磷锑钼蓝分光光度法测定大米和面粉中磷
磷锑钼蓝分光光度法测定大米和面粉中磷
磷锑钼蓝分光光度法测定大米和面粉中磷李晓东【摘要】该文采用酸度为0.10 mol/L的硫酸作为介质,磷(V)与钼酸铵发生显色反应生成淡黄色络合物,在抗坏血酸和酒石酸锑钾的还原下变成蓝色络合物.在磷锑钼蓝分光光度法的基础上,研究加入铋(III)之后对测定磷的影响,发现铋(III)的引入,使测定磷的灵敏度提高54.6%.体系最大吸收波长在708 nm,磷含量在0.040~0.90μg/mL范围内与吸光度呈现良好的线性关系,其线性回归方程为A=1.859C+0.079,线性相关系数r=0.9995,其表观摩尔吸光系数ε708nm=6.19×104L/mol/cm,方法检出限为0.023 μg/mL.该法可成功地测定食物大米和面粉中磷的含量.%In this paper, sulfuric acid with acidity of 0.10 mol/L is adopted as medium, and the chromogenic reaction takes place between phosphorus(V)and ammonium molybdate with light yellow complex produced, and then it turns into blue complex under the reduction effect of ascorbic acid and antimony potassium tartrate. Bismuth(III)is added on the base of phosphorus antimony molybdenum blue spectrophotometric method and the effect of bismuth(III)on the determination of phosphorus is studied. It is found that the introduction of bismuth(III)has increased the sensitivity of determination for phosphorus by 54.6% and the maximum absorption wavelength of the complex is 708 nm and the absorbance is linearly related to the concentration of phosphorus(V)within the range of 0.040-0.90 μg/mL. The linear regression equation is A=1.859C+0.079, with a correlation coefficient of r is 0.999 5. Its apparent molar absorption coefficient ε708nm is 6.19×104L/mol/cm and the detection limit of themethod is 0.023 μg/mL. The method has been successfully used to determine phosphorus content in foodstuff rice and flour.【期刊名称】《中国测试》【年(卷),期】2018(044)002【总页数】4页(P48-50,112)【关键词】磷;分光光度法;磷锑钼蓝;铋;大米;面粉【作者】李晓东【作者单位】吉林建筑大学松辽流域水环境教育部重点实验室基础科学部,吉林长春130118【正文语种】中文0 引言磷广泛存在于动植物组织中，也是人体含量较多的元素之一。
饲料中总磷的测定实训报告
一、实验目的1. 了解饲料中总磷的测定原理和方法。
2. 掌握饲料中总磷的测定步骤和注意事项。
3. 培养实验操作技能和数据分析能力。
二、实验原理饲料中总磷的测定采用钼锑抗光度法。
该法基于磷与钼酸铵、抗坏血酸和锑酸铵在酸性条件下反应生成磷钼蓝复合物，其颜色强度与磷含量成正比。
通过测定吸光度，可以计算出饲料中总磷的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：饲料样品、钼酸铵、抗坏血酸、锑酸铵、硫酸、氢氧化钠、盐酸、蒸馏水等。
2. 实验仪器：分光光度计、容量瓶、移液管、烧杯、比色皿、电子天平等。
四、实验步骤1. 样品前处理：称取适量饲料样品（精确至0.0002g），置于烧杯中，加入少量蒸馏水，用玻璃棒搅拌溶解，转移至容量瓶中，定容至刻度线。
2. 标准溶液的配制：按照GB/T 6437-2002《饲料中总磷的测定》的规定，配制一定浓度的磷标准溶液。
3. 样品溶液的制备：取适量样品溶液（按照实验要求稀释），转移至比色皿中。
4. 标准曲线的绘制：分别取不同浓度的磷标准溶液，按照实验步骤进行显色反应，在分光光度计上测定吸光度，以磷浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
5. 样品溶液的测定：按照实验步骤进行显色反应，在分光光度计上测定吸光度。
6. 结果计算：根据样品溶液的吸光度，从标准曲线上查得相应的磷含量，计算饲料中总磷的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线的绘制：按照实验步骤绘制标准曲线，得到标准曲线方程为：A=0.0325C+0.0156，相关系数R²=0.9988。
2. 样品溶液的测定：按照实验步骤测定样品溶液的吸光度，得到吸光度为0.605。
3. 结果计算：根据标准曲线方程，查得样品溶液中磷含量为1.96mg/g。
4. 结果分析：本次实验测得饲料中总磷含量为1.96mg/g，符合饲料中总磷含量要求。
六、实验总结与讨论1. 实验总结：本次实验通过钼锑抗光度法测定了饲料中总磷的含量，实验操作规范，结果准确可靠。
微波消解-磷钼蓝分光光度法测食品中磷酸盐
８ ０ 、１． ０ ５ ０ 、２ ． ０和 ２ ． ０ｍ 相 当于 ． ０ ０ ０ 、１． ０ ０ ０ ５ ０ ｌ（
活动有着十分重要 的作用 ，因此检测食品中磷酸盐 含量至关重要 。《 食品中磷的测定》 的第三法是食 品中磷酸盐 的测定… ，但此法 灵敏度低 ，前处 理 麻烦 ，所用还原剂对苯二酚还是剧毒物质 ，对操作
Ｚ ｅ ａｇＰｅｅ ｔｅＭｅｉ ｎ ，Ｆｂ ０２，Ｖ ｌ ４ ｏ２ ｈ ｉｎ ｒ ｎｉ ｄ ｉｅ ｅ ．２ １ ｉ ｖ ｖ ｃ ｏ ２ ，Ｎ ．
表 ２ 浓度 范 围变化 与相关 系数 的关 系
项目 — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — ——————— ————————— —————— ——一
取 样 品 ０ ５ｇ ． ，置 于 微 波 消解
２ 样 品定 量线 性范 围和检 出限
分 别 取 不 同浓 度
罐 的内罐 中 ，加人 ６—８ｍ 硝酸 ，将 内罐放 入 外 罐 ｌ
范 围 的标 准 溶 液 ，测定 吸光 度 ，从 数 据 可 以看 出 ， 本 分析方 法 在磷 含 量为 ００— ０ ￣／０ｍ 时 ，有 ． ２０ ｇ５ ｌ 良好 的相 关 系数 （ ＞０９９ ） ｒ ．９５ ，而 在大 于 ２０ ｇ ０ ／ ５ ｌ ，标准 的线 性 趋 势 明显 下 降 ，准 确度 的可 ０ｍ 时
分别置于 ５ ｌ ０ｍ 比色管 中，以下操作同标准曲线。
材 料 与 方 法
１ 仪器与试剂 实验仪器 ：７ １ ２ 分光光度计 、意 大 利 Ｍｉｓ ｎ 波 消解 仪 。试 剂 Ｊ ｌ ｔ ｅ微 ｅｏ ：本 法 所 用 水
为 超 纯 水 。试 剂 纯 度 为分 析 纯 。磷 酸 盐 标 准 溶 液 （． １ｍ ／ ） ００ ｇｍ１ ：称 取 ０７ ６ ．１５ｇ在 １５℃ 干 燥 的磷 ０
磷钼兰光度法测定磷的含量
磷钼兰光度法测定磷的含量2.1 方法提要试样用硝酸、氟氢酸、高氯酸溶解。
在0.9N H2SO4介质中，以抗坏血酸还原磷钼杂多酸为兰色络合物，分光光度法测定硅铁中磷。
2.2 试剂2.2.1 HNO3（AR）2.2.2 氟氢酸（AR）2.2.3 高氯酸（GR）2.2.4 HCl（GR）2.2.5 H2SO41+12.2.6 钼酸铵5%水溶液2.2.7 抗坏血酸（Vc）2%，现用现配2.2.8 磷标准溶液ρ（p）=5μg/mL2.3 分析手续：2.3.1 母液的制备准确称取0.2 g试样于聚四氟乙烯烧杯中，少量水润湿，加入5 mL HNO3，慢慢加入10mL HF，待反应平静后加入高氯酸4mL，电热板上加热，至高氯酸冒烟除Si，取下稍冷，继续加HF 5mL，电热板加热冒烟，反复3次，取下，稍冷用水冲洗杯加入1+1 HCl 8mL，电热板加入溶解盐类，移入100mL容量瓶中稀至刻度摇匀。
2.3.2 显色吸取母液5 mL ，于50 mL 量瓶中，加入1+1 H 2SO 4 2.5mL ，H 2O 稀至20 mL ，加入5%钼酸铵，3 mL 摇匀，放置20 min ，加入2%抗坏血酸5 mL ，稀至刻度，摇匀，电热板上水浴15 min ，冷却，显色完全后冷却。
720 nm ，2Cm 比色杯，测其吸光度。
2.4 工作曲线取5、10、15、20μg 于50mL 量瓶中，加入1+1 H 2SO 4 3mL ，H 2O 稀至20mL ，加入5%钼酸铵3mL ，摇匀放置10′加入2%Vc 5mL ，以下同上。
2.5 计算ω（p ）/10-2=10010100/601⋅⋅⋅--x m m m 2.6 注意2.6.1 硅铁合金中砷含量，很低，如较高时（>1%）可加入氢溴酸或H 2O 2除去。
2.6.2 在显色过程中所用容量瓶，一定要洗涤干净，否则会出现不明原因的兰色，使显色失败。
钼蓝法测定面粉及其制品中的磷酸盐
© 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. 钼蓝法测定面粉及其制品中的磷酸盐欧剑丞 郑 红(广东省顺德市卫生防疫站 顺德 528300) [关键词] 钼蓝法;磷酸盐;测定 [中图分类号] R 155.51 [文献标识码] B [文章编号] 100826633(2001)0620711201 粮食部门生产加工的膨松面粉(自发面粉)在添加磷酸盐作膨松剂后,可不经发酵直接制成各种面制品。
国家卫生标准规定食品中添加的磷酸盐(以磷酸计)不得超过4g Kg ,为检测膨松面粉及其制品中磷酸盐的含量,我们用钼蓝法进行测定,报告如下。
1 原理 样品经有机破坏,在酸性溶液中,磷酸盐与钼酸铵作用生成淡黄色的磷钼酸铵,遇氯化亚锡还原剂,生成亮兰色的络合物钼蓝,根据颜色的深浅可以比色测定。
2 仪器 ①高温电阻炉。
②可见分光光度计3 试剂配制 钼酸铵硫酸液:钼酸铵2.5g 溶于100m l 的30%硫酸溶液中即成。
氯化亚锡溶液:氯化亚锡0.25g ,溶于10m l 的盐酸中,临用时新配。
磷标准溶液:精确称取经105℃干燥2h 的磷酸二氢钾(KH 2PO 4,)0.1389g ,置于100m l 容量瓶内,加去离子水溶解,并稀释至刻度混匀。
此溶液1m l 相当于1.0m g 磷酸(H 3PO 4)。
吸此溶液1.00m l 移入100m l 容量瓶中,用去离子水稀释至刻度,此溶液1.0m l 相当于10.0Λg 磷酸。
4 操作方法4.1 样品处理 准确称取均匀样品1.0g ,置于瓷坩埚中,在电炉上小火炭化至无烟,移入550℃高温炉中灰化3～4h ,直至灰分呈白色为止(必要时可在样品中加入浓硝酸湿润后再灰化)。
取出,待冷却后加入1+1盐酸1.0m l ,加热溶解灰分,然后用水移入100m l 容量瓶中,加水至刻度,摇匀。
钼蓝分光光度法测定食品中磷的研究及改进
钼蓝分光光度法测定食品中磷的研究及改进作者：向晓黎等来源：《安徽农业科学》2015年第08期摘要：[目的]分析研究并改进食品中磷的测定方法。
[方法] 对钼蓝分光光度法测定食品中磷的测定方法进行改进，对消解液酸度的调节，显色剂进行了改进，并与国标方法钼蓝分光光度法测定食品中磷的测定方法进行对比分析。
[结果]试验表明，该试验改进的方法不仅简化了操作过程，显色明显，而且标准曲线线性良好，得到了较好的准确度，测定结果与国标方法的测定结果比较无显著统计学差别。
[结论]研究得出的改进的钼蓝分光光度法可用于食品中磷的测定。
关键词：钼蓝分光光度法；食品；磷；测定方法；研究及改进中图分类号：S121 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2015）08-244-02磷是人体含量较多元素之一，占体重的1%左右。
磷是构成骨骼和牙齿的重要成分，是构成生命物质和酶的组成成分，参与能量代谢，体液内的磷酸盐还负责调节酸碱平衡[1]，因此检测食品中磷的含量有重要意义。
实际工作中发现，GB/T5009.87-2003钼蓝分光光度法测定食品中磷含量显色时间长，所用试剂不够稳定，方法不够灵敏[2]。
为此，笔者通过对消解液酸度的调节，并对显色剂进行了改进，不仅简化了操作过程，得到了较好的精密度和准确度，而且避免了有毒试剂对试验人员的危害及对环境的污染。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 主要仪器。
TU-1901紫外可见分光光度计及可调式电热板等实验室常用设备。
1.1.2 主要试剂。
氢氧化钠溶液（2 mol/L）：80.0 g氢氧化钠（分析纯）溶于水，用水定容到1 L。
硫酸溶液（4.52 mol/L）：吸取28.0 ml浓硫酸（分析纯），缓缓注入水中，并用水定容到1 L。
2，4-二硝基酚（或2，6-二硝基酚）指示剂：溶解0.20 g 2，4-二硝基酚溶于100 ml水中。
钼锑贮存液：153 ml浓硫酸（分析纯，密度1.84 g/ml），缓慢地倒入约400 ml水中，搅拌，冷却。
浅析铋磷钼蓝分光光度法测定土壤中磷含量
浅析钮磷钮蓝分光光度法测定上壤中磷含量磷在生物圈内的分布很广泛，在地壳中含量丰富，列元素含虽的前10位，并广泛存在于动、植物组织中，也是人体含量较多的元素之一，稍次于钙列第6位。
磷存在于人体所有细胞中，是维持件骼和牙齿健康的必要物质，几乎参与所有生理上的化学反应。
磷还是使心脏有规律跳动、维持肾脏正常机能和传达神经刺激的重要物质。
缺少磷，烟酸不能被吸收。
磷的正常机能需要维生素D(维生素食品)和钙(钙食品)来维持。
环境污染源中的磷主要来自化肥、冶炼、合成洗涤剂等行业，生活污水中也常含有较大量磷。
磷对上壤的污染主要是人为污染，来源于人类过量施用农药、化肥及污水灌溉等。
土壤污染具有隐蔽性，即从开始污染到导致后果有一个长期、间接、逐步积累的过程。
了解上壤中磷含量，对土壤的科学利用有一定的参考价值。
1方法原理将上壤环境样品用硝酸、氢氟酸分解，以髙氯酸、硫酸氧化磷。
硫酸冒烟处理后，以盐酸溶解盐类，用氨水使氢氧化铁和磷酸铁共沉淀而与基体中大部分铝分离。
以硫酸溶解沉淀，在硫酸介质中，用硫代硫酸钠还原高价碎，磷与硝酸钮、铝酸彼形成三元配合物，用抗坏血酸还原后，生成钮磷铝彼蓝，用分光光度计于波长700nm处测量貝吸光度。
2试剂(1)氢氟酸:二1. 15g/mLo(2)高氯酸:=1.67g/mL0(3)氨水:二0. 90g/mL o(4)硫酸:=1.84g/mLo(5)硝酸:=1.51g/mLo(6)盐酸:=1.19g/mLo(7)抗坏血酸溶液:称取抗坏血酸10g,用100mL蒸餾水溶解，混匀。
用时现配。
(8)硫酸铁彼溶液:称取硫酸铁披90g,用lOOmL蒸餾水溶解，混匀。
(9)硫代硫酸钠溶液:1L水中含20g无水硫代硫酸钠，用时现配。
(10)硝酸钮溶液:称取30g硝酸钮，加入lOOmL浓硝酸，待完全溶解后，加入900mL蒸懈水、4g尿素，混匀。
(11)铝酸彼溶液:称取15g铝酸鞍，置于400mL烧杯中，加入200mL蒸镭水，温热溶解, 过滤后加入800mL蒸镭水，混匀。
铋磷钼兰光度法快速磷含量测试法
铋磷钼兰光度法快速测定样品中的磷含量一、试验部分1.仪器及试剂722N 型分光光度计。
磷混合显色剂①取110 mL 1+1H2SO4于500 mL烧杯中。
②称取7.5克钼酸铵溶于100 mL水中，加热至60-70度③称取1.16克硝酸铋加3 mL硝酸，加水约50 mL，煮沸驱除氮氧化物，冷却④将②、③倒入①中，用水定容于1000 mL容量瓶中。
1.5%硫代硫酸钠：称取1.5 g硫代硫酸钠于100 mL烧杯中，加热溶解，取冷却后，用水稀释至100 mL。
3%抗坏血酸：称取3 g 抗坏血酸，溶于100 mL 水中，混匀（现用现配）。
磷标准贮备溶液（100 μg / mL）：准确称取0. 439 3 g 预先在110 ℃烘干至恒重的基准磷酸二氢钾溶于水中，移入1 L 容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
磷标准工作溶液（10 μg / mL）：吸取磷标准贮备溶液25.00 mL，移入250 mL 容量瓶中，用蒸馏水稀释至标线，摇匀。
用时现配。
2. 标准曲线的绘制准确移取1ML=10ug的磷标准工作溶液0、0.5、 1 、2、 4 、8 、10 、15 、20mL于50 mL 比色管中（本部门手测时标定0、1、2、4、8已可到达使用范围），依次加入1 mL1.5% 硫代硫酸钠溶液、20ML磷混合显色剂、5mL 3%抗坏血酸溶液，（每加一种试剂需充分摇匀）用水定容至刻度，摇匀，20分钟后于710nm处测定吸光度A，并绘制标准曲线。
可知磷在0-200 μg /50 mL 范围内呈线性关系。
求出曲线质量体积所对应的磷含量ug。
3.样品处理及实验方法准确称取称取灼烧后的灰分样0.05g灰样，放入100mL 烧杯中，加入5mL 盐酸盖表面皿低温加热（140℃）10分钟，加入硝酸10 mL，待氧化氮逸出后，加2 mL 1：1硫酸，继续加热至冒三氧化硫白烟后3分钟后取下冷却，用约20 mL 水冲洗表皿及杯壁，加热，使可溶性盐类溶解（此时溶液呈浑浊状态），冷后用中速滤纸过滤至50 mL容量瓶中，定容摇匀，取10ml溶液至50ML容量瓶中，加入1 mL1.5% 硫代硫酸钠溶液、20 mL磷混合显色剂、5mL 3%抗坏血酸溶液，（每加一种试剂需充分摇匀）用水定容至刻度摇匀（同时用清水制空白参比液），20分钟后于710nm处比色。
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磷锑钼蓝分光光度法测定大米和面粉中磷作者：李晓东来源：《中国测试》2018年第02期摘要：该文采用酸度为0.10mol/L的硫酸作为介质，磷（v）与钼酸铵发生显色反应生成淡黄色络合物，在抗坏血酸和酒石酸锑钾的还原下变成蓝色络合物。
在磷锑钼蓝分光光度法的基础上，研究加入铋（III）之后对测定磷的影响，发现铋（ⅡI）的引入，使测定磷的灵敏度提高54.6%。
体系最大吸收波长在708nm，磷含量在0.040～0.90μg/mL范围内与吸光度呈现良好的线性关系，其线性回归方程为A=1.859c+0.079，线性相关系数r=0.9995，其表观摩尔吸光系数ε708nm=6.19×104L/mol/cm，方法检出限为0.023μg/mL。
该法可成功地测定食物大米和面粉中磷的含量。
关键词：磷；分光光度法；磷锑钼蓝；铋；大米；面粉文献标志码：A文章编号：1674-5124（2018）02-0048-030引言磷广泛存在于动植物组织中，也是人体含量较多的元素之一。
它不但构成人体成分，且参与生命活动中非常重要的代谢过程，是机体很重要的一种元素。
磷存在于人体所有细胞中，是维持骨骼和牙齿的必要物质，几乎参与所有生理上的化学反应。
磷还是使心脏有规律地跳动、维持肾脏正常机能和传达神经刺激的重要物质。
人类通过食物链吸收磷，因此，研究测定磷的分析方法特别是食物中磷的测定方法，具有重要的意义。
常量磷的测定采用重量法、容量法，微量磷的测定方法主要有X-射线荧光光谱法、电感耦合等离子体发射光谱法、电感耦合等离子体质谱法、原子吸收光谱法、分光光度法等，其中钼蓝分光光度法因使用仪器简单、准确度较高而较为常用。
钼蓝分光光度法所用的还原剂种类很多，常用的还原剂有SnCl2、维生素c、硫酸肼、盐酸羟胺等，但这些还原剂大多存在一定的缺陷。
类似的方法还有磷钼杂多酸法、磷钒钼酸法、磷钼杂多蓝法、三元杂多蓝法和离子缔合物法。
磷钼杂多蓝法是在磷钼杂多酸法的基础上，使用适当的还原剂和还原条件将磷钼黄还原为磷钼蓝络合物，该物质颜色较稳定，最大吸收位于可见区或近红外区，灵敏度较高，可用普通光度计或比色计测定，因而得到广泛应用：但磷钼蓝络合物稳定时间不一。
这类研究所用的还原剂有抗坏血酸、硫酸肼、二氯化锡等以及上述还原剂的混合联用，某些须在水浴中加热才能反应完全，操作不便。
磷锑钼三元杂多蓝是利用锑（III）与磷（V）和钼（VI）形成三元络合物，用还原剂还原后形成磷锑钼蓝藉以进行分光光度法测定。
这类体系测定磷，在某些情况下，加入某些试剂可提高测定的灵敏度。
本文研究在铋（III）存在下磷锑钼蓝分光光度法测定磷的最佳实验条件及体系的选择性，考察方法的灵敏度、检出限、准确度、精密度、线性范围等指标，可用于某些食品大米和面粉中磷的测定。
1实验部分1.1仪器与试剂722S分光光度计（上海棱光技术有限公司），配1cm比色皿用于吸光度的测量。
磷（V）标准溶液：准确称取于105℃下烘干2h的磷酸二氢钾（天津市科密欧化学试剂开发中心）0.4387g，溶于适量水中，然后以水定容至100mL容量瓶中，得到1.000mg/mL的磷（v）储备液；取磷储备液1.0mL于100mL容量瓶中稀释至刻度，配制成10μg/mL的磷（V）工作液。
酒石酸锑钾溶液：取0.5000g酒石酸锑钾（西陇化工股份有限公司）溶于适量水中，并定容至100mL的棕色容量瓶中，得到0.5%（w/v）的酒石酸锑钾溶液。
铋（III）溶液：称取0.232 1g五水合硝酸铋（西陇化工股份有限公司）溶于5mL浓硝酸中，用水稀释至100mL，得到含铋（IⅡ）1.000mg/mL的储备液。
此溶液中的硝酸浓度为0.75mol/L。
取上述铋（III）溶液1.0mL以水定容至100mL容量瓶中，得到含铋（III）10μg/mL的工作液。
此溶液中的硝酸浓度为7.5×10-2mol/L。
钼锑抗硫酸混合显色液：取钼酸铵（天津市风船化学试剂科技有限公司）0.4g溶于25mL 水中，再徐徐加入3.1mL的浓硫酸（北京化工厂），冷却后，再加入5.0g/L的酒石酸锑钾（KSbCaH4O7·1/2H2O，西陇化工股份有限公司）溶液6mL，并用水稀释到50mL，贮存于棕色容量瓶中，使用前加入0.80g抗坏血酸（天津市大茂化学仪器供应站）于上述贮存液中，得到呈黄色的钼锑抗硫酸混合显色溶液。
此溶液中，钼酸铵摩尔浓度为6.47×10-3mol/L，酒石酸锑钾摩尔浓度1.80×10-2mol/L，抗坏血酸摩尔浓度9.08×10-4mol/L，硫酸摩尔浓度为1.12mol/L。
该试剂放置于4℃冰箱中。
实验所用试剂均为分析纯，水为去离子水。
1.2实验方法取适量磷（V）工作液置于50mL容量瓶中（优化条件实验采用25.0μg），依次加入25mL水，0.60mL含铋（III）10.0μg/mL的工作液，钼锑抗硫酸混合显色液4.5mL，用水稀释至刻度后，摇匀，在室温下放置45min后，以1cm比色皿于708nm波长处对试剂空白参比测量吸光度。
2结果与讨论2.1吸收光谱在室温（20±1）℃下，按实验方法在400～1000nm波长范围内对显色体系溶液进行吸收光谱测定，结果如图1所示。
在该体系中，磷（v）与铋（III）、锑（v）、钼（VI）发生显色反应生成蓝色络合物。
试剂空白最大吸收波长在520nm处，磷钼蓝最大吸收波长在708nm 处，方法对比度为188nm。
由图1可以看出，在708nm处磷钼蓝吸光度最大，实验灵敏度最高，所以本文选择708nm作为测量波长。
2.2条件试验2.2.1酸度的影响将酸度作为变量，在其他条件保持最优条件下，研究了溶液酸度的影响。
实验表明，当反应体系介质硫酸浓度在0.01～0.09mol/L之间，随着显色体系酸度的增加，吸光度增大；在酸度为0.09-0.12mol/L时，吸光度达到最大值，波动较小。
之后，酸度在0.12-0.30mol/L范围内，随着酸度的增大，吸光度降低。
所以本文选择最佳酸度为0.10mol/L。
2.2.2试剂用量的影响改变钼锑抗硫酸混合显色液组成，研究相关组成变量影响。
实验结果表明，本实验条件下6.47×10-3mol/L钼酸铵用量在3.5～5.5mL，1.80×10-2mol/L酒石酸锑钾用量在4.0-6.0mL，9.08×10-4mol/L抗坏血酸还原剂的用量为4.0～5.0mL时，测定磷的灵敏度最大，吸光度波动较小，实验均选定4.5mL。
为操作方便，按实验方法配制钼锑抗硫酸混合显色液，一次加入到显色体系中。
结果发现，在50mL体系中，加入铋（III）量为5.0-7.5μg时，体系灵敏度最大，波动较小，实验采用铋（III）加入量为6.0μg，即反应体系中铋（III）的浓度在1.44×10-2mol/L 时，磷测定灵敏度提高了54.6%。
铋（ⅡI）的引入，使磷测定灵敏度提高。
本研究认为Bi3+与磷锑钼蓝反应生成新的灵敏度更高的蓝色化合物，并在相同吸收波长处产生吸收，从而增敏。
2.2.3试剂加入顺序实验表明，试剂加入顺序对本文的结果无影响，本文试剂加入顺序为：P（V）+Bi（III）+钼锑抗硫酸混合显色剂。
2.3体系稳定性在最佳实验条件下，测定0.50μg/mL P（v），实验结果表明：显色溶液放置45min后吸光度恒定，在16h内，吸光度稳定，吸光度的变化在5%之内。
2.4工作曲线在最优的条件下进行线性范围实验，50mL体系中分别加入磷（v）标准溶液0，2.0，5.0，10.0，20.0，25.0，30.0，35.0，40.0，45.0μg，与试剂空白作对比。
结果表明，在最佳实验条件下，P（v）浓度在0.040-0.90μg/mL范围内与吸光度呈现出良好的线性关系，遵守比尔定律，线性回归方程为：A=1.859C（c：μg/mL）+0.079，相关系数r=0.9995，其表观摩尔吸光系数ε708nm=6.19×104L/mol/cm。
对0.50μg/mL P（V）进行13次平行测定，算出相对标准偏差RSD为0.93%。
对试剂空白进行11次测定，算得方法检出限3S/K（S为11次试剂空白的标准偏差，K为工作曲线的斜率）为0.023μg/mL。
2.5共存离子的影响当测定0.50μg/mL的P（v），相对误差控制在±5%以内，共存离子的允许量（以质量倍数计）如下：Ca2+，Cu2+，Mg2+，Ni2+，Zn2+（500）；Fe2+（100）；Fe3+（50）；Ap3+，B （III）（20）；Cd2+（10）；Cr3+，La3+（5）；Cl-（1000）；SO2-，SiO2-，苹果酸（500）；CO32-，NO2-（200）；Br-，I-（50）；F-，NO2-（20）；MnO4-，乙二胺四乙酸（EDTA），丙氨酸，柠檬酸（5）；赖氨酸，白氨酸，尿素（2）；牛血红蛋白（1）。
3样品分析称取5.000g大米或面粉样品于瓷坩埚中，在电炉上加热至不再冒烟，炭化。
放入高温炉内从低温升至500℃灼烧24h，取出冷却，灰份加入4mL盐酸（1：1，v/v），2mL浓硝酸，微热溶解，蒸至近干，加少量水溶解后转入100mL容量瓶中，以水定容，摇匀。
吸取上述试液1.0mL置于50mL容量瓶中，以水定容，摇匀，作为待测液。
取1.5mL待测液置于25mL比色管中，其余按实验方法进行测定。
以上样品同时按标准加入法做加标回收实验，测定回收率，上述测定结果列于表1。
4结束语本文研究建立了磷锑钼蓝分光光度法测定P（V）的最优条件，发现最大吸收波长在708nm处，磷（V）含量在0.040-0.90μg/mL的范围内与吸光度呈现良好的线性关系，其回归方程为A=1.859C（C：μg/mL）+0.079，相关系数r=0.9995。
ε708n m=6.19×104L/mol/cm。
方法检出限为0.023μg/mL。
铋（III）加入可使磷测定灵敏度提高54.6%。
该法成功地测定了大米和面粉中磷的含量，方法加标回收率在99.30%～101.30%，结果令人满意。
本方法具有操作简捷、快速、重现性好的特点，可以不用有机试剂，避免了有机试剂对人体的伤害和对环境的污染，并且室温显色，操作方便、快速。