全血丙酮酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶微板法)
乳酸脱氢酶（LDH）活性检测试剂盒说明书
乳酸脱氢酶（LDH ）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法货号：BC0680规格：50T/24S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体30 mL×1瓶4℃保存试剂一液体25 mL×1瓶4℃保存试剂二粉剂×1支-20℃保存试剂三液体25 mL×1瓶4℃保存试剂四液体60 mL×1瓶4℃保存标准品液体1 mL×1支4℃保存溶液的配制：1、试剂二：临用时加入1.3 mL 双蒸水充分溶解备用，配好后可分装成小管-20℃保存，可保存两周，禁止反复冻融；2、标准品：2 μmol/mL 丙酮酸钠溶液。
产品说明：LDH （EC 1.1.1.27）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是糖酵解途径的末端酶，催化丙酮酸与乳酸之间的可逆反应，伴随着NAD +/NADH 之间互变。
LDH 催化NAD +氧化乳酸生成丙酮酸，丙酮酸进一步与2,4-二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，在碱性溶液中显棕红色，颜色深浅与丙酮酸浓度成正比。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL ）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20%或200W ，超声3s ，间隔10s ，重复30次）；8000g 4℃离心10min ，取上清，置冰上待测。
2、组织：按照组织质量（g ）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL 提取液），进行冰浴匀浆。
丙酮酸激酶检测试剂盒测定原理
丙酮酸激酶检测试剂盒测定原理
具体的测定步骤如下：
1.样品准备：将待测样品（如血浆、血清、脑脊液等）收集到试管中。
2.加入试剂：向样品中加入适量的试剂盒中所提供的反应液，包括缓
冲液、辅酶、底物和酶测定物等。
3.反应催化：通过加入反应液，使丙酮酸与辅酶协同催化下，生成丙
酮酸脱氢酶并伴随着NADH的氧化，生成乳酸和NAD+。
反应方程式：
丙酮酸+NADH+H+->乳酸+NAD+
4.光度计测定：利用光度计测定在反应中，NADH的浓度的变化，NADH的浓度的变化可通过测量吸光度来表示。
在反应开始时，NADH的浓度较高，吸光度也较高，而反应过程中，
随着NADH的消耗，其浓度下降，吸光度也逐渐减小。
5.数据分析：将吸光度与时间建立标准曲线，通过与标准曲线进行比对，可以确定样品中丙酮酸激酶的活性。
注意事项：
1.实验过程需要在恒温条件下进行，以保证反应的稳定性。
2.标本的处理过程需要避光，以免光敏化反应的发生。
3.实验中要注意纯化试剂的选择，以减少因杂质引起的误差。
4.测试前要进行仪器的校准，确保测试结果的准确性。
总结：
丙酮酸激酶检测原理主要是通过测定丙酮酸脱氢酶催化下的丙酮酸形成乳酸的速率，间接反映出丙酮酸激酶的活性。
这种检测方法非常重要，可以帮助医生评估患者的病情和治疗效果，对提高脑卒中的诊断和治疗水平具有重要意义。
丙酮酸(pyruvic acid PA)含量测定试剂盒说明书
货号：QS2204 规格：50管/48样丙酮酸（pyruvic acid PA）含量测定试剂盒说明书可见分光光度法正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义：丙酮酸通过乙酰CoA连接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代谢，起着重要的枢纽作用。
测定原理：丙酮酸与2,4-二硝基苯肼作用，生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙，在碱性溶液中呈色。
自备实验用品及仪器：可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水。
试剂的组成和配制：提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体5mL×1瓶，4℃避光保存；试剂二：液体25mL×1瓶，4℃保存。
丙酮酸提取：1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），静置30min， 8000g，25℃离心10min，取上清待测。
2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆，静置30min，8000g，25℃离心10min，取上清待测。
3、血清（浆）样品：按照血清（浆）体积（mL）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议取0.1mL血清（浆）加入1mL提取液），进行冰浴匀浆，静置30min， 8000g，25℃离心10min，取上清待测。
测定步骤：1、分光光度计预热30min以上，调节波长至520nm，蒸馏水调零。
2、取300μL样本+100μL试剂一于1.5mL EP管中，混匀，静置2min，加入500μL试剂二，混匀，于520nm波长处测定管吸光值A。
丙酮酸含量计算：1、标准条件下测定回归方程为y = 0.0466x + 0.0675； x为丙酮酸含量（µg/mL），y为吸光值。
丙酮酸(PA)含量检测试剂盒说明书 微量法
丙酮酸（PA）含量检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC2205规格：100T/96S产品内容：提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体5mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体25mL×1瓶，4℃保存。
丙酮酸钠标准液，1mg/mL：液体1mL×1瓶，4℃保存产品说明：丙酮酸通过乙酰CoA连接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代谢，起着重要的枢纽作用。
丙酮酸与2,4-二硝基苯肼作用，生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙，在碱性溶液中呈樱红色。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰、蒸馏水。
操作步骤：一、丙酮酸提取：1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），静置30min，8000g，常温离心10min，取上清待测。
2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆，静置30min，8000g，常温离心10min，取上清待测。
3、血清（浆）样品：按照血清（浆）体积（mL）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议取0.1mL血清（浆）加入1mL提取液），进行冰浴匀浆，静置30min，8000g，常温离心10min，取上清待测。
4、标准品的准备：将标准品用蒸馏水稀释至100、50、25、12.5、6.25、3.125、1.5625、0g/mL。
二、测定步骤：1、分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至520nm，蒸馏水调零。
2、在微量玻璃比色皿或96孔板中加入75L标准液或样本和25L试剂一，混匀，静置2min，加入125L试剂二，混匀，于520nm波长处测定吸光值A。
乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒(LD-P比色法)
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加入物(ml) 待测样品(血清、血浆、体液等) LDH 检测工作液
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乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒(LD-P 比色法)
简介：
乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，LDH 或 LD)属于氧化还原酶，能够催化氢氧原 子或电子从一中底物转移到另一种底物上乳酸脱氢酶是糖酵解和糖异生的一个极其重要的 酶，含有锌离子，广泛分布于人和动物组织、植物和微生物中，能可逆的催化乳酸(L)和丙 酮酸(P)之间的氧化还原反应。乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒(LD-P 比色法)是利用乳酸脱氢 酶催化上述逆反应，即丙酮酸+NADH+H+→乳酸+NAD+。在上述反应过程中，丙酮酸还 原成乳酸，同时 NADH 氧化成 NAD+，引起 340nm 处吸光度的下降。该 LD-P 法的优点 是：1、操作比二硝基苯肼比色法简单；2、重复性好；3、准确性比二硝基苯肼法好；4、
2、 处理后的样品应及时检测，否则 LD4 和 LD5 易失效。 3、 血清或肝素抗凝血浆检测效果较好，草酸类、EDTA 抗凝剂对 LDH 活性有抑制作用。
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4、 避免使用溶血样本。 5、 为了您的安全和健康，请穿实验服幵戴一次性手套操作。
自动分析仪计算公式：LDH(U/L)=ΔA/min×(106/6220)×(296/10)=ΔA/min×4758.8 注意：如果待测样品加入 LDH 保护工作液，其结果应除以 0.9。
丙酮酸(PYR)测定试剂盒(乳酸脱氢酶法)产品技术要求北京赛诺浦
丙酮酸（PYR）测定试剂盒（乳酸脱氢酶法）适用范围：用于体外定量测定人体血清或血浆中丙酮酸的含量。
1.1 试剂盒包装规格试剂1：1×15mL，试剂2：1×5mL；试剂1：2×30mL，试剂2：2×10mL。
试剂1：2×54mL，试剂2：2×18mL；试剂1：3×45mL，试剂2：3×15mL；试剂1：4×54mL，试剂2：4×18mL；试剂1：2×300mL，试剂2：1×200mL；试剂1：1×9L，试剂2：1×3L。
校准品（选配）：2×0.5mL，2×1mL（2水平）。
质控品（选配）：2×0.5mL，2×1mL（2水平）。
1.2 试剂盒主要组成成分注：校准品和质控品存在批特异性，具体浓度见对应批次产品标签。
2.1 外观试剂1：无色澄清液体；试剂2：无色澄清液体。
校准品：无色至淡黄色澄清液体。
质控品：无色至淡黄色澄清液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 试剂空白吸光度在37℃、340nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不小于0.5。
2.4 分析灵敏度测定浓度在200µmol/L附近的样本时，吸光度变化值（ΔA）应不小于0.02。
2.5 线性在（30，1200）µmol/L线性范围内，线性相关系数r不小于0.990。
在(150，1200）µmol/L范围内的线性相对偏差不大于±10%；测定结果（30，150]µmol/L时线性绝对偏差不大于±15µmol/L。
2.6 重复性重复测试高低浓度的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于8%。
2.7 批间差不同批号试剂测试同一份样本，测定结果的批间相对极差应不大于10%。
2.8 准确度与已上市产品进行比对试验，在（30，1200）µmol/L范围内，与比对系统的相关系数r不小于0.975；在（100，1200）µmol/L区间内与比对系统的相对偏差应不大于±15%，（30，100] µmol/L区间内与比对系统的绝对偏差应不大于±15µmol/L。
丙酮酸测定试剂盒(乳酸脱氢酶法)产品技术要求jiuqiang
丙酮酸测定试剂盒（乳酸脱氢酶法）适用范围：用于体外定量测定人体血清中丙酮酸（PYR）的含量，临床主要用于糖尿病引起的酮症酸中毒的辅助诊断。
1.1包装规格包装规格见表1表1 包装规格1.2主要组成成分主要组成成分见表2。
表2 主要组成成分注：不同批号的校准品、质控品赋值有差异，具体赋值详见靶值单。
2.1 外观试剂1为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；试剂2为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；校准品为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；质控品为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；试剂盒标签标识清晰，外包装完整无损。
2.2 净含量试剂的净含量应不少于标称量。
2.3 试剂空白吸光度A340nm下测定空白吸光度应≥0.5000。
2.4 准确度回收试验：在临床样本中加入一定体积的校准品溶液，进行测定，回收率在90%～110%之间。
2.5 分析灵敏度样品浓度为200 µmol/L时，其吸光度变化在0.0400～0.1200之间。
2.6 线性区间在[30，1000]µmol/L区间内，线性相关系数r≥0.990，在[30，150]µmol/L区间内绝对偏差应不超过±15µm ol/L，在(150，1000]µmol/L区间内相对偏差应不超过±10%。
2.7 测量精密度2.7.1 重复性对高、低不同浓度的同一血清样本或质控品重复测定10次，其测定值的变异系数（CV％）应不大于10％。
2.7.2 批间差随机抽取三批试剂盒的批间相对极差（R）应不大于10%。
2.8 稳定性试剂盒在2℃～8℃密封避光保存，有效期为12个月。
在试剂盒有效期满后一个月以内，应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7.1的要求。
2.9 校准品溯源性按GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求，提供所有产品校准的来源、赋值过程以及测量不确定度，试剂盒校准品溯源至Sigma公司。
丙酮酸激酶检测试剂盒测定原理
丙酮酸激酶检测试剂盒测定原理丙酮酸激酶检测试剂盒是一种用于检测生物体内丙酮酸激酶含量的工具。
这种酶在人体内十分重要，是将糖类分解成能量的关键环节之一，也是糖尿病和肥胖等疾病的关键因素之一。
下面我将为大家分步骤地介绍丙酮酸激酶检测试剂盒的检测原理。
第一步，样品制备。
我们需要将要检测的血液、血清、血浆等样品加入一定的试剂中混合均匀，获得我们所需要的稀释后样品。
这里需要注意的是，样品的制备过程中需要去除可能存在的脂质、其他蛋白质、酶类等干扰因素。
第二步，反应系统的制备。
将试剂盒中所提供的所有试剂按一定比例混合，制成我们需要的反应系统。
反应系统包含两个方面：底物和酶标记物。
具体的，底物是指在酶的作用下，丙酮酸和ATP反应形成丙酮酸ADP，其中ADP是电子吸收素的辅因子，在波长340nm时较好吸收；酶标记物是取代分子中的二氢维生素K-3（又称香叶酸钠），是电化学发光素的前体物。
第三步，加样。
将制备好的稀释后样品加入反应系统中，进行反应。
反应的过程中，丙酮酸激酶与反应系统中的底物进行酶促反应，产生释放出的ADP，而此时体系中的酶标记物直接与ADP结合，生成复合物，这个复合物具有一定的电化学性质。
第四步，清洗。
首先用洗板液清洗反应后的微孔板，去除未结合的底物和酶标记物；然后再用去离子水清洗，彻底去除阻碍我们检测的任何余量原料。
第五步，测定。
将清洗后的微孔板放入读板仪上进行检测。
读板仪将指定波长的光束照射到微孔板中，同时检测光源照射后反射回来的光强。
反应后样品中复合物产生的荧光值与丙酮酸激酶的含量呈正相关，我们便得以精确检测出丙酮酸激酶的含量。
综上所述，丙酮酸激酶检测试剂盒通过底物和酶标记物的酶促反应机制，精确检测生物体内的丙酮酸激酶含量。
它的成分和原理虽然看起来很复杂，但是在临床检测中却发挥了重要的作用。
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4、 制备无蛋白上清液：静置 20min 以上，离心，取上清液(即无蛋白上清液)待用。上清 液应澄清，如果浑浊，转移上清液至一干净试管或离心管后，再次离心。
有效期：6 个月有效。
编号 CC0007
名称 磷酸缓冲盐溶液(10×PBS,无钙镁)
ห้องสมุดไป่ตู้
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CS0001 DC0032 DF0135 NR0001 PS0013 PW0082
ACK 红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer) Masson 三色染色液 多聚甲醛溶液(4% PFA) DEPC 处理水(0.1%) RIPA 裂解液(强) 丽春红 S 染色液(1×Ponceau S)
计算： 全血丙酮酸(mmol/L)={(ΔA 测定−ΔA 空白)/(ΔA 标准−ΔA 空白}×0.05×D
也可根据 NADH 毫摩尔吸光度计算： 全血丙酮酸(mmol/L)=(ΔA 测定−ΔA 空白)×(1.56/6.22)×(D/1.0)
换算公式：丙酮酸(mg/dl)=丙酮酸(mmol/L)×8.8
存 48h 有效
试剂(D): LDH solution
0.6ml -20℃ 避光
使用说明书
1份
操作步骤(仅供参考)：
1、 配制蛋白沉淀工作液：取 1 瓶蛋白沉淀剂，直接加入蒸馏水至 100ml，充分混匀，即 为蛋白沉淀工作液。4℃避光保存，1 周有效。该试剂有一定腐蚀性，请小心操作。
2、 配制空白对照液：取配制好的蛋白沉淀工作液 1ml 加入 0.67ml 蒸馏水，混匀，即为空 白对照液。4℃避光保存，1 周有效。
—
—
丙酮酸标准(1mmol/L)
—
167
—
无蛋白上清液
—
—
167
NADH solution
89
89
89
充分混匀，蒸馏水调零，于 340nm 处读取各管吸光度，分别
为 A 空白 1、A 标准 1、A 测定 1。
LDH solution
5
5
5
6、PA 检测：充分混匀，分光光度计检测的 340nm 吸光度，比色杯光径 1.0cm，室温孵 育 2min 后再读取各管吸光度，此后每隔 1min 读 1 次吸光度，直至读数稳定，分别为 A 空 白 2、A 标准 2、A 测定 2。
组成：
名称
编号
TC0757 100T
Storage
试剂(A): 丙酮酸标准(100mmol/L)
1ml
4℃ 避光
试剂(B): 蛋白沉淀剂
6瓶
RT 避光
试剂(C):
C1: NADH
2 支 -20℃ 避光
NADH solution
C2: NADH buffer
3ml
RT
按 C1:C2=1 支:1ml 的比例充分混合，即为 C1C2 液，4℃避光保
5、 加样：按照下表设置空白管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免 产生气泡。如果样品中的 PA 浓度过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
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样品的检测最好能设置平行管。
加入物(μl)
空白管 标准管 测定管
空白对照液
167
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全血丙酮酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶比色法)
简介：
全血丙酮酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶比色法)其检测原理是在 NADH 存在条件下，乳酸 脱氢酶(LDH)催化丙酮酸生成乳酸，同时生成 NAD+。在弱碱性条件下平衡偏向丙酮酸氧化 为乳酸的方向，驱动反应完成。通过分光光度比色法(分光光度计或自动分析仪)测定 340nm 处吸光度的下降速率，据此通过比色分析就可以计算出 PA 水平。该试剂盒可用于检测全血 血浆样品中内源性的丙酮酸含量。该试剂盒仅用于科研领域，丌宜用于临床诊断或其他用 途。
参考区间：
空腹静脉血
0.03~0.1mmol/L
注意事项：
1、 配制好的 NADH solution，4℃保存，24h 有效。 2、 如果没有分光光度计，也可以使用酶标仪测定。 3、 抗凝剂用肝素钠-氟化钠较好。抗凝血样品置于冰浴中送检，尽快分离出血浆等。 4、 草酸抗凝剂对 LDH 有一定的抑制作用。 5、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。