脓毒症心肌功能障碍模型大鼠的构建与评价
依达拉奉对脓毒性休克大鼠心肌细胞损伤的作用
依达拉奉对脓毒性休克大鼠心肌细胞损伤的作用【关键词】依达拉奉；氧自由基；休克，脓毒性；心肌损伤【Abstract】 AIM: To investigate the effect of edaravone(ED)， a novel free radical scavenger， on cardiac function and myocardial cell injury in rats with septic shock. METHODS: After treatment with three different doses (6.0， 3.0 and 1.5 mg/kg) of ED to rats 1 h after septic shock， changes of MAP， LVESP， LVEDP，±dp/dtmax were determined in 4 different time phases. The activities of SOD， CAT， LDH and the concentrations of MDA， LD in myocardial tissue were measured. The pathologic change of myocardial tissue was observed by HE staining. RESULTS: Compared with septic shock group， MAP，LVESP and +dp/dtmax were increased remarkably in ED treatment groups. The activities of SOD and CAT and the concentration of MDA in ED groups were close to those in normal control group. Histological examination showed congestion， edema and inflammatory cell infiltration in myocardial tissue， while ED treatment attenuated the above pathological changes of myocardium. CONCLUSION: ED has a satisfying therapeutic effect on cardiac dysfunction in rats with septic shock， which may be related to attenuating myocardial injury.【Keywords】 edaravone; Oxygen free radicals; shock， septic; Myocardial injury【摘要】目的：观察氧自由基清除剂依达拉奉（edaravone， ED）对脓毒性休克大鼠心脏功能和心肌损伤的作用. 方法：在大鼠脓毒性休克后1 h用3个剂量ED (6.0， 3.0和1.5 mg/kg)治疗，测定休克后4个时相点平均血压（MAP）、左室收缩末期压力（LVESP）、左室舒张末期压力（LVEDP）、左室压力上升及下降最大变化速率（±dp/dtmax）等心功能指标；取心肌组织测超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、乳酸脱氢酶（LDH）活性和乳酸（LD）、丙二醛（MDA）含量，并观察形态学改变. 结果：与脓毒性休克组比较，ED可显著升高MAP，LVESP和±dp/dtmax，并使SOD，CAT活性增强以及MDA浓度降低接近对照组；组织学观察可见模型组心肌充血、水肿及炎性细胞浸润等，ED可明显改善以上形态学变化. 结论： ED具有抗脓毒性休克心功能不全的作用，其机制与减轻心肌损伤有关.【关键词】依达拉奉；氧自由基；休克，脓毒性；心肌损伤心功能不全和心肌细胞损伤是脓毒性休克的主要致命性并发症，有40%的脓毒症患者出现左、右心功能不全［1-2］. 脓毒症时菌体膜产生的内毒素（lipopolysaccharide， LPS）入血可直接或间接通过细胞因子和自由基的作用引起心肌损伤和心功能不全［3］，实验证实抗氧化剂谷胱甘肽加N乙酰半胱氨酸可明显减少脓毒症休克患者血液中活性氧浓度，改善心功能指数［4］. 依达拉奉［edaravone， ED， 3甲基1苯基2吡唑啉5酮（MCI186）］是新型强效的自由基清除剂，是临床治疗缺血性脑卒中的有效药物［5］. 我们通过观察ED对脓毒性休克大鼠心功能、心肌氧自由基和心肌病理学变化的影响，旨在为该药治疗脓毒性休克提供理论依据.1材料和方法1.2方法1.2.1动物分组及病理模型复制将大鼠分为6组，每组10只. 对照组：仅作手术对照并给予生理盐水；模型组：尾静脉注射LPS， 8 mg/kg致内毒素休克后单纯给予等体积生理盐水；阳性药对照组：以XigrisTM为阳性药对照，根据临床剂量换算剂量为19.34 mg/kg；ED高、中、低剂量组：给予ED的剂量分别为1.6， 0.8， 0.4 mg/kg. 在LPS复制脓毒性休克模型后1 h行药物治疗. 戊巴比妥钠30 mg/kg腹腔注射麻醉，右颈总动脉插管至左心室，左股动脉导管接血压计检测平均动脉压（MAP），左股静脉导管用于给药和输液.1.2.2心功能检测指标将左心室导管连接8道生理记录仪，应用ChartV4.1.2信号处理软件记录左室收缩末期压力（LVESP），左室舒张末期压力（LVEDP）和左室压力上升及下降最大变化速率（±dp/dtmax）. 记录LPS注射后0， 2， 4， 6 h心功能指标.1.2.3心肌氧自由基测定在LPS后6 h心功能指标测完后，开胸取左心室两块0.5g组织，取其一用冰PBS冲洗干净，在PBS烧杯中剪碎及冰浴下匀浆，匀浆液在4℃下4000 r/min离心15 min，上清按试剂盒说明书应用分光光度仪检验LD， LDH， CAT， MDA及SOD含量.1.2.4心肌病理学观察取上步骤中另一块心肌经100 mL/L多聚甲醛固定，乙醇梯度脱水，二甲苯透明，石蜡包埋，连续冠状切片，切片厚度4 μm，HE 染色，显微镜下观察并留存图像.统计学处理：计量资料表示为x±s，用统计学软件SPSS 11.0的ANOVA 法比较组间差异的统计学意义.2结果2.1ED对脓毒性休克大鼠心功能的作用模型组动物在休克4 h时平均动脉压（MAP）明显降低（图1A， P<0.05），并呈继续下降趋势，ED高、中、低剂量均可显著升高MAP（P<0.01），休克6 h后ED升高MAP的效应随剂量增大而增强. 脓毒性休克后大鼠心脏LVESP显著下降（图1B），4 h后下降非常明显（P<0.01），且呈进行性下降趋势，ED高、中、低剂量使LVESP升高并接近对照组水平，与脓毒性休克组比较升高非常显著（P<0.01）. 脓毒性休克大鼠+dp/dtmax也呈进行性下降（图1C），在4 h后下降非常显著（P<0.01），休克后2 h，ED中、低剂量组+dp/dtmax即可明显增强（P<0.05），休克4 h时ED各剂量组均使+dp/dtmax显著升高（P<0.01）并接近相同时相点正常水平. 脓毒性休克时大鼠LVEDP和-dp/dtmax无明显改变，除ED低剂量组在4h明显增强-dp/dtmax外（P<0.05），未见其他各剂量组对-dp/dtmax有影响作用（图1D， E）.aP<0.05，bP<0.01 vs对照组； cP<0.05， dP<0.01 vs模型组. A：平均血压（MAP）；B：左室收缩末期压力（LVESP）；C：左室压力上升最大变化速率（+dp/dtmax ）；D：左室舒张末期压力（LVEDP）；E：左室压力下降最大变化速率（-dp/dtmax）.图1依达拉奉（ED）对脓毒症休克大鼠心功能各项指标的影响2.2ED对脓毒症休克大鼠心肌生化指标的影响模型组大鼠心脏组织中SOD， CAT活性呈不同程度降低(表1)，SOD活性明显低于对照组（P<0.05）；ED 中、高剂量组SOD活性升高非常明显（P<0.05， P<0.01）；ED各剂量组的CAT活性均明显高于模型组（P<0.01）；LDH在脓毒症休克时升高，ED各剂量组对LDH活性有降低作用，但差异不明显. 模型组MDA， LD升高，ED高剂量组能显著降低MDA（P<0.01），其他各治疗组也不同程度地降低MDA，LD水平，但无统计学差异.表1依达拉奉（ED）对脓毒症休克大鼠心肌SOD， MDA， CAT， LD， LDH的影响2.3ED对脓毒症休克大鼠心肌形态学的影响光镜下观察到对照组大鼠心肌着色均匀完整，可见横纹和润盘，未见炎性细胞浸润. 模型组间质充血、水肿，血管扩张，炎性细胞浸润. 经ED治疗后心肌细胞结构完整，可见横纹和润盘，有少量炎性细胞浸润，未见明显细胞变性及坏死病灶. XigrisTM治疗后心肌细胞着色不均，有部分变性坏死，血管扩张，有灶性出血，炎症细胞浸润（图2）.3讨论ED是一种有效的羟自由基清除剂，通过清除氧自由基，抑制脂质过氧化，从而抑制细胞损伤，临床已作为脑保护剂广泛用于急性脑梗死治疗［6］. 研究发现ED可明显降低糖尿病大鼠心肌硫代巴比士酸物质、增加SOD活性并有效维持心肌细胞直径和线粒体结构［7］，也有资料表明ED能明显降低局部缺血再灌注心肌家兔血液中MDA浓度，有效抑制局灶性缺血再灌注损伤［8］. 脓毒性休克时心肌损伤和心功能不全是多种炎症介质共同参与的结果，其中氧自由基被认为是致病的重要原因. 在脓毒症早期，自由基通过激活细胞核转录因子（NFκB或AP1），诱导细胞因子合成而起促炎症作用，继而在自由基和细胞因子的协同作用下激活内皮细胞，促进炎症介质和黏附分子合成，中性粒细胞呼吸爆发(respiratory burst)产生活性氧物质（reactive oxygen species， ROS）并释放溶酶体酶而发挥毒性作用，导致细胞功能丧失和坏死，最终使器官、系统功能失调［9］. 因此脓毒症休克时防治ROS对心功能损伤具有重要意义.LVESP和+dp/dtmax为检测左心功能的指标，我们是国内外首次将ED用于治疗脓毒性休克大鼠的研究单位，发现模型组动物MAP明显降低， LVESP和+dp/dtmax降低非常显著，说明模型组出现明显心功能不全的病理变化，ED治疗后各剂量可显著升高MAP， LVESP和+dp/dtmax，并随剂量增大而增强，表明ED有改善左心功能不全的作用. 模型组的心脏组织中SOD， CAT活性明显降低，氧自由基代谢产物MDA升高，ED可使SOD， CAT活性增强，强度与剂量成正比，并显著降低MDA，表明该药可以增强心肌组织的抗氧化能力，清除氧自由基. 模型组心肌组织水肿、出血及炎性细胞浸润，ED能明显减轻上述病理变化，证明该药通过ROS减少防治了LPS造成的心肌损伤.XigrisTM的有效成分为重组活化蛋白C，是人体内的自然蛋白，其作用可以平衡脓毒血症的凝结（血液凝结）和促进纤维蛋白溶解，该药降低了重度脓毒症患者近20%的死亡风险，但能引起出血等不良反应［10］. 本资料提示该药可以部分改善心功能不全，其机制可能与心肌细胞氧自由基代谢无关，但心肌有较重的出血变化.由于脓毒症休克是临床危重患者的重要死亡原因之一，尚无有效的治疗药物，基于以上试验结果，我们认为ED具有明确的作用机制，对于脓毒症休克的治疗具有进一步研究的价值和一定的开发潜力.参考文献［1］ Turner A， Tssamitros M， Bellomo R. Myocardial cellinjury in septic shock［J］. Crit Care Med， 1999，27(9):1775.［2］ Parrillo JE， Parker MM， Natanson C， et al. Septic shock in humans: advances in the understanding of prognosis， cardiovascular dysfunction， and therapy［J］. Ann Intern Med，1990，113(3):227-242.［3］ Karima R， Matsumoto S， Higashi H， et al. The molecular pathogenesis of endotoxic shock and organ failure［J］. Mol Med Today，1999，5(3):123-132.［4］ Peake SL， Moran JL， Leppard PI. NacetylLcysteine depresses cardiac performance in patients with septic shock［J］. Crit Care Med， 1996，24（12）:1302-1310.［5］阳清伟，刘鸣，张世波，等. 依达拉奉治疗急性脑梗死的系统评价［J］. 中国循政医学杂志，2006，6（1）:26-30.［6］ Wang LF， Zhang HY. A theoretical investigantion on DPPH radicalscavenging mechanism of edaravone ［J］. Bioorg Med Chem Lett，2003，13(21):3789-3792.［7］ Hayashi T， Mori T， Sohmiya K， et al. Efficacy of edaravone， a free radical scavenger， on left ventricular function and structure in diabetes mellitus［J］. 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2020脓毒症致心肌损伤模型的研究进展
目前，SIMI 动物模型的研究与应用已经相对成熟。制备 SIMI 的动物 模型主要有三种方法：宿主屏障破坏，毒素注射和病原体注射。 2.1 宿主屏障破坏模型
盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture，CLP)即通过人为的盲 肠结扎和穿刺诱发多菌性腹膜炎，动物会出现典型脓毒症症状。在此脓毒
1976 年，Kimes 等[15]从胚胎期 BDIX 大鼠心室组织中获得可以体外 培养增殖的 H9c2 心肌细胞株。H9c2 心肌细胞可以传代分化，在低血清 培养基中向骨骼肌分化，而在维甲酸诱导下则呈现心肌细胞表型，但此株 细胞即使分化，依然缺乏心肌细胞样的节律性搏动。研究发现体外培养的 H9c2 细胞在 LPS 处理下出现明显的炎症反应，为利用 H9c2 细胞建立 SIMI 模型提供基础。此后研究发现黄芪多糖通过下调 miR-127、大黄素 通过下调 miR-223 的表达来改善 LPS 诱导的心肌损伤，提示 microRNA 可能是 SIMI 治疗的一个重要靶点[16]。 3.2.2 小鼠心房 HL-1 细胞株
大鼠脓毒症模型建立方法
大鼠脓毒症模型建立方法
嘿，你知道咋给大鼠整出脓毒症模型不？先得选好健康的大鼠哇，这就跟挑运动员似的，得挑身强体壮的。
然后给大鼠来点细菌或者毒素啥的，让它感染上。
但这可得小心着点儿，别整太多把大鼠给搞死了。
就像做饭放盐似的，得恰到好处。
这过程安全不？那肯定得小心再小心哇！稍有不慎大鼠可能就一命呜呼了。
稳定性嘛，也得看操作手法。
要是技术不过关，那可就没准儿了。
那这脓毒症模型有啥用呢？哎呀，用处可大了去了。
可以研究脓毒症的发病机制呀，找到治疗的办法。
就好比侦探破案，得先有现场才能找出凶手嘛。
我听说有个实验室就用这方法做脓毒症模型，效果还不错呢。
通过观察大鼠的症状和生理指标，找到了一些治疗的新思路。
这不是超棒嘛！
大鼠脓毒症模型建立虽然有难度，但真的很有意义，值得一试。
内质网应激在脓毒症大鼠心肌损伤中的作用
内质网应激在脓毒症大鼠心肌损伤中的作用目的：研究内质网应激与脓毒症大鼠心肌损伤的关系。
方法：35只雄性SD 大鼠采用随机数字表法分为假手术组（n=7）和模型组（n=28），模型组下设2、6、12、24 h 四个时相点，每个时相点7只。
采用自动生化分析仪检测大鼠血CK-MB及cTnI水平。
采用HE染色检测心肌损伤情况，免疫组化技术检测心肌组织ERS标志物GRP78蛋白表达。
结果：（1）模型组大鼠6、12、24 h血清CK-MB 及cTnI均较对照组显著升高（P＜0.05）；各时相点病理改变明显；（2）心肌组织中GRP78蛋白表达在2 h即较对照组升高，并呈逐渐增加趋势（P＜0.05）；（3）GRP78表达与心肌损伤具有显著正相关（r=0.711，P＜0.05）。
也与血清cTnI水平呈显著正相关（r=0.612，P＜0.05）。
结论：脓毒症启动了ERS，并且ERS与心肌损伤、血cTnI水平呈正相关关系。
ERS可能在脓毒症大鼠心肌损伤中起重要作用。
脓毒症是指各种致病微生物或其毒素存在于血液或组织中，是机体对感染的一种全身性炎性反应，是严重感染、重度创伤、大手术后、重症胰腺炎和休克等常见的并发症，常导致心、肺、肾、胃肠道、血液系统等重要器官损伤，其中心肌损伤无疑具有至关重要的作用。
而关于脓毒症所致心肌损伤的机制，目前已知的有氧化应激、细胞凋亡、NO水平失调等[1-2]，近年有研究表明，内质网应激反应（endoplasmic reticulum stress ERS）[3]可能参与其中，而GRP78蛋白是ERS 的经典标志物。
本研究旨在观察脓毒症大鼠GRP78蛋白的变化规律及与心肌损伤的关系，为ERS在脓毒症发病过程中的作用奠定实验基础。
1 材料与方法1.1 实验动物清洁级雄性SD大鼠35只，质量150～200 g，由大连医科大学实验动物中心提供。
采用随机数字表法分为对照组（n=7）和模型组（n=28），其中，模型组按照内毒素注射时间不同再设2、6、12、24 h四个时相点，每组7只。
大鼠急性心肌梗死动物模型的建立和评估-最新文档资料
大鼠急性心肌梗死动物模型的建立和评估1 对象与方法?1. 1研究对象清洁级雄性Spreague-Dawley (SC)大鼠20 只，体质量250〜300 g (275± 15. 3) g,由广州中医药大学实验动物中心提供。
随机分为假手术组和心肌梗死组。
1 .2 研究方法?1 . 2. 1 MI 模型的建立[2-3] 氯胺酮( 75 mg/kg )腹腔注射麻醉，经口人工呼吸(导管置于大鼠的舌体与上颌之间)，连接小动物呼吸机予以正压通气，潮气量3〜5 ml/100 g ，呼吸频率60次/min，吸呼比1? : ?1。
左侧胸部备皮，消毒手术区域，经胸骨左缘第4 肋间开胸，钝性分离肌肉，以眼科开睑器撑开肋间肌切口，暴露心脏，剪开心包，于肺动脉圆锥与左心耳之间距主动脉根部2~3 mm处，用7-0眼科无创缝合针，穿过前降支深部连同一小束心肌一并结扎。
根据心电图和心肌组织颜色确定冠脉结扎成功。
逐层缝合胸壁，自主呼吸恢复后拔出通气导管。
大鼠清醒后送动物房饲养,规律照明,自由进食和饮水。
术后连续3 d 予以青霉素40 万U 腹腔注射以预防感染。
假手术对照组除不结扎冠状动脉外，其余步骤相同。
1. 2. 2 超声心动图检查[4]3% 戊巴比妥钠( 45 mg/kg )腹腔注射麻醉，用Philips Sonos 5500型多功能超声诊断仪( S12探头，频率5~12 MHz),在胸骨旁以二维超声和M型超声测量左室收缩末径（LVSd、左室舒张末径（LVDd、舒张期左室后壁厚度（PWd、舒张期左室前壁厚度（AWd Ml组为梗死区室壁厚度）、左室射血分数（LVEF和短轴缩短率（FS）,分别计算梗死区变薄指数（BBZS即舒张期左室前壁厚度/后壁厚度）和非梗死区增厚指数（ZHZS即舒张期左室后壁厚度/前壁厚度）。
所有参数均在3 个连续的心动周期中进行测量并取平均值。
1．2．3 血流动力学检查[5]3%戊巴比妥钠（45mg/kg）腹腔注射麻醉，气管切开插管，保持呼吸道通畅。
辛伐他汀预处理对脓毒症大鼠心肌细胞 ICAM-1表达的影响及意义
辛伐他汀预处理对脓毒症大鼠心肌细胞 ICAM-1表达的影响及意义张立涛;于织波;赵鹤龄【摘要】目的观察心肌细胞间粘附分子-1（ICAM-1）在脓毒症大鼠心肌细胞的表达，同时探讨辛伐他汀预处理对其表达的影响及意义。
方法雌性Wistar大鼠60只随机分为正常组、脓毒症组和辛伐他汀组，每组20例，应用盲肠结扎穿孔法制造脓毒症模型。
辛伐他汀组喂养辛伐他汀20 mg/kg，1次/d，共2周。
2周后辛伐他汀组与脓毒症组大鼠行盲肠结扎穿孔术。
术后48 h取各组大鼠心肌组织制成石蜡切片，采用免疫组织化学染色方法观察心肌细胞ICAM-1的蛋白表达。
结果免疫组织化学染色显示脓毒症组大鼠心肌细胞ICAM-1蛋白表达于术后48 h较正常组明显增加（ P ＜0铑．05），辛伐他汀组大鼠心肌细胞ICAM-1蛋白表达与脓毒症组比较明显减弱（ P ＜0．05），与正常组比较差异有统计学意义（ P ＜0．05）。
%Objective To observe the expressions of ICAM-1 in myocardial cells of rats with sepsis ,and to explore the effect and significance of simvastatin pretreatment on ICAM-1 expression .Methods Sixty female Wistar rats were randomly divided into three groups:control group ( n=20 ) , sepsis group ( n =20 ) and simvastatin group ( n =20 ) .The animal models with sepsis were established by cecal ligation and puncture (CLP).The rats in simvastatin group were treated withsimvastatin ,20mg/kg,once a day for two weeks before CLP.After teo weeks the rats both simvastatin group and sepsis group underwent CLP ,then 48h after operation the myocardium tissues of rats in three groups were collected to be made paraffin section , and the expressions of ICAM-1protein in myocardial cells were detected by immunohistochemistry ( IH ) staining.Results Immunohistochemistry staining showed that the expression levels of ICAM-1 in sepsis group were significantly higher than those in control group at 48h after CLP ( P <0.05),however,which in simvastatin group were significantly decreased,as ompared with those in sepsis group ( P <0.05),and there were significant differences in expression levels of ICAM-1 between simvastatin group and control group ( P<0.05 ).Conclusion Simvastatin can attenuate the expression of ICAM-1 in myocardial cells of rats with sepsis ,as a result,which can partially improve heart function during sepsis .【期刊名称】《河北医药》【年(卷),期】2013(000)019【总页数】3页(P2896-2898)【关键词】脓毒症;辛伐他汀;细胞间粘附分子-1;免疫组织化学染色【作者】张立涛;于织波;赵鹤龄【作者单位】050071 石家庄市，河北省人民医院急诊科;050071 石家庄市，河北省人民医院风湿免疫科;050071 石家庄市，河北省人民医院重症医学科【正文语种】中文【中图分类】R59脓毒症是由于感染引起的全身炎性反应综合征，并常导致组织损伤和器官功能异常，进一步发展可导致脓毒症休克、多器官功能障碍综合征。
脓毒症动物模型制作及评价-2019年文档
脓毒症动物模型制作及评价脓毒症动物模型是研究脓毒症发病机制和临床防治的基础。
建立标准的符合临床的脓毒症动物模型是脓毒症研究领域重点课题之一［1］。
本文就脓毒症动物模型制作中动物种类选择、制作方法等，予以综述并进行模型评价。
1 脓毒症动物模型动物以及制作方法的选择近交系小型动物如大鼠、小鼠或豚鼠，自身纯度较高、无特异性病原菌且价格较低。
大型哺乳动物，如猪、羊、狗等动物，可进行血流动力学监测和提供充足标本，便于进行较长试验观察。
灵长类动物免疫系统与人类高度相似，可用于评价炎性细胞因子以及免疫系统反应，但价格昂贵而且受到严格的伦理学制约。
另外，动物自身特点也可供实验利用：如羊对内毒素敏感，只需相当于狗的几十至几千分之一剂量（0.6μg/kg）即可出现肺血管损伤等脓毒症症状［2］。
猪肾脏、心血管和消化系统的生理特点和解剖结构与人类最相似，多用于严重脓毒症器官功能障碍的研究。
具有明确基因特征动物如内毒素耐受型敏感型小鼠，成为从分子水平揭示脓毒症发病机制的重要工具［3］。
脓毒症动物模型使用的制作方法也是需要考虑的重要问题。
不同种属宿主对内毒素或致病菌的敏感性、反应性各异：如啮齿类动物、猫和狗对内毒素具有一定的耐受性，而灵长类动物、兔和羊则对内毒素较敏感。
即使是相同动物对不同细菌侵袭反应也不同：如腹腔注射金黄色葡萄球菌或大肠杆菌的小鼠，抗生素可诱发前者循环中肿瘤坏死因子α（TNF-α）的早期释放，而后者TNF-α释放在时间和变化幅度上均无明显影响。
在应用抗TNF-α抗体分别对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌对感染的大鼠进行治疗时，结果显示对后者的保护作用优于前者［4］。
即使是同一种动物同一种制模病原体，采取的攻击方式和剂量不同，所引起的动物体内细胞等炎性因子反应亦不同。
如给予亚致死量的LPS可诱导动物产生高动力循环特点，而致死量LPS则使动物呈现低动力循环特点。
所以脓毒症动物模型的选择，除了要考虑研究的目的以及路径之外，还要考虑制模所使用的方法以及在研究结果的解释方面考虑模型自身的特点以及局限，作出合理客观的解释。
普伐他汀对脓毒症大鼠模型TNF—α的影响和心肌保护的作用
普伐他汀对脓毒症大鼠模型TNF—α的影响和心肌保护的作用摘要目的探讨普伐他汀对脓毒症大鼠模型TNF-α的影响和心肌保护的作用。
方法100只大鼠，随机分为研究组和对照组，各50只，制作大鼠脓毒症模型。
研究组给予研钵粉碎的普伐他汀，20 mg/（kg·d）加入2 ml生理盐水连续灌胃24 h。
对照组采取生理盐水连续灌胃24 h。
比较两组治疗前、治疗3 h、治疗6 h 肿瘤坏死因子（TNF-α）和心肌肌钙蛋白I含量。
结果两组治疗前TNF-α和心肌肌钙蛋白I比较差异无统计学意义（P>0.05）；研究组治疗3 h、6 h TNF-α（6.34±1.57）、（11.2±8.5）ng/ml和心肌肌钙蛋白I（0.15±0.03）、（0.36±0.22）ng/ml 优于对照组（P＜0.05）。
结论普伐他汀能够减轻脓毒症大鼠体内炎症水平，对减轻心肌损伤有保护作用。
关键词普伐他汀；脓毒症；大鼠模型；肿瘤坏死因子；心肌保护【Abstract】Objective To investigate influence by pravastatin on tumor necrosis factor-α （TNF-α）in sepsis rat model and its myocardial protection effect. Methods A total of 100 rats were randomly divided into research group and control group to establish sepsis rat model，with 50 cases in each group. The research group received crushed pravastatin by 20 mg/（kg·d）in 2 ml normal saline through continuous lavage for 24 h. The control group received continuous lavage for 24 h by normal saline. Comparison was made on TNF-α and cardiac troponin I contents between the two groups before treatment and in 3 and 6 h of treatment. Results There was no statistically significant difference of TNF-α and cardiac troponin I before treatment between the two groups （P>0.05）. The research group had better TNF-α as （6.34±1.57）and （11.2±8.5）ng/ml and cardiac troponin Ias （0.15±0.03）and （0.36±0.22）ng/ml in 3 and 6 h of treatment than those in the control group （P＜0.05）. Conclusion Pravastatin can reduce inflammation level in rat with sepsis，and it contains protective effect for reducing myocardial damage.【Key words】Pravastatin；Sepsis；Rat model；Tumor necrosis factor；Myocardial protection越来越多研究显示，他汀类药物还能改善脓毒症模型及患者的预后，可能降低体内C反应蛋白（CRP）水平、减弱补体活性，调节炎症介质表达而达到保护内皮细胞的作用。
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《中国组织工程研究》 Chinese Journal of Tissue Engineering Research1249·研究原著·张胜，男，1989年生，河北省沧州市人，回族，宁夏医科大学在读硕士，医师，主要从事重症医学研究。
通讯作者：王晓红，博士，主任医师，副教授，硕士生导师，宁夏医科大学总医院ICU 科，宁夏回族自治区银川市 750004文献标识码:B投稿日期：2019-07-03 送审日期：2019-07-05 采用日期：2019-08-21 在线日期：2019-10-23Zhang Sheng, Master candidate, Physician, Ningxia Medical University, Yinchuan 750004, Ningxia Hui Autonomous Region, ChinaCorresponding author: Wang Xiaohong, MD, Chief physician, Associate professor, ICU, General Hospital of Ningxia Medical University, Yinchuan 750004, Ningxia Hui Autonomous Region, China脓毒症心肌功能障碍模型大鼠的构建与评价张 胜1，白吉佳2，徐艳萍3，王晓红2 (1宁夏医科大学，宁夏回族自治区银川市 750004；宁夏医科大学总医院，2ICU 科，3心脏中心功能检查部，宁夏回族自治区银川市 750004)DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.2464 ORCID: 0000-0002-9840-8260(张胜)文章快速阅读：文题释义：脓毒症心肌功能障碍：是脓毒症或脓毒症休克最严重的并发症之一，其特征为心脏整体可逆的功能障碍，但心功能障碍的严重程度仍是影响脓毒症预后的重要因素之一，若不能及时有效地改善脓毒症心肌功能障碍将显著增加脓毒症患者病死率。
脂多糖：是革兰阴性菌重要的致病物质，注射脂多糖方法虽不能完全模拟脓毒症病理生理的复杂性，但该方法致病方式统一、可控，动物产生的临床表现具有同质性，并可导致脓毒症休克等严重病理变化，因此大部分脓毒症临床前研究都基于此方法。
摘要背景：目前认为心肌线粒体结构与功能的损伤在脓毒症心肌功能障碍中起着关键作用。
目的：构建大鼠脓毒症心肌功能障碍模型，为研究该疾病提供有效的实验手段。
方法：72只清洁级雄性SD 大鼠随机分为对照组28只、脂多糖组44只；两组大鼠各随机抽取20只用于观察造模后10 d 生存率；脂多糖组剩余24只依据造模后时相分为脂多糖 6，12，24 h 组3个亚组，每组8只。
脂多糖组腹腔注射10 mg/kg 脂多糖建立大鼠脓毒症模型，对照组注射等量生理盐水。
脂多糖各亚组分别于各时相点行超声心动图检查心功能。
留取心肌组织光镜观察心肌组织病理形态结构，透射电镜观察心肌超微结构；ELISA 法检测大鼠静脉血清心肌肌钙蛋白、脑钠肽浓度。
实验经宁夏医科大学总医院伦理审查委员会批准(审批号：2018-320)结果与结论：①与对照组比较，脂多糖组大鼠10 d 生存率明显降低；②与对照组比较，脂多糖 6 h 组左室射血分数、左室缩短分数未见降低(P 均> 0.05)，脂多糖 12 h 组、脂多糖 24 h 组左室射血分数、左室缩短分数显著降低(P 均< 0.01)，且随时间延长降低更明显(P 均< 0.01)；③与对照组比较，脂多糖 12 h 组、脂多糖 24 h 组血清肌钙蛋白Ⅰ、脑钠肽水平升高(P 均< 0.01)，且随脂多糖注射时间延长，肌钙蛋白Ⅰ、脑钠肽水平逐渐升高(P 均< 0.01)；④脂多糖各组心肌病理形态及超微结构与对照组比较出现明显损伤，且随着脂多糖注射时间延长损伤加重；⑤结果说明，实验成功建立大鼠脓毒症心肌功能障碍模型，该模型稳定可靠。
关键词：脓毒症；脂多糖；大鼠模型；心肌功能障碍 中图分类号：R446；R496；R318 基金资助：国家自然科学基金资助项目(81460288)，项目负责人：王晓红Constructing and assessing a rat model of sepsis-induced myocardial dysfunctionZhang Sheng 1, Bai Jijia 2, Xu Yanping 3, Wang Xiaohong 2 (1Ningxia Medical University, Yinchuan 750004, Ningxia Hui Autonomous Region, China; 2ICU, 3Department of Heart Center Function Examination, General Hospital of Ningxia Medical University, Yinchuan 750004, Ningxia Hui Autonomous Region, China)张胜，白吉佳，徐艳萍，王晓红. 脓毒症心肌功能障碍模型大鼠的构建与评价[J]. 中国组织工程研究，2020，24(8):1249-1253. DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.24641250AbstractBACKGROUND: It is currently believed that myocardial mitochondrial structure and function damage play a key role in sepsis-induced myocardial dysfunction.OBJECTIVE: To construct a rat model of sepsis-induced myocardial dysfunction and provide an effective experimental method for studying the disease.METHODS: Seventy-two SPF male Sprague-Dawley rats were randomly divided into control group (n =28) and lipopolysaccharide (LPS) group (n =44). Twenty rats were randomly selected from each group for observation of 10 days of survival. According to the post-modeling phase, the remaining 24 rats of the LPS group were divided into three subgroups, LPS 6-hour group, LPS 12-hour group and LPS 24-hour group, with 8 rats in each group. A sepsis model was constructed by intraperitoneal injection of 10 mg/kg LPS in the LPS group, and the control group was injected with an equal volume of normal saline. Echocardiographic examination of cardiac function was performed at each phase in each LPS subgroup. Myocardial histopathological morphology was observed by light microscopy, and myocardial ultrastructure was observed by transmission electron microscopy. Serum cardiac troponin and brain natriuretic peptide levels were measured by ELISA. The study was approved by the Ethic Committee of General Hospital of Ningxia Medical University in China (approval No. 2018-320). RESULTS AND CONCLUSION: Compared with the control group, the 10-day survival rate of rats in the LPS subgroups was lower.Compared with the control group, there was no reduction in left ventricular ejection fraction and left fractional shortening in the LPS 6-hour group (both P > 0.05). While in the LPS 12-hour group and LPS 24-hour group, the left ventricular ejection fraction and left fractional shortening significantly decreased (all P < 0.01)，and the decrease was more obvious with time (all P < 0.01). Compared with the control group, the serum cardiac troponin and brain natriuretic peptide levels were significantly increased in the LPS 12-hour group and LPS 24-hour group (all P < 0.01), and the serum cardiac troponin and brain natriuretic peptide levels gradually increased with LPS injection time (all P < 0.01). The myocardial pathological morphology and ultrastructure of the LPS subgroups showed obvious damage compared with the control group, and the damage was more obvious with the prolongation of LPS injection time. In this experiment, we successfully constructed a stable and reliable model of sepsis-induced myocardial dysfunction in rats, which is an ideal animal model for clinical research of sepsis cardiomyopathy. Key words: sepsis; lipopolysaccharide; rat model; myocardial dysfunctionFunding: the National Natural Science Foundation of China, No. 81460288 (to WXH)0 引言 Introduction脓毒症是指机体对感染反应失调导致危及生命的器官功能障碍[1]。