阪崎杆菌的控制研究ppt
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控制婴儿配方奶粉中阪崎肠杆菌：国际上法律法规的要求和良好的控制手段资料
•uted in the
factory well.
• 第四如果级这个程序在工厂得到很好的执行将最大程度保 • 第五证我级们产品的安全
• Use Enterobacteriacease (EB) as an indicator
• 第• 二En级terobacter Sakazakii 阪崎杆菌
• •
第• 三Co级ntrol of Enterobacter Sakazakii 阪崎杆菌控制: 第• 四1C)o级Znotrnoel oIdf eEant分er区obacter Sakazakii 阪崎杆菌控制:
• 第五2)级Mirco-biologic monitoring program 微生物监
• 单击red此uce处u编nwa辑nt母ed 版con文tam本in样atio式ns • 第• 二对Ke生级ep产t区he域d分ry区a以re减a f少ro非m预w期et污. 染Minimize using water in • 第三hig级h care areas.
干湿区分开。在高洁净区尽可能减少用水
By Joe Zhou, QA Manager of Cargill USA 周永武博士，美国嘉吉质量保证经理
1
单击此处编Se辑mi母nar版Co标nt题ent样s 内式容
• 单• 击I配nf此方an奶处t F粉编or和m辑微u母la生版a物n文d风M本险ic样rob式iological Risks 婴幼儿
to be controlled for micro contaminations 与干混配
• 第二料级和产品有关的操作步骤是需要控制微生物污染的
• 第• 三主 Sa级要lm区on域ella and E. sak are the only two
factory well.
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• •
第• 三Co级ntrol of Enterobacter Sakazakii 阪崎杆菌控制: 第• 四1C)o级Znotrnoel oIdf eEant分er区obacter Sakazakii 阪崎杆菌控制:
• 第五2)级Mirco-biologic monitoring program 微生物监
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干湿区分开。在高洁净区尽可能减少用水
By Joe Zhou, QA Manager of Cargill USA 周永武博士，美国嘉吉质量保证经理
1
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阪崎肠杆菌_ppt课件
※氧化酶阴性
※过氧化氢酶阳性，并生成黄色菌落
营养成分表
样品
美赞臣 安婴儿婴儿配方奶粉
罐装
配料表： 100%进口奶源配料：乳糖、精炼植物油、浓缩 乳清蛋白、脱脂奶粉、低聚半乳糖（GOS）、 花生四烯酸（ARA）和二十二碳六烯酸（DHA） （来源于单细胞油）、矿物质（碳酸钙、氯化钙、 柠檬酸钾、氯化钾、氯化镁、硫酸亚铁、硫酸锌、 硫酸铜、硫酸锰、亚硒酸钠、碘化钾）、玉米糖 浆固体、维生素（维生素A、维生素D3、维生素 E、维生素C、维生素B1、维生素B2、维生素B6、 维生素B12、维生素K1、胆碱、肌醇、烟酰胺、 叶酸、泛酸、生物素）、牛磺酸、核苷酸、食品 添加剂：磷脂、抗坏血酸棕榈酸酯、氢氧化钙、 碳酸氢钾。
44 ℃±0.5 ℃ 培养24h±2h 。
10 mL mLST-Vm 肉汤
36 ℃±1 ℃培 养24 h±2 h。
各取增菌培养物1 环，分 别划线接种于两个阪崎肠 杆菌显色培养基平板
①前增菌和 增菌
②分离
挑取1 个～5 个可疑菌落，划 线接种于TSA 平板。 25 ℃±1 ℃培养48 h±4 h。
③鉴定
阪崎肠杆菌显色培养基DFI
微生物
菌落颜色
• 阪崎肠杆菌 • 大肠杆菌 • 金黄色葡萄球菌
蓝绿色 无色菌落 被抑制不生长
培养基和试剂
• 4 、胰蛋白胨大豆琼脂（trypticase soy agar， TSA）：见附录A 中A.3。
• 5 、生化鉴定试剂盒。 • 6、 氧化酶试剂：见附录A 中A.4。 • 7、 L-赖氨酸脱羧酶培养基：见附录A 中A.5。 • 8 、L-鸟氨酸脱羧酶培养基：见附录A 中A.6。 • 9 、L-精氨酸双水解酶培养基：见附录A 中A.7
阪崎肠杆菌的研究进展
阪崎肠杆菌研究进展
龙道崎、邹妍、关郁芳、 雷丹丹、边伟、胡鹏
目录
概述
生物学特性
检测方法 致病性 预防和控制
阪崎肠杆菌概述
阪崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)属肠杆菌科， 是人和动物肠道内寄生的一种周生鞭毛、能运动、 无芽孢的革兰氏阴性菌，一直以来被称为黄色阴沟 肠杆菌 (Enterobacter cloacae)，于1980年以日 本细菌学家 Riichi Sakazakii的名字命名。 阪崎肠杆菌能引起严重的新生儿脑膜炎、小肠结肠 炎和败血症，近年来受到了研究者的广泛关注
阪崎肠杆菌的毒力因子可能是一类肠毒素样 化合物。在组织培养过程中一些菌株产生细 胞毒效应，且菌株间的毒力作用有差异。 细菌内毒素（脂多糖），是构成革兰氏阴性 细菌细胞外壁的主要成分。具有热稳定性， 能增加小肠上皮细胞通透性，促使细菌侵入 肠壁中而致病。
Байду номын сангаас防与控制
预防 坚持母乳喂养 选择检查合格的奶粉 开水冲调婴幼儿配方食品，再次食用前应重新加热。 控制 制定婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌微生物标准 制定加工、使用和操作婴幼儿配方食品的导则 制定有效的环境监测计划 建立实验室监测网络，对阪崎肠杆菌的来源、传播途径 等进行调查研究
阪崎肠杆菌的致病性
阪崎肠杆菌是存在自然环境中的一种
“条件致病菌”，由其引发的危害人群 主要是婴儿以及早产儿。偶尔还可引起 成人局部感染。
阪崎肠杆菌能引起严重的新生儿脑膜炎、
菌血症和坏死性小肠结肠炎，并可能遗 留严重的神经系统后遗症，死亡率20 ％～50％。
阪崎杆菌的致病性
致病机制研究不多，尚不清楚。 目前所知阪崎肠杆菌致病性可能与肠毒素和内毒 素有关
龙道崎、邹妍、关郁芳、 雷丹丹、边伟、胡鹏
目录
概述
生物学特性
检测方法 致病性 预防和控制
阪崎肠杆菌概述
阪崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)属肠杆菌科， 是人和动物肠道内寄生的一种周生鞭毛、能运动、 无芽孢的革兰氏阴性菌，一直以来被称为黄色阴沟 肠杆菌 (Enterobacter cloacae)，于1980年以日 本细菌学家 Riichi Sakazakii的名字命名。 阪崎肠杆菌能引起严重的新生儿脑膜炎、小肠结肠 炎和败血症，近年来受到了研究者的广泛关注
阪崎肠杆菌的毒力因子可能是一类肠毒素样 化合物。在组织培养过程中一些菌株产生细 胞毒效应，且菌株间的毒力作用有差异。 细菌内毒素（脂多糖），是构成革兰氏阴性 细菌细胞外壁的主要成分。具有热稳定性， 能增加小肠上皮细胞通透性，促使细菌侵入 肠壁中而致病。
Байду номын сангаас防与控制
预防 坚持母乳喂养 选择检查合格的奶粉 开水冲调婴幼儿配方食品，再次食用前应重新加热。 控制 制定婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌微生物标准 制定加工、使用和操作婴幼儿配方食品的导则 制定有效的环境监测计划 建立实验室监测网络，对阪崎肠杆菌的来源、传播途径 等进行调查研究
阪崎肠杆菌的致病性
阪崎肠杆菌是存在自然环境中的一种
“条件致病菌”，由其引发的危害人群 主要是婴儿以及早产儿。偶尔还可引起 成人局部感染。
阪崎肠杆菌能引起严重的新生儿脑膜炎、
菌血症和坏死性小肠结肠炎，并可能遗 留严重的神经系统后遗症，死亡率20 ％～50％。
阪崎杆菌的致病性
致病机制研究不多，尚不清楚。 目前所知阪崎肠杆菌致病性可能与肠毒素和内毒 素有关
阪崎杆菌的控制研究-贾超
阪崎肠杆菌的控制研究引言1958 年，人们在一例新生儿脑膜炎病例中第一次暗示了阪崎肠杆菌( Enterobacter sakazakii) 的存在，此后大约有70 例阪崎肠杆菌感染报告[1]。
事实上，阪崎肠杆菌在所有国家都远没有被充分报告。
阪崎肠杆菌可引起所有年龄组人群的疾病，但人们普遍认为婴儿受感染的危险最大。
而且，阪崎肠杆菌感染能在新生阶段以后，引起从前健康的婴儿染病[2]。
感染在医院和门诊部都曾发生过。
2004 年，分别发生在新西兰和法国[3]的两次阪崎肠杆菌爆发，被人们在微生物学上证明与婴幼儿配方奶粉有联系。
法国的爆发有9 例，造成2 名婴儿死亡。
由于现有的信息缺乏，尚不能确定每一次爆发中患者接触的阪崎肠杆菌数量，则不能画出阪崎肠杆菌剂量反应曲线图[4]。
然而，我们可以确定，配方奶粉中存在少量细菌就会引发疾病。
如果还原乳液中细菌有繁殖的条件，如放置在不适宜温度下时间过长，则这种危险会迅速增加。
本文综述了阪崎肠杆菌的生物特性、食物中阪崎肠杆菌的污染状况，以及如何对婴儿配方粉进行污染并采取的一些控制措施。
一、阪崎杆菌的介绍阪崎杆菌（E. sakazakii）属于肠杆菌科，起初E. sakazakii被认为是肠杆菌的生物变型菌, 并被命名为“黄色阴沟肠杆菌”,直到1980年, Farmer[5]与其合作者在E. sakazakii和E. cloacae 的脱氧核糖核酸(DNA) 杂交的基础上, 分析生化反应、黄色菌落产物以及对抗生素敏感性的基础上, 建议将该菌更名为在E. sakazakii, 此名称被广泛地采纳, 并沿用至今。
[6]E. sakazakii是一种兼性厌氧的条件致病菌。
能引起严重的新生儿脑膜炎、败血症及坏死性小肠结肠炎等疾病，并伴随神经系统后遗症，E. sakazakii作为一种条件性致病菌,具有较高的致死率，死亡率高达50%。
[7]二、阪崎肠杆菌微生物特性1. 形态特征：阪崎肠杆菌为革兰氏阴性杆菌，形态粗而短、周身有菌毛、无芽胞, 属于肠杆菌科肠杆菌属的一种条件致病菌。
坂崎肠杆菌
阪崎肠杆菌是人和动物肠道内寄生的一种革兰阴 性无芽孢杆菌，属肠杆菌科肠杆菌属，是肠道正 常菌丛中的一种，在一定条件下可引起人和动物 致病。在1980年之前一直被称为黄色阴沟肠杆菌
。
阪崎肠杆菌兼性厌氧，营养要求不高，能耐受一 定程度的渗透压和干燥，能在营养琼脂、血平板 、麦康凯琼脂、伊红美蓝琼脂、脱氧胆酸琼脂等 多种培养基上生长繁殖。
增殖特性
• 所有的阪崎肠杆菌都能在胰蛋白酶大豆琼脂上 36℃快速生长，24小时后形成直径2～3mm的菌落 ；25℃生长24h后形成直径1～1．5mm的菌落， 48小时后形成直径2～3mm的菌落。 • 坂崎肠杆菌在25℃放置10小时可增加30000倍，即 使婴儿配方粉中只有极微量的污染，阪崎肠杆菌 能在婴儿配方粉中也可长期存活，在配方粉食用 前的冲调期和储藏期该菌可能会大量繁殖。
因阪崎肠杆菌这些特性，使得奶粉生产时不易被杀灭，储 存时易生存下来。
致病性
• 阪崎肠杆菌感染的大多数病例都是婴儿，特别是早产儿、 出生体重偏低等身体状况较差的新生儿。感染主要引起脑 膜炎、脓血症、坏死性小肠结肠炎，阪崎肠杆菌引起的脑 膜炎常引起脑梗塞、脑脓肿、囊肿形成和脑室炎等并发症 ，并且可引起神经系统后遗症或迅速死亡。除了感染新生 儿外，该菌偶尔还可引起成人局部感染和菌血症等。
阪崎肠杆菌(又称阪崎氏肠杆菌)是肠杆菌科的一种，1980年 由黄色阴沟肠杆菌更名为阪崎肠杆菌。其有周身菌毛，无芽 孢，有动力。阪崎肠杆菌能引起严重的新生儿脑膜炎、小肠 结肠炎和菌血症，死亡率高达50% 以上。目前，微生物学家 尚不清楚阪崎肠杆菌的污染来源，但许多病例报告表明婴儿 配方粉是目前发现的主要感染渠道。 1961年，Franklin等首次报道了2例由阪崎肠杆菌引起的脑膜 炎病例。以后相继在世界范围内(美国、冰岛、荷兰等国家) 报道了一系列新生儿阪崎肠杆菌感有耐热及耐寒性，在外界环境中比其他肠道 杆菌生存率强，培养最佳温度25—36℃，在6～45℃下都 能生长，某些菌株可在47℃下生长。阪崎肠杆菌比其他肠 杆菌耐高温，LEHNER研究发现阪崎肠杆菌在婴儿配方奶粉 中60℃存活2.5min，并且72℃仍能存活。BREELLWER等观 察阪崎肠杆菌在58℃下能持续0.39～0.60min不死。 • 由于阪崎肠杆菌细胞内含有大量的海藻糖酶，累积有大量 的海藻糖，使得阪崎肠杆菌比沙门菌和其他肠杆菌更耐受 渗透压和干燥。 • 阪崎肠杆菌耐酸性并对清洁剂和杀菌剂有较强抵抗力。 LEH—NER的实验表明，阪崎肠杆菌能在pH0.9～2下存活( 胃部的酸性环境)，可能与阪崎肠杆菌周身菌毛结构有关 ，该菌毛结构易使细菌形成共生集合体，也易粘附在各种 物体表面形成一层生物保护膜，对清洁剂和杀菌剂具有较 强的抵抗力。
阪崎肠杆菌研究进展
为相近； • 阪崎肠杆菌应作为一个独立种，归属于
肠杆菌属，鉴于所分离出的阪崎肠杆菌 之间也有差异，被分成15个生物型或群。
中国检验检疫科学研究院食品安全研究所
细菌分类方面的问题
• 种是生物分类中基本分类单位，是具有高 度特征相似性的菌株群，该菌株群与其它 类群的菌株有很明显的区别；
• 细菌学家和分类学家存在一定分歧； • DNA杂交同源性在60-70%以上，或
• GB/T 4789.40—2008 食品卫生微生物学检验 阪崎肠杆菌检验
– 第一法 定性方法 – 第二法 MPN方法
Keith Lampel 基思.蓝佩尔
中国检验检疫科学研究院食品安全研究所
阪崎肠杆菌检测方法的实验设计
传统方法
• 前增菌
– 蒸馏水
– BPW
• 选择性增菌
– mLST
– EE
• 选择性分离
– 显色培养基（DFI、ESIA，其他）
– VRBGA
• 主要生化特征的鉴别
– 产黄色素 – DNA酶
• 生化鉴定
– API
– VITEK – 其他
分子生物学方法
• 前增菌
• 选择性增菌
• 目标片段扩增
– dnaG.基因，大分子合成操纵子； – gluA.基因，α-葡萄糖苷酶； – rpob基因，编码RNA聚合酶β亚单
阪崎肠杆菌研究进展
中国检验检疫科学研究院食品安全研究所 赵贵明 2009年8月
中国检验检疫科学研究院食品安全研究所
内容提要
• 第一部分：阪崎肠杆菌的分类学变化 • 第二部分：阪崎肠杆菌检验研究进展
中国检验检疫科学研究院食品安全研究所
阪崎肠杆菌的重视程度
• 《CODE OF HYGIENIC PRACTICE FOR POWDERED FORMULAE FOR INFANTS AND YOUNG CHILDREN》 CAC/RCP 66 - 2008替代 CAC/RCP 21-1979 – 由争论到定论 – 给出了制定阪崎肠杆菌监控计划的指南
肠杆菌属，鉴于所分离出的阪崎肠杆菌 之间也有差异，被分成15个生物型或群。
中国检验检疫科学研究院食品安全研究所
细菌分类方面的问题
• 种是生物分类中基本分类单位，是具有高 度特征相似性的菌株群，该菌株群与其它 类群的菌株有很明显的区别；
• 细菌学家和分类学家存在一定分歧； • DNA杂交同源性在60-70%以上，或
• GB/T 4789.40—2008 食品卫生微生物学检验 阪崎肠杆菌检验
– 第一法 定性方法 – 第二法 MPN方法
Keith Lampel 基思.蓝佩尔
中国检验检疫科学研究院食品安全研究所
阪崎肠杆菌检测方法的实验设计
传统方法
• 前增菌
– 蒸馏水
– BPW
• 选择性增菌
– mLST
– EE
• 选择性分离
– 显色培养基（DFI、ESIA，其他）
– VRBGA
• 主要生化特征的鉴别
– 产黄色素 – DNA酶
• 生化鉴定
– API
– VITEK – 其他
分子生物学方法
• 前增菌
• 选择性增菌
• 目标片段扩增
– dnaG.基因，大分子合成操纵子； – gluA.基因，α-葡萄糖苷酶； – rpob基因，编码RNA聚合酶β亚单
阪崎肠杆菌研究进展
中国检验检疫科学研究院食品安全研究所 赵贵明 2009年8月
中国检验检疫科学研究院食品安全研究所
内容提要
• 第一部分：阪崎肠杆菌的分类学变化 • 第二部分：阪崎肠杆菌检验研究进展
中国检验检疫科学研究院食品安全研究所
阪崎肠杆菌的重视程度
• 《CODE OF HYGIENIC PRACTICE FOR POWDERED FORMULAE FOR INFANTS AND YOUNG CHILDREN》 CAC/RCP 66 - 2008替代 CAC/RCP 21-1979 – 由争论到定论 – 给出了制定阪崎肠杆菌监控计划的指南
食品卫生微生物学检验-阪崎肠杆菌 ppt课件
（三）神经系统症状：烦躁、哭声尖直、嗜睡甚至昏迷，可出现凝视、 惊厥，查体可有头围增大、颅缝裂开、前囟张力增高、脑膜刺激征阳 性。
阪崎肠杆菌介绍
易感人群:
免疫力低下者和婴幼儿、新生儿， 尤其是早产儿、低体重儿可以致病。感 染来源主要是受阪崎肠杆菌污染的奶粉， 人与人之间无传染性。
阪崎肠杆菌介绍
1、阪崎肠杆菌在自然界分布广泛，在水、土壤、食 物、排泄物等中都能够检出。细菌不耐热，加热到 72℃持续15秒就可以杀灭。细菌不在人与人之间传播。 2、阪崎肠杆菌在一般情况下不对人体健康产生危害， 但对于新生儿，尤其是早产儿、低体重儿可以致病。 3、绝大多数患者为轻症病例，表现为轻微的消化道 症状，恢复良好；重症病例罕见但病死率高。对于发 现的病例应及时报告。
阪崎肠杆菌介绍
阪崎肠杆菌（Enterobater sakazakii）属肠杆菌科肠杆 菌属，革兰染色阴性杆菌。阪崎肠杆菌在自然界分布 广泛，繁殖迅速，但不耐热，可通过巴斯德消毒法杀 灭。阪崎肠杆菌属条件致病菌，在一般情况下，不对 人体健康产生危害，但对于免疫力低下者和婴幼儿、 新生儿，尤其是早产儿、低体重儿可以致病。感染来 源主要是受阪崎肠杆菌污染的奶粉，人与人之间无传
食品卫生微生物学检验-阪崎肠杆菌 ppt课件
阪崎肠杆菌检验 GB/T 4789.40-2008
一、采标情况
二、适用范围 三、操作过程 1 第一法 阪崎肠杆菌的检验 2 第二法 阪崎肠杆菌的计数
阪崎肠杆菌检验 GB/T 4789.40-2008
二、适用范围
适用于婴幼儿配方奶粉、乳和乳制品及 其原料中阪崎肠杆菌的检验
挑取绿色菌落
接种TSA平板
25℃±1 ℃ 48 h ± 4 h 挑取黄色菌落
生化鉴定
阪崎肠杆菌介绍
易感人群:
免疫力低下者和婴幼儿、新生儿， 尤其是早产儿、低体重儿可以致病。感 染来源主要是受阪崎肠杆菌污染的奶粉， 人与人之间无传染性。
阪崎肠杆菌介绍
1、阪崎肠杆菌在自然界分布广泛，在水、土壤、食 物、排泄物等中都能够检出。细菌不耐热，加热到 72℃持续15秒就可以杀灭。细菌不在人与人之间传播。 2、阪崎肠杆菌在一般情况下不对人体健康产生危害， 但对于新生儿，尤其是早产儿、低体重儿可以致病。 3、绝大多数患者为轻症病例，表现为轻微的消化道 症状，恢复良好；重症病例罕见但病死率高。对于发 现的病例应及时报告。
阪崎肠杆菌介绍
阪崎肠杆菌（Enterobater sakazakii）属肠杆菌科肠杆 菌属，革兰染色阴性杆菌。阪崎肠杆菌在自然界分布 广泛，繁殖迅速，但不耐热，可通过巴斯德消毒法杀 灭。阪崎肠杆菌属条件致病菌，在一般情况下，不对 人体健康产生危害，但对于免疫力低下者和婴幼儿、 新生儿，尤其是早产儿、低体重儿可以致病。感染来 源主要是受阪崎肠杆菌污染的奶粉，人与人之间无传
食品卫生微生物学检验-阪崎肠杆菌 ppt课件
阪崎肠杆菌检验 GB/T 4789.40-2008
一、采标情况
二、适用范围 三、操作过程 1 第一法 阪崎肠杆菌的检验 2 第二法 阪崎肠杆菌的计数
阪崎肠杆菌检验 GB/T 4789.40-2008
二、适用范围
适用于婴幼儿配方奶粉、乳和乳制品及 其原料中阪崎肠杆菌的检验
挑取绿色菌落
接种TSA平板
25℃±1 ℃ 48 h ± 4 h 挑取黄色菌落
生化鉴定
阪崎肠杆菌
• 婴幼儿脑膜炎：未足月出生的新生儿占75％。主要变现为 发热、面色苍白，有抽搐或颤抖，张力亢进，囱门隆出， 无颈项强直。合并有菌血症者占5／8，坏死性小肠结肠炎 占2／8，死亡率高达75％。阪崎肠杆菌引起的脑膜炎常引 起脑梗塞、脑脓肿、囊肿形成和脑室炎等并发症,并且可 引起神经系统后遗症或迅速死亡。 。 • 新生儿菌血症:低热，寒战，白细胞偏低，血液培养分离 可得到阪崎肠杆菌 ，多数症状较轻，如出现严重的脓毒 血症，死亡率可达36％。 • 新生儿坏死性小肠结肠炎(NEC):多发生于未足月出生体重 较轻的婴幼儿 。 • 成人感染 ：阪崎肠杆菌引起成人菌血症或局部感染。
所致疾病
阪崎肠杆菌可以对任何年龄段的人群引起疾 病，但主要是婴幼儿，特别是1岁以下和出生28 天以内的婴儿，早产儿、低体重儿或免疫缺陷的 婴幼为他们主要依靠奶粉喂养， 比其他婴幼儿更容易感染。感染主要引起脑膜炎、 脓血症、坏死性小肠结肠炎,阪崎肠杆菌引起的脑 膜炎常引起脑梗塞、脑脓肿、囊肿形成和脑室炎 等并发症,并且可引起神经系统后遗症或迅速死亡。
生物学性状
• 形态特征:革兰阴性粗短杆菌细胞大小为 ( 0.6~1.1 )×( 1.2~3.0 )µm，有周身菌毛,无芽胞,有动力 。 • 培养:兼性厌氧,营养要求不高,能在营养琼脂、血平板、麦 康凯等多种培养基上生长。在TSA和BHI生长为 1.5~2.5mm的黄色菌落 ，在VRBG能产生紫红色菌落，而 在TSA上加xα-GLC将出现绿色菌落，氧化酶阴性，触酶 反应阳性。 • 抵抗力：耐高温、干燥、渗透压 阪崎肠杆菌比其他肠杆 菌耐高温。耐酸性并对清洁剂和杀菌剂有较强抵抗力 。 •
我国对阪崎肠杆菌方面的管理规定
• 《关于对进口乳制品进行阪崎肠杆菌检测的通知》(国质 检食函[2005]690号)； • 《关于加强进口乳制品检验检疫监督管理工作的通知》 国质检食函[2007]298号）； • 《婴幼儿配方乳粉生产许可证审查细则》(2006、2008 版)
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另外对紫外光也有很好的耐受性，在60℃-70℃紫外光照射下E. sakazakii
能存活120min。 同时, Breeuwer 等的研究结果表明，E. sakazakii由于 含有大量的海藻糖酶, 能在细胞内积累海藻糖，阻止蛋白变性和膜融合，使
其较其他细菌更能耐受干燥和渗透压, 从而使之能在婴儿配方粉中长期存活。
阪崎杆菌的控制研究
姓 名 导 师
贾 超 张 筠
1 2 3
4
引 言
阪崎杆菌的介绍 阪崎杆菌生物特性 阪崎杆菌在食品中的污染状况
5Байду номын сангаас
6
阪崎杆菌如何污染婴儿配方粉
阪崎杆菌的控制措施
1
引 言
1958 年，人们在一例新生儿脑膜炎病例中第一次暗示了阪崎肠杆菌 ( Enterobacter sakazakii) 的存在，此后大约有70 例阪崎肠杆菌感染 报告。事实上，阪崎肠杆菌在所有国家都远没有被充分报告。阪崎肠 杆菌可引起所有年龄组人群的疾病，但人们普遍认为婴儿受感染的危 险最大。而且，阪崎肠杆菌感染能在新生阶段以后，引起从前健康的 婴儿染病。感染在医院和门诊部都曾发生过。2004 年，分别发生在新 西兰和法国的两次阪崎肠杆菌爆发，被人们在微生物学上证明与婴幼 儿配方奶粉有联系。法国的爆发有9 例，造成2 名婴儿死亡。由于现有 的信息缺乏，尚不能确定每一次爆发中患者接触的阪崎肠杆菌数量， 则不能画出阪崎肠杆菌剂量反应曲线图。然而，我们可以确定，配方 奶粉中存在少量细菌就会引发疾病。如果还原乳液中细菌有繁殖的条 件，如放置在不适宜温度下时间过长，则这种危险会迅速增加。 本文综述了阪崎肠杆菌的生物特性、食物中阪崎肠杆菌的污染状况， 以及如何对婴儿配方粉进行污染并对其采取的一些控制措施。
条件致病菌。我国也非常重视E. sakazakii的监测情况，已将其列入食源性致病
菌的监测范围。在2010-2011年各地疾控中心的食源性致病菌监测结果E. sakazakii的检出情况中显示，广西梧州市监测的175份食品中检出率为5.26% ， 江苏宿迁市的891份样品中检出率为2.6%，甘肃定西市对321份市售食品监测中
3
阪崎杆菌生物特性
1 2 3
形态特征 培养特性 抵抗性 增值能力
1
4
生物 特性
2
4
3
形态特征
阪崎肠杆菌为革兰氏阴性杆菌，形态粗而短、周身有
菌毛、无芽胞, 属于肠杆菌科肠杆菌属的一种条件致病菌。
培养特性
阪崎肠杆菌营养要求不高, 能在多种培养基中生长繁殖。不同的 琼脂培养其菌落颜色不同, 如在结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂 (VRBG)平板中36℃ 孵育24h, 可出现紫色菌落, 而接种在胰蛋白酶大 豆琼脂( TSA ) 平板25℃ 48-72h, 可出现黄色菌落 , 在胰蛋白酶大豆 琼脂 ( TSA )上加5- 溴- 4-氯- 吲哚- A- D 吡喃葡萄苷( X a- GLC ) , 能 产生蓝绿色菌落, 现已作为阪崎肠杆菌快速培养的选择性培养基。
增值能力
阪崎肠杆菌于25℃ 放置6h, 其相对危险性可增加30倍; 25℃ 放置10h相对危险性可增加30 000倍。因此, 即使婴儿配 方粉中只有极微量的阪崎肠杆菌污染, 在配方粉食用前的冲调期 和储藏期该菌也可能大量繁殖。
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阪崎杆菌在食品中的污染状况
在过去的E. sakazakii感染案例中，婴儿配方奶粉（FIP）是E. sakazakii的 主要感染渠道。自1961年首次报道由E. sakazakii引起的新生儿脑膜炎之后， 全球范围陆续出现感染事件，丹麦、希腊、英国、荷兰、冰岛等国均有报道。 多个品牌婴幼儿食品中检测出E. sakazakii，其严重性已引起世界多国相关部门 的重视，E. sakazakii已被世界卫生组织和许多国家确定为引起婴儿死亡的重要
检出率为0.31%，湖南长沙市监测的286份食品中检出率为6.3%。2013年董晓
晖等对300份奶粉和50份非奶粉类食品中克罗诺杆菌进行定量检测，检出率达 6.6%，23个污染样品中有4个样品的含菌量大于100 MPN/100g。说明E. sakazakii在我国已经存在一定程度的污染且污染食品范围较广。
喂养婴儿 前被污染。
表1-配方粉干混原料成分中致病菌的调查结果
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阪崎杆菌的控制措施
控制初级原料的质量 在食品的加工过程中灭菌
防止灭菌后的产品在后续的生产环 节被再次污染
生产设备的控制
防止食品在消费环节被污染
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控制初级原料的质量
阪崎肠杆菌是在自然界中广泛存在的生物，它可能存在于生产食品的各种 原辅料中。这些原辅料有植物来源也有动物来源的。植物来源包括蔬菜、水
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阪崎杆菌的介绍
阪崎杆菌（E. sakazakii）属于肠杆菌科，起初E. sakazakii被认为是肠 杆菌的生物变型菌, 并被命名为“黄色阴沟肠杆菌”,直到1980年, Farmer与 其合作者在E. sakazakii和E. cloacae的脱氧核糖核酸(DNA) 杂交的基础上， 分析生化反应、黄色菌落产物以及对抗生素敏感性的基础上，建议将该菌更 名为在E. sakazakii，此名称被广泛地采纳, 并沿用至今。 E. sakazakii是一种兼性厌氧的条件致病菌。能引起严重的新生儿脑膜 炎、败血症及坏死性小肠结肠炎等疾病，并伴随神经系统后遗症， E. sakazakii作为一种条件性致病菌,具有较高的致死率，死亡率高达50%。
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阪崎杆菌如何污染婴儿配方粉
近几年来, 国内外报道了一系列配
方粉污染事件。阪崎肠杆菌污染配 方粉的途径主要有3条
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通过生产婴儿配方奶粉的 原料。国外对相关配方产 品进行的生产原料调查资 料表明, 在配方粉生产使用 的配方原料中, 淀粉被致病 性微生物污染的危险性最 高 。见下表
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在巴氏杀菌后污 染或随其他添加 剂带入。
抵抗力
阪崎肠杆菌耐高温, Farber研究表明，E. sakazakii 是所研究的肠杆 菌中最耐热的一种，在60℃为2.5 min 条件下，要使E. sakazakii 减少6或 7个数量级，需要在60℃分别加热15 min和17.5 min，而在高温短时 （72℃/15s）的巴氏杀菌条件下，理论上可以杀灭所有的E. sakazakii。