凝胶回收试剂盒

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DNA凝胶回收试剂盒产品说明书

DNA凝胶回收试剂盒产品说明书

北京四正柏生物科技有限公司网站: 客服热线:400-7060-959技术支持:DNA 凝胶回收试剂盒产品编号规格MDN3066-5050次MDN3066-100100次保存条件及效期:常温运输和保存,保质期一年。

产品描述:本试剂盒用于从琼脂糖凝胶中或DNA 反应体系中(如PCR 反应)回收DNA 片段。

试剂盒采用可以高效、专一结合DNA 的硅胶膜和独特的溶胶体系,或DNA 反应体系中回收的单链、双链及环状DNA ,回收效率可达50-90%(跟片段大小相关)。

得到的DNA 可直接用于连接、转化、酶切、测序、杂交等分子生物学实验。

产品组分:使用方法:1.凝胶回收:切取含DNA 片段的琼脂糖凝胶(100mg 左右,尽可能多地把多余的胶切除,否则会影响回收效率),放入一干净的1.5ml 塑料离心管(自备)中,用移液枪头捣碎,按重量比为1:3到1:5的比例加入通用溶胶液(100mg 琼脂糖凝胶需要加入300μl-500μl 通用溶胶液)。

PCR 产物回收:直接在PCR 反应管中加3-5倍体积的通用溶胶液,混匀,然后跳过第2步、直接从第3步做起。

如果PCR 反应中使用了石蜡,需要预先去除。

2.50℃保温使胶完全溶化(一般需要5分钟),其间可以振荡数次以促进琼脂糖凝胶的溶化。

如果片段长度在300bp 成份50次包装100次包装通用溶胶液25ml 50ml 吸附柱活化液25ml 50ml 通用洗柱液50ml 100ml 离心吸附柱50套100套DNA 洗脱液10ml 10ml 说明书1份1份以下,建议不要加热,以免DNA变性,影响回收率。

3.在等待期间,活化离心吸附柱。

在离心吸附柱中加入0.5mL吸附柱活化液,套上收集管后室温放置2分钟,然后12,000rpm离心2分钟,倒弃穿透液,再将吸附柱套上收集管后待用。

活化后的离心吸附柱必须在当天使用。

4.在上柱前,在溶化的胶中加入相当于胶块体积1/2的异丙醇(对100mg胶块,加50uL),快速振荡10秒混匀。

凝胶回收

凝胶回收

AxyPrep DNA 凝胶回收试剂盒本试剂盒适合从各种琼脂糖凝胶中回收多至8μg DNA(70bp-10Kb),回收率为60-85%。

琼脂糖凝胶在温和的缓冲液(DE-A 溶液)中熔化,其中的保护剂能防止线状DNA 在高温下降解,然后在DE-B 溶液的作用下使DNA 选择性结合到膜上。

纯化的DNA 纯度高,并保持片断完整性和高生物活性,可直接用于连接、体外转录、PCR 扩增、测序、微注射等分子生物学实验。

一、试剂盒组成、贮存、稳定性2ml离心管1.5ml离心管说明书Buffer DE-A:凝胶熔化剂,含DNA 保护剂,防止DNA 在高温下降解。

室温密闭贮存。

Buffer DE-B:结合液(促使大于70bp 的DNA 片段选择性结合到DNA 制备膜上)。

室温密闭贮存。

Buffer W1:洗涤液,室温密闭贮存。

Buffer W2 concentrate:去盐液,使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(用100%乙醇或95%乙醇),混合均匀,室温密闭贮存。

Eluent:洗脱液,室温密闭贮存。

二、注意事项1. Buffer DE-A(含有β-巯基乙醇)、Buffer DE-B 和Buffer W1 含刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套和眼镜,避免沾染皮肤、眼睛和衣服,谨防吸入口鼻。

若沾染皮肤、眼睛时,要立即用大量清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医疗咨询。

2. 在步骤1 中,将凝胶切成细小的碎块可大大缩短凝胶熔化时间(线型DNA 长时间暴露在高温条件下易于水解),从而提高回收率。

勿将含DNA 的凝胶长时间地暴露在紫外灯下,减少紫外线对DNA造成的损伤。

3. 在步骤2 中凝胶必须完全熔化,否则将严重影响DNA 回收率。

4. 将Eluent 或去离子水加热至65°C,有利于提高洗脱效率。

5. DNA 分子呈酸性,建议在2.5 mM Tris-HCl,pH 7.0-8.5 洗脱液中保存。

三、实验准备1. 第一次使用前,Buffer W2 concentrate中加入指定体积的无水乙醇。

胶回收试剂盒成分及作用

胶回收试剂盒成分及作用

胶回收试剂盒成分及作用
小伙伴们!今天咱们来唠唠胶回收试剂盒的那些事儿。

首先呢,胶回收试剂盒里有结合缓冲液。

这东西可重要啦!它的作用就是为了让咱们从琼脂糖凝胶里切下来的DNA片段能够很好地结合到硅胶膜上。

你想啊,如果没有这个结合缓冲液,那DNA片段就像没头的苍蝇似的,到处乱飘,根本没法好好进行下一步回收工作呢!我感觉这个结合缓冲液的量得控制好,不过具体多少有时候也得根据实际情况来定,多一点少一点可能不会有太大影响,但也别太离谱啦。

还有洗脱缓冲液。

这是干啥用的呢?它就是把吸附在硅胶膜上的DNA给洗下来。

我就这么跟你说吧,要是没有洗脱缓冲液,咱们千辛万苦把DNA吸附上去了,结果却拿不下来,那不是白忙活了嘛!一般来说按照试剂盒的说明加就好,但是呢,我试过稍微改变一点洗脱缓冲液的量,好像也能得到不错的结果,当然啦,这只是我的一点小经验哈。

另外,试剂盒里肯定有硅胶膜啦。

这个硅胶膜就像是一个小小的“DNA捕捉器”。

DNA片段经过结合缓冲液的作用后,就乖乖地被吸附在这个硅胶膜上了。

不过要注意哦,在操作的时候千万别把硅胶膜弄破了,一旦破了,那整个回收过程可能就会出问题啦!这一步一定要小心谨慎呀!
有些胶回收试剂盒可能还含有一些特殊的试剂成分,虽然我不太清楚具体每一个都是干啥的,但是它们肯定都是为了让胶回收这个过程更加顺利而存在的。

PCR 或酶切产物凝胶回收试剂盒说明书

PCR 或酶切产物凝胶回收试剂盒说明书

PCR或酶切产物凝胶回收试剂盒说明书
【试剂盒简介】
本试剂盒将可以特异结合DNA的高性能磁性复合微球与独特的溶液系统有机结合在一起,适合从各种电泳凝胶(TAE或TBE)中提取线性DNA(70 bp-10 Kb),回收率在60-90%以上,本试剂盒还可从凝胶中回收质粒。

纯化后的线性DNA保持完整的生物活性,适用于多种用途,如:连接、体外转录、PCR、测序、Southern 杂交、微注射等分子生物学研究。

本试剂盒结合自动化设备,可以实现DNA琼脂糖凝胶回收的高通量、自动化提取。

【试剂盒组成】
Cat. No. YR03009-01YR03009-02YR03009-03
制备次数 50次100次200次
Lysis-Binding Buffer 20mL40mL120mL
Wash Buffer W1 70mL140mL400mL
Magnetic beads 1mL2mL4mL
Elution Buffer 2.5mL5mL10mL
使用说明书1份1份1份
【贮藏与有效期】
所有试剂室温保存,有效期为一年。

【操作步骤】请与我公司联系。

【经销商】深圳市易瑞生物技术有限公司
Shenzhen Bioeasy Biotechnologies Co., Ltd.
地址:深圳市宝安区西乡街道桃花源科技创新园11号研发中心邮编:518102
电话:**************************传真:*************
电子邮件:********************公司主页:。

片段凝胶回收试剂盒(离心柱型).

片段凝胶回收试剂盒(离心柱型).
三、试剂盒特点
1. 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜 ,柱与柱之间吸附量差异极小,可 重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2. 使用了优质溶胶液,不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐,不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反 应。
3. 独特的溶胶液/结合液配方,将溶胶和结合两种功能统一,因此一个试剂盒可以运用于琼脂糖 DNA 回收,也可以 PCR 产物清洁纯化,酶切产物纯化回收等多种功能。
2. 所有的溶液应该是澄清的,如果环境温度低时溶液可能形成沉淀,此时不应该直接使用,可在 37℃水 浴加热几分钟,即可恢复澄清。使用前应该恢复到室温。
3. 储存于低温(4℃或者-20℃)会造成溶液沉淀,影响使用效果,因此运输和储存均在室温下(15℃- 25℃)进行。
4. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH 值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
24 ml
48 ml
120×2 ml
第一次使用前按说明加指定量乙醇
1ml
5 ml
10 ml
50 ml
5个
50 个
100 个
500 个
收集管(2ml) 室温
说明书
ห้องสมุดไป่ตู้室温
5个 1份
50 个 1份
100 个 1份
500 个 1份
本试剂盒在室温储存 12 个月不影响使用效果。
注意事项
1. 第一次使用前在漂洗液 W 中按 4:7 的比例加入无水乙醇,如包装为 24ml 漂洗液 W 中,应加入 42ml 无 水乙醇。加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入 !
如果凝胶浓度大于 2%,应加入 6 倍体积溶胶液。凝胶块最大不能超过 400mg,如果超过 400mg,请 用多个离心柱进行回收。 4.50-60℃水浴放置 10 分钟(或直至胶完全溶解)。每 2-3 分钟涡旋振荡一次或颠倒离心管 2 次帮助 加速溶解。

TaKaRa 凝胶回收说明书.

TaKaRa 凝胶回收说明书.

Code No. 9762 研究用TaKaRa MiniBEST AgaroseGel DNA Extraction Kit Ver.4.0说明书v201306Da目录内容页码●制品说明1 ●制品内容1 ●保存与运输1 ●使用前的准备事项1 ●操作方法1 ●使用例3 ●注意事项3 ●Q&A 4●制品说明本试剂盒是从琼脂糖凝胶中回收纯化DNA片段的试剂盒。

试剂盒采用了独特的凝胶溶解Buffer,其具有较强的缓冲性能并含有pH指示剂,方便判断溶液的pH值是否适合与DNA制备膜结合,其溶胶能力很强,无需加热,在室温(15-25℃条件下即可快速溶解凝胶。

本试剂盒结合DNA制备膜技术,具有高效、快速、方便之特点,全套操作只需20分钟便可完成。

使用本试剂盒每次可纯化得到多至20 μg以上的DNA片段(50 bp~20 kb,回收率高达50~80%,20~50 kb的DNA片段回收率略低。

经本试剂盒回收纯化的DNA片段纯度高,完整性好,可直接用于连接反应、PCR扩增、DNA测序等各种分子生物学实验。

●制品内容(50次量每次处理的胶块量约为300 mg(1%凝胶浓度时,本试剂盒可使用50次。

本试剂盒分试剂Set与Column Set两部分。

■试剂SetBuffer GM*1 50 mlBuffer WB*2 24 mlElution Buffer 2 ml ×2*1含有强变性剂,应避免与皮肤、衣物等接触。

若不小心接触到眼睛或皮肤时,请立即到医院进行处理。

*2首次使用前,向Buffer WB中添加56 ml的100%乙醇。

■Column SetSpin Columns 50支Collection tubes 50支【试剂盒之外所需准备试剂】◆无水乙醇◆灭菌水或Tris-HCl(pH8.0◆ 3 M醋酸钠溶液(pH5.2●保存与运输1. 本试剂盒可以在室温下(15-25℃保存。

2. 本试剂盒于室温下(15-25℃运输。

Geneaid GenepHlowTM Gel PCR 通用型DNA 纯化回收试剂盒说明书

Geneaid GenepHlowTM Gel PCR 通用型DNA 纯化回收试剂盒说明书

完整说明书(英文)下载如果您是第一次使用本产品或对本产品的操作步骤不熟悉,请您经由扫描QR code 下载并详阅完整说明书一、从琼脂糖凝胶中回收DNA 片段1. 凝胶融解将单一的目的DNA 条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分,凝胶重量不超過300 mg )放入干净的离心管中. 向胶块中加入500 μl 溶液Gel/PCR, 55-60ºC 水浴放置10-15分钟,其间不断温和地上下翻转离心管,以确保胶块充分溶解.注意:凝胶完全融解后应呈现黄色,即可进行后续操作。

如果胶完全融解后溶液的颜色为紫色,请使用10 μl 3M 乙酸钠(pH 5.0)将溶液的颜色调为黄色后再进行后续操作.(溶液Gel/PCR 中含有pH 指示剂,当pH≤7.5时溶液的颜色为黄色,此时DNA 才能够有效的与膜结合,当pH 值偏高时溶液的颜色变为紫色,需要进行调整.)2. 吸附将吸附柱DFH 放入2 ml 收集管中. 待溶液温度降至室温后,将所得溶液加入吸附柱DFH中,以14-16,000 ×g 离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放入收集管中.3. 漂洗向吸附柱DFH 中加入400 μl 漂洗液W1,以14-16,000 ×g 离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放入收集管中. 向吸附柱DFH 中加入600 μl 漂洗液Wash (使用前请先检查是否已加入无水乙醇),静置1分钟后以14-16,000 ×g 离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱DFH 放入收集管中. 以14-16,000 ×g 离心3分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除.注意:漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切,PCR 等)实验.4. 洗脱将吸附柱DFH 放入一个干净的离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加20-50 μl 洗脱缓冲液EB ,(如果回收的目的片段>5 kb ,则洗脱缓冲液EB 应置于60ºC 水浴预热),室温放置2分钟. 以14-16,000 ×g 离心2分钟收集DNA 溶液.注意:1. 为了增加DNA 回收率,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,室温放置2分钟,以14-16,000×g 离心2 分钟,将DNA 溶液收集到离心管中. 2. 如果使用ddH 2O 做洗脱液,需保证其pH 值≥8.0,pH 值低于8.0会降低洗脱效率.Instruction Manual Download完整说明书(英文)下载如果您是第一次使用本产品或对本产品的操作步骤不熟悉,请您经由扫描QR code 下载并详阅完整说明书二、从琼脂糖凝胶中回收DNA片段 (回收DNA进行测序实验)1. 凝胶融解 将单一的目的DNA 条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分,凝胶重量不超過300 mg )放入干净的离心管中. 向胶块中加入500 μl 溶液Gel/PCR, 55-60ºC 水浴放置10-15分钟,其间不断温和地上下翻转离心管,以确保胶块充分溶解.注意:凝胶完全融解后应呈现黄色,即可进行后续操作.如果胶完全融解后溶液的颜色为紫色,请使用10 μl 3M 乙酸钠(pH 5.0)将溶液的颜色调为黄色后再进行后续操作.(溶液Gel/PCR 中含有pH 指示剂,当pH≤7.5时溶液的颜色为黄色,此时DNA 才能够有效的与膜结合,当pH 值偏高时溶液的颜色变为紫色,需要进行调整.)2. 吸附将吸附柱DFH 放入2 ml 收集管中. 待溶液温度降至室温后,将所得溶液加入吸附柱DFH 中,以14-16,000 ×g 离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放入收集管中.3. 漂洗向吸附柱DFH 中加入600 μl 漂洗液Wash (使用前请先检查是否已加入无水乙醇),静置1分钟后以14-16,000 ×g 离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱DFH 放入收集管中. 重复向吸附柱DFH 中加入600 μl 漂洗液Wash (使用前请先检查是否已加入无水乙醇),以14-16,000 ×g 离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱DFH 放入收集管中,以14-16,000 ×g 离心3分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除.注意:漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验.4. 洗脱将吸附柱DFH 放入一个干净的离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加20-50 μl 洗脱缓冲液EB ,(如果回收的目的片段>5 kb ,则洗脱缓冲液EB 应置于60ºC 水浴预热),室温放置2分钟. 以14-16,000 ×g 离心2分钟收集DNA 溶液.注意:1. 为了增加DNA 回收率,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,室温放置2分钟,以14-16,000×g 离心2 分钟,将DNA 溶液收集到离心管中. 2. 如果使用ddH 2O 做洗脱液,需保证其pH 值≥8.0,pH 值低于8.0会降低洗脱效率.Instruction Manual Download完整说明书(英文)下载如果您是第一次使用本产品或对本产品的操作步骤不熟悉,请您经由扫描QR code 下载并详阅完整说明书三、从PCR 反应液或酶切反应液中回收DNA 1. 样品前处理取20-100 μl PCR 反应液或酶切反应液加入1.5 ml 离心管中,向其中加入五倍体积溶液Gel/PCR ,充分混匀(无需去除石蜡油或矿物油). 注意: 如PCR 反应体系为50 μl (不包括石蜡油体积),则加入250 μl 溶液Gel/PCR . 樣品混匀后溶液应呈现黄色,即可进行后续操作. 如果溶液的颜色为紫色,请加入10 μl 3M 乙酸钠(pH 5.0)将溶液的颜色调为黄色后再进行后续操作. 2. 吸附将吸附柱DFH 放入2 ml 收集管中. 将上一步所得溶液加入吸附柱DFH 中,以14-16,000 ×g 离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放入收集管中. 注意:吸附柱容积为750 μl ,若样品体积大于750 μl 可分批加入.3. 漂洗向吸附柱DFH 中加入600 μl 漂洗液Wash (使用前请先检查是否已加入无水乙醇),静置1分钟后以14-16,000×g 离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱DFH 放入收集管中. 以14-16,000×g 离心3分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除. 注意:漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切,PCR 等)实验.4. 洗脱将吸附柱DFH 放入一个干净的离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加20-50 μl 洗脱缓冲液EB ,(如果回收的目的片段>5 kb ,则洗脱缓冲液EB 应置于60ºC 水浴预热),室温放置2分钟. 以14-16,000 ×g 离心2分钟收集DNA 溶液.注意:1. 为了增加DNA 回收率,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,室温放置2分钟,以14-16,000×g 离心2 分钟,将DNA 溶液收集到离心管中. 2. 如果使用ddH 2O 做洗脱液,需保证其pH 值≥8.0,pH 值低于8.0会降低洗脱效率.Instruction Manual Download。

胶回收DNA试剂盒的原理和方法一原理

胶回收DNA试剂盒的原理和方法一原理

胶回收DNA试剂盒的原理和方法一原理胶回收DNA试剂盒是一种常用的分子生物学实验工具,用于从琼脂糖凝胶中回收纯化DNA的方法。

其原理主要基于琼脂糖凝胶电泳的分离特性和DNA与硅胶膜亲和吸附的原理。

下面将详细介绍胶回收DNA试剂盒的原理和方法。

1.原理:1.1琼脂糖凝胶电泳分离:首先,将DNA样品与琼脂糖混合并加热使其溶解后,将混合物加入琼脂糖凝胶槽中,随后进行电泳。

由于琼脂糖具有分子筛的特性,DNA分子根据大小被分离在凝胶中的不同位置。

1.2硅胶膜吸附:电泳结束后,将琼脂糖凝胶取出,然后将硅胶膜放置在凝胶表面,使其与DNA分子接触。

由于硅胶膜具有强烈的亲和吸附性,它能够有效地吸附DNA分子。

1.3洗脱纯化:在硅胶膜上吸附的DNA分子可以通过洗脱的方式从硅胶膜上释放出来。

一般情况下,通过使用适当的缓冲液可以将DNA洗脱出来,得到纯化的DNA样品。

2.方法:2.1样品制备:将待分离和纯化的DNA样品进行适当的制备处理,如酶切产生的片段、PCR扩增产生的产物等。

根据需要,可以使用酶切缓冲液、PCR停止液等添加剂来优化样品的制备。

2.2琼脂糖电泳:将样品加入琼脂糖凝胶槽中,通过电泳操作进行DNA分离。

根据需要,使用适当的电泳缓冲液和电泳条件来获得所需的分离效果。

2.3硅胶膜吸附:电泳结束后,取出琼脂糖凝胶,将硅胶膜放置在凝胶表面,使其与DNA分子接触。

根据实验要求,可以根据需要对硅胶膜进行预处理,如加热、孵育等。

2.4洗脱纯化:通过使用适当的洗脱缓冲液,将硅胶膜上吸附的DNA 洗脱出来。

通常,洗脱缓冲液中包含盐和其他成分,以提高DNA的纯度和回收率。

2.5最终保存:将洗脱的DNA样品进行适当的保存和处理。

根据实验需求,可以进行浓缩、冻干或直接用于后续实验。

总结:胶回收DNA试剂盒通过利用琼脂糖凝胶电泳分离DNA,并利用硅胶膜的亲和吸附性,实现了从琼脂糖凝胶中回收纯化DNA的目的。

这种方法简便易行,能够在短时间内获得高质量的DNA样品,广泛应用于分子生物学研究和实验室应用中。

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DNA Gel Extraction Spin Protocol
The DNA Gel Extraction Kit employs optimized reagents in combination with a convenient Miniprep column to purify DNA fragments from either TAE or TBE agarose gels (regular and low-melt), and impurities including proteins, other organic compounds, salts, et al. are discarded in the process. DNA fragments in a size range of 70 bp to 10 kb can be efficiently recovered. Depending upon the length of the DNA fragments, the recovery rate is approximately 60-85%. DNA fragments purified by this method are full-length with high biological activity. These fragments are suitable for all routine molecular biology applications, such as ligation, PCR, sequencing, etc.
1.Excise the agarose gel slice containing the DNA fragment of interest with a clean,
sharp scalpel under ultraviolet illumination. Transfer the gel slice to an EP tube and weigh. In this application, the weight of gel is regarded as equivalent to the volume. For example, 100 mg of gel is equivalent to a 100 μl volume.
2.Add a 3× sample volume of Gel solubilization buffer (溶胶液). Heat at 50-55°C
for 10 min until the gel is completely dissolved, Intermittent vortexing will accelerate gel solubilization.
Note: If the solution becomes red (yellow for normal), add 10-30ul NaAc (3M, pH5.2) to adjust the color to yellow.
3.Transfer the solubilized agarose into a Miniprep column. Centrifuge at 12,000xg
for 1 minute. Discard the filtrate.
4.Add 700 μl washing buffer. Centrifuge at 12,000xg for 1 min. Discard the filtrate.
Note: Make sure that 100% ethanol has been added into washing buffer concentrate. Make a notation on the bottle label for future reference.
5.Add 500 μl washing buffer. Centrifuge at 12,000xg for 1 min. Discard the filtrate.
6.Place the Miniprep column back into the 2 ml microfuge tube. Centrifuge at
12,000xg for 2 minute.
7.Transfer the Miniprep column into a clean 1.5 ml microfuge tube, evaporate the
ethanol for several minutes at room temperature.
8.To elute the DNA, add 30 μl of Eluent(洗脱缓存液) to the center of the
membrane. Let it stand for 3 minute at room temperature. Centrifuge at 12,000xg for 2 minute.
Note: Pre-warming the Eluent at 65°C will generally improve elution efficiency.
Note: Deionized water can also be used to elute the DNA fragments.
9. Store the DNA at -20°C。

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