常用的消毒、灭菌方法
消毒与灭菌常用方法及设备
消毒与灭菌常用方法及设备（一）干热灭菌【原理】高温对细菌有明显的致死作用，主要机理是凝固菌体蛋白质，也可能与细菌DNA单螺旋断裂、细菌膜功能受损及菌体内电解质浓缩有关。
干烤箱为常用的干热灭菌器，其杀菌作用是通过脱水干燥和大分子变性完成的。
【构造】干烤箱是中间夹着石棉的双层金属制成的方形或长方形箱，箱底装有热源，箱内有数层金属架，并附有温度计和自动温度调节器等装置。
把待灭菌的物件均匀地放入恒温干燥箱，加热至160℃～170℃维持2小时即可达灭菌目的。
【使用方法及注意事项】1.将包扎好的待灭物品（培养皿、吸管器等）放于箱内，注意不要摆得太挤，以免妨碍气流流通。
2.关门，插上电源插头（常为220伏），拨动开关，旋动恒温调节器，至红灯亮。
3.待温度上升160℃～170℃时，借恒温调节器的自动控制，保持此温度2小时。
4.灭菌后停止加热，待温度下降至40℃以下方可开门取物，在这之前切勿自行打开箱门，否则其内物品(如玻璃器皿等)会因温度骤然下降而爆裂。
【应用】干热灭菌主要用于要求干燥的、耐高温的物品灭菌，如玻璃器材、瓷器、凡士林、液体石蜡、药粉等的灭菌。
一般不耐高温的、含有水份的物质，不能用这种方法灭菌。
（二）湿热灭菌【原理】高温对细菌有明显的致死作用，主要机理是凝固菌体蛋白质，也可能与细菌DNA单螺旋断裂、细菌膜功能受损及菌体内电解质浓缩有关。
湿热灭菌所需温度较低，时间较短(表3-2)。
特别是高压蒸气灭菌，因增加压力而提高温度，灭菌效果最佳。
其主要优点是：①温度较高，灭菌所需时间较短；②蒸气穿透力强；③蒸气冷凝时释放汽化热，能迅速提高物品的温度；④物品不过分潮湿。
表3-2 热力消毒灭菌法比较方法温度(℃) 时间(min)灭菌器适用物品焚烧＞500 瞬时废弃物品、动物尸体灭菌干烤160～170 120 干热灭菌器（干烤箱）玻璃器材、瓷器等灭菌巴氏消毒法61.1～62.871.73015-30s牛奶、酒类等消毒煮沸消毒法100 5 食具、刀剪、注射器等消毒流通蒸气消100 15～30 Arnold流通蒸气灭食具等消毒毒法菌器间歇灭菌法100 30 流通蒸气灭菌器(重复3次)不耐高温的含糖、牛奶等培养基高压蒸气灭菌法121 15～30高压蒸气灭菌器耐高温、高压及不怕潮湿的物品高压蒸气灭菌器是目前应用最广泛、灭菌效果最好的灭菌器具，其种类有手提式、直立式、横卧式等。
医院消毒和灭菌常用方法
医院消毒和灭菌常用方法一、压力蒸汽灭菌适用范围：用于耐高温、高湿的医用器械和物品的灭菌。
不能用于凡土林等油类和粉剂的灭菌。
二、干热灭菌适用范围：用于耐高温的诊疗用品如油脂、粉末和金属、玻璃等制品的消毒和灭菌。
灭菌方法1焚烧：适用于对病人尸体、废弃衣物、纸张、医疗垃圾等的处理，可直接点燃或在焚烧炉内焚烧。
2 烧灼：用于耐高温物品和小件金属器件的灭菌。
3 干烤：在特定的于烤箱内进行灭菌。
三、紫外线消毒适用范围：用于室内空气、物体表面和水及其它液体的消毒。
四、医用微波灭菌微波可以杀灭各种微生物，包括细菌繁殖体、真菌、病毒和细菌芽胞、真菌抱子等。
各种物质对微波的吸收不同，消毒效果也不同。
一般来说，吸收微波越多的物品，消毒效果越好，例如水、肉类和含水份高的物品，均是强吸收介质。
很少吸收微波的物质，称为微波的良介质，例如：玻璃、石英、陶器、凡上林、聚四氟乙烯等塑料制品。
而金属制品不吸收微波，不易达到消毒。
五、甲醛气体消毒剂甲醛是一种灭菌剂，对所有的微生物都有杀灭作用，包括细茵繁殖体、芽胞。
真菌和病毒。
甲醛气体灭菌效果可靠，使用方便，对消毒、灭菌物品无损害。
适用范围：可用于对湿、热敏感、易腐蚀的医疗用品的灭菌。
六、环氧乙烷气体灭菌环氧已烷在低温下为无色液体，常压下为无色气体，易燃易爆。
环氧乙烷气体杀菌力强、杀菌谱广，可杀灭各种微生物，属灭菌剂。
适用范围：环氧乙烷不损害消毒的物品且穿透力较强，故大多数不宜用一般方法消毒的物品均可用环氧乙烷消毒和灭菌。
例如，电子仪器、光学仪器、医疗器械、书籍、文件、皮毛、棉、化纤、塑料制品、木制品、陶瓷及金属制品、橡胶制品、内窥镜、透析器和一次性使用的诊疗用品等。
七、臭氧消毒臭氧在常温下为爆炸性气体，是一种强氧化剂。
臭氧稳定性极差，在常温下可自行分解为氧。
所以臭氧不能瓶装贮备。
只能现场生产，立即使用适用范围：臭氧是一种广谱杀菌剂，可杀灭细菌繁殖体和芽胞、病毒、真菌等，并可破坏肉毒杆菌毒素C在医院消毒方面，臭氧的用途主要有下列几种。
微生物检测中常用的灭菌和消毒方法
微生物检测中常用的灭菌和消毒方法消毒和灭菌两个词在实际使用中常被混用，其实它们的含义是有所不同的。
消毒是指应用消毒剂等方法杀灭物体表面和内部的病原菌营养体的方法，而灭菌是指用物理和化学方法杀死物体表面和内部的所有微生物，使之呈无菌状态。
物理方法一、温度利用温度进行灭菌、消毒或防腐，是最常用而又方便有效的方法。
高温可使微生物细胞内的蛋白质和酶类发生变性而失活，从而起灭菌作用，低温通常起抑菌作用。
1.干热灭菌法a.灼烧灭菌法：利用火焰直接把微生物烧死。
此法彻底可靠，灭菌迅速，但易焚毁物品，所以使用范围有限，只适合于接种针、环、试管口及不能用的污染物品或实验动物的尸体等的灭菌。
b.干热空气灭菌法：这是实验室中常用的一种方法，即把待灭菌的物品均匀地放入烘箱中，升温至160℃，恒温1小时即可。
此法适用于玻璃皿、金属用具等的灭菌。
2.湿热灭菌法在同样的温度下，湿热灭菌的效果比干热灭菌好，这是因为一方面细胞内蛋白质含水量高，容易变性。
另一方面高温水蒸汽对蛋白质有高度的穿透力，从而加速蛋白质变性而迅速死亡。
a.巴氏消毒法：有些食物会因高温破坏营养成分或影响质量，如牛奶、酱油、啤酒等，所以只能用较低的温度来杀死其中的病原微生物，这样既保持食物的营养和风味，又进行了消毒，保证了食品卫生。
该法一般在62℃，30分钟即可达到消毒目的。
此法为法国微生物学家巴斯德首创，故名为巴氏消毒法。
b.煮沸消毒法：直接将要消毒的物品放入清水中，煮沸15分钟，即可杀死细菌的全部营养和部分芽孢。
若在清水中加入1%碳酸钠或2%的石炭酸，则效果更好。
此法适用于注射器、毛巾及解剖用具的消毒。
c.间歇灭菌法：上述两种方法在常压下，只能起到消毒作用，而很难做到完全无菌。
若采用间歇灭菌的方法，就能杀灭物品中所有的微生物。
具体做法是：将待灭菌的物品加热至100℃，15~30分钟，杀死其中的营养体。
然后冷却，放入37℃恒温箱中过夜，让残留的芽孢萌发成营养体。
5种常用的物理消毒灭菌法
5种常用的物理消毒灭菌法
物理消毒灭菌是指使用物理特征（温度、湿度、光照、压力等）
来杀灭病菌，净化环境的方法。
物理消毒手段有很多种，下面介绍五
种常用的物理消毒灭菌法。
1、热消毒灭菌。
热消毒是把适当的温度加以控制，在一定的时
间内杀死病菌的方法。
生活中有很多热消毒方法，如烤、烧、熬、卤、煮等。
热消毒灭菌对对抗病菌效果很好，但温度不能太高，以免损害
物质本身。
2、光线灭菌法。
在室内我们常用的是紫外线灭菌。
紫外线是一
种高能物理波，可以穿透物体表层细胞膜，分解和氧化细菌，从而达
到灭菌的目的。
3、压力消毒灭菌。
压力消毒是把物品放在密闭的容器中，加压
或者是因压缩到较高的压力状态，来得到消毒的作用，从而得到灭菌
的效果。
4、干消毒灭菌。
指的是将物品放在50～60摄氏度、湿度室内，
放置一段时间内杀菌的方法。
干消毒灭菌比较方便，可以消毒木器、
布艺等，广泛用于家具、家电杀菌消毒使用。
5、高压水灭菌法。
是把高压的纯净水分散在物体表面消毒的一
种方法。
高压水灭菌法有温效应，高压水灭菌消毒有杀菌作用，同时
也可以从外面洗去各种污染物，是当前使用最多的一种消毒灭菌方法
之一。
以上就是五种常用的物理消毒灭菌法，各有其特点，又能有效灭菌，因此得到广泛应用。
作为一种比较无害的灭菌方式，物理消毒灭
菌方法被大量使用，极大地减少了有害物质及有毒物质的污染，提高
了社会生活质量。
常见的消毒和灭菌方法
化学药物消毒法
用体积分数为
70%～75%的乙
醇、碘酒涂抹， 来苏水喷洒等
用于皮肤、伤口、动植物组织 表面消毒、空气、手术器械、 塑料或玻璃器皿等
营养体繁 殖
联系
①都借助 理化性质， 营造微生 物难以生 存的不良 环境 ②其作用 实质都是 通过使蛋 白质变性 来抑制微 生物生命 活动或杀 死微生物
常见的消毒和灭Biblioteka 方法内 容种类主要方法
应用范围
区别
灼烧灭菌法
酒精灯火焰 灼烧
微生物接种工具如接种环、接种 针或其他金属用具等，接种过程 中试管口或三角瓶口等
强烈的理化 因素，杀死
生物体内外
灭 菌
干热灭菌法 高压蒸汽灭菌法
干热灭菌 160～170℃加
热1～2h
121℃维持
玻璃器皿（如滴管、培养皿等）、 金属用具等凡不适合用其他方法
包括芽孢在
灭菌而又能耐高温的物品
内的所有微
生物
培养基及多种器材、物品
15～30min
巴氏消毒法 煮沸消毒法 消 毒 紫外线消毒法
70～80℃处理 15～30min
100℃沸水浴
5～6min
30W紫外灯照 射30min
牛奶、啤酒、果酒和酱油等不宜 进行高温灭菌的液体
日常食品、罐装食品
接种室空气
温和的物 理、化学 方法，杀 死表面微 生物营养 体或抑制
消毒灭菌方法
食品包装消毒
食品包装材料需要经过严格的消毒程序，以杀灭 可能存在的细菌和病毒，保证食品安全。
食品储存环境消毒
食品储存环境需要定期进行消毒，以减少病菌的 滋生和传播，保证食品安全。
环境领域消毒灭菌应用
公共场所消毒
公共场所的地面、墙壁、天花板、空调系统等都需要定期进行消毒，以减少病菌 的传播，预防疾病感染。
超声波消毒灭菌法
超声波清洗机
利用超声波清洗机进行清洗和消毒，适用于医疗器械、手术器械等。
超声波雾化器
利用超声波雾化器将消毒液雾化后对空气进行消毒，具有高效、快速的特点 ，适用于手术室、ICU等。
02
化学消毒灭菌法
气体消毒灭菌法
环氧乙烷气体消毒法
使用环氧乙烷气体对物品进行消毒。
甲醛气体消毒法
使用甲醛气体对物品进行消毒。
过氧化氢气体消毒法
使用过氧化氢气体对物品进行消毒。
液体消毒灭菌法
含氯消毒剂
使用含氯消毒剂对物品进行消 毒。
过氧化物类消毒剂
使用过氧化物类消毒剂对物品进 行消毒。
酒精类消毒剂
使用酒精类消毒剂对物品进行消毒 。
固体消毒灭菌法
01
02
03
干热法
使用干热法对物品进行消 毒。
压力蒸汽灭菌法
使用压力蒸汽对物品进行 灭菌。
低温蒸汽甲醛熏蒸消毒法
01
02
适用范围
优点
常用于医院内医疗器械、器具及物品 的消毒灭菌。
具有穿透性强、消毒灭菌时间短、效 率高、环保等优点。
03
缺点
使用时需严格控制甲醛的用量和使用 时间，以免对人体造成伤害。同时， 该方法不适用于对甲醛过敏的人群。
常用消毒灭菌法
消毒灭菌常规计划生育技术服务机构的清洁、消毒、灭菌是预防与控制医源性感染的重要措施之一。
常用的消毒灭菌方法有两大类：即物理消毒灭菌法和化学消毒灭菌法。
物理消毒灭菌法是利用物理因素，如热力、辐射、电离辐射、过滤等将微生物消除或杀灭的方法。
化学消毒灭菌法是采用各种化学物品来消除或杀灭微生物的方法，用于杀灭传播媒介上的微生物使其达到消毒或灭菌要求的化学制剂称为消毒剂。
下面将介绍几种常用的消毒灭菌方法。
一、压力蒸汽灭菌压力蒸汽灭菌是热力消毒灭菌中效果最好的一种方法，在临床上广泛应用，常用于耐高温、耐高压、耐潮湿物品的灭菌，如金属、玻璃、橡胶、搪瓷、敷料等的灭菌，不能用于凡士林等油类和滑石粉等粉剂的灭菌。
我们现阶段主要使用的是手提式压力蒸气灭菌器。
(一)灭菌原理微生物受到热力作用时，其蛋白质分子运动加速，互相撞击，致连接肽链的键断裂，使其分子由有规律的紧密结构，变为无秩序的散漫结构，大量的疏水基暴露于分子表面，并互相结合成为较大的聚合体而凝固沉淀即通过不可逆地破坏酶和结构蛋白，从而达到杀灭微生物的目的。
（二）高压锅的操作（现场操作）冷空气排除→灭菌→排汽→干燥→温度达到121℃，维持20-30分钟，即可达到灭菌目的。
（三）注意事项1、清洗干燥：器械或物品灭菌前必须清洗干净并擦干或晾干；2、物品包装合适，装载重量适当；3、灭菌包放置合理：各包之间留有空隙，布类物品放于金属、搪瓷类物品之上，盛装物品的容器如有孔应将容器打开，利于蒸气进入，消毒完毕，关闭容器孔；4、尽量排除灭菌器内的冷空气；5、控制加热速度，随时观察压力及温度；6、灭菌后处理：灭菌物品待干燥后才能取出，分类放置并做醒目标志；检查灭菌包装，若灭菌不彻底或有可疑污染如破损、湿包、有明显水渍等则不能作无菌包使用；7、注意安全操作：操作人员要经过专门训练，合格后才能上岗，严格遵守操作规程，定期对灭菌设备进行检查、维修。
二、紫外线消毒紫外线可杀灭多种微生物，包括杆菌、病毒、真菌、细菌繁殖体、芽胞等。
常用灭菌消毒方法及适用范围
常用灭菌消毒方法及适用范围
高压蒸汽灭菌，水溶液、药剂、玻璃、培养基、无菌衣、胶塞、医院实验室可重复使用的器械以及其它遇高温和潮湿不发生变化或损坏的物品；传染性医疗废物灭菌。
干热灭菌，不耐湿热或不能被湿热穿透的物品(如粉剂，油剂，锋利器械，硅胶假体，电子仪器等)，以及除热原。
环氧乙烷灭菌，适用于大多数医疗材料和聚合物（如塑料、橡胶等），带管腔型器械，适用于纤维素如纸类等，温度敏感材料。
不能对液体、油剂灭菌。
过氧化氢等离子体灭菌，可用于不耐热、不耐湿且抗氧化的物品和多数医疗器械；不能对长管腔表面或带隐藏表面的物品灭菌，不适用于纤维素（如纸纤维、醋酸纤维素）、棉麻、天然橡胶和液体。
臭氧灭菌，水溶液、药剂、玻璃、培养基、无菌衣、胶塞、医院实验室可重复使用的器械以及其它遇高温和潮湿不发生变化或损坏的物品；传染性医疗废物灭菌。
辐照灭菌，低温灭菌，可以对医疗器械、药品、化妆品、香料、生物制品、食品和消费品进行消毒。
一般进行一次性灭菌，不能对同一物品重复多次辐照。
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知识点：常用的消毒、灭菌方法
情境：灭菌技术
任务：常用的消毒、灭菌方法
课程：食品微生物技术
常用的消毒、灭菌方法
消毒、灭菌方法：可分为物理方法和化学方法两大类，常用灭菌、消毒、防腐等术语表示物理或化学方法对微生物的杀灭程度。
灭菌、消毒、防腐、化疗的比较
比较项目灭菌消毒防腐化疗处理因素强理化因素理化因素理化因素化学治疗剂
处理对象任何物体内外生物体表、酒、乳
等有机质物体内外寄主体内微生物类型一切微生物有关病原体一切微生物有关病原体对微生物的作用彻底杀灭杀死或抑制抑制或杀死抑制或杀死
实例高压蒸汽灭菌，辐
射灭菌，化学杀菌
剂、火焰灼烧灭菌
70%酒精消毒，巴
氏消毒
冷藏，干燥，糖渍
，盐腌，缺氧，化
学防腐剂
抗生素，磺胺药物
，生物药物素
微生物消毒、灭菌方法主要分为两大类：•干热灭菌
•湿热灭菌
常用的灭菌方法
一、干热灭菌技术
灭菌: 凡是能够杀死或消除材料或物体上全部微生物的方法。
1.干热灭菌
干热灭菌：150℃~170 ℃下处理2~3小时。
适用于玻璃器皿、金属用具等耐热物品的灭菌。
优点：可保持物品的干燥。
2.火焰灭菌（灼烧灭菌）
常用于金属接种工具、污染物品及实验材料等废弃物的处理。
二、湿热灭菌技术
1.定义及特点
湿热灭菌是利用热蒸汽灭菌。
在相同温度下，湿热灭菌的效力比干热灭菌好。
湿热灭菌效力好的原因：
①热蒸汽对细胞成分的破坏作用更强；
②热蒸汽比热空气穿透力强；
③蒸汽潜热大，当气体转变为液体时可放出大量热量，故可迅速提高灭菌物体的温度。
2.湿热灭菌的种类
种类有高压蒸汽灭菌、流通蒸气灭菌、间歇灭菌、巴氏消毒等。
（1）高压蒸汽灭菌
应用最广泛的灭菌方法。
将待灭菌的微生物放置在有少量水的加压蒸汽灭菌锅内。
将锅内的水加热煮沸，并将其中的冷空气彻底驱除，将锅封闭。
再持续加热就会使锅内的蒸汽压逐渐上升，从而使温度达100 ℃以上。
高压灭菌的优点：高压灭菌避免了热处理而出现的影响食品品质的各种弊端，保持了食品的原有风味、色泽和营养价值。
由于是液体介质的瞬间压缩过程，灭菌均匀，操作安全，耗能低，减少环境污染。
为达到良好的灭菌效果，一般要求温度应达到121 ℃（压力为0.1~0.15MPa ）, 时间维持20～30min。
适用于一切微生物学实验，医疗机构或发酵工厂中对培养基等多种器材、物料的灭菌。
高压灭菌不是利用高压来杀死微生物，而是利用提高压力使水的沸点升高，以提高水蒸汽的温度，更加有效地杀灭微生物。
（2）流通蒸气灭菌
是指在常压条件下，采用100 ℃流通蒸气加热杀灭微生物的方法，灭菌时间通常为30~60min。
该法适用于消毒以及不耐高热制剂的灭菌，但不能保证杀灭所有芽孢。
（3）间歇灭菌
利用反复多次的流通蒸汽加热或煮沸加热，杀灭所有微生物，包括芽孢。
方法同流通蒸汽灭菌法或煮沸灭菌法，但一般要重复3次以上，每次间歇是将要灭菌的物体放到37℃培养箱过夜，目的是使芽胞发育成繁殖体。
（4）巴氏消毒法
加热61.1~62.8℃时间30min，或者72℃时间15 min，可杀死乳制品的链球菌、沙门菌、布鲁菌等病原菌，但仍保持被灭菌物中不耐热成分不被破坏。
常用于乳制品、饮料、酱油等液体食物的消毒。
（5）煮沸法
采用100℃煮沸数分钟的方法杀死微生物，一般用于日常饮用水消毒等。
微生物的繁殖体一般需在100℃煮沸5min以上，杀死芽胞则需煮沸2h以上，常用于餐具、刀剪、医用玻璃注射器的消毒。