RhoA基因在肝细胞肝癌中的表达及其意义
裙带菜多糖抑制肝癌细胞增殖和迁移的机制
裙带菜多糖抑制肝癌细胞增殖和迁移的机制刘伟萍;陈建芬;安金琪;罗艺;刘凤斌【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2024(40)4【摘要】目的探讨裙带菜多糖(sulfated polysaccharide from Undaria pinnatifida,SPUP)对肝癌细胞增殖、迁移的影响及潜在机制。
方法MTT和克隆形成实验检测SPUP对肝癌细胞HepG2、SMMC-7721增殖的影响;Hoechst 33258染色和Western blot法检测SPUP干预后对HepG2、SMMC-7721细胞凋亡的影响;Transwell和划痕法检测HepG2、SMMC-7721细胞的迁移和侵袭;免疫荧光和Western blot法检测SPUP对肝癌细胞自噬、上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)和基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)、MMP-9蛋白的影响。
结果SPUP对HepG2、SMMC-7721细胞有短期和长期的抑制增殖作用,对正常肝细胞L-02无明显抑制作用,SPUP可促进两种肝癌细胞凋亡和自噬水平。
同时,SPUP可以抑制肝癌细胞的迁移侵袭能力,降低EMT和MMPs水平。
结论SPUP通过促进凋亡和自噬、抑制EMT和MMPs,进而抑制肝癌细胞的增殖和迁移。
【总页数】9页(P670-678)【作者】刘伟萍;陈建芬;安金琪;罗艺;刘凤斌【作者单位】广州中医药大学第一附属医院脾胃病科;广州中医药大学博士后科研流动站;广州中医药大学第一临床医学院;广东燕岭医院中医骨伤科;粤北人民医院中医科;广州中医药大学第一附属医院白云分院内一科【正文语种】中文【中图分类】R284.1;R322.47;R329.28;R329.25;R735.7;R977.3【相关文献】1.从细胞自噬角度探讨紫草多糖抑制H22肝癌实体瘤细胞增殖的作用机制2.长春新碱调控PI3 K/Akt信号通路抑制肝癌细胞Hep3 B增殖迁移侵袭及促进细胞凋亡的机制研究3.阿法替尼调控Egr-1/TLR4/mTOR信号通路抑制肝癌细胞Hep3B 增殖迁移侵袭及促进细胞凋亡的机制4.纳布啡通过调控miR-4301/BRD4抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究5.蟾毒灵联合索拉非尼通过R hoA/ROCK/HIF1α通路抑制肝癌HepG2细胞增殖、迁移及侵袭的机制因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
RhoA信号通路在肿瘤细胞浸润与转移中的作用研究
RhoA信号通路在肿瘤细胞浸润与转移中的作用研究RhoA 信号通路在肿瘤细胞浸润与转移中的作用研究癌症一直是医学研究的热门领域，如何抑制肿瘤细胞的浸润与转移，减少癌症的死亡率是临床治疗的重要问题。
近年来，随着对 RhoA 信号通路的深入研究，越来越多的研究表明 RhoA 信号通路在肿瘤细胞浸润与转移中的作用至关重要。
RhoA 信号通路的基本原理RhoA 是一种小 GTP 酶，它是细胞骨架、真核细胞形态和细胞内信号转导的关键分子。
RhoA 信号通路可以通过其活化下游的一系列分子，如 ROCK、mDia、PKN 和 MLCK 等，来引导细胞形态变化、黏附、迁移、增殖和凋亡。
其中 ROCK 激酶在 RhoA 信号通路中的作用是最为重要的，它可以通过调节细胞骨架、黏附和收缩等方式来影响细胞的运动和迁移。
RhoA 信号通路在肿瘤细胞浸润与转移中的作用肿瘤细胞浸润与转移是癌症病理生理学的重要过程。
肿瘤细胞的浸润与转移是癌症的致命因素，根据统计数据，肿瘤细胞的浸润与转移是导致癌症死亡的主要原因之一。
现在已有研究表明，RhoA 信号通路在肿瘤细胞浸润与转移中发挥着重要作用。
RhoA 信号通路通过 ROCK 激酶的介导，可以影响肿瘤细胞的形态变化和黏附能力，进而影响细胞的运动和迁移。
其次，RhoA 信号通路通过调节肿瘤细胞表面的分子与其他细胞、基质或临近的细胞相互作用，影响肿瘤细胞的浸润能力。
一些研究还发现 RhoA 信号通路能够抑制肿瘤细胞的凋亡，增加细胞的存活率，并促进肿瘤细胞的增殖。
抑制 RhoA 信号通路可降低肿瘤细胞浸润与转移由于 RhoA 信号通路在肿瘤细胞浸润与转移中的作用，研究人员开始探索抑制RhoA 信号通路的策略以达到减少肿瘤细胞浸润与转移的效果。
一些研究已经开始研究 RhoA 信号通路的抑制剂，研究发现对 RhoA 信号通路进行抑制的干预措施，可以显著地降低肿瘤细胞浸润与转移的效果，从而达到抑制肿瘤细胞生长和转移的目的。
人脑胶质瘤中RhoA的表达及其临床意义
between R hoA s ex p ress i on a nd p a t hol og i ca lg ra d e， f ut herm ore， whose cli ni ca ls i g ni fi ca nce wou ld be d i s cu ss ed � for d i a g nosi ng � � � the � � � g li om a ， j u dg i ng t he m a li g na nt g ra d es a nd the p a t i ent s p rog nos i s .M The
ex p res si on of R hoA p rotei na nd R hoA m R NA were d ete cted i n 53ca s es ofhu m a ng li om a s a m pl es a nd 9 ca s es of norm a l bra i nt i s s ues by SABC i m m u nohi st ochem i ca ls ta i ni nga nd revers e tra ns cri pt i on p ol ym era se cha i n rea ct i on( R TP CR ) ， res p ect i vel y.R p osi ti ve cel ls w a s 100% ( 1 ) The i m m unohi s tochem i st ry showed t ha tt he ra t i o of R hoA
达程度与胶质瘤病理分级呈正相关�检测 R hoA 的 m R NA 和( 或) 蛋白的表达， 可以作为胶质瘤诊断� 判断预后的一个可靠指标�( 2 ) R hoA 表达水平与肿瘤恶性程度 呈正相关， 提示 我们可以将 其作为星 形细胞瘤 级新的有效的诊断标记物 ， 同时作为 常规组织病 理学的分 级标准 的补充�这 将有助 免疫组织化学; 逆转录聚合酶链反应; R hoA 于描述肿瘤的生物学行为特征， 选择术后进一步的治疗方案� � 关键 词� 神经胶质瘤;
Rho的生物学功能及其在肿瘤发生中的病理学意义_百替生物
Rho的生物学功能及其在肿瘤发生中的病理学意义罗齐平综述（湖南中医药大学中西医结合学院湖南长沙410007）摘要:Rho家族成员及其各自的已知下游效应分子参与调节肿瘤细胞相关基因的表达及细胞增殖活性，调控细胞骨架组装、细胞迁徙运动等细胞生物力学机制，涉及肿瘤细胞的浸润和转移过程。
在多种实体瘤中，如胃癌、乳腺癌、卵巢癌、肝癌、直结肠癌等，都可检测到Rho家族成员Racl、RhoA、Cdc42中的一种或多种蛋白质的表达上调与活性升高。
该类蛋白成分为一种新的肿瘤标志物，可以应用于病变良恶性的判断，并有助于评估肿瘤转移能力及患者预后。
关键词: Rho；肿瘤细胞；肿瘤转移；生物力学机制Rho家族蛋白质是Ras超家族成员中小分子量G蛋白构成之一，是一组分子量为20 KD ~ 30 KD的鸟苷酸结合蛋白，具有GTP酶活性。
1985年，Rho作为Ras同源物(Rashomologue)首先被克隆出来，称Ras相关单体GTP酶[1]，主要有Rho（包括Rho A、B和C）、Rac（Rac 1、2和3）和cdc42（cdc42Hs，G25K）3个亚家族，在细胞信号传导中具有重要的功能。
一般认为，Ras 家族调控细胞分裂和增殖，而在细胞变形、运动和游走调控中，Rho 家族是起开关作用的最重要的分子[2]。
以往有关Rho家族的研究主要集中在白细胞运动游走方面，近年来研究发现，Rho 家族成员在多种肿瘤组织的表达增加[3]，提示其可能成为一种新的肿瘤标志物，可以应用于判断良恶性及判断肿瘤转移能力及估计预后，具有潜在的重要临床价值[4]。
1. Rho的调控因子和效应分子异常活化的RhoA能启动细胞的无限增殖、肿瘤细胞的浸润和转移特征。
最近研究已证实，RhoA在肿瘤发生发展过程中有重要作用，如其参与细胞恶性转化、浸润转移和血管发生[5]等效应有关。
它的这些作用，是通过一系列的调控因子和效应分子来实现的。
1.1 Rho的上游调控因子在细胞内，Rho蛋白家族通过与GTP结合的激活型和与GDP结合的失活型两者之间的转换，执行其分子开关功能。
RNAi沉默RhoC基因对肝癌细胞生长和转移潜力的影响
７ ．８ ０ １％ ， ０５ ±１ ．０ Ｐ＜００ ） Ｃｅｎ １ Ｎ ｖｌｎＲ Ａ ｒ ｐ ａ ｎｔ ｌｌ ｅ ｔ ｎｃｎｏ（ ．５ ．１ ｄ１２ ±０２ ， ．１ ． ｙｌＤ Ａｌ ｅｉ Ｎ ｉ ｏ ｓ ｏ ｂｙｏ ｒｈ ｔ ｌ ４ ±０２ ．５ ．４ Ｐ ｉ ｍＲ ｅ ｇｕｗ ａ ｗ ａ ｏｒ ０ ｎ ａ
１ｎｅＲｌＣ ｅｐｅｓ ｎ Ａ ｓｙｔｅｐｏ ｅａｉｎｐ ｔｎｉｌ ｆ ｅｌ ｂ ｌｔ ｌｎｎ ｓ ａ ｄｄｔｒ ｎ ｅｍＲＮ ｖｌ ｏ ｙｌ Ｄ１ａ ｄ ｅ ｃ ｔ ｘ ｒｓｉ ； ｓａ ｒｌ ｒｔ ｅ ｔ ｌ ｙｐａｅｃｏｉｇｔ ｔ ｎ ｅ ｍｉｅｔ ＿Ａ ｌ ｅｓ ｆ ｃｉ ｎ ｏ ｏ ｈ ｆ ｉ ｏ ｏ ａｏ ｃ ｓ ｅ ｅ ｈ ｅ Ｃ ｎ
载体 ， 沉默肝癌细胞 Ｒ ｏ 因表达 ； ｈＣ基 平板 克隆实验检测 细胞生长潜 力 ， 半定 量 Ｒ － Ｔｔ ￣Ｒ法 检测细胞周期 蛋 白和 ＭＭ ｓ Ｐ 表达水平 。结果 Ｒ Ａ 组克隆形成百分数显著低于对 照组 （０ ３ Ｎｉ ２ ．３±５ ４ ％和 ７ ．８ ０ １ ％， ．２ ０ ５ ±１ ．０ Ｐ＜０ ０ ） Ｒ Ａ 组 细 ．１ ； Ｎ ｉ
胞 Ｃｅ ｎ １ ｙｌＤ 表达显著低 于对照组 （ ．５ ．１ １２ ０ ２ ， ｉ ０４ ±０２ 和 ．５± ．４ Ｐ＜０ ０ ） 而 ｔ １ 因表达 则显著高 于对照组 （ ．７± ．５ ， ７ 基 ２ １０
CIT基因的作用机制及研究进展
CIT基因的作用机制及研究进展郝思达;修有成;刘赞【摘要】Citron rho-interacting serine/threonine kinase (CIT) is aserine/threonine kinase,which is a downstream substrate of Rho protein.CIT and Rho protein binding,completes the intermediate regulation and plays an important role in cytokinesis by acting on multiple protein components.CIT has a close relationship with the nervous system.The recessive genetic variant of CIT is the genetic basis of the microcephaly and newborn death,and severely compromises the later embryonic and postnatal neurogenesis.CIT can promote the formation of HIV virus.CIT is also associated with a variety of tumor diseases,such as liver cancer,Down syndrome and prostate cancer.%CIT是一种丝/苏氨酸激酶,是Rho蛋白的一个下游底物.CIT与Rho蛋白结合,通过作用于多种蛋白组件完成对中间体的调控并在胞质分裂中发挥重要作用.CIT与神经系统有着密切的关系,CIT中隐性遗传致命变种是头小畸形和新生儿死亡的基因基础,并严重损害了胚胎后期和出生后的神经发生.CIT可促进人类免疫缺陷病毒的生成.CIT还与多种肿瘤疾病有关,如肝癌、前列腺癌、唐氏综合征.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2017(023)010【总页数】5页(P1894-1897,1902)【关键词】CIT;中间体;胞质分裂;神经系统【作者】郝思达;修有成;刘赞【作者单位】哈尔滨医科大学附属第一医院泌外三科,哈尔滨 150001;哈尔滨医科大学附属第一医院泌外三科,哈尔滨 150001;哈尔滨医科大学附属第一医院泌外三科,哈尔滨 150001【正文语种】中文【中图分类】R73CIT(citron rho-interacting serine/threonine kinase)是一种丝/苏氨酸激酶。
KCTD10基因表达及其临床意义的研究进展
KCTD10基因表达及其临床意义的研究进展邓先武; 朱晓兰; 邬文敏; 胡柯; 黄民江【期刊名称】《《中外医学研究》》【年(卷),期】2019(017)027【总页数】3页(P186-188)【关键词】KCTD10; 基因表达; 研究进展【作者】邓先武; 朱晓兰; 邬文敏; 胡柯; 黄民江【作者单位】湖南医药学院医学院湖南怀化 418000; 怀化市第一人民医院【正文语种】中文KCTD10 是钾离子通道四聚体蛋白，属于PDIP1 基因家族，能被肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素6(IL-6)所诱导，可能参与了DNA 复制、修复及细胞周期调控过程等生理活动[1]，但目前国内外有关KCTD10 功能研究及其与疾病相关的研究并不多。
因此本文对KCTD10 基因表达及其临床意义进行综述，以期为相关疾病发生、发展及治疗研究提供一定的研究思路。
1 KCTD10基因概述KCTD10 是在2005 年被首先克隆出来的钾离子通道四聚体蛋白，人类基因定位于染色体的12q24.11 区域，全长28.8 kb，有7 个外显子，属于PDIP1 基因家族，其cDNA 全长3 957 bp，开放阅读框为942 bp，一共编码了313 个氨基酸，编码的蛋白质大小约为34.4 kD[2-3]。
KCTD10 基因的氨基酸序列与其他家族成员相似，其与PDIP1 的一致性为65.1%，与TNFAIP1 的一致性为66.7%。
KCTD10 的N 端包含一个BTB/POZ 域和钾通道结构域(相对BTB/POZ 域)。
BTB 结构域在PDIP1 家族蛋白中高度保守，可能介导KCTD10 与其他蛋白的相互作用及细胞骨架调控染色质重塑等过程。
C 端则有增殖细胞核抗原(PCNA)在其糖基结合部位，PCNA 通过其与KCTD10 发生相互作用，其还能与DNA 聚合酶δ 的小亚基P50 相互作用，且在PCNA 的作用下进一步激活DNA 聚合酶δ 的活性，从而发挥其在DNA 复制、修复、周期调控等方面的作用[4-5]。
肝癌组织rhoa表达及与浸润转移的关系
肝癌是严 重危害 人们健康的 主 要恶 性 肿瘤 之一，素 有 “癌中之王”称号，由于其自身的病理特点，早期常无症状，一 旦发现，多已属中晚期，给治疗和预后带来巨大影响。肝癌发 生发展的分子机制尚不十分清楚，人们一直在致力寻找肝癌 恶性程度、侵袭转移的预测和检测指标 。 ［１－２］ 另据研究报道 ＲｈｏＡ蛋白通过细胞运动、周期调控、增殖凋亡、调节黏附分子 和信号转导等途径，在肿瘤发生、浸润和转移过程中扮演着重 要角色［３－５］。田小林等研究表明胃癌中 ＲｈｏＡ可作为上游信 号转导途径参与调控胃癌的浸润转移 。 ［６］ 而目前国内外关
现代消化及介入诊疗 ２０２０年 第 ２５卷 第 １期 ＭｏｄｅｒｎＤｉｇｅｓｔｉｏｎ＆Ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ２０２０牞Ｖｏｌ．２５牞Ｎｏ．１
５ １
·基础研究·
肝癌组织 ＲｈｏＡ表达及与浸润转移的关系
姬宏娟１，王梅２，姬宏利２
【摘要】目的 检测 ＲｈｏＡ在不同侵袭程度的肝癌组织中的表达，探讨其与肝癌浸润转移的关系。方法 选取有完整临床 资料、不同浸润程度及不同病理分期的 ５２例肝癌组织及癌旁正常组织标本，应用荧光定量 ＰＣＲ法（ＱＲＴＰＣＲ）及蛋白免疫印记 法（Ｗｅａｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ）检测 ＲｈｏＡ表达情况。结果 肝癌组织中 ＲｈｏＡｍＲＮＡ及 ＲｈｏＡ蛋白的表达量明显高于癌旁组织，并与肿 瘤病理分期及侵袭程度密切相关，在门静脉受侵犯、有微卫星病灶和 ｐＴＮＭ ｓｔａｇｅ分期较晚的患者中明显增高。结论 ＲｈｏＡ的 表达与肝癌的浸润转移有关，可作为重要的生物学标第 ２５卷 第 １期 ＭｏｄｅｒｎＤｉｇｅｓｔｉｏｎ＆Ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ２０２０牞Ｖｏｌ．２５牞Ｎｏ．１
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RhoA基因在肝细胞肝癌中的表达及其意义*【摘要】目的探讨RhoA基因与肝细胞癌的发生、发展和侵袭、转移的关系。
方法采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）在半定量水平检测42例肝细胞癌及其相对应的癌旁肝组织中RhoA mRNA的表达，同时采用PCR产物单链构象多态性（PCR-SSCP）银染法检测RhoA基因的突变情况。
结果本组42例肝癌组织中RhoA mRNA光密度相对值明显高于癌旁肝组织（P<0.01）；有门静脉癌栓者其癌组织中RhoA mRNA光密度相对值明显高于无癌栓者（P<0.05）。
经PCR-SSCP银染法分析未发现异常泳动条带。
结论 RhoA基因在肝细胞肝癌进展中起重要作用，并可能与肝癌转移相关。
【关键词】肝癌；RhoA；基因表达；RT-PCR【Abstract】 Objective To investigate the expression of RhoA genein hepatocellular carcinoma and to evaluate the relationship between RhoA gene expression and invasion of hepatocellular carcinoma.Methods The mRNA expression of RhoA gene was examined by RT-PCR in 42 cases of hepatocellular carcinoma and adjacent non-cancerous tissue.In addition，the mutation of RhoA gene was examined by PCR-SSCP.Results The opacity density (OD) of RhoA mRNA expression in hepatocellular carcinoma tissues was significantly higher than that in adjacent non-cancerous tissues(P<0.01）.The OD of RhoA mRNA expression in hepatocellular carcinoma with intrahepatic metastasis was significantly higher than that without intrahepatic metastasis (P<0.05）.Mutation was not found in RhoA gene by PCR-SSCP examination.Conclusion The RhoA gene may be related to malignant transformation and development of hepatocellular carcinoma probably by overexpression.【Key words】 hepatocellular carcinoma；RhoA；gene expression；RT-PCR原发性肝癌发生率高，手术切除是目前最主要的治疗方法。
尽管随着影像诊断和外科技术的进步，尤其是肝移植在肝癌中的运用，肝癌的预后已经有所改善，但肝脏的特殊解剖结构和功能决定着肝癌术后复发率高，术后复发已成为影响患者预后的主要问题。
肝癌侵袭转移是主要的影响因素之一，深入研究肝癌侵袭转移机制对于改善肝癌患者的总体预后有重要作用。
Rho蛋白和肿瘤发生有密切的关系，参与肿瘤的浸润和转移过程。
Rho家族属于Ras超家族，是重要的细胞内信号分子，在细胞的许多基础生命活动中起关键的作用［1］。
目前研究证实，Rho蛋白特别是RhoA在肿瘤发生、发展中起重要作用，在结肠癌、乳腺癌、肺癌、头颈癌等均报道有RhoA表达的异常增高［2］。
本研究利用RT-PCR技术及分子定量成像系统分析42例肝细胞肝癌（HCC）病人的肝癌组织及癌旁肝组织中RhoA mRNA的表达，并探讨其临床意义。
1 材料与方法1.1材料1.1.1主要试剂及仪器 RT-PCR试剂盒购自MBI公司；dNTP及DNAmarker购自Promega公司；琼脂糖、TRIzol试剂及DEPC购于Gibco公司。
凝胶成像系统购自美国Genesis公司；UV-3000型紫外分析仪购自上海天能科技有限公司；PE-2400TMPCR仪购自美国Perkin。
1.1.2标本来源 42例患者的原发性肝癌组织及相对应的癌旁肝组织来自第四军医大学附属第一医院2004年8月～2005年3月的新鲜手术标本，离体后30min 内分装保存于液氮罐中，所有病例均附癌旁肝组织作为对照，分别伴有慢性炎症、纤维化和肝硬化，全部标本均经病理科医师切片确诊。
1.2方法1.2.1扩增引物设计以GenBank中人RhoA基因全长序列为模板，按引物设计原则予以设计，采用Primer premier 5.0软件设计，其序列如下（U，D分别表示上游和下游引物）：RhoA U1 5’CTGGTGATTGTTGTTGGTGATGG3’，U25’GATTCGTTGCCTGAGCAATG3’，D 5’GCGATCATAATCTT-CCTGCC3’。
B��actin引物序列：上游引物，5’CGGGAAATC-GTGAT3’；下游引物，5’GAACTTTGGGGG ATGCTCGC3’。
其中U1、U2为RhoA上游引物，分别用于定量RT-PCR和PCR-SSCP，D为下游引物。
RhoA产物分别为183bp和221bp。
1.2.2总RNA提取组织总RNA的抽提取：0.5g组织块，加入Trizol试剂1ml，在电动玻璃匀浆器中，充分匀浆。
将全部匀浆液转入1ml离心管中，加0.25ml氯仿，充分振荡混匀，冰浴15min。
低温 13000r/min离心15min。
小心吸取上层水相至另一1.5ml离心管中，注意不要吸到蛋白层或有机相，加等体积异丙醇，摇匀，室温放置10min，低温13000r/min离心15min，沉淀RNA。
加70%酒精漂洗沉淀，5000r/min，离心10min，小心弃去酒精，空气中干燥10min。
经电泳证实有两条明显的18S及28S条带，用紫外可见分光光度仪检测RNA的纯度及含量。
1.2.3 RT-PCR扩增RhoA mRNA及鉴定 cDNA制备：应用逆转录试剂盒，总RNA 投入量为2μg，使用随机引物。
第一链cDNA合成后终体积10μm，具体方法按说明操作。
RhoA与B��actin反应同管进行，反应终体积为50μl，反应条件为94℃ 30s，57℃ 30s，72℃ 40s，共25个循环。
PCR产物在含0.5g/ml溴化乙锭的1.0%琼脂糖凝胶上电泳，应用凝胶成像系统对条带进行扫描分析。
利用分析软件计算并比较每一对样品中RhoA mRNA与B-actin的光密度的相对比值，从而获得每对样品中肝癌组织及癌旁肝组织RhoA mRNA表达的相对含量。
1.2.4 PCR-SSCP分析 PCR反应试剂基本同前，仍用cDNA模板，改用U2和D引物扩增RhoA基因，反应条件为94℃ 1min，57℃ 2min，72℃ 1min，共扩增30个循环。
扩增产物变性后行聚丙烯酰胺凝胶电泳，观察泳动条带是否异位以判断突变情况。
1.3统计学方法所有数据以均数±标准差（x±s）表示，用SPSS10.0进行分析，组间比较用Student’s t检验，P<0.05表示有统计学意义，P<0.01表示有显著的统计学意义。
2 结果将各样品RT-PCR产物经分子定量成像系统分析，以B��actin条带为内参照，其光密度值设定为1.000，计算RhoA mRNA表达的相对丰度。
肝癌组织中RhoA mRNA光密度相对值为（0.276±0.069）；癌旁肝组织中为（0.137±0.058）；两者差异有非常显著性（P<0.01）。
有门静脉癌栓者共17例，其癌组织中RhoA mRNA光密度相对值为（0.316±0.107），无肝内转移灶者为（0.241±0.097）；两者差异有显著性（P<0.05）。
为探讨RhoA基因突变在肝癌发生发展中可能的作用，我们采用了PCR-SSCP的方法检测RhoA基因中结构改变可能影响RhoA功能的总长为221bp的片段，结果在检测的42例肝癌组织中均未发现异常泳动条带，提示肝癌的发生发展与RhoA基因突变无关。
3 讨论Rho家族属小G蛋白超家族成员，有GDP结合的活性态和GTP结合的非活性态，两种活性形式之间的转换使他们能够发挥一种类似“分子开关”的作用。
活性态的小G蛋白能激活下游的信号传导通路，行使其功能。
与Ras基因突变导致其持续激活相似，Rho基因若发生结构改变，使GTP水解发生障碍，而处于持续GTP结合的激活状态，可致其多种功能增强，称为组成型激活突变体，如RhoA(G14V)、RhA(Q63L)等。
Rho家族蛋白参与调节了细胞的多种生命过程，包括肌动蛋白的细胞骨架重组、细胞黏附、细胞运动、细胞周期进展、细胞分裂以及基因转录等，Rho家族分子功能的多样性与其下游效应分子的多样性有关，以RhoA为例，已经发现的RhoA 的下游效应分子包括ROCK、PKN、Citron、PI-3K等，这些分子介导了RhoA的作用［3］。
越来越多的证据表明，Rho家族蛋白与肿瘤发生发展的各个方面均有联系，包括肿瘤的生长和增殖、侵袭和转移、细胞周期进展、细胞凋亡、肿瘤新生血管的形成等。
近年来研究发现，Rho家族成员在多种肿瘤组织中表达增加并和肿瘤恶性程度相关，即在恶性程度高的肿瘤表达更多，提示其在肿瘤发生和转移中具有重要作用。
尽管Rho家族与肿瘤相关的基础研究已有大量报道，但Rho家族与临床肿瘤发生发展关系的研究仍然较少。
已有的研究发现，RhoA和RhoB在乳腺癌中的表达增高，且与乳腺癌的恶性表型相关；RhoC主要与有侵袭能力的炎性乳癌有关；Rac1、Rac3和Cdc42在乳腺癌中也有高表达，但与乳腺癌的分期和增殖无关。
另外还发现，RhoA在睾丸精原细胞瘤和上尿道肿瘤中的转录水平升高，RhoA和Rac1b在大肠癌中的表达升高，Rac2在头颈部肿瘤中和RhoC在胰腺癌中的表达也是升高的［4］。
这些研究提示，尽管Rho家族分子的同源性较高，但它们在不同的肿瘤中可能起不同的作用。
Fritz在对乳腺肿瘤的研究中发现，乳腺癌组织较正常组织高表达RhoA，RhoB，Racl，Cdc42蛋白，且RhoA，RhoB，RhoC蛋白表达水平与组织学分级及增殖指数呈明显正相关；而Rho mRNA的表达与正常组织无显著差异［5］。