依达拉奉注射液细菌内毒素检查的质量标准研究
依达拉奉注射液的质量标准
依达拉奉注射液的质量标准
依达拉奉注射液是一种用于治疗风湿性关节炎和类风湿性关节炎的药物。
为了保证患者的用药安全和疗效，制定一份严格的质量标准至关重要。
下面是一份关于依达拉奉注射液的质量标准的示范，包括药物的外观、成分、纯度、稳定性以及生产工艺等方面的要求。
1. 外观要求
依达拉奉注射液应该是一种清澈、无色透明的液体，不得有悬浮物或沉淀物。
瓶身应干净完整，无破损或渗漏。
2. 成分及含量测定
（1）依达拉奉注射液的主要成分为依达拉奉。
（2）依达拉奉的含量应符合国家药典中规定的标准要求。
3. 纯度要求
（1）依达拉奉注射液中有关杂质的含量应符合国家药典中规定的限量要求。
（2）微生物限度应符合国家药典中规定的要求。
4. 稳定性
依达拉奉注射液在常温下应该能保持稳定，不分解、不氧化或不发生其他化学变化。
5. 生产工艺要求
（1）生产车间应符合GMP标准。
（2）所有原辅料应当有详细的质量控制记录。
（3）生产过程中的所有关键步骤均应定期进行验证。
（4）设备应当定期维护、清洁，并进行有效的验证。
6. 包装要求
依达拉奉注射液的包装材料应符合药物包装的相关要求，确保能有效地保护药品的质量和稳定性。
总结
依达拉奉注射液的质量标准应当覆盖药品的外观、成分、纯度、稳定性和生产工艺等方面，并严格按照国家药典的要求进行检测和验证。
生产企业在生产过程中应该始终遵守GMP等相关质量标准，并建立健全的质量管理体系。
这样才能确保依达拉奉注射液的质量稳定可靠，从而在临床应用中发挥出预期的疗效。
64 种注射用药品细菌内毒素检查法的方法学研究
内毒素限值 ( EU ∃ mg 1 ) 0 15 50 12 2 5 15 0 30 0 5
承担工作 样品厂家数量 药检所 黑龙江所 陕西所 湖北所 武汉所 山东所 大连所 陕西所 宁夏所 广州所 山东所 新疆所 安徽所 1 ( 3) 3 ( 3) 4 ( 10) 2 ( 8) 3 ( 6) 1 ( 6) ( 样品批次 ) 1 ( 6)
813 2 个药检所的实验结果都表明, 样品可以通过 稀释等方法, 排除对内毒素检查法的干扰作用, 并 能够使用灵敏度为 0 125EU ∃ mL 的鲎试剂进行 内毒素检测的品种, 即认为该品种适用于细菌内毒素
1
检查方法, 由中检所汇总, 报送国家药典委员会。 3 研究结果 本次研究结果表明, 84 个注射剂品种中, 2 个 药检所均获得样品 ( 部分品种由于生产厂家较少因 此 2 个药检所得到的样品为相同厂家但不同批次的 样品 ) 且实验结果符合上述原则可建立细菌内毒素 检查法的 , 或只有 1 个药检所获得样品但实验结果 也符合上述原则可建立细菌内毒素检查法的品种共 有 58 个; 2 个药检所实验结果差异较大或 存在其 它问题的品种有 6 个 ; 另有部分品种由于生产厂家 较少 , 市场上很难找到样品, 因此未找到样品无法 进行研究的品种 20 个。 样品对于细菌内毒素检查法无明显的 干扰作 用, 不需要特别处理 , 可使用任意灵敏度的鲎试剂 进行检验的品种共有 34 个 , 结 果见表 1 。样品对 细菌内毒素检查法存在一定的干扰作用 , 但经过稀 释或其他方法可排除干扰 , 可建立内毒素检查法的 品种共 24 个。具体品种名称及排除干扰方法等详 见表 2。样品对细菌内毒素检查法存在较强的干扰 作用 , 并且经过一般的方法无法排除干扰, 或存在 其他问题 , 需要进一步研究的品种共 6 个, 具体品 种名称及存在的问题详见表 3。
3种中药注射剂细菌内毒素检查方法研究
3种中药注射剂细菌内毒素检查方法研究
刘枕;马帅;冯宇;高新贞
【期刊名称】《中国药品标准》
【年(卷),期】2022(23)4
【摘要】目的:建立3个品种中药注射剂的细菌内毒素检查方法,比较基因重组鲎试剂(rLAL)与传统鲎试剂(TAL/LAL)检查结果的差异,确定rLAL的适用性。
方法:依据《中国药典》2020年版四部<1143细菌内毒素检查法>、<9251细菌内毒素检查法应用指导原则>,采用rLAL、LAL、TAL3种鲎试剂对丹红注射液、痰热清注射液、血必净注射液3种中药注射剂进行细菌内毒素检查。
结果:3种鲎试剂均可用于3种中药注射剂细菌内毒素检查,检测结果均符合规定。
其中rLAL检测灵敏度更高,可达0.001 EU·mL^(-1),且具有更大的MVD值。
结论:基因重组鲎试剂可取代传统鲎试剂用于3种中药注射剂细菌内毒素检查。
【总页数】5页(P430-434)
【作者】刘枕;马帅;冯宇;高新贞
【作者单位】淄博市食品药品检验研究院;科德角国际生物医学科技(北京)有限公司【正文语种】中文
【中图分类】R921.2
【相关文献】
1.2002年中药注射剂的细菌内毒素检查研究
2.2001年我国中药注射剂细菌内毒素检查的研究概况
3.5种中草药注射剂细菌内毒素检查方法的研究
4.2种中草药静
脉注射剂细菌内毒素检查方法的研究5.两种喹诺酮类注射剂细菌内毒素检查方法的实验研究
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依达拉奉注射液的质量标准
依达拉奉注射液的质量标准第一章总则一、为规范依达拉奉注射液的质量管理和生产，保障药品质量安全，特制定本标准。
二、本标准适用于依达拉奉注射液的质量管理和生产。
三、依达拉奉注射液应符合国家相关法律法规和药典要求。
第二章原料与辅料一、原料药需符合国家药典及相关药品质量标准，应具有合法的生产许可证。
二、辅料应符合国家相关标准，且不得对药品的质量安全造成影响。
三、原料与辅料的采购应建立合格供应商名录，并进行定期审核。
四、原料与辅料应进行严格的进货检验，确保符合质量标准。
第三章质量控制一、建立健全的质量管理体系，包括质量保证、质量控制和质量改进等环节。
二、设立质量控制实验室，配备专业人员和仪器设备，进行原料、辅料和成品的质量监控。
三、建立完善的质量记录系统，记录药品生产、质检及其它相关环节的数据，以保证质量的可追溯性。
四、开展全面的质量风险评估，确保在各个环节上都有能力发现和解决潜在的质量问题。
第四章生产工艺一、生产工艺应符合相关药典要求，确保每个环节都能得到有效的控制。
二、设立标准操作程序，明确每个生产工艺环节的操作规范，包括原料配制、生产操作、清洁消毒等内容。
三、生产过程中应加强环境监控，确保无菌生产条件的稳定性。
四、注射液灌装应符合相关的规范要求，确保产品的装配质量和无菌性。
第五章质量控制检验一、建立完善的药品质量控制标准，包括外观、溶解度、无菌、菌内毒素、含量测定等项目的检验标准。
二、严格执行药品质量控制标准，对成品进行全面的质量检验，确保药品符合规定的质量标准。
三、建立定期抽样检验制度，对已上市的产品进行质量监测，及时发现问题并采取措施。
四、建立药品质量评价制度，对产品质量情况进行自评、外审和追溯分析，及时发现问题并采取措施。
第六章贮存及运输一、依达拉奉注射液的贮存及运输条件应符合产品说明书的规定。
二、贮存条件包括温度、湿度、光线等要求，应进行合理控制和监控。
三、运输过程中应避免受到外界环境的影响，确保产品质量稳定。
依达拉奉原料药细菌内毒素检查法的研究
阴性对照
－－ －－
λ （ＥＵ·ｍＬ－１）
０２５
０２５
λＣ （ＥＵ·ｍＬ－１）
０５
０２５
结论
符合规定 符合规定
注：“－”为阴性结果；“＋”为阳性结果
依达拉奉（ｅｄａｒａｖｏｎｅ，ＭＣＩ１８６），其化学名为 ３甲基１苯 基２吡唑啉５酮，是日 本 三 菱东 京 制 药 公 司 开 发 的 治 疗 急 性脑梗死的新药（商品名为 Ｒａｄｉｃｕｔ）〔１〕。依达拉奉是一种新 型的治疗脑梗死的脑保护剂，它疗效确切，能抑制自由基引起 的脂质过氧化和细胞坏死，有明确的抗脑缺血和脑保护作用， 对于治疗脑梗塞病是一个优良的药物。在我国依达拉奉广泛 应用于脑出血“脑梗死”“脑卒中”颅脑外伤等的治疗〔２〕。对 于依达拉奉原料药，目前尚未有建立该药细菌内毒素检查方 法的报道，且 ２０１５年版中国药典也未收录原料药的细菌内毒 素检查方法，因此，通过有效的质量标准控制其质量和稳定性 对于制剂安全及临床安全用药具有重要的意义，我 们 按 照 《中国药典》２０１５年版四部通则 １１４３细菌内毒素检查法，对 依达拉奉原料进行细菌内毒素检查法干扰试验，为建立该品 种的细菌内毒素检查法提供科学依据。 １ 实验材料与仪器 １１ 受试药物 依达拉奉，批号：１７０６１５、１７０６１９、１７０６２３；规 格：１０ｇ／袋，生产厂家：河南润弘制药股份有限公司。 １２ 试 剂 ① 细 菌 内 毒 素 工 作 标 准 品，批 号：１５０６０１ ２０１７８３，规格：８０ＥＵ，生产单位：中国食品药品检定研究院；② 鲎试剂 １，批号：１７０７１９，规格：０５ｍＬ，标示灵敏度：０２５ＥＵ· ｍＬ－１，生产单位：厦门鲎试剂实验有限公司；③ 鲎试剂 ２，批 号：１７０４０７３，规格：０５ｍＬ，标 示 灵 敏 度：０２５ＥＵ· ｍＬ－１，生 产
中风病人用药的注意事项
中风病人用药的注意事项中风是以突然昏仆、不省人事、口舌歪斜、半身不遂、语言蹇涩，或仅见口眼歪斜为主要临床表现。
常用的药物有抗凝、降纤、溶栓、防止脑水肿、神经保护剂、扩容、扩血管和活血化瘀、通脉舒络、豁痰开窍、醒脑安神、益气固脱等中药。
现将用药注意事项介绍如下：1 中西药合理联合应用在治疗中风时，应用中药通过活血化瘀的作用，有一定的治疗和预防作用。
在我国中药应用已有60多年历史，为我国医疗事业做出了巨大的贡献，也为无数病人解除了病痛，中药注射剂在临床方面具有化学药品不可替代的作用。
在某些疾病的治疗上，中药注射剂的疗效高于部分化学产品。
但是，近年来，中药注射剂不良反应病例报道逐渐增[1]。
因此，中西药联合使用时，应注意：（1）不可将中药注射剂超量应用；一些复方中药注射制剂中含有多种成分，其中某些成分容易受酸碱变化的影响出现色泽加深，溶解度下降，产生聚合物出现沉淀[2]。
（2）溶解同一种药品的注射器不可以在连续配制中反复使用，用后弃去，不可放置半小时以上。
防止药品在注射器中析出微小结晶，如再配制可使药品析出结晶影响治疗。
（3）为保证药品稳定性，静脉输注药品要求现用现配，如临床达不到，尽可能配制1小时内开始输注。
（4）中西药相连输入时，两者之间用生理盐水静点15分钟以上。
2 认真阅读药品的说明书中风病人危急重症多见，护士多忙碌于对病人的各种处置，加药前易忽略看药物说明书。
加药前认真阅读药品的说明书，掌握药品禁忌症和注意事项，了解药品的不良反应，按要求操作，避免用量过大、中西药不合理联合应用引起不良反应。
3 严格控制药物的剂量和用法药品应按说明书要求溶解配制，进行皮下、肌注或静脉给药。
如随意使用溶媒可能会造成浑浊、沉淀，不能使用。
粉针配制要求充分溶解，混匀后使用。
如：改善脑功能和代谢药物：依达拉奉（别名易达生）30mg使用是只能用生理盐水稀释后静点，勿与含糖液体混合，否则降低药品浓度。
每次点滴不超过30分钟。
依达拉奉注射液检验报告
依达拉奉注射液检验报告检验项目申报标准检验结果单项结论【性状】应为无色澄明液体为无色澄明液体符合规定【鉴别】（1）在246nm波长处有最大吸收见图1 符合规定（2）呈正反应呈正反应符合规定【检查】pH值 3.0~4.5 3.45 符合规定装量 >20ml 22.0ml、22.5ml 符合规定澄明度符合规定热原符合规定无菌符合规定【含量测定】含依达拉奉（C10H10N2O） 100.7% 符合规定应为标示量的90.0%~110.0%结论：本品符合申报的依达拉奉注射液的质量标准检验人：复核人：依达拉奉注射液检验报告检验项目申报标准检验结果单项结论【性状】应为无色澄明液体为无色澄明液体符合规定【鉴别】（1）在246nm波长处有最大吸收见图2 符合规定（2）呈正反应呈正反应符合规定【检查】pH值 3.0~4.5 3.50 符合规定装量 >20ml 21.8ml、22.2ml 符合规定澄明度符合规定热原符合规定无菌符合规定【含量测定】含依达拉奉（C10H10N2O） 100.5% 符合规定应为标示量的90.0%~110.0%结论：本品符合申报的依达拉奉注射液的质量标准检验人：复核人：依达拉奉注射液检验报告检验项目申报标准检验结果单项结论【性状】应为无色澄明液体应为无色澄明液体符合规定【鉴别】（1）在246nm波长处有最大吸收见图3 符合规定（2）呈正反应呈正反应符合规定【检查】pH值 3.0~4.5 3.53 符合规定装量 >20ml 20.6ml、21.5ml 符合规定澄明度符合规定热原符合规定无菌符合规定【含量测定】含依达拉奉（C10H10N2O） 100.2% 符合规定应为标示量的90.0%~110.0%结论：本品符合申报的依达拉奉注射液的质量标准检验人：复核人：。
依达拉奉注射液的质量标准
依达拉奉注射液的质量标准依达拉奉注射液是一种用于治疗心血管疾病的药物，其质量标准对于保障患者安全和治疗效果至关重要。
以下是依达拉奉注射液的质量标准。
一、外观和标识1.依达拉奉注射液应该呈现为无色透明液体，无悬浮物和沉淀物。
2.外包装应该清晰标明药品名称、规格、生产批号、生产日期、有效期等信息，以便患者和医生正确使用。
二、理化性质1.依达拉奉注射液的pH值应该在7.0~8.5之间，以确保适宜的药理作用。
2.溶液中应该不含任何有害杂质或微生物，以保证患者安全使用。
三、有效成分含量1.依达拉奉注射液中依达拉奉的含量应该符合国家药典或相关标准的规定，确保药物的治疗效果。
2.应该定期对生产批次的依达拉奉注射液进行含量测定，以确保每支注射液的有效成分含量符合要求。
四、清晰度和透明度1.依达拉奉注射液的清晰度和透明度应该符合国家药典或相关标准的规定，以保证患者注射时能清晰观察溶液状态。
五、稳定性1.依达拉奉注射液的稳定性应该经过严格的稳定性测试，包括在不同环境条件下的储存稳定性和在不同时间点的有效成分含量变化等，以保证药品有效期内稳定性良好。
六、离子含量1.依达拉奉注射液中离子含量应该符合国家药典或相关标准的规定，以防止因离子含量不合格而对患者造成不良影响。
七、微生物限度1.依达拉奉注射液中微生物限度应该符合国家药典或相关标准的规定，以保证药品在无菌条件下生产和储存。
八、包装和贮存1.依达拉奉注射液的包装材料应该符合国家药典或相关标准的规定，防止包装材料对药品的影响。
2.药品应该在指定的温度条件下存放，并且包装密封良好，以防止药品受潮、曝光等情况发生。
以上是依达拉奉注射液的质量标准，只有严格按照这些标准进行生产和质量控制，才能保证依达拉奉注射液的质量和安全性。
同时，医药生产企业和相关监管部门也应该加强对依达拉奉注射液质量标准的监督检查，确保患者使用的药品符合要求，达到治疗的预期效果。
依达拉奉注射液质量研究工作试验资料及文献资料
依达拉奉注射液质量研究工作试验资料及文献资料7.1、样品来源依达拉奉注射液：自制三批，批号：20010709、20010711、20010713。
7.2、含量限度本品为含30mg依达拉奉的20ml灭菌水溶液，含依达拉奉应为标示量的90.0%~110.0%。
经对本品三批样品检测，测定结果均在上述范围之内。
7.3、性状取本品三批样品观察均为无色的澄明液体。
7.4、鉴别7.4.1紫外分光光度法取本品对照品及三批样品适量，加乙醇制成每1ml约含6μg的溶液，按分光光度法（中国药典2000年版二部附录IV A）测定，图谱见图1~4，均在246nm波长处有最大吸收。
取按处方比例配制的辅料按上述方法检查，紫外光谱中没有特征吸收峰，不干扰测定，见图5。
7.4.2 化学法取本品约2ml，加重氮苯磺酸试液2ml，立即呈黄色。
取本品三批样品检查，均为阳性反应。
取按处方比例配制的辅料检查，均为阴性反应，不干扰测定。
7.4.3 高效液相色谱法在含量测定项下记录的色谱图中，供试品峰的保留时间应与依达拉奉对照品峰的主峰保留时间一致。
取本品三批样品检查，供试品峰的保留时间与依达拉奉对照品主峰的保留时间一致，见图6~9。
取按处方比例配制的辅料按上述方法检查，不干扰测定，见图10。
7.5、检查7.5.1 装量取本品三批样品每批2瓶，照中国药典2000年版二部附录I B中方法试验，试验结果如表1。
表1 装量检查结果检测结果表明，本品三批样品装量均在合格范围内，符合药典规定。
7.5.2 pH值取本品三批检测，结果见表2。
表2 依达拉奉注射剂pH值检测结果本品三批样品测定结果表明，依达拉奉注射剂的pH值均在3.0~4.5之间。
7.5.3 颜色取本品三批样品，依法检查（中国药典2000年版二部附录IX A第一法），颜色均为无色。
7.5.4 有关物质照高效液相色谱法（中国药典2000年版二部附录V D）测定，色谱条件与系统适用性试验与原料药中一致。
依达拉奉注射液中有关物质检查方法的研究
中 图分类 号 ：Ｒ ９ ２ ７ ． ２
文献标 识 码 ：Ｂ
文章编 号 ：１ ６ ７ １ － ８ １ ９ ４（ ２ ０ １ ５ ）１ ０ － ０ ０ ６ ６ － ０ ２
依 达拉奉注射 液是 日 本三 菱东京制 药株 式会社开 发的 中枢神 经系 统用药 ，于２ ０ ０ １ 年 在 日本首次上 市。国 内外 文献 相继报道其有 关物质
２ ． ３ 方法学验证 ２ － ３ ． １ 专属性
的色谱 条件并不 完善 ，不能有 效检出本品 的有 关物质 。本 项研 究依据 日 本 最新公布 的依达拉奉注射 液质量标准 ，结合本 品合成 工艺 ，对可 能产 生的杂质及 制剂的降解产 物进行分析 ，筛选适合 的色谱条件 ，为 建立 真正能够有效控制产 品质量 的标 准提供 试验依据 。 １仪 器与试 药 １ ． Ｉ 主要仪器 ：岛津Ｌ Ｃ 一 １ ５ Ｃ ，二极管阵列检测器 （ 检测波长２ ４ ０ ｎ ｍ）；有 关物质 （ ｉ ）， Ｃ ｌ ８ 柱 （ 岛津Ｗｏ ｎ ｄ ａ ｓ ｉ ｌ ，长２ ５ ０ ｉ ｆ ｌ ｍ，内 径４ ． ６ ｍ ｍ，填料粒径 ５ ｍ）｛有 关物质 （ ｉ ｉ ） ，Ｃ ， Ｂ 柱 （ 岛津Ｗｏ ｎ ｄ ａ ｓ ｉ ｌ ，长１ ５ ０ ｍ ｍ，内径 ４ ． ６ ｍｌ ｎ ，填料粒径５ ｕ Ｉ １ １ ）；微电 脑光照培养箱 （ 上海博迅实业有限 公司，
【 摘 要】 目的 建立 依达拉 奉注射 液 中有 关物质 的控 制 方法 。方 法 采用高 效液相 色谱法 ，通 过 筛选 色谱 条件确 定有关物质 方 法 ｉ 和有 关物质 方 法ｉ ｉ 。结果 在 筛选 出的 色谱 条件下 杂质 能有 效检 出并 与依 达拉 奉峰 完 全分 离。结 论 该 方法可作 为有效控 制依 逸拉 奉 注射 液 中杂质 的方法 。
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依达拉奉注射液细菌内毒素检查的质量标准研究
作者：许雷鸣顾倩武谷
来源：《中国医药导报》2013年第05期
[摘要] 目的统一依达拉奉注射液细菌内毒素检查限值，为依达拉奉注射液标准的提高提供参考。
方法按《中国药典》2010年版二部附录细菌内毒素检查法，采用2个不同厂家的鲎试剂对5个不同厂家的依达拉奉注射液样品进行研究。
结果依达拉奉注射液最大不干扰浓度为0.187 5 mg/mL，可将细菌内毒素检查限值在现行国家标准基础上统一提高至“每毫克小于0.33 EU”。
结论统一后的限值可行，可更严格控制产品中的内毒素。
[关键词] 依达拉奉注射液；细菌内毒素检查；干扰试验
[中图分类号] R927.33 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）02（b）-0103-03
依达拉奉是一种脑保护剂（自由基清除剂），可清除自由基，抑制脂质过氧化，从而抑制脑细胞、血管内皮细胞、神经细胞的氧化损伤。
临床上用于改善急性脑梗死所致的神经症状、日常生活活动能力和功能障碍。
目前，关于依达拉奉注射液的细菌内毒素检查限值不统一。
国家食品药品监督管理局标准YBH28302005中细菌内毒素检查限值为：每毫克依达拉奉中含内毒素的量应小于2.0 EU；国家食品药品监督管理局标准YBH01602008中细菌内毒素检查限值为：每毫升中含内毒素量应小于0.5 EU；国家食品药品监督管理局标准YBH10412008中细菌内毒素检查限值为：每毫克依达拉奉中含内毒素的量应小于3.33 EU；国家食品药品监督管理局标准YBH00372011中细菌内毒素检查限值为：每毫克依达拉奉中含细菌内毒素的量应小于2.5 EU。
查阅国外药典，未见收载该品种。
本实验参照依达拉奉注射液现行标准，《中国药典》2010年版二部“细菌内毒素检查法”[1]以及相关细菌内毒素检查的文献[2-10]，考察了5个厂家的产品，研究本品对细菌内毒素检查试验的干扰情况，探讨提高本品细菌内毒素限值的可行性，在实验基础上统一细菌内毒素检查质量标准。
1 仪器与试药
1.1 仪器
洁净工作台，苏净集团苏州安泰空气技术有限公司，VS-1300L-U；S648恒温水浴锅（上海医疗器械七厂），XW-80A混旋仪（上海沪西分析仪器厂有限公司），微量取液器（50～250 μL，上海荣泰生化工程有限公司），细菌内毒素检查用具（湛江博康海洋生物有限公司）。
1.2 试药
依达拉奉注射液，吉林省博大制药有限责任公司，批号：01-110904、01-110906，规格：20 mL∶30 mg。
批号：02-110816、02-111108，规格：10 mL∶15 mg。
吉林省辉南长龙生化药业股份有限公司，批号：2012041101，规格：20 mL∶30 mg。
扬州制药有限公司，批号：20120601，规格：20 mL∶30 mg。
国药集团国瑞药业有限公司，批号：1204068、1204069、1204071，规格：20 mL∶30 mg。
安徽威尔曼制药有限公司，批号：120423、120424、120515，规格：20 mL∶30 mg。
鲎试剂（福州新北生化工业有限公司，批号：12070312，灵敏度：0.06 EU/mL；规格：0.1 mL/支。
湛江安度斯生物有限公司，批号：1211081，灵敏度：0.06 EU/mL；规格：0.1 mL/支）；细菌内毒素工作标准品（冻干品）（中国食品药品检定研究院，效价：120 EU/支，批号：150601-201072）。
细菌内毒素检查用水（福州新北生化工业有限公司，批号：11102021，规格：100 mL/瓶）。
2 方法与结果
2.1 鲎试剂灵敏度复核试验
将细菌内毒素工作标准品用细菌内毒素检查用水溶解，配制成2λ、1λ、0.5λ、0.25λ四个浓度的内毒素标准溶液，按照细菌内毒素检查法进行加样操作[1-2]。
每种内毒素浓度分别平行做4管，同时用细菌内毒素检查用水作阴性对照做2管。
按公式λc=antilg（ΣX/4）计算λc 值，结果见表1。
由结果可知，2λ管均为阳性，0.25λ均为阴性，阴性对照管为阴性，试验有效。
两个不同厂家的2批鲎试剂灵敏度测定值均在0.5λ～2.0λ范围内，符合要求，可用于细菌内毒素检查，并以标示灵敏度λ为该批鲎试剂的灵敏度。
2.2 内毒素限值（L）的确定[2-3]
参照上述4个国家标准，采用国内现行标准最严的限度：每毫升中含内毒素量应小于0.5 EU。
由于本品20 mL相当于30 mg，并且其临床剂量以每公斤体重（mg）计，故将依达拉奉注射液细菌内毒素检查限值定为：每毫克依达拉奉中含内毒素的量应小于0.33 EU。
2.3 干扰试验预试验
目前市售鲎试剂λ通常在0.50～0.03 EU/mL，根据公式MVD=C×L/λ，则依达拉奉注射液对应的最大有效稀释倍数分别为1、2、4、8、16倍。
取规格为20 mL∶30 mg的样品，每个厂家各取一批，将5个厂家的依达拉奉注射液用细菌内毒素检查用水分别配制成为原液、2、4、8、16倍稀释液，将此系列溶液记为NPC。
同法制备上述系列溶液，向其中加入内毒素标准溶液，使每一浓度的溶液中均含有2λ浓度的细菌内毒素，此系列溶液记为PPC。
取福州新北生化工业有限公司和湛江安度斯生物有限公司生产的鲎试剂，分别与上述NPC和PPC进行反应，每一浓度重复做2管，同时设阳性对照（PC）和阴性对照（NC），干扰预试验结果见表
2。
预试结果显示，样品在8倍以下稀释倍数时可能对反应有抑制性干扰作用；样品的8倍以上稀释倍数可能对反应无干扰作用。
2.4 干扰试验
取上述干扰预试验的依达拉奉注射液用细菌内毒素检查用水分别进行稀释，使其正式干扰试验稀释倍数为8倍，按《中国药典》2010年版二部附录Ⅺ E“细菌内毒素检查法”凝胶法干扰试验项进行试验[1]，结果见表3。
正式干扰试验结果表明，采用福州新北生化工业有限公司和湛江安度斯生物有限公司生产的灵敏度均为0.06 EU/mL的鲎试剂进行试验，Es均在0.5λ～2.0λ内且Et/Es均在0.5～2.0之间，确认5个厂家的上述样品稀释8倍后对细菌内毒素检查均无干扰，即依达拉奉注射液最大不干扰浓度为0.187 5 mg/mL。
2.5 样品细菌内毒素检查
根据干扰试验结果，取5个厂家12批样品用细菌内毒素检查用水稀释8倍，分别用两个不同厂家灵敏度为0.06 EU/mL的鲎试剂，以每毫克小于0.33 EU为细菌内毒素检查限值，按照《中国药典》2010年版二部附录Ⅺ E“细菌内毒素检查法”凝胶限度试验对样品进行细菌内毒素检查[1]，结果见表4。
结果显示，本实验成立，供试品管呈阴性，12批样品均符合规定。
3 讨论
为了统一依达拉奉注射液细菌内毒素检查限值，提高检验标准，笔者参照依达拉奉注射液现行国家标准，拟定细菌内毒素检查限值为0.33 EU/mg，采用2个不同厂家的鲎试剂对5个不同厂家的依达拉奉注射液进行了细菌内毒素检查干扰试验研究，并按该限值检查了5个厂家生产的12批依达拉奉注射液的细菌内毒素量。
干扰实验表明，依达拉奉注射液部分产品在较高浓度时对细菌内毒素检查有一定的干扰，在0.187 5 mg/mL以下浓度时对细菌内毒素检查均无干扰。
检查结果表明，5个厂家生产的12批样品细菌内毒素量均小于0.33 EU/mg，符合拟定的质量标准。
说明各个厂家按照目前的生产工艺和水平可以满足拟定的限值要求，统一后的标准可行。
统一后的依达拉奉注射液的细菌内毒素检查方法如下：取本品，可用0.06 EU/mL以上的高灵敏度鲎试剂，依法检查（《中国药典》2010年版二部附录Ⅺ E），每毫克依达拉奉中含内毒素的量应小于0.33 EU。
本试验将限值统一为0.33 EU/mg，提高了检验标准，有利于更好地控制药品质量，更好地保障用药安全。
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（收稿日期：2012-12-11 本文编辑：卫轲）。