细菌染色技术总结
细菌一般染色方法
细菌一般染色方法细菌染色是一种常用的实验技术，通过染色使细菌在显微镜下能够更清晰地观察和分析。
细菌染色通常分为简单染色、阴性染色和阳性染色三种方法。
一、简单染色方法：简单染色是最基础的细菌染色方法，主要是用一种染色剂来染色所有类型的细菌。
常用的染色剂有墨汁、甲基蓝、伊红等。
简单染色的步骤如下：1.取一片细菌涂片，将其干燥。
2.在涂片上滴加染色剂，覆盖整个片面。
3.将染色剂置于片上一分钟，用水冲洗。
4.用纸巾将涂片上的多余水份吸干。
5.镶片并观察。
简单染色可以使细菌呈现出斑点或条纹状，并能够区分一些基本形态和结构，但不能提供更多细菌信息。
二、阴性染色方法：阴性染色可使细菌显现为透明，而背景呈色的方法。
常用的阴性染色剂有阿里兹红、印度墨等。
阴性染色的步骤如下：1.将涂片上的细菌涂片均匀涂抹于载玻片上，使其成薄层。
2.滴加阴性染色剂到涂片上，使其均匀覆盖涂片表面。
3.用水冲洗染色液，并用纸巾擦干涂片。
4.镶片并观察。
阴性染色使背景呈色，使细菌透明，从而可以更清晰地观察其形态特征。
三、阳性染色方法：阳性染色可以使细菌显现为有色的圆点或杆状，常用的阳性染色剂有甲基蓝、伊红等。
阳性染色的步骤如下：1.将涂片上的细菌涂片均匀涂抹于载玻片上。
2.将染色剂滴加到涂片上，使其完全覆盖涂片。
3.置片5-10分钟，然后用水冲洗染色剂。
4.用纸巾将涂片上的多余水份吸干。
5.镶片并观察。
阳性染色可以染色细菌，使其呈现有色的形态，便于观察和鉴定。
此外，还有一些特殊染色方法，如革兰氏染色法、氢酒精酸快速染色法等。
革兰氏染色是一种经典的细菌染色方法，通过不同细菌细胞壁的染色性质来将其分为革兰阳性细菌和革兰阴性细菌。
该方法使用革兰紫染色剂和碘液，以及酒精和碳酸盐条件溶液进行染色处理。
氢酒精酸快速染色法是一种常用的快速染色方法，将细菌用甲基蓝染色液处理一段时间后，用酒精和酸性酒精进行洗涤和脱色，最后用伊红染色液着色。
这种方法可以快速地将细菌分为两种主要类型：革兰阳性细菌和革兰阴性细菌。
各种染色技术总结
一、原理：1、革兰氏染色原理：通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。
2、芽孢染色法的原理:芽孢又叫内生孢子(endosopre)，是某些细菌生长到一定阶段在菌体内形成的休眠体，通常呈圆形或椭圆形。
细菌能否形成芽孢以及芽孢的形状、芽孢在芽孢囊内的位置、芽孢囊是否膨大等特征是鉴定细菌的依据之一。
芽孢染色法是利用细菌的芽孢和菌体对染料的亲和力不同的原理，用不同染料进行着色，使芽孢和菌体呈不同的颜色而便于区别。
芽孢壁厚、透性低，着色、脱色均较困难，因此，当先用弱碱性染料，如孔雀绿（malachite green）或碱性品红（basic fuchsin）在加热条件下进行染色时，此染料不仅可进入菌体，而且也可进入芽孢，进入菌体的染料可经水洗脱色，而进入芽孢的染料则难以透出，若再用复染液（如番红液）或衬托溶液（如黑色素溶液）处理，则菌体和芽孢易于区分。
用着色力强的染色剂孔雀绿或石炭酸复红，在加热条件下染色，使染料不仅进入菌体也可进入芽孢内，进入菌体的染料经水洗后被脱色，而芽孢一经着色难以被水洗脱，当用对比度大的复染剂染色后，芽孢仍保留初染剂的颜色，而菌体和芽孢囊被染成复染剂的颜色，使芽孢和菌体更易于区分。
3、荚膜染色法的原理:荚膜是包围在细菌细胞外面的一层粘液性物质，其主要成分是多糖类，不易染色，故常用衬托染色法，即将菌体和背景着色，而把不着色且透明的荚膜衬托出来。
细菌染色技术实验报告
细菌染色技术实验报告一、实验目的本实验旨在通过不同染色方法，对细菌进行染色，观察不同染色方法对细菌形态、结构的影响，掌握常用的细菌染色技术。
二、实验原理1.革兰氏染色：根据细胞壁结构的差异，将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。
革兰氏阳性菌壁厚，含有大量的多糖和肽聚糖，易被紫晶染液染色；而革兰氏阴性菌壁薄，含有较少的多糖和肽聚糖，难以被紫晶染液染色。
因此，在进行革兰氏染色时，先用紫晶染液将细胞全部着紫色（1分钟），再用碘酒固定着色（1分钟），用酒精洗去过量的紫晶染液（10秒钟），最后用苏木精或伊红精着红色（30秒钟）。
2.抗酸杆菌染色：抗酸杆菌是一类特殊的革兰阴性菌，其细胞壁含有高度抵抗酸性染料的脂质物质——酸快染色素。
因此，抗酸杆菌染色需要使用专门的染色剂——浓硫酸和甲基绿。
3.荧光染色：荧光染色是一种常用于检测活细胞、细胞分布和数量的方法。
通过将荧光素标记到特定的细胞结构上，可以在荧光显微镜下直接观察到细胞形态、结构等信息。
三、实验步骤1.革兰氏染色（1）取一片无菌玻片，在上面滴一滴水。
（2）用无菌棒取少量培养液，均匀涂抹于玻片上。
（3）将玻片放置在火焰中加热至干燥。
（4）滴上紫晶染液，静置1分钟。
（5）用水冲洗干净，滴上碘酒固定着色，静置1分钟。
（6）用95%乙醇洗去过量的紫晶染液，持续10秒钟左右。
（7）再次用水冲洗干净，滴上苏木精或伊红精，静置30秒钟。
（8）用纸巾轻轻吸干水分，放置晾干后进行观察。
2.抗酸杆菌染色（1）取一片无菌玻片，在上面滴一滴水。
（2）用无菌棒取少量抗酸杆菌培养液，均匀涂抹于玻片上。
（3）将玻片放置在火焰中加热至干燥。
（4）滴上浓硫酸，静置1分钟。
（5）用水冲洗掉浓硫酸，滴上甲基绿染液，静置1分钟。
（6）再次用水冲洗干净，放置晾干后进行观察。
3.荧光染色（1）取一片无菌玻片，在上面滴一滴水。
（2）用无菌棒取少量荧光素标记的细胞培养液，均匀涂抹于玻片上。
（3）将玻片放置在火焰中加热至干燥。
细菌染色技术实验报告
细菌染色技术实验报告标题：细菌染色技术实验报告摘要：本实验旨在探索细菌染色技术的原理和操作方法，并通过实验观察、数据分析和结果讨论，深入理解该实验的意义和应用。
在实验过程中，我们采用了不同的染色方法，包括革兰染色法、伊红染色法和抗酸染色法，以便清晰地观察细菌样本的形态特征和结构组成。
通过对实验样本的显微观察和图像分析，我们成功地鉴定了不同类型的细菌，并对其特点和功能进行了综合分析。
本实验结果表明，细菌染色技术在微生物学研究和临床诊断中具有重要的应用价值。
引言：细菌染色技术是一种常用的微生物学实验方法，通过使用染色剂和适当的处理方法，使细菌在显微镜下能够被清晰地观察到。
细菌的染色对于鉴定不同种类的细菌、了解它们的形态特征和结构组成以及研究其功能和代谢机制至关重要。
在本实验中，我们将学习和应用三种常用的细菌染色方法：革兰染色法、伊红染色法和抗酸染色法。
材料与方法：1. 细菌培养物样品准备：从培养基中取出细菌样品，制备革兰染色、伊红染色和抗酸染色的实验样品。
2. 革兰染色法操作步骤：涂片制备、革兰染色试剂的使用、洗涤、显微观察和图像记录。
3. 伊红染色法操作步骤：涂片制备、伊红染色试剂的使用、洗涤、显微观察和图像记录。
4. 抗酸染色法操作步骤：涂片制备、抗酸染色试剂的使用、洗涤、显微观察和图像记录。
结果：1. 革兰染色实验结果：根据颜色反应，我们将细菌分为革兰阳性和革兰阴性。
- 革兰阳性细菌：具有厚的层状胞壁，显紫色或紫蓝色。
- 革兰阴性细菌：具有较薄的胞壁，显红色或粉红色。
2. 伊红染色实验结果：我们观察到细菌细胞周围形成了红色颜料，使细菌在显微镜下更易于观察。
3. 抗酸染色实验结果：通过抗酸染色，我们能够将细菌分为抗酸性和非抗酸性。
- 抗酸性细菌：在抗酸染色试剂下，细菌保持红色。
- 非抗酸性细菌：在抗酸染色试剂下，细菌显蓝色。
讨论与结论：在本次实验中，我们成功地应用了革兰染色、伊红染色和抗酸染色技术对细菌样品进行了染色和观察。
细菌染色技术总结
细菌染色技术（2010-11—22 22：29:46)目的要求初步掌握细菌涂片制作，单染色法及革兰染色法等染色技术。
实验内容1．细菌染色一般程序涂片干燥固定初染（媒染) 脱色复染（1）涂片临床标本或液体培养物可直接涂抹于洁净的载玻片上，固体培养的细菌先在玻璃片上滴一滴生理盐水，然后取菌少许在盐水中磨匀，呈轻度混浊.涂好的菌膜大小一般以1cm2左右为宜。
（2)干燥涂片最好在室温下自然干燥，或将标本面向上,置于酒精灯火焰高处慢慢烘干，切不可在火焰上烧干。
（3)固定细菌的固定常用火焰加热法,即将上述已干的涂片在火焰中迅速通过3～5次，温度以手能摸时热而不烫为度。
目的在于杀死细菌，凝固细胞质，改变细菌对染料的通透性。
(4）初染不同的染色方法，所用染液也不同.染液以覆盖菌膜为度。
（5) 媒染通过媒染可增加染料和被染物质的亲和力。
媒染剂还可用于固定之后，亦可含在固定液或染液中。
（6）脱色此步骤主要目的是观察细菌与染料间结合的稳定程度，作为鉴别染色之用。
（7) 复染细菌初染色被脱色后常以复染液复染，便于观察。
复染液的颜色与初染液有明显不同。
2．常用染料原液配制一般制备100ml纯酒精饱和溶液所需染料量：美兰2g～5g；结晶紫7g~14g；碱性复红3g～7g。
3．常用的染色方法(1) 单染色法即用一种染料染色的方法。
常用吕氏美兰或稀释石炭酸复红染液。
1）染液①吕氏美兰液美兰酒精饱和液30ml+0.01％KOH溶液70ml即成.②稀释石炭酸复红液碱性复红酒精饱和液10ml+5%石炭酸溶液90ml,然后用蒸馏水作10倍稀释即成。
2) 菌种大肠埃希菌普通斜面培养物。
3）染色方法于已做好的涂片上滴加吕氏美兰或稀释石炭酸复红染液，染色1min，以水冲洗至无颜色流下为止，自然干燥或以远火烘干后镜检。
4) 结果以美兰染色者菌体呈现兰色;以稀释石炭酸复红染色的菌体呈现红色.（2）革兰染色法1) 原理细菌被结晶紫着色后，再经媒染剂处理，染成深紫色或紫黑色。
细菌的简单染色实验报告
细菌的简单染色实验报告细菌的简单染色实验报告细菌的简单染色和革兰氏染色实验细菌的简单染色和革兰氏染色实验实验目的1. 学习微生物涂片，染色的基本技术，掌握细菌的单染色方法及无菌操作技术。
、2. 巩固显微镜的使用方法。
基本原理1. 简单染色法:用单一染料对细菌进行染色的方法。
此法操作简单，适用于一般形态的观察。
在中性，碱性或酸性溶液中，细菌细胞通常带负电荷，所以用碱性染料进行染色。
碱性染料并不是碱，和其他染料一样是一种盐，电离时染料离子带正电，易于带负电荷的细菌结合而是细菌着色。
带正电的染料离子可使细菌细胞染成蓝色。
通常的碱性染料除了美蓝外，还有结晶紫，碱性复红，番红等。
细菌体积较小，较透明，如未经染色常不易识别，而经染色后与背景形成鲜明的对比，是易于在显微镜下观察。
2. 革兰氏染色法:将所有的细菌分成革兰氏阳性菌G+)和革兰氏阴性菌(G-)两大类，是细菌上最常用的鉴别染色法。
该染色法所以将细菌分为G+和G-菌，是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同决定的。
G-菌的细胞壁中含有较多易被乙酸溶解的类脂质，而且肽聚糖层较薄，交联度低，故用乙醇脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使染色的结晶紫和碘的复合物易于渗透，结果细菌被脱色，在经复红染色后就成了红色。
G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小，通透性降低，因此细菌仍保留初染时颜色。
革兰氏染色需要四种不同的溶液，碱性染料初染液，煤染剂，脱色剂和复染液。
碱性染料初染液的作用像在细菌的单染色法基本原理中所述的那样，而用于革兰氏染色的初染液一般是结晶紫。
媒染剂的作用是增加染料和细胞之间的亲和性或付着力，即已某种方式帮助染料固定在细胞上，是不易脱落，碘是常用的媒染剂。
脱色剂是被染色的细胞进行脱色，不同类型的细胞脱色反应不同，有的能被脱色，有的则不能，脱色剂常用95%的酒精。
复染液也是一种碱性染料，其颜色不同于初染剂，复染的目的是使被脱落的细胞染上不同于初染液的颜色，从而将细胞区分成G+和G-两大类群，常用的染色液是复红。
细菌的染色实验报告
细菌的染色实验报告细菌的染色实验报告引言：细菌是一类微小的单细胞生物，它们广泛存在于自然界中的各个环境中，包括土壤、水体、空气等。
对于研究细菌的结构和功能，染色实验是一项重要的技术手段。
本实验旨在通过染色方法，观察和研究细菌的形态和结构，为进一步了解细菌的生物学特性提供基础数据。
材料与方法：1. 细菌培养物：从实验室中提供的细菌培养基中，选取一种细菌进行实验。
2. 染色试剂：我们选择了革兰染色和吉姆萨染色两种染色方法。
3. 实验器材：显微镜、玻璃载玻片、吸管、酒精灯、染色盒等。
实验步骤：1. 准备玻璃载玻片：用酒精清洗玻璃载玻片，使其表面无油污和杂质。
2. 取适量的细菌培养物：用吸管吸取一定量的细菌培养物，滴在玻璃载玻片上。
3. 固定细菌：将滴在玻璃载玻片上的细菌培养物，通过酒精灯加热固定，使其附着在玻璃载玻片上。
4. 进行革兰染色：将固定的细菌培养物滴上革兰染色试剂，静置片刻后用水冲洗。
5. 进行吉姆萨染色：将经过革兰染色的细菌培养物滴上吉姆萨染色试剂，静置片刻后用水冲洗。
6. 干燥与观察：将染色后的玻璃载玻片晾干，并放置在显微镜下观察。
结果与讨论：通过革兰染色和吉姆萨染色，我们成功地对细菌进行了染色，并观察到了不同的形态和结构。
在革兰染色中，我们发现染色后的细菌分为两类：革兰阳性细菌和革兰阴性细菌。
革兰阳性细菌在染色后呈现紫色或蓝紫色，而革兰阴性细菌则呈现红色或粉红色。
这是因为革兰阳性细菌具有较厚的细胞壁，能够保留革兰染色试剂，而革兰阴性细菌的细胞壁较薄，无法保留革兰染色试剂。
吉姆萨染色是一种常用的染色方法，它可以染色细菌的胞内结构，如细胞核和细胞质。
通过吉姆萨染色，我们可以观察到细菌的形态和排列方式。
例如，球菌呈现为圆形，链菌则呈现为链状排列。
细菌的染色实验不仅可以帮助我们观察和研究细菌的形态和结构，还可以为细菌的分类和鉴定提供依据。
通过观察细菌的染色特点，我们可以初步判断细菌的种类，并为后续的实验研究提供基础。
细菌的简单染色和革兰氏染色实验报告
细菌的简单染色和革兰氏染色实验报告细菌的简单染色和革兰氏染色实验报告细菌是微生物中最常见的一类生物，它们广泛存在于自然界的各个角落，包括土壤、水体、空气等。
为了更好地了解细菌的形态和结构，科学家们开展了许多实验，其中包括细菌的简单染色和革兰氏染色。
一、细菌的简单染色实验细菌的简单染色是一种常用的染色方法，通过给细菌染色，可以使其在显微镜下更加清晰可见。
这种染色方法主要使用了一种叫做甲基蓝的染料。
在实验中，首先需要制备好细菌的涂片。
将一根无菌的钢丝棒蘸取一小滴细菌悬液，然后将其均匀地涂抹在玻璃片上。
待涂片干燥后，将其固定在火焰上加热的玻璃柱上，以使细菌附着在玻璃片上。
接下来，将制备好的涂片放入染色盒中，加入适量的甲基蓝染料，浸泡片刻。
然后，用蒸馏水轻轻冲洗涂片，直至水洗液不再有颜色流出。
最后，用纸巾轻轻吸干涂片上的水分，将其放入显微镜下观察。
在显微镜下观察，我们可以清楚地看到细菌的形态和结构。
不同种类的细菌可能会呈现出不同的形状，例如球状、杆状、螺旋状等。
通过简单染色，我们可以更好地观察和研究细菌的特征。
二、革兰氏染色实验革兰氏染色是一种常用的细菌染色方法，它可以将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两类。
这种染色方法主要使用了紫晶染料和碘酒。
在实验中，首先需要制备好细菌的涂片，方法与简单染色相同。
然后，将涂片放入染色盒中，加入适量的紫晶染料，浸泡片刻。
接着，用蒸馏水轻轻冲洗涂片，直至水洗液不再有颜色流出。
接下来，将碘酒滴在涂片上，使其浸润全片，然后用蒸馏水轻轻冲洗涂片。
随后，滴入乙醇或酒精醛溶液，使其浸润全片，然后用蒸馏水轻轻冲洗涂片。
最后，滴入蓝色染料，浸泡片刻后用蒸馏水冲洗涂片。
在显微镜下观察，我们可以看到细菌的染色效果。
革兰氏阳性菌会呈现紫色或蓝色，而革兰氏阴性菌则呈现红色或粉色。
这是因为革兰氏阳性菌的细胞壁含有较多的胆固醇，可以吸附紫晶染料和碘酒，而革兰氏阴性菌的细胞壁则较薄，无法吸附这些染料。
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细菌染色技术（2010—11-22 22：29:46）目的要求初步掌握细菌涂片制作,单染色法及革兰染色法等染色技术。
实验内容1．细菌染色一般程序涂片干燥固定初染 (媒染）脱色复染(1）涂片临床标本或液体培养物可直接涂抹于洁净的载玻片上，固体培养的细菌先在玻璃片上滴一滴生理盐水，然后取菌少许在盐水中磨匀，呈轻度混浊.涂好的菌膜大小一般以1cm2左右为宜。
（2）干燥涂片最好在室温下自然干燥，或将标本面向上，置于酒精灯火焰高处慢慢烘干，切不可在火焰上烧干。
（3)固定细菌的固定常用火焰加热法，即将上述已干的涂片在火焰中迅速通过3~5次，温度以手能摸时热而不烫为度.目的在于杀死细菌，凝固细胞质,改变细菌对染料的通透性。
(4) 初染不同的染色方法，所用染液也不同。
染液以覆盖菌膜为度。
(5) 媒染通过媒染可增加染料和被染物质的亲和力。
媒染剂还可用于固定之后，亦可含在固定液或染液中。
(6) 脱色此步骤主要目的是观察细菌与染料间结合的稳定程度,作为鉴别染色之用.(7）复染细菌初染色被脱色后常以复染液复染，便于观察。
复染液的颜色与初染液有明显不同。
2．常用染料原液配制一般制备100ml纯酒精饱和溶液所需染料量：美兰2g～5g；结晶紫7g~14g；碱性复红3g~7g.3．常用的染色方法（1）单染色法即用一种染料染色的方法。
常用吕氏美兰或稀释石炭酸复红染液。
1) 染液①吕氏美兰液美兰酒精饱和液30ml+0.01%KOH溶液70ml即成。
②稀释石炭酸复红液碱性复红酒精饱和液10ml+5％石炭酸溶液90ml，然后用蒸馏水作10倍稀释即成。
2) 菌种大肠埃希菌普通斜面培养物.3) 染色方法于已做好的涂片上滴加吕氏美兰或稀释石炭酸复红染液，染色1min，以水冲洗至无颜色流下为止，自然干燥或以远火烘干后镜检。
4）结果以美兰染色者菌体呈现兰色；以稀释石炭酸复红染色的菌体呈现红色。
（2）革兰染色法1) 原理细菌被结晶紫着色后,再经媒染剂处理，染成深紫色或紫黑色.如被酒精脱去颜色,经复红复染成红色，称为革兰阴性菌；如不被酒精脱色，则仍为紫黑色，称为革兰阳性菌。
革兰染色的原理尚未完全明了，主要有三种学说：①等电点学说革兰阳性菌的等电点低（pH2~3），革兰阴性菌等电点较高(pH4~5)，一般染色液pH值为7.0左右，故电离后阳性菌所带阴电荷比阴性菌多，因此，摄取带阳电荷的染料（如结晶紫）多且不易脱色。
②通透性学说革兰阳性菌细胞壁的通透性比阴性菌小，脱色剂较易通过革兰阴性菌的细胞壁，将染料溶解洗出，故易脱色；阳性菌的细胞壁通透性低,故不易脱色。
③化学学说革兰阳性菌细胞内含有某种特殊化学成分，一般认为是核糖核酸镁盐与多糖的复合物，它能和染料-媒染剂互相结合，使已着色的细菌不易脱色;革兰阴性菌体含核糖核酸镁盐复合物较少，易被脱色.2) 染液①结晶紫染液取结晶紫饱和溶液20ml+1%草酸铵水溶液80ml混合过滤。
②卢戈碘液取碘化钾2ml以10ml蒸馏水充分溶解,然后加碘1g待完全溶解后加蒸馏水至300ml。
③脱色剂 95%乙醇.④稀释石炭酸复红同单染色法。
3) 菌种大肠埃希菌和葡萄球菌混合菌液。
4）方法①初染将结晶紫染液2～3滴加于制好的涂片上，染色 1min，水洗;②媒染加卢氏碘液2~3滴染色1min，水洗；③脱色 95％乙醇脱色0。
5min(无紫色脱落为止)，水洗;④复染加稀释石炭酸复红数滴，染色1min，水洗干后镜检.5) 结果革兰阳性菌染成紫色，革兰阴性菌染成红色。
6) 注意事项①涂片不宜过厚，否则脱色受影响，使革兰阴性菌染成革兰阳性菌,造成错误鉴定。
②为防止染液蒸发而改变浓度，碘液的颜色变淡应弃去。
③涂片积水过多会改变染液浓度，影响染色效果，故每次水洗后应将玻片甩干.④注意细菌的菌龄，一般以18h～24h左右培养物效果最好,菌龄过长影响细菌染色性.(3) 萋-纳抗酸染色法(ziehl—neelsen)：主要用于结核杆菌和麻风杆菌检查.1）染液①石炭酸复红染液取碱性复红酒精饱和液10ml+5%石炭酸水溶液90ml 混合。
②脱色剂 3％盐酸酒精。
③复染剂吕氏美兰染液，同单染色法。
2）菌种卡介苗和表皮葡萄球菌混合液。
3) 方法①初染在已固定的涂片上滴加石炭酸复红染液，远火徐徐加热至有蒸汽冒出，但切不可沸腾，并随时添加染色液，染色3 min～5min，冷却后水洗。
②脱色滴加3%盐酸酒精脱色至无红色流下为止，一般为2min。
③复染水洗后用吕氏美兰复染0。
5 min～1min，水洗干后镜检.4）结果抗酸菌染成红色，非抗酸菌染成蓝色。
5) 注意事项①加热时火切勿过大，防止染液沸腾。
②每张玻片只允许放一份标本，以免阴阳结果混淆。
③用过的玻片要彻底洗干净,防止抗酸菌留在玻片上。
④切勿使用染色缸，印干的滤纸只能一片一张，不得重复使用。
⑤脱色时间宁长勿短，以免误诊。
⑥为防止实验室感染,标本要高压灭菌后再制片。
(4) 潘本汉抗酸染色法(panpenhein) 主要用于尿及粪便中抗酸菌检查.当用萋-纳抗酸染色检出抗酸菌后，用该方法染色，结核分枝杆菌染成红色,耻垢分枝杆菌染成蓝色。
1) 染液①石炭酸复红染液见萋—纳抗酸染色法。
②复染液取蔷薇色酸1g先溶于100ml无水乙醇中,然后加美兰2g（至饱和），置室温中4天，使其充分溶解,过滤后加甘油20ml混匀备用。
2）标本怀疑肾结核患者的尿液。
3) 方法①初染于制好的涂片上滴加石炭酸复红染液数滴加温染色2min。
②复染倾去染液勿水洗，滴加复染液，边滴边倾去，重复4~5次后,水洗、待干、镜检.3) 结果结核分枝杆菌染成红色，耻垢分枝杆菌及其他细菌染成蓝色。
（5）鞭毛镀银染色法1）染液①甲液鞭酸5g，三氯化铁5g，36%甲醛1ml,1％NaOH 1ml，蒸馏水100ml.②乙液取AgNO3 2g溶于100ml蒸馏水中,临用前用15%氨水滴定，出现棕色沉淀后继续滴加氨水直至呈现乳白色薄雾状为止.2）方法①将奇异变形杆菌在 1.4％的软琼脂上传两代，形成迁徙生长现象。
取洁净玻片一张，于玻片上滴加蒸馏水一滴，然后取上述迁徙生长边缘的细菌少许,轻轻点于蒸馏水中，使其自然扩散、干燥，切勿火焰固定。
②在制好的涂片上滴加甲液染3 min～5min，用蒸馏水冲洗。
③用乙液冲去残水后，加乙液0.5 min～1min，并在火焰上方稍加热，用蒸馏水冲洗，干后镜检。
3) 结果菌体染成深褐色，鞭毛染成浅褐色。
4）注意事项①细菌培养时传代次数因菌种不同可适当增加。
②制涂片时菌量不宜过多,动作要轻，切勿研磨，以免鞭毛脱落。
③加乙液后加热温度不要太高。
(6）魏曦氏鞭毛染色法1）染液饱和钾明矾液2ml，5％石炭酸液5ml，20％鞣酸液2ml相混合。
临用时加碱性复红酒精饱和液1ml，混合后过夜，次日过滤后使用。
此染液以3日内使用效果最好。
2）方法将奇异变形杆菌在1。
4%的软琼脂上传两代，形成迁徙生长现象。
取高度洁净玻片一张,于玻片上滴加蒸馏水一滴,然后取上述迁徙生长边缘的细菌少许，轻轻点于蒸馏水中，使其自然扩散，置37℃培养箱内让其自干.无需火焰固定.滴加染液染0.5 min～1min，水洗待干，镜检。
3) 结果菌体与鞭毛均呈红色.(7) 芽胞染色法1) 染液①石炭酸复红染液见抗酸染色法。
②脱色剂 95％乙醇。
③复染液吕氏美兰染液，同单染色法.2）菌种炭疽芽胞杆菌普通斜面培养物。
3）方法①初染于制好的涂片上滴加石炭酸复红染液加热染 3 min~5min，勿使染液沸腾。
②脱色水洗后用95%乙醇脱色约1min，水洗。
③复染加吕氏美兰染液染1min，水洗干后镜检。
4）结果芽胞染成红色,菌体呈蓝色.（8) 黑斯(Hiss）荚膜染色法1) 染液结晶紫染液:取结晶紫饱和液5ml加蒸馏水95ml混合;20%CuSO4水溶液.2) 标本提前数日小白鼠腹腔注射肺炎链球菌菌液0。
2ml，小鼠死亡后解剖取腹腔液印片。
3）方法①将印片在空气中自然干燥，无需加热固定。
②滴加结晶紫染液在火焰上加热,使有蒸汽冒出为止，勿水洗。
③以20% CuSO4溶液冲洗染液，勿水洗，干后镜检。
4）结果菌体呈紫色，荚膜呈淡紫色.（9）阿尔伯特(Albert)异染颗粒染色法1）染液①甲液甲苯胺兰0。
15g，孔雀绿0.2g，溶于95％酒精2ml中再加入蒸馏水至100ml及冰醋酸1ml,放置24h后过滤备用。
②乙液将碘化钾3g溶于蒸馏水10ml～20ml中,再加碘2g等溶解后加蒸馏水至300ml备用。
2) 菌种白喉棒状杆菌吕氏鸡蛋斜面培养物。
3）方法已固定的涂片上加甲液染 3 min～5min，水洗后，再加乙液染色1min,水洗待干，镜检。
4) 结果菌体呈蓝绿色，异染颗粒呈蓝黑色。
(10) 刚果红染色法(负染色法）:背景着色而菌体不着色的染色方法.1）染液 2%刚果红水溶液，1%盐酸酒精溶液。
2）方法于载玻片上滴加2%刚果红溶液1滴与少量培养菌混合，涂成均匀厚片待干，以1%盐酸酒精溶液冲洗,待干后镜检。
3）结果背景呈蓝色,菌体无色。
(11) 金胺“O"染色法1）染液①金胺“O"染液金胺“O”0.1g溶于10ml95%酒精中，另取3ml石炭酸加在87ml的蒸馏水中.将此二液混匀,虽混浊但不必过滤，装入褐色瓶中，放室温保存。
②0。
5%盐酸酒精。
③0。
5％高锰酸钾溶液。
2）菌种怀疑结核的痰标本。
3）方法在已固定的涂片上加金胺“O"染液染15min，水洗后用0.5%盐酸酒精脱色2min，水洗，再加0.5%高锰酸钾液作用3min，水洗,待干，用荧光显微镜观察.4）结果抗酸菌呈亮黄色荧光。
（12）美兰染色法美蓝是常用的活体染色染料，当它处于氧化状态是呈现出蓝色，而还原态时为无色。
用它进行活体染色时，由于活细胞代谢过程中的脱氢作用，美蓝接受H后就由氧化转变为还原态，故表现出无色;而衰老的细胞由于代谢缓慢或停止，不能使美蓝还原，所以呈蓝色或者淡蓝色。
(13）苏木精-伊红染色苏木精-伊红染色，又称“苏木素—伊红染色"，或“H＆E染色”（hematoxylin and eosin stain、HE stain）,是组织学最常用的染色方法之一。
这种染色方法的基础是组织结构对不同染料的结合程度不同.染料苏木精可以将嗜碱性结构染成蓝紫色，而伊红可以将嗜酸性结构染成粉红色。
嗜碱性结构通常包括含有核酸的部分,如核糖体、细胞核及细胞质中富含核糖核酸（RNA）的区域等。
嗜酸性结构则通常由细胞内及细胞间的蛋白质，如路易体（Lewy body）、酒精小体（Mallory body）、细胞质的大部分等。
有时,黄褐色也会出现在染色样本中，这是由于组织内原有的色素，例如黑色素等造成的。
(14）吉姆萨染液吉姆萨染液(英语：Giemsa stain）是一种用于染色体的染色方法。