olympus_i71倒置显微镜操作规程

OLYMPUS IX71倒置显微镜操作规程

编写人：於锋时间

一、目的

正确使用倒置显微镜对细胞标本的形态特征进行观察，为生命科学的研究提供更多可靠的实验数据。

二、原理

倒置显微镜系统（IX71系列）是在透镜成像原理基础上发展起来的显微观察系统，利用卤素灯为光源，光线经过聚光镜汇聚后透过标本，通过物镜对标本进行聚焦放大成像，最后通过目镜把物镜所成的像再次放大，从而使实验者能够清晰的分辨体外培养的细胞的形态以及内部结构，主要用于体外活细胞培养形态观察，根据实验需求配置了明场、暗场、相差、荧光等技术模块。

三、主要操作规程

相差观察：

1.打开主开关

2.转动光路选择盘到“眼睛”位置。

3.装上观察样本。使用10X物镜，将聚光镜转盘转到“BF”位置。

4.瞳距调节

5.屈光度调节：通过螺旋目镜屈光度调节环。

6. 通过粗微调对样本准确调焦。选择所用物镜，10X，20X，40X。

相差观察时转动聚光镜转盘到“PH”位置。相差只能用10X，20X物镜观察和摄影。

7. 调节光线强度：明场观察时，调节孔径光栏。相差观察时，打开孔径光栏

8. 观察。

荧光观察步骤：

1.打开荧光供电装置开关，关掉显微镜主开关。等大约10分钟后电弧稳定。

2.连接UV防护板

3.把光路选择转盘和选择杆转到“眼睛”位置。

4.使相应的荧光激发滤色镜进入光路

5.根据标本不同，选择U，B，G激发。

6.打开激发光光闸使光通过把所用物镜推入光路10X，20X，40X。

7.把标本放在载物台上，对标本进行调焦，如果荧光衰退快，请将激发光光闸推入光路

使用1小时后关掉电源开关。

普通明场观察：

1.打开明场电源开关（“︱”为开，“○”为关）

2.将样品置于载物台上

3.将光路选择旋钮调至观察位置

4.从低倍镜开始观察，相差环拨到明场（BF）位置，荧光滤色块转盘拨到“1”的位置

5.调节透射光光强，调焦，找到预观察视野

6.依次换到高倍镜，观察样品

7.拍照时将光路选择旋钮调至相机位置

关机：

1. 关闭汞灯电源（注意：汞灯需使用半小时以上方可关闭，关闭半小时以后方可再次开启）

2. 将透射光强调到最小，透射光选择按钮按出

3. 关闭明场电源开关

4. 将镜头转到低倍镜，取出样品，若使用过油镜用干净的擦镜纸擦拭镜头

5. 确认数据已经保存，关闭软件

6. 使用光盘拷贝数据（禁止使用移动储存设备拷贝数据）

7. 关闭电脑，登记使用时间、荧光数字等使用情况

倒置IX71显微镜透射光明场观察步骤

观察相差时，要使用与相差物镜放大倍数相匹配的相差环板。

相差元件（聚光镜内）PHL PH 1（PH C）PH 2

物镜4倍10倍、20倍40倍、60倍虚线框内第一次观察调整完成后不需要进行调整，除非更换相差光学元件。

倒置显微镜IX71荧光观察方法步骤

荧光观察应遵循先明场对标本定位，然后再转入荧光观察的顺序。