OLYMPUS_IX71倒置显微镜操作规程
CXO_OLYMPUS IX71倒置荧光显微镜使用与维护SOP
起 草：李敏惠 日期：2007.10.24 审 核：邹强 日 期：2007.11.07 批 准：王伦安 日期：2007.11.15生效日期：2007.12.01签 字：修订号生效日期制定（变更）原因及目的：01 2007.12.01 开始按SOP 管理 02 03 分子生物学 [ ]份 组织病理学 [ ]份 细胞培养室 [ 1 ]份 天然产物 [ ]份 抄送SPF 级动物 [ ]份精密仪器室 [ ]份准 备 室 [ ]份技术档案室 [ 1 ]份OLYMPUS IX71倒置荧光显微镜使用与维护SOP1 适用范围¾ 本SOP 适用于OLYMPUS IX71倒置荧光显微镜的使用及维护保养。
2职责¾ 操作人员：认真执行本SOP 的内容，并作好相关记录。
¾ 设备管理员：培训、指导操作人员正确执行本SOP ，同时需按本SOP 对设备进行定期维护保养并作好相应记录。
3主要性能参数 物镜转换器 六孔，带有简易防水装置聚焦行程9mm （从载物台表面起，向上7mm ，向下2mm ），同轴粗/微调节钮（微调精度1μm ，微调每圈行程100μm ），上限位锁定机构，粗调扭力矩调节器初始图像光口 上光口，更换内置1×/1.6×变倍器显微镜镜体前置操作光路选择钮，透射光强调节钮和灯开关，TTL 脉冲控制钮。
100W 透射光照明柱IX2-ILL100 照明支柱倾斜装置（30度倾角，带有减震装置）；聚光镜架（行程50mm ，带有摆动装置）；可调视场光阑，4个滤色片架（直径45毫米，厚度=6mm 或更小）透射光照明器外接电源装置 TH4-200 200V ，TH4-HS 手动控制器，重量2.2kg观察筒双目观察筒 U-BI90 瞳间距调焦范围：50～76mm ，带有屈光度调节功能，视场数22 载物台右手控制旋钮载物台IX2-SFR行程：50mm （X ）×50mm （Y ），载物台插入板可更换（直径110mm ）聚光镜 长工作距离聚光镜IX2-LWUCD5孔转盘（其中3孔直径30mm ，2孔直径38mm ），孔径光阑可调，N.A.0.55，W.D.27mm目镜 WHN10×-H 高眼点，带屈光度调节功能，视场数22 荧光照明器 IX2-RFA 直型设计，带有视场光阑模块，有滤色片滑板（2个位置，直径32mm ，厚度或更小） 反射光荧光装置荧光滤色镜转盘 IX2-RFAC 转盘上有6个位置，内置光闸光源 100W汞灯室和变压器4 主要应用范围¾透射光明场、透射光相差、反射光荧光显微观察5 启动5.1 5.2 5.36.16.2 6.36.46.5 6.6 6.76.8将光强调节钮调节到最小；打开显微镜电源，将主开关拨到“I”（开）；荧光观察时，开荧光汞灯光源，将主开关拨到“I”（开）；¾汞灯是高压激发，其内是高压，切忌频繁开关，可能的话，需观察的样本请集中在一个时间段观察，在开灯10~15分钟后开始观察效果较好。
倒置荧光相差显微镜简明操作规程
倒置荧光相差显微镜简明操作规程
1. 左侧面的固定功能按钮
①TL/IL 反复切换明视场/荧光
②AP孔径光圈（BF模式下的图像反差）
③INT照明强度（明视场/荧光的亮度）
④FD 视野光圈
2. 初始化后的前方显示屏上的图形功能按钮
①显微镜观察方法的状态
②当前使用的物镜倍数
③Σ显微镜总放大倍数
④光线强度 / INT ；AP 孔径光圈 FD 视野光圈
⑤视频/目镜
3. 前方按钮功能
荧光虑块 A 颜色表达蓝
荧光虑块 I3 颜色表达绿
荧光虑块 N21 颜色表达红
SHUTTER 荧光挡板(阻挡或释放荧光)
其它固定功能按键为空
4. 开机
位于显微镜左侧，①为显微镜开关：只使用明场观察时，只打
开此开关即可；②为荧光汞灯开关，需要荧光观察时，两个开关均
需开启。
另需拍照时，请打开电脑。
5. 根据样品标记的荧光素选择相应的滤光片；
6. 放好样品，找到合适的视野进行观察；
7. 双击开启软件
8. 如需拍照点击采图键，
注意：拍照时应将CCD下方的拉杆拉出方可在屏幕上
显示图像
9. 拍照过程中如需白平衡，在空白处，按住鼠标左键画
一个框，即可显示相关信息；
10. 拍照完毕，及时关闭电脑、汞灯及电源，清理试验台；
11. 如需将数据带走，请到办公室取专用U盘拷取，严禁私自用自己的盘拷贝资料。
olympus_i71倒置显微镜操作规程
OLYMPUS IX71倒置显微镜操作规程编写人：於锋时间一、目的正确使用倒置显微镜对细胞标本的形态特征进行观察，为生命科学的研究提供更多可靠的实验数据。
二、原理倒置显微镜系统（IX71系列）是在透镜成像原理基础上发展起来的显微观察系统，利用卤素灯为光源，光线经过聚光镜汇聚后透过标本，通过物镜对标本进行聚焦放大成像，最后通过目镜把物镜所成的像再次放大，从而使实验者能够清晰的分辨体外培养的细胞的形态以及内部结构，主要用于体外活细胞培养形态观察，根据实验需求配置了明场、暗场、相差、荧光等技术模块。
三、主要操作规程相差观察：1.打开主开关2.转动光路选择盘到“眼睛”位置。
3.装上观察样本。
使用10X物镜，将聚光镜转盘转到“BF”位置。
4.瞳距调节5.屈光度调节：通过螺旋目镜屈光度调节环。
6. 通过粗微调对样本准确调焦。
选择所用物镜，10X，20X，40X。
相差观察时转动聚光镜转盘到“PH”位置。
相差只能用10X，20X物镜观察和摄影。
7. 调节光线强度：明场观察时，调节孔径光栏。
相差观察时，打开孔径光栏8. 观察。
荧光观察步骤：1.打开荧光供电装置开关，关掉显微镜主开关。
等大约10分钟后电弧稳定。
2.连接UV防护板3.把光路选择转盘和选择杆转到“眼睛”位置。
4.使相应的荧光激发滤色镜进入光路5.根据标本不同，选择U，B，G激发。
6.打开激发光光闸使光通过把所用物镜推入光路10X，20X，40X。
7.把标本放在载物台上，对标本进行调焦，如果荧光衰退快，请将激发光光闸推入光路使用1小时后关掉电源开关。
普通明场观察：1.打开明场电源开关（“︱”为开，“○”为关）2.将样品置于载物台上3.将光路选择旋钮调至观察位置4.从低倍镜开始观察，相差环拨到明场（BF）位置，荧光滤色块转盘拨到“1”的位置5.调节透射光光强，调焦，找到预观察视野6.依次换到高倍镜，观察样品7.拍照时将光路选择旋钮调至相机位置关机：1. 关闭汞灯电源（注意：汞灯需使用半小时以上方可关闭，关闭半小时以后方可再次开启）2. 将透射光强调到最小，透射光选择按钮按出3. 关闭明场电源开关4. 将镜头转到低倍镜，取出样品，若使用过油镜用干净的擦镜纸擦拭镜头5. 确认数据已经保存，关闭软件6. 使用光盘拷贝数据（禁止使用移动储存设备拷贝数据）7. 关闭电脑，登记使用时间、荧光数字等使用情况倒置IX71显微镜透射光明场观察步骤观察相差时，要使用与相差物镜放大倍数相匹配的相差环板。
倒置显微镜使用详解及注意事项
倒置显微镜使用详解及注意事项
1.开机
打开开关①、开关②、开关③显微镜及操作台④开电脑、软件
注：荧光电源需在使用荧光时开，开关间隔时间保持30min以上，相机电源在需要拍照时打开
2.制片放在载物台上，倒置
①用控制面板进行物镜选择，点击OBJ按钮，选择物镜倍数；
②点击CON按钮，选择观察通道：彩色制片选择
A：明场：任何倍数
需要用浮雕效果选择
Phl:4×
DICN1:10×、20×、40×
DICN2:60×油镜
注：荧光不需要选择油镜
3.荧光:打开荧光电源，点击控制面板选择荧光模式
打开荧光操作面板Open键，选择荧光强度
4.拍照:打开相机电源选择黑白或彩色相机拍照，保存为JPEG2000原始图像
5.关机:先关软件，电脑，再关硬件。
倒置显微镜使用说明
倒置显微镜使用说明1.准备工作a.将倒置显微镜放置在坚固的平台上，并使其处于水平状态。
b.通过调整顶部和侧面的旋钮，使显微镜的镜头平行于平台。
c.打开显微镜的照明系统，确保光源正常工作。
2.样品准备a.将待观察的样品固定在载物台上。
可以使用夹具或者胶片将其固定，确保样品不会移动。
b.根据样品的性质选择合适的载物台，例如透明载物台适用于透射光观察，而金属载物台适用于反射光观察。
c.可根据需要调整载物台的高度和角度，确保样品被正确照明。
3.调节镜头a.打开显微镜的放大倍数选择器，并选择合适的倍数。
常见的倍数包括100X、200X和400X。
注意，选择不同倍数时需要更换不同的镜头。
b.通过调节镜头的对焦手柄和调节旋钮，使图像清晰。
c.通过调节镜头的聚焦手柄，使图像的深浅合适。
聚焦手柄可以控制镜片的运动来改变焦距。
4.观察样品a.将眼睛对准倒置显微镜的眼镜管，并通过调节眼片距离，使图像清晰。
b.用一个眼睛观察样品，另一个眼睛可通过裸眼或查看屏幕来记录或共享观测结果。
c.使用顶部或侧面的旋钮，调节样品在镜头下的位置，以便观察感兴趣的细节或区域。
d.可以使用倒置显微镜上的刻度盘来测量样品的大小或距离。
5.照明控制a.可通过调整照明系统的亮度调节器或对光源进行调节，来调整样品的亮度。
b.如果使用透射光观察样品，可以调节照明系统的透光板或滤光片，来调整样品的颜色或对比度。
6.实施安全措施a.使用倒置显微镜时，应确保操作平稳，以防止显微镜或样品的损坏。
b.在使用镜头时，避免触摸镜片，以免污染或损坏。
c.在观察过程中，要注意观察时间和姿势，以避免眼睛疲劳或不适。
以上是倒置显微镜的使用说明，通过正确操作和调节，倒置显微镜可以提供高清晰度和高放大倍数的观察图像，为科研和研究工作提供帮助。
倒置荧光显微镜X71
倒置荧光显微镜X71仪器名称：奥林巴斯IX71倒置荧光显微镜型号：IX71 1、说明书（多的话单独附件）IX71 产品规格光学系统UIS2光学系统。
观察法荧光（U激励）（B，G激发）荧光荧光（U激励）微分⼲涉相位差简易偏光明场对⽐照明系统透射照明100W卤素灯照明⽩光LED照明EPI照明100W汞灯75W氙⽓灯光源，光导镜筒双⽬宽视场22数场倾⾓30°宽视⾓CT*1摇摆双⽬宽视场22数场倾⾓30°常设三⽬宽视场22场35?85°的倾斜⾓度荧光光源130⽡的卤素灯光导照明100⽡汞脂蛋⽩灯外壳和变压器100⽡汞灯和变压器75 W氙灯外壳和变压器物镜转换器电动六孔物镜转换器（DIC滑块），防⽔结构编码六孔物镜转换器（DIC滑块），防⽔结构荧光照明复眼透镜L形荧光照明L形的设计与可交换FS模块L形的荧光照明器L形的交换FS和AS模块设计荧光照明直板造型设计与视场光阑研究级倒置显微镜1.1 物镜转换器：6孔式物镜转换器，带有简易防⽔装置*1.2 聚焦机构：备有聚焦机构同轴粗、微调旋钮（最⼩微调刻度单位：1µm），⾏程9mm（向上7mm、向下2mm），粗调旋钮扭矩可调，备有上限位装置*1.3 原象光⼝：双层光路设计，共6条射⼊/射出光路，最多可同时接4 路采集原像的图像获取系统，左侧光⼝的原像到机架的距离102mm*1.4 具有中间2级放⼤率转换器：1×/1.6×1.5 透射光照明装置：100W卤素灯透射光照明装置，视场可变光阑可调；外置电源供应器1.6 观察镜筒：双⽬镜筒：瞳距可在50-76mm范围内进⾏调节，视场直径为22*1.7 ⾼精度载物台：⾏程为50 × 50mm；载物台插⼊圆板（外径110mm、内径25mm）* 1.8 万能平场半复消⾊差相差物镜，视场数≥26.54X（N.A.0.13 W.D.17 mm）；10X（N.A.0.3 W.D.10 mm）20X（N.A.0.45 W.D.6.6-7.8 mm）；40X（N.A.0.6 W.D.3.0-4.2 mm）1.9 ⽬镜：⾼眼点⽬镜，10×，视场直径：221.110 反射荧光系统1.10.1 荧光照明装置：备有视场可变光阑，滤光⽚插板*1.10.2 荧光滤⾊镜盒：备有可装⼊6个滤⾊镜⽴体镜套的转盘式滤⾊镜盒，内装光闸*1.10.3 荧光激发块：蓝⾊（B）、绿⾊（G）、紫外（U）1.10.4 荧光光源：100W超⾼压汞灯2 超⾼分辨率制冷彩⾊CCD*2.1 像素：≥1700万像素（最⾼分辨率≥4800 X 3600）*2.2 制冷系统：低于环境温度10度*2.3 测光⽅式：30%、1%平均测光，可达0.1%点测光*2.4 ⽆压缩图像采集速度：≥15 幅/秒（1600 X 1200）2.5 提供2x2、4x4的像素混合模式（binning）2.6 图像传输速度：4秒（最⾼分辨率）2.7 芯⽚规格：1/1.8英⼨彩⾊CCD2.8 ⽩平衡：⾃动/ ⼿动/ 点触式2.9 感光度：可达ISO1600*2.10 具有3CCD模式，更佳的⾊彩还原性3 图像控制分析软件3.1 采集图像：⽀持奥林巴斯多种型号专业CCD，⽀持TWAIN接⼝，界⾯直观，操作容易，使⽤户更加容易的集中精⼒关注⽣物试验过程；3.2 对图像中的直线显⽰线上灰度强度变化，从⽽反映图像中的变化特性；3.3 在图像上添加注释、箭头等功能，可以⽅便的表⽰图像中的重点关注部位；3.4 调节亮度、对⽐度、伽玛值以及灰度显⽰范围，并可以单独调节RGB各通道的亮度，⽅便地对图像添加伪彩⾊、改变⾊彩模式以及⾊阶位数等功能，可以改变图像分辨率、旋转图像等各种操作，⽀持反转、低通、⾼通、锐化等滤镜，使图像关注点和各荧光通道获得最佳的显⽰效果；3.5 对单荧光通道图⽚做⾊彩合成，⽅便显⽰多染标本的图像；*3.6 合成透射光和荧光通道图像，显⽰荧光在细胞上的定位图像；3.7 ⽅便的输⼊硬件信息即可实现添加标尺功能，从⽽显⽰图像的放⼤⽐例关系；3.8 可以做离线⽩平衡、市场平整度以及背景校正等处理，便于后期图像处理；3.9 可以对多幅视野相邻的图像做⼤图拼接，轻松获取⾼分辨率⼤视野图像；*3.10 可以实时对多幅视野相邻的图像做⼤图拼接，实时获取⾼分辨率⼤视野图像；*3.11 可以测量直线长度、曲线长度、矩形⾯积、圆⾯积、周长、⾓度等多个参数，并把测量结果输出到EXCEL，并于后期分析处理。
奥林巴斯生物显微镜的使用
奥林巴斯生物显微镜的使用发布日期：2012-07-27 来源：食品论坛浏览次数：43 核心提示：奥林巴斯生物显微镜的使用1．低倍镜的使用方法(1)取镜和放置：生物显微镜平时存放在柜或箱中，用时从柜中取出，右手紧握镜臂，左一手托住镜座,将显微镜放在自己左肩前方的实验台上，镜座后端距桌边1－2寸为宜，便于坐着操作。
(2)对光：用拇指和中指移动旋转器(切忌手持物镜移动)，使低倍镜对准镜台的通光孔(当转动听到碰叩声时，说明物镜光轴已对准镜筒中心)。
打开光圈，上升集光器，并将反光镜转向光源，以左眼在目镜上观察(右眼睁开),同时调节反光镜方向，直到视野内的光线均匀明亮为止。
(3)放置玻片标本：取一玻片标本放在镜台上，一定使有盖玻片的一面朝上，切不可放反，用推片器弹簧夹夹住，然后旋转推片器螺旋，将所要观察的部位调到通光孔的正中。
(4)调节焦距：以左手按逆时针方向转动粗调节器，使镜台缓慢地上升至物镜距标本片约5毫米处，应注意在上升镜台时，切勿在目镜上观察。
一定要从右侧看着镜台上升，以免上升过多，造成镜头或标本片的损坏。
然后，两眼同时睁开，用左眼在目镜上观察，左手顺时针方向缓慢转动粗调节器，使镜台缓慢下降，直到视野中出现清晰的物象为止。
如果物象不在视野中心，可调节推片器将其调到中心(注意移动玻片的方向与视野物象移动的方向是相反的)。
如果视野内的亮度不合适，可通过升降集光器的位置或开闭光圈的大小来调节，如果在调节焦距时，镜台下降已超过工作距离(>5.40mm)而未见到物象，说明此次操作失败，则应重新操作，切不可心急而盲目地上升镜台。
2．高倍镜的使用方法(1)选好目标：一定要先在低倍镜下把需进一步观察的部位调到中心，同时把物象调节到最清晰的程度，才能进行高倍镜的观察。
(2)转动转换器，调换上高倍镜头，转换高倍镜时转动速度要慢，并从侧面进行观察(防止高倍镜头碰撞玻片)，如高倍镜头碰到玻片，说明低倍镜的焦距没有调好，应重新操作。
IX2系列显微镜操作步骤介绍
3
4
4
4、按红色箭头方向转动 光强调整钮，调节光亮度。
三、透射光明场观察
5
三、透射光明场观察
•特点：常规观察方法 •应用：
常规的镜检、病理、染色标本。
6
三、透射光明场观察
打开卤素 灯电源
选择光 路，调 节光强
移出光 学元件
放入 标本
调节 合适 光强
＊准备工作 ——光轴中心调节
开始 观察
调节孔 径光阑
汞灯电源主开关
六、荧光观察方法
观察步骤：
1、明场条件下找到标本 （具体方法参考明场观察方法步骤）
电源指示器灯亮
2、标本定位后，打开汞灯电源供电 装置开关，从“O”拨到 “I”。
此时电源指示等亮，计时器开始运行。
为了延长高压汞灯的使用寿命，一旦启动 ，不能在少于15分钟内关闭。关闭高压汞灯 后，至少10分钟后才能再次启动。
按绿色箭头转动汞灯透镜聚焦旋钮 按黄色箭头推动ND滤色片滑块 按蓝色箭头拉推荧光反射照明器视场光阑
观察过程如不需要荧光，可以通过 光闸SHUTTER控制。
荧光反射照明 器视场光阑
ND滤色片
51
六、荧光观察方法
U-CST
准备工作：荧光中心调节
*荧光中心调节完成后不需要再调节，除非更换汞灯时，再需调节。
1、放入荧光对中标本U-CST于载物台上。
选择白色一边进入光路中。U-CST为多种荧光 染料标本。蓝光激发，视野为绿色；绿光激发， 视野为红色。
2、选择蓝色（B)荧光激发块，按黄色箭头 方向打开光闸（SHUTTER）从“●”到 “○” ，让光路通过。
荧光对中一面
3、10X物镜移入光路，对U-CST聚焦清晰。
内六角螺丝手把插入其 中转动相差环对中螺丝
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
OLYMPUS IX71倒置显微镜操作规程
编写人：於锋时间
一、目的
正确使用倒置显微镜对细胞标本的形态特征进行观察，为生命科学的研究提供更多可靠的实验数据。
二、原理
倒置显微镜系统（IX71系列）是在透镜成像原理基础上发展起来的显微观察系统，利用卤素灯为光源，光线经过聚光镜汇聚后透过标本，通过物镜对标本进行聚焦放大成像，最后通过目镜把物镜所成的像再次放大，从而使实验者能够清晰的分辨体外培养的细胞的形态以及内部结构，主要用于体外活细胞培养形态观察，根据实验需求配置了明场、暗场、相差、荧光等技术模块。
三、主要操作规程
相差观察：
1.打开主开关
2.转动光路选择盘到“眼睛”位置。
3.装上观察样本。
使用10X物镜，将聚光镜转盘转到“BF”位置。
4.瞳距调节
5.屈光度调节：通过螺旋目镜屈光度调节环。
6. 通过粗微调对样本准确调焦。
选择所用物镜，10X，20X，40X。
相差观察时转动聚光镜转盘到“PH”位置。
相差只能用10X，20X物镜观察和摄影。
7. 调节光线强度：明场观察时，调节孔径光栏。
相差观察时，打开孔径光栏
8. 观察。
荧光观察步骤：
打开荧光供电装置开关，关掉显微镜主开关。
等大约10分钟后电弧稳定。
连接UV防护板
把光路选择转盘和选择杆转到“眼睛”位置。
使相应的荧光激发滤色镜进入光路
根据标本不同，选择U，B，G激发。
打开激发光光闸使光通过把所用物镜推入光路10X，20X，40X。
把标本放在载物台上，对标本进行调焦，如果荧光衰退快，请将激发光光闸推入光路
使用1小时后关掉电源开关。
普通明场观察：
打开明场电源开关（“︱”为开，“○”为关）
将样品置于载物台上
将光路选择旋钮调至观察位置
4.从低倍镜开始观察，相差环拨到明场（BF）位置，荧光滤色块转盘拨到“1”的位置
5.调节透射光光强，调焦，找到预观察视野
6.依次换到高倍镜，观察样品
7.拍照时将光路选择旋钮调至相机位置
关机：
1. 关闭汞灯电源（注意：汞灯需使用半小时以上方可关闭，关闭半小时以后方可再次开启）
2. 将透射光强调到最小，透射光选择按钮按出
3. 关闭明场电源开关
4. 将镜头转到低倍镜，取出样品，若使用过油镜用干净的擦镜纸擦拭镜头
5. 确认数据已经保存，关闭软件
6. 使用光盘拷贝数据（禁止使用移动储存设备拷贝数据）
7. 关闭电脑，登记使用时间、荧光数字等使用情况
倒置IX71显微镜透射光明场观察步骤
观察
相
差
时，
要
使
用
与
相
差
物
镜
放
大倍数相匹配的相差环板。
相差元件（聚光镜内）PHL PH 1（PH C）PH 2
物镜4倍10倍、20倍40倍、60倍虚线框内第一次观察调整完成后不需要进行调整，除非更换相差光学元件。
倒置显微镜IX71荧光观察方法步骤
荧光观察应遵循先明场对标本定位，然后再转入荧光观察的顺序。