成年大鼠脑透析液和血清中褪黑素含量的测定
高效液相色谱法测定人血清中褪黑素的浓度
高效液相色谱法测定人血清中褪黑素的浓度胡世莲;徐维平;王卫东;胡冰;魏伟;张琦;蒋磊【期刊名称】《中国临床保健杂志》【年(卷),期】2005(008)003【摘要】目的用反相高效液相色谱法测定血清中褪黑素的含量.方法采用荧光检测器检测20例自愿者血清中的褪黑素.结果血清中褪黑素最低检测浓度为0.5pg·ml-1,检测限0.2pg,褪黑素在1.0～500pg·ml-1之间呈线性关系,回归方程Y=65744.7x-220.6(r=0.9989,P＜0.05),回收率＞94.7%,日间、日内变异系数均在10%以下.结论用反相高效液相色谱法测定血清中褪黑素的含量灵敏、快速、准确,为褪黑素在体内代谢等研究提供方法,对临床合理补充外源性褪黑素具有指导性.【总页数】3页(P193-195)【作者】胡世莲;徐维平;王卫东;胡冰;魏伟;张琦;蒋磊【作者单位】安徽省立医院,合肥,230001;安徽省立医院,合肥,230001;安徽省立医院,合肥,230001;安徽省立医院,合肥,230001;安徽医科大学;安徽医科大学;安徽医科大学【正文语种】中文【中图分类】R446.112【相关文献】1.在线二维柱切换-高效液相色谱法测定人血清中多索茶碱浓度 [J], 郑玲利;袁明勇;蒋婷;王峰;张维;陈静2.高效液相色谱法测定人血清中拉莫三嗪血药浓度的方法及拉莫三嗪个体化用药分析 [J], 李萌; 庄星星; 倪受东; 何勇3.反相高效液相色谱法测定人血清中拉莫三嗪的浓度 [J], 王晓娟;袁君;黄庆;赵伍西4.反相高效液相色谱法测定人血清中泊沙康唑的浓度 [J], 计建军;张慧;查丽;费爱丽;王小琴;蔡继明;徐少毅;王长江5.高效液相色谱法测定人血清中替考拉宁的血药浓度及其应用 [J], 王石健;夏修远因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
褪黑素对大鼠肠缺血再灌注损伤保护作用的实验研究(一)
褪黑素对大鼠肠缺血/再灌注损伤保护作用的实验研究(一)【关键词】褪黑素〔摘要〕目的：观察褪黑素对大鼠肠缺血/再灌注损伤的保护作用。
方法：成年雄性SD大鼠60只分为假手术组(10只)、缺血/再灌注组(10只)、缺血/再灌注＋褪黑素20 mg/kg组(15只)。
观察肠缺血30 min再灌注60 min后肠黏膜损伤程度，测定血中D乳酸和内毒素水平，并测定小肠组织中丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)水平和诱生型-氧化氮合酶(iNOS)活力。
结果：运用褪黑素组肠黏膜损伤程度轻，MDA、NO、iNOS和D乳酸、内毒素均低于缺血/再灌注组和溶媒组，并呈剂量依赖效应。
肠黏膜损伤程度与MDA、NO及D乳酸呈正相关。
结论：运用褪黑素对大鼠肠缺血/再灌注损伤有保护作用，效应呈剂量依赖性。
这种作用的部分原因可能是褪黑素抑制了NO的过度生成。
〔关键词〕褪黑素；缺血/再灌注；肠屏障；一氧化氮Experimental Study on the Protective Effects of Melatonin on Intestinal Ischemiareperfusion Injury in RatsAbstract：Objective The purpose of this study was to assess the protective effect of melatonin on intestinal ischemiareperfusion (IIR)injury in rats.Methods IIR injury was induced by clamping the superior mesenteric artery in rats for 30 min,follow by relase of the clamp(reperfusion),Melatonin(10 mg/kg,20 mg/kg)or vehicle(control 2% alcohol)was administered twice,5 min prilr to reperfusion and 30 min after the reperfusion period,At 60 min after reperfusion,rats were decapitated.Serum samples were decapitated.Serum samples were taken for hisological examination or the detdrmination ofmalondialdehyde(MDA),nitric oxide(NO),catalase(CAT)and inducible isoform of nitric oxide synthase(iNOS)activity Plasma Dlactate and endotoxin concentrations were measured for the eva lration of intestinal permeability.Results Compared with the shamoperation group,Dlactate,endotoxin and MDA,NO,iNOS were significantly increased,white CAT was decreased in ischemiareperfusionjpared with ischemiareperfusion group and vehicle administered group,these changes were reverted to some degree by treatment with melatonin in a dosedependent menner.Thehistopathologic results were consistent with the biochemical markers.Conclusion Melatotin protects effectively intestine from ischemiareperfusion injury,the reason may inhibit the production of nitric oxide,and this effect is exerted in a dosedep endent manner.Key words：Melatonin;Ischemiareperfusion;Intestine barrier;Nitric oxide肠缺血/再灌注损伤不仅导致肠道局部组织坏死、凋亡，还将引发全身炎性反应失控，对其他器官组织产生广泛影响，严重者会导致多器官功能障碍综合征〔1，2〕。
微透析_高效液相色谱法测定大鼠脑脊液中4种氨基酸的含量测定
本实验采用微透析技术 将透析 探针埋 入动物 的脑中, 透 析探针可除去分子量大 于 30 000 的 分子 [ 4, 5] , 对周围 组织损 伤 很小, 取 样 量少, 并 且 多位 点 多时 点采 样 进行 动态 监 测。 样品不经预处理, 灌流速度稳定在 31 0 L L /m in可使回收率提 高。
雄性 SD大鼠以水合氯醛 ( 400 m g/kg)腹 腔麻醉, 固定在 立体 定 位 仪 上, 将 透 析 套 管 定 位 于 右 侧 纹 状 体 (前 囟 前 01 2 mm, 旁开 315 mm, 皮层下 512 mm )并 用小螺钉 固定。开 启透析灌流系统, 调节恒 流泵控制液流速 310 LL# m in- 1, 透 析探针与人工脑脊液灌 流系统 直接相 接。灌流平 衡 120 m in 后, 每 15 m in收 集 1管, 每管 30 LL, 共收 集 8管透 析液。收 集的透析液立即放 入 - 20 e 冰箱保存。 6 OPA 柱前衍生
的含量。结果: 该体系可在 30 m in内对脑脊液 中 4种氨 基酸实现良 好的分离, 4种 氨基酸在 01625- 10 Lmol/L浓
度范围内与色谱峰面积线性关系良好, 保留时间分别是天门冬氨酸 41392 m in、谷氨酸 51592 m in、牛磺酸 131 625 m in、
C - 氨基丁酸 141833 m in。结论: 本方法准确、灵敏、方便、重复性好, 可用于微透析样品中氨基酸的含量测定。
液相分析采 用梯 度洗 脱, 缩短 分析 时间, 改 善峰 形 和提 高样品的检测灵敏 度。选用 KH 2 PO4 缓 冲液 配制流 动相, 其 浓度为 01 1 m ol/L, 如果浓度 过高会 破坏键 合相的 稳定性, 对 色谱柱的损 害较 大。另外, 缓 冲液 一 定要 用低 浓度 的, 临用 前现 配, 并 用 01 22 Lm 滤 膜 过 滤。水 用 超 纯 水 系 统 去 除 杂质。
褪黑素对糖尿病肾病大鼠肾脏的影响
褪黑素对糖尿病肾病大鼠肾脏的影响刘昌明;邓良超;孙玉锦【期刊名称】《西南军医》【年(卷),期】2018(020)003【摘要】目的探讨褪黑素对大鼠糖尿病肾病肾脏的影响.方法将24只大鼠只随机分为正常(NC)组、糖尿病肾病(DN)组和褪黑素(Mel)组.DN组、Mel组采用一次性腹腔注射STZ30mg/kg,给予高脂饮食;NC组注射等体积的柠檬酸缓冲液,给予普通饲料.禁食6小时后,Mel组、DN组给予褪黑素20mg/kg/d,NC组给予等量含有2％乙醇的生理盐水溶液灌胃,连续6周后,检测FBG;心脏采血检测血BUN、Scr、24hUP;Western blot法检测caspase-3蛋白;肾组织匀浆检测MDA、SOD、GSH-Px;组织切片观察大鼠肾组织形态学变化,TUNEL检测细胞凋亡指数(AI).结果与NC组比较,DN组FBG、BUN、Scr和24hUP显著升高(P＜0.05),AI增高(P＜0.05);形态学显示肾小管上皮细胞水肿,内皮细胞和系膜细胞增生显著,基底膜增厚,肾小球纤维化,间质纤维组织增生;与DN组比较,Mel组BUN、Scr、24hUP均明显降低(P＜0.05),肾组织SOD、GSH-Px活性明显升高(P＜0.05),MDA含量明显降低(P＜0.05),AI显著降低(P＜0.05);形态学显示肾小管水肿较明显减轻,纤维化有明显的改善.结论褪黑素可通过减轻氧化应激损伤和减少肾脏细胞凋亡,对大鼠DN 肾脏具有一定的保护作用.【总页数】4页(P360-363)【作者】刘昌明;邓良超;孙玉锦【作者单位】625000四川雅安,雅安职业技术学院基础医学部;625000四川雅安,雅安职业技术学院基础医学部;625000四川雅安,雅安职业技术学院基础医学部【正文语种】中文【中图分类】R587.1【相关文献】1.褪黑素对糖尿病大鼠肾脏抗氧化物酶的影响 [J], 涂晓文;陈英剑;张爱平;胡成进;王艳侠2.褪黑素和维生素E对早期糖尿病大鼠肾脏氧化应激的影响 [J], 舒毅;钟历勇;石立3.复方积雪草对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用及对血红素加氧酶-1、NADPH氧化酶4蛋白表达的影响 [J], 朱勤;陈洪宇;曾佳丽;李晓虹;王永钧;杨洪涛4.缬沙坦对糖尿病肾病大鼠MEK/ERK/Nrf2通路及肾脏纤维化的影响 [J], 谢飞;周美兰5.醋酸泼尼松对糖尿病肾病模型大鼠肾功能、肾脏炎性反应及AMPK/SIRT1信号通路的影响 [J], 邓九红;郑超;王声遥;王心怡因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
褪黑素抑制实验性老化大鼠海马注射Aβ_(1-40)毒性作用
褪黑素抑制实验性老化大鼠海马注射Aβ_(1-40)毒性作用谢桂琴;孙秀兰;田苏平;陈启盛【期刊名称】《中国神经科学杂志》【年(卷),期】2003(19)3【摘要】目的 :观察褪黑素 (melatonin ,MT)对实验性老年性痴呆大鼠的防治作用。
方法 :连续 6周腹腔内注射D 半乳糖 ,双侧海马内注射Aβ1 4 0 造成AD模型。
以Y 型迷宫、一次性被动回避实验检测大鼠的学习记忆行为 ,测定大脑皮层脂褐素含量以及海马线粒体膜流动性、SOD活性、MDA含量 ,电镜观察海马超微结构。
结果 :褪黑素可显著改善痴呆大鼠的学习记忆障碍 ,明显逆转海马SOD活性、MDA含量及皮层脂褐素含量相对其正常水平的增高 ,阻抑海马神经元的变性及凋亡。
结论 :褪黑素可能通过影响自由基水平对实验性老年性痴呆大鼠有一定的防治作用。
【总页数】4页(P167-170)【关键词】褪黑素;实验;大鼠;Aβ1-40;神经毒性;老年性痴呆;海马内注射;阿尔茨海默病【作者】谢桂琴;孙秀兰;田苏平;陈启盛【作者单位】南京医科大学生理系【正文语种】中文【中图分类】R746.16;R977.1【相关文献】1.凝聚态Aβ1-40海马内注射致AD大鼠在体神经毒性作用 [J], 姜礼红;张一娜;宋芳芳;郭达云2.Aβ1-40脑内注射对大鼠海马Na+-K+-ATP和Ca2+-ATP酶活性的影响及加减地黄饮子的干预作用 [J], 牛英才;谢宁3.红景天素、褪黑素抑制实验性老化大鼠海马注射Aβ1-40毒性作用 [J], 谢桂琴; 孙秀兰; 田苏平; 陈启盛4.Aβ_(1-40)脑内注射对大鼠海马超氧化物歧化酶丙二醛的影响及通络救脑口服液的干预作用 [J], 张晓杰;张春庆;胡南;宫国良;李澎涛5.天麻素对海马内Aβ_(1-40)注射阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆的改善作用 [J], 柳星;汪萌芽因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
电针对慢性应激模型大鼠血清褪黑素含量的影响
ｔ ｈ ｅ ｃ ｏ ｎ ｔ ｅ ｎ ｔ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ ｍｅ ｌ ａ ｔ ｏ ｎ ｉ ｎ ｉ ｎ ｒ ａ ｔ ｓ ｅ ｒ ｕ ｍ．Ｒｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ ：ｃ ｏ ｍｐ ａ ｒ ｅ ｄ ｗｉ ｔ ｈ ｃ ｏ ｎ ｔ ｒ ｏ ｌ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ， ｔ ｈ ｅ ｃ ｒ ｏ ｓ ｓ ｉ ｎ ｇ ｎ ｕ ｍｂ ｅ ｒ ｓ ｏ ｆ ｍｏ ｄ ｅ ｌ
ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ４ － ７ ４ ５ Ｘ ． ２ ０ １ ４ ． ０ ２ ． ０ ０ ５
【 摘要 】目的 观 察电针针刺百会 、 印堂对慢性应激模型大 鼠血 清中褪黑素 （ ＭＴ ） 含量 的影 响 ， 探究 电针 抗抑
郁 的作 用 机 制 。 方 法 将 ２ ４只 Ｓ Ｄ 雄 性 大 鼠随 机 分 为 空 白对 照 组 、 模 型 对 照 组 与 电针 治 疗 组 ， 采 用 慢 性 轻 度 不 可 预 见 性 应 激 和 孤 养 方法 复制 抑 郁 症 模 型 ， 通 过 开 野 实 验 观 察 大 鼠的 行 为 学 变 化 ， 应 用 酶 联 免疫 吸 附 法 对
ｄ ｅ ｐ ｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ ． Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ ：２ ４ Ｓ Ｄ ｒ ａ ｔ ｓ ｗ ｅ ｒ ｅ ｒ ａ ｎ ｄ ｏ ｍｌ ｙ ｄ ｉ ｖ ｉ ｄ ｅ ｄ ｉ ｎ ｔ ｏ ｔ ｈ ｒ ｅ ｅ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ ｓ ： ｃ ｏ ｎ ｔ ｒ ｏ ｌ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ， ｍｏ ｄ ｅ ｌ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ， ａ ｎ ｄ ｅ ｌ ｅ ｃ — ｔ ｒ ｏ ａ ｃ ｕ ｐ ｕ ｎ ｃ ｔ ｏ ｒ ｅ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ ．Ｏ ｐ ｅ ｎ － ｉ ｆ ｌ ｅ ｄ ｔ ｅ ｓ ｔ ｗ ａ ｓ ｕ ｓ ｅ ｄ ｔ ｏ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｔ ｈ ｅ ｂ ｅ ｈ ａ ｖ ｉ ｏ ｒ ｓ ｏ ｆ ｒ ａ ｔ ｓ ． ＥＬ Ｉ Ｓ Ａ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｗａ ｓ ｕ ｓ ｅ ｄ ｔ ｏ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ
褪黑素对大鼠局灶性脑缺血后NO含量和NOS活性的影响及其机制
褪黑素对大鼠局灶性脑缺血后NO含量和NOS活性的影响及其机制汪丽华;陈金和;吴基良;李立中【期刊名称】《湖北科技学院学报（医学版）》【年(卷),期】2002(016)001【摘要】目的探讨褪黑素对大鼠局灶性脑缺血后NO含量和NOS活性变化的影响及机制.方法用线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型.大鼠随机分为假手术组(阴性对照组),缺血组,褪黑素组(给药组)(4mg/kg)),尼莫地平组(阳性药物对照组)(0.2mg/kg),缺血前30分钟舌下静脉给药.持续性缺血30分钟,6小时,24小时后处死动物,测定NO含量和NOS活性(用分光光度法).结果 MCAO后,缺血30分钟NO含量及NOS活性升高,缺血6小时降低,24小时再度升高.与模型组比较,缺血30分钟,褪黑素使NO含量及NOS活性升高,6小时、24小时降低.结论褪黑素对大鼠局灶脑缺血有一定的保护作用,其机制可能与降低脑组织中NO含量和NOS 活性,减轻脑组织自由基的损伤有关.【总页数】3页(P11-13)【作者】汪丽华;陈金和;吴基良;李立中【作者单位】武汉大学医学院,武汉,430071;武汉大学医学院,药理学教研室,武汉,430071;咸宁医学院药理学教研室;咸宁医学院药理学教研室【正文语种】中文【中图分类】R961【相关文献】1.褪黑素对局灶性脑缺血大鼠扩散加权成像及脑组织中Fas、FasL、活性Caspase-3蛋白表达的影响 [J], 王海宇;陈岚芬;王晓莉;闫少珍;牟青杰;赵岩松2."手十二井穴"刺络放血对大鼠局灶性脑缺血后SOD活性和MDA含量的影响 [J], 黄碧兰;余良主;刘寿仙;王帮华3."手十二井穴"刺络放血对大鼠局灶性脑缺血后NO含量和NOS活性的影响 [J], 黄碧兰;程静4.银杏叶提取物(EGB)对大鼠局灶性脑缺血再灌注后SOD活性和MDA含量的影响 [J], 王淑英;王小江;金维哲;佟春玲;李尧5.腺苷预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注后线粒体活性氧含量及线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅲ活性和脑组织总抗氧化能力的影响 [J], 赵欣;裴科阳;谭军因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
褪黑素对大鼠下丘脑_垂体_甲状腺轴相关激素及组织超微结构的影响_宝轶
结果 : 药物干预后第 1、 2、 3 周, 中、 高剂量 M el 干预组血清 T 4 、 FT 3 、 FT 4 、 T SH 水平明显低于对照组及低剂量 M el 干预组 ( P <
0. 01) ; 中 、 高剂量 M el 干预组血清 T 4 水平逐周降低 ( P < 0. 01) ; M el 干预 2 周后 T SH 水平下降 , 第 3 周与前 2 周相比差异有统 计学意义 ( P < 0. 01) 。 M el 干预后第 1 、 2、 3 周 , 高剂量 M el 组 proT RH mRN A 表达 水平低于正 常对照组 ( P < 0. 01) , 并 随给药 时间的延长 , pro T RH mRN A 表达水平呈先降低后升高的趋势 ; 下丘脑 、 垂体 、 甲状腺组织超微结构无明显变化 。 结论: 中 、 高 剂量褪黑素抑制下丘脑 - 垂体 - 甲状腺轴相关激素分泌 , 但对各组织超微结构影响不大 。 [ 关键词 ] 褪黑素 ; 下丘脑 - 垂体 - 甲状腺轴 ; 激素 ; 超微结构 R 584 [ 文献标志码 ] A [ 文章编号 ] 0258- 879X( 2009) 09- 1009- 04 [ 中图分类号 ]
hy po thalamus- pituitary - t hy ro id ax is ( H PT A ) in r ats. Methods: A to tal of 60 male Sprag ue - Daw ley r ats w ere ev enly rando mized into fo ur g roups: contro l, lo w- dose M el( 0. 5 mg - do se M el( 50 mg
3 [ 7]
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
成年大鼠脑透析液和血清中褪黑素含量的测定孟涛;郑志竑;叶婧;林玲【摘要】目的：采用高效液相色谱（HPLC）‐荧光法和酶联免疫（ELISA）法测定成年大鼠脑微透析液及血清中的褪黑素（MLT）含量，比较2种检测方法的灵敏性、准确性及可靠性。
方法将微透析引导管置入正常成年大鼠纹状体内1周后，采用脑微透析技术动态收集2：00，6：00，10：00，14：00，18：00和22：00的透析液，并于次日22：00行尾静脉取血；用HPLC‐荧光法和ELISA法分别测定透析液及血清样本中的MLT水平。
结果HPLC‐荧光法测定MLT检出限为0．1 pg／mL ，在1．0～500 pg／mL之间呈线性关系，回归方程 y＝10446 x ＋8603．5（r＝0．9987，P＜ 0．001），日间、日内精密度均＜6％；ELISA 法检出限为5．92 pg／mL ，检测线性范围为12．35～1000 pg／mL。
用HPLC‐荧光法测定2：00，6：00，10：00，14：00，18：00和22：00大鼠脑透析液中的MLT含量分别为（32．99 ± 2．22），（18．25 ± 2．27），（4．03 ± 1．70），（2．92 ± 1．08），（12．08 ± 1．77）和（21．83 ± 2．04）pg／m L ，具有明显的昼夜节律性，探针回收率为12％～13％；22：00血清中的MLT含量为（82．62 ± 8．09）pg／mL ，提取回收率＞90％，且血清与透析液中的MLT水平呈高度正相关（r＝0．987，P＜0．001）；用ELISA法测定血清中的MLT含量为（81．31±9．62）pg／mL ，且用2种方法测定血清中MLT差别无统计学意义（P＝0．115）。
结论用HPLC‐荧光法测定大鼠脑微透析液和血清中的MLT 含量具有灵敏、快速、准确、重复性好等特点，且HPLC‐荧光法和ELISA法测定血清中的MLT具有较好的一致性。
%Objective To determine brain dialysate and serum melatonin (MLT ) levels in adult rats by high‐performance liquid chromatography (HPLC) with fluorescencedetection and enzyme‐linked immunosorbent a ssay (ELISA) ,and compare the sensitivity ,accuracy and reliability of the two detection methods . Methods The guide tube was implanted into the striatum of healthy adult rats . One week af‐ter implantation ,dialysate samples were collected at2 :00 ,6:00 ,10 :00 ,14:00 ,18 :00 ,22 :00 h in stria‐tum by brain microdialysis . Blood samples were collected from the rat tail vein at 22 :00 h on the follow‐ing day . HPLC with fluorescence detection and ELISA were applied to detect dialysate and serum MLT levels . Results The lowest concentration of MLT that can be detected by HPLC with fluorescence de‐tection was 0 .1 pg/mL . There was a regressive equation y=10 446 x+8 603 .5 (r=0 .998 7 ,P<0 .05) in linear range 1 .0~500 pg/mL of MLTlevels ,with an intra‐assay and inter‐assay of below 6% . The detection limit of MLT by ELISA was 5 .92 pg/mL ,and the detection range was 12 .35~1 000 pg/mL . The mean concentrations of dialysate MLT that showed a distinct fluctuation were (in pg/mL )(32.99±2.22),(18.25±2.27),(4.03±1.70),(2.92±1.08),(12.08±1.77),(21.83±2.04 )at2:00, 6 :00 ,10:00 ,14:00 ,18:00 and 22 :00 h by HPLC with fluorescence detection . The recovery of the probes was from 12% to 13% . Besides ,the mean concentration of serum MLT was (82 .62 ± 8 .09) pg/mL by t his method . The extraction recovery of serum MLT was more than 90% . There was a distinct positive correlation between serum MLT and dialysate MLT levels at 22:00 pm ,and pearson’s correlation coeffi‐cient between the two was 0 .987 at the 0 .001 level (t wo‐tailed) .In addition ,the mean concentration of serum MLT was (81 .31 ± 9 .62) pg/mL by ELISA . Therewas no significant difference in serum MLT levels between the two methods (P=0 .115) . Conclusion These data suggest that HPLC with fluores‐cence detec tion may be sensitive ,rapid ,accurate and reproducible in determination for M L T levels in dia‐lysate and serum samples ,and serum MLT levels by HPLC with fluorescence detection may be consistent with those by ELISA .【期刊名称】《福建医科大学学报》【年(卷),期】2015(000)002【总页数】5页(P67-71)【关键词】褪黑激素;色谱法;色谱法 ,高压液相;酶联免疫吸附测定;透析液;血清【作者】孟涛;郑志竑;叶婧;林玲【作者单位】福建医科大学神经生物学中心，福州 350108; 中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所化学污染与健康安全重点实验室，北京 100050;福建医科大学神经生物学中心，福州 350108;福建医科大学神经生物学中心，福州350108;福建医科大学神经生物学中心，福州 350108【正文语种】中文【中图分类】R-332;R347;R977.1褪黑素（melatonin，MLT）主要是由松果体分泌的一种吲哚类激素，具有明显的昼夜节律性，分泌高峰在夜间，白天分泌减少，且合成与分泌受光／暗周期信号、神经系统等因素的调节[1－2]。
松果体分泌MLT后立即释放入脑脊液和血液，并与广泛分布在中枢神经系统与外周组织器官靶细胞膜上的MLT受体相结合，参与机体的生长、发育、成熟和衰老等生命过程。
既往的研究主要针对MLT功能以及血清和松果体MLT含量变化；近年来，研究者开始关注脑脊液中MLT的动态变化、脑内MLT与血清MLT的相关性。
本研究以正常成年大鼠为研究对象，将引导管置入前脑纹状体内，采用脑微透析技术动态收集透析液样本，并采集大鼠尾静脉血；用高效液相色谱（high－performance liquid chromatography，HPLC）－荧光法测定大鼠体内的MLT，并分析脑透析液与血清中MLT之间的相关性；同时用酶联免疫法（enzyme－linked immunosorbent assay，ELISA）测定血清中MLT含量，比较2种检测方法的一致性，为进一步了解体内MLT的分泌模式、MLT含量的测定提供一种更为合理、有效的方法。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 动物 8只健康雄性SD大鼠，体质量为（200±20）g[上海斯莱克实验动物公司，许可证号：SCXK（沪）2007－0005]。
大鼠在（23±2）℃、30%～45%湿度下置于无菌层流架内饲养，光暗周期12h／12h，自由饮食饮水。
1.1.2 试剂 ELISA试剂盒（美国Uscnk公司）；MLT标准品（美国Sigma公司）；甲醇和三氯甲烷（德国Merck公司）；实验用水为Millipore超纯水；其他均为国产试剂。
1.1.3 仪器大鼠脑立体定位仪（SR－5M，日本Narishige公司）；微透析探针及脑微透析系统（CMA12，瑞士CMA 公司），探针外径0.5mm、膜长4mm；反相色谱柱（Smart RPC18，美国Grace公司）；HPLC（Waters 600）及荧光检测系统（Waters 2475）（美国 Waters公司）；酶标仪（FLx800，美国BioTek 公司）。
1.2 方法1.2.1 HPLC－荧光法 MLT 流动相成分为Na2HPO435.8g／L，EDTA·2Na 0.372g／L 和30%甲醇，pH 6.4，检测系统为Waters 2475荧光检测器和Smart RPC18反相色谱柱（150mm×4.6mm，粒径5μm），利用单泵恒流洗脱，柱温为30℃，流速为0.9mL／min。