植物全氮的检测测定
植株全氮、全磷、全钾的测定
植株全氮、全磷、全钾的测定一、待测液的制备（H2SO4—H2O2消煮法）二、植株全氮的测定（H2SO4—H2O2消煮，蒸馏法）三、植株全磷的测定（H2SO4—H2O2消煮，钒钼黄比色法）四、植株全钾的测定（H2SO4—H2O2消煮，火焰光度法一、待测液的制备（H2SO4—H2O2消煮法）1 H2SO4—H2O2消煮原理植物样品在浓H2SO4溶液中，经过脱水、碳化、氧化等一系列的作用后，易分解的有机物则分解，然后再加入H2O2，H2O2在热的浓H2SO4溶液中会分解出新生态氧，具有强烈的氧化作用，可继续分解没被H2SO4破坏的有机物，使有机态氮全部转化为无机铵盐。
同时，样品中的有机磷也转化为无机磷酸盐，故可用同一消煮液分别测定N、P、K（植株中K以离子态存在）。
2 主要仪器：万分之一电子天平、0.5 mm筛、三角瓶（50ml）或消煮管、移液管（5、10ml）+吸耳球、弯颈小漏斗、消煮炉、吸管、漏斗、无磷钾滤纸、容量瓶（100ml）2 试剂：浓硫酸（GB T625）：化学纯、比重1.8430%H2O2（GB 6684）：阴凉处存放3 操作步骤称取烘干、磨细的植物样品(过0.5 mm筛)0.19g，置于50ml三角瓶（或消煮管）底部（勿将样品粘附在瓶颈上），加浓硫酸5mL，摇匀（最好放置过夜），瓶口盖一弯颈小漏斗，在电炉上先缓缓加热，待浓硫酸分解冒大量白烟时再升高温度（在消煮炉上先250℃消煮—温度稳定后计时，时间约30min，待浓硫酸分解冒大量白烟时再升高温度至400℃）。
消煮至溶液呈均匀的棕黑色时，取下三角瓶，稍冷后提起弯颈漏斗，滴加30%H2O210滴，并不断摇动三角瓶。
再加热(微沸)约7-10 min，取下，稍冷后重复滴加30%H2O25~10滴，再消煮。
如此反复进行3-5次，每次添加的H2O2应逐次减少，消煮至溶液呈无色或清亮后，再加热5-10min（以赶尽剩余的H2O2)，取下三角瓶冷却，用少量水冲洗漏斗，洗液流入三角瓶中。
植物全氮、磷、钾的测定
植物全氮、磷、钾的测定植物中氮、磷、钾的测定包括待测液的制备和氮磷钾的定量两大步骤。
植物全氮待测液的制备通常用开氏消煮法(参考有机肥料全氮的测定)。
植物全磷、钾可用干灰化或其他湿灰化法制备待测液。
本书介绍H2SO4—H2O2消煮法，可用同一份消煮液分别测定氮、磷、钾以及其它元素(如钙、镁、铁、锰等)。
一、植物样品的消煮(H2SO4—H2O2法)方法原理植物中的氮磷大多数以有机态存在，钾以离子态存在。
样品经浓H2SO4和氧化剂H2O2消煮，有机物被氧化分解，有机氮和磷转化成铵盐和磷酸盐，钾也全部释出。
消煮液经定容后，可用于氮、磷、钾等元素的定量。
本法采用H2O2加速消煮剂，不仅操作手续简单快速，对氮磷钾的定量没有干扰，而且具有能满足一般生产和科研工作所要求的准确度，但要注意遵照操作规程的要求操作，防止有机氮被氧化成N2或氮的氧化物而损失。
试剂：(1)硫酸(化学纯、比重1.84)(2)30%H2O2（分析纯)操作步骤：(1)常规消煮法称取植物样品(0.5mm)0.3～0.5g(准确至0.0002g)装入100m l开氏瓶的底部，加浓硫酸5m l，摇匀(最好放置过夜)，在电炉上先小火加热，待H2SO4发白烟后再升高温度，当溶液呈均匀的棕黑色时取下，稍冷后加6滴H2O2，再加热至微沸，消煮约7—10 分钟，稍冷后重复加H2O2再消煮，如此重复数次，每次添加的H2O2应逐次减少，消煮至溶液呈无色或清亮后，再加热约10分钟，除去剩余的H2O2，取下冷却后，用水将消煮液无损转移入100ml容量瓶中，冷却至室温后定容(V1)。
用无磷钾的干燥滤纸过滤，或放置澄清后吸取清液测定氮、磷、钾。
每批消煮的同时，进行空白试验，以校正试剂和方法的误差。
(2)快速消煮法称取植物样品(0.5mm)0.3～0.5g(称准至0.0002g)，放入100m l 开氏瓶中，加1ml水润湿，加入4ml浓H2SO4摇匀，分两次各加入H2O22ml，每次加入后均摇匀，待激烈反应结束后，置于电炉上加热消煮，使固体物消失成为溶液，待H2SO4发白烟，溶液成褐色时，停止加热，此过程约需10 分钟。
植物总氮测定
13.2.1 .1 植株全氮的测定(不包括硝态氮， H2SO4- H2O2消煮，奈氏比色法)[4]13.2.1.1.1 方法原理植物样品在浓H2SO4溶液中，历经脱水碳化、氧化等一系列作用，而氧化剂H2O2在热浓H2SO4溶液中分解出的新生态氧(H2O2——H2O2+ [O])具有强烈的氧化作用，分解H2SO4没有破坏的有机物和碳。
使有机氮、磷等转化为无机铵盐和磷酸盐等，因此可以在同一消煮液中分别测定N、P、K等元素的联合测定。
该消煮液除可用半微量蒸馏法定氮外，还可用奈氏比色法测定溶液中氮的含量。
奈氏(Nessler)比色法的原理如下：待测液中的铵在pH=11的碱性条件下，与奈氏试剂作用生成桔黄色配合物，其反应式如下：KOH2KI + HgI2 —— K2HgI4(奈氏试剂)K2HgI4 + 3KOH + NH3 —— Hg2O(NH4I) (桔黄色) + 7KI + H2O上述显色过程受溶液pH的影响很大，溶液pH=4时不显色，从pH=4~11之间随pH升高而颜色加深，pH=11时显色完全，其桔黄色的深浅在显色液NH4＋-N的浓度在0.2~3mg·L-1时符合比耳定律。
凡是在测定溶液中引起混浊的物质中Ca2+、Mg2+、Fe3+、S2-以及酮、醇等，在植物分析中主要是Ca2+、Mg2+离子的干扰，可加酒石酸钠配合掩蔽。
13.2.1.1..2主要仪器开氏瓶(100mL)；控温消化炉，721分光光度计。
13.2.1.1.3 试剂（1）基本试剂：浓H2SO4； 300g·L-1 H2O2；100 g·L-1酒石酸钠溶液；100 g·L-1 KOH溶液；（2）奈氏试剂：溶解HgI2 45.0g 和 KI 35.0g于少量水中，将此溶液洗入1000mL容量瓶，加入KOH 112g，加水至800mL，摇匀，冷却后定容。
放置数日后，过滤或将上清液虹吸入棕色瓶中备用。
（3） 100 μg·mL-1N(NH4+-N)标准溶液：称取烘干NH4Cl(分析纯) 0.3817g溶于水中，定容为1000mL，此为100 μg·mL-1N(NH4+-N) 贮备液。
植株全氮、全磷的测定
植株全氮、全磷的测定测N仪器操作一、测定方法:1、称样前过100目筛,然后将试管洗净,排号,烘干。
2、称样品0.5000g,并做好记录,称K2SO4 4.5g ,CuSO4*5H2O 0.5g ,或者将两种药品按比例混好过筛后,一次性加入 5 g 混合药品。
不论是先加药品还是称样,都必须在其后将两者摇匀,还要求称好的样全部送至试管底部,加了10 ml 硫酸后继续摇匀,在放到机子上去消煮,否则误差较大。
3、消煮:插上电源后按开关---执行---等40 min后420℃时放样---将水开到最大---打开风机和电动风阀(1 h)。
4、消煮后先放到架子上冷却,再将上面的盖子取下冷却至无白雾。
5、硼酸:1 %:50g溶于5000 ml 水,将配好的35ml甲基红试剂和50ml溴甲酚绿加入5000ml硼酸。
甲基红和溴甲酚绿都是称 1 g溶解到1000ml无水乙醇中。
6、NaOH:一瓶默认500g + 1250ml水。
7、0.1mol/L的标准酸:吸取15ml浓硫酸定容到5000ml,即约为0.0558mol/L的硫酸,换算为标准酸约为0.1116mol/L 的标准酸。
8、标准酸的标定:取少许无水碳酸钠于烧杯,在180--200℃下烘4—6小时,取出放干燥瓶冷却至室温,然后称取约0.22 g 于250毫升锥形瓶中,加50毫升水溶解,各加1--2滴甲基红和溴甲酚绿指示剂,用配好的标准酸滴定,在出现红色后加热一些、冷却,反复直至红色不退去为止,记录用量V。
滴定做三个重复还有一个空白。
标准酸浓度计算:C=0.22/(0.05299*V)标定好的标准酸浓度约为0.1115---0.1117mol/L的H+浓度,开机后可以按右上方的∟● 键,输入计算好的标准酸浓度即可。
二、仪器操作:1、开机按钮:按回车键等几分钟,机子自检完成---self-fest-按手型设置键----定到Receiver---回车键,等颜色(中间瓶)与硼酸颜色相同时将机子盖打开。
植物全氮、全磷、全钾含量的测定
令狐采学实验报告课程名称：土壤学实验指导老师：倪吾钟成绩：__________________实验名称：植物全氮、全磷、全钾含量的测定 同组学生姓名：余慧珍一、实验目的和要求二、实验内容和原理三、实验材料与试剂四、实验器材与仪器五、操作方法和实验步骤六、实验数据记录和处理 七、实验结果与分析八、讨论、心得一、 实验目的和要求1. 掌握植物样品消煮液制备方法；2. 掌握植物全氮、磷、钾的测定与结果分析。
二、 实验内容和原理1. 植物样品消煮——H2SO4-H2O2消煮法在浓H2SO4溶液中，植物样品经过脱水、碳化、氧化等作用后，易分解的有机物则分解。
再加入H2O2 ，H2O2在热浓H2SO4溶液中会分解出新生态氧，具有强烈的氧化作用，可继续分解没被H2SO4破坏的有机物，使有机态氮全部转化为无机铵盐。
同时，样品中的有机磷也转化为无机磷酸盐，植株中K 以离子态存在。
故可用同一消煮液分别测定N 、P 、K 。
2. 植株全氮的测定——靛酚蓝比色法令狐采学专业： 农资1202 姓名： 平帆 学号： 3120100152装订线经消煮待测液中氮主要以铵态氮存在，被测物浸提剂中的NH4+，在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚反应，生成水溶性染料靛酚蓝，其深浅与溶液中的NH4+－N含量呈正比，线性范围为0.05-0.5mg/l之间。
3.植株全磷的测定——钒钼黄比色法经消煮待测液中磷主要以磷酸盐存在，在酸性条件下，正磷酸能与偏钒酸和钼酸发生反应，形成黄色的三元杂多酸—钒钼磷酸[1]。
溶液黄色稳定，黄色的深浅与磷的含量成正相关。
4.植株全钾的测定——火焰光度计法消煮待测液中难容硅酸盐分解，从而使矿物态钾转化为可溶性钾。
待测液中钾主要以钾离子形式存在，用酸溶解稀释后即可用火焰光度计测定。
三、实验器材与仪器样品：三叶草，取于东七教学楼南侧，研磨过18目筛备用；试剂：浓硫酸、300g/l H2O2、6mol/l NaOH溶液、0.2%二硝基酚指示剂、酚溶液、次氯酸钠溶液、铵标准溶液（准确称量0.3142g 经105℃干燥2h的氯化铵（NH4Cl），用少量水溶解，移100mL 容量瓶中，用吸收液稀释至刻度。
项目 植物中全氮的测定
项目植物中全氮的测定氮是植物的主要营养元素，植物的氮素营养状况是关系到其生长和产量形成与品质改善的重要因素，因此，掌握作物全氮含量，在生产和科研上有其重要的意义。
一般植物含氮占干物重的0.3-5%，因作物种类、器官、发育时期不同而异，植物体内的氮素主要以有机氮如蛋白质和氨基酸等形态存在于植物组织中，所以植物全氮的测定可用蒸馏法、扩散法、比色法等，通常用蒸馏法最多。
以H2SO4—混合加速剂消煮法和H2SO4—H2O2消煮法两种消煮方法最常用。
同时适应蒸馏法、扩散法、比色法等方法的测定。
混合加速剂消煮是一种公认的标准方法；H2SO4—H2O2消煮法的消煮液可同时适应N、P、K 测定。
1教学目标通过对本实验项目的教学，要求学员实现如下目标：1.1掌握本实验项目测试所用试剂的性质、配制方法、贮存及使用方法；1.2掌握本实验项目测试所用仪器的使用方法及注意问题；1.3掌握本实验项目测试取样方法、处理方法以及称取方法；1.4掌握本实验项目测试原理及操作流程。
2教学任务使学员能够利用本实验项目的方法，独立完成对植物样品中全氮含量的测试分析。
下面介绍上述两种消煮定氮方法，可供选用。
3方法一H2SO4—混合加速剂消煮•蒸馏法3.1实践操作3.1.1主要仪器分析天平（感量0.0001 mg）、消煮炉、半微量定氮器、半微量滴定管、三角瓶(150 ml)等。
3.1.2试剂准备(1)浓H2SO4（化学纯，比重1.84，无氮）。
(2)10 mol·L-1 NaOH溶液：称取NaOH 420 g于硬质烧杯中，加400 ml蒸馏水溶解，不断搅拌，使其全部溶解，冷却后转入塑料瓶中，加塞，防止吸收CO2，放置几天后待碳酸钠沉淀后，将全部清液吸入盛有160 ml左右的无CO2的水的烧杯中，加去CO2的水至一升，贮存于塑料瓶中。
(3)甲基红—溴甲酚绿混合指示剂：称取溴甲酚绿0.5g，甲基红0.1g溶于100 ml乙醇中。
(4)2%H3BO3指示剂溶液：20 g H3BO3（化学纯）溶于1升水中。
森林植物与森林枯枝落叶层全氮的测定
森林植物与森林枯枝落叶层全氮的测定
森林植物与森林枯枝落叶层全氮的测定可以使用以下步骤：
1. 野外采样
在调查森林植物全氮时，需要在不同种类的植物中采集样品。
同时，也需要采集不同程度的森林枯枝落叶层。
可以使用锄头或刀具将植物根系和枯落物层收集到不锈钢或塑料袋中。
2. 样品预处理
将采集的样品带回实验室，进行干燥处理。
在干燥处理后，将样品研磨成粉末，然后过筛，以去除任何杂质和残留的大块物质。
3. 总氮的测定
可以使用Kjeldahl方法来测定森林植物和枯萎物中的总氮含量。
该方法需要将样品加入一种含硫酸的溶液中，并进行炼制，使样品中的氮转化为铵离子。
然后将这些铵离子还原为氨气，并将其吸收到氧化铜中。
最后，通过气相色谱仪分离并测量氨气来确定总氮含量。
4. 数据分析
将所得的数据进行统计分析，计算出森林植物和枯萎物层中的平均总氮含量及其标准差。
通过比较不同样品之间的氮含量，可以评估不同植物或不同程度的枯萎物层之间的差异。
植株全氮的测定方法
植株全氮的测定方法3 方法原理样品用浓硫酸加过氧化氢消化，将有机氮转化为铵盐，在碱性条件下蒸馏，经硼酸吸收溶液吸收，用硫酸标准溶液滴定，测定植株全氮含量。
4 试剂和溶液所有试剂除注明者外，均为分析纯。
分析用水应符合GB/T 6682中至少三级水的规格要求。
试验中所需标准滴定溶液、制剂及制品，在没有注明其它要求时均按GB/T 601、GB/T 603之规定制备。
4.1 硫酸：ρ（H2SO4）=1.84g/mL。
4.2 过氧化氢：φ（H2O2）≥30%。
4.3 氢氧化钠溶液：c（NaOH）=10mol/L。
4.4 氢氧化钠溶液：c（NaOH）=0.1mol/L；4.5 硼酸吸收溶液：20g硼酸溶于950mL约60℃的水中，冷却至室温后，每升硼酸溶液中加入甲基红–溴甲酚绿混合指示剂（4.7）20mL，并用氢氧化钠溶液（4.4）调节至微红色（pH约4.5），定容至1L。
4.6 硫酸标准滴定溶液：c（1/2H2SO4）=0.02mol/L。
4.7 甲基红–溴甲酚绿混合指示剂：将0.099g溴甲酚绿和0.066g 甲基红于研钵中，加少量乙醇（体积分数为95%）研磨至指示剂全溶为止，最后用乙醇（体积分数为95%）定容至100mL。
5 仪器设备5.1 凯氏定氮仪：全自动或半自动型。
5.2 消煮炉：温度可达400℃，200℃～400℃温度范围内，温差不大于±3℃。
5.3 分析天平：感量0.1mg。
5.4 容量瓶：100mL。
5.5 弯颈小漏斗：直径2cm。
5.6 移液管：10mL。
5.7 滴定管：25mL、50ml。
6 分析步骤警告——使用本标准的工作人员应有正规实验室工作的实践经验。
本标准未指出所有可能的安全问题。
使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关法规规定的条件。
6.1 试样溶液制备称取按DB/T XXXX操作所得实验室样品0.5g（精确至0.0001g），置于消煮炉所配消煮管底部（勿将样品粘附在瓶壁上）。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
植株全氮的测定
（H2SO4—H2O2消煮，凯氏定氮法）
一、方法原理
植物样品在浓H2SO4溶液中，历经脱水碳化、氧化等一系列作用，而氧化剂H2O2在热浓H2SO4溶液中分解出的新生态氧具有强烈的氧化作用，分解H2SO4破坏的有机物和碳。
使有机氮、磷等转化为无机铵盐和磷酸盐等，因此可以在同一消煮液中分别测定N、P、K 等元素。
二、主要仪器
消煮管；控温消煮炉；凯氏定氮仪；
三、试剂
（1）浓H2SO4（分析纯）；（2）30% H2O2（分析纯）；
（2）甲基红—溴甲酚绿混合指示剂。
称取甲基红0.42g，溴甲酚绿0.84g，共同放入玛瑙研钵中，然后加入95%的乙醇边研磨边用滴定管吸取上清液转移至250ml容量瓶中，研磨完毕后用95%的乙醇润洗研钵将溶液转移至容量瓶中，最后用95%的乙醇定容、摇匀。
将混合指示剂置于冰箱中长期冷藏储存。
（3）配制2%的硼酸溶液。
用250ml体积烧杯称取硼酸（分析纯）40g，用2L体积容量瓶量取2升蒸馏水，将硼酸倒入2L的烧杯，用量好的蒸馏水将称硼酸的烧杯刷洗几遍，洗液倒入2L烧杯中，然后将剩余的蒸馏水全部倒入2L烧杯中，打开电炉，将2L烧杯放于电炉上加热，同时用玻璃棒搅拌，待硼酸全部溶解后取下烧杯，关闭电炉。
往烧杯加入甲基红—溴甲酚绿混合指示20ml，混合均匀，倒入硼酸桶里。
（4）35%的氢氧化钠。
称取700g的氢氧化钠（分析纯）加水1300ml。
具体操作如下：称取氢氧化钠200g加上一整瓶即为700g,取2000毫升烧杯于通风橱将全部700g氢氧化钠倒入烧杯，打开通风橱，用量筒量取1300毫升水倒入烧杯中，边倒边搅拌，全部溶解待冷却后备用。
当然根据情况也可以配置2600毫升。
（5）0.01mol/L(1/2H2SO4)标准溶液。
量取硫酸0.7ml，加水稀释至2500ml，然后用标准碱或硼砂标定。
四、操作步骤
（1）称烘干磨细的植株样品（过0.25～0.5mm筛）0.3000g（精确至0.0001），置于消煮管中，先用滴管滴加4滴蒸馏水湿润样品，让后加入浓H2SO4 5ml，轻轻摇匀，盖上小漏斗。
（最好先放置过夜）。
（2）将消煮管置于控温消煮炉上，先低温缓缓加热，待浓硫酸分解冒白烟后逐渐升高温度。
当溶液全部呈均匀的棕黑色呈油状时，从消煮炉上取下消煮管，稍冷，逐滴加入30%H2O28滴，并不断摇动消煮管，已利反应充分进行。
（3）重新置于消煮炉上继续消煮10min，再次取下稍冷后再滴加30%H2O2 6滴，继续消煮10min后，第三次取下稍冷后再滴加30%H2O2 4滴，继续消煮。
当消煮液呈无色或清亮色后，再加热10min钟，以除尽过剩的双氧水。
（4）取下消煮管冷却，用蒸馏水先冲洗漏斗，然后将消煮液洗入100mL容量瓶中，定容，摇匀。
（5）使用定量滤纸将洗液干过滤至100ml三角瓶中。
此滤液可用来测定全N、P、K。
（6）做空白实验，除未称量样品外其他操作完全一致。
（6）打开冷凝水开关，打开机器开关，按参数按钮至显示A的时候将数值调到3S，其他不变，按到显示自动测定为止。
先放入一个空的消煮管进行空蒸，当空蒸值在0.6以下时再进行样品测定。
（随时检查蒸馏水量，碱量，指示剂量及标准酸量）
吸取10mL滤液置于蒸馏管中（N含量高时吸5ml），在凯氏定氮仪上蒸馏、滴定。
记录H2SO4滴定体积V1，记录下空白实验的H2SO4滴定体积V0。
五、结果计算
植株中全（N，g/kg）=（V1- V0）×c×14×100/（10×m）V1：样品测定所消耗标准酸体积（ml）；V0：空白实验所消耗标准酸体积（ml）；
C：标准酸的当量浓度（mol/L）；14：氮原子的摩尔质量（g/mol）；
100：第一次定容体积（mL）；10：吸取体积（mL）；m：植株样品质量（g）；
六、注意事项
（1）消煮时，双氧水应直接滴入消煮管底部，若滴在管壁上，双氧水会很快分解，失去氧化效果。
（2）消煮液中残余的双氧水需要继续加热分解除去，否则会影响P的比色测定。
（3）冷却后温度，以滴加双氧水时听到嗞嗞的声音为最适宜。
温度太高容易造成双氧水过快被氧化分解，温度太低氧化效果不是很好。