果蝇大试验

1、亲本收集 将6号果蝇和26号果蝇分别培养，使其产卵。 910天后，开始收集新羽化的6号处女蝇，同时收 集26号雄蝇，分别放在另外的培养瓶中，25度培 养待用。 2、2天后，确认放处女蝇的培养瓶中没有幼虫出现 （如有，说明收集处女蝇失败）。 3、亲本杂交 将3-5只6号处女蝇和5-8只26号雄蝇放入同一个 培养瓶中。重复同样杂交2-3瓶。在各个培养瓶 壁上做好交配类型、日期和培养瓶序号标记。

参考文献： 乔守怡，遗传分析试验教程，2008.1 北京： 高等教育出版社.
谢谢大家
^-^
七、思考题：
1、利用实验室保存的哪两个果蝇品系杂交， 即可一次验证所有的遗传定律？ 2、在进行杂交和F1自交后一定时间为什么要 释放杂交亲本？ 3、在伴性遗传的性状在正反？交中为什么会 出现差异？与性别关系如何？
1、实验所用果蝇灰体与黑檀体在2号染色体 上，另外三个性状眼色，翅长，刚毛都在1 号性染色体上。这样既可以验证两条染色 体上的基因分离与自由组合定律，也可以 验证性染色体上的伴性遗传，及三点测验。
2、由于雌蝇生殖器官中有贮精囊，一次交配 可保留大量精子，供多次排卵使用，因此 应避免雌蝇在同所挑好的亲本雄蝇杂交之 前与其他基因型的雄蝇杂交所产生后代， 影响F2代性状统计结果。 处女蝇的选取：由于孵化出的幼蝇在12小 时内不交尾，因此必须在这段时间内把雌 雄蝇分开，所得的雌蝇即为处女蝇。

F2
灰体 3
： ：
黑檀体 1

自由组合定律: 位于非同源染色体上的两对基因,一对 基因的分离与另一对(或另几对)基因的分离 是独立的,所以一对基因所决定的性状在杂 种第二代是3:1之比,而两对不相互连锁的基 因所决定性状,在杂种第二代就呈9:3:3:1之比 .
灰体白眼
♀

黑檀体红眼
× ↓ eXW/eY ♂
五、试验步骤与技术 路线
收集亲本蝇 ↓ 在每个培养瓶中放5-6对亲本蝇 ↓ 25℃培养5-6天
必须选处女蝇
F1幼虫出现，倒亲本 ↓ 25℃培养3-4天
注意：亲本要倒干净！
检查F1成蝇性状，统计表型及雌雄个数 ↓ 从每瓶中选5-6对成蝇，分别再转 移到新培养瓶中培养。 ↓ 25℃培养3-4天 F2成蝇出现，每隔两天统计一次 ↓ •根据记录数据计算各种性状的分 离比，做χ2检验。 此处不需要处女蝇
重组发生在 m—w + + + + w—sn + + + + -
重组值
分析:
九、实验中可能存在的困难、问题及 解决方法
1、亲本雌蝇为何一定要选用处女蝇？怎样才能保证所选 雌蝇为处女蝇？ 2、在进行亲本杂交或F1自交一定时间后为什么要释放杂 交亲本或F1？ 3、反交组为何不能直接进行三点测验？如果需要进行反 交组的三点测验，应如何对实验过程加以调整？ 4、伴性遗传的性状在正交和反交的后代中为什么会出现 差异？与性别的关系如何？ 5、本实验中为何正交组与反交组自由组合定律的预期分 离比不同？
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灰红长直 灰白短卷
F2代观察计数
灰红长直 灰白短卷 灰白长直 灰红短卷 灰红长卷 灰白短直 灰红短直 灰白长卷 黑红长直 黑白短卷 黑白长直 黑红短卷 黑红长卷 黑白短直 黑红短直 黑白长卷
计数日期（） 计数日期（） 计数日期（） 计数日期（） ---- 合计 ---1号瓶 2号瓶 3号瓶 1号瓶 2号瓶 3号瓶 1号瓶 2号瓶 3号瓶 1号瓶 2号瓶 3号瓶
三点测验: P: ♀白短卷 w m sn F1: ♀ 红长直
+ + + w m sn
F2:
× ×
♂ 红长直
+++ ♂白短卷
w m sn
红长直 白短卷 红短卷 白长直 红短直 白长卷 红长卷 白短直
亲本型
重组型
四、实验器具和药品
1:用具:麻醉瓶、白瓷板、体式显微镜、毛笔、 镊子、培养瓶、不干胶标签 2.药品:乙醚、玉米粉、琼脂、蔗糖或白糖、 酵母粉、丙酸、乙醇
EXw/EXw
灰体红眼 灰体白眼 F1 EXW/eXw × EXw/eY ↓ F2 2EXW/EXw EXw/EXw EXW/EY EXw/EY 2EXW/eXw 2EXw/eXw 2EXW/eY 2EXw/eY eXW/eXw eXw/eXw eXW/eY eXw/eY
黑体白眼 灰体白眼 黑体红眼 灰体红眼
4、2天后将杂交瓶里的所有亲本果蝇麻醉后弃除。 25度条件下，约1周至10天后开始有成蝇出现。 5、子一代（F1）观察与计数，各瓶分别统计。将 陆续羽化出来的F1成蝇隔天收集一次，深度麻醉 后仔细观察，按照表型和雌雄分别计数。为了防 止误将F2计入，F1羽化开始8天后停止收集和计 数。 与此同时，取子一代雌雄成蝇各2-5只放入 同一个培养瓶中。每种杂交重复2-3瓶。2天后将 F1杂交瓶里的所有果蝇弃除（操作同亲本杂 交 ）。25度条件下，约1周至10天后开始有子二 代成蝇出现。
灰体红眼 实验观察数(O) 灰体白眼 黑体红眼 黑体白眼
理论数(3:3:1:1)(C)
偏差(O-C) (O-C)2/C
自由度=4-1=3
分析:
X2=∑[(O-C)2/C]=
查x2表
伴性遗传组数据及x2检测
F1 红眼雌性 实验观察数(O) 理论数(1:1)(C) 偏差(O-C) (O-C)2/C 白眼雄性
自由度=2-1=1
分析:
X2=∑[(O-C)2/C]=
查x2表
F2
雄性红眼 实验观察数(O) 理论数(C) 偏差(O-C) 雄性白眼 雌性红眼 雌性白眼
(O-C)2/C
自由度=4-1=3
分析:
X2=∑[(O-C)2/C]=
查x2表
三点测交试验中观察的记录 测交后代表型 观察数 m—sn sn w m + + + + w + sn + m sn + + + w m + + m sn w + 总计 + + + +
根据前一次的实验得到以下各品系 的表型特征：
品系 3 4 体色 黄 灰 眼色 红 红 翅型 长 残 刚毛 直 直
6
18 22 26
灰
灰 灰 黑檀e(3)
白w(1)
红 白 红
短m(1)
长 长 长
卷sn(1)
直 直 直
故选择6号，26号品系作为实验的材料
6号 ♀ 26号 ♂ 灰 + (3) × 黑檀e(3) 白，短，卷 (1) 红，长，直(1) w m sn + + + F1 灰体Ee ♀ ♂ 红，长，直 白，短，卷
灰红长直 灰白短卷 灰白长直 灰红短卷 灰红长卷 灰白短直 灰红短直 灰白长卷 灰红长直 灰白短卷 灰白长直 灰红短卷 灰红长卷 灰白短直 灰红短直 灰白长卷 灰红长直 灰白短卷 灰白长直 灰红短卷 灰红长卷 灰白短直 灰红短直 灰白长卷 黑红长直 黑白短卷 黑白长直 黑红短卷 黑红长卷 黑白短直 黑红短直 黑白长卷 灰红长直 灰白短卷 灰白长直 灰红短卷 灰红长卷 灰白短直 灰红短直 灰白长卷 灰红长直 灰白短卷 灰白长直 灰红短卷 灰红长卷 灰白短直 灰红短直 灰白长卷
1
× ×
:
♂红 X+Y ♂白
X wY 1
F2
♀红 ♀白 ♂红 ♂白 1 : 1 : 1 : 1
三点测验: 三点测验是通过一次杂交和一次用隐性 亲本测交,同时确定3个基因之间的遗传距离 和排列顺序的方法.三位座杂合亲本可以产 生8种配子,因此在测交子代中存在8种不同 基因型的个体,经过数据处理,一次实验就可 以测出三个连锁基因的距离和顺序.
eY
灰红长直 灰白短卷 灰白长直 灰红短卷 灰红长卷 灰白短直 灰红短直 灰白长卷 黑红长直 黑白短卷 黑白长直 黑红短卷 黑红长卷 黑白短直 黑红短直 黑白长卷
六、实验结果记录
F1代观察计数
计数日期（）计数日期（）计数日期（）计数日期（）---- 合计
1号瓶 2号瓶 3号瓶 1号瓶 2号瓶 3号瓶 1号瓶 2号瓶 3号瓶 1号瓶 2号瓶 3号瓶


实验中涉及的两条染色体中一条是性染色 体，因此F1雄蝇性状中处在性染色体上那 一对基因的应符合伴性遗传的规律。正反 交结果是不同的。所以整个自由组合的两 对基因所得结果也不符合9：3：3：1。 反交为3:3:1:1
3、伴性遗传的特点就是交叉遗传，母本将形 状遗传给子代雄性，父本将形状遗传给子 代雌性。 正交F1代♀♂都是野生型[+]，F1互相交配 得F2代，则♀都是野生型[+]，♂则野生型 [+]与白眼型[w]比为1：1。 反交♀为野生型[+]♂为白眼[w]，F1交配得 F2代，♀的红眼与白眼的比例为1:1, ♂的红 眼与白眼比为1：1

+
w
+
m
+
sn
w
m
sn
分离定律:一对基因在杂合状态中保持相对的 独立性,而在配子形成时,又按原样分离到不 同的配子中去,理论上配子分离比是1:1,子二 代基因型分离比是1:2:1,若完全显性,子二代 表型分离比是3:1.
分离定律： P 灰体 ♀ × 黑檀体♂ ++ ee F1 灰体 （互交）
实验果蝇F2的基因遗传分析
E (+ + +) E (w m sn) E (w + +) E (+ m sn) E (+ + sn) E (w m +) E (+ m +) E (w + sn) e (+ + +) e (w m sn) e (w + +) e (+ m sn) e (+ + sn) e (w m +) e (+ m +) e (w + sn) E (w m sn) e (w m sn) E Y