核桃蛋白的分离纯化及功能性质的研究
核桃蛋白研究进展
211 打浆工艺研究 赵声兰 [ 4 ] 等人的研究 表明, 核桃 制品生产过程
中, 适宜的打浆处理工艺条件为: 温度 77- 79e , pH 817- 910, 打浆次数为 2- 3次, 这样可使核桃蛋白质 的溶出率达到 90% 。罗勤贵 [ 5] 等人发现, 在 pH 值为 510时, 蛋白粕的乳化性最差, 核桃蛋白此时溶解度 最小。在偏离 pH 值 510 的酸性环境尤其是碱性环 境中, 其乳化性明显提高; 75e 时乳化性和乳化稳定 性最好, 但是为保证蛋白粕的营养价值, 建议工业生 产中采用 55e 的温和条件。适当浓 度的 N aC l溶液 可提高蛋白粕的溶解度和乳化性, 在 015m ol /L N aC l 溶液中, 核桃蛋白的乳化性最好, 打浆最适条件为温 度 78- 82e ; pH 717- 813, 打浆 2 - 3次为宜。打浆 蛋白质溶出率可达 90% 。
核桃又名胡桃、羌桃, 为胡桃科胡桃属植物 ( Juglans regia L1) , 与扁桃、腰果、榛子并列为世界著名的 四大干果。核桃是公认的优质植物蛋白资源, 核桃蛋 白的营养价值与动物蛋白相近。目前, 国内对核桃偏 重于其油脂方面的研究, 对核桃 蛋白的研究报道 较 少, 因此, 为了很好地开发核桃资源, 对核桃蛋白功能 性质的研究极为重要。
食品蛋白质经蛋白酶水解后生成的小肽类物质 中可能 包含 有 抑 菌功 能 的 成分, 即抗 菌 肽。 刘昭 明 [ 13 ] 等人研究了核桃蛋白木瓜蛋白酶和中性蛋白酶 酶水解物的 抑菌性能。实 验表明, 酶 解物对大肠杆 菌、枯草杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑制作用, 且随 着水解度的增加, 酶解物的抑菌能力增强。水解度为 28% 的木瓜蛋白酶和中性蛋白酶混合酶解所得的酶 解物对 枯 草 杆 菌 和 金 黄 色 葡萄 球 菌 抑 制 能 力 与 018% 的山梨酸钾和 N isin相当, 其对大肠杆菌、枯草 杆菌和 金 黄 色 葡 萄 球 菌 的 最小 抑 菌 浓 度 分 别 是 50% 、50% 和 60% 。
核桃的分离提纯实验方案
核桃中蛋白质的分离提纯核桃(Juglans regial L．)原产中亚，又叫胡桃、羌桃、万岁子等，系胡桃科核桃属植物。
我国栽培的核桃品种约有40 余种，各地均有分布。
核桃作为林业副产品，很有开发利用的价值。
核桃营养丰富，是世界“四大”干果之一。
据测定，每百克含蛋白质14.9 克，脂肪58.8 克，核桃中的脂肪71%为亚油酸，12%为亚麻酸，碳水化合物9.6 克，膳食纤维9.6 克，胡萝卜素30 微克，维生素E 43.21毫克，钾385 毫克，锰3.44 毫克，钙56 毫克，磷294 毫克，铁2.7 毫克，硒4.62 微克，锌2.17 毫克人。
就营养成分比较来说，核桃营养价值是大豆的8.5 倍，花生的6 倍，鸡蛋的12 倍，牛奶的25 倍，（1 斤核桃仁相当于5 斤鸡蛋或9 斤牛奶的营养价值）肉类的10 倍。
核桃仁在增进人体健康方面，是中药的重要辅料，有顺气补血，止咳化痰，润肺补肾，滋养皮肤等功能。
据有关资料记载历史上有许多老寿星和素食家也是把食用核桃作为养生美颜的主要果品。
近几年有些癌症患者，经常食用核桃，或核桃仁加工的副食品，明显有控制癌扩散的积极效能；现代医学又证明，经常食用核桃有降低血液中胆固醇和软化血管的作用。
核桃蛋白含量为14%～17%，其蛋白消化率可达87.2%。
主要由4类蛋白质构成, 即清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白, 分别占核桃蛋白总量6.81%、17.57% 、5.33% 和70.11% , 核桃蛋白中的醇溶蛋白有独特的氨基酸组成, 其中支链氨基酸和中性氨基酸含量较高, 是植物蛋白中少有的特色组成,据有极高的开发利用价值。
核桃蛋白含有18种氨基酸, 其中包括8种必需氨基酸, 且精氨酸、谷氨酸、组氨酸、酪氨酸等含量相对较高, 接近联合国粮农组织( FAO)和世界卫生组织(WHO )规定的标准, 它是一种很好的植物蛋白。
但目前理想的核桃蛋白保健食品在市场上并不多见，可见核桃蛋白极具开发价值。
核桃蛋白功能性质及其影响因素效应的研究
加 ∞ ∞ ∞ 如 加
ｈ溶液 的 ｐ Ｈ分别 调 为 ７０和 ６０ 然 后分 别在 ６ ＇ ． ．， ０ Ｅ， ７ｃ ，０ ０【 ８ ℃水浴 中加 热 ｌ ，０，５，０ｍｎ后 ， ３５ ０ ： ５３ ４ ６ ｉ 在 ０ ｒｍｎ下离 心 １ ｉ， 定 上 清 液 中蛋 白质 的 含 量 。 ／ｉ ０ ｍｎ 测
ｐ ｏ ｅｎ ｒｔ ｉ
一
◆一 起 泡 忡 Ｆａ ｉｇａ ｉｔ ■ 一 泡 沫 稳 定 性 Ｆａ ｔ ｉｔ ｏｍｎ ｂｌｙ— ｉ ｏｍ ｓ ｂｌｙ ａ ｉ
由图 ２可 知 ， Ｎ Ｃ 的 浓度 为 ０ ６ｍ ｌＩ时 ， 当 ａ１ ， ｏ 核 ／
ｎ形成泡沫。研究 了 ｐ Ｈ值 、 ａ １蔗糖对其起泡性 ＮＣ、
核桃又名胡桃 、 羌桃 、 合桃等 ， 是胡桃科核桃属多 年生落叶乔木的果实 ， 与扁桃 、 腰果 、 榛子并列为世界 ４ 大干果。全世界核桃产量最大的是美 国， 中国占第
２位 ， 国核 桃 的种 植 面 积 已达 ６ ． ｍ ， 产 量 约 我 ６ ７ｈ 年 为 ２ 万 ｔ主 要 分 布 在 山 西 、 西 、 北 、 南 、 Ｏ多 ， 陕 河 河 甘
核 桃 仁 的含 油 率 高 达 ６ ％ ～７％ ， 中不 饱 和 ０ ０ 其 脂肪 酸含量 在 ９ ％ 以上 ， 有 一 定 的保 健 功 能 ， 优 ０ 具 是
１ 材 料 与 方 法
１１ 材 ． 料
质的食用油源； 核桃仁的蛋白质含量为 １％ ～１％ ， ４ ７
可消化率达 ８ ． ％ Ｊ ７ ２ 。我 国人 民一 直把核桃视作
１３２ 粘 度的测 定 ．．
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用 粘 度计 测定 ｐ Ｈ＝ ７ ０ 浓 度 ．、
踟
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核桃的分离提纯实验方案
核桃中蛋白质的分离提纯核桃(Juglans regial L．)原产中亚，又叫胡桃、羌桃、万岁子等，系胡桃科核桃属植物。
我国栽培的核桃品种约有40 余种，各地均有分布。
核桃作为林业副产品，很有开发利用的价值。
核桃营养丰富，是世界“四大”干果之一。
据测定，每百克含蛋白质14.9 克，脂肪58.8 克，核桃中的脂肪71%为亚油酸，12%为亚麻酸，碳水化合物9.6 克，膳食纤维9.6 克，胡萝卜素30 微克，维生素E 43.21毫克，钾385 毫克，锰3.44 毫克，钙56 毫克，磷294 毫克，铁2.7 毫克，硒4.62 微克，锌2.17 毫克人。
就营养成分比较来说，核桃营养价值是大豆的8.5 倍，花生的6 倍，鸡蛋的12 倍，牛奶的25 倍，（1 斤核桃仁相当于5 斤鸡蛋或9 斤牛奶的营养价值）肉类的10 倍。
核桃仁在增进人体健康方面，是中药的重要辅料，有顺气补血，止咳化痰，润肺补肾，滋养皮肤等功能。
据有关资料记载历史上有许多老寿星和素食家也是把食用核桃作为养生美颜的主要果品。
近几年有些癌症患者，经常食用核桃，或核桃仁加工的副食品，明显有控制癌扩散的积极效能；现代医学又证明，经常食用核桃有降低血液中胆固醇和软化血管的作用。
核桃蛋白含量为14%～17%，其蛋白消化率可达87.2%。
主要由4类蛋白质构成, 即清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白, 分别占核桃蛋白总量6.81%、17.57% 、5.33% 和70.11% , 核桃蛋白中的醇溶蛋白有独特的氨基酸组成, 其中支链氨基酸和中性氨基酸含量较高, 是植物蛋白中少有的特色组成,据有极高的开发利用价值。
核桃蛋白含有18种氨基酸, 其中包括8种必需氨基酸, 且精氨酸、谷氨酸、组氨酸、酪氨酸等含量相对较高, 接近联合国粮农组织( FAO)和世界卫生组织(WHO )规定的标准, 它是一种很好的植物蛋白。
但目前理想的核桃蛋白保健食品在市场上并不多见，可见核桃蛋白极具开发价值。
核桃花蛋白质提取条件的初步研究
第22卷第3期西 南 农 业 大 学 学 报Vol.22,No.3 2000年6月Journal o f Southwest Agricultural Univer sity J un.2000文章编号:1000-2642(2000)03-0246-03核桃花蛋白质提取条件的初步研究①①樊 建,陈朝银,赵声兰,余旭亚(云南工业大学-清华大学生物资源开发工程研究所,昆明 650051)摘要:研究在7种pH值,4种温度及3种阳离子溶液条件下,核桃花蛋白质的抽提率。
结果表明,核桃花蛋白质在碱性溶液中抽提率较大,在酸性溶液中最小;温度对其影响不大;在Na+,K+溶液中的抽提率明显大于Ca2+溶液。
关 键 词:核桃;核桃—花3;蛋白质;提取中图分类号:S664.1∶TQ936.2 文献标识码:BPRE LI MI NARY ST UDY OF THE CONDITI ONS FOR EXTRACTI NG PROTEI NFROM PERSI AN WA LNUT(JUG LANS REGIA L.)FAN Jian,CHEN Ch ao-yin,ZH AO Sheng-lan,YU Xu-ya(Engineering Institute of Exploitation of Biological Res ources,Y unnan Industry University-Qinghua University,K unming650051,China)Abstract:Protein was extracted from flowers of Persian walnut(Juglans regia L.)at7levels of pH,4tem peratures and in s olutions with3differ2 ent ions.Relatively,the extraction rate was high in alkaline s olutions and low in acid s olutions.T em perature had no significant effect on extraction rate.Protein extraction rate was significantly higher in s olutions with Na+or K+than in s olutions with Ca2+.K ey w ords:Walnut;Walnut—flowers;protein;abstraction 核桃(Walnut),落叶乔木,属胡桃科,其根、叶、花、外壳、坚果及种仁均可入药。
核桃球蛋白的分离纯化、鉴定及抗氧化性分析
徐倩，陈洲，王青华，等. 核桃球蛋白的分离纯化、鉴定及抗氧化性分析[J]. 食品工业科技，2022，43（18）：105−113. doi:10.13386/j.issn1002-0306.2022010234XU Qian, CHEN Zhou, WANG Qinghua, et al. Isolation, Purification, Identification and Oxidation Analysis of Walnut Globulin[J].Science and Technology of Food Industry, 2022, 43(18): 105−113. (in Chinese with English abstract). doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2022010234· 研究与探讨 ·核桃球蛋白的分离纯化、鉴定及抗氧化性分析徐 倩，陈 洲，王青华，韩盼盼，李思霆，马爱进，贾英民*，展远蓉（北京工商大学食品与健康学院，北京 100048）摘 要：为揭示核桃球蛋白主要组成及体外抗氧化活性，以脱脂核桃粕为原料，对其中的球蛋白进行分离纯化并通过2,2'-联氮双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）（2,2'-azino-bis （3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid ），ABTS ）阳离子自由基清除能力对其抗氧化能力进行评价，即经进一步脱脂后，根据Osborne 分级法提取得到核桃球蛋白粗提物，再通过HiTrap TM Capto TM Q 阴离子交换柱和Sephacryl TM S 100HR 凝胶过滤柱两步分离纯化，得到主要蛋白组分。
结果表明，制备的球蛋白蛋白含量为51.53%，占核桃总蛋白的15.3%，等电点为3.8。
十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示，纯化得到主要蛋白组分分子量为10.1 kDa 。
核桃渣中蛋白质的提取工艺及其功能性研究
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图)
不同 01 对蛋白质溶出率的影响
-5" ! 01 小于 @(- 时 ! 蛋白质溶出率随 01 的增加而加
大 ! 但 大 于 01@(- 时 ! 核 桃 蛋 白 的 溶 出 率 有 所 下 降 "
&()(*() 持水力!;1<#测定方法9-:
取-’+,离心管!+&#!
将准确称取的一定量蛋白质样品放入! 加入水中搅 拌 均 匀 ! 调 012(’! =’" 水 浴 *’+78 后 冷 却 静 置 &4 !
核桃渣中蛋白提取工艺的确定 单因素变化对核桃蛋白浸提效果的影响
"3. 时 间 对 核 桃 蛋 白 浸 提 率 的 影 响 & 在 料 液 比 3 " /0% C@:70% 温 度 ;0# 分 别 用 超 声 波 和 水 浴 的 方 法
对核桃渣分别浸提 3O% /O% 6O" 以蛋白质浸出率为指 标 " 确定浸提方法和时间对浸提核桃蛋白率的影响 ’
\T:Q>PK M 9Z ]:>67 N ^- ^PTK>67 Y6=1>P=6V6:6KS <7Y >+O:# =6T7 ;_<P<;K>P6=K6;= TU U:TOP =TS 1PTYO;K=FWJ- @TTY I;6>7;>Z 03D3Z??[3!H35
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核桃蛋白提取工艺研究
提取率 /%
55
50 45
◆
◆
◆
40
◆
◆
35
30
25
20
30
40
50
60
70
时间 t/min
图 4 时间对提取率的影响
从图 4 可知，随着浸提时间的增加，核桃蛋白提 取率也提高，当时间为 70 min 时，略有下降，这可 能是提取时间增加后，少量蛋白质被分解的原因。因
2010 年第 5 期
色具有一定的影响，而且这类颜色很难在脱色过程中 洗脱掉。采用磷酸盐—柠檬酸缓冲溶液为酸沉剂，核 桃蛋白的颜色更佳。 1.2.4 理化指标测定
（1） 水分测定采用 GB/T 5009.3—2003，直接干 燥法。
（2） 脂肪含量的测定依据 GB/T 1477.2—2008。 （3） 蛋白质含量的测定依据 GB/T 5009.5—2003， 凯氏定氮法。 （4） 在本实验中蛋白提取率以浸出率为指标。蛋 白浸出率按照下式计算。
固液比 1∶90，温度 55 ℃，碱溶 pH 值 7.5，时间 70 min 为提取条件，其核桃蛋白提取率达 55.83%。
关键词：核桃；蛋白；提取工艺；提取率
中图分类号：TS229
文献标志码：A
doi：10.3969/jissn.1671- 9646(X).2010.05.003
Study on Protein Extraction Process from Walnut
1 材料与方法
1.1 材料与设备 1.1.1 材料
核桃、氢氧化钠、盐酸、无水乙醚、石油醚、硫 酸铜、硫酸钾、磷酸氢二钠、柠檬酸、无水亚硫酸 钠，均为分析纯。
1.1.2 设备 HH—2 型 数 显 电 子 恒 温 水 浴 锅 ； 格 兰 仕 牌
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核桃蛋白的分离纯化及功能性质的研究
随着现代科学技术的发展，蛋白质已经成为现代生物学研究中非常重要的研究对象，在以它们构成和性质为基础的研究和开发被广泛应用。
核桃蛋白是一类非常重要的单元蛋白，具有多种生理活性。
本文旨在研究核桃蛋白的分离纯化及其机理性质。
一、核桃蛋白结构
核桃蛋白是一种植物类乳糖酶，主要由两种可溶性蛋白组成：核桃抗性蛋白（NRT）和核桃糖酶（NE）。
NRT是一种65 kDa的肌动蛋白，它通过酶解作用分解能量类外源物质和非结构性抗原来支持核桃生长。
它以其独特的结构支持它的抗性和活性。
与NRT相比，NE是一种25 kDa的核苷酸酶，它可以水解糖苷键，以便提供能量到核桃细胞。
核桃蛋白的其它功能包括抗体反应，细胞因子合成和调节细胞凋亡等。
二、核桃蛋白的分离纯化
核桃蛋白的分离纯化，需要使用一系列技术，包括柱层析、电渗透和膜过滤等方法。
层析可以分离和纯化核桃蛋白，而其纯度比电渗透稍低。
膜过滤是一种高纯度分离纯化方法，它可以有效地去除杂质和其它蛋白。
当核桃蛋白经过分离和纯化后，它可以用于生物化学分析和功能性研究。
三、核桃蛋白的功能性研究
核桃蛋白具有多种生理活性，因此，很多研究者都想深入了解它的生理功能。
最近的研究表明，核桃蛋白可以增强机体的抗氧化能力，
对对抗内在和外在的氧化应激具有重要作用；它还可以阻断放射性物质的吸收，具有显著的辐射防护作用；它还具有显著的抗细菌活性，可以抑制致病性细菌的生长和复制。
此外，核桃蛋白还具有抗肿瘤作用，可以降低细胞癌变的风险。
四、总结
本文旨在研究核桃蛋白的分离纯化及其功能性质。
核桃蛋白是一类单元蛋白，由NRT和NE两种可溶性蛋白组成，具有多种生理活性，如抗氧化能力、辐射防护作用、抗细菌活性和抗肿瘤作用等。
核桃蛋白的分离纯化，需要使用技术，如柱层析、电渗透和膜过滤等，可以有效地去除杂质和其它蛋白，并可用于生物学分析和功能性研究。
鉴于其多种功能，核桃蛋白可能在科学研究和产业应用中发挥重要作用。