基因工程复习学案(高三)
2024届高三生物一轮复习基因工程导学案
2024年高考生物学一轮复习基因工程导学案一、回归教材学问点1、DNA重组技术的根本工具1、限制酶——“分子手术刀〞（1）特点：能够识别双链DNA分子特定的核苷酸序列，在特定位点切开两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键（2）DNA末端：限制酶切割DNA产生的DNA末端有两种形式：黏性末端、平末端。
2、DNA连接酶——“分子缝合针〞（1）作用：将双链DNA片段“缝合〞起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
（2）种类：① DNA连接酶：只能“缝合〞双链DNA互补的黏性末端。
②T4DNA连接酶：既可“缝合〞双链DNA互补的黏性末端，又可“缝合〞双链DNA的平末端。
3、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车〞（1）载体种类①质粒：一种暴露的结构简洁、于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制的力量的环状DNA分子；②入噬菌体的衍生物；③动植物病毒（2）载体的特点①能够在细胞内自我复制，或整合到染色体DNA上，随染色体DNA进行自我复制；②具有一个或多个限制酶切点，便于供外源DNA插入；③具有特别的遗传标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。
【留意】（1）猎取目的基因和切割载体时一般使用两种不同的限制酶，目的是为了防止目的基因或载体的自环，以及目的基因与载体的正确连接）猎取一个目的基因需要限制酶切割两次，产生4个黏性末端或平末端。
（3）限制酶切位点的选择必需保证启动子、终止子和标记基因等的部位完整性，以便于检测。
4、与DNA有关的4种酶的比拟比拟工程限制酶DNA连接酶耐高温DNA聚合酶解旋酶RNA聚合酶逆转录酶作用底物DNA分子DNA片段脱氧核苷酸DNA分子核糖核苷酸脱氧核苷酸作用部位磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键氢键磷酸二酯键磷酸二酯键形成产物黏性或平末端重组DNA 新的DNA分子单链DNA mRNA cDNA学问点2、基因工程的根本操作步骤第一步：目的基因的筛选与猎取（1）利用PCR猎取和扩增目的基因：PCR〔聚合酶链式反响〕是利用DNA半保存复制的原理，在体外供应参加DNA复制的各种组分与反响条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。
高考第二轮复习(高三生物)导学案4-1基因工程.doc
【考点要求】 1. 基因工程的诞生(I )A. 说出基因工程的概念(Pl)B. 简述限制酶和DNA 连接酶的作用(P4-5)C. 简述质粒的木质及其在基因T 程中的作用(P6)2. 基因工程的原理及技术(II)A. 简述基因工程的原理及基本操作步骤(P8-15)B. 模拟制作基因表达载体的构建(P4・5)3. 基因工程的应用(I)举例说出基因工程在育种、疾病治疗及生态环境保护上的应用(P17-24)4. 蛋白质工程(I)A. 举例说出蛋白质工程的含义(P27)B. 简述蛋口质工程的原理、基木途径、进展和而景(P26-28)【基因工程操作流程图】注意事项获取方法：玄接分离和人工合成人工合成常用方法有反转录法和化学合成法賊因表达载体二启动了 +目的卑因+终止子+标记卑因【知识巩固】1. (2012海南卷)己知卬种农作物因受到乙种昆虫危害而减产，乙种昆虫食川某种原核生物 分泌的丙种蛋白质后死亡。
因此，可将丙种蛋白质基因转入到甲种农作物体内，使甲种 农作物获得抗乙种昆虫危害的能力。
回答下列问题：⑴为了获得丙中蛋白质的基因,在已知丙种蛋白质氨基酸序列的基础上,推测出丙中蛋白 质的 序列，据此可利用_____ 方法合成目的基因。
获得丙屮蛋白质的基因还可用 _________ 、 ________ 方法。
⑵在利用上述丙中蛋白质基因和质粒载体构建重组质粒的过程中，常需使用 _______________ 酣和4-1基因工程曰的基闵的菸取 基闵夷达载体的构律 熔曰的基闵导入爭体细舸 曰的基闵的检涮和鉴宗标记基因:有利于筛选出成功导入目的基因的受体细胞启动子：RNA 聚合酚识别利结合的部付植物细胞：农杆菌转化法，慕因枪法，花粉管通道法动物细胞：显微注射技术。
受休细胞名是受精卵微生物细胞：感受态细胞法(钙离子处理法)检测方法：DNA 分了杂交技术、棊因作探针与mRNA酶。
⑶将含有重组质粒的农杆菌与甲种农作物的愈伤组织共培养，筛选出含有丙种蛋白质的愈伤组织，由该愈伤组织培养成的再生植株可抵抗_________________________________ 的危害。
高三生物一轮复习 专题1 基因工程(单元复习)精品学案 新人教版选修3
高三生物一轮复习专题1 基因工程（单元复习）精品学案新人教版选修3【单元知识网络】基因工程的概念：依据、技术、目的“分子手术刀”——限制酶基本工具“分子缝合针”——DNA连接酶“分子运输车”——载体目的基因的获取基因表达载体的构建（核心）基基本操作程序将目的基因导入受体细胞（转化）因目的基因的检测与鉴定工植物基因工程程动物基因工程基因工程的应用基因工程药品的生产基因治疗蛋白质工程：蛋白质工程崛起的缘由、基本原理【单元强化训练】一、选择题1、除了下列哪一项之外，其余的都是基因工程的运载体所必须具备的条件A．能在宿主细胞中复制并保存B．具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接C．具有标记基因，便于进行筛选D．是环形状态的DNA分子【解析】原核细胞如细菌的核DNA也是环状DNA，但不能作运载体，因为它不具备A、B、C三个条件。
【答案】C2、科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶主要蛋白。
以下有关该基因工程的叙述错误的是( )A．采用反转录的方法得到的目的基因有内含子B．基因非编码区对于目的基因在块茎中的表达是不可缺少的C．马铃薯的叶肉细胞可作为受体细胞D．用同一种限制酶，分别处理质粒和含目的基因的DNA，可产生黏性末端而形成重组DNA 分子【解析】采用反转录的方法得到目的基因的过程是以目的基因转录成的信使RNA为模板，反转录成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成双链DNA，从而获得所需要的目的基因。
由于信使RNA中没有与内含子相对应的部分，所以采用反转录的方法得到的目的基因不存在内含子。
基因非编码区对于基因的表达具有调控作用。
植物细胞的全能性很容易得到表达，所以转基因植物培育过程中的受体细胞可以是植物的体细胞。
限制酶具有专一性，只有用同一种限制酶处理才能获得相同的黏性末端，才能够形成重组DNA分子。
【答案】A3、科学家将β－干扰素基因进行定点突变，然后导入大肠杆菌表达，使干扰素第17位的半胱氨酸改变成丝氨酸，结果大大提高β－干扰素的抗病性活性，并且提高了储存稳定性。
基因工程高三一轮复习导学案
基因工程（一）【考纲要求】基因工程的诞生A基因工程的原理及技术A基因工程的应用B蛋白质工程A【课前必记】1 •基因工程是指按照人们的意愿，进行严格的设计’并通过休外DNA重组和转基因等技术"赋予生物以新的遗传特性.从而创造一更符合人们需要的新性物类型和生物产品基因工程是在业水平上进行生物设计和匯工，因此又叫DNA重组技术N共分子手术刀-一限制性核酸内切醐，这类酶主要从廛擅生虬分离纯化出来，他们能识别DNA的特定核昔酸序列,并且使特定部位亠酸二酯霆断开。
DNA分子经该酶切割产生的DNA末端通常有粘性末端和平末d晒种形式a3 •肚分子缝合针” -- DNA连接爾，根据来源不同分为E.mliDNA连接酶和TRNA连接酶这两类酶都是将双链DNA “缝合柑起来，恢复两个核背酸间的碼酸二酯謔I “分子运输车” -运载檢，通常用质粒作为载体,质粒是一种很小的双链DNA分充在基因丄程中使用的载体除质粒外还有喘蔺体的衍牛物、动擅牧蛊垂等口5•基因工程的基本操作程序主要包一目的基因的获取、、基因表达载怵的构建、将目的基因导入壹怵细测、口的基因的检测与鉴定四个步骡,苴中基因表达载休的构建是基因工程的核心. &目的基因主要是指编码栄白质的耳因，获取目的基因的方法有从基圉文库中获取、用PCR技术扩增、入T合成孔基因表达载体构建目的① 便目的篡因在受体细胞中稳定存在井遗传给下一代」②僅目的基因能表达知走挥作用，二盤芸劇屈逅成诵亍盲药範贰还宓麺有启动子、终止子以及标记基因"虫目的基因进入受体细胞内*并且在受体细胞内维持穩定和表达的过程称为转代・将目的基因导入植物细腕采用最多的方法是逊菌转化进；显微注射技並是转基因动物中采用最多最有效的方法，由于原核细有繁殖快、多为单细胞遗传物质相对较少的特点，所以早期的基因工程都用原核生物做受体细胞，这种转化方法为感受态细胞法,常用—O N浜—处理受体细胞o【学习活动】1.下图为科学家通过基因工程方法培育转基因抗虫棉的大致过程。
生物选修3 专题1 基因工程导学案(高三复习)
课题：生物选修3 专题1 基因工程导学案 编写人： 审核组长： 审核主任： 温馨寄语： 【学习目标】 1．说出基因工程的概念 2．分析基因工程研究的理论基础 3．说出DNA 重组技术所需的三种基因工具的作用 4．简述基因工程基本操作程序的四个步骤 5．简述目的基因的获得、运载体的构建、目的基因的导入与检测等常用的方法及其基本原理 6．举例说出基因工程在农业、医疗、环境保护等方面的广泛应用及其发展前景 7．关注基因工程的发展，认同基因工程的应用促进生产力的提高 【知识梳理】 （一）DNA 重组技术的基本工具 1．基因工程的概念：是指按照＿＿＿＿＿＿＿，进行严格的设计，通过＿＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿技术，赋予生物以＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，创造出＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿的新的生物类型和生物产品。
基因工程是在＿＿＿＿＿＿＿水平上进行设计和施工的，又叫做＿＿＿＿＿＿＿。
2．DNA 重组技术的基本工具 （1）“分子手术刀”—— ＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿（简称：＿＿＿＿＿） ①来源：主要是从＿＿＿＿＿＿＿中分离纯化出来的。
②功能：能够识别双链DNA 分子的某种＿＿＿＿的核苷酸序列，并且使每一条链中＿＿＿部位的两个核苷酸之间的＿＿＿＿＿＿＿断开，因此具有＿＿＿＿性。
③结果：经限制酶切割产生的DNA 片段末端通常有两种形式：＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿。
（2）“分子缝合针”—— ＿＿＿＿＿＿＿ ①作用：将＿＿＿＿＿＿＿连接起来 ②两种DNA 连接酶（E ·coliDNA 连接酶和T 4DNA 连接酶）的比较： 相同点：都缝合＿＿＿＿＿＿＿键。
区别：E ·coliDNA 连接酶来源于＿＿＿＿＿＿，只能将双链DNA 片段互补的＿＿＿＿＿之间的磷酸二酯键连接起来；而T 4DNA 连接酶来源于＿＿＿＿＿＿，它能缝合＿＿＿＿＿，但连接平末端之间的效率较＿＿＿＿。
③与DNA 聚合酶作用的异同:DNA 聚合酶只能将＿＿＿＿＿＿＿加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。
高三生物一轮复习 基因工程导学案 新人教版
第一单元基因工程【重难点突破】一、如何理解基因工程的概念和原理1、操作环境是生物体外，典型过程是基因表达载体的构建。
2、基因工程的优点（1）克服了远缘杂交不亲和的障碍。
基因工程和植物体细胞杂交一样，突破了有性生殖的局限。
（2）定向改造了生物性状。
与诱变育种相比较克服了诱变育种的突变的不定向性。
3、原理是基因重组。
4、操作层次：是分子水平。
是获取某生物的DNA分子片段，把它与另一个DNA分子片段结合成一个DNA分子。
5、实质：A种生物的某个基因通过一定方式导入B种生物体内并能进行基因表达。
基因没有改变，蛋白质没有改变，只是转录和翻译吃场所发生改变。
6、目的基因和载体能够形成重组DNA分子的基础是（1）物质组成相同，都是四种脱氧核苷酸组成。
（2）空间结构相同，都是规则的双螺旋结构。
（3）结构和功能单位相同，基因是控制生物性状的结构和功能单位。
性状都是蛋白质表现的。
（4）遵循的基因表达原则相同，基因表达包括了基因的复制，转录和翻译，都遵循中心法则。
（5）遗传密码相同，所有生物共用一套遗传密码。
【典题演示】1、（2011温州十校）采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出了转基因羊。
但是，人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。
以下有关叙述，正确的是（）A．如果人凝血因子基因的核苷酸序列已知，可用人工合成的方法获得该目的基因B．人体细胞中凝血因子基因进入羊受精卵细胞后，其传递和表达不再遵循中心法则C．在该转基因羊体内，人凝血因子基因存在于乳腺细胞，而不存在于其他体细胞中D．人凝血因子基因开始转录后，DNA聚合酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA【答案】A【解析】掌握基因工程的原理是突破口。
当已知某种基因的核苷酸序列，可以进行人工合成；目的基因的表达仍然遵循中心法则；由于目的基因是导入受精卵，所有体细胞都含有目的基因，只有在乳腺细胞中表达，是因为目的基因连接了乳蛋白的基因的启动子；转录需要的酶是RNA聚合酶。
基因工程复习学案(高三)
基因工程专题复习编写：李学孟审编：张军2015-4-7【目标引领】（考试大纲要求）1、基因工程的诞生Ⅰ2、基因工程的原理及技术Ⅱ3、基因工程的应用Ⅱ4、蛋白质工程Ⅰ复习重难点：基因工程的基本操作流程【课前自主复习】一、基因工程的概念和原理：1、操作环境是。
典型过程是。
2、基因工程的优点（1）克服了。
基因工程和植物体细胞杂交一样，突破了有性生殖的局限。
（2）改造了生物性状。
与诱变育种相比较克服了诱变育种的突变的不定向性。
3、原理是。
4、操作层次：是水平。
是获取某生物的DNA分子片段，把它与另一个DNA 分子片段结合成一个DNA分子。
5、实质：A种生物的某个基因通过一定方式导入B种生物体内并能进行基因表达。
基因没有改变，蛋白质没有改变，只是转录和翻译的场所发生改变。
二、基因工程操作常用的工具：1、限制酶又称。
2、DNA连接酶（1）种类：和。
（2）作用：是连接两个DNA片段形成磷酸二酯键。
3、载体（1）常用载体是，本质是小型；其他载体有λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。
（2）功能：将导入受体细胞。
（3）载体必需具备的条件：能够在宿主细胞内稳定保存并大量复制；有一个至限制酶的切割位点，以便于与外源基因进行连接；有特殊的遗传，供重组DNA的检测和鉴定。
三基因工程的操作程序：1、目的基因的获取有哪些方法？2、如何构建基因表达载体？画出一个完整的基因表达载体。
3、将目的基因导入受体细胞的方法4、目的基因的检测和鉴定（1）分子水平的检测：（2）个体水平检测。
四、蛋白质工程1、总结蛋白质工程与基因工程的区别与联系：【课中合作解疑】一、基因工程的概念和原理：1、基因工程实现的生物学基础？二、基因工程操作常用的工具：2、转基因抗虫棉的抗虫基因插到棉花细胞的哪个部位？抗虫棉的后代一定抗虫吗？三基因工程的操作程序：3、基因组文库与cDNA文库的区别。
4、动物基因工程的受体细胞一般是受精卵，为什么？一定是受精卵吗？如果受体细胞是高度分化的细胞，采用什么技术获得个体？5、为什么微生物常坐受体细胞？6、通过什么现象确定目的基因导入受体细胞并表达？7、受体细胞一定导入目的基因吗？如何把导入外源基因的受体细胞选出来？四、蛋白质工程8、蛋白质工程的直接操作对象是什么？【课中训练巩固】1、（2010全国2）下列叙述符合基因工程概念的是A．B淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因B．将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株C．用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株D．自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上2、（2010苏北四市三模）下列过程一定能够导致DNA分子结构发生改变的是（）A．基因工程 B．DNA分子扩增 C．染色体变异 D．交叉互换3、(2010无锡高三)基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。
河北省广平一中高三生物总复习学案 035 基因工程(一)(艺术班)
035基因工程(一)基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。
（一）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）主要是从原核生物中分离纯化出来的。
（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。
（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。
2.“分子缝合针”——DNA连接酶(1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。
②区别：E·coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。
(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。
DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。
3.“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。
②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。
③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。
（2）最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。
（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒(二)基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。
2.原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。
人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合成法_。
3.PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。
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基因工程专题复习
编写：李学孟审编：张军2015-4-7
【目标引领】（考试大纲要求）
1、基因工程的诞生Ⅰ
2、基因工程的原理及技术Ⅱ
3、基因工程的应用Ⅱ
4、蛋白质工程Ⅰ
复习重难点：基因工程的基本操作流程
【课前自主复习】
一、基因工程的概念和原理：
1、操作环境是。
典型过程是。
2、基因工程的优点
（1）克服了。
基因工程和植物体细胞杂交一样，突破了有性生殖的局限。
（2）改造了生物性状。
与诱变育种相比较克服了诱变育种的突变的不定向性。
3、原理是。
4、操作层次：是水平。
是获取某生物的DNA分子片段，把它与另一个DNA 分子片段结合成一个DNA分子。
5、实质：A种生物的某个基因通过一定方式导入B种生物体内并能进行基因表达。
基因没有改变，蛋白质没有改变，只是转录和翻译的场所发生改变。
二、基因工程操作常用的工具：
1、限制酶又称。
2、DNA连接酶
（1）种类：和。
（2）作用：是连接两个DNA片段形成磷酸二酯键。
3、载体
（1）常用载体是，本质是小型；其他载体有λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。
（2）功能：将导入受体细胞。
（3）载体必需具备的条件：
能够在宿主细胞内稳定保存并大量复制；
有一个至限制酶的切割位点，以便于与外源基因进行连接；
有特殊的遗传，供重组DNA的检测和鉴定。
三基因工程的操作程序：
1、目的基因的获取有哪些方法？
2、如何构建基因表达载体？画出一个完整的基因表达载体。
3、将目的基因导入受体细胞的方法
4、目的基因的检测和鉴定
（1）分子水平的检测：
（2）个体水平检测。
四、蛋白质工程
1、总结蛋白质工程与基因工程的区别与联系：
蛋白质工程基因工程
操作方法
区别
结果
操作对象都是基因，蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第
联系二代基因工程。
【课中合作解疑】
一、基因工程的概念和原理：
1、基因工程实现的生物学基础？
二、基因工程操作常用的工具：
2、转基因抗虫棉的抗虫基因插到棉花细胞的哪个部位？抗虫棉的后代一定抗虫
吗？
三基因工程的操作程序：
3、基因组文库与cDNA文库的区别。
4、动物基因工程的受体细胞一般是受精卵，为什么？一定是受精卵吗？如果受体
细胞是高度分化的细胞，采用什么技术获得个体？
5、为什么微生物常坐受体细胞？
6、通过什么现象确定目的基因导入受体细胞并表达？
7、受体细胞一定导入目的基因吗？如何把导入外源基因的受体细胞选出来？
四、蛋白质工程
8、蛋白质工程的直接操作对象是什么？
【课中训练巩固】
1、（2010全国2）下列叙述符合基因工程概念的是
A．B淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因
B．将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株
C．用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株
D．自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上
2、（2010苏北四市三模）下列过程一定能够导致DNA分子结构发生改变的是（）
A．基因工程B．DNA分子扩增C．染色体变异D．交叉互换
3、(2010无锡高三)基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。
已知限制酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC—限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。
根据图示判断下列操作正确的是（）
A.目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割
B.目的基因和质粒用限制酶I切割
C.质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶I切割
D.质粒用限制酶I切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割
4、2008年诺贝尔化学奖授予了“发现和发展了水母绿色荧光蛋白“的三位科学家。
将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因，再将该融合基因转入真核生物细胞内，表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。
绿色荧光蛋白在该研究中的主要作用是（）A．追踪目的基因在细胞内的复制过程
B．追踪目的基因插入到染色体上的位置
C．追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布
D．追踪目的基因编码的蛋白质的空间结构
5、为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发备受关注。
我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。
（1）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制酶作用于图中的______处，DNA连接酶作用于___________处。
（填a或b）
（2）将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和___________法。
（3）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用_________________技术，该技术的核心是_______________和_______________。
（4）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的_________作探针进行分子杂交检测，又要用________________方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。
6、蛋白质工程的基本操作程序正确是()
①蛋白质分子结构合成②DNA合成③mRNA合成④蛋白质的预期功能
⑤根据氨基酸的序列推出脱氧核苷酸的序列
A．①→②→③→④→⑤→①B．⑤→④→③→②→①→②
C．④→①→⑤→②→③→①D．②→③→⑤→①→②→④
【拓展应用】
1、（14全国II）植物甲具有极强的耐旱性，其耐旱性与某个基因有关。
若从该植物中获得
该耐旱基因，并将其转移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性。
回答下列问题：
（1）理论上，基因组文库含有生物的__________基因；而cDNA文库中含有生物的____________基因。
（2）若要从植物甲中获得耐旱基因，可首先建立该植物的基因组文库，再从中____________
出所需的耐旱基因。
（3）将耐旱基因导入农杆菌，并通过农杆菌转化法将其导入植物_________的体细胞中，经过一系列的过程得到再生植株。
要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达，应检测此再生植株中该基因的_________，如果检测结果呈阳性，再在田间试验中检测植株的__________是否得到提高。
（4）假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交，子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为3:1事，则可推测该耐旱基因整合到了___________（填“同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”）。