高效液相色谱法对丹参中丹参酮ⅡA,丹参酮Ⅰ和隐丹参酮的同时测定
丹参制剂中隐丹参酮和丹参酮_A的反相高效液相色谱法测定_张宇霞

/ / 。 别为 6 5 . 3m 3 . 5m g和 2 g g g
3 结论
本文建立了一种同 时 测 定 丹 参 制 剂 中 隐 丹 参 酮 和 丹 参 酮 Ⅱ A 含 量 的 反 相 高 效 液 相 色 谱 法 。 采 用 , ) 甲醇 -水 ( 体积比 8 为流动相获得了良好的分离效果 。 P h e n o m e m e x C 2 5 0×4 . 6mm, 5μ m) 0 ∶ 2 0 1 8 色谱柱 ( 结果表明 , 所建立的反相高效液相色谱方法具有前处理简便 、 分析时间短 、 选择性好等特点 , 适用于丹参及 其相关制剂的质量控制 。
第2 9卷
, 甲醇 6 用4 冷却后 , 转移至 2 用7 0m L 密塞 , 0k H z超声波清洗剂超声提取 3 0m i n 5 0m L 容量瓶 , 5% 甲醇 稀释至刻度 , 摇匀 , 用0 作为样品溶液 。 . 4 5μ m 微孔滤膜过滤后 , ; 流 动 相: 甲 醇 -水 ( 体积比8 1. 2. 3 色谱分析条件 色谱柱 : P h e n o m e m e x C 2 5 0×4 . 6 mm, 5μ m) 0 ∶ 1 8柱 ( ) ; / 柱温 : 流速 : 检测波长 : 进样量 : 2 0 3 5℃ ; 1 . 0m L m i n; 2 7 0n m; 2 0μ L。
但重现性差 ; 分光光度法虽简便易行 , 但需先分离 、 富集 。 而液相色谱法同 时 测 定 中 成 药 中 隐 丹 参 酮 和 丹 参酮 Ⅱ A 鲜 有 报 道 。 本 文 建 立 了 同 时 测 定 丹 参 制 剂 中 隐 丹 参 酮 和 丹 参 酮 Ⅱ A 的 反 相 高 效 液 相 色 谱 法 ( , 可用于丹参相关制剂的质量控制 。 R P-HP L C)
高效液相色谱法测定丹参中丹参酮IIA的含量

高效液相色谱法测定丹参中丹参酮IIA的含量何玲玲【摘要】目的建立高效液相色谱法测定中药丹参不同部位中丹参酮IIA 的含量.方法采用反相高效液相色谱法,选择色谱柱Hypersil ODSC18 柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:甲醇∶水=75:25;流速为1.2mL/min;柱温为30℃;检测波长为268 ~ 270nm.结果丹参酮IIA 浓度在1.25 ~21.45μg/mL(r=0.9997)范围内线性关系良好,平均加样回收率为99.83%,RSD=2.04%(n=6).结论采用反相高效液相色谱法测定丹参中丹参酮IIA 的含量,该方法快速、灵敏、准确,可以为丹参的种植、品质鉴定、扩展药用部位以及控制丹参药材的质量提供测定依据.【期刊名称】《中国医药指南》【年(卷),期】2012(010)011【总页数】2页(P36-37)【关键词】高效液相;丹参;丹参酮IIA;色谱柱【作者】何玲玲【作者单位】佛山市中医院,广东,佛山,528000【正文语种】中文【中图分类】R282.710.3丹参(Salvia Miltiorrhiza Bunge)为唇形科(Labiatae)鼠尾草属多年生草本植物,传统以根入药。
丹参味苦,性微寒,具活血化瘀、凉血消痈、清心除烦之功效。
活性成分主要包括脂溶性成分和水溶性成分,丹参酮IIA是其脂溶性代表成分之一,相对含量较高,有扩张冠脉,抗心肌缺血等作用[1]。
目前,高效液相色谱法(HPLC)已经成为控制中药质量的最为有效的手段,而且很多资料中记录了对丹参高效液相色谱的研究[2,3],但对丹参的根、茎、叶中丹参酮IIA的含量测定鲜有报道,本文通过对丹参各部位中丹参酮IIA含量的测定,以为今后中药丹参的采集、部位选择及加工提供一定的理论参考,现将研究结果报道如下。
1 实验材料1.1 实验仪器Waters 700高效液相色谱仪(美国 Waters公司);Waters 700紫外检测器;色谱柱Hypersil ODSC18柱(4.6mm×250mm,5μm );BS110S电子天平(北京赛多利斯天平有限公司);干燥箱(浙江省金坛市正基仪器有限公司,型号CS-202),电热恒温水浴锅(北京长安科学仪器厂,型号:HH S11-2),超声仪( AUTOSC I ENCE,型号:AS5150A )。
高效液相色法同时测定丹参酮胶囊中隐丹参酮和丹参酮ⅡA含量

高效液相色法同时测定丹参酮胶囊中隐丹参酮和丹参酮ⅡA含量伍庆;卢俊;陈文生;赵杨;黄俊学;梁洁;胡蓉;邹晶【期刊名称】《贵州师范大学学报(自然科学版)》【年(卷),期】2006(024)004【摘要】采用高效液相色谱法同时测定丹参酮胶囊中隐丹参酮和丹参酮ⅡA含量,建立丹参酮胶囊质量控制体系.采用C18 柱分离测定;甲醇:水(80:20)为流动相,检测波长:270nm;流速:1.0ml/min. 结果:隐丹参酮和丹参酮ⅡA分别在 0.20~160μg(r >0.999 9)、0.21~1.68μg(r>0.999 8)质量范围内线性关系良好;回收率在98.7%~103.0%之间.【总页数】3页(P103-105)【作者】伍庆;卢俊;陈文生;赵杨;黄俊学;梁洁;胡蓉;邹晶【作者单位】贵州师范大学分析测试中心,贵阳,550001;贵州省山地环境重点实验室,贵阳,550001;贵阳生产力促进中心,贵阳,550002;贵州师范大学分析测试中心,贵阳,550001;贵阳中医学院,贵阳,550003;贵州师范大学分析测试中心,贵阳,550001;贵州师范大学分析测试中心,贵阳,550001;贵州省山地环境重点实验室,贵阳,550001;贵州省山地环境重点实验室,贵阳,550001【正文语种】中文【中图分类】O6【相关文献】1.HPLC法测定宁神补心片中隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA含量 [J], 袁荣高2.HPLC 测定丹参酮胶囊中隐丹参酮的含量 [J], 汪艳;徐庆辉;凌丽美3.高效液相法测定9种丹参制剂中隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮ⅡA [J], 张亮;彭朋;张新峰;刘松灿;贺敏;蒋健;裘福荣4.HPLC同时测定丹参酮含片中隐丹参酮和丹参酮ⅡA含量 [J], 薛克昌;史宁;谭生建;迟家平;姜莉;吴久鸿5.高效液相色谱法测定丹参滴注液中隐丹参酮和丹参酮ⅡA含量 [J], 田闯因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
高效液相色谱法测定丹参及其复方制剂中的3个丹参酮

v ( o . 1 %磷 酸 )=8 5 : 1 5混合 溶 液为 流动 相 , 检 测 波长 为 2 5 4 a m, 流速 为 1 . 0 mL / m i n . 在 上述 色谱
条件 下隐丹参酮、 丹参酮 I 和丹参酮 Ⅱ 在 1 0 m i n内实现有效分 离和准确测定, 加标 回收率在
h t t p: / / x b . y n n i . e d u .丹 参 及 其 复 方 制剂 中的 3个 丹 参酮
马志刚 , 曹秋娥 , 丁 中涛
( 云南大学 化学 科学与工程学 院 , 教育部 自然资源药物化学 重点 实验 室 , 云南 昆明 6 5 0 0 9 1 )
云南 民族大学 学报 : 自然科 学版 , 2 0 1 3 , 2 2 ( 6 ) : 3 9 1 —3 9 3
d o i : 1 0 . 3 9 6 9 / j . i s s n . 1 6 7 2—8 5 1 3 . 2 0 1 3 . 0 6 . 0 0 1
CN 5 3一l 1 9 2 /N I S S N 1 6 7 2—8 5 1 3
摘要: 建立了同时测定丹参及其复方制剂 中隐丹参酮、 丹参酮 I 和丹参 酮 Ⅱ 的反相 高效液相
色谱 法. 采 用 Wa t e r s S p h e r i s o r b O D S 2 ( 5 m, 4 . 6 m m i . d .X2 5 0 mm) 为 色谱 柱 , ( 甲醇 ) :
S a l v i a mi l t i o r r h i z a B g e a n d i t s p r e p a r a t i o n s b y r e v e r s e d p h a s e h i g h p e r f o r m a n c e l i q u i d c h r o m a t o g r a p h y( R P—
高效液相色谱法测定丹参片中丹参酮Ⅱ A含量的方法

高效液相色谱法测定丹参片中丹参酮ⅡA 含量的方法褚晶晶【摘要】 目的 观察采用高效液相色谱法对丹参片中的丹参酮ⅡA 的含量进行测定的效果。
方法 本研究检测供试品溶液以超声波提取法对丹参片进行制备, 对照品采用丹参酮ⅡA, 测定方法采用高效液相色谱法, 选择合适的色谱柱、流动相以及检测波长, 并控制适宜的流速以及进样量, 测定温度选择为室温。
结果 在0.5126~4.8700 μg/ml 范围内丹参酮ⅡA 与峰面积具有良好的线性关系, 求的回归方程为Y =1425.3X +28.75, r =0.9996, n=5;平均回收率为99.63%, RSD 值为1.46%(n=9)。
结论 采用高效液相色谱法对丹参片中的丹参酮ⅡA 的含量进行测定具有操作方法简便, 测定结果稳定的优势, 适用于丹参片中的丹参酮ⅡA 的含量控制, 值得推广。
【关键词】 高效液相色谱法;丹参片;丹参酮ⅡA ;含量测定DOI :10.14164/11-5581/r.2017.12.112作者单位:123000 阜新市药品检验所业务办公室丹参片在2015年版《中国药典》中质量标准只有丹酚酸B 的含量测定, 本文采用高效液相色谱法对丹参片中丹参酮ⅡA 的含量测定方法进行了研究。
1 仪器与材料本研究采用的高效液相色谱仪为美国waters E2695高效液相色谱仪。
丹参片(批号分别为161011, 161012, 161013), 丹参酮ⅡA 对照品(中国药品生物制品检定所, 批号为0766-200201)。
本研究所用甲醇均为色谱纯, 所用水为纯化水。
2 方法与结果2. 1 色谱条件 选择规格为(4.6 mm×250 mm, 5 μm)的waters symmetry C18色谱柱, 以甲醇-水(80∶20)为流动相, 控制流速为1.0 ml/min, 选取270 nm 为检测波长, 并控制适宜的冲柱比例以及进样量。
2. 2 溶液的制备 ①对照品溶液:称取20 mg 丹参酮ⅡA 对照品, 将其放于100 ml 棕色量瓶中, 采用甲醇溶解后稀释至刻度。
应用高效液相色谱法测定丹参中丹参酮IIA的含量

应用高效液相色谱法测定丹参中丹参酮IIA的含量目的:分析高效液相色谱法在中药丹参不同部位中丹参酮IIA含量测定中的应用价值。
方法:建立反相高效液相色谱测定模式,选用Hypers110DS(C18)色谱柱,以75甲醇/25水为相液流动相比例,分别检测丹参不同部位有效成分丹参酮IIA的含量,并通过实验验证这一方法的有效性、稳定性等。
结果:丹参酮IIA面积和浓度呈线性相关,在1.25-21.45yg/ml浓度范围内线性最佳;加样溶液丹参酮IIA回收率平均为99.52%,相对标准偏差值为2.02%;丹参茎、叶未含丹参酮IIA。
结论:反相高效液相色谱法,可在短时间内精准获知丹参不同部位丹参酮IIA的含量,为丹参品质鉴定、药用价值和剂量研究工作提供可靠参考资料。
标签:高效液相;丹参;丹参酮IIA;色谱柱丹参是药用价值极高的草本植物,其根部内含丹参酮,常被入药调经疏络、活血祛瘀、消肿镇痛,其中丹参酮IIA是丹参脂溶性成分的代表物质,被广泛用于冠心病防治。
但是,丹参入药采购、运输、选品等各个环节均存在危险因素,如部分不法分子试图用伪劣品以假乱真牟取利益,制药工作人员专业水平不达标不能准确鉴别真伪、优劣,严重影响了中医药学的发展。
鉴于此,本院开展了丹参不同部位丹参酮IIA含量测定研究,旨在证实高效液相色谱法的应用价值并为丹参药用研究提供参考资料。
1 材料和设备1.1 实验材料本实验研究材料包括由中国药品生物制品检定所提供的丹参酮IIA标准品,江阴祥辉化工有限公司提供的色谱纯甲醇,广州致信中药饮片有限公司提供的干燥丹参根(6个月龄)、茎和叶子,实验用超纯水。
1.2 实验设备本实验研究设备包括高效液相色谱仪(杭州汉泽仪器有限公司,型号为LC-2010HT),紫外检测器(Genesys系列)、色谱柱(Hypersi10DSC18,长度为250mm,内径为4.6mm,填料颗粒直径为Sμm)、电子分析天平(瑞士梅特勒一托利多AB-S系列)、精密可程式干燥箱(上海博迅医疗生物仪器股份有限公司,BXH-130S)、电热恒温水槽(上海精密仪器仪表有限公司,CU系列)、实验室色谱超生仪(必能信超声上海有限公司,SB2200)。
高效液相色谱法测定白花丹参中总丹参酮和丹参酮Ⅱ A含量

高效液相色谱法测定白花丹参中总丹参酮和丹参酮Ⅱ A含量齐永秀;李香;万建建;曹明亮;高允生;夏作理【期刊名称】《医药导报》【年(卷),期】2007(26)7【摘要】目的采用高效液相色谱(HPLC)法对白花丹参总丹参酮和丹参酮ⅡA含量进行分析.方法采用乙醇超声提取法提取白花丹参中脂溶性成分,HPLC法进行测定,色谱柱为Waters symmetry shieLd RP18(105 mm×3.9 mm,5μm);测定总丹参酮以甲醇-水(90∶10)为流动相,测定丹参酮ⅡA以乙腈-水(75∶25)为流动相,流速均为0.8 mL·min-1;检测波长270 nm.结果总丹参酮在0.075~0.750 μg·mL-1浓度内与峰面积线性关系良好,线性方程为A=5.88×106C-1.99×105,r=0.9994(n=5),丹参酮ⅡA在7.5~50.00μg·mL-1内线性关系良好,线性方程为A=7.8×104C-5.41×104,r=0.999 4(n=5).结论建立的HPLC法灵敏度高,方法准确,测定结果重现性好.白花丹参中含有丰富的总丹参酮和丹参酮ⅡA.【总页数】3页(P796-798)【作者】齐永秀;李香;万建建;曹明亮;高允生;夏作理【作者单位】泰山医学院药学院,泰安,271016;泰山医学院2003级药学专升本班,泰安,271016;泰山医学院2003级药学专升本班,泰安,271016;泰山医学院药学院,泰安,271016;泰山医学院药学院,泰安,271016;泰山医学院药学院,泰安,271016【正文语种】中文【中图分类】R283.4;R927.2【相关文献】1.一测多评法测定白花丹参中丹参酮ⅡA、隐丹参酮和丹参酮Ⅰ的含量 [J], 秦增贵;柳克浩;高长青;秦超2.一测多评法测定白花丹参中丹参酮Ⅱ_A、隐丹参酮和丹参酮Ⅰ的含量 [J], 秦增贵;柳克浩;高长青;秦超;3.应用高效液相色谱法测定丹参中丹参酮IIA的含量 [J], 庞谢辉4.应用高效液相色谱法测定丹参中丹参酮IIA的含量 [J], 庞谢辉5.反相高效液相色谱法测定丹参中丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA的含量 [J], 金学军;姜英子;金成赞;金将杰;金红日;南极星因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
一测多评法测定复方丹参片中4种丹参酮类成分的含量_吴笛

品( CⅠ; 4 - 丹参酮Ⅱ A
Fig. 1
Chromatograms of reference standard ( A ) , sample of
。 一测多
评法适用于对照品难得或制备成本高或不稳定的情 [2 ] 况下同类多成分的同时测定 。 目前一测多评法 《中国药典》 2010 年版一部收录, 用于黄连的含 已被 量测定。 复方丹参片由丹参、 三七、 冰片 3 味中药组成, 其中丹参为主要成分。丹参的活性成分按化学结构 分为两大类: 脂溶性的丹参酮类和水溶性的丹参酚 酸类, 而丹参酮类化合物中, 二氢丹参酮 Ⅰ ( dihydrotanshinone Ⅰ) 、 隐丹参酮( cryptotanshinone ) 、 丹参酮 Ⅰ( tanshinone Ⅰ ) 和丹参酮 Ⅱ A ( tanshinone Ⅱ A ) 的
[1 ]
[311 ] , 含量较高 但对光和热不稳定。 《中国药典》 2010 年版一部复方丹参片项下丹
参酮类的含量测定方法仅以丹参酮 Ⅱ A 作为单一检 测指标, 不能全面反映复方丹参片的质量。 为提高 复方丹参片的质量标准, 以更好地控制复方丹参片 的质量, 同时基于丹参酮类化合物的不稳定性 , 本实 验以相对较稳定且标准品易得的丹参酮 Ⅱ A 为内 标, 采用一测多评法建立复方丹参片中主要活性成 分二氢丹参酮 Ⅰ、 隐丹参酮、 丹参酮 Ⅰ、 丹参酮 Ⅱ A , 的含量测定方法 并将一测多评法与常规外标法进 分析一测多评法用于复方丹参片中丹参酮 行比较, 类成分含量测定的可行性。 1 仪器与试药 Waters 2695 高效液相 色 谱 仪 ( 美 国 Waters 公 Dionex UltiMate 3000 高效液相色谱仪, Dionex 司) ,
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高效液相色谱法对丹参中丹参酮ⅡA ,丹参酮Ⅰ和隐丹参酮的同时测定
——外标法定量分析
【实验目的】
1. 掌握高效液相色谱仪的结构和高效液相色谱的原理。
2.掌握高效液相色谱梯度洗脱的分析方法。
3.掌握外标定量分析法。
【实验原理】
丹参酮ⅡA 、丹参酮Ⅰ和隐丹参酮是从唇形科鼠尾草属植物丹参的根部提取的脂溶性二萜类物质。
其分子结构、分子式、分子量如下:
O
H 3C
C H
3
C H
3
O
O
O
O
O
O
O
O
C 18H 12O 3 294.33 C 18H 12O 3 276.29 C 19H 20O 3 296.36
丹参酮ⅡA 丹参酮Ⅰ 隐丹参酮
本实验将采用高效液相色谱法对丹参中的三种脂溶性提取物(丹参酮ⅡA 、丹参酮Ⅰ、隐丹参酮)进行同时测定。
高效液相色谱分析包括两种洗脱方式:等度洗脱和梯度洗脱。
梯度洗脱又称为梯度淋洗或程序洗提,即在分离过程中使两种或者两种以上不同极性的溶剂按一定程序连续改变他们之间的比例,从而使流动相的强度、极性、pH 值或离子强度相应地变化,达到提高分离效果,缩短分离时间的目的。
梯度洗脱可以使一个复杂样品中性质差异较大的组分,都能在各自适宜的分离条件(容量因子k 适宜)下实现分离。
色谱定量分析的依据是各分析组分的质量或者浓度与检测器的响应信号(色谱图上表现为峰面积A 或峰高h)成正比,即m=f ’A(f ’称为定量校正因子)。
色谱法中常用的定量分析方法有归一化法,内标法和外标法。
外标法是应用待测组分的纯物质来制作标准曲线,即配置不同质量分数(浓度)的标准溶液,取固定量标准溶液进样分析,从所得的色谱图上测出响应信号(峰高或峰面积),然后绘制峰高或峰面积对含量(质量或浓度)的标准曲线。
本实验采用反相化学键合相色谱法,以十八烷基硅烷键合相为固定相,0.1%磷酸溶液-甲醇为流动相分离丹参中脂溶性提取物,并通过外标法对三种待测物质进行定量分析。
当组分在固定相和流动相间进行分配时,极性大的物质在流动相中的溶解度较大,而极性小的物质在流动相中的溶解度较小,组分的流
出顺序是极性大的化合物在前,极性小的化合物在后,最终实现各物质的分离。
【实验用品】
1.仪器
日本岛津LC-20A高效液相色谱仪(配备SPD-20A紫外检测器、SIL-20A自动进样器、LC-20AB 输液泵、CTO-10AS柱温箱、脱气机)、色谱柱:Diamonsil C18柱(150 mm×4.6 mm,5 μm)、电子天平、超声波清洗仪、溶剂过滤器、微孔滤膜(0.45µm,无机相和有机相)、50 ml具塞三角瓶、25.00 mL 移液管、定量滤纸、漏斗、漏斗架、一次性针筒过滤器(脂溶性)、微量注射器。
2.试剂
丹参酮ⅡA标准品,丹参酮Ⅰ标准品,隐丹参酮标准品,甲醇(色谱纯),乙醇(分析纯),磷酸(分析纯),超纯水,丹参粉末。
【实验条件】
1.色谱柱:C18柱(150mm×4.6mm,5 μm)
2.流动相:泵A:0.1% 磷酸水溶液;泵B:甲醇
泵B浓度:0~40 min,70%~75%;40~45 min,75%
流速:0.8mL/min
3.紫外检测器:测定波长254 nm
4.柱温箱:30℃
5.进样量:10μL
【实验内容】
1.丹参酮ⅡA,丹参酮Ⅰ和隐丹参酮混合标准品溶液的配制
2.丹参粉末中丹参酮ⅡA,丹参酮Ⅰ和隐丹参酮的提取
精密称取0.2g(精确至0.1mg)干燥样品粉末,置于具塞三角瓶中,准确加入25.00mL 80%乙醇,称重,超声提取25min,补重,摇匀过滤,得到待测液。
3.流动相的制备
4.实时分析
(1)将流动相至于超声波清洗器上脱气40min。
(2)根据实验条件,将仪器调节至进样状态,色谱工作站基线呈平直,即可进样
(3)使用一次性针筒过滤器分别将对照品和待测液过滤到进样瓶中,进样对照品和样品并记录数据。
(4)实验结束后,按要求冲洗分析柱,关好仪器。
【数据记录】
【数据处理】
25×ω1
1.样品中丹参酮ⅡA(丹参酮Ⅰ/隐丹参酮)的含量ω(μg/g)
m(g):称取干燥丹参粉末的质量;
ω1 (μg):10μl进样量中各待测组分的含量;
2.计算相对标准偏差RSD
【思考题】
1.用外标法进行定量分析的优缺点是什么?
2.什么是梯度洗脱?有什么优点?
3.若标准曲线用标准品质量浓度对峰高作图,能给出准确结果吗?与本实验的质量浓度-峰面积标准曲线相比何者优越?为什么?。