血清外泌体来源的microRNA-221-3p在肝细胞癌中的表达及意义 吴俊艺
MicroRNA对相关癌细胞作用的研究进展
科技视界Science &Technology VisionScience &Technology Vision 科技视界1MicroRNA 的介绍MicroRNA 一般简写作miRNA ,是一种21-25nt 长的单链小分子RNA,成熟的miRNA,5’端有一个磷酸基团,3’端为羟基。
它广泛存在于真核生物中,是一组不编码蛋白质的短序列RNA。
编码miRNAs 的基因最初产生一个长的pri-RNA 分子,这种初期分子被剪切成约70-90个碱基大小、具发夹结构的单链RNA 前体,并经过Dicer 酶加工后生成。
成熟的miRNA 5’端的磷酸基团和3’端羟基则是它与相同长度的功能RNA 降解片段的区分标志。
目前只有一小部分miRNAs 生物学功能得到阐明。
这些miRNAs 调节了细胞生长,组织分化,与生命过程中发育、疾病有关。
通过对基因组上miRNA 的位点分析,显示其在发育和疾病中起了非常重要的作用。
而最近的研究发现,miRNA 表达与多种癌症相关,大约50%得到注解的miRNAs 在基因组上定位于与肿瘤相关的脆性位点,这说明miRNAs 在肿瘤发生过程中起至关重要的作用。
同时据推测,miRNA 调节着人类1/3的基因。
2癌细胞的介绍癌细胞是一种产生了变异的细胞,可以无限生长、转化和转移,能够无限增殖并破坏正常的细胞组织,难以消灭,它是癌症的根源。
大部分细胞的分裂次数是有限的,即“海弗利克极限”。
在分裂40-60次之后,细胞的生长速度会下降直至终止,这时细胞就进入衰老期,但是依然存活。
这是由于细胞分裂跟端粒有关,如果没有端粒,细胞每分裂一次染色体都会变短,基因信息就会缺失。
但是如果存在端粒,每次细胞分裂都会损失端粒的一部分核苷酸,而正常细胞中没有端粒酶,不能正常合成端粒,随着细胞分裂的进行,最后就没有端粒可以保护染色体的末端DNA,所以正常细胞会衰老死亡。
而癌细胞中有端粒酶,可以在染色体末端增加端粒DNA。
外泌体中基因编码与非编码RNA在疾病进程中的作用研究
外泌体中基因编码与非编码RNA在疾病进程中的作用研究近年来，外泌体越来越受到科研人员的关注。
外泌体是一种细胞分泌物，包裹着生物分子，例如基因编码RNA和非编码RNA。
这些分子可以被外泌体释放到周围环境中，作用于相邻或远离的细胞，从而影响疾病的进程。
本文将介绍外泌体中基因编码RNA和非编码RNA在疾病进程中的作用研究。
1. 外泌体介导的基因编码RNA在疾病中的作用基因编码RNA是指可以被转录成蛋白质的RNA分子。
许多疾病的发生与蛋白质的表达水平有关，因此外泌体介导的基因编码RNA对疾病的进程起着重要的作用。
1.1 外泌体介导的miRNA在癌症中的作用miRNA（microRNA）是一种非编码RNA，其长度为20-22个碱基，与靶向RNA结合并诱导降解或抑制转录。
大量的实验表明miRNA在肿瘤的生长、转移、血管生成等方面发挥重要的作用。
研究发现，一些肿瘤细胞系中的外泌体富含miRNA，这些miRNA可以被转移至周围的正常细胞并影响其表达。
例如，miR-21被发现在外泌体中高度表达，在肺癌和乳腺癌中表达增高。
miR-21通过靶向PTEN蛋白和PDCD4蛋白，抑制正常细胞的凋亡和抗癌基因的表达。
此外，miRNA也可以通过外泌体的方式影响肿瘤疫苗的研究。
由于miRNA和蛋白质的结构差异，故学者们利用外泌体将miRNA包裹在脂质体中，增加其稳定性，并提高其在肿瘤细胞中的转移能力。
1.2 外泌体介导的lncRNA在心脏病中的作用lncRNA（long noncoding RNA）是一种长度超过200个碱基的非编码RNA。
lncRNA与DNA、RNA或蛋白质相互作用，参与细胞生物过程的调控，例如RNA 剪接、表观遗传修饰和转录调控。
心脏病是心血管疾病的一种，包括心肌梗死、心力衰竭、心律失常等等。
近年来，研究发现外泌体具有保护心血管系统的作用。
龚卫等人研究发现，有些脂肪细胞通过释放以载体形式存在的外泌体将其所含的lncRNA-UCR（上皮分化相关超保守基因区）转移到心脏细胞中，从而增强心脏的自我修复能力。
microRNA-335在慢性肝病中的作用
!M"!ｍｉｃｒｏＲＮＡ－３３５在慢性肝病中的作用袁亚杰，丁豪杰，孔庆明杭州医学院寄生虫病研究所，杭州３１００００摘要：近年来，ｍｉｃｒｏＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）在肝脏病理过程中的调控作用备受关注。
在病毒性及脂肪性肝炎中，ｍｉＲＮＡ－３３５通过Ｙ盒上的性别决定区（ＳＯＸ）４转录因子调控肝炎进展；在进展性肝纤维化及肝癌发生发展过程中，ｍｉＲＮＡ－３３５通过缺氧诱导因子１α、磷酸酶和紧张素同系物、靶向Ｒｈｏ蛋白激酶１、纤溶酶原激活物抑制剂１、碱性螺旋－环－螺旋转录因子家族１及间质－上皮细胞转化因子等靶基因调控肝脏中胶原的产生、沉积和降解，从而调控肝星状细胞或肝癌细胞的迁移和侵袭等生物学行为。
主要归纳了近几年报道的ｍｉＲＮＡ－３３５在肝炎、肝纤维化和肝癌中作用的研究进展，同时，结合现有研究，提出ｍｉＲＮＡ－３３５／巯基氧化酶１调控轴可能通过抑制肝星状细胞活化介导青蒿琥酯抗血吸虫性肝纤维化的猜想，以期为抗肝纤维化及其他肝病治疗提供新思路。
关键词：肝炎；肝硬化；癌，肝细胞；微ＲＮＡｓ中图分类号：Ｒ５７５ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００１－５２５６（２０２１）０２－０４７１－０４ＲｏｌｅｏｆｍｉｃｒｏＲＮＡ－３３５ｉｎｃｈｒｏｎｉｃｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅｓＹＵＡＮＹａｊｉｅ，ＤＩＮＧＨａｏｊｉｅ，ＫＯＮＧＱｉｎｇｍｉｎｇ．（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＰａｒａｓｉｔｉｃＤｉｓｅａｓｅｓ，ＨａｎｇｚｈｏｕＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ３１００００，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎｒｅｃｅｎｔｙｅａｒｓ，ｔｈｅｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｒｏｌｅｏｆｍｉｃｒｏＲＮＡｓｉｎｌｉｖｅｒｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｐｒｏｃｅｓｓｈａｓａｔｔｒａｃｔｅｄｍｏｒｅａｎｄｍｏｒｅａｔｔｅｎｔｉｏｎ．Ｉｎｖｉｒａｌｈｅｐａｔｉｔｉｓａｎｄｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ，ｍｉｃｒｏＲＮＡ－３３５（ｍｉＲＮＡ－３３５）ｒｅｇｕｌａｔｅｓｔｈｅｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎｏｆｈｅｐａｔｉｔｉｓｖｉａｔｈｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎｆａｃｔｏｒｓｅｘ－ｄｅｔｅｒ ｍｉｎｉｎｇｒｅｇｉｏｎＹ－ｂｏｘ４；ｉｎｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎｏｆｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅｌｉｖｅｒｆｉｂｒｏｓｉｓａｎｄｌｉｖｅｒｃａｎｃｅｒ，ｍｉＲＮＡ－３３５ａｆｆｅｃｔｓｃｏｌｌａｇｅｎｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ，ａｎｄｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｌｉｖｅｒｖｉａｔｈｅｔａｒｇｅｔｇｅｎｅｓｉｎｃｌｕｄｉｎｇｈｙｐｏｘｉａ－ｉｎｄｕｃｉｂｌｅｆａｃｔｏｒ１α，ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅａｎｄｔｅｎｓｉｎｈｏｍｏ ｌｏｇｕｅ，Ｒｈｏ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｃｏｉｌｅｄ－ｃｏｉｌｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅ１，ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｏｒｉｎｈｉｂｉｔｏｒ－１，ｔｗｉｓｔｆａｍｉｌｙｂＨＬＨｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎｆａｃｔｏｒ１，ａｎｄｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ－ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｔｒａｎｓｉｔｉｏｎｆａｃｔｏｒａｎｄｔｈｕｓｒｅｇｕｌａｔｅｓｔｈｅｍｉｇｒａｔｉｏｎａｎｄｉｎｖａｓｉｏｎｏｆｈｅｐａｔｉｃｓｔｅｌｌａｔｅｃｅｌｌｓａｎｄｈｅｐａｔｏｍａｃｅｌｌｓ．ＴｈｉｓａｒｔｉｃｌｅｓｕｍｍａｒｉｚｅｓｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈａｄｖａｎｃｅｓｉｎｔｈｅｒｏｌｅｏｆｍｉＲＮＡ－３３５ｉｎｈｅｐａｔｉｔｉｓ，ｌｉｖｅｒｆｉｂｒｏｓｉｓ，ａｎｄｌｉｖｅｒｃａｎｃｅｒｉｎｒｅｃｅｎｔｙｅａｒｓ，ａｎｄｂａｓｅｄｏｎｅｘｉｓｔｉｎｇｄａｔａ，ｉｔｉｓｐｏｉｎｔｅｄｏｕｔｔｈａｔｔｈｅｍｉＲＮＡ－３３５／ＱＳＯＸ１ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙａｘｉｓｍａｙｍｅｄｉａｔｅａｒｔｅｓｕｎａｔｅａｇａｉｎｓｔｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍａｌｌｉｖｅｒｆｉ ｂｒｏｓｉｓｂｙｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇｈｅｐａｔｉｃｓｔｅｌｌａｔｅｃｅｌｌａｃｔｉｖａｔｉｏｎ，ｓｏａｓｔｏｐｒｏｖｉｄｅｎｅｗｉｄｅａｓｆｏｒｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｌｉｖｅｒｆｉｂｒｏｓｉｓａｎｄｏｔｈｅｒｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ；ＬｉｖｅｒＣｉｒｒｈｏｓｉｓ；Ｃａｒｃｉｎｏｍａ，Ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ；ＭｉｃｒｏＲＮＡｓＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－５２５６．２０２１．０２．０４７收稿日期：２０２０－０７－２８；修回日期：２０２０－０８－３１基金项目：国家自然科学基金（３１５０１０５０）；浙江省青山湖联合基金（ＱＹ１９Ｈ１９０００２）作者简介：袁亚杰（１９９４—），女，主要从事分子寄生虫学研究通信作者：孔庆明，151****0576＠１６３．ｃｏｍ 肝病在全球尤其是亚太地区是一个严重的公共卫生问题［１－２］。
MicroRNA-122是肝癌细胞和线粒体调节的调控因子
microRNA-122 as a regulator of mitochondrial metabolic gene network in hepatocellular carcinoma接下来，主要概括整片文章主要讲解的内容与相关问题。
整个文章首先对肝癌，癌旁组织中的220个人类的miRNA,和所有转录本（mRNA）进行了芯片分析，得出他们各自的表达量数据。
转录本数据分为了两种：上调（并非全是二级靶标，含有大多数的二级靶标）和下调（并非是初级靶标）。
220个miRNA的表达量在两种组织中的差异，其次是它们与转录本相关或负相关的相关系数和这些转录本的数量。
发现：miRNA122表达量差异性最大，且又做了一个肝硬化的对照实验，进一步说明其他肝疾病中miRNA122的表达量也会明显减少。
紧接着，我们采用种子匹配的方法，即用4096个六聚体去匹配所有的转录本（mRNA），检测它们3’UTR种子匹配富集。
（六聚体的序列也就对应某个miRNA的种子区的碱基序列）计算相应的P值和E值。
发现，只有13个miRNA符合E值条件。
针对某个特定的miRNA，我们将与它相关的（或负相关的）转录本与其他miRNA的六聚体进行匹配，检测下富集程度。
最后，发现6个与下调转录本相关的miRNA中，miRNA122的3’UTR种子匹配的富集程度最高。
也就是miRNA122是转录本调节的关键调控子。
下一步，我们通过GO与KEGG两个数据资源库，分析了与miRNA122相关的转录本的基因功能类型。
首先，用central seed hexamer在进行与转录本的匹配，检测富集。
发现，与miRNA122富集的负相关的转录本，主要是富集在细胞周期基因。
而相关的E值却不符合条件，也就是miRNA122不能直接调控细胞周期。
作者检测了与miRNA122正相关的转录本，发现3’UTE匹配不富集，但是这些转录本却在线粒体定位的代谢功能基因富集。
外泌体在肝细胞癌中的作用
综述DOI: 10.3877/cma.j.issn.2095-3232.2019.05.020基金项目： 广东省自然科学基金（2016A030313848）；广州市科技计划项目（201704020175） 作者单位： 510630 广州，中山大学附属第三医院肝胆外科通信作者： 邓美海，Email ：dengmeih@外泌体在肝细胞癌中的作用杨嘉睿 邓美海 梁豪 熊志勇 姚志成【关键词】 癌， 肝细胞； 外泌体肝细胞癌（hepatocellular carcinoma ，HCC ）是最常见的原发性肝脏恶性肿瘤。
每年有超过60万例确诊病例，它是全球第五大常见癌症，也是导致癌症相关死亡的第二大原因。
肝癌切除术是治疗HCC 最有效的方法，但HCC 复发率高，治疗效果不理想[1]。
由于HCC 是一种异质性疾病，具有遗传和表观遗传学变化的积累，因此识别可用于HCC 诊断和预后的分子生物标志物至关重要[2]。
外泌体是由核内体的膜向腔内凹陷形成很多封闭的小泡，这些小泡被称为多泡体（multivesicular body ，MVBs ）[3]。
分泌到细胞外的外泌体是一种直径为30～100 nm 的小囊泡。
外泌体的表面有大量的蛋白质和脂质成分，内部有microRNAs （miRNAs ）、mRNAs 和胞质蛋白等成分。
外泌体的膜结构可以保护内部的细胞因子和其他蛋白质不被血清中的蛋白酶分解，从而扮演了一个细胞间传递信息载体的角色。
近年来的研究发现外泌体可以诱导抗肿瘤免疫应答，因此对外泌体的基础研究和利用外泌体开发抗肿瘤疫苗的应用研究越来越被关注。
最近的证据表明，肝细胞也释放外泌体，其成分可能反映细胞的病理变化[4]。
此外，一系列关于HBV 病毒粒子形态发生的研究表明，多泡体及其相关细胞蛋白在这一过程中发挥了重要作用[1,5]。
HBV 抗原表达、基因组复制、病毒粒子组装和分泌可能直接或间接影响外泌体的形成和分泌过程，导致受感染肝细胞释放的外泌体成分发生变化[2-3, 6-7]。
外泌体miRNA在肿瘤代谢的作用和诊断治疗中的价值
外泌体miRNA在肿瘤代谢中的作用及其在诊断治疗上的价值恶性肿瘤的进展受间质和癌细胞间动态串扰的影响很大。
外泌体是分泌的纳米卵泡，它通过将核酸和蛋白质转移到靶细胞和组织中而在细胞-细胞通讯中起着关键作用。
最近，microRNA（miRNA）及其在外泌体中的递送与生理和病理过程有关。
在肿瘤微环境中与基质细胞相互作用，调节肿瘤的进展、血管生成、转移和免疫逃逸。
改变细胞代谢是癌症的特征之一。
许多不同类型的肿瘤依赖于线粒体代谢，通过触发适应性机制来优化它们的氧化磷酸化与它们的底物供应和能量需求有关。
外源性外泌体可通过恢复癌细胞的侵袭和抑制肿瘤生长而诱导代谢重编程。
参与癌代谢调控的外体miR可能用于更好的诊断和治疗。
引言实体肿瘤由支持肿瘤血管系统的细胞外基质（ECM）包围的癌细胞和广泛的宿主衍生细胞组成，包括在动态和适应环境中共存的癌相关成纤维细胞（CAF），淋巴细胞和骨髓细胞。
活化的CAF通过分泌胶原蛋白和基质修饰酶合成，沉积和改变三维ECM支架，通过旁分泌生长因子和趋化因子促进癌细胞增殖和转移.自适应通讯在癌细胞与局部和远处环境之间尤为重要。
最近，细胞外囊泡（EV）已成为长距离传播者;它们在原发性肿瘤中的作用也可能具有全身作用，并有助于循环过程.外泌体代表一类特殊的EV，由各种细胞释放.癌细胞产生更多的外泌体肿瘤释放的外泌体诱导其受体细胞的改变，从而在肿瘤生长，血管生成和转移中发挥作用.选择外泌体货物的机制尚不清楚。
然而，外泌体内容的决定因素是供体或受体细胞的类型，以及它们的状态。
外泌体已被证明可转运蛋白质，脂质和核酸（DNA，mRNA，miR）。
越来越多的证据表明外泌体递送的miRs在癌细胞通讯中，这是一个重要且复杂的过程，允许肿瘤细胞“塑造”并影响其环境。
该综述将集中于含有外泌体的miR在与癌症相关的代谢重编程中的作用以及它们参与肿瘤基质的细胞和非细胞组分之间复杂的相互作用。
肿瘤微环境与肿瘤代谢肿瘤是由与成纤维细胞、间充质细胞（MSCs）、平滑肌细胞、周细胞、（MYO）成纤维细胞、免疫细胞、血小板和内皮细胞（ECS）等间质成分相关的癌细胞异质亚群组成的非常复杂的组织。
miR-126-3p和SLC7A11在肺癌中的研究进展
miR-126-3p和SLC7A11在肺癌中的研究进展党裔武，陆会平，陈罡(广西医科大学第一附属医院病理科，广西南宁530021)【关键词铱miR-126-3p；SLC7A11；肺癌;铁死亡中图分类号:R734.2文献标志码:A DOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2021.05.014在我国乃至全世界常见癌症中肺癌是最常见且最致命的,在广西，其发病率和病死率也仅次于肝癌［1~3］，严重危害人类健康。
肺癌又可根据组织学分为非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)和小细胞肺癌，所有亚型均与吸烟有关⑷,准确的组织学和分子分型对肺癌的治疗和预后判断至关重要。
肺鳞癌(lung squamous cell carcinoma, LUSC)和肺腺癌是最常见的两种非小细胞肺癌。
随着精准医疗的快速发展，人们通过分子病理学技术准确判断表面生长因子受体、程序性死亡配体1等基因的状态，针对性地指导肺癌患者进行酪氨酸激酶抑制剂及免疫检查点抑制剂治疗,从而有效延长患者寿命。
然而，分子靶向药治疗的受益者十分有限，且不可避免的药物不良反应和耐药等问题也是接受靶向药物治疗患者所面临的巨大挑战。
与此同时,迄今仍未发现明确的LUSC驱动基因和药物治疗靶点，针对LUSC的治疗方案较为局限。
因此，寻找特异性LUSC诊疗分子靶标仍是当下肺癌防控的关键任务。
近年众多文献报道微小RNA(microR-NA,miRNA)与肺癌发生发展关系密切，本文将从miRNA的视角,以miR-126-3p及其潜在作用靶基因溶质载体家族成员7成员11(solute carrier family7 member11,SLC7A11，又称xCT)为例,对它们在肺癌中的作用及机理进行综述。
1miRNA的概况miRNA是一系列由18~22个核苷酸组成的内源性非编码RNA,参与人类多种恶性肿瘤的发生发展咱5］。
微小核糖核酸在肝细胞癌中的作用研究进展
微小核糖核酸在肝细胞癌中的作用研究进展
张阳;范钟辰;辛凯轩;张兴元
【期刊名称】《临床普外科电子杂志》
【年(卷),期】2024(12)1
【摘要】微小核糖核酸(micro ribonucleic acid,miRNA)是指一类具有约22个核苷酸的高度保守的内源性非编码RNA。
大量研究表明,其在肝细胞癌的发生发展进程中扮演了极为重要的角色,可作为肝细胞癌相关基因表达的调控分子,部分也参与激活细胞信号转导通路来影响肝细胞癌发生发展。
本文就miRNA在肝细胞癌中的作用研究进展作一综述,以期能够为寻找肝细胞癌的诊断标志物以及研究分子靶向药物提供思路。
【总页数】8页(P18-25)
【作者】张阳;范钟辰;辛凯轩;张兴元
【作者单位】滨州医学院附属医院肝胆外科
【正文语种】中文
【中图分类】R73
【相关文献】
1.微小核糖核酸在急性心肌梗死诊断和治疗中作用的研究进展
2.微小 RNA 在肝细胞癌治疗中的作用研究进展
3.微小核糖核酸在结直肠癌发病、诊治及预后中作用的研究进展
4.微小核糖核酸在缺血性脑卒中中作用的研究进展
5.肝细胞癌相关外泌体中微小核糖核酸与肝癌腹腔镜根治术后预后的研究进展
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： ， ； ； ； Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ ｅｘｏｓｏｍｅｓ ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ
ｄ收基作通ｏｉ稿金者信：１日 项 简 作０．期 目 介 者３９：：：：６２福 吴 王９０／２建 俊 耀ｊ０． ｉ医 艺 东ｓ－ｓ０ｎ（，科２．电１１大９－０子９０１０学１２信－；启－修箱）５航，２回：男５ｗ基６日ａ，．金ｎ主２期ｇ０ｙ（要２ａ：２０ｏ２０从ｄ．０１ｏ０２８ｎ事８０Ｑｇ．ｃ－肝Ｈ０ｈ１０１＠胆８３１１１－胰２６１）３相１．。ｃ关ｏｍ疾。病研究。
ｓｑｕａｒｅ ｔｅｓｔ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｃａｔｅｇｏｒｉｃａｌ ｄａｔａ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｗｏ ｇｒｏｕｐｓ． Ｔｈｅ Ｋａｐｌａｎ － Ｍｅｉｅｒ ｍｅｔｈｏｄ ａｎｄ ｔｈｅ ｌｏｇ － ｒａｎｋ ｔｅｓｔ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｔｏ
， ａｎａｌｙｚｅ ｔｈｅ ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｓｅｒｕｍ ｅｘｏｓｏｍａｌ ｍｉＲＮＡ － ２２１ － ３ｐ ｗｉｔｈ ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ ｔｈｅ Ｃｏｘ ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎａｌ ｈａｚａｒｄｓ ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ
摘要：目的 方法 探讨肝细胞癌（ ＨＣＣ） 患者血清外泌体来源 ｍｉｃｒｏＲＮＡ（ ｍｉＲＮＡ） － ２２１ － ３ｐ 的表达水平及分析其临床意义。
选取 ２０１０ 年 ２ 月 － ２０１４ 年 １２ 月南京大学医学院附属南京鼓楼医院经手术治疗后诊断为 ＨＣＣ 的 ６６ 例患者作为 ＨＣＣ 组，选取 ２５
１７６８
临床肝胆病杂志第 卷第期 年月 ， ， ３６ ８ ２０２０ ８ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｈｅｐａｔｏｌ Ｖｏｌ．３６ Ｎｏ．８ Ａｕｇ．２０２０
血清外泌体来源的 ｍｉｃｒｏＲＮＡ － ２２１ － ３ｐ 在肝细胞癌中的表达及意义
吴俊艺１，２，赖智德１，田毅峰１，王耀东１
１ 福建省立医院肝胆胰外科，福州３５０００１；２ 南京大学医学院附属南京鼓楼医院肝胆胰外科，南京２１０００８
例同期在本院接受健康检查的体检者作为对照组。 通过外泌体提取试剂盒分离 ＨＣＣ 组和对照组血清中的外泌体，采用蛋白免疫印
迹检测外泌体标记蛋白分子，透射电镜鉴定血清外泌体形态；实时荧光定量 ＰＣＲ 方法检测两组血清外泌体来源的 ｍｉＲＮＡ － ２２１ － ３ｐ
表达水平。 计量资料两组间比较采用 Ｍａｎｎ － Ｗｈｉｔｎｅｙ Ｕ 检验，计数资料两组间比较采用 χ２ 检验。 采用 Ｋａｐｌａｎ － Ｍｅｉｅｒ 方法及 ｌｏｇ －
失去手术时机［２］。因此，深入研究ＨＣＣ 的发病机制、寻 及ａｎｔｉ － ＣＤ６３ 一抗在４ ℃ 冰箱中孵育过夜，ＰＢＳ 缓冲液
找新的ＨＣＣ 早期诊断标志物具有重要意义。目前临床 冲洗后二抗孵育１ ｈ，采用化学发光法显色并拍照（Ｔａｎｏｎ
上ＡＦＰ 的检测是ＨＣＣ 筛查的主要手段，但是其对ＨＣＣ ５２００ 成像系统）。
结果 ｒａｎｋ 检验分析血清外泌体来源的 ｍｉＲＮＡ － ２２１ － ３ｐ 表达与预后关系，采用 Ｃｏｘ 比例风险回归模型分析预后影响因素。
血清
来源的外泌体是直径为 ４０ ～ １００ ｎｍ 囊泡体，表达 ＨＳＰ７０、Ａｌｉｘ 及 ＣＤ６３。 ＨＣＣ 组血清来源外泌体中 ｍｉＲＮＡ － ２２１ － ３ｐ 较对照组表达 水平升高，差异具有统计学意义（ Ｕ ＝ ３５４． ００，Ｐ ＜ ０． ００１） 。 ＨＣＣ 患者血清外泌体 ｍｉＲＮＡ － ２２１ － ３ｐ 高表达与肿瘤大小（ χ２ ＝ ６． ０１６， Ｐ ＝ ０ ０１４） 、包膜侵犯（ χ２ ＝ ７ ５８０，Ｐ ＝ ０． ００６） 和 ＴＮＭ 分期（ χ２ ＝ ６． ３４０，Ｐ ＝ ０． ０１２） 有关。 此外，血清外泌体来源的 ｍｉＲＮＡ － ２２１ － ３ｐ 表达水平较高的 ＨＣＣ 患者总体生存率较低，差异具有统计学意义（ χ２ ＝ １７． １０５，Ｐ ＜ ０． ００１） 。 多因素分析结果表明血清外泌体来
吴俊艺，等． 血清外泌体来源的ｍｉｃｒｏＲＮＡ －２２１ －３ｐ 在肝细胞癌中的表达及意义
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肝细胞癌（ＨＣＣ）是最常见的恶性肿瘤之一，ＨＣＣ 的 （ＪＥＭ － ）在 ２１００ １００ ｋＶ 电压下进行观察并拍照。
发展具有多种癌症特征，如持续性细胞增殖、逃避凋亡、 １． ３． ３ 白免疫印迹 通过含有蛋白酶抑制剂的裂解
达水平明显升高，对 ＨＣＣ 诊断及预后判断具有参考价值。
关键词：癌， 肝细胞； 外泌体； 微 ＲＮＡｓ； 预后 中图分类号：Ｒ７３５． ７ 文献标志码：Ａ 文章编号： （ ） １００１ － ５２５６ ２０２０ ０８ － １７６８ － ０５
Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｏｆ ｓｅｒｕｍ ｅｘｏｓｏｍａｌ ｍｉｃｒｏＲＮＡ － ２２１ － ３ｐ ｉｎ ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ ｃａｒｃｉｎｏｍａ
： （ ） Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｏｆ ｓｅｒｕｍ ｅｘｏｓｏｍａｌ ｍｉｃｒｏＲＮＡ ｍｉＲＮＡ － ２２１ － ３ｐ ｉｎ ｈｅｐａｔｏ
（ ） ， ｃｅｌｌｕｌａｒ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ＨＣＣ ． Ｍｅｔｈｏｄｓ Ａ ｔｏｔａｌ ｏｆ ６６ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｈｏ ｕｎｄｅｒｗｅｎｔ ｓｕｒｇｅｒｙ ｉｎ Ｎａｎｊｉｎｇ Ｄｒｕｍ Ｔｏｗｅｒ Ｈｏｓｐｉｔａｌ Ｎａｎｊｉｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ， ， Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｈｏｏｌ ｆｒｏｍ Ｆｅｂｒｕａｒｙ ２０１０ ｔｏ Ｄｅｃｅｍｂｅｒ ２０１４ ａｎｄ ｗｅｒｅ ｄｉａｇｎｏｓｅｄ ｗｉｔｈ ＨＣＣ ｗｅｒｅ ｅｎｒｏｌｌｅｄ ａｓ ＨＣＣ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ２５ ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ ｗｈｏ
ｕｎｄｅｒｗｅｎｔ ｐｈｙｓｉｃａｌ ｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ ｉｎ ｏｕｒ ｈｏｓｐｉｔａｌ ｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｐｅｒｉｏｄ ｏｆ ｔｉｍｅ ｗｅｒｅ ｅｎｒｏｌｌｅｄ ａｓ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ． Ｔｈｅ ｅｘｏｓｏｍｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｋｉｔ ｗａｓ
； ； ｕｓｅｄ ｔｏ ｉｓｏｌａｔｅ ｔｈｅ ｅｘｏｓｏｍｅｓ ｉｎ ｓｅｒｕｍ Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｍｅａｓｕｒｅ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｅｘｏｓｏｍｅ ｍａｒｋｅｒｓ ａ ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ ｅｌｅｃｔｒｏｎ ｍｉ ； ｃｒｏｓｃｏｐｅ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ ｏｆ ｓｅｒｕｍ ｅｘｏｓｏｍｅｓ ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ｒｅａｌ － ｔｉｍｅ ＰＣＲ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｍｅａｓｕｒｅ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｓｅｒｕｍ ， ｅｘｏｓｏｍａｌ ｍｉＲＮＡ － ２２１ － ３ｐ． Ｔｈｅ Ｍａｎｎ － Ｗｈｉｔｎｅｙ Ｕ ｔｅｓｔ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ ｄａｔａ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｗｏ ｇｒｏｕｐｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｈｉ －
ｍｏｄｅｌ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ａｎａｌｙｚｅ ｔｈｅ ｉｎｆｌｕｅｎｃｉｎｇ ｆａｃｔｏｒｓ ｆｏｒ ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ． Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｓｅｒｕｍ ｅｘｏｓｏｍｅｓ ｗｅｒｅ ｓｍａｌｌ ｍｅｍｂｒａｎｏｕｓ ｖｅｓｉｃｌｅｓ ｗｉｔｈ ａ ｄｉａｍｅｔｅｒ ｏｆ
， ， ， ａｂｏｕｔ ４０ － １００ ｎｍ ａｎｄ ＨＳＰ７０ Ａｌｉｘ ａｎｄ ＣＤ６３ ｗｅｒｅ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｅｘｏｓｏｍｅｓ． Ｔｈｅ ＨＣＣ ｇｒｏｕｐ ｈａｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｓｅｒ （ ， ） ， ｕｍ ｅｘｏｓｏｍａｌ ｍｉＲＮＡ － ２２１ － ３ｐ ｔｈａｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ Ｕ ＝ ３５４． ００ Ｐ ＜ ０． ００１ ． Ｉｎ ｔｈｅ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ＨＣＣ ｔｈｅ ｈｉｇｈ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｓｅｒｕｍ （ ， ）， （ ， ）， ｅｘｏｓｏｍａｌ ｍｉＲＮＡ － ２２１ － ３ｐ ｗａｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｕｍｏｒ ｓｉｚｅ χ２ ＝ ６． ０１６ Ｐ ＝ ０． ０１４ ｃａｐｓｕｌａｒ ｉｎｖａｓｉｏｎ χ２ ＝ ７． ５８０ Ｐ ＝ ０． ００６ ａｎｄ （ ， ） ， ＴＮＭ ｓｔａｇｅ χ２ ＝ ６． ３４０ Ｐ ＝ ０ ０１２ ． Ｉｎ ａｄｄｉｔｉｏｎ ｔｈｅ ＨＣＣ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｈｉｇｈ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｓｅｒｕｍ ｅｘｏｓｏｍａｌ ｍｉＲＮＡ － ２２１ － ３ｐ ｈａｄ ａ ｓｉｇ （ ， ） ｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｌｏｗｅｒ ｏｖｅｒａｌｌ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｒａｔｅ ｔｈａｎ ｔｈｏｓｅ ｗｉｔｈ ｌｏｗ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ χ２ ＝ １７． １０５ Ｐ ＜ ０． ００１ ． Ｔｈｅ ｍｕｌｔｉｖａｒｉａｔｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｅｘ （ ［ ］ ， ［ ］： ， ） ｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｓｅｒｕｍ ｅｘｏｓｏｍａｌ ｍｉＲＮＡ － ２２１ － ３ｐ ｈａｚａｒｄ ｒａｔｉｏ ＨＲ ＝ ２． ４３４ ９５％ ｃｏｎｆｉｄｅｎｃｅ ｉｎｔｅｒｖａｌ ＣＩ １． １７８ － ５． ０２７ Ｐ ＝ ０． ０１６ （ ， ： ， ） ａｎｄ ｔｕｍｏｒ ｓｔａｇｅ ＨＲ ＝ ２． ６５３ ９５％ ＣＩ １． ２２２ － ５． ７６０ Ｐ ＝ ０． ０１４ ｗｅｒｅ ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｒｉｓｋ ｆａｃｔｏｒｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ＨＣＣ． ， Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅｒｅ ｉｓ ａ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｉｎｃｒｅａｓｅ ｉｎ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｓｅｒｕｍ ｅｘｏｓｏｍａｌ ｍｉＲＮＡ － ２２１ － ３ｐ ｉｎ ＨＣＣ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｈｉｃｈ ｐｒｏｖｉｄｅｓ ａ ｒｅｆｅｒ