β-葡萄糖醛酸苷酶(β-GD)活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法
胃癌诊断的一项新方法——唾液β-葡萄糖醛酸苷酶活性测定
胃癌诊断的一项新方法——唾液β-葡萄糖醛酸苷酶活性测定于爱平;谢萍;王文章;代然;崔向东
【期刊名称】《实用肿瘤杂志》
【年(卷),期】1992(7)4
【摘要】本文应用比色法检测唾液β-葡萄糖醛酸苷酶(β-GCD)212例。
正常人该酶含量很低,42名无1例达到阳性标准。
检测胃癌74例,阳性46例
(62.2%)(P<0.001)。
而直肠癌、食道癌、慢性胃炎与溃疡病阳性率亦低,与胃癌组相比有显著性差异(P<0.01),故胃癌唾液β-GCD 增高有相对特异倾向。
该方法简单、稳定,对胃癌诊断有临床应用价值。
本文对胃癌唾液β-GCD 增高及其与肿瘤转移机制提出初步看法。
【总页数】3页(P208-210)
【关键词】胃肿瘤;诊断;葡萄糖苷酸酶;唾液
【作者】于爱平;谢萍;王文章;代然;崔向东
【作者单位】辽宁省肿瘤研究所;辽宁省肿瘤医院
【正文语种】中文
【中图分类】R735.204
【相关文献】
1.β-葡萄糖醛酸苷酶测定在母乳性黄疸诊断中的价值 [J], 姚丛月;李华;徐佳燚;邓晓毅
2.正常人和肝癌患者血清β-葡萄糖醛酸苷酶活性测定 [J], 袁振铎
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土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS)活性检测试剂盒说明书__可见分光光度法UPLC-MS-4028
土壤β-木糖苷酶（S-β-XYS）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法货号：UPLC-MS-4028规格：50T/24S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体3mL×1瓶（自备）2-8℃保存试剂二液体30mL×1瓶2-8℃保存试剂三粉剂×2瓶-20℃保存试剂四液体60mL×1瓶2-8℃保存标准品液体1mL×1支2-8℃保存溶液的配制：1、试剂一：甲苯自备。
2、试剂三：临用前取1瓶加入10mL蒸馏水，充分溶解备用，用不完的试剂-20℃分装保存4周。
3、标准品：5mmol/L的对硝基苯酚溶液。
产品说明：β-木糖苷酶（EC3.2.1.37，β-XYS）存在于植物、细菌和真菌等生物体，是催化木聚糖类半纤维素降解的关键酶，产物木糖可作为碳源应用于微生物发酵。
另外，β-木糖苷酶还可以作为生物漂白剂应用于造纸工业，比传统的漂白法环保，具有广泛的应用价值。
S-β-XYS催化对硝基苯酚-β-D-木糖苷产生对硝基苯酚，对硝基苯酚在400nm处有特征吸收峰，测定400nm光吸收增加速率，可计算S-β-XYS活性。
S-β-XYSP-Nitrophenol-β-D-Xyloside P-Nitrophenol（400nm）注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、30-50目筛、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30-50目筛。
二、测定步骤1、分光光度计预热30min，波长调至400nm，蒸馏水调零。
2、标准溶液的稀释：临用前取20μL5mmol/L的对硝基苯酚溶液，加入980μL试剂二，充分混匀，配制成100μmol/L标准液使用，现用现配。
β-葡萄糖苷酶活性测定
β-葡萄糖苷酶活性测定（新鲜土样）比色法的原理：以对硝基苯-β-D-吡喃葡糖苷为基质，水解产生对硝基酚，比色测定（硝基酚比色法）。
1.配置溶液：（1）改进的通用缓冲溶液（MUB）贮备液：12.1g 三羟甲基氨基甲烷（C4H11NO3 即 Tris）、11.6g 马来酸（C4H4O4）、14g 柠檬酸（C6H8O7）和 6.3g 硼酸（H3 BO3）溶于 500ml 1mol.L-1 NaOH 溶液中，用去离子水稀释至 1L，于 4℃下贮存。
（2） pH 值 6.0 的 MUB 缓冲溶液：在继续搅拌下，在 200ml MUB 贮备液中分别滴加 0.1 mol.L-1 HcL 或 0.1mol.L-1 NaOH 至溶液 pH 值为 6.0，去离子水稀释定容至 1L（3） 4-Nitrophenyl-beta-D-glucopyranoside 对硝基酚-β-D-吡喃葡糖苷（PNPG）溶液[C12H15NO8 =25mmol.mol-1]：0.377g PNPG 溶于 40ml MUB 溶液（pH 为 6.0）中，用相同 pH 值的缓冲液稀释至 50ml，于 4℃下贮存。
301.25（4） Cacl2溶液（0.5mol.L-1）：取无水Cacl2 55.49g 加入1L 的容量瓶中配置（5） Tris缓冲液[c（C4H11NO3）=0.1mol.L-1，pH 值 12.0]：12.2 g 三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶于 800ml 去离子水，用 0.5mol.L-1 NaOH 调节 pH 至 12.0，去离子水稀释至 1L（6）标准对硝基苯酚溶液：溶解 0.500g 对硝基酚于 400ml 双去离子水中，定容到500mL，保存于 4 度，用时再稀释 10 倍。
稀释后为100ug.ml-1。
（一般需 1000ppm）2.试验过程(1)取 1g 新鲜土样(<2mm)于 100ml 三角瓶中，加 0.25ml 甲苯, 通风橱 10min 后，4ml pH 为6.0 的 MUB 溶液和 1mm PNPG 溶液，盖上瓶盖，充分混匀，在 37℃培养 1h。
糖原磷酸化酶 b (GPb)活性检测试剂盒说明书__ 紫外分光光度法UPLC-MS-4183
糖原磷酸化酶b(GPb)活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法货号：UPLC-MS-4183规格：50T/24S产品内容：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体30mL×1瓶2-8℃保存试剂一液体50mL×1瓶2-8℃保存试剂二粉剂×1支2-8℃保存试剂三粉剂×1支2-8℃保存试剂四粉剂×1支-20℃保存试剂五粉剂×3支-20℃保存试剂六粉剂×3支-20℃保存试剂七粉剂×1瓶2-8℃保存溶液的配制：1、试剂二：临用前加入1.25mL蒸馏水，充分混匀；2-8℃保存2个月；2、试剂三：临用前加入1.25mL蒸馏水，充分混匀；可分装后-20℃保存4周，避免反复冻融；3、试剂四：临用前加入1.25mL蒸馏水，充分混匀；可分装后-20℃保存4周，避免反复冻融；4、试剂五：临用前每支加入1mL蒸馏水，充分混匀；可分装后-20℃保存4周，避免反复冻融；5、试剂六：临用前每支加入1mL蒸馏水，充分混匀；可分装后-20℃保存4周，避免反复冻融；6、试剂七：临用前加入4mL蒸馏水，充分混匀后-20分装保存4周，避免反复冻融；7、工作液的配制：临用前根据实验所需用量，按照试剂一：试剂二：试剂三：试剂四=740μL:20μL:20μL: 20μL（1T的量）的比例，充分混匀，现用现配。
产品说明：糖原磷酸化酶是糖原分解代谢中的关键酶，催化糖原的磷酸化反应。
该酶分为有活性的糖原磷酸化酶a （Glycogen phosphorylase a,GPa）和无活性的糖原磷酸化酶b（Glycogen phosphorylase b,GPb）两种形式。
糖原的分解主要在糖原磷酸化酶a的催化下进行。
未添加激活剂时，糖原磷酸化酶a催化糖原和无机磷产生葡萄糖残基生成糖原和1-磷酸葡萄糖，磷酸葡萄糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步依次催化NADP还原生成NADPH，在340nm下测定NADPH上升速率，即可反映糖原磷酸化酶a活性。
β-木糖苷酶活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法
β-木糖苷酶活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC2620规格：50T/24S产品内容：提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加2mL蒸馏水。
试剂二：液体35mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体35mL×1瓶，4℃保存。
标准液：液体1mL×1支，4℃保存，5μmol/mL对硝基苯酚溶液。
产品说明：β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、细菌和真菌等生物体，是催化木聚糖类半纤维素降解的关键酶，产物木糖可作为碳源应用于微生物发酵。
另外，β-木糖苷酶还可以作为生物漂白剂应用于造纸工业，比传统的漂白法环保，具有广泛的应用价值。
β-木糖苷酶催化对硝基苯酚-β-D-木糖苷产生对硝基苯酚，对硝基苯酚在405nm处有特征吸收峰，测定405nm光吸收增加速率，可计算β-木糖苷酶活性。
自备实验用品及仪器天平、低温离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、水浴锅、蒸馏水。
操作步骤：一、粗酶液提取1.植物样本：称取约0.1g样品，加1.0mL提取液充分冰浴匀浆，然后12000rpm，4℃，离心20min，弃沉淀，取20μL上清测定蛋白含量，剩余上清作为待测酶液。
2.细菌、真菌样本：收集约500万个细胞，加入1.0mL提取液，超声波破碎（冰浴，功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后10000rpm，4℃，离心10min，弃沉淀，取20μL上清测定蛋白含量，剩余上清置于冰上待测。
3.标准液的处理：用试剂二将标准液稀释至0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625μmol/mL。
二、测定操作表1、分光光度计预热30min 以上，调节波长至405nm，蒸馏水调零。
2、操作表对照管测定管空白管标准管酶液（μL）200200标准品（μL）200试剂一（μL）50试剂二（μL）400350600400混匀，45℃水浴20min试剂三（μL）400400400400混匀，静置5min，1mL 玻璃比色皿，蒸馏水调零，测定A 405吸光值，分别记为A 对照、A 测定、A 空白、A标准。
小鼠β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)ELISA试剂盒使用说明书本
小鼠β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)ELISA试剂盒使用说明书本本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)的含量。
试验原理：βGD试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知βGD浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将βGD和生物素标记的抗体同时温育。
小鼠β葡萄糖醛酸苷酶ELISA试剂盒洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中βGD的浓度呈比例关系。
试剂盒组成：自备材料蒸馏水。
加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振荡器及磁力搅拌器等。
安全性避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
底物A应挥发，避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。
避免用手接触，有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
使用不含热原和内毒素的试管。
收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
β-葡萄糖醛酸苷酶(β-G或β-GD)检测
迪信泰检测平台
β-葡萄糖醛酸苷酶（β-G或β-GD）检测
β-葡萄糖醛酸苷酶（β-Glucuronidase, β-G或β-GD）是细胞溶酶体中的一种
酸性水解酶，参与机体的生理、病理及药物代谢等过程。
β-GD可水解基底膜中的
主要成分-蛋白多糖，因而参与肿瘤的侵袭和转移过程。
在肝细胞和胃癌组织中含
量丰富。
β葡萄糖醛酸苷酶活性测定，有助于病情观察和预后评价。
迪信泰检测平台采用生化法，可高效、精准的检测β-葡萄糖醛酸苷酶的活性变化。
此外，我们还提供其他糖代谢类检测服务，以满足您的不同需求。
生化法测定β-葡萄糖醛酸苷酶样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周。
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）。
2. 相关参数（中英文）。
3. 图片。
4. 原始数据。
5. β-葡萄糖醛酸苷酶活性信息。
迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案，具体可免费咨询技术支持。
小鼠葡萄糖醛酸苷酶(GD)酶联免疫吸附测定试剂盒
小鼠β葡萄糖醛酸苷酶（βGD）酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!预期应用ELISA法定量测定小鼠血清、血浆或其它相关生物液体中βGD含量。
实验原理用纯化的βGD抗体包被微孔板，制成固相载体，往微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的βGD抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物（TMB）显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的βGD 呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1、酶标板：一块（96孔）2、标准品（冻干品）：2瓶，请临用前15分钟内配制。
每瓶以样品稀释液稀释至1ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为20U/ml，将其稀释为10U/ml后，再做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成10U/ml，5 U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml，0.312U/ml，0.156U/ml，样品稀释液直接作为空白孔0U/ml。
如配制5U/ml标准品：取0.5ml（不要少于0.5ml）10U/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、样品稀释液：1×20ml。
4、检测稀释液A：1×10ml。
5、检测稀释液B：1×10ml。
6、检测溶液A：1×120/瓶（1:100）。
临用前以检测稀释液A1:100稀释（如：10检测溶液A/990检测稀释液A），充分混匀，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（100/孔），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
7、检测溶液B：1×120/瓶（1:100）。
临用前以检测稀释液B1:100稀释。
稀释方法同检测溶液A。
8、底物溶液：1×10ml/瓶。
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β-葡萄糖醛酸苷酶（β-GD）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法
注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
货号：BC1910
规格：50T/48S
产品内容：
提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：液体5mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入5mL蒸馏水，充分溶解待用；用不完的试剂仍-20℃保存；
试剂三：液体37.5mL×1瓶，4℃保存；
试剂四：1μmol/mL标准储备液10mL，4℃保存；
产品说明：
β-GD广泛存在于动物组织中，是一种参与肿瘤侵袭和转移过程的基质降解酶，具有水解固醇葡萄糖醛酸和酸性粘多糖等生理功能。
该酶在肝细胞中含量较高。
此外在胃癌组织中含量丰富，测定胃液β-GD活性对于研究胃癌具有重要的意义。
β-GD催化苯酚β-D-葡萄糖醛酸产生游离的酚酞，通过测定苯酚含量反应该酶活性高低。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、样品测定的前处理
按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。
8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
二、测定步骤
1、分光光度计预热30min以上，调节波长至540nm，蒸馏水调零。
2、样本测定（在EP管中加入下列试剂）
试剂名称（μL）加样孔
测定管标准管空白管
试剂一100100100
试剂二100100100
样本50
1μmol/mL50
蒸馏水50
混匀后，37℃水浴30min
试剂三750750750
混匀，540nm下测定各管吸光值
注意：标准管和空白管只需测一次。
三、β-GD活性计算
（1）按样本鲜重计算：
单位定义：每小时每g鲜重样品中催化产生1μmol酚酞的量为一个活力单位。
β-GD（μmol/h/g鲜重）=(C标准管×V1)×（A测定管-A对照管）÷（A标准管-A空白管）÷(W ×V1÷V2)÷T=2×（A测定管-A对照管）÷（A标准管-A空白管）÷W
（2）按样本蛋白浓度计算：
单位定义：每小时每mg组织蛋白催化产生1μmol酚酞的量为一个活力单位。
β-GD（μmol/h/mg prot）=(C标准管×V1)×（A测定管-A对照管）÷（A标准管-A空白管）÷(V1×Cpr)÷T=2×（A测定管-A对照管）÷（A标准管-A空白管）÷Cpr
C标准管：标准管浓度，1μmol/mL；V1：加入样本体积：0.05mL；
V2：加入提取液体积，1mL；T：反应时间，0.5h；
Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g。