超净工作台灭菌方法及操作规程
超净工作台操作规程
超净工作台确认方案一、前言二、确认目的确认超净工作台的正常工作状态，包括空气净化效果、过滤器使用寿命、仪器设备功能是否齐全等，以保证设备的可靠性和精度。
三、确认内容1.空气净化效果确认确认超净工作台的空气净化效果是确保工作环境的重要步骤。
通过检测工作台内的空气质量指标，如微生物浓度、颗粒物浓度等，来评估空气净化效果。
确认方法可以采用空气采样器和微生物培养等方法来进行定性和定量的检测。
2.过滤器使用寿命确认超净工作台的过滤器是保证工作台空气净化效果的关键组件。
过滤器的使用寿命与工作台的工作时间和工作环境有关，需要定期进行确认和更换。
确认方法可以通过检测过滤器的压差和颗粒物捕集效率等指标来评估过滤器的使用寿命。
3.设备功能完整性确认4.清洁度确认四、确认方法与步骤1.确认空气净化效果的方法和步骤：a.使用空气采样器采集工作台内的空气样品。
b.将采集的样品送往实验室进行微生物培养和颗粒物测定。
c.按照相应的标准和要求，对微生物浓度和颗粒物浓度进行评估。
2.确认过滤器使用寿命的方法和步骤：a.检查过滤器的压差显示器，记录当前的压差数值。
b.检测工作台内的颗粒物浓度，评估过滤器的捕集效果。
c.根据过滤器的使用寿命曲线，结合当前的压差数值和颗粒物浓度评估过滤器的使用寿命。
3.确认设备功能完整性的方法和步骤：a.按照设备的操作说明书，逐项测试设备的各项功能。
b.观察设备是否正常运行，并记录测试结果。
c.如发现异常或故障，及时报修或更换部件。
4.确认清洁度的方法和步骤：a.检查工作台的表面是否有污染物、灰尘等。
b.检查工作台内部是否有异物、细菌等。
c.如发现污染或异物，及时清理或更换。
五、确认记录与报告确认过程中，需要做好相应的记录和报告工作。
包括确认的日期、确认结果、异常情况的处理等信息。
同时，还需要建立一个持续改进的机制，根据确认结果进行相应的优化和调整。
六、总结通过制定超净工作台确认方案，可以确保设备的正常工作状态，提高设备的可靠性和精度。
超净工作台操作规程
超净工作台操作规程1、使用前应提前30分钟同时开启紫外灯和风机组工作，工作30分钟后关闭紫外灯。
要经常用消毒剂将紫外灯表面和工作区的表面擦干净，保证其灭菌效率。
4.2新安装的或长期未使用的工作台，使用前必须用超净真空吸尘器或不产生纤维的物品认真进行清洁工作。
长期不使用的工作台请拔下电源插头4.3工作台面上禁止存放不必要的物品，以保持工作区的洁净气流不受干扰4.4禁止在工作台面上记录书写，工作时应尽量避免作明显扰动气流的动作4.5风机、照明均由红色光排指示其工作状态。
工作时，光排发光;不工作时，光排熄灭。
4.6当需要调节风机风速时，用工作台操作面板上的轻触型开关进行调节(按电压分为五档140V，150V，160V，180V，220V)。
风机调速电压指示由红、绿双色光排显示。
风速每递增一档，光排增加两格红色替代原来的绿色:反之，风速每递减一档，光排增加两格绿色替代原来的红色显示。
4.7禁止在预过滤器进风口部位放置物品，以免挡住进风口造成进风量减少降低净化能力5维修与保养5.1根据环境洁净程度，定期将预过滤器中的滤料拆下清洗，一般间隔时间为3一6个月。
5.2定期(一般每二月一次)用热球式电风速计测量工作区风速，如发现不符合技术参数的要求，则可调大风机供电电压。
5.3当风机组电压调到最大时，工作区风速仍达不到0.3/s，则必须更换高效空气过滤器更换高效空气过滤器后，应用尘埃粒子计数器检查四周边密封是否良好，若有泄露需用密封胶封堵。
5.4更换高效空气过滤器及预过器时均应停机进行5.5更换高效空气过滤器时需注意以下事项:5.5.1更换新的高效空气过滤器时应特别注意拆箱、搬运及安装取用时保护纸完整无损禁止用手触及滤纸造成破损。
5.5.2安装前，将新的高效过滤器对着亮处，以肉眼查看高效空气过滤器是否因运输等原因。
而出现漏洞，如有漏洞则不能使用。
5.5.3更换时，应打开机箱后盖，并应注意过滤器上的箭头标志应与工作台出风流向保持致。
抗菌实验规范操作
抗菌实验具体实验步骤一、共培养及换液1.开灯，开风扇，用浸过酒精的纸巾擦次超净工作台台面，点酒精灯2.取出4根10ml的管子3.往管子中分别加入1ml的样品药液：（（在超净台中用0.22um的绿色滤膜与10ml针筒过滤5ml团簇银，并用pbs稀释药物）注：绝大多数细菌的直径大小在0.5μm之间.所以用一张0.22um的滤膜,把样品倒入一次性针管中,在超净工作台中过滤.容器也要注意灭菌）AgNCS：1# Co 、2# 1/2 、3#1/4 、4# 1/8，5#PBS4.先用震荡器摇菌10S（管子均水平放置震荡，以下震荡与此一样）再往这4个管子中分别加入100微升的（P）金葡菌液5.再往这4个管子中分别加入5mlLB,写上标记6.最后用封口膜封好肉汤和共培养的样品7.把共培养的样品拿去摇菌（摇菌参数：37度，6h，150rpm）8.清理桌面，拿走自己的样品和垃圾，用浸过酒精的纸巾擦次超净工作台台面二、涂板（晚上7点开始涂板子）1.开灯，开风扇，用浸过酒精的纸巾擦次超净工作台台面，点酒精灯；后分别把PBS和样液拿进超净工作台2.放好两个架子的位置（左边放样液，前方放小型试管架）3.把三角涂板器在火焰上灼烧（每个顶点，每条边，均来回灼烧3次）4.取2ml的管子放好，每组样品3个，共12个5.每组管子命名为A,B,C号管子，先往A,B管中加入990ulPBS，再往C管中加入900ulPBS6.摇菌，取10微升菌液，先加入到A中，盖上盖子震荡10S，再取A管10微升液体加入到B中，震荡10S，最后取B管100微升液体到C中7.取C管中50微升液体均匀地滴加到板子的四个正方形顶点位置上，后用三角涂板器顺时针涂100次以上（应涂到干透为止），同时板子也要不停地转动，最后再标记好姓名，日期，菌名，封口，调节移液枪量程至最大，收拾桌面，取出所有相关物品，倒掉大烧杯中垃圾并在喷酒精后放回，用浸过酒精的纸巾擦次超净工作台台面，开半小时紫外，之后务必关闭，后将板子一个一个地倒放在生化培养箱里8.等待12—16h,取出板子观察，数菌，拍照9.清理板子：板子拉开一个口子，并喷上酒精，倒入垃圾桶三、换液（菌落培养24h后换液）1.开灯，开风扇，用浸过酒精的纸巾擦次超净工作台台面，点酒精灯2.将昨天培养的菌落震荡10S3.取出一只10ml管子，加入100ul菌液4.再加入5mlLB5.封口，标记日期，姓名，菌名6.清理桌面，拿走自己的样品和垃圾，用浸过酒精的纸巾擦次超净工作台台面备注一、倒板子用500ml的锥形瓶装配好LB溶液（配琼脂，500ml超纯水+12.5g肉汤粉+10g琼脂：2瓶；1000ml超纯水+25g肉汤粉+20g琼脂：1瓶）1.先用铝箔纸盖上瓶口，再放入铁篮子里，之后放入高压灭菌锅里（121摄氏度，升温1h，恒温0.5h，降温1h），两个小时之后取出样品2.最后在超净工作台上将琼脂用锥形瓶倒满板子表面二、制LB1.将配好的LB aq （10gLB+400ml水）装进80ml的瓶子，瓶子的盖子半松开状态，之后放入高压灭菌锅中（121摄氏度，升温1h，恒温0.5h，降温1h）,两个小时之后取出样品，之后等降到室温时，在锅内把盖子拧紧，封口，放入冰箱。
微生物限度检查操作规程
1 目的规范微生物限度检查操作。
2 适用范围适用于微生物限度的检查。
3 职责质量检定部人员严格按本SOP操作。
4 工作程序4.1 仪器4.1.1 超净工作台4.1.2 微生物检测系统4.2 试剂所用培养基及缓冲液均按《中华人民共和国药典》2005版三部要求进行配制。
玫瑰红钠培养基、营养琼脂培养基4.3 试验方法采用薄膜过滤法4.4试验前准备试验过程中所有用的器材都应进行灭菌后方可使用；超净工作台使用前需进行紫外灭菌30min。
4.5 试验步骤4.5.1 将样品加入薄膜过滤器的滤杯中4.3.1.3 供试品检查时，如果使用了表面活性剂、中和剂或灭活剂，应证明其有效性及对微生物的生长和存活无影响4.3.1.4 除另有规定外，本检查法中细菌培养温度为30～35℃；霉菌、酵母菌培养温度为23～28℃；控制菌培养温度为35～37℃。
4.3.1.5 检验结果以1g、1ml、10g、10ml或10cm2为单位报告。
4.3.2 检验量4.3.2.1 检验量即一次试验所用的供试品量（g、ml或cm2）。
4.3.2.2 除另有规定外，一般供试品的检查量为10g或10ml；化学膜剂为100cm2；贵重药品、微量包装药品的检验量可以酌减。
4.3.3 供试液的制备供试液制备若需用水浴加温时，温度不应超过45℃。
供试液从制备至加入检验用培养基，不得超过1小时。
4.3.3.1液体供试品取供试品10ml，加pH7.0无菌氯化钠－蛋白胨缓冲液至100ml，混匀，作为1：10的供试液。
油剂可加入适量的无菌聚山梨脂80使供试品分散均匀。
水溶性液体制剂也可用混合的供试品原液作为供试液。
4.3.4 细菌、霉菌及酵母菌计数4.3.4.1 检查法薄膜过滤法采用薄膜过滤法，滤膜孔径应不大于0.45um，直径约为50mm。
选择滤膜材质时应保证供试品及其溶剂不影响微生物的充分被截留。
滤器及滤膜使用前应采用适宜的方法灭菌。
使用时，应保证滤膜再过滤前后的完整性。
超净工作台操作规程
文件制修订记录2.0范围：适用于SW-CJ-1D净化工作台的使用3.0职责：化验员4.0原则：本设备适用于中国药典、部颁标准收载的药品菌检。
5.0程序5.1.使用前准备工作5.1.1.确认超净工作台内无异物。
5.1.2.用75%酒精擦拭台面，禁止用75%酒精擦拭有机玻璃隔离板。
5.1.3.按下总电源开关，打开紫外线灯开关，使其照明40分钟后，关闭紫外线灯开关。
5.2.使用步骤5.2.1.按下照明灯开关，照明灯亮后，按下风机运行按钮，风机即开始正常运行。
5.2.2.向上拉开有机玻璃隔离板，依次放入经灭菌的实验用具、培养基及被检药品后拉下有机玻璃隔离板，才可开始进行相关的实验。
5.2.3.实验结束后拉开有机玻璃隔板，取出相关物品，按下风机停止按钮，风机停止运行。
5.2.4.用75%酒精认真做好净化工作台使用后的清洁擦拭工作。
5.2.5.关闭照明灯后，拉下有机玻璃隔离板，关闭总电源。
5.3操作注意事项：5.3.1新安装的或长期末使用的工作台，、建议使用前用超净真空吸尘器或不产生纤维脱落的物品认真进行清洁工作。
5.3.2带移门的工作台操作时，移门开启高度虽无明确规定，一般不宜开启过高（拉至顶端）或关闭过低（落至台面），以免影响风速和洁净度。
5.3.3工作台面上禁止存放无关的物品，以保持工作区的洁净气流不受干扰。
5.3.4禁止在工作台面上记录书写，工作时应尽量避免明显扰动气流的动作。
5.3.5禁止在预过滤器进风口部位放置物品，以免挡住进风口造成进风量减少，降低净化能力。
5.3.6本产品在受到外界电磁干扰或其它干扰时，可能会有影响。
请远离此类干扰源或采取其它必要措施。
6.0安全事项6.1本产品适用与室内使用，勿至于高速尘源和震源出。
6.2不能用挥发油、稀释剂等擦拭本体，以免伤及漆尘或引起漆尘变色。
6.3禁止用于下列场所：低温、高温、多湿、结露、多尘及油烟、雾气的地方。
6.4禁止一分钟内反复操作电源开关，以免因频繁动作而损坏电器元件。
超净工作台维护保养、操作SOP
1. 目的规范超净工作台清洁、维护保养操作，确保正确使用，制定本规程。
2. 范围本规程适用于超净工作台清洁、维护保养、操作。
3. 职责3.1. 洁净室操作人员：负责本规程操作。
3.2. 复核人：按照本标准操作程序对操作人的操作进行复核，确保操作的正确性。
4. 定义无5. 引用标准无6. 材料6.1. 仪器设备无6.2. 器械、用具无6.3. 其他无7. 流程图无8. 内容8.1. 操作8.1.1. 使用前应提前30分钟打开电源。
8.1.2. 检查高效过滤器外观不应有损坏之处，以免影响过滤效果。
8.1.3. 检查回风口不应被堵塞。
8.2. 清洁方法8.2.1. 连续使用时，每天必须对超净工作台进行清洁。
长期停用要根据具体情况定期进行清洁，已保持设备清洁。
8.2.2. 清洁消毒剂洗洁精、75%酒精、0.1%新洁尔灭。
8.2.3. 用抹布蘸取洗洁精水擦拭外部后再用抹布蘸取纯化水擦拭直至无泡沫。
8.2.4. 用超细抹布蘸75%乙醇液或0.1%新洁尔灭（两种消毒剂交替使用）进行消毒。
8.2.5. 环境的洁净程度，1月将粗滤布（涤纶无纺布）拆下清洗或予以更换。
8.2.6. 每次使用前对环境进行灭菌工作，同时用纱布沾上酒精将紫外线灭菌灯的表面擦干净，保持表面清洁，否则会影响灭菌效果。
8.2.7. 清洁效果用清洁超细布擦拭，无不洁痕迹。
8.3. 维护保养8.3.1. 每天注意检查电机工作是否正常，检查四周密封，以免漏汽，影响净化效果。
电机轴承每半年上油一次。
8.3.2. 当风量调节档位调到最大，而不能使操作区风速达到0.3m/s时，必须更换高效空气过滤器。
8.3.3. 更换高效过滤器时，可打开顶盖，更换时注意过滤器上的箭头标志，箭头指向即为层气流流向。
更换过滤器时应仔细检查四周边框是否密封良好，否则将影响过滤效果。
8.3.4. 定期进行检测，不符合技术参数要求时应采取相应措施。
8.3.5. 紫外杀菌灯灭菌效果下降，可自行更换。
超净工作台的正确使用方法
超净工作台的使用方法：1、接通电源2、提前20分钟开风机。
3、提前30分钟开台内紫外灯杀菌。
注意事项：1、新安装的或长期未使用的超净工作台使用前：须对净化工作台及周围环境用超净真空吸尘器或无纤维的工具进行清洁；2、工作台面上，不要存放不必要的物品，以保持工作区内的洁净气流正常流动，不受干扰。
3、禁止在工作台面上记录，工作时应须尽量避免作明显扰乱气流的动作无菌操作注意事项体外培养细胞缺乏抗感染能力，所以防止污染是决定培养成功或失败的首要条件。
即便使用设备完善的实验室。
若实验者粗心大意，技术操作不规范,也会导致污染。
因而．为在一切操作中为最大可能的保证无菌．每一项工作都必须做到有条不紊和完全靠。
【培养前准备】在开始实验前要制定好实验计划和操作程序。
有关数据的计算要事先做好。
根据实验要求，准备各种所需器材和物品、清点无误后将其放置操作场所(培养室、超净台)内，然后开始消毒。
这可以避免开始实验后．囚物品不全往返拿取而增加污染机会。
【操作野消毒】无菌培养室每天都要用0.2%的新洁尔灭拖洗地面—次(拖布要专用)．紫外线照射消毒30-50min，超净工作台台面每次实验前要用75％酒精擦洗。
然后紫外线淌毒30min。
在工作台面消毒时切勿将培养细胞和培养用液同时照射紫外线，消毒时工作台面上用品不要过多或重叠放置．否则会遮挡射线降低消毒效果。
—些操作用具如移液器、废液缸、污物盒、试管架等用75%酒精擦洗后置于台内同时紫外线消毒。
【洗手和着装】原则上和外科手术相同。
平时仅做观察不做培养操作时，可穿装细胞培养室内紫外线照射30min的清洁工作服。
在利用超净台工作时，因整个前臂要伸入箱内，应着长袖的清洁工作服，并于开始操作前要用75％酒精消毒手。
如果实验过程中手触及可能污染的物品和出入培养室都要重新用消毒液洗手。
进入原代培养室需彻底洗手还要戴口罩、着消毒衣帽。
【火焰消毒】在无菌环境进行培养或做其它无菌工作时，首先要点燃酒精灯或煤气灯。
超净工作台标准操作规程
1. 目的规范超净工作台的操作，确保设备正常运作。
2. 适用范围本操作规程适用于超净工作台的操作。
3. 职责使用人员负责本规程操作。
4. 内容4.1 操作规程4.1.2接通电源，按按钮面板“电源”按钮，开启后灯亮表示出于接通状态。
4.1.3超净工作台内堆放有与本实验无关的物品，可先移出。
紫外杀菌15min以上。
4.1.4 紫外杀菌结束前应先开启风机，再关闭紫外灯，让臭氧散尽后，再进行实验。
4.1.5 按“照明”按钮开启日光灯，根据需要按“低-中-高”风速按钮，即可经行操作。
4.1.6适当打开超净工作台玻璃挡板，进行实验操作。
4.1.7实验完毕后，用消毒剂擦拭超净工作台台面，收集各废弃物，关闭玻璃挡板，关闭风速按钮及照明开关，打开紫外灯灭菌15min以上，最后关闭电源。
4.1.8实验完毕后，填写《设备使用记录》及《紫外灯使用记录》。
4.2日常保养4.2.1接通电源使超净工作台运行，检查工作台各部分功能是否正常。
4.2.2用清洁剂擦拭设备表面、灯管和工作台面。
4.2.3工作台面应进行消毒灭菌处理。
4.2.4每周进行清洁或维护，填写《仪器设备清洁或维护保养标识状态清单》。
4.3 维护4.3.1每三个月对设备外观、工作电源进行一次检查。
4.3.2 紫外灯使用不得超过使用寿命，应及时进行更换；经确认不合格时也应进行更换。
4.4 维修：参照《设备管理制度》中设备维修一项。
4.5 注意事项4.5.1 超净工作区内严禁存放不必要的物品，以保持洁净气流流型不变。
4.5.2对长期未使用的工作台，使用前应进行清洁，再开紫外灯进行灭菌。
4.5.3实验过程中操作人员应尽量避免快速且大浮动移动，以减少对超净台内气流的扰乱。
4.5.4正常情况下，风机的最低档在出厂时已经满足风速要求。
使用时可选择“低-中-高”按钮选择需要的风速大小。
4.5.5紫外线对人体的皮肤及视网膜有很强的刺激性，注意使用前关闭紫外灯。
4.5.6可将操作台大致分为废物回收区，物品放置区和操作区。
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超净工作台灭菌方法及操作规程
一般都采用紫外线灯来灭菌
一．超净工作台操作使用前要做的准备工作
1、开启超净工作台的风机，净化台内环境。
打开工作灯达到工作照度。
2、检查超净工台中准备的各种灭菌饲养和实验物品是否齐全。
3、检查喷雾器喷洒效果及超净台内外擦抹用的药液是否已配置好。
4、打开房间内排风系统。
排除打开笼盒时逸出的有味气体。
5、检查IVC机组各种表头指针及目视各笼盒内的动物情况，估测IVC运行情况。
6、记录影响实验动物繁殖、生长、发育的主要环境参数，如相对湿度、温度、日温差、笼盒内外压差等。
二．超净工作台操作规程及注意事项
（1）操作人员带好一次性口罩、帽子及医用乳胶手套。
（2）双手轻轻抬起IVC笼盒外端，沿笼架搁挡向外移出笼盒，放在不锈钢小推车上。
（3）用药液喷雾器充分喷洒双手手套外表及IVC笼盒的外面，消毒灭菌并沾粘住表面的尘埃，防止进入超净台时被层流气体吹扬。
也可用带手套的双手浸入药液容器中，捞起拧干药液毛巾，擦干手套外液滴，同时擦一下笼盒的外表。
（4）打开超净工作台移门，把笼盒移入超净工作台。
（5）适当拉下超净工作台移门。
打开IVC笼盒盖底之间的紧固扣并打开笼盖。
侧卧放在一边。