βAmyloid蛋白在恒河猴脑组织中的形态学特点
成年恒河猴中枢神经系统胶质细胞源性神经营养因子的分布
成年恒河猴中枢神经系统胶质细胞源性神经营养因子的分布杨静;阎洪涛;卢永超;齐建国;周雪;王廷华【期刊名称】《郑州大学学报（医学版）》【年(卷),期】2007(042)005【摘要】目的:探讨成年恒河猴中枢神经系统(CNS)胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)的分布.方法:取3只成年雄性恒河猴CNS 制作冰冻切片,采用免疫组织化学SP法观察成年恒河猴CNS中GDNF分布.结果:GDNF免疫阳性物质主要位于神经元胞浆内,呈棕色.具有免疫阳性信号的神经元可见于大脑皮质、基底核、小脑皮质、小脑内的核团、中线核群、弓状核、橄榄核群、滑车神经核、舌下神经核、迷走神经背核、前庭核、耳蜗核、网状结构、脑桥核、脚间核、延髓下部中央管周围灰质、中脑导水管周围灰质、下丘中央核、薄束核、楔束核、脊髓的腹角、背角以及环绕脊髓中央管周围.此外,在中枢神经系统许多部位的白质可见GDNF阳性胶质细胞和神经纤维.结论:GDNF在恒河猴CNS中广泛分布,其功能可能涉及多种神经元和非神经细胞.【总页数】4页(P909-912)【作者】杨静;阎洪涛;卢永超;齐建国;周雪;王廷华【作者单位】郑州大学基础医学院法医学教研室,郑州450001;郑州大学基础医学院法医学教研室,郑州450001;河南省人口和计划生育科学技术研究院生殖技术与干细胞研究室,郑州450002;四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室,成都,610041;四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室,成都,610041;四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室,成都,610041【正文语种】中文【中图分类】R322.81【相关文献】1.胶质细胞源性神经营养因子、Cajal间质细胞和缝隙连接蛋白43在先天性巨结肠中的表达分布研究 [J], 王宝西;侯豫;杨烨2.17 β-雌二醇对血管性痴呆大鼠神经生长因子、脑源性神经营养因子和胶质细胞源性神经营养因子表达的影响 [J], 卢宏;姜晓蕊;王建平;宋志宇;滕军放;王凯娟3.胶质细胞源性神经营养因子在大鼠生后腰段脊髓中分布的实验研究 [J], 苏剑斌;白秉学;周长满;鄂玲玲;刘雁;徐忠涛4.恒河猴脊髓半横断损伤后脊髓腹角及对侧皮质前运动区胶质细胞源性神经营养因子的表达 [J], 卢永超;杨静;张丽;金虹;孙玲;张广政;申小静;齐建国;王廷华5.胶质源性神经营养因子在成年大鼠中枢神经系统中的表达 [J], 周雪;章为因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
β-淀粉样蛋白分子量
β-淀粉样蛋白分子量
β-淀粉样蛋白（amyloid β-protein，Aβ）分子量约4kDa，由β淀粉样前体蛋白(β-amyloid precursor protein,APP)水解而来，由细胞分泌，在细胞基质沉淀聚积后具有很强的神经毒性作用。
β淀粉样蛋白( amyloid-β，Aβ) 是由淀粉样前体蛋白( amyloid precursor protein，APP) 经β-和γ-分泌酶的蛋白水解作用而产生的含有39～43 个氨基酸的多肽。
它可由多种细胞产生，循环于血液、脑脊液和脑间质液中，大多与伴侣蛋白分子结合，少数以游离状态存在。
人体内Aβ最常见的亚型是Aβ1～40 和Aβ1～42。
在人脑脊液和血中，Aβ1～40分别比Aβ1～42的含量水平高10 倍和1．5倍，Aβ1～42具有更强的毒性，且更容易聚集，从而形成Aβ 沉淀的核心，引发神经毒性作用。
实验性糖尿病恒河猴的组织病理学观察
感谢实验室人员的辛勤付出和协助，他们为本实验提供了宝贵的 支持和帮助。
对资助机构的感谢
感谢相关资助机构对本实验的资助和支持，这些机构的支持使得 本实验得以顺利进行。
THANKS
谢谢您的观看
背景
糖尿病是一种常见的慢性疾病，对人 类健康具有严重危害。
恒河猴是一种常用的实验动物，具有与人 类相似的生理特征，可用于研究人类疾病 。
组织病理学观察是研究疾病发生、 发展过程中组织结构与功能变化的 重要手段。
02
实验方法与过程
实验动物与饲养条件
实验动物
健康成年恒河猴，雌雄不限，体重在3-5kg之间。
细胞坏死
实验性糖尿病恒河猴的胰岛细胞坏死数量也明显增加。
免疫细胞浸润与炎症反应
T淋巴细胞浸润
实验性糖尿病恒河猴的胰岛和肾组织中T 淋巴细胞浸润明显，提示免疫调节异常。
VS
单核/巨噬细胞浸润
实验性糖尿病恒河猴的视网膜和肾组织中 单核/巨噬细胞浸润明显，表明炎症反应 强烈。
04
讨论与结论
糖尿病对恒河猴组织的影响
通过对恒河猴组织的病理学观察，可以了解糖尿病对机 体的影响程度，为诊断提供依据。
01
机制研究
通过对恒河猴组织的病理学变化进行 分析，有助于深入探讨糖尿病的发病 机制。
02
03
药物筛选
通过对恒河猴组织的病理学变化进行 观察，可以评估药物对糖尿病的治疗 效果，为新药研发提供参考。
本实验的优缺点与改进方向
取材部位
取胰腺、肾脏、肝脏等组织。
取材时间
在注射后4周进行取材。
组织处理
将取材的组织用10%中性甲醛固定，进行石蜡包 埋、切片等处理。
恒河猴piwil4基因的鉴定与表达分析
恒河猴piwil4基因的鉴定与表达分析赵少志;李玥;江雪;卢亦路;陶大昌;刘运强;马用信【期刊名称】《遗传》【年(卷),期】2011(33)4【摘要】To investigate the structure and expression pattem of thesus monkey PIWIL4 protein, homologous comparison and reverse transcription PCR (RT-PCR) were carried out to identify thesus monkey piwil4.The expression of piwil4 mRNA was tested in thesus monkey heart, brain, colon, epididymis and testis, and the result showed that piwil4 mRNA was expressed in these thesus monkey tissues.Bioinformatic analysis suggested that the thesus PIWIL4 protein shared 97％identity in amino acids and the same domains such as PAZ and Piwi with the human PIWIL4 (HIWI2) protein.The immunohistochemical result indicated that PIWIL4 proteins had the same localization in adult testes of the two species, but the distribution of these proteins was altered dynamically at different developmental stages in thesus monkey testes.PIWIL4 protein was expressed in the nucleus of convoluted seminiferous tubules in infant monkey testes, whereas it was expressed in the cytoplasm of adult monkey testes.The results suggest that piwil4 gene play a similar role in thesus and human, and different localizations of PIWIL4 protein in infant monkey and adult monkey testes suggest that it functions differently at different developmental stages.%为了研究人类近亲恒河猴中PIWI家族蛋白PIWIL4的结构和表达情况,文章首次利用同源比对和RT PCR方法克隆了恒河猴piwil4基因,检测了其mRNA在恒河猴心脏、脑、结肠、附睪和睪丸5种组织中的表达情况,利用生物信息学的方法对恒河猴piwil4基因和人的PIWIL4 (HIWI1)基因编码的蛋白产物进行了同源性分析和结构域分析,并进一步利用免疫组化的方法比较了PIWIL4蛋白在成人、成年恒河猴和性未成熟恒河猴肇丸组织中的表达分布.结果表明,恒河猴piwil4 mRNA在多组织中表达,恒河猴和人的PIWIL4蛋白的氨墓酸序列同源性达97%以上,均含有PAZ和Piwi结构域,它们在两物种成年个体辜丸组织中空间分布一致,但在不同发育阶段恒河猴辜丸组织中的分布发生了改变,幼猴中PIWIL4蛋白主要表达于生精小管细胞的细胞核,在成年猴辜丸组织中则表达于各种细胞的胞浆中.上述结果提示,piwil4基因在人类和恒河猴精子发生过程中作用类似,PIWIL4蛋白在幼猴和成年猴辜丸组织中的表达差异提示它们在不同发育阶段功能的改变.【总页数】6页(P365-370)【作者】赵少志;李玥;江雪;卢亦路;陶大昌;刘运强;马用信【作者单位】四川大学华西医院医学遗传研究室暨生物治疗国家重点实验室疾病基因组学研究室,成都610041;四川大学华西医院医学遗传研究室暨生物治疗国家重点实验室疾病基因组学研究室,成都610041;四川大学华西医院医学遗传研究室暨生物治疗国家重点实验室疾病基因组学研究室,成都610041;四川大学华西医院医学遗传研究室暨生物治疗国家重点实验室疾病基因组学研究室,成都610041;四川大学华西医院医学遗传研究室暨生物治疗国家重点实验室疾病基因组学研究室,成都610041;四川大学华西医院医学遗传研究室暨生物治疗国家重点实验室疾病基因组学研究室,成都610041;四川大学华西医院医学遗传研究室暨生物治疗国家重点实验室疾病基因组学研究室,成都610041【正文语种】中文【相关文献】1.恒河猴MyD88基因沉默siRNA腺病毒载体的构建与鉴定 [J], 赵方;陈鹏;焦剑;胡明道;黄明;刘锋;许晔凯2.茶树PPR基因家族全基因组鉴定及白化相关基因表达分析 [J], 刘丁丁;王君雅;汤榕津;陈亮;马春雷3.甘蓝型油菜ZIP基因家族全基因组鉴定与表达分析 [J], 贺丹;杨太桦;黎婷;吴金锋;彭佳师;刘丽莉;张大为;严明理;李再云4.茄子脂氧合酶家族基因全基因组鉴定与表达分析 [J], 赵国富;严亚琴;汪精磊;魏庆镇;包崇来5.小鼠耳芥PEBP基因家族全基因组鉴定及表达分析 [J], 李永光;金玉环;郭力;艾昊;李瑞宁;黄先忠因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
重组EPO-Fc融合蛋白对恒河猴的长期毒性和免疫原性研究
重组EPO-Fc融合蛋白对恒河猴的长期毒性和免疫原性研究张欣;刘斌;王莉;岑小波【期刊名称】《中国新药杂志》【年(卷),期】2007(16)3【摘要】目的:观察重组EPO-Fc对恒河猴的长期毒性和免疫原性.方法:健康恒河猴随机分为EPO-Fc高、中、低剂量组(80,25,8μg·kg-1)和对照组,每组6只,雌雄各半.皮下注射给药,每周1次,连续24周.末次给药后24 h处死2/3,剩下动物停药后继续观察8周.观察症状和检测指标包括:一般情况、血液学、血生化、血电解质、心电图、粪尿、骨髓、病理组织学及血清抗体等各项检测.结果:连续给药后,高、中剂量组的红细胞计数(RBC)、血细胞比容(HCT)、血红蛋白(HGB)等升高,这与其药理作用有关.给药第4周高剂量组开始出现抗EPO-Fc抗体,第16周各剂量组大多数动物产生抗体;恢复期间,抗体滴度逐渐降低.其余各项观察指标均未见异常.结论:长期给予EPO-Fc对恒河猴无明显毒性,其安全剂量为80μg·kg-1,但具有免疫原性.【总页数】4页(P196-199)【作者】张欣;刘斌;王莉;岑小波【作者单位】四川大学华西医院/华西临床医学院,国家成都中药安全性评价中心,成都,610041;四川大学华西医院/华西临床医学院,国家成都中药安全性评价中心,成都,610041;四川大学华西医院/华西临床医学院,国家成都中药安全性评价中心,成都,610041;四川大学华西医院/华西临床医学院,国家成都中药安全性评价中心,成都,610041【正文语种】中文【中图分类】R994.2;R915.2【相关文献】1.重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对大鼠的长期毒性研究 [J], 郭竹英;佘佳红;姜华;张淑英;张晓东;陈黛影;袁伯俊2.重组人脑钠素对恒河猴长期毒性研究 [J], 陆国才;袁伯俊;佘佳红;吴浩3.重组人尿激酶原对恒河猴的长期毒性研究 [J], 陆国才;袁伯俊;姜华;黄矛;颜天华;佘佳红;张晓冬4.重组霍乱毒素B亚基与恶性疟原虫多抗原表位融合蛋白对恒河猴的免疫保护作用研究 [J], 李平;钟辉;石成华;李杰之;张艳红;李楚芳;时运林;马清钧;曹诚5.重组水蛭素对恒河猴长期毒性研究 [J], 陆国才;佘佳红;袁伯俊;黄矛;张晓冬;姜华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
β-Amyloid(1-42) β淀粉样肽(1-42)要点
S-0107R
◆兔抗人、大鼠、小鼠β-Amyloid（1-42）多克隆抗体
◆200ul/1200.00 1ml/4200.00 (100ug/200ul 500ug/1ml)亲和纯化抗体
◆WB=1:300-600 Elisa=1:500-1500 IP=1:50-150 IHC=1:300-600
抗体动物种属来源缩写：R-兔、M-小鼠、r-大鼠、Sh-山羊、H-人
Apaf-w1(C端)凋亡蛋白活性因子-1
S-0058R
◆兔抗人、大鼠、小鼠Apaf-1(CT)多克隆抗体
◆200ul/1000.00 1ml/2900.00 (100ug/200ul 500ug/1ml)亲和纯化抗体
◆WB=1:300-600 Elisa=1:500-1500 IP=1:50-150 IHC=1:300-600
◆APAF-1(Apoptosis protease activating factor-1)调节细胞色素C依赖的Caspase-9原有的自动催化活性，导致Caspase-3的激活和引起凋亡。Apaf-1在成年人的脾脏、外周血白细胞、肾脏、肺和胎儿脑、肾、肺中高水平表达。
抗体动物种属来源缩写：R-兔、M-小鼠、r-大鼠、Sh-山羊、H-人
◆血管紧张素原是一种大分子糖蛋白和α2球蛋白，分子量为55-65KDa,广泛分布于血液循环、淋巴、脑、肾脏等组织。
抗体动物种属来源缩写：R-兔、M-小鼠、r-大鼠、Sh-山羊、H-人
◆AR(Androgen Receptor; dihydro testosteroneR)是一个由920个氨基酸组成的蛋白质，位于雄激素靶组织细胞中或细胞表面上的特异分子部位或结构。AR在前列腺癌中起着重要作用，研究表明AR的表达与组织分型形成一定的相关性，AR在高分化的肿瘤中表达的较多，而在低分化的肿瘤中表达较少。分子量为：101KDa。
恒河猴胚胎浅表型植入机理的探讨
恒河猴胚胎浅表型植入机理的探讨
秦力;柏素霞;唐爽;王雁玲
【期刊名称】《动物学报（英文版）》
【年(卷),期】2003(049)004
【摘要】为揭示恒河猴胚胎浅表型植入的分子机理,实验采用免疫组化和原位杂交的方法研究了粘附侵润相关分子在妊娠恒河猴母胎界面的表达模式,发现层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在滋养层细胞柱的远端开始表达;整合素α1β1从柱的近端到远端表达逐渐升高,但在滋养层细胞鞘中上述分子的表达均降低;大量侵润母体血管的滋养层细胞高水平表达上述分子.此外,植入早期上皮斑和蜕膜基质细胞高表达MMPs组织抑制因子-2(TIMP-2).结果提示,滋养层细胞鞘中α1β1、LN、MMP-2表达水平的降低及上皮斑、蜕膜和滋养层细胞中TIMP-2的高表达可能是导致浅表型植入形成的分子基础[动物学报 49(4):473～480,2003].
【总页数】8页(P473-480)
【作者】秦力;柏素霞;唐爽;王雁玲
【作者单位】中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室,北京,100080;中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室,北
京,100080;中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室,北
京,100080;中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室,北
京,100080
【正文语种】中文
【中图分类】Q95
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L-茶氨酸药理作用的研究进展
刘 杉1，2 1. 河北北方学院药学系，2. 北京托毕西药业有限公司，【摘要】L-茶氨酸对于中枢神经系统，利于阿尔茨海默症过升高α波活性、调节昼夜紊乱、可通过促进肿瘤细胞凋亡、起到保护作用，降低病毒感染风险。
对于机体代谢，饮茶不仅是我国传承了数千年的文化传统，在当下亦是健康时髦的标志。
茶叶中富含了多种营养物质，L-茶氨酸（L-theanine，L-The）就是其中之一。
茶氨酸的分子量为174.20 Da，是一种非蛋白质类生物氨基酸，结构似谷氨酸和谷氨酰胺，溶于水，在酸性环境下更稳定，有很强的抗氧化作用［1-2］。
L-茶氨酸是日本学者坂田（Sakata）于1949年首次从绿茶叶中分离到的，而实际上，茶氨酸早在1942年就首次通过水乙胺处理吡咯烷甲酸的方法化学合成了［3］。
合成的茶氨酸为L-和D-对映体的外消旋混合物，而在自然界中的L-The是以L-（S）对映体形式存在的［4］。
从成分上看，新鲜茶叶中游离的氨基酸约50%是L-The，干茶中只含有1%~2%。
绿茶中的L-The可以产生焦糖味和诱人的香气，在口感上有助于缓解茶水中茶多酚的涩味和咖啡因的苦味。
常饮茶还具有使人放松、消除疲倦、改善代谢功能等积极的作用。
L-The的分子量小又溶于水，使得其在机体内吸收十分迅速。
据动物研究报道，L-The是在小肠上通过钠偶联转运蛋白在小肠绒毛刷状缘膜上表达的主动转运体吸收的［5］。
在大鼠脑组织模型中，L-The的吸收也会显著降低需要“L-系统”（L-system）运输的其他氨基酸的吸收，特别是那些具有大侧链或支链的物质［6］。
在动物模型中，给药30 min后，L-The在大脑和肝脏中的浓度显著增加，45~90 min后达到最大浓度，24 h后在这些组织中就检测不到L-The的浓度了［7］。
结构特点使其能在大脑和肝脏内分布比较集中，并且具有很强的抗氧化和抗炎作用，这些理化性质和药代动力学特点更有利于其在中枢神经系统和肝脏发挥药理作用。
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ｈｉｐｏ ａ ｕｓ Ｔｈ ｉ ｍｕ — ｌｃｒ ｎ ｍｉｒ ｓ ｏ ｙ ｎａｙ ｅ ｏ ｔｅ ｂ ａｎ ｒ ｍ ａ ｐ ｃ ｍｐ ． ｅ ｍ ｎｏ ｅｅ ｔｏ ｃ ｏ ｃ ｐ ａ ｌ ｓ ｓ ｆ ｈ ｒ ｉ ｆｏ ２３一ｅ ｒｏｄ ｍｏ ｋｅ ｆ ｒｈｅ ｒｖ ａｅ ｙ ａ — ｌ ｎ ｙ ｕ ｔ ｒ ｅ ｅ ｌｄ
标记的胶体金颗粒。结论 Ａ４ Ｂ ２ 恒 河 猴 老 年 斑 的 主要 成分 ， 在 其 形 成 过 程 中起 到 重 要 作 用 。 并
【 键 词 】 恒 河 猴 ； ａ ｙｏ 关 １ ｍ ｌ ｄ蛋 白 ； 体 金 颗 粒 ； 疫 电镜 ； 年 斑 ３ ｉ 胶 免 老
【 中图分类号 １Ｒ ４ ５１
ｃ ｎ ｕ ｔｄｔ ｅｅｍｉｅｌｃ ｌ ａｉｎ ｏ ３ ｄ ｐ ｓｔ ｉ ｈ ａｉｕ ｅ ｉｎ ｎ ｌｄｎ ｒｎａ ，ｐ ｒ ｔｌ ｅ ｏａ ｏｔｘ ａ ｄ ｏ ｄ ｃｅ ｏ ｄ ｔｒ ｎ ｏ ａｉ ｔ ｆＡｆ ｅ ｏ ｉ ｎ ｔｅ ｖｒｏ ｓｒｇｏ ｓｉｃｕ ｉｇ ｆ ｔｌ ａｉ ａ ，ｔｍｐ ｒｌｃｒｅ ｎ ｚ ｏ ｓ ｏ ｅ
赵 乔 ，蔡 青 ， 孟 霞 ， 立 鸣 ， 胜 利 ， 守恕 ， 朱 李 焦 王 钜
（ 都 医 科 大 学 实 验 动 物 科 学 部 ， 都 医科 大 学 电 镜 室 ， 京 １０ ６ ） 首 首 北 ０ ０９
【 要 】 目的 观 察 １ ｍｙ ｉ 白在 不 同 年 龄 的恒 河 猴 脑 中 的表 达 及 其 组 织 学 和 细 胞 超 微 结 构 水 平 的分 布 摘 ３ ｌ ｄ蛋 ａ ｏ
【 文献标识码 】Ａ
【 文章编号 】１７ －８６ ２ １ ）３０ １－４ ６ １７ ５ （０ ０ ０ －０ ５０
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特 点 。方 法 分 别 取 脑 组 织 额 叶 、 马 、 叶和 顶 叶做 免 疫 组 化 ， 察 １ｍ ｌｉ 海 颞 观 ３ ｙｏ ａ ｄ蛋 白在 组 织 学 上 的 分 布 特 点 及 与 年 龄的关系 ； 用 ２ 选 ３岁 恒 河 猴 一 只 ， 注 后 取 上 述 部位 做 免 疫 电镜 ， 察 １ ｍ ｌｉ 灌 观 ３ ｙ ｄ蛋 白在 细 胞 超 微 结 构 水 平 的 分 布 ａ ｏ 特 点 。结 果 免 疫 组 化 染 色 可 观 察 到 年 轻 猴 的 神 经 细 胞 和 胶 质 细 胞 中 有 少 量 的 ＡＢ Ｏ颗 粒 ， 额 叶 和 海 马居 多 。 ４ 以 在老年猴脑 中 Ａ ４ ｐ ０常 聚 集 成 团 状 斑 块 。 年 轻 猴 脑 细 胞 内未 见 明 显 的 颗 粒 状 ＡＢ ２ 而 老 年 猴 的 额 叶 有 多 量 的 ４， Ａ４ ｐ ２细 胞 外 散 在 斑 块 ， 经 细胞 和 胶 质 细 胞 内 也 见 有 Ａｐ ２颗 粒状 沉 积 。免 疫 电 镜 可 观 察 到 Ａ ４ 神 ４ ｐ ０的胶 体 金 颗 粒 大 部 分 存 在 于 老 年 猴 神 经 细 胞 细 胞 质 中 ， 细胞 问 质 和 小 胶 质 细 胞 中也 可 见 少 量 的胶 体 金 颗 粒 ， 见 于 额 叶 ； 记 在 多 标 Ａ４ Ｂ ２的 胶 体 金 颗 粒 也 是 多 见 于 神 经 细 胞 中 ， 小 胶 质 细 胞 中 少 量 存 在 ， 时 在 颞 叶 的神 经 纤 维 束 中 也 可 见 Ａ ４ 在 同 Ｂ２
２１ ０ ０年 ３月
中 国 比较 医 学杂 志
ＣＨＩ ＮＥＳ ＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＣＯＭＰ Ｅ Ｊ ＡＲＡＴＩ ＶＥ ＭＥＤＩ ＮＥ ＣＩ
Ｍａ ｃ ｒ ｈ，２ １ ００
Ｖ０ ． ０ ＮＯ ３ １２ ．
第２ Ｏ卷
第 ３期
１ ｍ ｌｉ ３ ｙｏ Ａ ｄ蛋 白在 恒 河 猴 脑 组 织 中 的 形 态 学 特 点
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【 ｂｔａｔ Ｏｂｅｔ ｅ Ｔ ｖｓｇｔ ｔｅｄｓ ｉ ｔ ｎａ ｄｕ ｒｓ ｕｔｒ ｏ ｅ［ ｍ ｌｉ ｐｏ ｉ ｉ ｃｒｂａ ｔｓｅ Ａ ｓ ｃ】 ｒ ｊｃｉ ｏｉ ｅｔ ａ ｉｒ ｕｉ ｎ ｈａｔ ｃｕｅ ｆｈ ３ ｙｏ ｒｔ ｎ ｎ ｅｅｒｌｉ ｕ ｖ ｎ ｉ ｅｈ ｔｂ ｏ ｒ ｔ ａ ｄ ｅ ‘ ｓ