冰冻切片工作中的经验总结

冰冻切片工作中的经验总结

冰冻切片工作中的经验总结

发表时间:2018-09-21T16:48:28.870Z 来源:《中国医学人文》2018年第8期作者:代洁王巍

[导读] 快速冰冻诊断报告用于术中确定病变的良恶性,手术方式和手术范围等,快速冰冻切片是手术中病理诊断的一种重要方法

(四川大学华西第二医院;四川成都 610000)

【中图分类号】R2 【文献标号】A 【文章编号】2095-9753(2018)08-0235-01

快速冰冻诊断报告用于术中确定病变的良恶性,手术方式和手术范围等,快速冰冻切片是手术中病理诊断的一种重要方法。手术病人可以通过冰冻结果来确定是否需要由腹腔镜转为开腹手术,或者开腹手术是否需要扩大手术范围或者清扫淋巴结,免去病人受到二次手术的痛苦,因此为病理医生提供一张高质量的冰冻切片十分重要。我院近来的术中冰冻标本量都在每年3万例-4万例左右,并且逐年递增,通过长时间的冰冻切片工作,我对快速冰冻切片有一些自己的经验总结。

一、冰冻取材

1、经过福尔马林浸泡的组织标本不能用于冰冻切片。

2、室温下,切片组织冰晶融化,将出现许多孔状空隙,导致结构破坏甚至酶和蛋白等微细结构移动,以致影响诊断,我们在取材过程中应尽量减少冰晶[1]的产生。

⑴在取材前应将所有器械的水擦拭干净,减少取材标本冰晶的产生;

⑵与临床医生沟通,不要用浸泡过生理盐水、酒精、碘伏的纱布包裹标本;

3、取材组织大小最好为1.5cm×1.5cm×0.2cm,如果组织过大过厚,冻后组织块脱水不好,影响冻后诊断。

4、在工作中,经常会遇到针尖样大小的标本组织送检,如宫内膜,各种小结节等,我们可以先滴加一定量的包埋剂于标本台上,突出于支撑面0.5cm左右,将极少量的标本立即放置于包埋剂表面,在包埋剂下沉以前迅速将标本台放置于冷室冷冻。最后冻好的标本凝固于包埋剂表面,并突出支撑面,利于切片。

5、医生在取完材后,一定要对取材台、取材器械进行清洁消毒,避免交叉污染。

6、通过长期的工作实践,我们可以使用胶水替代OTC包埋剂,以节约成本。注意在组织脱水前,应将胶水冲洗干净,避免组织与纸质标签粘连,影响组织包埋。

二、冰冻切片

1、温度[2]是保证冰冻切片质量的重要因素:细胞致密且较硬的组织冷冻温度较高(-16~-20℃),且冷冻时间较短;细胞疏松且较软的组织温度稍低(-20~-22℃),冷冻时间较长;脂肪组织所需温度更低(-22~-24℃),冷冻组织更长。

2、切片厚度:细胞密集且细胞体积较小的组织薄切;纤维多细胞稀少且细胞体积较大的组织厚切。

3、保证切片质量的关键:

⑴在上标本台夹时选好角度,保证组织切面完整;

⑵切片厚薄均匀,遇到较硬的组织(如宫颈、肌瘤等),可以利用大拇指的体温将组织进行软化后再进行切片;

⑶在HE染色时应勤换染色试剂,不要节约,保证核浆对比清晰,染色漂亮。

三、冰冻收块

1、及时收块

一旦病理诊断结束,应将剩余组织及时固定。

2、4℃冰箱甲醛固定

低温组织迅速复温至室温,极有可能破坏组织生物膜系统,直接影响冻后石蜡切片质量及后续的病理诊断,可将收好的组织块放置于4℃冰箱的福尔马林中固定。

四、冰冻切片机的维护与保养

随着冰冻切片技术和临床外科手术的发展,要求送检冰冻切片的病例越来越多,冰冻切片机的使用频率就越来越高,我们应该正确的使用低温恒冷冰冻切片机,对其进行日常保养,尽量预防和减少故障的发生率。

1、及时清洁冷室内组织碎屑,保证设备内外清洁,特别注意清扫碎屑的方式,往废物槽清扫,尽量不要扫入装有标本台夹头的转轮缝隙里,如果组织碎屑长期积累,会影响右侧转轮的使用,转动转轮会非常费力,影响冰冻切片的速度和质量。

2、定期清洁切片机的主要功能部件,特别是刀架和标本台。

3、定期消毒,特别是切过携带传染病标本后,可采用喷雾式84消毒液。

4、定期给机械系统加润滑剂,请工程师进行专业维护保养。

5、每次切完切片要及时关闭照明开关,按下锁机开关,保证人机安全。

作为一名合格的病理技术员,不仅仅是要干好自己的本职工作,更需要从日常工作中总结经验、发现问题、解决问题,时刻严格要求自己,能够为诊断医生提供一张完美的切片。

参考文献:

[1] 包翠芬,刘霞,穆长征,李淑玲. 比较三种防冰晶法对切片保存效果的影响[J]. 中国组织化学与细胞化学杂志. 2007 (01)

[2] 陈芳,李海. 提高病理冰冻切片质量的探讨[J]. 中国医药指南. 2013 (06)

石蜡切片免疫组化染色步骤

石蜡切片免疫组化染色步骤 1、载玻片的处理: 抗原修复过程中,由于高温、高压、辐射等诸多因素的影响,极易造成脱片。为保证试验的正常进行,可选用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI-9003 Histogrip TM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等几种试剂,对已清洗的载玻片进行处理。具体方法如下: 1.1 APES:现用现配。将洗净的玻片放入以1:50比例丙酮稀释的APES中,停留20~30秒钟,取出稍停片刻,再入纯丙酮溶液或蒸馏水中涮去未结合的APES,置通风橱中晾干即可。用此载玻片捞片时应注意组织要一步到位,并尽量减少气泡的存在,以免影响染色结果。 1.2 Histogrip TM:将洗净的玻片放入以1:50比例丙酮稀释的Histogrip液中,停留1~2分钟,然后用双蒸水快速清洗三次,室温干燥或60o C烤箱烘烤一小时,装盒备用。 1.3 Poly-L-Lysine:将洗净、干燥的载玻片放入以1:10比例去离子水稀释的多聚赖氨酸溶液中,浸泡5分钟,60o C烤箱烘烤一小时或室温过夜干燥。装盒备用。试验中使用的器具均为非玻璃制品。 2、常用酶消化: 2.1 胰蛋白酶:一般使用浓度为0.05%~0.1%,消化时间为37℃、10~40分钟,主要用于细胞内抗原的显示。 2.2 胃蛋白酶:一般使用浓度为0.4%,消化时间为37℃、30~180分钟,主要用于细胞间质抗原的显示,如:Laminin(层粘蛋白),Collagen IV(IV型胶原)等。 2.3 皂素(Saponin):一般使用浓度为2~的saponin溶液,消化时间为室温孵育30分钟。 3、抗原热修复: 可根据实验室的具体条件,选用微波炉抗原修复、高压锅抗原修复或水浴高温抗原修复。抗原热修复可选用各种缓冲液,如TBS、PBS、重金属盐溶液等,但实验证明,以0.01M枸橼酸盐缓冲液(pH6.0)效果最好。请选用我公司提供的ZLI-9064 枸橼酸盐缓冲液(粉剂)配制,取该粉剂一包溶于1000ml 的蒸馏水中,混匀,其pH值在6.0 0.1,如因蒸馏水本身造成的pH值偏差,请自行调整。 3.1 石蜡切片微波炉抗原修复操作方法:切片脱蜡至水后,3%H2O2处理10分钟,蒸馏水洗2分钟×3。将切片放入盛有枸橼酸盐缓冲液(工作液)的容器中,置微波炉内加热使容器内液体温度保持在92℃~98℃之间并持续10~15分钟(注意:无论是使用医用或家用微波炉,请根据具体机型酌情设置条件,务必满足以上步骤中对温度和时间的要求)。取出容器,室温冷却10~20分钟(注意:不可将切片从缓冲液中取出冷却,以便使蛋白能够恢复原有的空间构型)。PBS洗,下接免疫组化染色步骤。 3.2 石蜡切片高压抗原修复操作方法:切片脱蜡至水。将1500ml~3000ml的枸橼酸盐缓冲液(工作液)注入不锈钢压力锅中加热至沸腾。切片置于金属架上,放入锅内,使切片位于液面以下,盖锅压阀。当压力锅开始慢慢喷气时(约加热5~6分钟后),计时1~2分钟,然后将压力锅端离热源,冷水冲至室温后,取下气阀,打开锅盖,取出切片,蒸馏水洗后,PBS洗2分钟×3,下接免疫组化染色步骤。 3.3 石蜡切片电炉煮沸抗原修复操作方法:切片脱蜡至水后,放入盛有枸橼酸盐缓冲液(工作液)的容器中,并将此容器置于盛有一定数量自来水的大器皿中,电炉上加热煮沸,从小容器的温度到达92℃~98℃起开始计时15~20分钟,然后端离电炉,室温冷却20~30分钟,蒸馏水冲洗,PBS洗,下接免疫组化染色步骤。 4、免疫组化染色步骤: (以美国ZYMED公司SP试剂盒为例) 4.1石蜡切片脱蜡至水。 4.2 3%H2O2室温孵育5~10分钟,以消除内源性过氧化物酶的活性。 4.3蒸馏水冲洗,PBS浸泡5分钟,(如需采用抗原修复,可在此步后进行)。

冰冻切片实验方案和HE染色

2-3人一组,分为7组(上课时需携带实验步骤) 冰冻切片操作方法及步骤: 1取材:(昆明小鼠各个组织或器官) 取材时不能太大太厚,厚者冰冻费时,大者难以切完整,最好为24×24×2mm。 2包埋: 取出组织支承器,放平摆好组织,周边滴上包埋剂,速放于冷冻台上,冰冻。 小组织的应先取一支承器,滴上包埋剂让其冷冻,形成一个小台后,再放上细小组织,滴上包埋剂。 注意:大组织进行包埋时,只要使组织固定在支承器上即可,切勿浪费包埋剂。 3修平: 将冷冻好的组织块,夹紧于切片机直承器上,启动粗进退键,转动旋钮,将组织修平。 注意:修平过程中,正确使用切片机,不要一次性大量切割组织块,以防损毁切片刀。 4切片: 调好切片的厚度,根据不同的组织而定,原则上是细胞密集的薄切,纤维多细胞稀的可稍为厚切,一般在5~10um间。 5调防卷板: 制作冰冻切片,关键在于防卷板的调节上,这就要求操作者要细心,准确地将其调较好,调校至适当的位置。切片时,切出的切片能在第一时间顺利地通过刀防卷板间的通道,平整地躺在持刀器的铁板上。这时便可掀起防卷板,取一载玻片,将其附贴上即可。 6切片工作完成后,将冷冻机内的所有废物清理干净,切勿乱扔。 冰冻切片时的注意事项: 1 防卷板及切片刀和持刀架上的板块应保持干净,需经常用毛笔挑除切片残余和用柔软的纸张擦。有时需要每切完一张切片后就用纸擦一次。因为这个地方是切片通过和附贴的地方,如果有残余的包埋剂粘于刀或板上,将会破坏甚至撕裂切片,便切片不能完整切出。 2 多例多块组织同时需做冰冻且片时,可各自放于不同的支承器上,于冷冻台上冻起来,然后依据不同的编号,依序切片,这样做既不费时也不会乱。 3 放置组织冰冻前,应视组织的形状及走势来放置,如果胡乱放置,就不能收到很好的效果。 4 组织块不须经各种固定液固定,尤其是含水的固定液,在未达到固定前,更不能使用。临床快速冰冻切片,不须要预先固定,一是为了争取时间,二是固定了的组织,反而增加了切片的难度。如果使用未完全固定的组织做冰冻切片,就会出现冰晶。这是因为含水的固定液在组织未经固定前,其中的水份也可渗入到组织中去,当冰冻发生时,这些水份就存留于组织中,形成了冰晶。 5 当切片时,如果发现冰冻过度时,可将冰冻的组织连同支承器取出来,在室温停留片刻,再行切片,或者用口中哈气,或者用大拇指按压组织块,以此来软化组织,再行切片。 6 用于附贴切片的载玻片,不能存放于冷冻处,于室温存放即可。因为当附贴切片时,从室温中取出的载玻片与冷冻箱中的切片有一种温度差,当温度较高的载玻片附贴上温度较低的切片时,由于两种物质间温度的差别,当它们碰撞在一起时,分子彼此间发生转移而产生了一种吸附力,使切片与载玻片牢固地附贴在一起。如果使用冷藏的载玻片来附贴切片,由于温度相同,没有发生上述的现象。

厨房工作自我鉴定范文5篇

厨房工作自我鉴定范文5篇 厨房员工工作能力差和工作意识不强现象,严抓新员工的工作服务意识,强化岗位技能,提升员工的综合能力。下面是我精心精选厨房工作自我鉴定,仅供参考,希望喜欢。 精选厨房工作自我鉴定一 厨房在XX年做了很多,但也有不足,有激情,但也有无奈,其实这些就是工作,这些就是生活。我们不要想着去改变什么,我们更多的该想想我们自己还可以改变什么,这样才能让我们的厨房有更大的进步。下面是我的工作总结,和大家分享: XX年即将过去,回首年前的工作计划和这一年中的忙碌种种,厨房员工付出了艰辛的努力,大家齐心协力,积极奋斗,在完成计划的同时还创造了一个个的惊喜,但也有不足需要我们去总结和弥补。 XX年工作总结: 1.加强厨房内部培训。根据前一年的工作总结,厨房员工工作能力差和工作意识不强现象,严抓新员工的工作服务意识,强化岗位技能,提升员工的综合能力。 2.加强前后台沟通和协调,提升对客服务。定期拓开厨房、前台协调会议,增强香榭里人手的团队意识和服务意识,发现并解决工作中的存在的不足,前后台相互协助,共同努力,提升了餐厅的品牌。 3.合理安排人手,劳动力综合运用。在竞争日益激烈的当今,人手紧张,根

据厨房现有人手对其进行合理安排,综合运用,及时调整员工的工作内容,提升员工的工作效率。 4.进一步规范和明确厨房奖励考核制度。为提升厨房员工工作效率,增强团队战斗力和凝聚力,提高员工总体水平和素质,培养员工积极进取的工作态度,对员工的奖励及考核方案作了进一步的明细规定。 5.一如既往做好厨房“五常法”和卫生工作,厨房的卫生和“五常法”工作一直是厨房工作的重点之一,厨房员工持之以恒进行落实。在饭店星级复评自查中,受饭店领导好评,还被评为西餐部“五常法”示范厨房。 6.体现餐厅品牌,突出个性化服务。在平日服务中,前后台共同配合,不缺乏个性服务,对特殊客人特殊对待,这其中有为孕妇制定制作为期两个多月的营养餐,有为喜好美食的常客长期制作个性菜肴等等。 7.坚持做好各厨房的协调配合工作。严把出品质量关,保证从本厨房出去的任何成品或半成品符合标准,提升部门的服务与品质。 8.圆满完成月饼销售任务。一年一度的月饼销售工作厨房人手齐心协力,把工作重点放在销售上,虽厨房人手的销售能力薄弱,但经过两个多月的努力,圆满完成任务。 9.各节日美食活动丰富多彩。从中西混合套餐到经典自助吧台,从母亲节温馨套餐到圣诞大餐,给客人带来的不光是美食,更多的是惊喜和满足。 10.创造具有南苑特色的优秀西餐菜肴。厨房内部创新开拓,研制了许多深受客人喜爱的西餐零点菜肴;在参加全省烹饪技能大赛中屡获金奖、特金奖,为饭店争夺荣誉。 这些都离不开全体人手的共同努力,也离不开领导的支持和配合。在这一年

免疫组化技术全程原理

免疫组化技术全程原理 一、概念和常用方法介绍 1、定义 用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学(immunohistochemistry)技术或免疫细胞化学(immunocytochemistry)技术。 2、原理 根据抗原抗体反应和化学显色原理,组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合,再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应,前者再用标记辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AKP)等的抗生物素(如链霉亲和素等)结合,最后通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分,在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物,从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。 3、分类 1)按标记物质的种类,如荧光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)、铁蛋白、胶体金等,可分为免疫荧光法、放射免疫法、免疫酶标法和免疫金银法等。 2)按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二步、三步或多步法)。与直接法相比,间接法的灵敏度提高了许多。 3)按结合方式可分为抗原-抗体结合,如过氧化物酶-抗过氧化物酶(PAP)法;亲和连接,如卵白素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC)法、链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(SP)法等,其中SP法是比较常用的方法;聚合物链接,如即用型二步法,此方法尤其适合于内源性生物素含量高的组织抗原检测。 4、目前几种常用免疫组化方法简单介绍 1)免疫荧光方法 是最早建立的免疫组织化学技术。它利用抗原抗体特异性结合的原理,先将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察。当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后即会发出一定波长的荧光,从而可确定组织中某种抗原的定位,进而还可进行定量分析。由于免疫荧光技术特异性强、灵敏度高、快速简便,所以在临床病理诊断、检验中应用较广。 2)免疫酶标方法

切片、免疫组化步骤

冰冻切片的免疫组化染色步骤 速冻组织 将组织块平放于软塑料盖或特制小盒内(直径2cm),如组织块小可适量加OCT包埋剂浸没组织,然后将特制小盒缓缓平放入盛有液氮的小杯内,当盒底部接触液氮时即开始气化沸腾,此时小盒保持原位切勿浸入液氮内,大约 10-20秒组织即迅速冰冻成块。取出组织冰块立即置入-80℃冰箱储存备用,或置于恒冷切片机冰冻切片。 冰冻切片4~8mm,冰冻切片后如不染色,必须吹干,储存低温冰箱内,或进行短暂预固定后储存冰箱内保存。 室温放置30分钟后,入4℃丙酮固定10分钟。也可根据需要选择其它的固定方式。 PBS洗,5分钟×3。 用3%过氧化氢孵育5~10分钟,消除内源性过氧化物酶的活性。 PBS洗,5分钟×3。 下接石蜡切片免疫组化染色操作步骤(滴加一抗开始)。 石蜡切片免疫组化染色步骤 三步法(以SP试剂盒为例) 1. 石蜡切片脱蜡至水。 2. 蒸馏水冲洗,PBS浸泡5分钟,如需采用抗原修复,可在此步后进行。 3. 3%H2O2室温孵育5~10分钟,以消除内源性过氧化物酶的活性,PBS 冲洗,2分钟×3次。 4. 5~10%正常山羊血清封闭,室温孵育10分钟。倾去血清,勿洗,滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液,37℃孵育1~2小时或4℃过夜。 5. PBS冲洗,2分钟×3次。 6. 滴加适当比例稀释的生物素标记二抗(1%BSA-PBS稀释),37℃孵育10~30分钟;或滴加第二代生物素标记二抗工作液,37℃或室温孵育10~20分钟。 7. PBS冲洗,2分钟×3次。 8. 滴加适当比例稀释的辣根酶标记链霉卵白素(PBS稀释),37℃孵育10~30分钟;或第二代辣根酶标记链霉卵白素工作液,37℃或室温孵育10~20分钟。 9. PBS冲洗,2分钟×3次。 10. 显色剂显色(DAB或AEC)。

免疫组化方法(冰冻切片)

免疫组化方法(冰冻切片) A. 所需溶液和试剂 1.二甲苯 2.无水乙醇(100% 和95%,变性无水乙醇,组织学级) 3.苏木精(可选) 4.固定剂:请参考产品说明书选取合适的固定剂。 a.10%中性福尔马林 b.丙酮 c.甲醇 d.3%甲醛溶液:配制时,将18.75 ml 16%甲醛溶液加入到81.25 ml 1X PBS中。 5.10X Tris缓冲盐水(10X TBS):在800 ml蒸馏水中加入24.2 g 三羟甲基氨基甲烷(Trizma base ,C4H11NO3)和80 g 氯化钠(NaCl)。用浓盐酸将pH调节到7.6。 6.漂洗(缓冲)液:1 X Tris缓冲盐水(TBS)。100 ml 10 X TBS加900 ml水至1L。 7.甲醇/过氧化氢:配制时,将10 ml 30% H202加入到90 ml甲醇中。保存在-20°C。 8.封闭液:1X TBS / 0.3% Triton-X 100 / 5%正常山羊血清。 9.配制时,将500 μl山羊血清和30 μl Triton-X 100加入到9.5 ml 1X TBS中。 10.检测系统:根据厂家说明书使用。已有的检测系统*。 11.DAB试剂或合适的底物:按产品说明配制。 B. 切片 1.对于保存在-80°C的样品:切片前先从冰箱中取出放在-20°C平衡15分钟左右。这可以避免切 片时样品断裂。 2.将样品切成大约6-8 μm厚,铺在带正电性的玻片上。 3.固定前,可以把切片摊开放在实验台上风干几分钟。(这有助于切片贴紧玻片) C. 固定 注意:参考产品说明书(抗体)选择合适的固定剂 1.玻片上的切片风干后,选用如下合适的固定剂进行固定。 a.10%中性福尔马林:室温10分钟。立即进行染色操作。 b.冰丙酮:-20°C 10分钟。风干。立即进行染色操作。 c.甲醇:-20°C 10分钟。立即进行染色操作。 d.3%甲醛溶液:室温15分钟。立即进行染色操作。

厨房工作总结范文

厨房工作总结范文 新的一年又将来临,回顾过去一年,感慨良多。作为厨房的管理者我始终严格要求自己,以身作则,认真服从领导安排,以招待所 利益为重,xxxx年招待所厨房在领导的关心帮助、各位同志的理解 支持下,较好地完成了各项服务保障工作。为了总结经验,克服不足,更好的促进以后的工作,现将这一年来的工作情况汇报如下: 一、基本工作情况 1、人员管理 2、菜品更新及创新 经常利用空闲时间到市场上进行调研,及时了解市场新的原料、菜品,每月为淮河厅更新一次菜谱,并增加了有机蔬菜、新鲜水果、鱼类等,现在天气逐渐变冷,每天中午还推出了一道例汤,这些也 都得到了领导的认可。 聘请粤菜师傅到招待所内进行菜品技术经验交流,在此期间,也推出了一系列粤菜系菜品,主要以家常、清淡为主,在摆盘、盘头 装饰上也进行了突破创新,并为宴会厅购臵了一批新的餐具及器皿,增添菜品新鲜感、创新度。 3、安全管理 (2)设备及人员安全方面。每天对厨房灶具旁的墙壁、抽油烟罩 等容易污染处进行清洗,对于油烟管道至少每半年清洗一次。定期 对厨房内的燃气燃油管道、法兰接头、阀门作检查,防止泄漏。每 天安排值班人,在下班后关闭所有的燃气燃油阀门,切断气源、火源、电源后才能离开。 根据菜品安排厨师班组,各班组厨师对各自烹调品种负责,严格按照产品规格进行加工,使产品统一标准,保证菜品质量。对每道 菜的出成率进行计算,对菜量进行控制,配菜时按照人数进行配备。尤其是宴会餐,严格核算每人标准,避免菜量过多造成浪费。

根据菜品本身需求制订原料采购标准,采购以日为单位,根据经营状况规律进行计划性下单,避免积压。对原料粗加工、切配工作 流程及标准进行规范,严格按照标准测算出原料的粗加工、切配的 出成率。每天对垃圾桶进行检查,查看原材料的浪费情况,对于恶 意浪费者进行重罚。 二、工作中存在的不足 1、创新意识不强,走出去的少,不能及时对菜品进行更新进调换,对淮河厅菜品的研制不够细致,不深入,没能充分结合领导身 体情况及季节的变化进行调配。 2、现在的工作重心主要还是放在招待所厨房,对于食堂厨房的 菜品关心的少。 三、明年工作展望 2、将工作重心放到淮河厅,针对局领导身体情况,根据季节的 变换,对煲汤类菜品进行研制,把菜品做细、做精。 3、加强与食堂的沟通交流,对每周的菜谱进行研讨,对菜品进 行合理调剂。 4、加紧菜品创新工作,厨师长及有关人员每周至少一次对市场 进行考察、及时发现挖掘新、奇、特原料和货源,不断更新菜品。 集众家之长,经常到其他酒店学习、交流、取经,对每道菜品都要 进行认真分析,确保每道菜品都能适合顾客口味,被顾客称赞。 6、成本控制和节能 8、建立开放、和谐的沟通渠道,让大家积极参与,踊跃发表对 于工作上的,生活上的意见,对员工提出的意见适时地给予认可、 赞扬。员工在思想和生活上有困难时,设法为他们排忧解难。 总结一年来的工作,我觉得有所失也有所得,虽然也取得了一些成绩,但距离领导的要求和期望还是有一定距离。在今后的工作中,我将同厨师班子一起,发扬成绩,克服不足,继续努力,加强学习,尽职尽责的完成好各项工作任务,有不足之处还恳请各位多进行批

冰冻切片步骤 很全面

冰冻切片是指将组织在冷冻状态下直接用切片机切片。它实际上是以水为包埋剂,将组织进行冰冻至坚硬后切片的。在冰冻切片前组织不经过任何化学药品处理或加热过程,大大缩短了制片时间。同时,由于此法不需要经过脱水、透明和浸蜡等步骤,因而较适合于脂肪、神经组织和一些组织化学的制片,并作为快速切片的方法应用在临床诊断。 1.取材: 应尽可能快地采取新鲜的材料,防止组织发生死后变化。 2.速冻: 为了较好地保存细胞内的酶活性或尽快制成切片标本的需要,一般在取材后就要立刻对组织块进行速冻,使组织温度骤降,缩短降温的时间,减少冰晶的形成。 液氮速冻切片法是实验室最常用的速冻切片方法。具体做法是将组织块平放于软塑瓶盖或特制小盒内(直径约2cm),如组织块小可适量加OCT包埋剂浸没组织,然后将特制小盒缓缓平放入盛有液氮的小杯内,当盒底部接触液氮时即开始气化沸腾,此时小盒保持原位切勿浸入液氮中,大约10-20s组织即迅速冰结成块。在制成冻块后,即可置入恒冷箱切片机冰冻切片。若需要保存,应快速以铝箔或塑料薄膜封包,立即置入-80℃冰箱贮存备用。 3.固定: 样品托上涂一层OCT包埋胶,将速冻组织置于其上,4℃冰箱预冷5-10min 让OCT胶浸透组织。取下组织置于锡箔或者玻片上,样品托速冻。 组织置于样品托上,其上再添一层OCT胶,以完全覆盖为宜,速冻架(PE)上30min。 4.切片: 恒温冰冻切片机为较理想的冰冻切片机,其基本结构是将切片机置于低温密闭室内,故切片时不受外界温度和环境影响,可连续切薄片至5-10μm。切片时,低温室内温度以-15℃~-20℃为宜,温度过低组织易破碎,抗卷板的位置及

2020厨房后勤人员年终工作总结范文

2020厨房后勤人员年终工作总结范文 20xx厨房后勤人员年终工作总结范文 时间过得真快,茫茫碌碌中一个学年已经过去了,做为后勤工作中的重中之重,食堂自然是不可或缺的。作为食堂自然是离不开饮食,食是每个人生活中不可缺少的一部分,假如我们离开了吃的东西是不可能生存下去的,所以作为单位的食堂这也是很重要的。作为管理员更应多为职工的饮食着想,为保证每位同事的身心健康而考虑,现对这段时间的食堂工作作以如下总结: 第一、作为一个集体食堂,要严格落实全台食品卫生安全是关系到每一位师生身体健康的大事。首先,每位食堂工作人员每年都要进行上岗前的体检,对体检不合格者不於上岗。其次,不定期对工作人员进行思想教育、贯彻落实食品卫生法的要求等。通过学习,提高工作人员在工作中的服务质量和意识。切实做好我校食堂的食品卫生、餐具的“一洗、二冲、三消毒”工作,工做台做到随用随清,每周对厨房一次大清扫。如发现工作中有不到位之处立即指出,勒令改正及时到位。全体工作人员能够认真做好本职工作,明确职责、各司其职、服从分配、随叫随到,保证了职工的工作正常运转。

第二、先对库存商品进行盘点交接,每天我都亲自下厨房和他(她)们一起工作、沟通,对食堂工作方面的所需与不足详细了解,并对目前现状不足之处及时改进。如卫生情况:由于前段时期连续性接待了几次大型会仪,使大家身心疲惫,没能够及时、彻底地将卫生打扫干净,物品的摆放也不整齐,使领导对食堂产生了脏、乱、差的不好印象。为了及时调整好工作人员的心态改变当前状况,我亲自到厨房带头和他们一起将天花板、墙壁、灶台、蒸箱、地面、以及库房等,统统进行了一次大清扫。这次清理行之有效,厨房有了明显改观,良好的工作环境改变了领导的印象,保持下去是关键。 金秋十月是收获得季节,也是秋菜上市的时节。为了使食堂的成本降低,购买了大量的冬储菜,如:萝卜、大白菜、土豆、大葱等,并腌制了大白菜和各种咸菜。使职工在冬季也能吃到品种多样的食物。 第三、把住食品进货也非常重要。100多人用餐需要经常外出采购各种食品,如:肉、菜、蛋、主、副食等。由我亲自去采购的严把没有“检疫证”、“食品卫生许可证”的食品一律不采购,存放时间长的、变质变味的统统拒之门外,严防食物重毒事件的发生,切实保证每位职工的身体健康。在此期间在我食堂用餐的人员及职工无发生任何肠道疾病和食物中毒事故。

冰冻切片免疫荧光染色流程

冰冻切片免疫荧光染色流程(表面分子,以CD4为例) (1)冰冻切片室温晾干15分钟; (2)用组化油笔将待染组织圈好,置PBS中浸泡10分钟,以去除OCT;(3)用含10%正常山羊血清的PBS室温封闭切片1 小时(此步可以不洗涤,把封闭液吸干即可); (4)加入CD4单抗(1:100; SeroTec, Inc, Raleigh, NC, USA),4℃孵育过夜;(5) PBS洗3次,每次10分钟; (6)加入罗丹明标记的羊抗小鼠的IgG二抗(1:50; Sigma 公司),37℃孵育1小时; (7) PBS洗3次,每次15分钟; (8)封片后,荧光显微镜观察结果并拍照; (9)在每切片中随机选择5个视野计数阳性细胞数。 注意事项:(1)整个实验过程中勿使表面干燥 (2)稀释、加二抗(荧光抗体)及此后的洗涤过程中注意避光 附注1:如目的分子为胞内分子,各种液体中需要加透膜剂0.3%TrixtonX100。附注2:所用液体(表面分子染色不用0.3%TrixtonX100): (1)pH7.4 0.01MPBS: 配方为:0.1MPBS 100ml+ddH2O 900ml+NaCl 7.65g 0.1MPBS 配方为:Na2HPO4 23g+NaH2PO4﹒2H2O 5.9g+NaCl 17g 定容至2000ml, 高压, pH7.2-7.4 (2)洗涤液:0.3%TrixtonX100-pH7.4 0.01MPBS,分装15ml/支-20℃保存 (3)封闭液:10%NGS-0.3% TrixtonX100-pH7.4 0.01MPBS,分装1.2ml/支-20℃保存 (4)抗体稀释液:1%BSA-0.3% TrixtonX100-pH7.4 0.01MPBS,分装1ml/支-20℃保存

厨房员工工作总结范文,个人总结

厨房员工工作总结范文,个人总结 厨房员工工作总结 大家齐心协力,积极奋斗,在完成计划的同时还创造了一个个的惊喜,但也有不足需要我们去总结和弥补。 一、XX年工作总结: 1.加强厨房内部培训。根据前一年的工作总结,厨房员工工作能力差和工作意识不强现象,严抓新员工的工作服务意识,强化岗位技能,提升员工的综合能力。 2.加强前后台沟通和协调,提升对客服务。定期拓开厨房、前台协调会议,增强香榭里人员的团队意识和服务意识,发现并解决工作中的存在的不足,前后台相互协助,共同努力,提升了餐厅的品牌。 3.合理安排人员,劳动力综合运用。在竞争日益激烈的当今,人员紧张,根据厨房现有人员对其进行合理安排,综合运用,及时调整员工的工作内容,提升员工的工作效率。 4.进一步规范和明确厨房奖励考核制度。为提升厨房员工工作效率,增强团队战斗力和凝聚力,提高员工总体水平和素质,培养员工积极进取的工作态度,对员工的奖励及考核方案作了进一步的明细规定。

5.一如既往做好厨房“五常法”和卫生工作,厨房的卫生和“五常法”工作一直是厨房工作的重点之一,厨房员工持之以恒进行落实。在饭店复评自查中,受饭店领导好评,还被评为西餐部“五常法”示范厨房。 6.体现餐厅品牌,突出个性化服务。在平日服务中,前后台共同配合,不缺乏个性服务,对特殊客人特殊对待,这其中有为孕妇制定制作为期两个多月的营养餐,有为喜好美食的常客长期制作个性菜肴等等。 7.坚持做好各厨房的协调配合工作。严把出品质量关,保证从本厨房出去的任何成品或半成品符合标准,提升部门的服务与品质。 8.圆满完成月饼销售任务。一年一度的月饼销售工作厨房人员齐心协力,把工作重点放在销售上,虽厨房人员的销售能力薄弱,但经过两个多月的努力,圆满完成任务。 9.各节日美食活动丰富多彩。从中西混合套餐到经典自助吧台,从母亲节温馨套餐到圣诞大餐,给客人带来的不光是美食,更多的是惊喜和满足。 10.创造具有南苑特色的优秀西餐菜肴。厨房内部创新开拓,研制了许多深受客人喜爱的西餐零点菜肴;在参加全省烹饪技能大赛中屡获金奖、特金奖,为饭店争夺荣誉。

免疫组化步骤

免疫组化实验步骤 细胞和组织的固定 (一)固定 为了更好的保持细胞和组织原有的形态结构,防止组织自溶,有必要对细胞和组织进行固定。固定的作用不仅是使细胞内蛋白质凝固,终止或抑制外源性和内源性酶活性,更重要的是最大限度的保存细胞和组织的抗原性,使水溶性抗原转变为非水溶性抗原,防止抗原弥散。不同抗原,其稳定性也不相同,因而对固定剂的耐受性差异较大 (二)固定剂 用于免疫组织化学的固定剂种类较多,性能各异,在固定半稳定性抗原时,尤其重视固定剂的选择,介绍如下。 1.醛类固定剂双功能交联剂,其作用是使组织之间相互交联,保存抗原于原位,其特点是对组织穿透性强,收缩性小。有人认为它对IgM、IgA、J链、K 链和λ链的标记效果良好,背景清晰,是常用的固定剂。 1)4%多聚甲醛为我们常用固定剂 2)Bouin’s液 该固定液为组织学、病理学常用固定剂之一,对组织穿透力较强而收缩性较小,比单独醛类固定更适合免疫组化染色。Kayhko认为用于标记B细胞的J链较好,但Bullock则认为它可导致Igg γ重链变性,故必需加大第一抗体的浓度。 2.丙酮及醇类固定剂 系最初免疫细胞化学染色的固定剂,其作用是沉淀蛋白质和糖,对组织穿透性很强,保存抗原的免疫活性较好。但醇类对低分子蛋白质、多肽及胞浆内蛋白质保存效果较差,解决的办法是和其它试剂混合使用,如加冰醋酸、乙醚、氯仿、甲醛等。 丙酮的组织穿透性和脱水性更强,常用于冰冻切片及细胞涂片的后固定,保存抗原性较好,平时4。C低温保存备用,临用时,只需将涂片或冰冻切片插入冷丙酮内5-10min,取出后自然干燥,贮存于低温冰箱备用。 以上介绍了免疫组织化学中常用的固定液,用于免疫组化的固定剂种类很多,不同的抗原和标本需经过反复试验,选用最佳固定液,迄今尚无一种标准固定液可以用于各种不同的抗原固定。而且同一固定液固定的组织,免疫组化染色标记

冰冻切片实验步骤

全部实验步骤 1 取新鲜组织于4%多聚甲醛固定24小时 2 30%蔗糖脱水48小时以上 3 -250C包埋(冰冻切片机内) 4冰冻切片 冰冻切片步骤 冰冻切片免疫组化染色步骤: 冰冻切片4~8μm,室温放置30分钟后,入4℃丙酮固定10分钟,PBS洗,5分钟×3次。用3%过氧化氢孵育5~10分钟,以消除内源性过氧化物酶的活性。PBS冲洗,5分钟×2次。下接石蜡切片免疫组化染色操作步骤。(见我发的前面的帖子) 你确定你是冰冻切片吗??? 冰冻切片不能用热修复啊!!! 以下是我的步骤: 1 冰冻切片室温放置30分钟后,入4℃丙酮固定10分钟,PBS洗,5分钟×3。用3%过氧化氢孵育5~10分钟,PBS洗,5分钟×2。 2 5~10%正常山羊血清(PBS稀释)封闭,室温孵育10分钟。倾去血清,勿洗,滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液,37℃孵育1~2小时或4℃过夜。 3 PBS冲洗,5分钟×3次。 4 滴加滴加第二代生物素标记二抗工作液,37℃或室温孵育30分钟。 PBS冲洗,5分钟×3次。 5 滴加辣根酶标记链霉卵白素工作液,37℃或室温孵育10~30分钟。 6 PBS冲洗,5分钟×3次。 7 显色剂显色(DAB)。 8 自来水充分冲洗,复染,封片。 冰冻切片免疫组化染色用的灭活内源性过氧化物酶,最好是用3%H2O2/甲醇溶液,室温20分钟。此配方不易产生脱片。 配制方法是在9ml甲醇中加30%H2O2 1ml,混匀后使用,每次新鲜配制。 冰冻切片免疫组化染色步骤 冰冻切片4~8mm,室温放置30分钟后,入4℃丙酮固定10分钟,PBS洗,5分钟×3。用3%过氧化氢孵育5~10分钟,消除内源性过氧化物酶的活性。PBS洗,5分钟×2。 下接免疫组化染色操作步骤。

20XX年厨房设计师个人总结范文

20XX年厨房设计师个人总结范文 《20XX年厨房设计师个人总结范文》的范文,觉得有用就请下载哦更多20XX年个人工作总结,个人工作总结范文,个人总结范文,年度个人工作总结,年终个人工作总结,年度考核个人总结,年终考核个人总结等范文,请关注个人工作总结栏目! xx年度,厨房整体工作运行较为正常,但在细节上还有待加强和提高。 一,十*大以来,餐饮业受反腐倡廉活动的继续深入,行业影响相当严峻,受到较大冲击,但我们厨房没有停下前进的脚步,继续推陈出新,几乎每月都按时出新菜,并得到客人的认可。 二,进一步完善了各项制度,并落实到实际工作中。比如每日员工健康检查表,留样样品制度等,让每一项都落实到人。 三,经常带领全体厨房员工共同学习,了解每个人的思想和心理状态,为更好地开展工作打好基础,理解和关心每一个同事的难处,有困难大家一起解决。 四,本年度厨房员工相对稳定,心得体会更加团结,出现问题就事论事,更包容更大度,及时把问题处理好。 五,针对现在餐饮大环境和餐饮发展的趋势,结合广大消费者的习惯,我们推出了系列的砂锅营养套餐,并开出了针对家宴的消费菜品和价格,使这两条腿同时走路,让消费者享受到星级

出品和星级服务的家庭宴请,更实惠,更经济,借此让营业额有所回升。 六,在收原材料环节,牢牢坚持住我们的标准和质量,哪怕是和供货商吵,闹,哪怕是到处堵**眼,堵漏洞,也一样要为公司,为这个大家庭,节约每一分钱,创最大利益,让利于消费者。 七,在人员安排上,由于生意的不稳定等原因,厨房人员相对少了几人,在工作上更加灵活的安排,不再是一成不变的固定在某个位置,大家更加团结灵活的工作。自己在过去的一年中,从没把自己固定在某个位置,小吃,打荷,蒸菜,凉菜,炉子上炒菜,甚至于到水台,什么都做,哪里忙就做哪里,当然,也让自己学到相当多的知识和技能,并用自己实干的行动带领大家一起前进。 不足之处,任然有很多,人无完人,但得有正能量。认清差距,才能明确努力方向,克服困难,才能完善自己。

厨房个人工作总结5篇

厨房个人工作总结5篇 通过总结,人们可以把零散的、肤浅的感性认识上升为系统、深刻的理性认识,从而得出科学的结论,以便改正缺点,吸取经验教训,使今后的工作少走弯路,多出成果。下面是小编整理的一些关于厨房个人总结的文章,希望对你有所帮助。 厨房工作总结1 ——年已经过去一半,回首半年的厨房工作,感慨颇深。半年中的忙碌种种,厨房员工付出了艰辛的努力,大家齐心协力,积极奋斗,在完成工作任务的同时还创造了一个个的惊喜,也有诸多不足需要我们去总结和弥补。现将半年的工作做下简单总结。 一、——年工作总结: 1.加强厨房内部培训。根据去年的工作总结,厨房员工工作能力不高和工作意识不强现象,严抓新员工的工作服务意识,强化岗位技能,提升员工的综合能力。 2.加强前后台沟通和协调,提升对客服务。定期召开厨房、前台协调会议,增强员工的团队意识和服务意识,发现并解决工作中的存在的不足,前后台相互协助,共同努力,提升了水天酒店餐饮的品牌。

3.合理安排人员,劳动力综合运用。在竞争日益激烈的今天,厨房人员相对紧张,我们根据厨房现有人员对其进行合理安排,综合运用,及时调整员工的工作内容,提升员工的工作效率。 4.进一步规范和明确厨房奖励考核制度。提升厨房员工工作效率,增强团队战斗力和凝聚力,提高员工总体水平和素质,培养员工积极进取的工作态度,对员工的奖励及考核方案作了进一步的明细规定。 5.一如既往做好厨房食品安全和卫生工作,厨房的卫生和食品安全工作一直是厨房工作的重点之一,厨房员工持之以恒进行落实。 6.体现餐厅品牌,突出个性化服务。在平日服务中,前后台共同配合,不缺乏个性服务,对特殊客人特殊对待,这其中有为食宿者、回民游客、韩国游客等客人制作不同需求的套餐,有为喜好美食的游客制作个性菜肴等等。 7.坚持做好各厨房的协调配合工作。严把出品质量关,保证从本厨房出去的任何成品或半成品符合标准,提升部门的服务与品质。 8.各节日美食活动丰富多彩。从不同时令、季节和客人需求实际出发台,推陈出新,以顾客满意为宗旨研发菜肴,给客人带来的不光是美食,更多的是惊喜和满足。 9.厨房内部创新开拓,加强员工在菜肴烹制方面的培训和教育,

远程术中冰冻切片检查与诊断简介1

远程术中冰冻切片检查与诊断 一.简介及意义 冰冻切片检查与诊断(简称“术中冰冻”)是将手术中切除的病理组织在冰冻切片机中快速制片,经过特殊染色后供病理医师进行病理诊断的一种诊断方法;是临床医师在实施手术过程中,就与手术方案有关的疾病诊断问题请求病理医师快速进行的会诊方式,如果诊断为恶性肿瘤,就可以直接根据结果选择手术方式及范围,从而有效地避免了二次手术及损伤。 二.方法及原理 将手术中切除的病理组织无需固定、直接送检,在冰冻切片机中快速制片,经过特殊染色后供病理医师进行病理诊断,冰冻切片取材后剩余、未曾冷冻的组织(冻剩)均会制备石蜡切片并进行常规病理诊断。 三.应用范围 适用范围 1.需要确定病变性质(如肿瘤或非肿瘤、良性肿瘤或恶性肿瘤等),以决定手术方案时。 2.了解恶性肿瘤的扩散情况,包括肿瘤是否浸润相邻组织、有无区域淋巴结转移等。 3.确定肿瘤部位的手术边缘有无肿瘤组织残留。 4.确认切除的组织,例如甲状旁腺、输卵管、输精管及异位组织等。 不适用范围 1.疑为恶性淋巴瘤者。 2.过小的标本(标本长径≤0.2cm者)和含水分较多的脑组织。 3.术前易于进行常规活检者(例如:肠镜、胃镜、支气管镜、穿刺组织标本等)。 4.脂肪组织、骨组织和钙化组织。 5.需要依据核分裂计数判断良、恶性的软组织肿瘤。 6.主要根据肿瘤生物学行为特征(如浸润、转移)而不能依据组织形态判断良、恶性的肿瘤。 7.已知具有传染性的标本(例如结核病、病毒性肝炎、艾滋病等)。 8.钳夹、烧灼后的标本不能进行冰冻切片。

四、送检流程 1、预约: 1)项目开展时间为全周,工作时间是上午8:30-下午17:00。遇法定假期以具体通知为主。具体安排为:周一、三、五在本院病理科完成,周二、四、六、日送到金域检验中心病理科完成。推荐冰冻尽量安排在周一、三、五来完成。 2)预约方式:需要进行术中冰冻的临床科室需至少提前一天17:00前预约第二天手术。致电给病理科,登记患者姓名和手术时间等信息。 ① ②、电话预约客服中心(4001-111-120)工作时间为周一至周六8:00-21:00、周日8:00-17:30。 2、手术: 送检保存:手术标本送检冰冻时,无需加固定液,不要沾水,过小标本可用拧后的生理盐水湿棉布包裹防止坏死。 3、配送:由专门医护人员直接将手术标本从手术室送至本院病理科,并做好相关登记。 4、标本处理:标本处理依次经过标本接收、取材、冰冻切片、染色及封片等步骤制作成玻片,处理时间在20分钟内。 5、诊断: ①、病理医生上班时:直接阅片作病理诊断,做出诊断报告不超过10分钟。 ②、病理医生休息时:通过数字化远程病理系统将制片扫描上传,由金域检验中心病理室的病理医生(提前预约好)阅片作病理诊断。金域病理中心在收到远程图片后做出诊断报告不超过10分钟。 6、报告:病理医生做出诊断后,即时发送电话报告或传真报告,随后会再发出一份常规石蜡报告,确保结果准确性。

食堂安全工作总结

食堂安全工作总结 食堂工作是学校后勤服务工作的重要组成部分,直接为全校师生的饮食卫生安全负责。今天小编给大家为您整理了食堂安全工作总结,希望对大家有所帮助。 食堂安全工作总结范文一:忙碌的一个学期过去了,做为后勤工作中的重中之重,食堂自然是不可或缺的。作为食堂自然是离不开饮食,食是每个人生活中不可缺少的一部分,作为食堂管理人员更应多为职工及学生的饮食着想,为保证每位师生的身心健康而考虑,现对这段时间的食堂工作作以下总结: 一、持证上岗、消除安全隐患 作为一个集体食堂,严格落实食品卫生安全是关系到每一位师生身体健康的大事。首先,每位食堂工作人员每年都要进行上岗前的体检,对体检不合格者不予上岗。其次,不定期对工作人员进行思想教育、贯彻落实食品卫生法的要求等。通过学习,提高工作人员在工作中的服务质量和意识。切实做好我校食堂的食品卫生、餐具的“一洗、二冲、三消毒”工作,工作台做到随用随清,每周对厨房一次大清扫。如发现工作中有不到位之处立即指出,勒令改正及时到位。全体工作人员能够认真做好本职工作,明确职责、各司其职、服从分配、随叫随到,保证了食堂工作的正常运转。 二、强化软件管理 学期开学,食堂管理人员和工作人员一起学习《中华人民共和国食品卫生法》,提高每位工作人员的思想上认识。本学期,先后制定了十项规章制度并上墙,特别完善了食物中毒上报流程图(上墙)和食物中毒防治预案,从制度上保障学校食堂的安全和规范。定时定期对食堂工作人员进行法律法规、工作规范的培训,做到以法律法规为准绳,办好学校的集体食堂。在此基础上又专设食品卫生监督员,仓库保管员及专职采购员,并严格控制各种主料,从而从根本上杜绝了食品安全隐患。 学校非常重视食堂内部管理,在科学化、规范化、制度化和严格管理上下功夫。力求把基础管理工作做扎实,做全面,做到时时有规范,事事有规范。食品卫生工作中紧紧围绕以“三防”为重点(防中毒、防投毒、防病毒),采购工作中严把“五关”

免疫组化操作方法原理步骤以及常见问题处理大总结

免疫组化操作方法、原理、步骤以及常见问题处理大总结 1、方法操作不难,最大的难处是出现异常结果时如何解决?这就需要掌握免疫组化实验原理,每一步知道为什么这样做,这样你才敢大胆地改革先前的不对的方法步骤。如抗体孵育条件主要是抗体浓度、温度、时间,这三者一般是相互成反比的(相对),其中浓度是最重要的先决条件,温度决定反应的速度、时间决定反应的量。就拿温度来说,可以有4度、室温、37度,我推荐4度最佳,反应最温和,背景较浅;而37度反应速度较快,时间较短;室温我不太提倡,除非你每次都把环境温度控制在一定的范围,否则,尽量选择前两者。 2、免疫组化最大的优势是定位和定性。相比于其他蛋白检测方法,免疫组化具有定性灵敏度高、定位较直接准确,是定位检测分析首选方法。尤其对于有些因子的转位研究十分有用。 3、免疫组化结果定量分析的前提是高质量的染色切片。免疫组化结果也能定量分析,但必须是背景染色浅而特异性染色较深的情况下,分析最为准确,这种原则可能也是我们日常审稿时判定研究结果的必备条件。 4、免疫组化实验一定要设置阳性对照和阴性对照。阳性对照一般是用肯定表达这种抗原的切片来做;阴性对照一般是用PBS或非一抗替代一抗来进行反应,其余步骤均一致。前者是排除方法和实验系统有无问题;后者是排除有无一抗外的非特异性染色。 5、免疫组化的应用广泛,是当前实验研究的最重要方法之一。如今发SCI论文时,明显感觉仅靠量化的数据来发文章很难,加一些形态学数据或图片,老外十分欢迎,可能是怕你学术造假吧。当然也不能做假阳性或假阴性结果。 6、免疫组化技术掌握与否的鉴定标准是同一切片或不同切片中不同抗原均从摸索浓度或条件而做出优良的染色切片。我在平时带教中就发现许多研究生把我已经摸索很成熟的反应条件、浓度、方法步骤,重复运用于同一性质的切片和同一种抗体,做出来后就觉得自己已经掌握了免疫组化方法,更换一种抗体后,居然连二抗的种属来源都拿错了。失败往往促进你去思考试验原理和过程,成功有时也加快你自傲。 7、实验方法需要动手+动脑。如今我还不敢说我在免疫组化什么都知道。我只所以今天敢在这里说这说那,这是因为我经过了反复的动手+动脑,把理论原理运用于实践,在把实践中发现的问题带到理论知识中去解决,最终把理论与实践融会贯通。 一、概念和常用方法介绍 1、定义用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学(immunohistochemistry)技术或免疫细胞化学(immunocytochemistry)技术。 2、原理根据抗原抗体反应和化学显色原理,组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合,再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应,前者再用标记辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AKP)等的抗生物素(如链霉亲和素等)结合,最后通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分,在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物,从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。 3、分类 1)按标记物质的种类,如荧光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)、铁蛋白、胶体金等,可分为免疫荧光法、放射免疫法、免疫酶标法和免疫金银法等。2)按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二步、三步或多步法)。与直接法相比,间接法的灵敏度提高了许多。3)按结合方式可分为抗原-抗体结合,如过氧化物酶-抗过氧化物酶(PAP)法;亲和连接,如卵白素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC)法、链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(SP)法等,其中SP法是比较

厨房员工工作总结范文3篇

厨房员工工作总结范文3篇 厨房员工工作总结范文1 新的一年又将到来,回顾过去的一年,从一个熟悉的城市到另一个陌生的城市,感康很多做为厨房的一员认真服从领导安排,以公司的利益为重。为了总结经年,客服不足,更好的促进以后的工作,现将这一年来的工作总结如下; 一、认真总结、吸取教训、把好质量,做为一个熟手责任非常重大,工作中起着承上启下的作用。工作容不下一点马虎大意,工作中努力要求自己,不求最好,只求更好,从我手中过的每一道菜肴都要做到餐具净、热、口味正、色泽好,如此繁重而重复的事情,从不感到厌倦。 二、厉行节约、相互监督、控制成本省下的就是挣下的,能回收的就回收,能利用的再利用、大料大用、小料小用,,回收了许多可以重新利用的物品、减少了许多不必要的浪费。为公司节约了一定的成本。 三、爱岗敬业、提高自已一道成功的菜品离不开全员的共同配合,什么样的菜肴适合什么样的餐具、这都做出了规定。,但是要想学的准、学的精就要努力提高自己的水平,增强自身素质,争取自己不会被淘汰,不断学习,不断进步。,因为要成为一个部门的骨干只掌握一门工夫还远远不够。还要和同事之间搞好关系,做到

相互帮助相互学习。总而方之,不害怕不会干,但怕不去干,不害怕干不好,就怕去捣乱,有付出就有回报 总结一年来的工作,我觉得有所得也有所失。虽然去得一定成绩,但离自己的目标和领导的期望还是有一定的距离。无需太多的承诺,说的好不如做的好,在新的一年里,我一定坚定信心,,努力、努力再努力。 厨房员工工作总结范文2 一、基本情况: xx职工食堂、招待所两个单位共有干部员工xx人,担负着较为繁重的内外接待、员工就餐等项工作任务。在沙运司党委、沙运司以及生活公司的领导下,在各兄弟单位领导和职工同志们的大力支持下,我们紧密围绕沙运司的整体工作大局,精心搞好了各项生活服务工作。截至目前,职工食堂、招待所收入xxx元,固定成本xxx元,变动成本xxx元,利润为xxx元。 二、今年以来的主要工作情况: xx职工食堂、招待所是沙运司后勤生活服务工作的重要组成部分。尤其是处在xx,担负着较为繁忙的各级领导、来宾的接待任务和面对沙运司内部单身干部员工的住宿、生活等项工作。作为沙运司的一个“窗口”单位,这两个单位工作质量的好坏,直接关系到沙运司的对外形象和广大员工的切身利益。因此,我们坚持做好以下几个方面的工作:

相关文档
最新文档