重寄生菌哈茨木霉的研究及其在植病生防中的应用
哈茨木霉微生物菌剂在水稻上的应用研究
作用 ，是绝对产量形 成的最重要阶段［ １ ｏ ｉ 。 本试验 结果 表明 ，增施 氮肥虽然 能提高 小麦产量 ，但 氮肥施 用过 量反而 会降低小 麦的 有效穗数 、产量 。在 不同 氮肥运 筹组 别 中，增 加穗肥 施用量 ，小 麦每穗实 粒数 、千
［ ２ 】 张春明 ， 邱韩英 ， 张炬 ， 等． 不同供 氮水平对机条播小麦氮素利
试验于２ ０ １ ５ 年设在上海市 崇明区城桥镇长兴村进行 ， 试 验 田前茬为蚕豆绿肥 ，土壤为砂壤 土，肥力均匀 ，ｐ Ｈ８ ． ０ ４ 、 有机质含量 为２ ５ ． ８ ｇ ／ ｋ ｇ 、 水解 氮含量为 ８ １ ． １ ２ ｍｇ ／ ｋ ｇ 、 有
纯氮总用 量为 ２ ２ ｋ ｇ 。哈茨 木霉 菌颗 粒剂在基肥 、穗肥时各
验结果报道如 下。 １ 材 料 与方 法
１ ． １ 试 验 概 况
Байду номын сангаас
效磷 含量 为 ｌ ７ ． ７ ｍｇ ／ ｋ ｇ 、速效钾含量为 ６ １ ｍｇ ／ ｋ ｇ 。供 试
水稻品种 为 “ 花优 ｌ ４ ” ，采用人工移栽方 式 ， 每６ ６ ７ ｉ ｎ 栽插 密度为 １ ． ８ 万穴 ，每穴 ３ 株 ，５ 月２ ８日移 栽 ，移栽 时水稻平
粒重 和产量相 应增 加 ，但有效穗 数则 呈先增 加后 降低的趋
哈茨木霉菌对大白菜的促生作用及对根肿病的防治效果
哈茨木霉菌对大白菜的促生作用及对根肿病的防治效果作者：马赛宋雨萌罗兰来源：《山东农业科学》2020年第05期摘要：为明确哈茨木霉菌对大白菜的促生作用及对根肿病的防治效果，本试验采用盆栽法，分别设置不同浓度的哈茨木霉菌（0.75×106、1.50×106、3.00×106 CFU/mL）、50%氟啶胺悬浮剂（对照药剂，250 mg/L）、清水（空白对照，CK）处理，测定不同处理对白菜根肿病的防治效果及对大白菜生长的影响。
结果表明，经哈茨木霉菌处理的大白菜出苗率与CK无显著差异，根长、单株鲜重均显著高于CK，株高明显高于CK。
哈茨木霉菌浓度为1.50×106、3.00×106 CFU/mL时，对白菜根肿病的病株防效分别为70.80%、71.11%，病指防效分别为84.95%、85.26%，与对照药剂差异不显著;哈茨木霉菌浓度为0.75×106 CFU/mL时，对白菜根肿病的病株和病指防效分别为50.47%、62.49%，显著低于其它处理。
综上，哈茨木霉菌对大白菜具有防病和促生作用，建议使用浓度为1.5×106 CFU/mL以上。
关键词：哈茨木霉菌;白菜根腫病;防治效果;促生作用中图分类号：S482.2+92 文献标识号：A 文章编号：1001-4942（2020）05-0110-03Abstract Growth-promotion and control effect of Trichoderma harzianum WP against Chinese cabbage clubroot were studied through pot test. The treatments were designed as 0.75×106，1.50×106 and 3.00×106 CFU/mL of Trichoderma harzianum WP， 250 mg/L of fluazinam SP and water （CK）. The results showed that germination rate of Chinese cabbage under the treatments of T. harzianum WP was not different from that of CK; root length and fresh weight per plant were significantly higher， and plant height was obviously higher compared CK. The stem control effects of T. harzianum WP to Chinese cabbage clubroot were 70.80% and 71.11%， and the control effects based on disease index were 84.95% and 85.26% at the concentration of 1.50×106 and 3.00×106CFU/mL， respectively， which were not significantly different from fluazidime. The control effects of 0.75×106 CFU/mL based on plants and diseased index were 50.47% and 62.49%， which were significantly lower compared the other treatments. In conclusion， T. harzianum had better control effects against Chinese cabbage clubroot and could promote the growth of Chinese cabbage. The concentration over 1.5×106 CFU/mL was recommended.Keywords Trichoderma harzianum; Chinese cabbage clubroot; Control effect; Growth-promotion白菜根肿病是由芸薹根肿菌（Plasmodiophora brassicae）侵染引起的一种土传真菌病害[1]，在我国西南、东北和华东地区发生较为严重，给十字花科蔬菜生产造成了严重威胁[2]。
哈茨木霉T2-16菌剂对建兰防病及促生长效果的研究
项 目来 源 ：国家公益性行业 （ 农业 ） 科研专项经费 （ ２ ０ １ ５
０ ３ １ １ ０～ ０ ３ ） 。
一
４ ５ —
ＣＨＩ ＮＥ Ｓ Ｅ Ｈ ＯＲＴ Ｉ ＣＵ Ｌ ＴＵ ＲＥ Ａ Ｂ Ｓ ＴＲ Ａ ＣＴ Ｓ
盆调查每株兰花 新生苗数 ；１ ２ ０ ｄ后 同时调查兰花炭
中，在各兰花种植地普遍严 重发生 的真菌病害有 ：由
刺孢 盘属 （ Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｃ ｔ ｏ ｔ ｒ ｉ ｃ ｈ ｕ ｍ） 引起 的炭疽 病、 由小 核菌 属（ Ｓ ｃ ｌ ｅ ｒ ｏ ｔ ｉ ｕ ｍ） 引起 的白绢病 、由镰 刀菌属 （ Ｆ ｕ ｓ ａ ｒ ｉ ｕ ｍ） 引起的茎腐病等 。兰花病害一般采用化学药剂防治 ， 但可 引发以下一 系列 问题 ：农药使 用过 量 ，引起兰花 药害 ；对侵染病原菌判断不准确 ，不能对症 下药 ；错 过防治适期 ，防治效果低 ；长期单一使用 杀菌剂 ，使 病原 菌产生 抗药性 ；污染 环境等 。 目前研 究者在 应用微生物防 治兰花病害及促进 兰 花 生长 方 面也 做 了一 些有 益尝试 ，如 朱秋 潮 等利 用
为主 要培养基成分 ，接种种子 菌后在发 酵罐 中按适宜 设 置条件进行液体发酵培养 ，发酵 完成 后将发酵醪用 氢 氧化钠 溶液调 至 ｐ Ｈ 值为 ７ ． ５ ，闷罐 过夜 ，用 灭菌 纱 布真 空过滤 ，密封 包 装 ，即 成哈茨 木霉 Ｔ ２ －１ ６菌
株液态制剂 。
微生物在兰花防病促长方面的应用潜力 。
摘 要 ：应 用生防茵哈 茨木 霉 Ｔ ２ －１ ６的 固态制剂在建 兰栽种制备培 养基质 、应 用液态生物 制剂在花期
喷 雾植株 ，研 究木 霉菌对兰花 防病促 生长的效 果 结果表 明：Ｔ ２ －１ ６菌株 固液态制 剂可有 效降低 建 兰 白绢病 、茎基腐和炭 疽病的发病程度 ，其 中木 霉菌剂土壤处理 对 ５ 种病 害的 防治效果优 于对 照化 学药 剂 多茵灵 ，木霉制剂叶 面喷 雾处理对病 害的防治效果 与多菌灵相 当；２种制剂还 能促 进建兰的生 长，表
哈茨木霉对7种植物病原菌的生防机制研究
Ｆ ｕ ｓ ａ ｒ ｉ ｕ ｍ ｍ ｏ ｎ ｉ ｌ ｆ ｉ ｏ ｒ ｍｅ Ｓ ｈ ｅ ｌ ｄ ｃ ｏ ｍ ｅ ｓ ｓ ｅ ｃ ｏ ｎ ｄ ｌ ｙ ． Ｔ ｈ ｅ ｍｙ ｃ ｅ ｌ ｉ ａ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｏ ｆ Ｔ ｒ ｉ ｃ ｈ ｏ ｄ ｅ ｒ ｍ ａ ｈ ａ ｒ ｚ ｉ ａ ｎ ｕ ｍ ｈ ａ ｓ ｔ ｈ ｅ ｉ ｎ ｈ ｉ ｂ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｎ
关键 词 ： 哈茨木霉； 拮抗 ； 重寄生； 生防
中 图分类 号 ： ￥ ４ ３ ２
文 献标 志码 ： Ａ
文 章编号 ： １ ０ ０ ８ — ７ ５ １ ６ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ５ — ０ ０ ３ ２ — ０ ４
Ｓｔ ｕｄｉ ｅ ｓ ｏ ｎ ｂ ｉ ｏ ｃ ｏ ｎｔ ｒ ｏ ｌ ｍｅ ｃ ｈａ ｎｉ ｓ ｍｓ ｏ ｆ Ｔ ｒ ／ ｃ ｈｏ ｄ ｅ ｒ ｍａ ｈａ ｒ ｚ ｉ ａ ｎｕ ｎ ａ ｇ ａ ｉ ｎ ｓ ｔ
２ ０ １ ３年 ｌ ０月
Ｏｃ ｔ ．２ ０ １ ３
ｄ ｏ ｉ ： １ Ｏ ． ３ ９ ６ ９ ￣ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ８ — ７ ５ １ ６ ． ２ ０ １ ３ ． ０ ５ ． ０ ０ ８
哈茨木霉对 ７种植物病原 茵的生防机制研 究
郎剑 锋 ， 孔凡彬， 石 明 旺， 杨 洪 生
第４ １ 卷 第 ５期
哈茨木霉WF2菌株鉴定及对烟草黑胫病的防效
木霉菌（Trichoderma sp.）作为一类重要的生防真菌，广泛存在于自然界中，通常定居在腐烂的木材和其他形式的有机基质中，具有分布广、适应性强、繁殖快等特点［1，2］。
木霉属包括多个菌种，有超过400多个种类［3］。
在农业防治上，常用的有绿木霉（T.virens ）、长枝木霉（T.longibrachiatum ）、绿色木霉（T.viride ）、康宁木霉（T.koningii ）、哈茨木霉（T.har⁃zianum ）、棘孢木霉（T.asperellum ）、深绿木霉（T.atro⁃viride ）、盖姆斯木霉（T.gamsii ）等［3］。
它既可以作为生物防治剂，也可以作为生物促进剂。
木霉可以使用多种复杂的直接和间接生物防治机制［4］来防治多种植物病害，既可以对抗生物胁迫如广谱病原微生物（真菌、细菌、昆虫和线虫）等，也可以对抗非生物胁迫如恶劣的环境条件等。
对病原体的直接影响包括细胞壁降解酶（CWDEs ）的产生、抗生素的合成、对空间和营养物质（主要是碳、氮和铁）的竞争以及与真菌病原体建立直接的寄生关系［4］。
烟草是中国重要的经济作物，但烟叶生产主要依赖化学农药防治土传病害，长期使用化学农药易导致病原菌抗药性增强，同时还会造成环境污染［5］。
因此，需探索出绿色、有效的烟草土传病害防治方法。
与化学农药相比，生物农药具有高效、选择性强、低残留、不易产生抗药性等优点。
在环境保护、绿色发展等理念的支持下，生物农药已成为生物防治领域的研究热点［5］。
本研究从湖北省五峰县烟田土壤中分离获得1株木霉，通过生物学特征分析和分子生物学手段鉴定其种类，并采用对峙试验和活体盆栽试验测定其对烟草黑胫病菌和烟草根腐病菌，即烟草疫霉（Phy⁃tophthora nicotianae ）和尖孢镰刀菌（Fusarium oxyspo⁃rum ）的生防效果，为利用绿色环保的生物农药防治烟草病害提供应用基础。
1材料与方法1.1供试材料及培养基供试木霉菌株WF2分离自湖北省五峰县烟田土壤样品。
哈茨木霉菌
通用名：哈茨木霉菌
生防菌类别：真菌
形态特征:哈茨木霉的菌丝纤细无色，具分隔，多分枝。
分生孢子梗从菌丝的侧枝上生出，对生或互生，一般有2-3次分枝，着生分生孢子的小梗瓶形或锥形。
应用作物：各种蔬菜、瓜果、花卉等
防治对象：作物根腐病、立枯病、灰霉病、白粉病、炭疽病等。
作用机理
竞争作用：哈茨木霉菌在植物的根围、叶围可以迅速生长，抢占植物体表面的位点，形成一个保护罩，阻止病原真菌接触到植物根系及叶片表面，以此来保护植物根部、叶部免受上述病原菌的侵染。
重寄生作用：重寄生作用是指对病原菌的识别、接触、缠绕、穿透和寄生一系列连续步骤的复杂过程。
在木霉与病原菌互作的过程中，寄主菌丝分泌一些物质使木霉趋向寄主真菌生长，一旦寄主被木霉寄生物所识别，就会建立寄生关系。
抗生素作用：哈茨木霉菌可以分泌一部分抗生素，可以抑制病原菌的生长定植，减轻病原菌的危害
植物生长调节作用：木霉菌在植物根系定殖并且产生刺激植物生长和诱导植物防御反应的化合物，改善根系的微环境，增强植物的长势和抗病能力，提高作物的产量和收益。
产品特点
具有治疗效果，见效快。
防治叶部、根部其它真菌病害，同时可预防细菌性病害。
作用方式独特，不会产生抗性。
可与其让化学农药、肥料等混用。
使用技术要点：
哈茨木霉菌根据其有效成分菌株的不同分为：根部型和叶部型。
根部型：防治植物根部病害，最佳使用时期为苗期，施药过程中要保证药液充分接触根部。
叶部型：主要应用于蔬菜灰霉病、叶霉病、白粉病的防治。
触杀为主因此施药是要均匀喷雾。
木霉菌对宿主植物的促生抗逆作用研究进展
木霉菌对宿主植物的促生抗逆作用研究进展作者：张玉荣来源：《农业与技术》2013年第12期摘要：木霉菌（Trichoderma）是植物病害生物防治的重要生防菌株，其生防防治机理主要包括：拮抗作用、重寄生作用、代谢抑菌活性成分等，目前形成了多个商品化的菌剂品种。
木霉菌可以定殖与植物根际，形成共生体，改变植物的代谢功能，表现在促进植物生长、增加养分吸收利用效率、提高农作物产量以及诱导植物产生抗逆性等。
关键词：木霉菌；促生作用；诱导抗性中图分类号：S476.8 文献标识码：A生物防治是有效控制植物病害的手段，目前应用较多的生防菌主要包括：芽孢杆菌属（Bacillus）、农杆菌属（Agrobacterium）、荧光假单胞杆菌属（Pseudomonas）、链霉菌属（Streptomyces）、芽孢杆菌属（Bacillus），以及真菌类别包括（Gliocladium）、木霉菌属（Trichoderma）、白粉寄生孢（Ampelomyces）、假丝酵母（Candida）、盾壳霉属（Coniothyrium）等。
其中木霉菌（Trichoderma）是一类重要的植物病害生防真菌，其生防机制主要包括拮抗作用、重寄生作用、代谢抑菌活性成分等，在生物防治领域的重大应用潜力促使人们其对病原菌的作用及其生防机制进行了深入系统的研究，并形成了多个商品化菌剂。
此外，研究发现部分木霉菌株可定殖与植物根际，形成共生体，改变植物的代谢功能，表现在促进植物生长、增加养分吸收利用效率、提高农作物产量以及诱导植物产生抗逆性等[1]。
近年来，木霉与植物的互作机制逐渐成为木霉研究的热点和重点，下面简要探讨一下木霉菌与宿主植物互作对植物的促生抗逆作用。
1 木霉菌对植物的促生作用生防菌如真菌、细菌以及病毒等在防治病害的同时，可以促进植物的生长，如在温室试验中，莴苣、番茄和辣椒接种哈茨木霉T22和绿色木霉P1后，通过测定整株的干重/湿重、地上部分生物量、叶片数量和产量等指标，同不接种木霉菌的对照相比分别增加了300%，同时哈茨木霉T22和绿色木霉P1表现出了良好的兼容性，同时接种2种木霉对植物的生长起到了协同增效的作用。
哈茨木霉在水稻体内的定殖及对水稻生理生化特性的影响
注 ： Ａ 表 示 湘 矮 早 ７， Ｂ 表 示 金 优 ４０２； 表 中“＊＊”、“＊”分 别 表 示 差 异
达极显著、显著， 下同。
２．３ 内生木霉对病原菌的拮抗活性
从水稻植株体内分离出的木霉菌株对 ５ 种常见 的植物病原菌的抑制率见表 ２。由表 ２ 可看出， 内生 木霉菌株对供试的病原菌均有一定的抑制作用， 与 出发菌株相比， 虽然略低但差异并不显著。表明哈 茨木霉定殖于水稻植株体内后， 其对病原菌的拮抗 性并未丧失。
１．５ 内生木霉对水稻生理生化指标的影响
１．５．１ 对水稻生长势的影响 对不同浸种处理的秧 苗随机取样 ， 按常规方法测定秧苗株 高 、地 上 下 部 鲜重、干重； 用 ＴＴＣ 比色法测定根系活力； 用丙酮法 测定叶片中叶绿素含量； 考马斯亮蓝法测定可溶性 蛋白的含量［２］。 １．５．２ 对水稻抗病性的影响 对不同浸种处理的水 稻秧苗， 进行纹枯病菌人工接种， ８ ｄ 后调查不同处 理的发病情况； 并测定与抗病性密切相关的多酚氧 化 酶（ ＰＰＯ） 、过 氧 化 物 酶（ ＰＯＤ） 、苯 丙 氨 酸 解 氨 酶 （ ＰＡＬ） 的活性。其中用氧化儿茶酚法测定 ＰＰＯ 活 性， 用氧化苯丙氨酸法测定 ＰＡＬ 活性， 用氧化愈创 木酚法测定 ＰＯＤ 活性［３］。
ＬＩＡＮＧ Ｚｈｉ－ ｈｕａ ｉ１，３， ＷＥＩ Ｂａ ｏ－ ｙａ ｎｇ１， ＷＥＩ Ｌｉｎ２，３， ＬＵＯ Ｈｅ － ｒｏｎｇ３，ＺＨＡＮＧ Ｑｉ－ ｙｉ４
（１．Ｈｕｎａｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｃｈａｎｇｓｈａ ４１０１２８， ＰＲＣ； ２．Ｃｅｎｔｒａｌ Ｓｏｕｔｈ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｈａｎｇｓｈａ ４１０００４， ＰＲＣ； ３． Ｈｕｎａｎ Ｐｌａｎｔ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ， Ｃｈａｎｇｓｈａ ４１０１２５， ＰＲＣ； ４． Ｌｉｕｙａｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉ － ｔｅ ｃｈ
哈茨木霉 NF9 菌株对水稻的诱导抗病性
19(3)111-114 中国生物防治 Chinese Journal of Biological Control 2003年8月哈茨木霉NF9菌株对水稻的诱导抗病性Nzojiyobiri Jean2Berchmans1,徐同13,宋凤鸣1,沈瑛2(1.浙江大学农业与生物技术学院植保系,杭州 310029;2.中国水稻研究所,杭州 310006)摘要:在温室条件下用哈茨木霉NF9菌株进行种子处理,诱导水稻感病品种原丰早幼苗对稻瘟病和白叶枯病的抗病性,其抗性水平为中抗,对稻瘟病菌不同菌株(SY1、H16)以及对白叶枯病菌不同菌株(CR1、CR7)的抗性表现无显著差异。
经木霉种子处理的水稻幼苗接种稻瘟病菌或白叶枯病菌后,过氧化物酶及苯丙氨酸转氨酶活性增强,在某一时段显著高于未经木霉种子处理的对照。
诱导抗性可能是哈茨木霉NF9菌株的生防机制之一。
关 键 词:哈茨木霉;水稻;诱导抗病性;稻瘟病菌;白叶枯病菌中图分类号:S435.111.4;S476 文献标识码:A 文章编号:100529261(2003)0320111204由于水稻抗病育种尚未取得突破性进展,病害防治主要靠喷施农药。
随着人们对农业可持续发展、生存环境、食品安全以及病原菌抗药性等问题的日益关注,生物防治的重要性更加突出。
利用有益微生物控制水稻病害已有很多报道。
木霉是普遍存在的一类真菌,许多木霉菌株对植物病原菌有明显的抑制作用,其拮抗机理除了竞争、抗生、重寄生外,诱导抗性亦是其中之一。
据报道,哈茨木霉(T richoderm a harz ianum)T39处理番茄、莴苣、辣椒、烟草、菜豆等植株能诱导对灰霉病(Bot rytis ci nerea)的系统抗性,延缓和抑制病斑的形成和扩展[1]。
研究表明,木霉能直接和间接产生某些化合物,激发植物的防卫反应[2]。
本实验室以往的研究表明,哈茨木霉NF9菌株对水稻等多种植物病原真菌具有明显的抑制作用[3],在温室及网室试验中对水稻纹枯病具有较好的防治效果[4]。
哈赤木霉菌作用原理、特点、用量及使用方法！
哈赤木霉菌作用原理、特点、用量及使用方法！随着科学进步也带来了农业技术的发展，化肥、农药、杀虫剂、除草剂、生长调节剂得各种层出不穷，很多农民朋友只是简单的了解其药性和作用，但并不了解其作用机理。
前几期给大家介绍很多常用的杀虫剂、杀菌剂及叶面肥。
今天给这期给农民朋友详细介绍一款微生物农药杀菌剂“哈茨木霉菌”。
作为广谱性杀菌剂可有效防治土传性真菌病害，下面我们一起了解一下这款产品！一、什么是哈赤木霉菌通过资料我们能了解茨木霉菌是一种纯微生物、广谱性杀菌剂。
哈赤木霉菌主要通过营养竞争、重寄生、细胞壁分解酵素、以及诱导植物产生抗性等多重机制，可以对很多作物病原菌产生拮抗作用，具有保护和治疗双重功效。
哈赤木霉菌可以有效防治作物土传性真菌病害，特别是对大棚作物和果园效果显著。
如由灰霉菌、腐霉菌、丝核菌、炭疽菌、镰刀菌等引起的根腐病、立枯病、猝倒病、枯萎病、菌核病，也可有效防治番茄、辣椒、葡萄等果蔬上的灰霉病、霜霉病、猝倒病、立枯病、根腐病等土传病害效果突出。
二、哈赤木霉菌的作用机理是什么呢？1、竞争作用哈赤木霉菌可以在植物的根围、叶围迅速生长并形成保护罩，因为我们知道我们补充的都是活菌，能杀死有害病菌，它的代谢衍生物能够促进土壤中养分的转化、提升作物对养分的吸收率，刺激作物根系生长，可有效防止根部和叶片病原真菌的侵染，提高作物的产量和品质2、重寄生作用哈赤木霉菌在杀死病原菌的过程中，寄主菌丝会分泌一些物质，是哈赤木霉菌木霉向寄主真菌方向生长，当他们相互作用时，一旦寄主对哈赤木霉菌中的木霉产生生物识别，就会建立寄生关系。
3、抗生素作用哈赤木霉菌在杀死病原菌的过程中可分泌一部分抗生素来分解病原真菌的细胞壁，可以有效抑制病原菌的生长定植，从而减轻病原菌的危害。
4、植物生长调节作用哈赤木霉菌可以在植物根系定植时产生刺激植物生长和诱导植物防御反应化合物，能够改善作物根系的微生物环境，从而能够增强作物的长势和提高抗病能力、产量和收益。
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并在纤维素酶基因启动子 染色体内 切 几 丁 质 酶"
+ D 8 # : ( * + 8 " / $ ( = -( $ $ 1 $ * $ 作用下在里氏木霉 ! 中得到
且灭活的立枯丝核菌菌丝体的加入能够诱导哈茨木 从% T ( C 4 Z :升 霉菌提高六戊烷基吡喃酮产生水平 !
* " ' + 高为 T ( T C 4 Z : $ &
%菌株中的两种内切几丁质酶 多研究&哈茨木霉 H
防中发现哈茨木霉产生了一种蛋白酶" 蛋白酶活性 与木霉菌防治蔬菜灰霉病的能力有关&将蛋白酶与
" # + 木霉 菌 的 分 生 孢 子 混 合 可 以 提 高 防 治 效 果 * &
基因已被克隆&f 等从哈茨木霉 H 菌株中分离 . M 1 ? 9 它具有 %' 编码具有 f O I T "的 < , ) * " ' T个 K @ " 出+
是一种广 !! 哈茨木霉菌 ! : ( * + 8 " / $ ( = -8 ( 7 * . , = $ 泛应用于植物真菌病害防治的菌寄生真菌" 它至少 可寄生于 % 如腐霉 $个属中的 " S种植物病原真菌" 菌! 镰刀菌! 长孺孢菌 H 5 ) 8 * , =1 2 $ ) @ , 1 ( * , =1 2 $ ) 炭疽菌 ! ! ' $ # = * . ) 8 " 1 2 " ( * , =1 2 $ ) ! " # # $ ) " ) ( * + 8 , =1 2 $ 等
(种 ! F % " & F F % " & F 葡聚糖酶" 而且有 "种编码 ! 葡聚 * % R + 糖酶的基因已经被克隆 &哈茨木霉 H %菌株的内
切型 ! 葡聚糖酶不仅对寄主真菌灰葡萄孢的细 F % " & F 胞壁有明显降解作用" 而且对寄主的孢子萌发和芽
$ + 管伸长有强烈的抑制作用 * &哈茨木霉 + Q + I菌株
万方数据 通讯作者 %俞晓平"1 C . 2 9 %M E @ W< 5 9 6 G 1 A 6 G < /
" # # $ 年增刊
石一臖等% 重寄生菌哈茨木霉的研究进展及其在植病生防中的应用
( (
寄主真菌的诱导 哈茨木霉与其寄主真菌立枯丝核 菌! 相互作用时" 寄主真菌可诱导 B 8 * 7 " + ) " . * -1 " # . * $ 凝集素诱导 寄主真菌细胞表 其产生几丁质酶# ! & $ 面的凝集素可以诱导哈茨木霉菌的 + f O I % # "几丁 质酶的产生&! 寄主产生的小分子诱导 由寄主立 T $ 枯丝核菌产生的一种耐热小分子能诱导哈茨木霉菌 和内切几丁质酶基因 ! 的蛋白酶基因 ! 2 ( D % $ $ + 8 T " $
% !细胞壁降解酶
真菌寄生是哈茨木霉主要拮抗机制之一&在趋 向生长) 识别) 接触) 缠绕和穿透等步骤的真菌寄生 哈茨木霉菌分泌产生的一系列细胞壁降解 过程中" 酶如几丁质酶) 葡聚糖酶) 蛋白酶等起着重要的作
哈茨木霉菌几丁质酶在非诱导条件下表达量很 少" 而在诱导条件下大量产生& 对几丁质酶的诱导 底物诱导 几丁质) 纯化的 $ + % ! % $ 主要有四种方式*
* % $ + ( D % &9 B D 1 ? ( D % 因2 等通过增加基本蛋白酶基因 2
的拷贝数来提高哈茨木霉的生物防治效率" 哈茨木 霉2 ( D # 多拷贝转化株抑制立枯丝核菌的能力明显增
% S + &Q 9 . A S对灰霉病菌的生 强* 等在研究哈茨木霉 &
近年来" 对几丁质酶基因的克隆和表达作了许
的内切型 ! 葡聚糖酶! 分子量 T 对多种植 F % " R F &b , $
% ( + 物病原真菌的生长有抑制作用 * &
% G & !蛋白酶
除了几丁质酶和葡聚糖酶外" 蛋白酶也起着重 要作用&有关哈茨木霉菌产生的蛋白酶研究并不 多&哈茨木霉在植物病原真菌菌丝或细胞壁诱导下 可以产生蛋白酶& ] 1 D 1 C 2 . 等从哈茨木霉菌株中分 离鉴定了其中一种碱性蛋白酶" 并克隆了相应的基
* " ^ T +
用" 其中以几丁质酶尤为重要&
% G % !几丁质酶
哈茨木霉菌可产生三种类型的几丁质酶% F % " ! 乙酰葡糖胺酶 ! 内切几 丁 质 酶 T F ) F Q + & G " G % G ' " $ ) 和外切几丁质酶或几丁二糖酶& ! ! Q + & G " G % G % T $ F 乙酰葡糖胺酶可以外切形式把几丁质降解成 % " T F ) F 乙酰葡糖胺单体&内切几丁质酶以随机形式内切 ) F 酶解产物可能有几丁单糖) 几丁二糖和 降解几丁质" 几丁寡糖&外切几丁质酶水解几丁质为几丁二糖& 哈茨木霉菌在与寄主的相互作用过程中往往能产生 并且在侵染的不同部位及不 几种不同的几丁质酶"
% " + 解酶活性 * 等又分离了哈茨木霉 H &Y . D 4 B 9 9 1 ? %的
" !抗菌类物质
目前的研究表明" 哈茨木霉菌可产生 % "种抗菌
" ^ T + 类物质 * &f B D . < 1 等报道" 哈茨木霉菌防治立枯
丝核菌的主要机制之一就是产生了挥发性抗生素"
" T + F &并 具有椰子香味" 经过鉴定为 R 戊烷基吡喃酮 *
通过对它编码的几丁质酶 ) 端* + f O I T &的基因" F * 序列分析和与推导的核酸序列分析表明" 该基因编
% % + T个 * *的信号肽 * & 码的几丁质酶具有一个 43; . D ? B 9 2 B < 3 F T " < , ) * 克隆" 产物具几丁质酶活性& 该几丁质酶在体外培 养的灰葡萄孢 ! 上表现出细胞壁降 ; " ) ( 5 ) * 1 + * . $ ( $ $
% " " P 3 2 8 2 5 6 / !P 3 1 / = 6\ 6 @ 2 / 4 !8 6\ 2 . B @ 2 / 4
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生物技术通报
综述与专论
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" # # $ 年增刊
重寄生菌哈茨木霉的研究及其在植病生防中的应用
石一臖%!申屠旭萍"!俞晓平"
% " ! 杭州师范大学生命与环境科学学院" 杭州!& % # # & T # 中国计量学院生命科学院" 杭州!& % # # % $ $
! " $ 真菌细胞壁和葡聚糖可诱导几丁质酶的产生#
!!基金项目% 浙江省自然科学基金项目! 8 & # ( % " $ $ " 浙江省重大招标项目! " # # T + % " # % ' " " # # R + % " # & " $ 作者简介% 石一臖! % S $ T F $ " 女" 硕士研究生" 主要从事生物农药研究&Q F C . 2 9 %N 2 / A ? 5 . M & & % W3 B = C . 2 9 G < B C
!几丁质诱导的哈茨木霉几丁质酶 表%
简称 + f O I % # " + f O I R T + f O I ( & + f O I ( " + f O I ' " + f O I T " + f O I T # + f O I & & + f O I & % ' " T #^ T " T # & &^ & ( & %^ & & ( & 分子量大小! b , $ % # &^ % % $ 几丁质酶 ) F 乙酰葡糖胺酶 ) F 乙酰葡糖胺酶 乙酰葡糖胺酶 ) F ) F 乙酰葡糖胺酶 内切几丁质酶 内切几丁质酶 几丁二糖酶 内切几丁质酶 内切几丁质酶 来源菌株 I Y & S G % I Y H % I Y & S G % H % H % I Y I Y
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