细菌培养常用培养基和抗生素的配制方法
微生物实验培养基配方
微生物实验培养基配方基础培养基配方：1.水：用去离子水或蒸馏水配制培养基。
2.碳源：葡萄糖是最常用的碳源，可提供微生物的能量和碳原子。
浓度通常为0.2-1%。
3.氮源：氨基酸、氨基酸类衍生物、蛋白胨、氨基酸盐等都可以作为氮源。
蛋白胨的浓度通常为0.5-1%。
4.无机盐：常用的无机盐包括NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4等。
它们提供微量元素和维持渗透平衡。
浓度根据不同微生物的要求而变化。
5.辅助物质：维生素、生长因子、酶、抗生素等物质有时会被添加到培养基中以满足微生物特殊的生长需求。
基础培养基通常是通用的，适用于多种微生物的培养和繁殖。
然而，根据不同的微生物，配方中可能会有一些调整和特殊需求。
以下是一些常见微生物群体的基础培养基配方：1.嗜热菌培养基配方：-水：去离子水。
-碳源：葡萄糖（1-2%）。
-氮源：氨基酸、蛋白胨、氨基酸盐。
-无机盐：NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4等。
-辅助物质：维生素、酶等。
2.嗜酸菌培养基配方：-水：蒸馏水。
-碳源：果糖（2-4%）。
-氮源：天门冬氨酸盐、蛋白胨、氨基酸盐。
-无机盐：NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4等。
-辅助物质：维生素、酶等。
3.嗜碱菌培养基配方：-水：去离子水。
-碳源：葡萄糖（1-2%）。
-氮源：氨基酸、蛋白胨、氨基酸盐。
-无机盐：NaCl、KCl、Na2CO3、Na2HPO4、KH2PO4等。
-辅助物质：维生素、酶等。
4.厌氧菌培养基配方：-水：蒸馏水。
-碳源：葡萄糖（1-2%）。
-氮源：氨基酸、蛋白胨、氨基酸盐。
-无机盐：NaCl、KCl、Na2CO3、Na2HPO4、KH2PO4等。
-辅助物质：维生素、酶等。
除了上述配方外，还可以根据实验需求添加抗生素、指示剂等。
抗生素可以抑制细菌、真菌和其他微生物的生长；指示剂则可以用来检测微生物的生长或一些特殊代谢产物的形成。
总之，微生物实验培养基的配方需要根据微生物的类型和特殊需求进行调整，以提供适宜的营养和环境条件，促进微生物的生长和繁殖。
常用培养基配制
常用培养基参考文献1.Atlas, R.M., Handbook of Microbiological Media, second edition, Ed. Parks,L.C., CRC Press, N.Y., 1997.2.Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition,Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12, 2001.常用储存液参考文献1.Atlas, R.M., Handbook of Microbiological Media, second edition, Ed. Parks,L.C., CRC Press, N.Y., 1997.2.Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition,Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12, 2001.常用缓冲液10X 磷酸盐缓冲液(储存液) (PBS) /升终1 X浓度NaCl 80.0 g 137 mMKCl 2.0 g 2.7 mMNa2HPO414.4 g 100 mMKH2PO42.7 g 2 mMH2O 至800 mlHCl 至pH 7.4H2O 至1升20X SSC /升终1 X浓度NaCl 175.3 g 150 mMNa3citrate x H2O 88.2 g 15 mMH2O 至800 ml 1M HCl调节pH值至7.0Tricine 179.2 g 0.1 MSDS 10.0 g 0.1% (w/v) O 至1升H2稀释溶液的pH至8.350X TAE (Tris-醋酸-EDTA)电泳缓冲液/升终1 X浓度Tri 碱242.0 g 40 mM冰醋酸57.1 ml 20 mM0.5 M EDTA (pH 8.0) 100 ml 2% mMO 至1升H2稀释溶液的pH大约为~8.510X TBE (Tris-硼酸-EDTA)电泳缓冲液/升终1 X浓度Tri 碱108.0 g 90 mM硼酸55.0 g 90 mM0.5 M EDTA (pH 8.0) 40 ml 2% mMHO 至1升210X TPE (Tris-磷酸-EDTA)电泳缓冲液/升终1 X浓度Tri 碱108.0 g 90 mM磷酸(85%) 15.5 ml 23 mM0.5 M EDTA (pH 8.0) 40 ml 2% mMO 至1升H2TE (Tris-EDTA) 缓冲液pH 7.4, 7.6或8.0 /升终1 X浓度参考文献1.Atlas, R.M., Handbook of Microbiological Media, second edition, Ed. Parks,L.C., CRC Press, N.Y., 1997.2.Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition,Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12, 2001.常用缩写下面红色字体为赠送的个人总结模板，不需要的朋友下载后可以编辑删除xx年电气工程师个人年终总结模板根据防止人身事故和电气误操作事故专项整治工作要求，我班针对现阶段安全生产工作的特点和重点，为进一步加强落实安全工作，特制定了防止人身事故和防电气误操作事故的(两防)实施细则。
常用培养基配制
限制-修饰
rRNA
核糖体核糖核酸
RT
逆转录
RT-PCR
逆转录聚合酶链式反应
SAM
S-腺苷蛋氨酸
SAP
虾碱性磷酸酶
SDA
链置换扩增
/升
终1 X浓度
Na2HPO4x7H2O
64 g
47.8 mM
KH2PO4
15 g
22 mM
NaCl
2.5 g
8.6 mM
NH4
5 g
18.7 mM
添加剂
/升
终1 X浓度
抗生素(如果需要)
氨苄青霉素
50 µg/ml
氯霉素
20 µg/ml
卡那霉素
30 µg/ml
四环素
12 µg/ml
半乳糖苷(如果需要)
2.Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12, 2001.
0.1% (w/v)
H2O
至1升
稀释溶液的pH至8.3
5X Tris-三(羟甲基)甲基甘氨酸-SDS电泳缓冲液
/升
终1 X浓度
培养基配方及配置
培养基配方及配置
一般来说，培养基的配方包含基础培养基、添加剂和调节剂。
基础培养基是指提供生物体基本生长必需的基本成分，包括能源物质、有机和无机原料、氮源、矿质元素和缓冲物质等。
常用的基础培养基有
LB培养基、MS培养基等。
添加剂是指用于满足特定实验需求的成分，如抗生素、抗菌剂、激素、维生素等。
添加剂的种类和浓度根据实验目的的不同而有所差异。
调节剂是指用于调节培养基pH值、渗透压、表面张力等物理化学性
质的成分，如缓冲液、pH调节剂等。
以下是一个常用的细菌培养基LB的配方及配置：
1.基础培养基成分：
- 水：900ml
-蛋白胨：10g
-酵母提取物：5g
-NaCl：5g
2.添加剂：（可根据实验需求进行必要的添加）
- 抗生素（如氨苄青霉素）：100μg/ml
- 抗菌剂（如氯霉素）：25μg/ml
3.配制方法：
-将蛋白胨、酵母提取物和NaCl加入水中，并搅拌混合均匀。
- 将培养基溶液倒入容量瓶中，加水至1000ml，并混合均匀。
-调节pH值至7.0-7.2（一般使用缓冲液进行调节）。
-用自制滤纸过滤器滤过，将溶液分装至培养皿或试管中。
-如需添加抗生素或抗菌剂，将相应的药物加入培养基中，并充分溶解。
-培养基装瓶后可以高温高压灭菌，或使用滤器过滤进行无菌处理。
以上是一个简单的LB培养基的配方和配置流程，不同实验需要可能
会有所调整和变化。
在设计培养基配方时，需要结合具体实验目的和生物
体的特性来确定合适的成分和浓度，并注意配制和保管过程中的无菌操作，以确保培养基的质量和有效性。
常用培养基和抗生素的配制方法
常用培养基和抗生素的配制方法1.LB培养基：材料：10g蛋白胨、5g酵母提取物、10g氯化钠、水至1000mL。
方法：将蛋白胨、酵母提取物和氯化钠加入水中，调整pH值至7.0，用自动出厂级水蒸馏水冲洗到1000mL。
2.M9盐基培养基：材料：64gNa2HPO4•7H2O、15gKH2PO4、2.5gNaCl、5gNH4Cl、水至1000mL。
方法：将Na2HPO4•7H2O、KH2PO4、NaCl和NH4Cl加入水中，调整pH值至7.0，用自动出厂级水蒸馏水冲洗到1000mL。
3.TSB培养基：材料：17g磷酸二氢钾、20g蛋白胨、5g氯化钠、水至1000mL。
方法：将磷酸二氢钾、蛋白胨和氯化钠加入水中，调整pH值至7.3，用自动出厂级水蒸馏水冲洗到1000mL。
4.青霉素琼脂培养基：材料：5g酵母提取物、1g酪蛋白、10gD-葡萄糖、2gK2HPO4、2gKH2PO4、20g琼脂、水至1000mL。
方法：将酵母提取物、酪蛋白、D-葡萄糖、K2HPO4和KH2PO4加入水中，调整pH值至7.0，加入琼脂，用自动出厂级水蒸馏水冲洗到1000mL。
抗生素的配制方法：1.青霉素盐酸盐溶液：材料：10g青霉素盐酸盐、水至100mL。
方法：将青霉素盐酸盐加入水中，搅拌至溶解。
2.氨苄青霉素钠盐溶液：材料：10g氨苄青霉素钠盐、水至100mL。
方法：将氨苄青霉素钠盐加入水中，搅拌至溶解。
3.克拉霉素溶液：材料：10g克拉霉素、水至100mL。
方法：将克拉霉素加入水中，搅拌至溶解。
4.挠敏霉素溶液：材料：10g挠敏霉素、水至100mL。
方法：将挠敏霉素加入水中，搅拌至溶解。
5.氯霉素溶液：材料：10g氯霉素、水至100mL。
方法：将氯霉素加入水中，搅拌至溶解。
以上是常用培养基和抗生素的基本配制方法，具体使用时还需要根据实验的需求和文献资料进行相应的优化和调整。
在配制过程中，需要注意配制环境的无菌操作、避免污染和准确称量材料的重量等。
实验室常用培养基的配制方法
实验室常用培养基的配制方法实验室中常用的培养基有很多种，包括通用培养基、选择性培养基、富集培养基等。
下面以常用的LB培养基和M9培养基为例，介绍它们的配制方法。
1. LB培养基（Luria-Bertani agar）LB培养基是一种通用培养基，适用于许多不同类型的细菌。
它由三种主要成分组成：蛋白胨、酵母提取物和氯化钠。
配方如下：-蛋白胨：10克-酵母提取物：5克-NaCl：10克-精制水：1000毫升步骤如下：1)在一个大容量烧杯中加入蛋白胨、酵母提取物和NaCl。
2)加入适量的精制水，搅拌溶解。
3) 将溶液移至一个继续器中，并用精制水补足至1000ml。
4)蓄满培养基的瓶子，盖上盖子，并使用自动压力灭菌器进行高压灭菌，或者将瓶子放入高压灭菌器中，将压力调至15磅（每平方英寸）。
2.M9培养基M9培养基是一种无机盐培养基，常用于细菌的生长和培养。
它的配方相对简单，由无机盐、葡萄糖和维生素B1组成。
配方如下：-Na2HPO4：6克-KH2PO4：3克-NaCl：0.5克-NH4Cl：1克-葡萄糖：0.4克-维生素B1：0.1克-精制水：1000毫升步骤如下：1)在一个大容量烧杯中加入Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和NH4Cl。
2)加入一部分的精制水，搅拌溶解。
3)加入葡萄糖和维生素B1，搅拌均匀。
4) 将溶液移至一个继续器中，并用精制水补足至1000ml。
5)蓄满培养基的瓶子，盖上盖子，并使用自动压力灭菌器进行高压灭菌，或者将瓶子放入高压灭菌器中，将压力调至15磅（每平方英寸）。
以上是LB培养基和M9培养基的配制方法的简要介绍。
当然，实验室中还有很多其他种类的培养基，它们的配制方法也各有不同，需要根据具体的实验目的和细菌类型进行调整。
在培养基配制过程中，应当注意严格按照配方比例配制，保持清洁卫生，避免污染，并注意高压灭菌的操作安全。
培养基配方及配置
培养基配方及配置培养基是一种提供养分和条件给细胞、组织或微生物生长和繁殖的人工环境。
不同种类的细胞或微生物，需要不同的培养基来满足其生长和繁殖的需求。
下面将介绍细胞和微生物培养基的配方及配置方法。
1.培养基配方：不同细胞或微生物的培养基配方各有不同，下面是常用的细胞培养基的配方示例：-DMEM培养基配方：Dulbecco’s Modified Eagle Medium（DMEM）是一种广泛应用于动物细胞培养的基础培养基。
其主要成分包括：- 无铁媒介物（Iron Medium）：DMEM中通常包含高浓度的铁盐，例如铁氯化物。
- 糖类（Glucose）：DMEM中通常包含葡萄糖，用于提供能量供细胞代谢。
- 氨基酸（Amino acids）：DMEM中包含多种氨基酸，用于蛋白质的合成。
- 维生素（Vitamins）：DMEM中通常添加B族维生素和其他必需维生素。
- 盐类（Salts）：DMEM中含有多种无机盐，例如氯化钠、磷酸盐等。
- 缓冲液（Buffer）：DMEM中的缓冲液用于维持培养基的pH值。
- 补充物（Supplements）：DMEM中可添加血清、激素和生长因子等提供细胞生长所需的物质。
-LB培养基配方：大肠杆菌（Escherichia coli）的最常用培养基是Luria-Bertani （LB）培养基。
其主要成分包括：- 蛋白质源（Protein source）：LB培养基中通常添加琼脂和酵母提取物作为蛋白质源。
- 碳源（Carbon source）：LB培养基中添加葡萄糖等碳源供菌落生长所需。
- 盐类（Salts）：LB培养基中含有多种无机盐，例如氯化钠、磷酸盐等。
- 缓冲液（Buffer）：LB培养基的缓冲液用于维持培养基的pH值。
- 抗生素（Antibiotics）：LB培养基中添加抗生素，用于选择性培养目标菌株。
- 补充物（Supplements）：在LB培养基中还可以添加亲水胶体、氧化还原剂等。
微生物学实验常用培养基的
牛肉膏蛋白胨培养基（培养细菌用）121℃灭菌20min。
2、高氏（Gause）1号培养基（培养放线菌用）配制时，先用少量冷水将淀粉调成糊状，倒入煮沸的水中，在火上加热，边搅拌边加入其他成分，溶化后，补足水分至1000mL。
121℃灭菌20min。
3、查氏（Czapek）培养基（培养霉菌用）121℃灭菌20min。
4、马丁氏（Martin）琼脂培养基（分离真菌用）112℃灭菌30min。
临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL，使每毫升培养基中含链霉素30μg。
5、马铃薯培养基（简称PDA）（培养真菌用）培养基的配制：马铃薯去皮，切成块煮沸30min，然后用纱布过滤，再加糖及琼脂，熔化后补足水至1000mL。
121℃灭菌30min。
6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制：(1)、取大麦或小麦若干，用水洗净，浸水6—12小时，至15℃阴暗处发芽，上面盖纱布一块，每日早、中、晚淋水一次，麦根伸长至麦粒的两倍时，即停止发芽，摊开晒干或烘干，贮存备用。
(2)、将干麦芽磨碎，一份麦芽加四份水，在65℃水浴中糖化3—4小时，糖化程度可用碘滴定之。
加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤，滤液如混浊不清，可用鸡蛋白澄清，方法是将一个鸡蛋白加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(4)、将滤液稀释到5—6波美度，pH约6.4，加入2%琼脂即成。
121℃灭菌30min。
7、无氮培养基（自生固氮菌、钾细菌）113℃灭菌30min。
8、半固体肉膏蛋白胨培养基121℃灭菌20min。
9、合成培养基加12 mL0.04%的溴钾酚紫（pH5.2—6.8，颜色由黄变紫，作指示剂）。
121℃灭菌20min。
10、豆芽汁蔗糖（或葡萄糖）培养基培养基的配制：称新鲜豆芽100g，放入烧杯中，加入水1000mL，煮沸约30min，用纱布过滤。
用水补足原量，再加入蔗糖（或葡萄糖）50g，煮沸熔化。
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细菌培养常用培养基和抗生素的配制方法
、常用培养基
1、LB 培养基将下列组分溶解在0.9L 水中：蛋白胨10g
酵母提取物5g
氯化钠10g
如果需要用INNaOH （〜1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L。
注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。
2 、SOB 培养基
将下列组分溶解在0.9L水中：
蛋白胨20g
酵母提取物5g
氯化钠0.5g
1mol/L 氯化钾2.5ml
用水补足体积到1L。
分成100ml的小份，高压灭菌。
培养基冷却到室温后，再在每100ml 的小份中加1ml 灭过菌的1mol/L 氯化镁。
3、SOC培养基
成分、方法同SOB培养基的配制，只是在培养基冷却到室温后，除了在每100ml的小份中
加1ml 灭过菌的1mol/L 氯化镁外，再加2ml 灭菌的1mol/L 葡萄糖（18g 葡萄糖溶于足够水中，再用水补足到100ml，用0.22um的滤膜过滤除菌）。
4 、TB 培养基
将下列组分溶解在0.9L水中:
蛋白胨12g
酵母提取物24g
甘油4ml
各组分溶解后高压灭菌。
冷却到60 C , 再加100ml灭菌的
170mmol/LKH2PO4/0.72mol/LK2HPO4 的溶液（2.31g 的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中，使终体积为100ml。
高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌）。
5、2X Y培养基
将下列组分溶解在0.9L水中:
蛋白胨16g
酵母提取物10g
氯化钠4ml
如果需要用INNaOH (〜1ml )调整pH 至7.0，再补足水至1L 。
注：琼脂平板需添加琼脂粉 12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉 7g/L 。
6、YPD 培 养基
将下列组分溶解在 0.9L 水中： 蛋白胨 20g 酵母提取物 10g 葡萄糖 20g
用水补足体积为 1L 后，高压灭菌。
建议在高压灭菌之前，对色氨酸营养缺陷型每升培养基 添加1.6g 色氨酸，因为 YPD 培养基是色氨酸限制型培养基。
为了配制平板，需要在高压灭 菌前加入 20g 琼脂粉。
二、常用抗生素 氨苄青霉素( ampicillin )( 100mg/ml ) 溶解 1g 氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至 25ug/ml 〜 50ug/ml 的终浓度添加于生长培养基。
羧苄青霉素( carbenicillin )( 50mg/ml )
溶解0.5g 羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至 以 25ug/ml 〜 50ug/ml 的终浓度添加于生长培养基。
甲氧西林( methicillin )( 100mg/ml )
溶解1g 甲氧西林钠于足量的水中， 最后定容至10ml 。
分装成小份于-20C 贮存。
常以37.5ug/ml 终浓度与 100ug/ml 氨苄 青霉素一 起添加于生长培养基。
卡那霉素( kanamycin )( 10mg/ml )
溶解0.1g 卡那霉素于足量的水中， 最后定容至10ml 。
分装成小份于-20C 贮存。
常以10ug/ml 50ug/ml 的终浓度添加于生长培养基。
氯霉素( chloramphenicol )( 25mg/ml )
溶解 0.25g 氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至 12.5ug/ml 〜25ug/ml 的终浓度添加于生长培养基。
链霉素( streptomycin )( 50mg/ml )
溶解 0.5g 链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，最后定容至 常以 10ug/ml 〜 50ug/ml 的终浓度添加于生长培养基。
萘啶酮酸( nalidixicacid )( 5mg/ml )
溶解0.05g 萘啶酮酸钠盐于足量的水中，最后定容至 10ml 。
分装成小份于-20C 贮存。
常以
15ug/ml 的终浓度添加于生长培养基。
四环素（tetracyyline ） （ 10mg/ml ）
溶解0.1g 四环素盐酸盐于足量的水中，或者将无碱的四环素溶于无水乙醇，定容至 10ml 。
分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光，于
-20 C 贮存。
常以10ug/ml 〜50ug/ml 的终浓
10ml 。
分装成小份于-20C 贮存。
常以
10ml 。
分装成小份于-20C 贮存。
常 10ml 。
分装成小份于-20 C 贮存。
常以 10ml 。
分装成小份于-20 C 贮存。
度添加于生长培养基。
小技巧：如配制10mg/ml卡那霉素，先在盐水瓶或血清瓶加入10ml双蒸水，高压，冷却后
加入0.1g卡那霉素，混匀，滤膜过滤到试管中，再以1ml/管分装到EP管中待用。
抗生素储存液工作浓度（mg/ml）保存条件严紧型质粒（ug/ml）松驰型质粒（ug/ml）氨苄青霉素50（溶于水）-20 °C
20 60羧苄青霉素50（溶于水）-20 C 2060氯霉素34（溶于乙醇）-20 C 25170卡那霉素10（溶于水）-20 C1050 链
1050四环素5（溶于甲醇）-20 1050
霉素10（溶于水）-20
浓度：50 mg/ml
配制量：50ml
配制方法：
1 •称取2.5g利福平置于50ml塑料离心管中。
2 •加入40ml甲醇，振荡充分混合溶解之后定容50ml，可以涡旋。
3•过滤灭菌后，小份分装（1-2ml每管）后，置于—20C保存。
4•配制时每毫升可加入〜5滴10 N NaOH以助溶。
若以DMSO做溶剂，可不滴加NaOH。