生化实验基本操作 生化实验基本技能训练
《生物化学实验》课程标准
实验一、基本操作及氨基酸、蛋白质一般理化性质
实验内容
教学要求
知道
理解
掌握
学会
1.实验室其它常规仪器的应用
2.实验室安全、急救知识
3.蛋白质的颜色反应
4.蛋白质的沉淀反应
2.点样
3.电泳
4.染色与干燥.
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实验十四、蛋白质的浓度测定(双缩脲法)
实验内容
教学要求
知道
理解
掌握
学会
1.分光光度计的使用
2.标准曲线的绘制
3.样液的测定.
√
√
√
实验十五、蛋白质的浓度测定（考马斯亮蓝法）
实验内容
教学要求
知道
理解
掌握
学会
1.分光光度计的使用
2.标准曲线的绘制
3.样液的测定.
√
√
√
实验十六、微量凯氏定氮试验
实验内容
教学要求
知道
理解
掌握
学会
1消化
2定氮仪的洗涤
3蒸馏
4滴定
5.计算
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√
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实验十七、酶的活力测定
实验内容
教学要求
知道
理解
掌握
学会
1.分光光度计的使用
2.标准曲线的绘制
3.样液的测定.
√
√
√
实验十八、DNA的定量分析(定磷法)
实验内容
教学要求
知道
理解
掌握
学会
生物化学实验
生物化学实验》课程实验大纲一、学时学分总学时：30 学分：1 实验时数：30二、实验目的生物化学是生物技术及生命科学相关专业的专业基础课程，其实验教学是使学生理解和掌握生物化学基本原理的必需环节。
生物化学实验所包含的基本技能涉及生物科学的各个领域，是完成其它专业课程实验的基础，在教学中占有重要地位。
本课程的实验目的主要包括：（1）加深生物化学基本概念和基本原理的理解与掌握；（2）培养学生掌握基本生化实验方法和实验技术，掌握各个实验的基本原理；（3）系统训练专门的实验技能，熟练使用各种常用生化实验仪器；（4）训练学生观察实验现象、准确记录实验数据、正确处理与分析实验结果的技能，培养严谨细致的科学作风。
三、实验基本原理蛋白质的溶解受盐、酸、碱、重金属等因素的影响，发生可逆和不可逆沉淀；在聚丙烯酰胺凝胶电泳中，加入SDS后由于各种蛋白质分子量大小不同，所以蛋白质在电泳中迁移率也会有不同；蛋白质的分子大小不同，小分子蛋白质由于扩散作用进入凝胶颗粒内部而被滞留，大分子被排阻在凝胶颗粒外面而迅速通过层析柱；碱性缓冲液中DNA分子带负电荷，在外加电场作用下向正极泳动；激活剂、抑制剂、温度等对酶促反应速度有极大影响；电子传递过程中的氧化还原反应可通过伴有颜色变化的化合物作受体来研究；纸层析技术可以用于转氨基作用中不同物质的检测。
四、实验基本要求严格遵守实验室各项规章制度；实验前认真预习实验指导书中有关实验的原理与步骤；认真听取理解教师在实验进行前的重点讲解；分小组进行实验，保持实验室安静，保持实验台整洁有序；正确使用实验仪器；认真观察与分析实验现象，客观真实地填写实验数据并进行结果分析；认真、准确、整洁地撰写实验报告并按时上交。
五、考核与报告考核分笔试和平时成绩两项。
笔试成绩占70%，平时成绩占30%。
平时成绩根据整个课程实验过程中学生的各方面表现和实验报告撰写情况打分。
六、主要仪器与设备组织捣碎机、水浴锅、高速冷冻离心机、台式离心机、柱层析系统、电泳仪、垂直与水平电泳槽、紫外与可见分光光度计、蛋白质检测仪、紫外透射反射仪、冰箱、电子天平、反渗透系统等。
化学实验基础知识PPT课件
表格法
适用于大量数据的整理和表达， 能清晰展示各组数据间的对比关
系。
图形法
直观展示数据间的变化趋势和规 律，便于分析和理解。常用图形 包括柱状图、折线图、散点图等。
文字描述法
对实验结果进行概括性描述和分 析，阐述实验结论和意义。应结 合图表进行解释和说明，增强表
达效果。
THANK YOU
根据实验需求选择合适的搅拌器，如玻璃棒、磁力搅拌器等。
根据实验需求控制搅拌速度，避免产生过多的气泡或溅出。
搅拌、过滤和蒸发操作要点
选择合适的滤纸
根据实验需求选择合适的滤纸，如慢速滤纸、中速滤纸等。
折叠滤纸
将滤纸折叠成合适的形状，放入漏斗中，用水润湿并贴紧 漏斗内壁。
搅拌、过滤和蒸发操作要点
• 过滤操作：将待过滤的液体沿玻璃棒慢慢倒入漏斗中，注 意液面不要超过滤纸边缘。
仪器的准备
标准溶液的配制
按照准确称量的基准物质的质量，配 制一定浓度的标准溶液。
准备好滴定管、容量瓶、移液管等仪 器，并进行校准。
滴定分析法原理及操作过程
待测溶液的取样和处理
准确移取一定体积的待测溶液，并进行必要 的预处理。
终点判断
根据指示剂的颜色变化或电位突跃等信号判 断滴定终点。
滴定操作
将标准溶液逐滴加入待测溶液中，同时搅拌 并观察反应现象。
待测溶液的取样和处理
准确移取一定体积的待测溶液，并进 行必要的预处理。
吸光度或发光强度的测定
将待测溶液置于比色皿中，在分光光 度计上选择合适的波长和测量模式， 测定其吸光度或发光强度。
数据处理
根据标准曲线和待测溶液的吸光度或 发光强度计算待测组分的含量。
06
实验数据处理与结果表 达技巧
初三化学实验基本技能训练1
固体药品通常保存 在_________ 广口瓶 中
镊子 (1)块状药品的取用_______
一横二放三慢竖
横放容器，把药 品放在容器口 把容器慢慢竖立起来，使 药品顺着器壁滑到底部
第一单元 课题3
(2) 粉末状药品的取用 药匙或纸槽 取用粉末状药品通常用__________ 把容器倾斜→把药品用药匙送到容器底 一斜二送三直立 部→把容器竖立起来
研钵
第三节 到实验室去
化学实验基本技能训练(一)
第二课时
（一）复习 1、用作少量试剂的反应容器 2、用于配制溶液和较大量试剂的反应容器 3、用于搅拌、引流或转移液体 4、用于夹持试管 5、用于加热 6、量度液体体积 7、用作收集或贮存少量气体 8、吸取和滴加少量液体 9、用于固定和支持各种仪器
化学实验基本操作
（3）注意： ①称量物不能直接放在托盘上,干燥固体放在纸上,易潮 解、易腐蚀的药品（如氢氧化钠）要放在玻璃器皿（如 小烧杯或表面皿）上。
②称量一定质量的药品要先放砝码，再放药品。
③若左码右物应是: （物质的质量=砝码－游码）
砝码=物质质量+游码
左 = 右 + 游
6.连接仪器装置
连接仪器装置
（1）把玻璃管插入带孔橡胶塞
4.物质的加热
（1）酒精灯的使用方法
①检查：一是灯芯是否烧焦或不平整，二是酒精的量。
（添加酒精用漏斗，不得超过容积的2/3，不得少于容
积的1/4，） 两查 ②点燃：要用火柴点燃，绝对禁止用燃着的酒精灯去点燃
另一盏酒精灯（以防火灾），绝对禁止向燃着的酒精灯
中添加酒精。 两禁
③熄灭：用灯帽盖灭，不可用嘴吹灭（以免引燃酒精灯 内的酒精，引起爆炸），灯帽盖两次，（避免灯帽内 产生负压打不开） ④火焰结构：从外向内,依次是外焰、内焰和焰心，外焰
生化新陈代谢实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解生化新陈代谢的基本原理。
2. 掌握生化实验的基本操作技能。
3. 通过实验验证酶促反应的特性和效率。
二、实验原理新陈代谢是生物体内物质和能量的交换与转变过程，包括同化作用和异化作用。
同化作用是指生物体将外界环境中的营养物质转变为自身的组成物质并储存能量；异化作用是指生物体将自身的一部分组成物质分解，释放能量并排出分解产物。
酶是生物体内一类具有催化活性的蛋白质，能显著降低反应活化能，加速生化反应的进行。
三、实验设备与试剂1. 实验设备：离心机、移液器、恒温水浴锅、显微镜等。
2. 实验试剂：葡萄糖、果糖、淀粉、蛋白质、DNA、RNA、酶、指示剂等。
四、实验步骤1. 酶促反应实验（1）将酶与底物混合，观察反应速率。
（2）改变酶浓度、底物浓度、pH值、温度等条件，观察反应速率的变化。
（3）比较不同酶的催化效率。
2. 新陈代谢实验（1）将生物样本（如细胞、组织等）放入反应体系中，观察物质和能量的变化。
（2）改变反应条件，如pH值、温度等，观察反应的变化。
（3）检测代谢产物，如葡萄糖、乳酸等。
五、实验结果与分析1. 酶促反应实验（1）实验结果显示，随着酶浓度的增加，反应速率逐渐加快。
（2）改变底物浓度，反应速率也随之增加。
（3）pH值和温度对酶促反应速率有显著影响，最适pH值和温度条件下，反应速率最高。
（4）不同酶的催化效率不同，如脲酶催化尿素水解速度比一般催化剂高10~10倍。
2. 新陈代谢实验（1）实验结果显示，生物样本在反应体系中发生代谢反应，物质和能量发生转变。
（2）改变反应条件，代谢反应速率发生变化。
（3）检测到代谢产物，如葡萄糖、乳酸等。
六、讨论1. 酶促反应具有高效、特异、可调节等特点，是生物体内新陈代谢的重要催化剂。
2. 新陈代谢是生物体维持生命活动的基础，酶在代谢过程中起着至关重要的作用。
3. 实验结果表明，酶浓度、底物浓度、pH值、温度等条件对酶促反应速率有显著影响。
生物化学基本实验技能训练(一)刻度吸管和微量可调式移液器的使用、校正与数据处理
二、微量可调式移液器（micropipette,俗称“加 样枪”）的构造和使用方法
工 欲 善 其 事 ， 必 先 利 其 法国GILSON 芬兰Labsystems 日本NICHIRYO 器 美国TOMOS 德国Brand 德国 Eppendorf 美国JENCONS
准 • 掌握微量可调式移液器的原理和使用方法，了解
可调式移液器的校正方法 • 建立实验误差、准确度和精确度的概念，掌握误
差分析计算方法 • 了解电子天平的使用方法
生化实验室规章制度和实验要求
1.必须按教学计划规定的时间到实验室，不迟到，不早退。进 入实验室必须穿实验服。
2.保持环境的肃静和整洁，不高声说话，严禁用器械及动物开 玩笑。
停片刻继续按按钮至第二停点（终点）吹出残余的液体。最后松开按钮。
• 5. 弃枪头 按下加样枪上的枪头推出杆，将枪头打入指定位置。
注意事项
• 移液器的正确放置 当移液器枪头里有液体时，切勿将移液器水平放置或倒
置，以免液体倒流腐蚀活塞弹簧。 • 维护保养时的注意事项
（1）如不使用，要把移液枪的量程调至最大值的刻度，使弹簧处于 松弛状态以保护弹簧；
芬兰雷勃 Finnpipette
微量可调式移液器的规格
• 用途 • 规格：
– 5 ml移液器(1000-5000ul) – 1ml移液器(200-1000) – 200ul移液器(20-200) – 100ul移液器(20-100ul) – 10ul移液器(0.5-10ul) – 2 ul移液器(0.1-2ul)
生化实验基本操作
内
1 2
容
玻璃器皿的洗涤
溶液的混匀技术 吸量管和加样器的使用
3
玻璃器皿的洗涤及干燥
1、使用过的玻璃器皿的洗涤（即常规洗涤方法） 2、新购置的玻璃器皿的洗涤 3、血清堵塞刻度吸管洗涤 4、油污烧杯试管洗涤 5、比色杯的洗涤（禁用毛刷刷洗） 6、污染玻璃器皿的洗涤 7、干燥：自然干燥、烘烤干燥 （量器一定采用自然方法干燥，容器可采用 自然和烘烤方法干燥）
6、放置（放回吸管架）禁止平放在实验台面上！ 7、洗涤（操作结束后）
可调式微量加样器的使用
1、选择（大小合适） 2、调所需值
先确定调节轮的方向，再调至大于或小于所需值一格，最后调回 所需值。
3、装吸嘴（套牢，避免间隙） 4、取液（按至第一停点，缓慢吸液） 5、放液（贴壁放液）先按至第一停点，再按至第二停点。 6、卸吸嘴（废物缸） 7、将数轮调回最大值 8、放置（
玻璃器皿清洗的原则：
对不同玻璃器皿，采用不同的洗涤方法。根 据器皿污染源的不同选择合适的洗涤液。
器皿清洁的判断方法：
洗涤后倒置容器，其内壁无挂珠；干燥后器 壁内外干净、无污物痕迹。
溶液的混匀技术
甩动混匀(最常用的方法） 弹打混匀 旋转混匀 倒转混匀 玻棒搅拌混匀 吸管混匀 振荡器混匀 电磁搅拌混匀 选用原则： 根据所使用的器皿和液体的容量选用
刻度吸管的使用
1、选管（大小合适）总容量最好等于或稍大于取液量 2、执管（左球右管） 3、取液（一下一上）
插入液面下0.5cm，吸至最高刻度上方1-2cm
4、调准刻度（三点一线）
溶液弯月面、视线和刻度线在同一水平上
5、放液（贴壁勿内）
带好临床生化实验课堂教学的体会
、
一
一
各种 酶项 目检验 中经 常使 用 的方 法 ，其准 确 程度 与检 验质 量 密 切 相关 ，它 的重要 性 学生 并不 一定 重 视和 理解 。我们 在进 行 重 点讲 解 的过程 中 ，让 学生 先 回顾 标准 曲线 制 作 的基础 ，然 后 分 析 曲线 的线性 、灵敏 感和 稳定 性 。通 过具 体 实例 的应 用启 发 学 生 由浅入 深地 认识 做好 标 准 曲线 的重 要性 和 掌握 标准 曲线 的 制 作 。这 样 ，当 Ａ 的标 准 曲线 完 全 掌 握之 中 ，学 生 就 能举 一 反 三地 自学并 掌握 同类 实验 的标 准 曲线绘 制 了 。 四 、提 倡 学 生不 断学 习进取 的精 神 检 验 技术 突 飞猛 进 ，仪器 设备 更 新 的速 度相 当快 ，手 工 也 有许多快速便捷的检验方法不断涌现 ，所以带教过程中我们并 不强调学生死记硬背某种方法 ，要求看操作卡会操作就行 了， 告 诉 他 们 任 何 方 法 即使 在一 般 时 间 内被 肯 定 也 不 是 十 全 十美 的 ，希 望他 们 有 时间 多看 书 ，多看 杂 志 ，掌握 新 的知识 ，不 断 全 面提 高 自己的专业 水 平 。 五 、加强培 养观 察和 动 手 能力 生化是 一 门理 论 与实 践结 合较 强 的学 科 。在 实验 中 ，学生 参 与 的积 极 胜高 ，学生 可 利用 初步 掌握 了相关 的理 论 知识 ，通 过 实验 来 印证 它们 。这 样 既可 提高 学生 学 习理 论知 识 的主 动性 和积极性 ，又可培养学生的观察能力 、操作技能、分析问题和 解决 问题 的能力 。 首先 ， 师应 选择 理论 知识 应用 性 强的 实验 。 教 同时 ，要求 学 生要 事先 复 习巩 固有 关 的理 论知识 ，做好 每 次实 验的预习工作 ，仔细阅读实验指导 ，了解实验 目的、要求和操 作 步骤 。教 师 在实 验操 作前 的讲 解 ，语 言要 简 洁 、精 练 ，凡 实 验 指 导 上 写得 很 清 楚 的 可 少讲 或 不 讲 。 一般 讲 解 要 控 制在 １ ５ 分 钟左 右 ，把充 分 的 时间 留给 学生 动手 实践 。在实 验 过程 中 ， 注 意指 导学 生 观察 实验 现象 ，激 发学 生 动手 的兴趣 ，增 强学 生 做 实验 的信 心 ，同时培 养学 生敏 锐 的观 察力 和 分析 问题 、解 决 问题 、独立 思考 的能 力 。 六 、注 重语 言表 达 能力 医学语 言具 有规 范 性 、准确 性 、鲜 明性 、简洁性 的表达 原 则 。实验 报告 及各 种 医疗文 件 的书写 都要 求学 生 能准确 、 明 、 简 扼要 的语 言表 达 。学生 知识 的巩 固 ，技 能 的形 成都 不是 “ ” 讲 出来 的 ，而 是学 生 在教 师 的指导 下 “ “ 练 出来 的 。课 堂 教学 是 个信息接受 、传递和反馈处理过程 。课堂知识需要学生 自己 的整 理 ，还 需要 巩 固深 化 。医学 本 身是 一 门实践 性 、应 用性 强 的学 生 。各 种 医学实 践 技能 及实 验不 但 可 以巩 固课 堂上 所学 的 理论 知 识 ，而且 还 可 以引导 学生 向纵 深 开拓 ，主动 自觉 地挖 掘
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生物化学与分子生物学实验教学中心
玻璃器皿的洗涤及干燥
❖ 1、使用过的玻璃器皿的洗涤（即常规洗涤方法） ❖ 2、新购置的玻璃器皿的洗涤 ❖ 3、血清堵塞刻度吸管洗涤 ❖ 4、油污烧杯试管洗涤 ❖ 5、比色杯的洗涤（禁用毛刷刷洗） ❖ 6、污染玻璃器皿的洗涤
09年秋季学期年秋季学期
生物化学与分子生物学实验教学中心
生物化学与分子生物学实验教学中心
先确定调节轮的方向，再调至大于或小于所需值一格，最后调回所 需值。
3、装吸嘴（套牢，避免间隙）按逆时针方向旋转一下。 4、取液（按至第一停点，缓慢吸液）加样器保持竖直。 5、放液 先按至第一停点，再按至第二停点。
贴不贴壁？？
取液和放液时，加样器不能平放或倒置！！ 6、卸吸嘴（废物缸） 7、将数轮调回最大值 8、放置（放在固定支架上）
09年秋季学期年秋季学期
生物化学与分子生物学实验教学中心
可调式微量加样器
❖ 调节旋钮、 吸 液按钮
❖ 操纵杆 ❖ 吸嘴脱卸按钮 ❖ 移液体积刻度
❖ 量程
09年秋季学期年秋季学期
❖ 吸样枪头
生物化学与分子生物学实验教学中心
可调式微量加样器的使用
1、选择（大小合适）加样器都有一定的量程。 2、调所需值
❖ 7、干燥：自然干燥、烘烤干燥
（量器一定采用自然方法干燥，容器可采用自 然和烘烤方法干燥）
09年秋季学期年秋季学期
生物化学与分子生物学实验教学中心
玻璃器皿的洗涤原则与判断方法
❖玻璃器皿清洗的原则：
对不同玻璃器皿，采用不同的洗涤方法。根据 器皿污染源的不同选择合适的洗涤液。
❖器皿清洁的判断方法：
洗涤后倒置容器，其内壁无挂珠；干燥后器壁 内外干净、无污物痕迹。
（检查一下试管架上的试管是否干净？）
09年秋季学期年秋季学期
生物化学与分子生物学实验教学中心
溶液的混匀技术
❖甩动混匀(最常用的方法） 右手持试管上部，
❖弹打混匀
轻轻甩动振摇ຫໍສະໝຸດ ❖旋转混匀❖倒转混匀❖玻棒搅拌混匀
❖吸管混匀
❖振荡器混匀
❖电磁搅拌混匀
选用原则：
根据所使用的器皿和液体的容量选用。
09年秋季学期年秋季学期
生物化学与分子生物学实验教学中心
09年秋季学期年秋季学期
生物化学与分子生物学实验教学中心
刻度吸管的使用
1、选管（大小合适）总容量最好等于或稍大于取液量。 2、执管（左球右管） 3、取液（一下一上）取液之前必须用样品润洗吸管2-３次！！
插入液面下0.5-１cm，吸至最高刻度上方1-2cm。
4、调准刻度（三点一线）
溶液弯月面、视线和刻度线在同一水平上。
5、放液（贴壁勿内）
刻度吸管有“吹”、“快”两种规格。 “吹” ：溶液停止流出后，应 将管内剩余的溶液吹出； “快”：待溶液停止流出后，一般等待15秒钟 拿出。
6、放置（放回吸管架）禁止平放在实验台面上！ 7、洗涤（操作结束后）
若短期内不再使用吸管吸取同一液体，则及时用水洗净。