羟丁酸脱氢酶(HBDH) 紫外动力法
α—羟丁酸脱氢酶(HBDH)测定试剂盒(α—酮丁酸底物法)产品技术要求derui
α-羟丁酸脱氢酶（HBDH）测定试剂盒
（α-酮丁酸底物法）
2.1外观和性状
外观和性状应符合表2要求。
表2 试剂盒内各组分的外观性状
2.2试剂空白
2.2.1试剂空白吸光度
试剂以生理盐水为空白时，在温度37℃、波长340nm，光径1.0 cm 条件下，吸光度≥ 1.1。
2.2.2试剂空白吸光度变化率
试剂以生理盐水为空白时，在温度37℃、波长340nm，光径1.0 cm 条件下，吸光度变化率≤0.002。
2.3分析灵敏度
试剂盒测试浓度为100U/L被测物时，吸光度变化率≥0.003。
2.4线性范围
2.4.1试剂盒在25 ~750U/L区间（范围）内，其回归系数r≥0.990。
2.4.2相对偏差或绝对偏差应符合表3 要求。
表3 相对偏差或绝对偏差
2.5精密度
2.5.1试剂盒重复性CV 值应≤5.0%。
1
2.5.2试剂盒批间相对极差（R）应≤10.0%。
2.6准确度
采用比对试验，相关系数r2≥0.95，相对偏差应在±10%范围内。
2.7液体装量
试剂盒不同规格的净含量应不少于其标示量。
2。
a-羟丁酸脱氢酶(a-HBDH)操作规程(SOP)
a-羟丁酸脱氢酶(a-HBDH)操作规程（SOP）一、用途本产品用于体外定量测定血清、血浆样品中α－羟丁酸脱氢酶（α－HBDH）的活性。
二、临床意义（一）概述α－羟丁酸脱氢酶（α－HBDH），酶编号为EC 1.1.2.30。
主要来源于心肌、肾和红细胞。
其活性表示LDH中能利用α－羟丁酸为反应基质的酶活性，主要为LDH1和LDH2的活性。
（二）临床意义血清а－羟丁酸测定主要用于酮症酸中毒的鉴别诊断及跟踪监护。
同时还可用于心肌梗死、肝脏实质细胞病变、活动性风湿性心肌炎、急性病毒性心肌炎、溶血性贫血等疾病的辅助诊断。
三、检验原理α-酮丁酸＋NADH＋H+−αα-羟丁酸＋NAD+−−-HBDH−→NADH的氧化速率与样品中α－HBDH活性成正比，在340nm波长处，通过连续监测吸光度的下降速率(－△A／min)，即可计算出样品中α－HBDH的活性。
四、样品血液样品原则上采集晨起空腹血（禁食12小时）；患者处于平静、休息状态，减少患者由于运动、饮食带来的影响；静脉采血时患者应取坐位或卧位；止血带使用后1分钟内采血，回血后立即松开；正确使用抗凝剂；防止溶血；防止过失性采样。
样品运送过程中应防止过度振荡、防止样品容器的破损、防止样品被污染、防止样品及唯一性标志的丢失和混淆，防止样品对环境的污染、水分蒸发。
α－HBDH测定样品为不溶血的血清、血浆（肝素或EDTA 抗凝）。
样品应在低温条件下运输保存，样品中α－HBDH在2～8℃保存可稳定7天。
五、试剂（一）试剂组成不同批号试剂中各组份不能互换。
（二）试剂准备R1和R2试剂为即用型液体试剂，开瓶装载即可使用，用后应及时冷藏保存。
（三）试剂的保存及稳定性1. 不能冰冻试剂。
2. 未开瓶的R1和R2试剂应在2～8℃密闭避光贮存，稳定期为瓶签标示的有效期。
开瓶后的试剂应在2～8℃保存，稳定期为30天。
（四）试剂性能可接受的指标空白吸光度：试剂空白在主波长340nm、副波长405nm 处，10mm光径下，吸光度值≥1.000。
a-羟丁酸脱氢酶（HBDH）测定-标准操作程序
三级文件测定标准操作程序第2页共3页生效日期：目的：建立a-羟丁酸脱氢酶（HBDH）测定标准操作规程。
范围：适用于a-羟丁酸脱氢酶（HBDH）测定的标准操作。
职责：生化部检验人员对本规程的实施负责。
规程：1 测定方法：NADH在340nm波长有最大吸收，NADH氧化生成NAD+的速率与血清中a-HBDH的活性成正比。
在340nm波长下测定NADH下降的速率，即吸光度下降的速率，可测出a-HBDH的活力。
a-HBDHNADH +a-酮丁酸+H+—────→a-羟基丁酸+ NAD+2 仪器设备GS200全自动生化分析仪3 试剂3.1 a-羟丁酸脱氢酶（HBDH）试剂盒，包括试剂1（R-1）、试剂2(R-2)。
试剂成份含量R-1 a-酮丁酸钠≥8.8g/L 叠氮化钠≥0.3g /L Tris ≥2.75g /LR-2 NADH ≥1.1g/L3.2 分析用人基质质控血清（RANDOX）、血清3.3 试剂稳定性与贮存a-羟丁酸脱氢酶（HBDH）试剂盒在2-8℃避光保存可稳定一年；试剂R-1、R-2开启后在2-8℃避光保存可稳定一个月。
3.4 样本稳定性与贮存3.4.1 分析用人基质质控血清：该血清自生产之日起，在2-8℃下保持可稳定4年；该血清一旦复融，在25℃下可稳定24小时，在2-8℃下可稳定7天，在-20℃可稳定1个月。
3.4.2 待测血清：2-8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定3个月。
样本不可反复冻三级文件测定标准操作程序第3页共3页生效日期：融。
不可使用已被污染的样本。
4 操作步骤4.1 打开全自动生化仪，按照GS200全自动生化分析仪操作维护保养程序，完成普通测试流程。
4.2 检验方法分析方法：速率A；主波长：340 nm；副波长：405nm；样品量：15.0ul；R-1：400ul，R-2：100ul；校准方式：K因子；反应方向：下降；测定温度：37℃。
样品与R-1混匀后反应5分钟，加入R-2混合后延迟60秒，测定240秒。
羟丁酸脱氢酶208
羟丁酸脱氢酶208
羟丁酸脱氢酶208（hydroxybutyrate dehydrogenase 208，简称HBDH-208）是一种参与酮体代谢的酶。
它主要催化羟丁酸（3-hydroxybutyrate）转化为丙酮酸（acetoacetate）。
HBDH-208在乳酸脱氢酶与乙酰乳酸脱氢酶之间的酶级联中发挥重要作用，通过两个反应将羟丁酸转化为乙酸。
这一过程是在线粒体中进行的，产生的乙酸可以进一步被供能物质氧化为二氧化碳和水释放能量。
HBDH-208是一种特定的酶亚型，208指的是此酶的isoenzyme电泳图谱上的带位置。
在人体内，HBDH主要存在于肝脏、心肌和脑组织中。
由于羟丁酸是酮体代谢的重要中间产物，HBDH-208的活性和水平可以作为一种生物标志物，用于评估酮症（例如酮症酸中毒、糖尿病酮症等）和其他与酮体代谢相关的疾病。
HBDH-208的检测方法一般采用常规的酶动力学测定方法，例如使用羟丁酸和辅酶NAD^+作为底物，观察酶促反应产生的辅酶NADH的吸收变化。
测定结果可以通过比色法或荧光法进行分析，根据底物的消耗量或产物的生成量来计算HBDH-208的活性。
需要注意的是，人体内存在多种羟丁酸脱氢酶亚型，包括HBDH-1、HBDH-2和HBDH-3等。
不同亚型的HBDH在组织分布、催化效率和生理功能等方面可能存在差异，因此在实际应用中需考虑亚型特异性。
丙氨酸 羟丁酸脱氢酶
丙氨酸羟丁酸脱氢酶1.引言概述部分的内容可以如下编写：1.1 概述丙氨酸羟丁酸脱氢酶是一种重要的酶类蛋白质，它在生物体内具有关键的生化功能。
作为一种氧化酶，它在丙氨酸代谢途径中发挥着至关重要的作用。
该酶能够催化丙氨酸与羟丁酸之间的反应，将丙氨酸转化为羟丁酸并伴随着氢离子的释放。
这一反应是细胞内代谢途径中重要的一步，关系着生物体能量代谢和碳代谢的平衡。
丙氨酸羟丁酸脱氢酶被广泛存在于各个生物界，从原核细菌到真核生物都可以发现其存在。
不同生物中的该酶在结构和功能上存在差异，但基本的催化机制和代谢途径却保持了高度的一致性。
这种高度保守性从侧面反映了丙氨酸羟丁酸脱氢酶在生物体内的关键作用。
随着生物技术和分子生物学的发展，对丙氨酸羟丁酸脱氢酶的研究逐渐深入。
人们通过克隆和表达该酶的基因，对其结构和功能进行了详细的研究。
除了研究酶的本身特性，还有科学家关注于该酶在疾病发生机制中的作用。
例如，一些研究表明，丙氨酸羟丁酸脱氢酶的缺失或突变可能与多种疾病的发生有关，如神经变性疾病和代谢紊乱等。
本文将系统地讨论丙氨酸羟丁酸脱氢酶的定义、功能、与丙氨酸的关系以及其在生物学中的意义。
同时，我们还将回顾目前在该酶研究方面的进展，并展望其在医学和生物技术领域的应用前景。
通过对丙氨酸羟丁酸脱氢酶的深入了解，我们对于细胞代谢和相关疾病的理解将得到进一步的拓展。
1.2文章结构文章结构文章的结构是指整篇文章所采用的组织方式和框架，它使读者可以更好地理解和掌握文章的内容。
本文将按照以下结构展开：引言部分主要包括三个方面的内容。
首先是概述，通过对丙氨酸羟丁酸脱氢酶的简要介绍，概括其作用和重要性，引起读者的兴趣。
其次是文章结构的说明，即介绍文章将按照怎样的框架和逻辑展开，以帮助读者理清文章的结构。
最后是目的的阐述，即明确本文的写作目的，让读者了解本文的意义和价值。
正文部分涵盖了两个方面的内容。
首先是羟丁酸脱氢酶的定义和功能，通过详细介绍其概念和作用机制，使读者对该酶有一个全面的认识。
α-HBDH,α-羟丁酸脱氢酶测定试剂盒(α-HBDH)检测标准操作规程
1、方法依据：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)测定试剂盒（DGKC法）测定方法2、适用范围：适用于人血清或血浆α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)的测定。
3、试剂仪器：3.1 试剂：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司原装试剂盒。
3.2未开启的试剂盒避光保存于2℃～8℃有效期为一年。
试剂开瓶后应避光保存，在2℃～8℃可稳定28天。
试剂不可冰冻。
3.3 仪器：迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪.4、操作程序4.1方法原理在α-HBDH催化作用下，α-酮丁酸被还原为α-羟丁酸，同时NADH被氧化为NAD+。
NAD+的生成引起340 nm处吸光度下降，下降速率与样品中α-HBDH的活性成正比。
α-HBDHα-酮丁酸 + NADH + H+ α-羟丁酸 + NAD+4.2样本要求新鲜血清、肝素抗凝或EDTA抗凝血浆，采集后及时测定，应避免溶血和污染。
样本于2℃～8℃保存可稳定3天。
4.3上机操作4.3.1试剂装载、校准、样品和质控血清分析操作详见“《迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪标准操作、维护、保养规程》”。
4.3.2 校准：4.3.2.1 标准液的准备：校准品使用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司配套冻干品，按说明书要求稀释后分装，-20℃冷冻保存，用前提前15分钟从冰箱中取出，复溶到室温后上机检测。
4.3.2.2 校准程序：首次使用校准。
当有以下情况时需重新校准：1）换试剂批号或出现质控漂移时；2）当仪器做完保养后；3）仪器进行零件更换时。
每次试验前用准备好的校准品进行校准，校准通过后进行检测。
4.3.2.3 质控：在标本开始之前做质控，质控通过后方能进行标本的检测。
4.3.3 测试基本参数4.4参考范围72～182 U/L（注：各实验室应有自己的参考范围。
）4.5 方法评价线性范围：10～1000U/L。
当样本测定值超过上限时，应将样本用生理盐水稀释，重新测定，结果乘以稀释倍数。
α-羟丁酸脱氢酶
α-羟丁酸脱氢酶α-羟丁酸脱氢酶介绍：α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)与LDH关系十分密切，实际上它是LDH同工酶Ⅰ型，因其对α-酮丁酸亲合力高，所以当以α-酮丁酸作为底物时，所测L DH的活性特称为α-羟丁酸脱氢酶活性。
α-HBDH测定方法主要有比色法和连续监测法。
α-羟丁酸脱氢酶正常值：(1)比色法：61～155U/L(37℃)。
(2)连续监测法：72～182U/L。
α-羟丁酸脱氢酶临床意义：α-HBDH的活性与LDH的活性变化一致，但更能反映LDH1的活性变化，其特异性比总LDH活性高。
与LDH、AST、CK、CK-MB构成心肌酶谱，对诊断心肌梗死更有意义。
(1)心肌梗死时α-HBDH活性明显升高，且维持时间较LDH长，LDH/α-HBDH比值(0.8～1.2)低于正常对照(1.2～1.6)。
(2)鉴别肝病和心脏病。
肝病和心脏病时LDH均可升高，但肝病时α-HBDH活性变化不大，LDH/α-HBDH比值可升高至1.6～2.5，而心脏疾病时α-HBDH则明显升高。
(3)营养不良、叶酸和维生素B12缺乏时，α-HBDH活性亦可升高。
α-羟丁酸脱氢酶注意事项：(1)比色法：①Rosalki及Wilkinson建立的α-HBDH测定方法是30℃的连续监测法，以国际单位(U/L)计算。
上述方法是37℃比色法，为使各方法间结果有更好的可比性，可转换成30℃连续监测法的相应单位。
37℃转换成30℃温度系数为0.87。
②因红细胞内该酶活性高，应在2h内及时分离血清，标本不能溶血。
4℃酶活性稳定不少于7天。
③可用EDTA(1mg/ml)、肝素(0.2mg/ml)抗凝血浆，草酸盐、枸橼酸钠、氟化物抗凝剂可抑制该酶活性。
(2)连续监测法：①此法是1980年由英国临床化学协会(ACB)推荐，其最适底物浓度为15mmol/L (25℃)，反应混合物的最终浓度：磷酸盐65.4mmol/L、NADH 0.2mmol/L、α-酮丁酸3.3mmol/L，样品容积组分比0.023。
α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)测定试剂盒(α-酮丁酸底物法)产品技术要求kemei
α-羟丁酸脱氢酶（HBDH）测定试剂盒（α-酮丁酸底物法）适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中α-羟丁酸脱氢酶（HBDH）的活性。
1.1包装规格试剂1:2×60ml 试剂2:2×15ml试剂1:5×60ml 试剂2:5×15ml1.2主要组成成分试剂1主要组分：α-酮丁酸钠 4.5mmol/L试剂2主要组分：NADH 1.45 mmol/L2.1外观2.1.1试剂1应为无色溶液，无混浊，无未溶解物。
2.1.2试剂2应为无色溶液，无混浊，无未溶解物。
2.2装量液体试剂的净含量应不少于标示值。
2.3试剂空白2.3.1试剂空白吸光度：α-HBDH试剂盒在波长340nm处测定试剂的吸光度值，应不小于1.1000。
2.3.2试剂空白吸光度变化率：α-HBDH试剂盒在波长340nm处测定试剂的空白吸光度变化率，每分钟的变化值应不大于0.002。
2.4分析灵敏度测试120U/L α-羟丁酸脱氢酶时，吸光度变化率应不小于0.01。
2.5准确度用本公司α-HBDH试剂盒和已上市公司α-HBDH试剂盒同时测定40个临床样本，用线性回归方法计算两组结果的线性相关系数（r2）应不小于0.95，在[25，1000]U/L区间内，线性相对偏差应不超过±10%。
2.6精密度2.6.1重复性重复测试（180±18）U/L的样本，所得结果的变异系数CV应不大于5%；2.6.2批间差测试（180±18）U/L的样本，所得结果的批间相对极差应不大于10%。
2.7线性范围α-HBDH试剂盒在[25,1000]U/L范围内，线性相关系数（r）应不小于0.990；a)在[25,100]U/L区间内，线性绝对偏差应不超过±10U/L；b)在（100,1000]U/L区间内，线性相对偏差应不超过±10%。
2.8稳定性原包装的试剂盒在2℃～8℃避光保存，有效期为12个月。
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目录
1. 检测原理
2. 标本采集与处理
2.1 受检者的准备
2.2 静脉采血
2.3 抗凝剂
2.4 标本处理
3. 试剂
3.1 试剂
3.2 校准血清
3.3 试剂、校准血清的稳定性
4. 仪器
5. 操作
6. 计算
7. 操作性能
7.1 精密度
7.2 准确度
7.3 灵敏度
7.4 可报告范围
7.5 特异性
7.6 干扰
8. 参考值
9. 临床意义
附录A: 参数
1. 检测原理
NADH在340nm波长有最大吸收，NADH生成NAD+的速率与血清中α-HBDH的活性成正比。
在34 0nm波长下测定NADH下降的速率，既吸光度下降的速率，既可测出α-HBDH的活力。
NADH +α-酮丁酸+ H+----------------α-羟基丁酸+ NAD+
2．标本采集与处理
2.1 受检者的准备：
病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。
应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.2 静脉采血：
除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
2.3 抗凝剂：
血浆使用肝素或EDTANa2（1mg/mL）作为抗凝剂。
2.4 标本处理：
血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。
3．试剂
3.1 试剂：
本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司HBDH试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：
3.2：校准血清
使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。
空白定标：每日需做试剂空白定标。
全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。
3.3 试剂、校准血清的稳定性：
原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。
18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。
当试剂空白吸光度低于1.0时，试剂按照失效处理。
多项校准血清在2-8℃储存至标签所示失效日期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，只可冻融一次，避免反复冻融。
参见校准血清说明书。
4．仪器
KONELAB 30型号仪器。
性能：波长340nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。
5．操作
样品为血清或肝素/EDTA抗凝血浆。
本法为速率法，参数见后附附录A。
试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。
6．计算
ΔA/min×Vt×1000
HBDH(U/L) = ----------------------------- = ΔA/min×F
e×Vs×d
式中：ΔA/min——每分钟吸光度变化率； e ——18.5 摩尔吸光系数；
Vt——反应液总体积（ml）；d ——1 比色杯光径（cm）；
1000——变化因数；Vs——标本体积（ml）；
7．操作性能
7.1 精密度：
批内CV<2.1%，批间CV<3.33%。
7.2 准确度：
检测结果的相对不准确度≤±10%。
7.3 灵敏度：
羟丁酸脱氢酶浓度为：200U/L时，吸光度变化率ΔA340nm/min为0.045～0.055。
7.4 可报告范围：
血清与试剂用量之比为1:24时，测定上限为400U/L。
测量值在给定值的90%-110％范围内。
7.6 干扰：
内源性干扰物为Hb1000mg/ml、TG 2000mg/ml、BIL 30mg/ml、VitC 300mg/ml对测试结果无明显影响。
8．参考值
74～140U/L。
9．临床意义
α-羟丁酸脱氢酶的活性定义为：当用α-酮丁酸作为底物时所获得的乳酸脱氢酶（LDH）的活性。
LDH-1较其它同工酶对α-酮丁酸有更大的亲合力，因此当用α-酮丁酸作为底物时，含LDH-1多的组织如血清、心肌、红血球等就具有较高的活性，即α-HBDH活性高；而肝、骨胳肌等具有较低的活性，即α-HBDH活性低。
常用α-HBDH来测量血清中LDH-1的活性。
α-HBDH与LDH、GOT、CK、CK-MB一起构成了心肌酶谱。
附录A: 参数。