大鼠急性酒精性肝脑损伤模型的建立

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五味子药用成分在鼠类生理生化及病理中的应用研究进展

万祥旭，黄笑然，周宝丽，等.五味子药用成分在鼠类生理生化及病理中的应用研究进展［J ］.中南农业科技，2023，44（3）：240-243．五味子（Schisandra chinensis ）属毛茛目木兰科植物。

果实亦称为五味子，古称荎蕏、玄及、会及，呈不规则的球形或扁球形，直径5~8mm ；表面红色、紫红色或暗红色，皱缩，显油润。

五味子味甘酸，是最早列于《神农本草经》的上品中药，药用价值高，性温滋力，入心、肺、肾经，具收敛固涩、益气生津等功效［1］。

学者对药用植物提取成分对动物生理生化功能的影响进行了研究。

本研究将中药五味子在啮齿动物生理生化及病理中的应用进行综述，可为其药品开发及鼠类饲养、疾病防治提供基础性依据。

1五味子对鼠类的抗肿瘤作用1.1五味子乙素对肿瘤患鼠的抑瘤作用五味子乙素（Schisandrin B ，Sch B ）是五味子的重要活性成分，经研究证实，Sch B 可以抑制SHG-44胶质肿瘤细胞的增殖［2］。

Li 等［3］研究发现，U251和U87胶质瘤细胞增殖也会被Sch B 所抑制，在不同给药量的情况下，对肿瘤细胞的抑制程度也不同，这反映出该抑制作用具浓度依赖性。

Sch B 同时也是诸多抗肿瘤药物的联合剂，范晓艳等［4］将Sch B 与类烷化剂的金属铂类化合物顺铂（Cisplatin ，CN ）进行联合，并将联合药物作用于H 22小鼠实体瘤，结果表明，药用组小鼠肿瘤细胞减少且大面积坏死。

除此之外，Sch B 还分别可与紫杉醇［5］和氟尿嘧啶［6］等药物相联合，以抑制肿瘤细胞的增殖。

1.2五味子多糖对肿瘤患鼠的抑瘤作用多糖为糖苷键所结合的糖链，是由不少于10个单糖构成的聚合糖高分子碳水化合物［7］。

五味子多糖（Fructus schisandrae polysaccharides ，FSP ）属中药多糖，具抑瘤功效。

王艳杰等［8］将FSP 作用于H 22肝癌移植瘤小鼠，结果表明，给药组小鼠肿瘤组织细胞中相应细胞器溶解性坏死，可见FSP 可以抑制小鼠H 22肝癌移植瘤的生长。

大鼠弥漫性脑损伤模型的具体方法及步骤

大鼠弥漫性脑损伤模型的具体方法及步骤(1)复制方法健康大鼠，雌雄不限，体重为300～350g。

1)落体撞击装置①有机玻璃管：长为2m、内径为19mm、外径为26mm的有机玻璃管，3点固定于墙上，其下端距地面15cm，以放海绵床和大鼠。

并在管壁上每10cm 钻一直径为5mm的小孔，对应两排，以减少空气阻力。

②打击垫片：直径为10mm、厚为3mm的圆形不锈钢片，用以制作弥漫性轴突损伤模型，另一种在其不锈钢垫片距中心2.5mm处钻一直径1.5mm的小孔，置入一不锈钢圆柱，使之高出垫片平面3mm以制作弥漫性脑损伤同时合并局灶性脑损伤动物模型。

2)脑损伤的方法大鼠经腹腔注射水合氯醛(按350～400mg/kg体重的剂量)或戊丨巴丨比丨妥丨钠(按50～60mg/kg体重的剂量)麻醉。

手术区域皮肤消毒，行气管插管，呼吸机辅助呼吸。

股动脉插管以记录动脉压，并监护心电、血压、脉搏、呼吸等变化。

将大鼠俯卧固定于一已知弹性系数的海绵床上，移至有机玻璃管下端，垫片正对有机玻璃管中央，有机玻璃管上方置一滑轮，在铜柱上端系一小绳，将滑轮调整至绳索跨过滑轮后铜柱处于有机玻璃管中央为止。

待动物开始苏醒，有肢体活动时，将400g重铜柱由1m 高处自由坠落于不锈钢垫片上，立即移开海绵床以免再次损伤，将大鼠移至手术台上接呼吸机给以呼吸支持。

观察打击中及打击前后动物的呼吸、心率及血压。

记录肢体活动、尿失禁、瞳孔改变及神经系统体征。

敲击后可选取3～24h间的时间段，快速断头取脑，记录蛛网膜下腔出血及肉眼所见的脑挫伤情况。

并将全脑浸泡于甲醛液中24h，固定好的脑作冠状切片，层厚2mm HE染色。

也可作心脑灌注，分别取左右顶叶皮层、海马、胼胝体、脑干等组织，处理后超薄切片，进行电镜观察。

(2)模型特点敲击后动物的死亡率在25％左右。

1)一般症状伤后动物表现为竖毛、尿失禁、四肢抽搐、单侧或双侧瞳孔散大、呼吸抑制等症状。

血压立即出现平均动脉压上升，然后是一段时间的低血压，并在30～60min内恢复到伤前水平。

改良四血管阻塞法建立大鼠缺血性脑损伤昏迷模型

ｏｅｏｇ，ｉｉｏｉｌＴｅＴｉｌｒｅｉｌｎｅｉ，ｈｎｑｇ４０３，ｈａｆＮｕｌｒｏｙＸｎａＨｓｔ，ｒＭｉｔＭｄａＵｉｒｔＣｏｇｉ００７Ｃｉｑｏｐａｈｈｄｉｙａｃｖｓｙｎｎ【ｂｔａｔＯｂｅｆｅＴｔｌｈａｋｄｏｉｅｌｓｈｍｃｂｉｕｙｃｍｏｅｉｒｓＭｅｏｓｂｓｇｏｒｅｓｌｃＡｓｃ】ｒｊｃｖｏｅａｉｉａｉｅｉｒｎｉｓｂｓｎｆｄｃａｒｏａｄｌｎａ．ｔｄｙｕｎｕｓ－ｍｔｈｉｆｖｅｏ
贾小兵叶建宁，露斯，李
（．三军医大学西南医院神经内科，庆４０３；．三军医大学新桥医院神经内科，庆４０３）１第重００８２第重００７
【要】目的制作一种较理想的大鼠缺血性脑损伤昏迷模型。方法通过用单纯四血管阻塞法和改良后的四血摘
ｉａｉｈｍｃｂａｊｒｃｍｏｅｉｔ．ｅｌＭｏｉｉｇｔｅｆｒｅｓｌｃｌｉｄｉｍｔ．０ｍｓｒｇｅｄｄｌｓｅｉｒｉｉｕｏａｍｌｎｒｓＲｓｔｅｅｎｎｙｄａｕｓｄｙｕｖｓｃｓｎａｄｄｅｒ６ｍｙｎｅｎｅｌｔｆｎｈｏｅｏｕｏａｅ０ｉｅｏ
管阻塞法分别＋直径０４、．００７ｍ注射器针头的“ 控线拴法 ” 由我室人员周振华建立 … ）各组在昏迷时间和．５０６、．０ｍ针（对病死率之间进行比较，以便寻找一种较理想的缺血性昏迷模型。结果改良后的四血管阻塞法＋０６ｍ针头 “ 控线．０ｍ针

改良小鼠酒精性肝损伤模型的建立

朱强王科钱晓锋饶建华王学浩李相成吕凌张峰
利用简易胃造
【要】目的摘
探索建立简便和稳定的酒精性肝病（Ｌ的动物模型。方法ＡＤ）
漏的方法，将实验动物分为四组，为正常小鼠（Ａ组ｎ＝１）Ｂ组为胃造瘘后给予生理盐水（２；ｎ＝１）Ｃ２；组为胃造瘘后给予酒精（８ｇ・ｇ・）＝２；１ｋ～ｄ（２）Ｄ组小鼠给予自制的ｚＱ液（２）ｎ＝２。实验动态观察ｌ，２周分别在第４周、、、２周测四组小鼠肝重、６周８周１体重值并检测肝脏ＡＴ和ＡＴ水平，ＬＳ同时收集肝脏标本经ＨＥ染色后光镜观察肝组织的结构变化。结果Ｃ组模型与Ａ组和Ｂ组比较也出现不同程度的肝脏损害，但损害的程度较Ｄ组轻。Ｄ组小鼠在４周开始出现了肝细胞脂肪变性，８周
（８ｇ・ｇ・ａ）（１ｋ～ｄｙｎ＝２）ｒｕｅｅｇｅｏｍａｅＺｕ（２；ＧｏｐＤｗｒｉＤｈｍｅｄＱｆｉｎ＝２）ｈｉｒＡＪａｄｖｌｄ２．ＴｅｌｅＩｎｖＴ
ＡＳｖｌｗｅｅｄｎｍｉａｌｎｔｒｄｆｒ１ｅｋ．ＴｅｍｏｓｒｍｖｒｒｕｒａｕｅｉｅＴｌｅｓｅｒｙａｃｌｍｏｉｅｏ２ｗｅｓｙｏｈｕｅｆｏｅｅｙｇｏｐｗｅｅｍｅｓｒｄｌｒｖｗｉｈ。ｂｄｅｇｔｎｅｅｔｄｌｖｌｏＴａｄＡＳｔｈ６，１ｅｋｅｐｃｉｅｙｗｈｎｔｅｌｅｅｇｔｏｙｗｉｈｄｄｔｃｅｅｅｓｆａＡＬｎＴａｅ４，８，２ｗｅｓｒｓｅｔｌｅｈｖｒｔｖｉｗｒｏｌｃｅｔｔｅｓｎｅｔ．Ｔｅｐｔｏｏｉｈｎｅｏｈｐｔｉｓｅｉｏｈｇｏｐａｂｅｖｄｅｅｃｌｔｄａｈａｌｉｅｍｅｈａｌｇｃｃａｇｆ，ｅａｉｔｕｎｂｔｒｕｓｗｓｏｓｒｅｈｃｓ

改良Feeney自由落体法建立大鼠创伤性脑损伤模型

改良Feeney自由落体法建立大鼠创伤性脑损伤模型高思淼;吴晓光;韩雪;许士奇;李葵花;彭勇【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2024(28)26【摘要】背景:目前关于Feeney自由落体创伤性脑损伤模型,探讨减轻开颅过程中持续磨骨损伤因素的文献较少。

目的:通过改变开颅骨窗方式改良创伤性脑损伤大鼠模型。

方法:将36只SD大鼠随机平均分成假手术组、模型组和改良模型组。

改良模型组造模过程中改良了开骨窗的方式,用小钻头磨骨钻低速2 m/s,在打击的损伤区域边缘打6-8个小孔,每圆孔直径为0.3-0.5 mm,感到空腔而不触及脑实质后立即抽出。

改良模型组和假手术组采用改良后的方法开骨窗,模型组按常规开骨窗方法,实施的打击参数相同改良模型组;假手术组不实施打击。

造模后第1天对大鼠进行mNSS评分;造模后第1,7天扫描T2WI磁共振成像,测量T2值;造模后第7天,苏木精-伊红染色病理切片观察脑组织形态学,并检测血液黏度和炎症因子白细胞介素6、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α水平。

结果与结论:①造模后第1天,模型组、改良模型组大鼠mNSS评分均高于假手术组(P<0.0001),改良模型组评分低于模型组(P<0.0001);②造模后第1,7天,模型组、改良模型组T2值均高于假手术组(P<0.05),改良模型组T2值低于模型组(P<0.05);③造模后第7天,模型组和改良模型组的血液黏度值、白细胞介素6、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α水平均高于假手术组(P<0.05),改良模型组白细胞介素6水平低于模型组(P<0.05);④基于Feeney自由落体法的创伤性脑损伤大鼠改良模型较好地控制了创伤性脑损伤大鼠造模中开颅骨的损伤因素。

【总页数】6页(P4164-4169)【作者】高思淼;吴晓光;韩雪;许士奇;李葵花;彭勇【作者单位】承德医学院河北省神经损伤与修复重点实验室;承德医学院生物医学工程系;承德医学院河北省医工结合国际研究中心;承德医学院附属医院神经内科;燕山大学电气工程学院;燕山大学河北省智能康复及神经调控重点实验室【正文语种】中文【中图分类】R496;R318;R-332【相关文献】1.大鼠脑损伤分级自由落体打击模型的建立2.改良四血管阻塞法建立大鼠缺血性脑损伤昏迷模型3.一种改良的创伤性脑损伤模型的建立4.Feeney法建立大鼠闭合性脑损伤模型及评估5.大鼠创伤性脑损伤模型的建立因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

大鼠体外循环模型的建立

大鼠体外循环模型的建立黑飞龙;高国栋;周荣华;龙村;温复兴;关彬;史世勇【期刊名称】《中国体外循环杂志》【年(卷),期】2006(4)4【摘要】目的建立大鼠体外循环(extracorporeal circulation,ECC)动物模型,为心血管外科ECC术后重要器官损伤,尤其是脑损伤的研究提供简单可靠、经济的实验平台.方法选用雄性SD大鼠,经右颈静脉、股静脉插管引流,股动脉插管灌注建立ECC.ECC 1 h,监测血流动力学指标及血气、电解质的变化.结果 ECC中动物血流动力学稳定,血气结果满意,完全符合满意ECC标准.停机后心血管和呼吸功能恢复顺利.结论利用特制动物实验膜肺,建立经右颈静脉、股静脉插管引流,股动脉插管灌注的大鼠体外循环模型,具有安全、稳定、简单、实用的特点,是进行与体外循环有关脏器损伤,尤其是脑损伤研究可靠的实验平台.【总页数】4页(P224-227)【作者】黑飞龙;高国栋;周荣华;龙村;温复兴;关彬;史世勇【作者单位】中国医学科学院,中国协和医科大学,阜外心血管病医院体外循环科,北京,100037;中国医学科学院,中国协和医科大学,阜外心血管病医院体外循环科,北京,100037;四川大学华西医院麻醉科,成都,610041;中国医学科学院,中国协和医科大学,阜外心血管病医院体外循环科,北京,100037;中国医学科学院,中国协和医科大学,阜外心血管病医院体外循环科,北京,100037;中国医学科学院,中国协和医科大学,阜外心血管病医院体外循环科,北京,100037;中国医学科学院,中国协和医科大学,阜外心血管病医院体外循环科,北京,100037【正文语种】中文【中图分类】R654.1【相关文献】1.大鼠体外循环脏器损伤模型的建立 [J], 李宗杰;刘凯;李德闽2.改良穿刺法建立大鼠无血预充非停跳体外循环后认知功能障碍模型 [J], 段铭杰;孙莹杰;郑翔;李思沁;屈鹏霞3.大鼠体外循环模型建立的研究进展 [J], 徐宁4.大鼠闭胸式体外循环模型的建立 [J], 薛剑锋;刘再英;周旋;温立勇5.心脏不停跳大鼠单肺体外循环肺损伤模型的建立 [J], 刘科宇; 张红; 何苗; 谢菲; 李倩; 于承坤因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

大鼠心肺复苏后脑损伤模型的建立

ｗｏｘｅｍｎ．ｅｕｔ：ｈｒｔｉｇｎｅｒｂａｎｆｌｔｎｍｌｗｒａｅｔｄ０ｓｃｎｓｆｒｕｃｊｃｏｆ％Ｋ１ｈｌｅｐｒｅｔＲｓｌＴｅｅｈｄｈａｅｔｇｌｈａｉａｅｅｒｓｏｄｔｉｉｅｔｎｏｅｉｓｂａｎａｔｉｏａｅｓｒｅ３ｅａｅｑｋｎｉ２Ｃ．
Ｗａｔｔｗｒｉｅｔｉ％Ｋ１ｕｃｌｔｉｄｃｒｔｉｇｎｒｉｒｓ：ｅｈｓａｄｍｅｎｐｏｈｉｐｉａａｉｓｓｒａｅｅｎｃｅｗｔ２ｅｒｓｊｄｈＣｉｙｏｎｕｅｅｈｄｃｄａａｒｔｔｎｃｅｔｂｏｎｓａ —ｎｃｅａｓｎｂｏｉｑｋｂａｎａａｃｅｈ — ｒｓｓ
Ａｆｅｂｏ１ｉｎｂｏｉｔｅｄｘｒｃｒｉｇａｒｃｖｒｄ，ｈｌｃｒｅｃｐｌｇａｂｃｍｅｆａｔｔｒｔｅｈｅｒｔｐｐｄｂｅｔｎｔｒａｕｔ０ｒｎａａｉｓｓ，ｈｅｔｏａｄｏｒｍｅｏｅｅｔｅｅｅｔｏｎｅｈａｏｒｍｅａｔａｌｅｎａｅｈａｔｓｏｅａｉｇ，ｆａｄｉｄｄｎｔｅｏｅ０ｎｔｉｒｃｖｒ６ｍｉａｔｒａａｏｉ．Ｔｈｅａｔｒａｂｏｄｒｓｕｅｅｃｎｄｕｃｌｏ０ｎｆｅｎｂｉｓｓｒｅｌｌｏｐｅｓｒｄｓｅｄｅｑｉｋｙｔｍｍＨｇａｔｒｔｅｃｒｉｃａｒｓｎｄｉｅｈａｄａｒｅｔａｆａｃｎｄｔｂｕ０ — ９ｍＨｇ１ｒｉｆｅｎａｏｉ．ｔｍａｏｏｙｅａｉａｉｎｓｏｄｈｔｔｅｅｒ．ｕｇａｄｂａｎｒｓｎｅｓｅｄｅｏａｏｔ８０ｍ０ａｎａｔｒａｂｉｓｓＰａｈｅｔｌｇｘｍｎｔｏｈｗｅｔａｈｈａ１ｎｎｒｉｐｅｅｔｄｔｉｅｅｅａｎｘｃｄｓｈｍｉｎｄａｏｉａｍａｅ６ｍｉｆｅａｄａｒｅｔｔｅｒｎｕｎｍａｅｄｄｎｏｖｂｉｕｌｉｒｖｍｅｔａｄｔｒｉｇｎａｔｒｃｒｉｃａｓ，ｈｅｈａｔａｄｈｇｄａｇｉｔｈａｅｏｖｏｓｙｍｐｏｅｎｎｈｅｂａｎ

新生大鼠缺氧性脑损伤模型的建立及评价

新生大鼠缺氧性脑损伤模型的建立及评价李玉宇;徐剑文【摘要】目的模拟新生儿出生窒息,建立新生大鼠缺氧性脑损伤模型.方法将新生大鼠短暂置于100％氮气环境中,建立出生窒息的模型.18只新生大鼠随机分为对照组、缺氧10 min组、缺氧20 min组,采用神经行为学观察、Nissl染色及透射电镜观察脑组织病理变化等方法,评价动物模型的可靠性.结果缺氧过程新生大鼠均出现全身紫绀、意识障碍等精神行为的异常.Nissl染色可见缺氧10 min海马CA1区部分神经元肿胀,缺氧20 min神经元损伤加重.尼氏染色阳性细胞数量缺氧10 min组低于对照组(P＜0.05),缺氧20 min组显著低于对照组(P＜0.01).超微结构显示:缺氧10 min神经元出现染色质边集,微血管内皮细胞空泡变性;缺氧20 min神经元坏死,核溶解,细胞器模糊不清.微血管周围星胶细胞脚板、细胞突起均肿胀.结论新生大鼠短暂置于100％氮气中,可建立简便可靠的新生鼠缺氧性脑损伤模型.%Objective To establish a rat model mimicking the brain injury caused by neonatal hypoxia.Methods Neonatal rats were transiently exposed to 100％ nitrogen gas.Eighteen rats were randomly divided into normal control group,10 min hypoxia group and 20 min hypoxia group.The reliability of the model was evaluated by behavior analysis and pathological examination of the brain tissues by means of Nissl staining and transmission electron microscopy.Results Transient hypoxia in neonatal rats resulted in systemic cyanosis,abnormal mental behavior and conscious disturbance.Nissl staining showed that hypoxia for 10 min led to the swelling of the partial neurons in the hippocampal CA1 region and that hypoxia for 20 min caused the neuron injury more pared withnormal control group,the number of Nissl staining positive cells was decreased in 10 min hypoxia group(P ＜ 0.05) and 20 min hypoxia group (P ＜ 0.01).Ultrastructure of the neurons revealed the margination of chromatin and the vacuolar degeneration of microvascular endothelial cells during 10 min of hypoxia.Also the neuron necrosis was observed in 20 min hypoxia group,featured by dissolved nuclei,indistinct organelles,and the swelling of both baseboard and processes of astrocytes.Conclusion A simple and reliable animal model of hypoxic brain injury is successfully established by transient exposure of neonatal rats to 100％ nitrogen gas.【期刊名称】《山西医科大学学报》【年(卷),期】2017(048)008【总页数】5页(P795-799)【关键词】缺氧;动物模型;脑损伤;Nissl染色;透射电镜;大鼠【作者】李玉宇;徐剑文【作者单位】福建医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系,神经生物中心,福州350108;三明职业技术学院医护学院解剖生理教研室;福建医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系,神经生物中心,福州350108【正文语种】中文【中图分类】R-332胎儿窘迫与新生儿窒息是导致新生儿缺氧性脑损伤的主要因素,严重威胁着新生儿的生命和健康,可造成新生儿学习能力降低、运动障碍和智能低下等永久性神经功能的损害[1]。

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大鼠急性酒精性肝脑损伤模型的建立刘青青;李永儒;李高婷;刘浪飘;杨一;彭云;杨艳【摘要】目的:探索建立简便有效的大鼠急性酒精性肝脑损伤动物模型.方法:将SD 大鼠随机分成对照组和模型组,模型组大鼠以52°白酒进行灌胃,第1天的灌胃剂量为7ml/kg,随后1周的灌胃剂量为10ml/kg,对照组灌胃等体积水.实验结束后,对大鼠进行体重增长幅度、肝指数计算,检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性、甘油三酯(TG)含量及肝脑组织中丙二醛(MDA)含量、总超氧化物歧化酶(SOD)活性,脑组织中钙离子(Ca2+)含量、ATP酶活性.结果:与对照组比较,模型组大鼠的体重增长幅度显著降低,血清中ALT、AST和TG显著升高,肝指数、肝脑组织MDA含量显著升高,而SOD活性显著降低,脑Ca2+含量显著升高、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性明显降低(P<0.001).结论:实验成功有效地在短时间内建立了大鼠急性酒精性肝脑损伤模型,可应用于护肝醒脑保健食品药品的评价研究.【期刊名称】《医学理论与实践》【年(卷),期】2018(031)016【总页数】3页(P2373-2375)【关键词】急性酒精性肝脑损伤;大鼠;动物模型【作者】刘青青;李永儒;李高婷;刘浪飘;杨一;彭云;杨艳【作者单位】西南医科大学公共卫生学院营养与食品卫生教研室,四川省泸州市646000;西南医科大学公共卫生学院营养与食品卫生教研室,四川省泸州市646000;西南医科大学公共卫生学院预防医学专业;西南医科大学公共卫生学院预防医学专业;西南医科大学公共卫生学院预防医学专业;西南医科大学公共卫生学院预防医学专业;西南医科大学公共卫生学院营养与食品卫生教研室,四川省泸州市 646000【正文语种】中文【中图分类】R575酒精性肝损伤又称酒精性肝病(Alcoholic liver disease，ALD)是由于长期大量饮酒所致的慢性肝病。

初期通常表现为脂肪肝，进而可发展成酒精性肝炎、酒精性肝纤维化和酒精性肝硬化；严重酗酒时可诱发广泛肝细胞坏死甚至肝功能衰竭。

近年来随着我国社会经济的发展和生活水平的提高，酗酒和高脂饮食对身体健康尤其对肝脏的损害日益显现，酒精性肝病和脂肪肝的发病率也明显增高[1]。

作为一种亲脂性小分子毒性物质，酒精对中枢神经和周围神经也可造成损伤，尤其容易透过血脑屏障作用于脑部，造成大脑神经细胞的损伤[2]。

因此，为探究酒精性肝脑损伤的发病机制，预防其发生而构建简便有效的酒精性肝脑损伤模型十分重要。

本实验通过大鼠胃灌注高度白酒，检测观察大鼠体重和生化指标变化，构建急性大鼠酒精性肝脑损伤模型，以期为后续护肝醒脑食品药品的评价及大鼠肝脑损伤保护机制的研究创造成功的动物模型。

1 材料与方法1.1 实验动物 SD大鼠22只，雄性，体重180～200g，由西南医科大学实验动物中心提供。

实验动物生产许可证SCXK(川)2013-17；实验动物使用许可证SYXK(川)2013-065。

1.2 仪器与试剂 (1)试剂。

52°红星二锅头，北京红星股份有限公司。

谷丙转氨酶(Alanine transarninase，ALT)(C001-e)、谷草转氨酶(Aspartate transarninase，AST)、总蛋白(TP)、甘油三酯(Triglyceride，TG)(A111-1)、总超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase，SOD)、丙二醛(Malondialdehyde，MDA)、钙离子(Ca2+)、ATP酶测定试剂盒购自南京建成生物工程研究所。

(2)仪器。

SELECTRA Junior全自动生化分析仪(荷兰威图公司)，Versamax连续波长酶标仪(美国分子仪器公司)，5810R冷冻型台式大容量高速离心机(德国eppendorf公司)，LD4-2A型台式低速离心机(北京众益中和生物技术有限公司)，数显恒温水浴锅(HH-8常州国华电器有限公司)，GI54DWS全自动高压灭菌器(美国致微仪器股份有限公司)，LRH-150生化培养箱(上海一恒科学仪器有限公司)，DHG-9240A鼓风干燥箱(上海一恒科学仪器有限公司)。

1.3 方法1.3.1 分组及造模：将22只SD大鼠随机分成对照组10只和模型组12只，适应性喂养一段时间，待大鼠体重达到(220±20)g开始正式实验。

模型组的大鼠以52°白酒进行灌胃，第1天的灌胃剂量为7ml/kg，随后以10ml/kg灌胃持续1周；对照组灌胃等体积水。

1.3.2 取材及样本制备、指标检测：末次灌胃后禁食、禁饮12～16h，大鼠按体重腹腔注射1%戊巴比妥钠40mg/kg(4.0ml/kg)麻醉，腹主动脉采血，3000r/min离心10min，取血清。

取血后立即处死大鼠，取肝脏用生理盐水漂洗，滤纸拭干，称重。

精确称量肝脑组织块制备 10%匀浆液，低温3 000r/min离心10min，取上清液。

取血清和肝脑匀浆液按试剂盒说明分别检测ALT、AST、TG、TC、TP和MDA、SOD、Ca2+、ATP酶。

体重增长幅度=(终体重-初始体重)/初始体重×100%。

肝指数=肝脏重量/体重×100%。

1.4 统计学方法采用SPSS17.0软件进行数据分析，计量资料采用均数±标准差表示，两样本均数比较用t检验。

以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果2.1 一般结果对照组大鼠毛发光泽，精神状态活跃，食欲良好。

模型组大鼠毛发暗黄，精神状态欠佳，酒精灌胃后偶显翻正反射阳性。

实验期间由于灌胃不当，致模型组2只大鼠死亡。

2.2 酒精对大鼠体重变化幅度及肝指数的影响模型组大鼠体重增长幅度显著低于对照组，肝指数高于对照组(P<0.001)。

见表1。

表1 酒精对大鼠体重增长幅度及肝指数的影响组别体重增长幅度(%)肝指数(%)对照组60.48±6.733.32±0.23模型组37.62±9.403.79±0.242.3 酒精对大鼠血清ALT、AST、TG的影响与对照组比较，模型组血清ALT、AST、TG水平均有显著升高 (P<0.001)。

见表2。

表2 酒精对大鼠血清ALT、AST、TG的影响组别ALT(U/L)AST(U/L)TG(mmol/ L)对照组37.48±4.34154.36±13.180.30±0.06模型组54.71±8.35195.59±10.700.62±0.212.4 酒精对大鼠急性酒精性肝损伤模型肝脑匀浆MDA、SOD的影响与对照组相比，模型组肝脑匀浆MDA含量显著升高、SOD活性明显降低 (P<0.001)。

见表3。

表3 酒精对大鼠肝脑匀浆MDA、SOD的影响组别肝匀浆MDA(nmol/mgport)SOD(U/mgport)脑匀浆MDA(nmol/mgport)SOD(U/mgport)对照组7.05±0.62350.01±31.423.15±0.84300.55±18.54模型组10.37±1.14275.49±21.996.76±0.66209.28±18.052.5 酒精对大鼠急性酒精性肝损伤模型脑匀浆Ca2+、Ca2+-Mg2+-ATP酶的影响与对照组相比，模型组脑匀浆Ca2+含量显著升高、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性明显降低 (P<0.001)，见表4。

表4 酒精对大鼠肝脑匀浆Ca2+、Ca2+-Mg2+-ATP酶的影响组别Ca2+(mmol/gprot)Ca2+-Mg2+-ATP酶活力(μmolPi/mgprot/hour)正常组0.05±0.011.01±0.09模型组0.10±0.010.59±0.063 讨论随着我国社会经济发展，酒精性肝病的发病率呈逐年上升趋势，预防和治疗酒精性肝病也成为临床工作者研究的重要课题。

这就要求探究酒精性肝病的发病机制及其病理变化，由此需要大量的实验动物模型，尤其是大鼠酒精性肝损伤模型。

因此，寻找合适的大鼠模型至关重要。

目前国外广为人知的大鼠酒精性肝损伤模型有Tsukamoto-French模型、Lieber-DeCarli模型等[3-4]，Tsukamoto-French模型操作上需要特殊设备技术、成本昂贵，不便于广泛使用；Lieber-DeCarli模型虽然造模稳定但也有耗时太长等不足。

国内学者制作酒精性肝损伤模型多数基于赵静波等[5-7]方式，预实验采用上述方式，7ml/(kg·次)，2次/d空腹灌胃高浓度白酒制作大鼠急性酒精性肝损伤模型，大鼠死亡率高；同时预实验病理学观察发现在造成大鼠肝损伤的同时，脑损伤的病理表现较明显。

有文献报道，在制作大鼠酒精性肝损伤模型时采用梯度浓度酒精进行性灌胃的方法可以减少大鼠死亡率[8]。

为降低大鼠死亡率，采用以下灌胃方式：第1天以7ml/kg的剂量空腹灌胃，第2～8天增加到10ml/kg空腹灌胃，通过梯度灌胃，提高存活率，以期在急性大鼠酒精性肝损伤模型的基础上造成脑损伤。

正常情况下，肝组织中的ALT主要存在于细胞浆中，AST主要存在于细胞浆和线粒体中，当脂质过氧化使肝细胞受到损害坏死时，ALT、AST释放入血，使得血清中ALT、AST含量升高。

因此，血清中ALT、AST含量可反映肝细胞受损伤程度[9]。

同时，酒精会促进TG合成，从而使肝脏脂肪沉积导致脂肪肝。

酒精尚可影响胃酸分泌、损伤胃黏膜、影响胃动力[10]，进而食欲不振，影响机体生长发育，体重增长缓慢。

实验显示，模型组血清体重增长幅度降低，肝指数增加，ALT、AST、TG含量升高，说明肝细胞受损，出现脂肪代谢紊乱，肝由于脂肪沉积出现肿大，酒精影响机体导致体重增长缓慢。

酒精进入人体经代谢产生乙醛，后者经黄嘌呤氧化酶作用转化为超氧化物，与酒精诱导肝脏P450酶代谢产生的大量活性氧均可引发脂质过氧化，MDA是脂质过氧化的终产物，能严重损害生物膜及其功能，可作为反映机体脂质过氧化程度的指标[11]。

大量的活性氧消耗大量的抗氧化物质，包括超氧化物歧化酶SOD，使SOD 活性降低。

实验显示，模型组肝脑匀浆MDA含量显著升高、SOD活性明显降低，肝脑组织抗氧化能力下降，脂质过氧化程度加深，酒精造成了肝脑组织的氧化损伤。

乙醇代谢产生氧自由基增多、细胞氧化应激增强，不饱和脂肪酸发生脂质过氧化反应，导致线粒体膜损伤和通透性的改变而诱发细胞损伤[12]。

ATP 酶是存在于组织细胞及细胞器生物膜上的一种蛋白酶，神经元细胞膜内外的正常离子梯度有赖于ATP酶的主动转运进行各种离子交换。