微生物药敏
全自动微生物药敏原理
全自动微生物药敏原理一、微生物分离与鉴定全自动微生物药敏试验首先需要对微生物进行分离与鉴定。
这一步骤通常包括以下几种方法：1. 直接涂片法：将标本直接涂片，然后用显微镜观察微生物形态，种类和数量，以便进行初步的诊断和药敏试验。
2. 分离培养法：将标本接种到培养基上，经过一定时间的培养，使得微生物在培养基上繁殖，并且形成肉眼可见的菌落。
根据菌落的形态，颜色，大小等特征，可以对微生物进行鉴定。
3. 免疫学方法：利用抗原-抗体反应的特异性，对微生物进行鉴定。
这种方法具有快速、准确、灵敏度高等优点，但需要使用抗体，成本较高。
4. 分子生物学方法：利用DNA探针、PCR等技术对微生物进行鉴定。
这种方法具有高灵敏度、高特异性等优点，但需要使用昂贵的仪器和试剂。
二、药敏试验在完成微生物分离与鉴定后，需要进行药敏试验。
药敏试验的目的是测定微生物对各种抗生素的敏感程度，以便选择最合适的抗生素进行治疗。
药敏试验的方法通常包括以下几种：1. 纸片扩散法：将含有不同抗生素的药敏纸片贴在培养基上，观察细菌的生长情况。
如果细菌对某种抗生素敏感，则在药敏纸片周围会出现抑菌圈。
通过比较不同药敏纸片周围的抑菌圈大小，可以判断细菌对各种抗生素的敏感程度。
2. 稀释法：将细菌接种在含有不同浓度的抗生素的培养基上，观察细菌的生长情况。
通过比较不同浓度抗生素下细菌的生长情况，可以判断细菌对各种抗生素的敏感程度。
3. E-test法：将含有一定浓度抗生素的E-test试纸贴在培养基上，观察细菌的生长情况。
如果细菌对某种抗生素敏感，则在E-test试纸周围会出现明显的抑菌圈。
通过比较不同E-test试纸周围的抑菌圈大小，可以判断细菌对各种抗生素的敏感程度。
三、数据分析完成药敏试验后，需要对试验数据进行统计分析。
数据分析的方法通常包括以下几种：1. 定量分析：将药敏试验数据转化为定量指标，如敏感率、耐药率、中介率等。
这些指标可以反映微生物对各种抗生素的敏感程度，为临床治疗提供参考。
微生物检验 第三章 药敏试验
绿脓和非肠杆菌科 头孢他啶，庆大霉素 替卡西林，哌拉西林 阿米卡星 头孢吡肟，头孢哌酮 氨曲南 环丙沙星，亚胺培南 替卡西林/克拉维酸 妥布霉素，复方磺胺 头孢曲松 氯霉素，奈替米星
三级
常规测试并报告的药物分组(2)
葡萄球菌
一级 林 二级
三级
肠球菌
青霉素，氨苄西
万古霉素 庆大霉素
苯唑西林，青霉素
红霉素类 克林霉素，万古霉素 氯霉素
• 或治疗研究显示药物对分离菌株的临床疗效不可靠。
中 介（intermediate , I）
是指抗菌药物处于敏感与耐药之间，加大剂量有 可能敏感。即抗菌药物在生理浓集的部位具有临 床效力，还包括一个缓冲区，以避免微小的、不 能控制的技术因素造成重大的结果解释错误。
药代动力学和药效学
• 药代动力学：药物吸收，分布，代谢，排泄 • 药效学：药物对机体的作用
推测其他药物的敏感
• 青霉素G
• 头孢噻吩 • 奈啶酸
2015-7-10
葡萄球菌
氨苄西林，美洛西林
替卡西林
肠杆菌科
头孢拉定，头孢氨苄 头孢克罗
肠杆菌科 所有
所有氟喹诺酮类 替考拉宁
16
• 万古霉素
药敏试验-稀释法
• 以一定浓度的抗菌药物与含有被试菌株的培养基 进行一系列不同倍数稀释（通常为双倍稀释）， 经培养后观察其最低抑菌浓度。
• 时间依赖型：β-内酰胺类，大环内酯类 • 浓度依赖型：氨基糖苷类、喹诺酮类 – 这些参数可用于计算具有最佳药效的给药方案
药敏试验的方法学
• 半定量…纸片扩散法 (抑菌圈直径) • MIC法：
– 肉汤稀释法 – 琼脂稀释法
– 自动化仪法
– 抗生素连续梯度法 (Etest )
微生物实验 药物敏感实验
微生物药物敏感实验
⏹一、实验目的
⏹1、熟悉和掌握圆纸片扩散法检测细菌对抗菌药物敏感性的操作程序和结果判断方
法。
⏹2、了解药敏试验在实际生产中的重要意义
二、实验原理
⏹将含有定量抗菌药物的纸片（药敏纸片）贴在已接种待检菌的琼脂平板表面特定部
位。
药物借其分子的扩散力向周围琼脂中扩散，形成了随着离纸片距离加大，琼脂中的药物浓度逐渐减少的梯度浓度。
其纸片周围一定区域琼脂内的药物浓度高于抑制待检菌所需浓度时，则该区域内细胞不能生长，形成透明抑制圈。
抑菌圈的大小可以反映待检对测定药物的敏感程度，抑菌圈愈大，说明该菌对此药物越敏感三、实验器材
⏹1．菌种大肠埃希菌。
⏹2．培养基牛肉膏蛋白胨培养基。
⏹3．试剂无菌生理盐水，抗菌药物纸片：
包括青霉素、氨苄西林、土霉素、链霉素等。
⏹4．其他无菌棉拭子、镊子、毫米尺、接种环。
四、实验方法和步骤
⏹1．菌液制备
菌浓合适，一般为106
⏹2．接种
细菌悬液制备后15min内接种至倒好的牛肉膏蛋白胨培养基平板中，接种量0.1-0.2mL。
涂布均匀。
⏹3．贴药敏纸片
⏹涂布后的平板在室温下干燥3~5min，用纸片分配器或无菌镊子将纸片贴于琼脂表面
并轻压，使纸片与琼脂表面完成接触。
各纸片中心相距应大于24mm，纸片贴上后就不能再移动位置。
⏹4．培养
⏹将平板倒置放入37℃培养箱培养，16~18h读取结果。
五、实验结果
六、思考题
⏹ 1.圆纸片药敏试验操作时应注意什么事项？
⏹ 2. 试述药敏试验的意义。
微生物药敏试验报告
微生物药敏试验报告
实验目的
本实验的主要目的是通过微生物药敏试验的方法，验证不同的抗生素对于待测微生物的敏感性，从而为临床提供正确的治疗建议。
实验流程
1. 选择待测微生物，通过培养、鉴定等方法进行检测，确保其为目标微生物。
2. 制作药敏板，将不同种类的抗生素均匀涂于药敏板上。
3. 用无菌环针将待测微生物接种于药敏板上，并在孵化器中进行培养。
4. 观察不同药物对于待测微生物的作用，记录生长情况并进行分析。
实验结果
经过实验我们得到以下结论：
1. 对于待测微生物A，抗生素B和C具有明显的抑菌作用，而抗生素D和E的作用较弱。
2. 对于待测微生物B，抗生素E和F具有显著的抑菌作用，而抗生素C和D对其作用较弱。
3. 对于待测微生物C，抗生素D和F表现出明显的抑菌作用，而抗生素A和B均未能抑制其生长。
综上所述，我们可以根据不同微生物对不同抗生素的敏感性，制定正确的治疗方案，使病情得到良好的控制和治疗。
注意事项
1. 实验过程中需要严格遵守多种操作规范，包括无菌操作、药
品使用、实验器材处理等。
2. 需要注意安全卫生问题，避免不必要的生化反应产生。
3. 实验记录需要详实、准确，方便日后的查询和参考。
结论
微生物药敏试验是临床治疗中必不可少的一项检测项目。
通过
在不同情况下，微生物对于不同抗生素的敏感性变化的比较，可
以为医生提供正确的治疗方案，降低治疗过程中的风险和复杂性。
建议今后在实验过程中，我们需要依然保持严格的操作规范，
不断摸索出更为精确的试验方法，提高诊疗效果，为患者带来更
优质的服务。
微生物药敏测试题及答案
微生物药敏测试题及答案一、选择题1. 微生物药敏测试中，下列哪种微生物通常不被考虑？A. 细菌B. 真菌C. 病毒D. 原生动物答案：C2. 药敏测试中，下列哪种抗生素是针对革兰氏阳性菌的？A. 青霉素B. 四环素C. 氯霉素D. 阿米卡星答案：A3. 在药敏测试中，下列哪种方法是用来确定抗生素最小抑制浓度的？A. 纸片扩散法B. 稀释法C. 琼脂扩散法D. E-test答案：D二、填空题1. 微生物药敏测试的目的是确定______对特定抗生素的敏感性。
答案：微生物2. 药敏测试中，______是指能够抑制微生物生长的最低药物浓度。
答案：最小抑制浓度（MIC）3. 药敏测试的结果通常用______来表示。
答案：敏感、中介、耐药三、简答题1. 简述微生物药敏测试的临床意义。
答案：微生物药敏测试的临床意义在于指导临床合理使用抗生素，减少抗生素滥用，控制耐药性的发展，提高治疗效果，减少患者治疗成本。
2. 描述药敏测试中纸片扩散法的基本原理。
答案：纸片扩散法的基本原理是将含有固定浓度抗生素的纸片放置在接种了测试菌株的琼脂平板上，抗生素会从纸片中扩散到琼脂中，形成一个浓度梯度。
在抗生素的有效浓度范围内，微生物的生长会被抑制，形成一个清晰的抑菌圈。
通过测量抑菌圈的直径，可以判断微生物对抗生素的敏感性。
四、论述题1. 论述微生物药敏测试在感染性疾病治疗中的作用。
答案：微生物药敏测试在感染性疾病治疗中起着至关重要的作用。
首先，它可以帮助医生确定感染是由哪种微生物引起的，这对于选择正确的抗生素至关重要。
其次，通过药敏测试，可以了解特定微生物对不同抗生素的敏感性，从而为临床提供个性化的治疗方案。
此外，药敏测试有助于监测和控制抗生素耐药性的发展，通过合理使用抗生素，减少耐药菌株的出现。
最后，药敏测试可以减少不必要的抗生素使用，降低患者的治疗成本，同时减少抗生素对环境的影响。
微生物药敏报告解读
微生物药敏报告解读微生物药敏报告是指对分离出的微生物进行抗生素敏感性测试，以确定该菌株对不同抗生素的敏感性结果。
该报告通常包含了微生物的鉴定结果，以及针对不同类型抗生素的敏感性测试结果。
然而，报告中的信息并不总是易于理解，因此，需要认真解读报告，以便正确选择合适的治疗方法。
微生物鉴定结果首先，报告中通常会提供微生物的鉴定结果，如菌属、菌种及形态学特征等。
这些信息对于确定菌株的特性以及可能引起的感染类型非常重要。
例如，耐药性较强的细菌，如金黄色葡萄球菌和鲍曼不动杆菌，往往需要使用更强效的抗生素治疗。
抗生素敏感性结果微生物药敏报告中最重要的信息是针对不同类型抗生素的敏感性测试结果。
一般来说，抗生素敏感性测试通常分为以下几个类别：1.敏感(S)：该菌株对该抗生素有高度敏感性，并有望对其治疗。
2.中度敏感(I)：菌株对抗生素的敏感性存在一定程度的变化，但仍有机会对其治疗。
3.耐药(R)：该菌株对该抗生素存在耐药性，这意味着该抗生素治疗该菌株无效。
4.不敏感(NC)：表示对该类抗生素不做出反应，该结果通常是由于菌株并不具备这类药物敏感性。
选择治疗方法基于微生物药敏报告结果，医生和临床医师可以采用合适的抗生素治疗方案。
但需要注意的是，在选择治疗方法时，仅仅依赖药敏报告是不够的。
医生还需要考虑病人的年龄、健康状况、过往药物使用记录，以及可能出现的副作用等方面因素。
此外，一些细菌具有多重耐药性，也就是同时对多种抗生素产生耐药，这种情况下，通常需要使用复合方案进行治疗。
总结微生物药敏报告对预防和治疗感染非常重要。
针对不同微生物对抗生素敏感性测试的结果，可以帮助医生和临床医师选择合适的抗生素治疗方案。
然而，在选择治疗方法时，还需要考虑病人的疾病特点和治疗史，并依据医学知识和经验，采取恰当的复合方案，以确保最佳的治疗效果。
微生物药敏结果临床解读与应用
微生物药敏结果临床解读与应用微生物药敏试验（Antimicrobial Susceptibility Testing, AST）是一种用来检测微生物（如细菌）对特定抗生素的敏感性的实验。
这种测试的结果对于指导临床治疗尤为重要，特别是在处理细菌感染时。
以下是微生物药敏结果的临床解读和应用：一、临床解读：1.敏感（Sensitive, S）：●如果细菌对某种抗生素敏感，这意味着这种抗生素在临床上可以有效抑制或杀死这种细菌。
●在选择治疗方案时，敏感的抗生素通常是首选。
2.中间敏感（Intermediate, I）：●中间敏感意味着抗生素对细菌有一定的抑制作用，但效果不如敏感类别中的抗生素。
●在某些情况下，如果药物浓度增加或药物累积，中间敏感的抗生素也可能有效。
3.耐药（Resistant, R）：●耐药表示细菌对某种抗生素具有抵抗力，常规剂量的抗生素无法有效控制或杀死这种细菌。
●应避免使用对该细菌耐药的抗生素。
二、应用：1.制定治疗计划：●药敏测试结果是制定抗生素治疗方案的重要依据，有助于选择最有效的抗生素。
●这有助于提高治疗效果，同时减少抗药性的发展。
2.调整治疗方案：●如果患者对初步治疗没有反应，药敏结果可以用来调整治疗方案。
●在长期或复杂的感染治疗中，根据药敏结果定期调整抗生素选择是常见的做法。
3.监测抗药性发展：●药敏测试可以帮助监测特定地区或医院内细菌抗药性的趋势。
●这对于公共卫生管理和抗生素使用指南的制定具有重要意义。
4.避免抗生素滥用：●通过准确的药敏测试，可以避免不必要或无效的抗生素使用，从而降低抗药性风险。
5.个体化治疗：●药敏测试结果有助于实现针对特定患者和感染的个体化治疗。
三、注意事项：1.临床医生需要结合患者的具体情况（如感染部位、患者的免疫状态、过敏历史等）来解读药敏测试结果。
2.在某些情况下，可能需要结合其他微生物学和临床数据来做出最终的治疗决策。
3.定期更新和审视药敏测试技术和标准，以确保结果的准确性和可靠性。
临床微生物的鉴定与药敏
加强耐药监测
医疗机构应建立耐药监测系统 ，对临床分离的细菌进行耐药 性监测，及时发现和报告耐药 菌株。
提高感染控制水平
医疗机构应加强感染控制措施 ，如手卫生、隔离患者、环境 清洁等，以减少耐药细菌的传 播。
研发新型抗生素
鼓励和支持科研机构和企业研 发新型抗生素，以应对日益严
重的细菌耐药性问题。
全基因组测序在临床微生物鉴定中的应用
总结词
全基因组测序技术能够提供微生物的全 基因组信息，对于鉴定未知病原微生物 和了解其基因组变异具有重要意义。
VS
详细描述
全基因组测序技术通过直接测定微生物基 因组的序列，能够全面了解微生物的基因 组结构和变异情况，从而鉴定出未知病原 微生物。该技术还能够发现微生物对抗生 素的耐药基因，为临床治疗提供重要参考 。
通过检测微生物中特定酶的活性，判 断其生化特性，进而鉴定微生物种类 。
代谢产物分析
分析微生物在生化反应中产生的代谢 产物，如糖类、脂肪、蛋白质等，进 行鉴定。
微生物的分子生物学鉴定
DNA指纹技术
利用限制性内切酶切割DNA，形成独特的DNA指纹图谱，用于鉴定微生物种 类。
基因测序
对微生物的基因组进行测序，通过比对已知基因序列，确定微生物的种属和亚 种。
人工智能在临床微生物药敏试验中的应用
总结词
人工智能技术能够通过分析微生物的药敏试 验数据，快速预测出微生物对不同药物的敏 感性，为临床治疗提供精准用药方案。
详细描述
人工智能技术通过机器学习和深度学习算法 ，对大量药敏试验数据进行训练和学习，从 而建立起预测模型。该模型可以根据新的药 敏试验数据，快速预测出微生物对不同药物 的敏感性，为临床医生提供精准用药方案。 人工智能技术的应用能够提高药敏试验的准
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目录 • 一、标本的采集 • 二、培养与鉴定 • 三、药敏结果
一、标本的采集
血液标本
1、血培养适应症：发热（＞38℃）、体温（＜36℃）、
白细胞增多、粒细胞减少、低血压、局部感染、突发精神 萎靡的儿童或老年人 2、最佳采血时机：（1）使用抗菌药物之前 （2）在寒战和发热起初时 每次要求从不同部位采集2~3套标本，每套包括一个需氧瓶 和一个需氧瓶，成人（5~10ml）婴儿（1~2ml）。每份血 培养间隔时间不超过30min
• 咽拭标本
用无菌棉拭子轻轻擦拭患者鼻咽部黏膜，留取标本，置 无菌试管内送检（立即）。
二、培养与鉴定
• 1、接种 分区划线分离法：先将标本均匀涂布于平板表面边缘一小 区（第一区内），约占平板1/5面积，再在二三…区依次 连续划线，以获得单个菌落。 • 2、培养 在35℃,5%CO2下孵育18~24h。
口，以减少常居菌的污染，应从气管深部咳出痰，吐入无 菌容器内。 （2）支气管喉镜或支气管毛刷，由医生采 集，建议直接输送培养基。
连送3日
• 便标本
自然排便后，挑取其脓血，黏液部分2~3g，液体粪便取 絮状物2~3ml,盛于灭菌容器内送检。
• 伤口分泌物标本
先以无菌盐水冲洗溃疡表面，用2支无菌棉拭取溃疡深处 接近组织的分泌物后插入运送培养基内送检。一支为涂片 检查用，一支作培养用（立即）。
全敏感，为金葡
有一耐药，为MRSA
青霉素、氨苄全耐药报屎肠
• 屎肠、粪肠
青霉素、氨苄全敏感报粪肠 西丁耐药，左氧、环丙敏感报大肠
•
大肠、阴沟
西丁敏感，左氧、环丙耐药报阴沟
The End
深部真菌显色
绿色（白色念珠菌）
真 菌 显 色
蓝色（热带念珠菌） 粉色（克柔念珠菌） 紫色（光滑念珠菌） 淡紫色（近平滑念珠菌）
三、药敏与结果
贴药敏纸片
培养18~24h
根据抑菌圈 直径回报结果
辅助药敏实验:OP敏感实验（肺炎链球菌） D实验
药敏小结
• 药敏结果辅助判别的细菌： • 葡萄球菌（西丁、苯唑）
典型微生物培养特性
• • • • • • • • • 4、肺炎克雷伯菌 血平板：圆形，较大，凸起，灰白色 伊红美蓝：较大粉红色菌落，可拉丝 5、铜绿假单胞菌 血平板：形成大而扁平，湿润，有金属光泽，蓝绿色菌落 伊红美蓝：粉红，伞状较干菌落 6、鲍曼不动杆菌 血平板：圆形，灰白色，光滑边缘整齐的菌落 伊红美蓝：粉红，凸起
• 骨髓标本
一般用骨髓穿刺针从髂骨采集骨髓标本，最好在用药前、 寒颤前或寒战后1h发热初期或高热期采样，阳性检出率较 高。
• 脑脊液标本
临床医师以无菌操作腰椎穿刺，抽取脑脊液2~3ml，盛于 无菌容器中送检（立即），不宜将其置于冰箱保存，否则 影响检出率（15min内)。
一、标本的采集
• 痰标本
1、送检指征：咳痰、咳血、呼吸困难、发热 2、标本采集：（1）晨痰养瓶
各类标本接种培养基
血平板 痰、咽拭子 尿 便 分泌物 脑脊液 伊红美蓝 巧克力 SS琼脂 沙保罗
菌种的鉴定
G-球 阳性 凝固酶
G+球
革兰染色 G+杆 肉眼观察 抗酸染色 G/GM实验 克玛佳 G-杆
触酶 阴性
氧化酶
典型微生物培养特性
• 1、金黄色葡萄球菌 血平板上典型菌落为金黄色，周围有明显的β溶血环。 • 2、肺炎链球菌 血平板上圆形、中央呈脐窝状，表面光滑，绿色扁平，周 围有草绿色溶血环。 • 3、大肠杆菌 血平板：呈圆形、稍凸、边缘整齐、灰白色； 伊红美蓝：菌落呈紫黑色，并有金属光泽
一、标本的采集
• 尿标本 1、尿培养临床指征:（1）尿痛、尿急、尿频、血尿、脓尿 （2）膀胱排空功能受损 （3）泌尿系统疾病手术前 （4）留置导尿管太长，患者出现发热 （5）白细胞高或亚硝酸盐阳性 2、标本采集：用药前采集，晨尿，清洗干净尿道口，留取 中段尿。（做厌氧菌培养时应膀胱穿刺采集尿）
一、标本的采集