BmNPV对家蚕抗氧化酶基因表达及其酶活性的影响
BmNPV对家蚕BmN细胞周期及周期蛋白基因表达水平的影响
BmNPV对家蚕BmN细胞周期及周期蛋白基因表达水平的影响刘丽华;沈卫德;李兵;王文兵【摘要】[目的]研究家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori Nucleopolyhedroviruses,BmNPV)对家蚕卵巢细胞系(BmN)细胞周期及细胞周期蛋白基因转录水平的影响.[方法]用BmNPV感染家蚕BmN细胞,分别在病毒感染后的不同时间(12,24,36,48 h),应用实时荧光定量PCR方法检测细胞周期蛋白基因CyclinA、CyclinB、CyclinE的表达情况,用流式细胞仪检测细胞周期的变化.[结果]BmNPV感染24 h后,BmN细胞出现明显感染症状,变为圆形;48 h后细胞核内出现多角体.随着感染时间的延长,CyclinA、CyclinB、CyclinE基因表达量均下降,分别在感染12,24,36 h后,表达量降低为0.流式细胞仪检测结果显示,在BmNPV 感染后24 h左右,抑制于G2/M期的BmN细胞达到68％.[结论]BmNPV感染家蚕BmN细胞后,导致CyclinB、CyclinE基因表达量降低,对CyclinA基因表达量的影响较小;同时BmNPV感染可以将BmnN细胞发育抑制于G2/M期.【期刊名称】《西北农林科技大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2014(042)002【总页数】5页(P41-45)【关键词】BmNPV;Cyclin基因;细胞周期【作者】刘丽华;沈卫德;李兵;王文兵【作者单位】通化师范学院生物系,吉林通化134000;苏州大学基础医学与生物科学学院,江苏苏州215123;现代丝绸国家工程实验室,江苏苏州215123;苏州大学基础医学与生物科学学院,江苏苏州215123;现代丝绸国家工程实验室,江苏苏州215123;江苏大学生命科学研究院,江苏镇江212001【正文语种】中文【中图分类】S884.5+1家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori Nucleopolyhedroviruses,BmNPV)属于杆状病毒，可经口或创伤感染家蚕，引起家蚕脓病。
家蚕核型多角体病毒Bm35基因的特性分析的开题报告
家蚕核型多角体病毒Bm35基因的特性分析的开题报告标题：家蚕核型多角体病毒Bm35基因的特性分析一、研究背景和意义家蚕核型多角体病毒（Bombyx mori nucleopolyhedrovirus，BmNPV）是一种能感染家蚕（Bombyx mori）的昆虫病毒，属于多角体病毒科。
BmNPV是家蚕制造丝绸的过程中的一种常见病毒，能导致家蚕的大面积死亡。
BmNPV的基因组结构为环状双链DNA，约130 kb，包含约150个基因。
其中Bm35是BmNPV中的一个病毒基因，它编码一种未知功能的蛋白质。
本研究旨在通过对Bm35基因的特性分析，了解其在BmNPV复制和感染过程中的作用，为控制BmNPV的传播提供理论依据。
二、研究内容和方法1. 明确Bm35基因的蛋白质结构和功能：利用生物信息学方法对Bm35基因进行分析，预测其编码的蛋白质的物理化学性质、亚细胞定位、二级结构等特征，以此初步推断其可能的功能。
2. 确定Bm35基因在BmNPV感染过程中的表达模式：采用荧光素酶检测技术和Western blotting检测技术，对不同时间段BmNPV感染家蚕细胞的样品中Bm35基因的表达情况进行分析，研究其表达的规律。
3. 探究Bm35基因对BmNPV感染和繁殖的影响：利用RNA干扰技术抑制或过表达Bm35基因，观察对BmNPV的感染、繁殖、复制和杀伤家蚕细胞的能力是否发生变化，探究Bm35基因在BmNPV感染过程中的作用。
三、预期研究结果及意义预计本研究可以明确Bm35基因的蛋白质结构和功能，揭示其在BmNPV感染和繁殖过程中的作用，为控制BmNPV的传播提供理论依据。
此外，本研究也有可能发现一些新的治疗BmNPV感染的候选药物和疫苗靶点，具有较大的应用前景。
BmNPV_侵染后不同抗性家蚕品系中肠组织转录组学分析
引用格式：刘 勇，龚椿营，艾均文，等. BmNPV侵染后不同抗性家蚕品系中肠组织转录组学分析[J]. 湖南农业科学，2023（11）：1-9，13. DOI:DOI:10.16498/ki.hnnykx.2023.011.001蚕桑文化是中国文明的起点，至少已有4 000 a 以上的历史。
家蚕作为重要的经济昆虫对人类文化、经济发展贡献巨大。
种桑养蚕至今仍是部分地区农民的重要收入来源。
然而生产上，家蚕始终受到细菌病、病毒病等的侵害，给农户造成一定的经济损失[1]。
其中，以家蚕核型多角体病毒（Bombyx mori nucleopolyhedrovirus，BmNPV）引起的血液型脓病对蚕桑产业的威胁最大，其传染性极强，一旦发病就难以控制[2]。
目前，环境消毒仍是预防蚕桑病害的主要措施，但该防治方法费时费力，严重制约了蚕桑业的发展。
在此背景下，学者们通过传统杂交育种、分子标记育种和转基因育种等方式选育抗性品种来预防家蚕频发性血液型脓病，虽然这种方式前期投入大、开发周期长，但是一旦成功选育出抗性品种，其经济效益、社会效益和生态效益都是不可估量的[3]。
因此，基于材料间所存在的抗性差异而进行家蚕抗病基因筛选、抗病机制解析成为近年来蚕桑领域的热门课题。
BmNPV是一种环状双链DNA的核型多角体病毒，具有包涵体衍生病毒（occlusion-derived virus，ODV）和出芽型病毒（budded virus，BV）2种不同形式，侵染家蚕的方式包括ODV引起的食下感染和BV引起的创伤感染[3]。
BmNPV在家蚕体内复制增BmNPV侵染后不同抗性家蚕品系中肠组织转录组学分析刘 勇，龚椿营，艾均文，薛 宏，何行健，贾超华，陈卓华，任立志（湖南省蚕桑科学研究所，湖南长沙 410127）摘 要：家蚕核型多角体病毒（BmNPV）是造成蚕业严重经济损失的主要病原体之一，主要通过食下感染引发家蚕血液型脓病，中肠是免疫病原体的重要组织器官。
家蚕生物反应器的研究进展及发展前景(1)
家蚕生物反应器的研究进展及发展前景(1)摘要：目前,家蚕生物反应器的研究和开发主要是以BmNPV为载体,在家蚕体液中表达多种有用蛋白,其表达量比其它生化微生物高出许多倍;但是利用转基因家蚕生物反应器表达外源蛋白比家蚕BmNPV表达系统有着更大的优越性。
家蚕生物反应器研究和开发已近20年历史，表达了数百种外源基因，由于表达量不高及产物分离纯化难度和成本问题，至今未能进入产业化；家蚕转基因生物反应器有过比较好的尝试，改进转基因技术提高外源基因的整合率是今后主攻方向。
本文综述了家蚕BmNPV表达系统的研究现状及转基因家蚕生物反应器的研究进展及发展前景。
关键词：家蚕生物反应器BmNPV表达系统转基因家蚕发展前景ThereearchprogreofilkwormbioreactoranddevelopmentpropectAbtract：Currently,theilkwormbioreactorofreearchanddevelopmentimainly Keyword:Bomby某moribioreactor,BmNPVe某preionytem,Trangenic ilkworm,Developmentpropect前言：养蚕业起源于我国，是我国的传统产业，在长达5000多年的生产实践中，为我国的经济发展和中外文化交流作出了巨大贡献，在国民经济中占有重要地位。
家蚕(Bomby某mori）属于鳞翅目蚕蛾科，为开放式血管系统，纤薄而强韧的表皮层包围着一个充满血淋巴及各种器官的空间。
几千年来，人们利用家蚕能吐丝结茧这一生物机能，大量生产生丝。
家蚕丝因具有柔软舒适、透气保温、吸湿散湿性能好、珍珠般光泽、染色性强等优良理化特性，被誉为“纤维皇后”，其织出的华丽丝绸深受人们喜爱。
并且随着科学技术的发展，很多新的技术和试验方法在家蚕新用途和基础研究中得到应用和推广。
家蚕除用作生产蚕茧以抽取蚕丝这一传统用途外，作为生物反应器而生产高价值物质等新用途也不断被开发研究出来。
BmNPV抗性差异蚕品种感染病毒后的中肠蛋白质组变化分析
蚕桑通报 2009 年 第 40 卷 第 1 期
图1 P50和306家蚕品种5龄中肠蛋白质双向电泳图谱 Fig. 1 Midgut 2D-PAGE protein profiles of silkworm breed P50 aiculture
第40卷 第1期 2009年2月 Vol.40 No.1 Feb., 2009
BmNPV抗性差异蚕品种感染病毒后的 中肠蛋白质组变化分析
兰天云 1，2， 陈金娥 2， 张金卫 3， 杨惠娟 2， 李建营 2， 丁 农 3， 钟伯雄 2， 段家龙 1 （1. 安徽农业大学 生命科学学院， 安徽 合肥 230036； 2. 浙江大学 动物科学学院， 浙江 杭州 310029；
(1. College of Life Science, Anhui Agriculture University, Hefei 230036, China; 2. College of Animal Science, Zhejiang University, Hangzhou 310029, China; 3. Huzhou Academy of Agriculture Sciences, Huzhou 313000, China)
Abstract: To understand the proteome changes of silkworm midgut after infected by BmNPV as well as to find out the anti -BmNPV related genes, antivirus experiments were carried out in the nine different silkworm breeds. Results found an antivirus silkworm breed P50 and a susceptible breed 306 and they had a great difference in the antivirus ability. The antivirus ability in the anti-BmNPV individuals of P50 were 72 centesimal points higher than that of the 306. The midgut protein expression profiles of the P50 and 306 on the first (1st) day and the fourth (4th) day of fifth instar after oral infected by BmNPV were analyzed by 2-dmension eletrophoresis. The results showed that the first day of the fifth instar after the infection 10 specific protein spots were found in both P50 and 306 breed, respectively. There were 33 specific protein spots on the fourth day were found in 306 while 14 were found on that of P50 and these proteins were different in the characters. These proteins may be involved in the antivirus ability to BmNPV in the anti-breed and the susceptibility to BmNPV in the susceptible breed. Keywords: Bombyx mori; BmNPV; Midgut; Proteomics
转基因家蚕的研究进展及应用前景-副本
转基因家蚕的研究进展及应用前景摘要:转基因家蚕Bombyx mori是指利用分子生物学手段,将外源基因转移到家蚕染色体中,使之出现先前不具有的性状和产物,并且可以保持传代,在个体水平可以体现外源基因的功能,使外源基因获得大量表达。
关键词:家蚕;转基因;载体;报告基因;生物反应器Progress and application prospect of transgenic silkwormZHOU Qi—Sheng,Yu Qi,LIU Qing—Xin (Laboratory of Developmental Genetics,Shandong AgriculturalUniversity.Tai’an,Shandong 271018,China)Abstract:Transgenic silkworm,Bombyx mori was generated by transferring foreign genes to its chromosome with molecular biological techniques and creating new traits and products,which could keep the generationand reflect the function of foreign genes with high expressionKey words:Bombyx mori;transgene;vector;reporter gene; bioreactor家蚕是重要的经济昆虫,曾为中国传统政治、经济和文化作出了卓越的贡献,新世纪随着生命科学和生物技术的发展,家蚕因具有世代周期短、繁殖率高、遗传背景清楚,后代个体数量多、能大量饲养等优点而成为经典遗传学研究的模式生物之一。
转基因家蚕是指利用分子生物学手段,将外源基因转移到家蚕染色体中,使之出现先前不具有的性状和产物,并且可以保持传代,在个体水平可以体现外源基因的功能,使外源基因获得大量表达。
BmNPV对家蚕抗氧化酶基因表达及其酶活性的影响
BmNPV对家蚕抗氧化酶基因表达及其酶活性的影响作者：唐芬芬杨伟克朱峰邵榆岚张永红白兴荣来源：《南方农业学报》2019年第10期摘要：【目的】探究喂食家蠶核型多角体病毒（BmNPV）后家蚕血淋巴和中肠组织抗氧化酶[超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）]的活性及其基因表达变化规律，明确BmNPV侵染对家蚕抗氧化系统的影响，为解析BmNPV的致病机理提供理论依据。
【方法】以五龄家蚕为研究对象，经口喂食BmNPV，分别于添食后6、12、18、24、30、36、42和48 h采集家蚕的血淋巴和中肠组织，采用实时荧光定量PCR检测两种抗氧化酶基因（Bmsod和Bmcat）的表达水平，同时以抗氧化酶活性测试盒测定SOD和CAT的活性变化情况。
【结果】BmNPV侵染五龄家蚕能引起典型的血液型脓病，主要表现为蚕体环节肿胀，狂躁爬行，体壁易破，体液呈乳白色等。
家蚕血淋巴和中肠组织中Bmsod和Bmcat基因均在感染BmNPV 中期开始上调表达，在感染后期呈下调表达趋势，其相对表达量也呈先增加后急剧减少的变化趋势。
添食BmNPV后，家蚕血淋巴和中肠组织的SOD活性在感染18和24 h时极显著高于对照组（添食等量灭菌水）家蚕（P<0.01，下同），但从感染30 h起SOD活性开始急剧下降，至感染48 h时降至最低值。
家蚕血淋巴和中肠组织的CAT活性在感染早期（6 h）略有下降，从感染12 h起CAT活性开始呈上升趋势，血淋巴CAT活性在感染18～30 h极显著高于对照组，随后急剧下降且显著低于对照组家蚕（P<0.05，下同）;中肠组织CAT活性仅在感染18和24 h时显著或极显著高于对照组家蚕，从感染30 h起开始持续下降，至感染48 h时降至最低值，约为对照组家蚕的18%。
【结论】BmNPV侵染能影响家蚕机体相关保护酶活性及其基因转录水平，SOD和CAT活性及其基因表达量在感染中期增加，感染后期则急剧降低，提示抗氧化酶SOD和CAT在家蚕的抗病毒过程中发挥重要作用。
家蚕抗核型多角体病毒基因与蛋白的研究进展
家蚕抗核型多角体病毒基因与蛋白的研究进展覃吕高;屈达才;李俊;徐周徐【期刊名称】《南方农业学报》【年(卷),期】2013(044)005【摘要】追踪研究蚕体内的抗家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nuclear polyhedrosis virus,BmNPV)基因与蛋白,了解家蚕抗BmNPV的机制,对减轻甚至解除血液型脓病、促进桑蚕产业发展具有重要意义.文章就家蚕抗BmNPV基因和蛋白的研究进展进行综述,提出今后对家蚕抗BmNPV的研究策略应是运用多种技术同时从DNA、RNA、蛋白质水平上进行研究,鉴定家蚕抗BmNPV基因或蛋白及其与抗BmNPV的相关性；再采用RNA干涉、转基因技术对家蚕进行基因操作,改变其对BmNPV的抵抗能力,确认这些基因、蛋白的抗病毒功能.另外,使用免疫组化、免疫共沉淀,ELISA等技术探索基因—蛋白、蛋白—蛋白间的相互作用,找到基因或蛋白的上、下游作用因子,解释清楚家蚕抗BmNPV的详细机制,为最终解除家蚕脓病危害、促进蚕业发展提供参考资料.【总页数】5页(P854-858)【作者】覃吕高;屈达才;李俊;徐周徐【作者单位】广西大学农学院蚕学研究所,南宁530005;广西大学农学院蚕学研究所,南宁530005;广西大学农学院蚕学研究所,南宁530005;广西大学农学院蚕学研究所,南宁530005【正文语种】中文【中图分类】S884.51【相关文献】1.对构建的家蚕抗核型多角体病毒病近等基因系的评估 [J], 刘晓勇;姚勤;陈克平2.家蚕抗核型多角体病毒基因与蛋白的研究进展 [J], 覃吕高;屈达才;李俊;徐周徐;3.短时热激后家蚕对核型多角体病毒的抗性及相关抗菌肽和热激蛋白基因表达水平的变化 [J], 唐芬芬;郑亚强;白兴荣;陈斌4.家蚕核型多角体病毒orf25基因在病毒感染过程中编码一个30kDa的晚期蛋白[J], 王海燕;陈克平;郭忠建;姚勤5.家蚕抗核型多角体病毒病研究进展 [J], 邢东旭因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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BmNPV对家蚕抗氧化酶基因表达及其酶活性的影响唐芬芬; 杨伟克; 朱峰; 邵榆岚; 张永红; 白兴荣【期刊名称】《《南方农业学报》》【年(卷),期】2019(050)010【总页数】6页(P2308-2313)【关键词】家蚕; 家蚕核型多角体病毒(BmNPV); SOD; CAT; 酶活性; 基因表达【作者】唐芬芬; 杨伟克; 朱峰; 邵榆岚; 张永红; 白兴荣【作者单位】云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所云南蒙自 661101【正文语种】中文【中图分类】S884.510 引言【研究意义】家蚕是一种重要的经济昆虫，同时是鳞翅目昆虫的模式生物，加之遗传背景清晰且饲育简单，已发展成为研究宿主—病原互作机制的理想材料（Geng et al.，2016a，2016b）。
超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）和过氧化氢酶（Catalase，CAT）在维持生物体内自由基代谢平衡的过程中发挥重要作用，在一定程度上能反映生物的抗逆能力（Lesser，2006；方允中和郑荣梁，2008）。
因此，研究抗氧化酶活性及其基因表达在家蚕抵抗病原微生物侵染过程中的变化规律，尤其是明确其在家蚕抵抗家蚕核型多角体病毒（Bombyx mori nucleopolyhedrovirus，BmNPV）时的功能和作用，可为揭示BmNPV侵染及其致病机理提供理论依据。
【前人研究进展】BmNPV感染主要引发家蚕血液型脓病，传染性强，危害严重，每年给桑蚕产业带来巨大经济损失（邵榆岚等，2017）。
据家蚕流行病学调查发现，BmNPV是云南蚕区发生较广且危害严重的主要病原（白兴荣等，2010），生产上多在三龄蚕后感染发病，且一旦发病即迅速蔓延。
虽然关于家蚕抵抗病毒的研究已有大量报道，但抗病机制至今尚未完全明确。
昆虫遭受外源病原菌侵染时，其机体内正常的代谢平衡被打破，诱发活性氧（ROS）过度积累，进而损伤宿主细胞（Kumar et al.，2003）。
抗氧化酶CAT和SOD在消除昆虫体内过量氧自由基方面发挥着重要作用，其中，CAT能催化H2O2分解为H2O和O2，减少羟自由基的产生，防止过量羟自由基损伤机体（Zhao and Shi，2009）；SOD能催化超氧阴离子自由基（O2）发生歧化反应，生成H2O2和O2，H2O2再经CAT作用转化为H2O和O2，进而维持机体的正常生理代谢过程（Wang et al.，2001）。
李世广等（2016）研究发现，菜青虫感染金龟子绿僵菌后其体内SOD和CAT活性呈先上升后下降的变化趋势，表明虫体在侵染初期防御能力增强，但后期防御能力降低。
张仙红等（2006）研究证实，菜青虫感染玫烟色拟青霉后体内SOD和CAT活性迅速提高，随后急剧下降并显著低于未感染组，同时出现感病症状，说明昆虫SOD和CAT等保护酶系统与病原菌对宿主的侵染存在一定关联，但具体作用机制尚未明确。
王树昌等（2017）研究发现，家蚕感染球孢白僵菌后其血淋巴、中肠等组织的总抗氧化活力、SOD和CAT活性均显著降低，Bmsod和Bmcat基因表达水平显著下调，而添加外源SOD和CAT等抗氧化剂能有效延长家蚕存活时间，故推测球孢白僵菌的致病机制主要是通过破坏家蚕抗氧化系统平衡，损伤组织器官，降低宿主的免疫防御功能，最终导致虫体发病死亡。
【本研究切入点】家蚕抵抗BmNPV涉及的防御反应极其复杂，BmNPV侵染不仅诱导家蚕中肠相关抗菌肽基因的表达，还能上调血淋巴中酚氧化酶原基因表达，进而提高酚氧化酶活性（唐芬芬等，2015，2016）。
目前，有关家蚕对BmNPV的免疫防御及免疫相关因子研究已较深入，但遭受BmNPV侵染时蚕体抗氧化酶活性及其基因表达变化规律的研究鲜见报道。
【拟解决的关键问题】以五龄家蚕为研究对象，探究添食BmNPV后家蚕血淋巴和中肠组织抗氧化酶SOD和CAT的活性及其基因表达变化规律，明确BmNPV侵染对家蚕抗氧化系统的影响，为解析BmNPV的致病机理提供理论依据。
1 材料与方法1.1 试验材料家蚕品系菁松×皓月和BmNPV均由云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所家蚕病害防控研究室提供。
Total RNA提取试剂盒（OMEGA公司，货号R6834-02）、反转录试剂盒PrimeScript RT Reagent Kit with gDNA Eraser（TaKaRa公司，货号RR047A）、FastStart SYBR Green Master（Roche 公司，货号***********）、SOD活性测试盒（货号A001-1）和CAT活性测试盒（货号A007-1）均购自南京建成生物工程研究所。
1.2 添食处理及样品采集家蚕按常规方法饲养至五龄起蚕，取体型和体重相近的家蚕随机分为两组（试验组和对照组），试验组每头家蚕经口添食10 µL预先制备好的病毒悬液（5.35×108个/mL），对照组添食等量灭菌水，添食后在同等条件下进行饲育。
于添食后6、12、18、24、30、36、42和48 h采集家蚕的血淋巴和中肠组织，每次取样均分成两份，一份用于抽提RNA，另一份用于制备酶液。
每次取样设4个重复，每个重复5头家蚕，样品收集后-80.0 ℃保存备用。
1.3 总RNA提取及反转录按照Total RNA提取试剂盒操作说明提取各组织RNA，以紫外分光光度计测定RNA样品浓度，取OD260/OD280为1.80～2.00的样品，根据反转录试剂盒说明将RNA反转录合成cDNA。
1.4 实时荧光定量PCR检测以真核翻译起始因子4A基因（家蚕芯片探针ID：sw22934）为内参基因、酚氧化酶原基因Bmsod（NCBI登录号NM_001043619.1）和Bmcat（NCBI登录号NM_001043447.1）为靶标基因。
利用Primer Premier 5.0设计引物（表1）。
参照FastStart SYBR Green Master试剂盒操作说明进行实时荧光定量PCR检测，扩增程序：95.0 ℃预变性30 s；95.0 ℃5 s，60.0 ℃30 s，进行40个循环；65.0 ℃5 s（每次加0.5 ℃，直至95.0 ℃）。
以CFX-96实时荧光定量PCR检测仪记录试验数据，根据2-△△Ct法计算目的基因相对表达量（Livak and Schmittgen，2001）。
表1 实时荧光定量PCR扩增引物Table 1 Primers used in real-time fluorescence quantitative PCR amplification基因Gene Bmsod Bmcatsw22934正向引物Forward primer 5'-GGACCTAACAGCATCA-3' 5'-ACAAACGGTGGGCAAG-3' 5'-TTCGTACTGCTCTTCTCGT-3' 反向引物Reverse primer 5'-AGTACCAAGCCCAACA-3' 5'-AGGGTCACGAACAGTATCA-3' 5'-CAAAGTTGATAGCAATTCCCT-3'1.5 抗氧化酶活性测定酶液制备：取家蚕幼虫各组织样品，分别加入1.2 mL预冷的磷酸盐缓冲液（0.1 mol/L，pH 7.0），在冰上进行研磨，使样品充分破碎，于4 ℃下2500 r/min离心15 min，收集上清液，即为待测酶液。
按照SOD活性测试盒和CAT活性测试盒使用说明，分别测定SOD和CAT的活性。
1.6 统计分析采用Excel 2016进行数据处理及作图，同时利用SPSS 19.0进行统计分析。
2 结果与分析2.1 家蚕感染BmNPV后的主要临床症状BmNPV侵染五龄家蚕能引起典型的血液型脓病，从感染后第4 d起开始发病，其临床症状主要表现为蚕体环节肿胀，狂躁爬行，体壁易破，体液呈乳白色等（图1）。
2.2 家蚕感染BmNPV后Bmsod和Bmcat基因的表达变化采用实时荧光定量PCR测定添食BmNPV后家蚕血淋巴和中肠组织中Bmsod和Bmcat基因的相对表达量，将对照组家蚕目的基因的相对表达量设定为1.0，当试验组家蚕目的基因的相对表达量大于1.0时，表明该基因上调表达，反之则下调表达。
由图2可看出，家蚕血淋巴Bmsod基因在感染BmNPV前期（6～12 h）的相对表达量接近于1.0，至感染18 h时开始上调表达，其相对表达量逐渐增加，于感染30 h时达最高值，随后家蚕血淋巴Bmsod基因相对表达量急剧下降，呈下调表达趋势。
在家蚕中肠组织中，Bmsod基因在感染BmNPV后12～24 h呈持续上调表达趋势，且在感染24 h时达最高值，至感染后期（30～48 h）Bmsod基因呈下调表达。
图1 五龄家蚕感染BmNPV后的临床症状Fig.1 Fifth instar silkworm infected with BmNPV图2 添食BmNPV后家蚕血淋巴和中肠组织Bmsod基因的表达变化Fig.2 Expression of Bmsod gene in hemolymph and midgut of silkworm after infection by feeding BmNPV由图3可看出，在BmNPV侵染前6 h，家蚕血淋巴和中肠组织中的Bmcat基因相对表达量均无明显变化，但从感染12 h起开始上调表达，其中，血淋巴Bmcat 基因约上调1.5倍，中肠组织Bmcat基因约上调1.8倍。
家蚕血淋巴Bmcat基因在感染BmNPV后12～30 h均呈上调表达趋势，在感染36～48 h呈持续下调表达趋势；中肠组织Bmcat基因在感染12～24 h呈上调表达，从感染30 h起开始下调表达，至感染42和48 h其相对表达量降至最低值。
图3 添食BmNPV后家蚕血淋巴和中肠组织Bmcat基因的表达变化Fig.3 Expression of Bmcat gene in hemolymph and midgut of silkworm after infection by feeding BmNPV综上所述，家蚕血淋巴和中肠组织中的Bmsod和Bmcat基因均在感染BmNPV中期开始上调表达，至感染后期则下调表达，其相对表达量也呈先增加后急剧减少的变化趋势。
2.3 家蚕感染BmNPV后血淋巴和中肠组织SOD活性的变化添食BmNPV后，家蚕血淋巴和中肠组织的SOD活性变化如图4所示。
其中，家蚕血淋巴SOD活性在感染初期（6～12 h）与对照组家蚕间无显著差异（P＞0.05，下同），感染中期（18～30 h）SOD活性则显著高于对照组家蚕（P＜0.05，下同），尤其在感染18和24 h时酶活性分别是对照组家蚕的1.9和2.3倍，其差异达极显著水平（P＜0.01，下同），但感染后期（36～48 h）SOD活性显著或极显著低于对照组家蚕（图4-A）；家蚕中肠组织SOD活性在感染12、18和24 h分别是对照组家蚕的2.2、2.9和3.1倍，其差异均达极显著水平，从感染30 h起SOD活性开始急剧下降，至感染42和48 h时酶活性最低，约为对照组家蚕的30%（图4-B）。