软骨发育不全家系产前诊断与基因突变分析解析
软骨发育不全患者FGFR3突变基因分析
软骨发育不全患者FGFR3突变基因分析王尧;崔亚洲;周小燕;韩金祥【摘要】目的对9例初步诊断为软骨发育不全患者及其父母进行成纤维生长因子受体3 (fibroblast growth factor receptor 3,FGFR3)基因突变筛查,以判定患者是否为软骨发育不全,同时验证中国人群中FGFR3是否为引起软骨发育不全的致病基因.方法提取9例患者及父母的外周血液DNA,并针对FGFR3外显子10序列设计引物,进行PCR扩增、纯化,并对PCR扩增产物进行毛细管电泳测序.结果 9例患者的FGFR3基因第10外显子11 38位点均发生了G＞A碱基转换,使得其所编码蛋白FGFR3的第38 0位氨基酸由甘氨酸(Gly)变为精氨酸(Arg).结论通过毛细管测序,9例患者均可以确诊为软骨发育不全,同时也验证了在中国人群中FGFR3基因是导致软骨发育不全的致病基因,G1138A为热点突变.【期刊名称】《罕少疾病杂志》【年(卷),期】2014(021)001【总页数】5页(P1-5)【关键词】软骨发育不全;基因突变;成纤维生长因子受体3 (fibroblast growth factor receptor 3);毛细管测序【作者】王尧;崔亚洲;周小燕;韩金祥【作者单位】山东中医药大学山东济南250355;山东省医药生物技术研究中心国家卫生部医药生物技术重点实验室山东省罕见病重点实验室,山东济南250062;山东省医药生物技术研究中心国家卫生部医药生物技术重点实验室山东省罕见病重点实验室,山东济南250062;山东省医药生物技术研究中心国家卫生部医药生物技术重点实验室山东省罕见病重点实验室,山东济南250062【正文语种】中文【中图分类】R681.3;Q343.1+3软骨发育不全（achondroplasia,ACH, MIM:100800），又称为胎儿型软骨营养障碍（chondrodystrophia fetalis），或称软骨营养障碍性侏儒（chondrodystrophic dwarfism），是一种常染色体显性遗传病，外显率为100%。
新人教版高中生物必修二：第5章-基因突变及其他变异
唇裂
无脑儿
（三）染色体异常遗传病：
患者大多寿命短暂，甚至在胚胎期就死亡造成流 产。较常见的有21三体综合症（先天性愚型）和 Turner综合症（性腺发育不良）等。
先天性愚型
性腺发育不良
第 5 章 基因突变及其他变异
•第1节 基因突变和基因重组
自主学习 新知突破
• 1．识记基因突变的概念。 • 2．理解基因突变的特点。 • 3．举例说出基因重组的类型。 • 4．知道基因突变、基因重组的意义。
B．二倍体
C．六倍体
D．三倍体
例3．某品种水稻的体细胞中含有48条染色体，
具有四个染色体组。则此品种水稻属于
A
A．四倍体
B．三倍体
C．二倍体
D．单倍体
例4.单倍体生物的体细胞内 D
A．只有一个染色体 B．只有一个染色体组 C．染色体组数目成单 D．与本物种配子的染色体数同
例5.大麦的一个染色体组有7条染色体，在四倍
• (4)低频性：在高等生物中，突变率是10－5～ 10－8，但同一个种群内的个体较多时，就可 能产生大量随机突变。
• (5)多害少利性：多数基因突变对生物体是有 害的，少数基因突变对生物体是有利的，也 有的基因突变对生物体既无利也无害。
•
(1)基因突变是染色体的某一位点
上基因的改变，其结果是使一个基因变成了
（2）二倍体
①概念：由受精卵发育而来的个体，体细胞含有两 个染色组的个体。
②实例：几乎全部动物，过半数的高等植物。
（3）多倍体
①概念：由受精卵发育而来的个体，体细胞含有三 个或三个以上染色体组的个体。
②成因：外界条件剧变，导致有丝分裂纺缍体形成 过程受阻，染色体数目加倍。
COL2A1基因新发突变导致先天性脊柱骨骺发育不良的遗传分析及产前诊断
ＤＯＩ：１０．１３６０２／ｊ．ｃｎｋｉ．ｊｃｌｓ．２０２０．１２．０９·临床实验研究·ＣＯＬ２Ａ１基因新发突变导致先天性脊柱骨骺发育不良的遗传分析及产前诊断李素萍ａ，金玉霞ａ，杨静ｂ，唐萍ａ，张卫华ａ，周赤燕ａ，沈华祥ｃ（嘉兴学院附属妇儿医院＆嘉兴市妇幼保健院ａ．产前诊断中心，ｂ．超声科，ｃ．产科，浙江嘉兴３１４０５１）摘要：目的 对１例先天性脊柱骨骺发育不良（ＳＥＤＣ）患儿进行基因检测和蛋白质功能预测，确定其致病原因，为家系遗传咨询及产前诊断提供依据。
方法 应用高通量测序法对先证者４５４个骨病相关基因进行检测，对检出的可疑基因突变进行Ｓａｎｇｅｒ测序检测，对父母进行验证并对胎儿进行产前诊断。
结果 该患儿检出ＣＯＬ２Ａ１基因ｃ．３５８９Ｇ＞Ａ（ｐ．Ｇｌｙ１１９７Ｓｅｒ）杂合错义突变，其父母均未携带该突变，先证者为新发变异，家系中胎儿产前诊断结果提示胎儿未携带与先证者相同的变异。
Ｐｏｌｙｐｈｅｎ２、ＭｕｔａｔｉｏｎＴａｓｔｅｒ软件对其蛋白质功能预测的结果为有害。
结论 ＣＯＬ２Ａ１基因ｃ．３５８９Ｇ＞Ａ变异是该ＳＥＤＣ家系先证者的致病原因。
关键词：先天性脊柱骨骺发育不良；ＣＯＬ２Ａ１基因；基因突变；产前诊断中图分类号：Ｒ４４６；Ｒ７１５．５ 文献标志码：Ａ 先天性脊柱骨骺发育不良（ｓｐｏｎｄｙｌｏｅｐｉｐｈｙｓｅａｌｄｙｓｐｌａｓｉａｃｏｎｇｅｎｉｔａ，ＳＥＤＣ）是一种罕见常染色体显性遗传病（ＭＩＭ：１８３９００），发病率约为１／１０００００，其特征是身材矮小，畸形骨骺和椎体扁平，早发性关节退行性变，有时还会表现为近视或视网膜变性伴视网膜脱离等［１ ２］。
患者童年期常出现进展性脊柱弯曲，最终可能会影响呼吸，此外，还存在其他骨骼体征包括扁平脊椎，髋关节畸形导致股骨内旋和畸形足等［３］。
先天性ＳＥＤＣ患者之间的临床表型和影像学特征差异明显，通常是由ＣＯＬ２Ａ１基因变异引起。
一项研究证实，在６６３例先证者中发现了ＣＯＬ２Ａ１基因４６０个突变类型，并证实其与２１个明确的遗传病相关［４］。
软骨发育不全与软骨发育低下家系的FGFR3基因突变分析
软骨发育不全与软骨发育低下家系的FGFR3基因突变分析李琳迪;蓝丹;杨湖;许田田;李琼艳;高宗燕【摘要】Objective To screen the sequence of fibroblast growth factor receptor 3 (FGFR3) genes in children with dys-chondroplasia and their family members for searching the mutations. Methods The sequence of exon 10 and exon 13 in muta-tion hot spot region of FGFR3 gene in seven families was analyzed using polymerase chain reaction (PCR) and DNA sequenc-ing technology. Results The c.1138G>A missense mutation in exon 10 was found in 4 probands who were diagnosed as achon-droplasia (ACH), while this mutation was absent in their parents. The c.1620C>A missense mutation in exon 13 was found in one girl and her mother who both were diagnosed as hypochondroplasia (HCH) with mild symptoms. Neither mutation men-tioned above was found in the other two probands. Conclusions Through detecting the mutation in exon 10, exon 13 of FGFR3 gene, most patients of ACH or HCH can be finally diagnosed. However, it is necessary to perform the mutation screening on the other zones of FGFR3 gene and on other related genes for a few cases.%目的：了解临床诊断为软骨发育异常类疾病患儿及其家系成员的成纤维细胞生长因子受体3（FGFR3）基因突变情况。
5.3 人类遗传病习题训练(含答案)
A．小于a、大于bB．大于a、大于bC．小于a、小于bD．大于a、小于b
16．对于人类的某种遗传病，在被调查的若干家庭中发病情况如下表。据此进行推断，最符合遗传基本规律的一项是(注：每类家庭人数150～200人，表中“＋”为发现该病症表现者，“－”为正常表现者)( )
A．该病为常染色体隐性遗传病B．2号携带该致病基因
C．3号为杂合子的概率是2/3D．1和2再生患此病孩子的概率为1/4
4．下列关于人类遗传病的叙述，正确的是
A．遗传病是指基因结构改变而引发的疾病
B．具有先天性和家族性特点的疾病都是遗传病
C．杂合子筛查对预防各类遗传病具有重要意义
D．遗传病再发风险率估算需要确定遗传病类型
(1)据图谱判断,多指是由____性遗传因子控制的遗传病。
(2)写出Ⅲ中女患者及其父母所有可能的遗传因子组成:女患者____,父亲____,母亲____。
(3)如果该女患者与多指男患者结婚,其后代所有可能的遗传因子组成是_________。
(4)如果该女患者与一正常男子结婚,其后代患多指的概率为__。
A．X染色体DNA上必定有一段与X探针相同的碱基序列
B．据图分析可知妻子患X染色体伴性遗传病
C．妻子的父母至少有一方患有性染色体数目异常疾病
D．该夫妇选择生女儿可避免性染色体数目异常疾病的发生
6．人类某遗传病的染色体核型如图所示。该变异类型属于
A．基因突变B．基因重组
C．染色体结构变异D．染色体数目变异
（4）___________________________是物种形成的必要条件。进一步探究海岛上的该昆虫是否成为了一个新的物种，让其与原生活环境的昆虫进行交配实验，若_______________________说明岛上昆虫已经成为了一个新物种。
2020-2021学年高中生物 第5章 基因突变及其他变异 3 人类遗传病课时作业1（含解析）新人教
人类遗传病(20分钟·70分)一、选择题(共7小题,每小题5分,共35分)1.人类染色体异常遗传病产生的原因主要有染色体结构变异和染色体数目变异两种。
下列遗传病由染色体结构变异引起的是( )A.猫叫综合征B.苯丙酮尿症C.21三体综合征D.镰刀型细胞贫血症【解析】选A。
苯丙酮尿症和镰刀型细胞贫血症都是单基因遗传病,21三体综合征是染色体数目变异造成的。
猫叫综合征是人的第5号染色体部分缺失造成的,是由染色体结构变异引起的遗传病。
2.(2020·泰州高一检测)某同学拟调查人类某遗传病的发病率,最适合的调查对象是( )A.该病患者的家系B.学校中的男同学C.老年人群D.随机选择的人群【解析】选D。
在该病患者的家系中进行调查,适宜调查该病的遗传方式,A错误。
调查该病的发病率,应该在人群中随机调查,而不应该在学校中的男同学或老年人群中调查,B、C错误。
调查该病的发病率,应该在人群中随机调查,D正确。
3.(2020·临汾高二检测)下列关于单基因遗传病的叙述,正确的是( )A.在青春期的患病率很低B.由多个基因的异常所致C.可通过遗传咨询进行治疗D.禁止近亲结婚是预防该病的唯一措施【解析】选A。
单基因遗传病在青春期的患病率很低,A正确。
单基因遗传病是由一对等位基因异常导致的,B错误。
可通过遗传咨询进行预防,C错误。
禁止近亲结婚是预防该病的措施之一,D错误。
【知识归纳】常见的单基因遗传病及其特点(1)伴X染色体隐性遗传病:如红绿色盲、血友病等,其发病特点:①男患者多于女患者;②隔代交叉遗传,即男患者将致病基因通过女儿传给他的外孙。
(2)伴X染色体显性遗传病:如抗维生素D佝偻病,其发病特点:①女患者多于男患者;②世代相传。
(3)常染色体显性遗传病:如多指、并指、软骨发育不全等,其发病特点:患者多,多代连续得病。
(4)常染色体隐性遗传病:如白化病、先天性聋哑、苯丙酮尿症等,其发病特点:患者少,个别代有患者,一般不连续。
软骨发育不全症的遗传方式
软骨发育不全症的遗传方式一、什么是软骨发育不全症软骨发育不全症（achondroplasia）是一种常见的遗传性疾病，主要表现为身材矮小、四肢较短、颅骨畸形等特征。
该疾病的发生率约为1/20,000，是一种常见的遗传性疾病。
二、软骨发育不全症的遗传方式软骨发育不全症是由FGFR3基因突变引起的，属于常染色体显性遗传。
具体来说，该基因突变位于第4号染色体上，导致FGFR3蛋白质功能异常，从而影响软骨细胞分化和增殖。
如果一个父母中有一个人携带了FGFR3基因突变，则其子女有50%的机会患上软骨发育不全症。
如果父母双方均携带该基因突变，则其子女有25%的机会患上该疾病。
三、FGFR3基因突变的类型FGFR3基因突变可分为两种类型：点突变和缺失突变。
1. 点突变：指基因中的某一个核苷酸发生了改变，导致FGFR3蛋白质结构异常。
点突变是软骨发育不全症的主要原因，约占所有病例的98%。
2. 缺失突变：指基因中的一段DNA序列丢失或缺失，导致FGFR3蛋白质结构异常。
缺失突变较为罕见，只有极少数软骨发育不全症患者出现。
四、软骨发育不全症的临床表现1. 身材矮小：软骨发育不全症患者身材普遍偏小，成年后身高一般在130-150cm之间。
2. 四肢较短：软骨发育不全症患者四肢相对于躯干比例较小，手指和脚趾也较短。
3. 颅骨畸形：软骨发育不全症患者颅骨形态异常，头部较大、面部凹陷。
4. 脊柱侧弯：软骨发育不全症患者易出现脊柱侧弯等骨骼畸形。
五、软骨发育不全症的诊断与治疗1. 诊断：软骨发育不全症可通过X线检查、基因检测等方式进行诊断。
2. 治疗：目前尚无特效药物治疗软骨发育不全症，主要采取对症治疗和康复训练等措施。
对于严重畸形的患者，可考虑手术治疗。
六、总结软骨发育不全症是一种常见的遗传性疾病，主要由FGFR3基因突变引起。
该基因突变是点突变和缺失突变两种类型，其中点突变是软骨发育不全症的主要原因。
该疾病的临床表现包括身材矮小、四肢较短、颅骨畸形等特征。
高中生物必修二第五章基因突变及其他变异考点大全笔记(带答案)
高中生物必修二第五章基因突变及其他变异考点大全笔记单选题1、下列关于“低温诱导染色体数目变化”的实验的叙述，正确的是（）A．将洋葱放在装满清水的烧杯中，将烧杯置于4℃冰箱诱导培养36hB．剪取诱导处理的根尖约5cm放入卡诺氏液中浸泡3小时固定细胞形态C．实验过程中固定和解离后的漂洗液都是体积分数为95%的酒精D．视野中处于分裂间期的细胞最多，不能观察到细胞从二倍体变为四倍体的过程答案：D分析：低温诱导染色体数目加倍实验（1）低温诱导染色体数目加倍实验的原理：低温能抑制纺锤体的形成，使子染色体不能移向细胞两极，从而引起细胞内染色体数目加倍。
（2）该实验的步骤为：选材低温培养→固定→冲洗→解离→漂洗→染色→制片→观察。
（3）该实验采用的试剂有卡诺氏液（固定）、改良苯酚品红染液（染色），质量分数为15%的盐酸溶液和体积分数为95%的酒精溶液（解离）。
A、将洋葱放在装满清水的广口瓶上，让洋葱的底部接触水面。
待洋葱长出约1cm的不定根时，将整个装置置于4℃冰箱诱导培养36h，A错误；B、剪取诱导处理的根尖约0 .5~1cm放入卡诺氏液中浸泡0 .5~1小时固定细胞形态，B错误；C、实验过程中固定后用体积分数为95%的酒精冲洗2次，解离后的漂洗液是清水，C错误；D、因为分裂间期在整个细胞周期中占的时间比例大，所以视野中处于分裂间期的细胞最多，细胞被卡诺氏液固定后已经死亡，因而不能观察到细胞从二倍体变为四倍体的过程，D正确。
故选D。
2、如图1为人体内苯丙氨酸的部分代谢途径，图2为甲、乙两个家庭（非近亲）的系谱图（甲、乙两个家庭都不含对方家庭的致病基因）。
下列相关分析正确的是（）A．苯丙酮尿症、尿黑酸症的病因分别是缺乏酶⑥和酶③B．家系甲中Ⅱ-3不可通过减少苯丙氨酸的摄入来减缓症状C．家系乙中Ⅱ-4携带尿黑酸症致病基因的概率是2/3D．如果甲家系的6号个体与乙家系的6号个体婚配，孕期内应进行相关的基因检测答案：C分析：由图1可知，缺乏酶①，会导致苯丙氨酸不能转化成酪氨酸，会出现苯丙酮酸症；缺乏酶⑤会导致黑色素不能合成；缺乏酶③会造成尿黑酸在体内积累，造成尿黑酸症。
软骨发育不全、成骨不全的影像诊断与鉴别诊断
成骨不全
长骨多次青枝骨折，畸形愈合，受累骨粗短，干骺端膨大，骨质网织状改变。
成骨不全
长骨骨折畸形愈合，骨间膜钙化（白箭头），巨大骨痂形成（1D-E）
成骨不全
脊柱、肋骨畸形
成骨不全
鉴别诊断
根据典型的临床及X线表现，本病诊断不难，有时需与以下疾病鉴别： • 软骨病和佝偻病：可见骨密度减低及长骨弯曲畸形，骨干弯曲不
颅底短，颅面比例加大，斜坡加深
软骨发育不全
a：腰椎正位片示椎弓根间距从L1-L5逐渐变小，髂骨小，呈方形，髋臼 平，股骨颈粗短 b：腰椎侧位片示腰椎椎体较小，前窄后宽，呈子弹头样改变，椎体后缘 向前凹陷
软骨发育不全
鉴别诊断
• 假性软骨发育不全：出生时外观正常，6个月-4岁时出现畸形。X 线颅面骨基本正常，骨骺及干骺端均异常，椎弓根间距正常。
软骨发育不全
影像学表现
• X线：平片检查，显示颅底短，颅盖相对较大。肱骨和股骨对称性 短粗且弯曲，骨皮质增厚，肌肉附着的结节部常明显增大。骺板光 滑或轻度不规则，并有散在点状致密影。干骺端增宽，向两侧张开， 而中央凹陷呈杯口状或“V”形，骨骺陷入其中，尤以膝关节为著。 骨骺二次骨化中心出现延迟，发育小，常提前与干骺愈合。尺骨较 桡骨短，近侧端增宽，远端变细，其近端通常有一向上的突起。手 足短管状骨粗短，诸手指近于等长。 椎体较小，后缘轻度凹陷，骨性终板不规则。椎弓根间距从第1腰 椎到第5腰椎逐渐变小，与正常者相反。骨盆狭小，髂骨呈方形， 坐骨大切迹小、深凹呈鱼口状，髋臼上缘变宽呈水平状。
弯曲畸形； 2. 囊型，少见，出生后即发病，呈进行性，骨内见多发囊样区，似
蜂窝样，以下肢明显，长管状骨明显弯曲畸形； 3. 细长型，发病较迟，病情较轻，亦可在胎儿或出生后即出现，表
《软骨发育不全》课件
需要不断探索和创新技术手段，提高治疗的精准度和安全性。
跨学科合作
需要医学、生物学、化学等多学科的交叉合作，共同推动软骨发育 不全的研究和治疗进展。
手术治疗
关节镜手术
通过关节镜技术对关节内病变进 行清理、修复和重建，缓解疼痛
、改善关节功能。
人工关节置换术
对于严重的关节病变，可能需要 采用人工关节置换术来替换病变
关节，恢复关节功能。
其他手术
如截骨术、骨延长术等，可以改 善骨骼形态和长度，缓解疼痛和
改善关节功能。
其他治疗
物理治疗
如热疗、冷疗、电疗等，可以缓解疼痛、减轻炎 症和促进关节功能恢复。
病因与发病机制
病因
基因突变是导致软骨发育不全的主要 原因，特别是FGFR3基因的突变。
发病机制
FGFR3基因突变导致成骨细胞和软骨 细胞过度增殖，骨膜增厚，骨小梁变 粗，骨皮质增厚，最终导致骨骼发育 异常和生长障碍。
流行病学与发病率
流行病学
软骨发育不全的发病率约为1/15000-1/20000，男女发病率 大致相等。
康复训练
如肌肉力量训练、关节活动度训练等，可以改善 肌肉力量和关节活动度，提高关节稳定性。
生活方式调整
如减轻体重、避免过度运动等，可以减轻关节负 担，延缓关节退行性变。
04
预防与康复
预防措施
定期产前检查
通过产前检查，及时发现胎儿是否存在软骨发育不全的风险，以 便采取相应的干预措施。
遗传咨询
对于有软骨发育不全家族史的夫妇，应进行遗传咨询，了解疾病的 发生概率和风险，制定合适的生育计划。
诊断标准
临床特征
具备典型的临床表现，如 身高发育迟缓、四肢短小 等。
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ｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）扩增并测序。抽取胎儿羊水或脐带血，提取基因组ＤＮＡ后，对ＦＧＦＲ３基因 结果 产前
外显子１ ０进行检测，并对３例超声检查发现短肢发育异常的胎儿进行产前基因诊断。
超声检测显示，短肢发育异常胎儿表现为股骨短小，股骨长度均＜正常值一２－３ＳＤ，双顶径与孕龄 不相符。母亲Ｃ．１１ ３８Ｇ＞Ａ杂合型突变的４个家系中，２例胎儿为Ｃ．１１ ３８Ｇ＞Ａ杂合型，另２例胎 儿正常。父亲为Ｃ．１１３８Ｇ＞Ａ杂合型突变、母亲基因型正常的１个家系中，胎儿为Ｃ．１１３８Ｇ＞Ａ杂
中华围产医学杂志２０１６年２月第１９卷第２期Ｃｈｉｎ
Ｊ ＰｅｒｉｎａｔＭｅｄ，Ｆｅｂ．２０１６，Ｖ０１．１９，Ｎｏ．２
・８５・
・胎儿医学专栏・
软骨发育不全家系产前诊断与基因突变分析
郝胜菊 闫有圣 李静
郑雷 张钏
梁济慈
陈雪
【摘要】
目的
探讨成纤维细胞生长因子受体３（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ
ｇｒｏｗｔｈ
ｆａｃｔｏｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ３，
ｐａｒｅｎｔｓ ｗｈｏ ｈａｄ
ａｎ
［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ］
Ａｃｈｏｎｄｒｏｐｌａｓｉａ；Ｐｒｅｎａｔａｌ
ｄｉａｇｎｏｓｉｓ；Ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ，ｔｙｐｅ ３
软骨发育不全（ａｃｈｏｎｄｒｏｐｌａｓｉａ，ＡＣＨ）是人 类侏儒症中最常见的遗传性骨病，为常染色体显性 遗传，其发病率为１／１
了ＡＣＨ的主要症状【２］，患者主要表现为骨骼生长 发育异常，身材矮小不成比例，以及头大、特殊面 容和“三叉戟手”等特征口】，但智力发育及性功能 正常。 股骨长度是产前超声检查时常规测量胎儿的长 骨长度，也是孕期计算胎儿体重的重要数据之一。 股骨长度常用于估计胎龄、评估胎儿宫内生长发育 情况等。软骨发育不全的主要超声表现为四肢均匀 短小畸形，头颅增大，胸廓狭窄，腹部膨隆，腹围 增大，但躯干骨接近正常。产前超声检查仅能在孕 中、晚期诊断ＡＣＨ，且确诊较为困难，故需要与 其他诊断技术相配合。 ＡＣＨ主要是由于成纤维细胞生长因子受体３
ｍｌ。
化科技有限公司）说明书进行模板ＤＮＡ的提取， 于一２００Ｃ保存备用。 ２．引物设计与ＰＣＲ扩增：针对ＦＧＦＲ３基因， 外显子１０参考Ｓｈｉａｎｇ等＂１的方法合成引物。引物 由上海生工基因公司合成。上游：５＇－ＡＧＧＡＧＣＴＧＧ— ＴＧＧＡＧＧＣＴＧＡ一３’；］：游：５’一ＧＧＡＧＡＴＣＴＴＧＴＧ— ＣＡＣＧＧＴＧＧ一３’。聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ 包括１０ＸＰＣＲ
ｉｎｃｌｕｄｅｄ
ａｎｄ ｐｒｅｎａｔａｌ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｗａｓ
ｏｆｆｅｒｅｄ ｔｏ ｔｈｅｍ ｔｈｒｏｕｇｈ ａｍｎｉｏｃｅｎｔｅｓｉｓ
Ｒｅｓｕｌｔｓ
Ｐｒｅｎａｔａｌ
ｕｌｔｒａｓｏｎｏｇｒａｐｈｙ ｔｅｓｔ
ｓｈｏｗｅｄ ｓｈｏｒｔｅｒ ｆｅｍｏｒａｌ ｌｅｎｇｔｈ，ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｌｅｓｓ ｔｈａｎ
合型。父母双方均为Ｃ．１
１
３８Ｇ＞Ａ杂合型突变的１个家系中，胎儿亦为Ｃ．１１ ３８Ｇ＞Ａ杂合型。父母
双方基因检测结果显示正常，但曾生育ＡＣＨ患儿的３个家系，本次妊娠的胎儿基因检测结果未见异
常。３例短肢发育异常胎儿的基因检测结果未发现突变。４例Ｃ．１１３８Ｇ＞Ａ胎儿和３例短肢发育异
常胎儿选择引产；５例基因型正常的胎儿已分娩，随访至出生后１年，表型正常，均为健康个体。 结论ＦＧＦＲ３基因检测可为ＡＣＨ患者或生育过ＡＣＨ患儿的家庭提供遗传咨询和产前基因诊断， 预防出生缺陷的发生。
ＦＧ朋ｊ）基因突变检测在软骨发育不全（ａｃｈｏｎｄｒｏｐｌａｓｉａ，ＡＣＨ）家系中进行产前诊断的价值。
法
方
提取２０１０年７月至２０１４年１２月在甘肃省妇幼保健院遗传中心门诊进行遗传咨询的９个家系
中疑似ＡＣＨ患者及其父母外周血基因组ＤＮＡ，对ＦＧＦＲ３基因外显子１０迸行聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ
Ｊｕｌｅｓ ５ ０００～１／７７
ＡＣＨ患儿。另３例孕２２～２８周超声检查发现胎儿 短肢发育异常，即超声测量胎儿股骨长度＜同孕龄 平均值的２个标准差（ｓｔａｎｄａｒｄ ｄｅｖｉａｔｉｏｎ，ＳＤ）。 取得家属知情同意后，抽取ＡＣＨ患者外周血２
ｍ１，
０００…。１９７８年，
Ｐａｒｒｏｔ首次提出ＡＣＨ；１９００年，Ｍａｒｉｅ描述
３（，Ｇ职ｊ）ｇｅｎｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ
ｐｒｅｐａｒｅｄ ｆｏｒ ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ．Ｄｉｒｅｃｔ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ ｒｅｖｅａｌｅｄ ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ａｆｔｅｒ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｘｏｎ ｌ ０ ｏｆ ＦＧＦＲ３ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｔｈｅ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｍｕｔａｔｉｏｎ．Ｆｅｔａｌ ＤＮＡ ｗａｓ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｆｒｏｍ
பைடு நூலகம்
ｄＮＴＰ、２０ｔｘｍｏｌ／Ｌ引物、１
５０
ＤＮＡ聚合酶和
０Ｃ ３ ｍｉｎ；然后
ｎｇ的ＤＮＡ。ＰＣＲ扩增条件为９４
９４ ｏＣ ３０ Ｓ、６０。Ｃ ３０ Ｓ、７２。Ｃ １
ｍｉｎ，共３５个循环；
最后７２ ｏｃ延伸１０ ｍｉｎ。
３．基因外显子测序分析：对ＰＣＲ扩增产物用 纯化试剂盒纯化后，进行ＦＧＦＲ３基因外显子１０的 直接测序（ＡＢＩ ３５００型ＤＮＡ测序仪，美国ＡＢＩ 公司生产），测序结果与标准序列（ＮＣ ０００００４） 进行比对分析，鉴定ＦＧＦＲ３基因外显子１０是否存 在突变。 ４．随访：孕中、晚期通过超声对胎儿进行详细 的超声筛查，出生后电话随访１年。
Ｃ．１ ｌ
３８Ｇ＞Ａ ｈｅｔｅｒｏｚｙｇｏｕｓ ｍｕｔａｔｉｏｎｓ ｉｎ ｂｏｔｈ ｔｈｅ ｍｏｔｈｅｒ ａｎｄ ｆａｔｈｅｒ．Ａｍｏｎｇ ｔｈｅ ｔｈｒｅｅ ｆａｍｉｌｉｅｓ ｗｉｔｈ ｕｎａｆｆｅｃｔｅｄ ｂｕｔ ｅａｃｈ ｈａｄ ａｄｅ
ｎｏｖｏ
ｐａｒｅｎｔｓ
Ｃ．１１３８Ｇ＞Ａｍｕｔａｔｉｏｎ ｃｈｉｌｄ．ｎｏｍｕｔａｔｉｏｎ ｏｆＣ．１１３８Ｇ＞Ａｇｅｎｏｔｙｐｅｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ
２０ １ ４ ｗａｓ ｃｅｌｌｓ ｉｎ
ｂｏｔｈ ａｍｎｉｏｔｉｃ ｆｌｕｉｄ ａｎｄ ｕｍｂｉｌｉｃａｌ ＣＯｒｄ．ａｎｄ ｔｈｅｎ
ｗｅｒｅ ａｌｓｏ
ｅｘｏｎ
ｌ ０ ｏｆ
ＦＧ脉３ ｗａｓ
ａｌｓｏ ｔｅｓｔｅｄ．Ｔｈｒｅｅ ｆｅｔｕｓｅｓ ｗｉｔｈ
ｏｒ
ｓｈｏｒｔ—ｌｉｍｂ ｄｙｓｐｌａｓｉａ
ｃｏｒｄｏｃｅｎｔｅｓｉｓ． ２－３
（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ
ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒ
孕１６～２３周行羊膜腔穿刺抽取羊水１５ ｍｌ，孕 ２４～２８周行脐静脉穿刺抽取脐血２ 二、方法 １．提取基因组ＤＮＡ：孕妇经腹行羊膜腔穿 刺，抽取羊水ｌ ５ ｍｌ；或行脐静脉穿刺，抽取脐
血２ ｍｌ。按基因组ＤＮＡ提取试剂盒（北京天根生
ｓｔａｎｄａｒｄ ｄｅｖｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｎｏｒｍａｌ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｄｙｓｐｌａｓｉａ ｆｅｔａｌ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｆｏｒ ｆｅｍｏｒａｌ ｓｈｏｒｔ．Ｆｅｍｕｒ ｌｅｎｇｔｈ ｉＳ １０ｗｅｒ
ｔｈａｎ ２—３ ｓｔａｎｄａｒｄ ｄｅｖｉａｔｉｏｎ ｍｉｎｕｓ
ｎｏｒｍａｌ
ｖａｌｕｅ．ａｎｄ ｄｉｓｃｒｅｐａｎｃｙ ｉｎ ｂｉｐａｒｉｅｔａｌ ｄｉａｍｅｔｅｒ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｆｅｔｕｓｅｓ
ｏｎｅ
ａｔ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｇｅｓｔａｔｉｏｎａｌ ａｇｅ．Ｉｎ ｔｈｅ ｆｏｕｒ ｆａｍｉｌｉｅｓ ｗｉｔｈ
ＡＣＨ ｐａｒｅｎｔ．Ｃ．１ １ ３８Ｇ＞Ａ ｈｅｔｅｒｏｚｙｇｏｕｓ ｍｕｔａｔｉｏｎ ｗａｓ
ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｉｎ ａｌｌ ｏｆ ｔｈｅ ｆｏｕｒ ｍｏｔｈｅｒｓ．ｗｈｉｌｅ ｔｗｏ ｆｅｔｕｓｅｓ ａｍｏｎｇ ｔｈｅｍ ｓｈｏｗｅｄ Ｃ．１１ ３８Ｇ＞Ａ ｈｅｔｅｒｏｚｙｇｏｕｓ ｍｕｔａｔｉｏｎ ｍｕｔａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｏｔｈｅｒ
Ｍａｔｅｒｎａｌ ａｎｄ Ｃ自ｆｌｄ Ｈｅａｌｔｈ Ｈｏｓｐｉｔａｌ．Ｌａｎｚｈｏｕ ７３００５Ｄ。Ｃｈｉｎａ
Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｎｔｈｏｒ：Ｃｈｅｎ Ｓｕｅ，Ｅｍｎｉｌ：２４２５７６１４《油ｑ．ｃｏｍ
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］０ｂｊｅｃｔｉｖｅ
Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ
ｔｈｅ ｖａｌｕｅ ｏｆ ｐｒｅｎａｔａｌ ｇｅｎｅｔｉｃａｌ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｂｙ ｍｕｔａｔｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ
ｌｎ
ｉｎ
ｔｈｅｉｒ ｆｅｔｕｓｅｓ．ｎｅｉｔｈｅｒ
ｔｈｅ ｔｈｒｅｅ ｆｅｔｕｓ
ｗｉｔｈ ｓｈｏｒｔ
ｌｉｍｂ ｄｙｓｐｌａｓｉａ．Ｆｏｕｒ ｆｅｔｕｓｅｓ ｗｉｔｈ
ａ
ｃ．１ １
３８Ｇ＞Ａ ｍｕｔａｔｉｏｎ
ａｎｄ ｔｈｒｅｅ ｗｉｔｈ
ｓｈｏｒｔ—ｌｉｍｂ ｄｙｓｐｌａｓｉａ ｗｅｒｅ ｔｅｒｍｉｎａｔｅｄ．Ｔｈｅ ｏｔｈｅｒ ｆｉｖｅ ｆｅｔｕｓｅｓ ｗｈｏｓｅ ｇｅｎｏｔｙｐｅ ｗａｓ ｎｏｒｍａｌ ｗｅｒｅ
ｔｗｏ
ｗｅｒｅ
ｎｏｒｍａｌ．Ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ ｏｔｈｅｒ ｔｗｏ ｆｅｔｕｓｅｓ ｗｉｔｈ Ｃ．１ｌ ３８Ｇ＞Ａ ｈｅｔｅｒｏｚｙｇｏｕｓ ｍｕｔａｔｉｏｎ
ｆｒｏｍ ｏｔｈｅｒ ｔｗｏ ｆａｍｉｌｉｅｓ．ｏｎｅ’Ｓ ｆａｔｈｅｒ ｈａｄ Ｃ．１ １ ３８Ｇ＞Ａ ｈｅｔｅｒｏｚｙｇｏｕｓ ｍｕｔａｔｉｏｎｓ，ｂｕｔ ｎｏｔ ｔｈｅ ｍｏｔｈｅｒ，ｔｈｅ ｏｔｈｅｒ ｈａｄ
ｃｈａｉｎ
３，ＦＧＦＲ３）基
ｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）反应为２５¨ｌ标准扩增体系，其中
ｂｕｆｆｅｒ、１．５ ｍｍｏｌ／Ｌ Ｍｇ”、２．５ ｍｍｏｌ／Ｌ
Ｕ Ｔａｑ
因突变所致Ｍ】。该基因定位于染色体４ｐ１６．３上。研 究发现，ＡＣＨ患者大多是核苷酸Ｃ．１１３８Ｇ＞Ａ突 变，少数为Ｃ．１ １３８Ｇ＞Ｃ突变。这２种碱基突变的 结果是导致编码的第３８０位氨基酸由甘氨酸（Ｇｌｙ） 转变成精氨酸（Ａｒｇ）［５‘６］。因此，检测软骨发育不 全患者ＦＧＦＲ３基因１ １３８位核苷酸是否发生突变， 是诊断ＡＣＨ的金标准。本研究应用基因测序技术， 对有ＡＣＨ家族史的９例胎儿和超声检查发现短肢 发育异常的３例胎儿进行了ＦＧＦＲ３基因产前分子 诊断，以达到优生的目的。 资料与方法 一、研究对象 ２０１０年７月至２０１４年１２月在甘肃省妇幼保 健院遗传中心门诊进行遗传咨询的９个ＡＣＨ家 系，孕１６—２０周时要求行产前诊断。其中４个家 系的母方为ＡＣＨ患者，父方正常；１个家系的父 方为ＡＣＨ患者，母方正常；１个家系父母双方均 为ＡＣＨ患者；３个家系父母双方正常，但曾生育