胸苷激酶 1(TK1) 及其在临床肿瘤学中应用

胸苷激酶  1(TK1) 及其在临床肿瘤学中应用
胸苷激酶  1(TK1) 及其在临床肿瘤学中应用

单克隆抗体的制备流程

单克隆抗体的制备流程 (一)动物的选择与免疫 1.动物的选择纯种BALB/C小鼠,较温顺,离窝的活动范围小,体弱,食量及排污较小,一般环境洁净的实验室均能饲养成活。目前开展杂交瘤技术的实验室多选用纯种BALA/C小鼠。 2.免疫方案选择合适的免疫方案对于细胞融合杂交的成功,获得高质量的McAb 至关重要。一般在融合前两个月左右根据确立免疫方案开始初次免疫,免疫方案应根据抗原的特性不同而定。 (1)可溶性抗原免疫原性较弱,一般要加佐剂,半抗原应先制备免疫原,再加佐 剂。常用佐剂:福氏完全佐剂、福氏不完全佐剂。 初次免疫抗原1~50μg加福氏完全佐剂皮下多点注射或脾内注射(一般0.8~1ml,0.2ml/点) ↓3周后 第二次免疫剂量同上,加福氏不完全佐剂皮下或ip(腹腔内注射)(ip剂量不宜超过0.5ml) ↓3周后 第三次免疫剂量同一,不加佐剂,ip(5~7天后采血测其效价) ↓2~3周 加强免疫,剂量50~500μg为宜,ip或iv(静脉内注射) ↓3天后 取脾融合 目前,用于可溶性抗原(特别是一些弱抗原)的免疫方案也不断有所更新,如:① 将可溶性抗原颗粒化或固相化,一方面增强了抗原的免疫原性,另一方面可降低抗 原的使用量。②改变抗原注入的途径,基础免疫可直接采用脾内注射。③使用细胞 因子作为佐剂,提高机体的免疫应答水平,增强免疫细胞对抗原的反应性。 (2)颗粒抗原免疫性强,不加佐剂就可获得很好的免疫效果。以细胞性抗原为例,免疫时要求抗原量为1~2×107个细胞。 初次免疫1×107/0.5ml ip ↓2~3周后 第二次免疫1×107/0.5ml ip ↓3周后 加强免疫(融合前三天)1×107/0.5ml ip或iv ↓ 取脾融合 (二)细胞融合

胸苷激酶1项目

胸苷激酶1(TK1)细胞周期分析项目说明 一、 癌症已成为最主要的致死类疾病 近10年来,癌症逐渐取代心血管疾病,成为中国人首要致死类病变,防癌形势严峻(右图)。《2012中国肿瘤登记年报》显示,国人每分钟有6人确诊为肿瘤。以我省(湖南省)为例,截至2010年,肿瘤死亡率为 143.67/10万(略高于全国肿瘤死亡率135.88/10万),每四到五个死亡者中就有一个死于肿瘤,肿瘤类型以肝癌、食道癌、胃癌、肺癌为主。 二、肿瘤发病率逐渐升高带来的高社会成本和经济压力 癌症病人医疗费用在全民医疗费用中占比极高,根据全国政协教科文卫体委员会和中国癌症基金会2006年编写的《癌症的科学与实践》,如果按照每位病人花费2万元来估算,中国每年癌症 病人的医疗费用高达近千亿元,占全国医疗卫生总费用的20%以上,远 图1:2009年全国死亡病因分析 2006年全国医疗费用支出 肿瘤 其他 >20%

高于其他慢性病的医疗费用。而一般以为,2万元每人的标准完全被低估了。 世界卫生组织指出:三分之一以上甚至约一半以上的癌症都是可以预防的。而癌症预防的成本,远远低于癌症治疗的花费。 同时造成肿瘤发病率和死亡率高及费用高昂的原因有: (1)早期发现难:缺乏经济、灵敏度高的适于早期全身筛查的检测手段:肿瘤标记物增强CT PET-CT 内窥镜免疫组化是否定性否否是配合组化否 灵敏度低,尤其早期高高高高 特异性低低高高高 发现恶变阶段 早期灵敏度 低,中晚期灵 敏度高 肿瘤早期 癌巢早期, 较CT早6 个月 癌前病变期 不典型组 织增生 是否适合全 身筛查 需联合使用是是否否 安全性微创或无创造影剂易产生 过敏,辐射 辐射 微创,但易发 生出血 样本来源 有创 费用低高昂贵低低 (2)中晚期治疗难 原因1:治疗过程中,缺乏准确预后的方法,治疗方案评估信息不足,方案有效性评估不足; 原因2:治疗恢复过程中,缺乏灵敏、准确的复发风险评估方案,无法进行动态、有效的评估。 以上原因使得难以对患者实施具有针对性的个体化治疗方案。往往各

心胸外科题库完整

胸外科题库 一、名词解释 1 反常呼吸:是一种病理的呼吸运动,是胸部外伤后至胸部多根多处肋骨骨折,胸壁失去完整肋骨支撑而软化所致,正常人在吸气时胸廓抬起,呼气时胸壁下降; 反常呼吸运动正好相反,在吸气时胸廓下降,呼气时胸壁抬 起。 2 纵膈扑动:是在开放性气胸时,呼、吸气时,两侧胸膜腔压力不均衡出现周期性变化,使纵膈在吸气时移向健侧,呼气时移向伤侧,称为纵隔扑动。 3 凝固性血胸:当血液在胸腔迅速积聚且积血量超过肺、心包及膈肌运动所起的去纤维蛋白作用时,胸腔积液发生凝固,成为凝固性血 胸。 4 创伤性窒息:是钝性暴力作用于胸部所致的上半身广泛皮肤、黏膜、末梢毛细血管淤血及出血性损害,是闭合性胸部伤中一种较为少见的综合征。 5 Horner 综合征:肿物压迫颈部交感神经,引起病侧眼睑下垂、瞳孔缩小、眼球陷、同侧额部与胸壁无汗或少汗。 6 休克:休克是机体遭受强烈的致病因素侵袭后,导致有效循环血量锐减,组织血液灌注不足引起的以微循环障碍、代障碍和细胞受伤为特征的病理性综合征。 7 呼吸衰竭:呼吸衰竭是各种原因引起的肺通气和(或)换气功能严重障碍,以致不能进行有效的气体交换,导致缺氧伴(或不伴)二氧化碳潴留,从而引起一系列生理功能和代紊乱的临床综合征。 8 DIC :是许多疾病在进展过程中产生凝血功能障碍的最终共同途径,是一种临床病理综合征。由于血液凝血机制被弥散性激活,促发小血管广泛纤维蛋白沉着,导致组织和器官损伤;另一方面,由于凝血因子的消耗引起全身性出血倾向。 9 心肌梗死:是指在冠状动脉病变的基础上,供应心肌某一节段的冠状动脉供血急剧减少或中断,所引起的心肌缺血性的坏死。 二、简答 1、低钾血症、高钾血症的临床表现和处理: (1)低钾血症临表:①肌无力,一般先出现四肢软弱无力,后延及躯干和呼吸肌。严重者出现软瘫、腱反射减弱或消失②消化道功能障碍,恶心、呕吐、腹胀、肠鸣音减弱或

最新心胸外科出科考试试题答案

心胸外科出科考试试题 姓名职称分数 一、名词解释(20分) 张力性气胸:是指较大的肺气泡破裂或较大较深的肺裂伤或支气管破裂,裂口与胸膜腔相通,且形成单向活瓣,又称高压性气胸。 脓胸:病菌侵入胸膜腔,产生脓性渗出液积聚于胸膜腔内的化脓性感染,称为脓胸。 二、选择题(40分) 1、开放性气胸紧急处理( E ) A :气管内插管,呼气末正压通气 B :胸腔闭式引流术 C :吸氧 D :剖胸探查术 E :迅速封闭胸壁创口 2、张力性气胸的表现特征为(B ) A :压升高,心搏微弱、动脉压降低 B :胸腔内压进行性增高 C :呼吸时的纵隔扑动 D :胸腔引流血量>200mL/h,连续3h E :反常呼吸运动 3、后纵隔最常见的肿瘤是(C ) A :非霍奇金淋巴瘤 B :心包囊肿 C :神经纤维瘤 D :畸胎瘤 E :胸腺瘤 4、胸外伤后出现极度和皮下气肿,最可能的诊断是(D ) A :食管损伤 B :胸壁挫裂伤 C :肺挫裂伤 D :张力性气胸 E:肋骨骨折 5、胸部损伤下述哪种情况为剖胸探查手术适应征(D ) A:气胸肺萎陷超过30% B:多根多处肋骨骨折 C:胸部爆震伤 D:进行性血胸 E:损伤性窒息发绀严重 6、开放性胸部损伤诊断的主要依据是(D ) A:胸部皮肤裂伤

B:气管或食管裂伤。 C:肋骨骨折刺破胸膜 D:胸壁创口与胸膜腔相通。 E:开放性肋骨骨折 7、进行性血胸是指( E ) A:损伤后DIC B:血胸量大于500ml C:血胸量大于1000ml D:胸腔闭式引流一次放出血量达500ml E:闭式引流后,引流量每小时大于200ml,持续3小时 8、肺癌的转移方式中,下列何者正确(D ) A:鳞癌发生血行转移出现较早 B:肺泡细胞癌,早期血行淋巴转移 C:腺癌早期发生淋巴转移,血行转移较晚 D:未分化癌早期出现血行,淋巴转移 E:淋巴转移只发生肺癌同侧 9、对放疗最敏感的肺癌是(A ) A:小细胞未分化癌 B:鳞癌 C:腺癌 D:肺泡细胞癌 E:以上均不敏感 10、升主动脉瘤最常见和最严重的后果是(A ) A:破裂 B:主动脉瓣关闭不全 C:压迫气管导致呼吸困难 D:胸骨侵蚀 E:心绞痛与心肌缺血 三、简答题(40分) 1、简答食管的解剖分段 颈段食管:接下咽,至胸骨切迹平面的胸廓入口,内镜距门齿15cm至20cm

2020全国规培 胸心外科学全真模拟试题22(题+答案)

模拟试卷(二) 第 1题:案例分析题(本题1分) 男性,48岁,吞咽困难1个月。30年前因"胃溃疡穿孔"做"胃大部切除术"。入院上消造影提示:食管中段主动脉弓水平长3cm充盈缺损伴管腔狭窄,黏膜破坏,胃呈术后改变(毕Ⅰ式)。辅助检查未发现远隔转移。 应首选何器官作为代食管器官 A.残胃 B.空肠 C.十二指肠 D.带血管蒂空肠段 E.结肠 【正确答案】:E 第 2题:单选题(本题1分) 患者,男性,31岁,被马车压伤胸部,查体:P140次每分,呼吸40次每分,血压:80/60mmHg,面色苍白,听诊患侧呼吸音消失,气管向健侧移位,此时应立即采取哪项检查 A.行立位胸部X线摄片 B.超检查确诊有无胸腔积液 C.行胸部I四 D.立刻行心血管造影明确有无胸腔内大血管损伤 E.患侧胸膜腔穿刺 【正确答案】:E 第 3题:单选题(本题1分) 女性,5分钟前被人用刀刺伤。来诊时烦躁不安,面色苍白,后反应淡漠。查体:脉搏细弱,血压测不到。左胸第4肋间胸骨旁2cm×2cm宽刀刺伤口。心音遥远、微弱。最可能的诊断是 A.心脏损伤 B.左肺损伤 C.左侧血胸 D.左侧气胸 E.左胸腹联合胸 【正确答案】:A 第 4题:案例分析题(本题1分) 男性,52岁,因乏力气促半年来诊。查体:颈静脉怒张,下肢浮肿,肝大肋下四指,腹水征(+),心音钝远。超声心动图示心包增厚粘连有钙化,少量心包积液,心脏收缩舒张受限,各瓣膜未见异常 此症的初步印象是 A.充血性心衰 B.心肌病 C.缩窄性心包炎 D.心包积液 E.心肌炎

【正确答案】:C 第 5题:单选题(本题1分) 患者,男,55岁,既往体健,近3个月来咳嗽,痰中带血丝,胸部平片及CT显示左上肺块影,3cm×3cm,肺门淋巴结不大,锁骨上淋巴结未扪及,无肺结核史,首选的处理方法是 A.手术切除 B.放疗 C.化疗 D.化疗后手术切除 E.观察2个月后复查 【正确答案】:A 第 6题:案例分析题(本题1分) 男性,40岁,饮白酒后2小时,呕吐后突发左胸痛,伴胸闷、心悸2小时就诊。入院时查体:呼吸急促,心率120次/分,体温37.8℃,血压100/60mmHg,胸片提示左侧液气胸 最可能的诊断是 A.急性胃肠炎 B.急性胃扩张 C.食管自发破裂 D.左侧血气胸 E.食管炎 【正确答案】:C 第 7题:单选题(本题1分) 下列各项是张力性气胸的临床特点除了 A.呼吸困难 B.紫绀 C.伤侧肺萎缩 D.纵隔向患侧移位 E.对侧肺膨胀不全 【正确答案】:E 第 8题:单选题(本题1分) 有关食管憩室,下列描述中错误的是哪一项 A.Zenker憩室好发于Killian三角 B.膨出型憩室多有食物存留 C.食管中段憩室大多无症状 D.含有食管壁全层结构的称为假性憩室 E.牵引型憩室好发于气管隆突水平 【正确答案】:D

胸心外科练习题

第三篇胸心外科 第二十六章胸部外伤 一、填空题 1、胸部损伤,根据是否穿破壁层胸膜,造成胸膜腔与外界沟通分为 和两大类。 2、胸部损伤的主要症状; 3、气胸一般分为、、; 4、胸膜腔内积气,称为; 5、Beck三联征、、。 二、判断改错题 1、胸部损伤中,胸骨骨折最为多见。 2、胸部损伤中,第4-7肋骨较长是固定,因此最难折断。 3、胸部损伤中,儿童的肋骨有弹性,承受暴力的能力强,不易折断。 4、胸部损伤中,胸部X线检查,仅能判定肋骨有无骨折,不能判定骨折部位和 性质。 5、胸膜腔内的积血一般是可以凝固。 三、选择题 [A型题] 1、根据胸部创伤分类,下列属于开放性损伤的是。 A.胸部皮肤有伤口,肺压缩40%;B.气胸伴皮下气肿 C.肋骨骨折并气胸D.肋骨骨折并血胸 E.心包填塞 2、下列哪些检查对诊断肋骨骨折最有意义。 A.受伤史B.X线检查C.血气分析 D.局部压痛E.合并皮下气肿 3、肋骨骨折最重要的治疗原则是。 A.骨折复位B.骨折固定C.功能锻炼 D.促进骨折愈合E.预防及治疗并发症 4、胸部创伤后行X线检查,下列哪项意义不大。 A.判断有无肋骨骨折B.判断有无气胸 C.判断有无血胸D.判断有无肋软骨骨折 E.判定有无合并症 5、胸部创伤时,下列哪项X线平片上不能显示。 A.气胸B.血胸C.纵隔及皮下气肿 D.肋软骨骨折E.肺挫伤 6、创伤性气胸,胸腔闭式引流管的位置通常应在。 A.腋前线第2肋间B.锁骨中线第2肋间 C.腋后线第6肋间D.腋前线第6肋间 E.腋中线第6肋间 7、胸部创伤后,血胸不凝固的原因是。 A.弥散性血管内凝血 B.心、肺和膈肌活动的去纤维蛋白的作用 C.凝血酶原减少 D.血小板消耗减少

浙江中医药大学临床生化与检验选择题

第十一章蛋白质和含氮化合物的生物化学检验▲嘧啶核苷酸补救合成途径的主要酶是: A.氨基甲酰磷酸合成酶 B.嘧啶磷酸核糖转移酶 C.胸苷激酶 D.尿苷激酶 E.胞苷激酶 ★苯丙酮尿症的发生是由于 A.苯丙氨酸羟化酶缺陷 B.酪氨酸脱羧酶缺陷 C.苯丙酮酸氧化酶的缺乏 D.酪氨酸羟化酶的缺陷 E.苯丙氨酸转氨酶缺陷 ★苯丙氨酸检测时每个血斑直径大于多少毫米 A.8 B.7 C.10 D.6 E.9 ★下列哪种蛋白质属于负性急性时相反应蛋白? A.C3 B.TRF C.Hp D.CRP E.CER ★动物嘌呤代谢的终产物很多,但不包括: A.尿素 B.H2O2 C.NH3 D.尿酸 E.尿囊酸 ★在急性时相反应中,以下哪项蛋白不增高 A.Hp B.ALB C.AAG D.CRP E.Cp ★血浆中Alb增高可见于 A.丢失过多 B.分解增加 C.血液浓缩 D.分布异常 E.合成不足 正确答案: C

★痛风症是因为血中某种物质在关节、软组织处沉积,其成份为 A.黄嘌呤 B.尿酸 C.尿素 D.胆固醇 E.次黄嘌呤 正确答案: B ●导致嘌呤分解增加的疾病有 A.白血病 B.红细胞增多症 C.多发性骨髓瘤 D.以上都是 E.恶性肿瘤化疗 正确答案: D ▲下列属于急性时相反应蛋白的有|C反应蛋白|β2微球蛋白|甲胎蛋白|α1抗胰蛋白酶|α2酸性糖蛋白 A.在急性炎症性疾病如感染、手术、创伤、心肌梗死和肿瘤等情况下,AAT、AAG、Cp、CRP、Hp以及α1-抗糜蛋白酶、血红素结合蛋白、C3、C4、纤维蛋白原等血浆蛋白浓度会显著升高;而血浆PA、Alb与TRF则出现相应的降低。这些血浆蛋白质统称为急性时相反应蛋白。 ★AAT的遗传表型以哪型最多 A.PiMM B.PiMS C.PiSS D.PiZZ E.PiSZ ▲下列哪种蛋白下降,可协助Wilson病的诊断 A.AAG B.ALB C.CRP D.α2-MG E.Cp ★细胞内含量较多的核苷酸是: A.3′-ATP B.3′-dATP C.5′-ATP D.3′-dUTP E.3′-UTP ▲嘧啶核苷酸补救合成途径的主要酶是: A.胞苷激酶 B.嘧啶磷酸核糖转移酶 C.尿苷激酶 D.氨基甲酰磷酸合成酶 E.胸苷激酶

心胸外科题库完整

胸外科题库 一、名词解释 1反常呼吸:是一种病理的呼吸运动,是胸部外伤后至胸部多根多处肋骨骨折,胸壁失去完整肋骨支撑而软化所致,正常人在吸气时胸廓抬起,呼气时胸壁下降;反常呼吸运动正好相反,在吸气时胸廓下降,呼气时胸壁抬 起。 2纵膈扑动:是在开放性气胸时,呼、吸气时,两侧胸膜腔压力不均衡出现周期性变化,使纵膈在吸气时移向健侧,呼气时移向伤侧,称为纵隔扑动。 3凝固性血胸:当血液在胸腔迅速积聚且积血量超过肺、心包及膈肌运动所起的去纤维蛋白作用时,胸腔积液发生凝固,成为凝固性血 胸。 4 创伤性窒息:是钝性暴力作用于胸部所致的上半身广泛皮肤、黏膜、末梢毛细血管淤血及出血性损害,是闭合性胸部伤中一种较为少见的综合征。 5 Horner综合征:肿物压迫颈部交感神经,引起病侧眼睑下垂、瞳孔缩小、眼球陷、同侧额部与胸壁无汗或少汗。 6 休克:休克是机体遭受强烈的致病因素侵袭后,导致有效循环血量锐减,组织血液灌注不足引起的以微循环障碍、代障碍和细胞受伤为特征的病理性综合征。 7 呼吸衰竭:呼吸衰竭是各种原因引起的肺通气和(或)换气功能严重障碍,以致不能进行有效的气体交换,导致缺氧伴(或不伴)二氧化碳潴留,从而引起一系列生理功能和代紊乱的临床综合征。 8 DIC:是许多疾病在进展过程中产生凝血功能障碍的最终共同途径,是一种临床病理综合征。由于血液凝血机制被弥散性激活,促发小血管广泛纤维蛋白沉着,导致组织和器官损伤;另一方面,由于凝血因子的消耗引起全身性出血倾向。 9心肌梗死:是指在冠状动脉病变的基础上,供应心肌某一节段的冠状动脉供血急剧减少或中断,所引起的心肌缺血性的坏死。 二、简答 1、低钾血症、高钾血症的临床表现和处理: (1)低钾血症临表:①肌无力,一般先出现四肢软弱无力,后延及躯干和呼吸肌。严重者出现软瘫、腱反射减弱或消失②消化道功能障碍,恶心、呕吐、腹胀、

胸心外科出科试题

胸心外科出科试题 一、选择题(2分/题): 1、张力性气胸最主要的诊断依据是: A呼吸困难B皮下气肿C气管移向健侧D肺萎陷E胸穿时针芯自动被推出 2、使被脓腔限制的肺扩张的手术称为: A胸膜粘连分解术B胸廓成形术C肺尖松解术D胸膜纤维板剥离术E肺、胸膜切除术 3、对一个压缩60%的自发性气胸病例,恰当的治疗是: A卧床休息B反复细针穿刺抽吸C胸腔闭式引流D及时开放引流E吹气球和间歇正压呼吸交替应用 4、张力型血气胸病人临床首选处理应为: A补液输血B胸腔穿刺排气排液C立即开胸术D胸带外部固定E气管插管辅助呼吸 5、根据生物学特点,下列哪种肺癌相对手术治疗的效果好: A腺癌B鳞癌C小细胞癌D弥漫性肺泡癌E混合癌 6、食道癌手术中不能用作代食道的器官是: A胃B降结肠C十二指肠D空肠E横结肠 7、纵隔肿瘤最常通过以下哪个机制出现症状: A内分泌活动B肺泡毛细血管填塞C恶性肿瘤的直接侵犯D延髓的迷走神经反射E局部压迫作用 8、胸部损伤造成呼吸困难的原因 A、血气胸所致肺萎陷 B、支气管内分泌物阻塞导致的肺不张 C、疼痛引起胸廓活动明显受限 D、胸壁反常呼吸运动或肺挫伤 E、以上原因都是 9、在张力性气胸的病理生理改变中,下列哪项是错误的 A、较大较深的肺裂伤,裂口形成活瓣 B、纵隔左右摆动 C、严重呼吸循环障碍 D、严重皮下气肿形成 E、伤侧和健侧肺均被严重挤压 10、恶性程度最高、预后最差的肺癌是 A、鳞状细胞癌 B、腺癌 C、细支气管肺泡癌 D、小细胞癌 E、大细胞癌 11、下列哪项X线所见可提示为肺癌 A、多房性空洞 B、圆形薄壁空洞,并有液平面 C、上叶空洞,空洞周围有纤维化病变 D、厚壁偏心性空洞,内壁不平 E、圆形阴影,顶部有月形透明区 12、食管癌根治性切除应距肿瘤上下 A、2cm B、2-3cm C、3-5cm D、5cm以上 E、10cm以上 13、诊断食管癌时,下列哪项不是常规检查

AFP启动子介导胸苷激酶表达载体的构建及其特异性表达.

AFP启动子介导胸苷激酶表达载体的构建及其特异性 表达 【摘要】【目的】构建AFP启动子介导HSV-TK基因表达载体,并对其在肝癌细胞中特异性表达进行分析。【方法】采用PCR法扩增人AFP基因启动子。回收纯化后克隆入pBluescript II KDR-TK相同克隆位点,切取AFP-TK片段,然后通过酶联反应插入到pEGFP-C1中,构建成pEGFP-C1-AFP-TK。对获得的片段进行鉴定、细胞靶向和外源基因表达的鉴定。【结果】序列分析表明,该启动子含300 bp核苷酸,与已报道的序列比较,100%相符。限制性酶切分析,重组质粒pEGFP-C1-AFP-TK已经克隆AFP启动子。RT-PCR及Western blotting 分析pEGFP-C1-AFP-TK转染后的HepG2细胞后,表明TK基因在mRNA水平上能有效的表达,裂解后的HepG2细胞膜蛋白中有相对分子质量约61 ~ 83 ku大小的特异性条带。【结论】人肝细胞癌(HepG2)靶向性质粒pEGFP-C1-AFP-TK 构建成功。 【关键词】 AFP启动子; HepG2细胞; 靶向表达; 单纯疱疹病毒-胸腺嘧 啶激酶1 Abstract:【Objective】 To construct the herpes simplex virus thymidine kinase type 1(HSV-1-TK) expression vector with alpha- fetoprotein (AFP) expression gene as starter, and analyzing its specific expression. 【Method】 The AFP promoter was amplified by means of PCR. It was purified and cloned on the cloning site of pBluescript II KDR-TK. Then the AFP-TK, fragment was obtained and inserted into pEGFP-C1 with T4 DNA ligase. The obtained fragment was identified for its cell targeting and exogenous genes expression. HepG2 genome DNA was extracted as template to amplify the AFP sequence (300 bp). Its PCR product was then conjugated with pMD-18,then amplified and extracted. The pMD-18-AFP was digested, and then the fragment was cloned into pBluescriptII KDR-TK. Then to produce the whole expressing fragment of AFP-TK which was inserted into the pEGFP-C1. Then the construction of pEGFP-C1-AFP-TK finished. The gene product was sent for sequencing evaluation. And the expression of pEGFP-C1-AFP-TK in HepG2 cells and ECV 304 cells was evaluated. And its mRNA expression was also evaluated. 【Result】 The sequence analysis proved that the promoter contained 300 bp nucleic acid which was 100% consistency with literatures. The result of restriction endonuclease analysis demonstrated that the recombined pEGFP-C1-AFP-TK was cloned within the AFP as an AFP promoter. The results of RT-PCR and Western blotting from the HepG2 cells transfected with pEGFP-C1-AFP-TK demonstrated that TK mRNA was expressed effectively. The lysis from the HepG2 cells was a specific band of 61-83 ku. The

胸外科试题

2016年胸外科护理试题 单项选择题 1 . 胸部损伤后咯血或痰中带血提示:C A. 气胸 B. 血胸 C. 肺或支气管损伤 D. 食管损伤 E. 损伤性窒息 2. 能出现反常呼吸的肋骨骨折是:D A. 两根肋骨骨折 B. 两根以上肋骨骨折 C. 双侧肋骨单根骨折 D. 多根多处肋骨骨折 E. 多发性肋软骨骨折 3. 患者胸部外伤2小时.查体:脉搏120/分,血压12/8kPa,右胸可触到骨

擦感和皮下气肿,叩诊鼓音,呼吸音消失,急救处理是: B A. 输血,补液,抗休克 B. 立即胸腔排气 C. 胶布固定 D. 应用升压 E. 氧气吸入 4. 男性,65岁,低热,咳嗽并痰中带血丝3个月,胸片显示左肺上叶不张,少量胸膜腔积液。为确诊进一步检查应首选 D 5.A. 胸部CT 6.B. 剖胸探查 7.C. 胸腔镜检查 8.D. 支气管镜检查 9.E. 经胸壁穿刺活组织检查 10. 食管癌病理分型,哪项是错误是C 11.A. 缩窄型 12.B. 蕈伞型

13.C. 梗阻型 14.D. 髓质型 15.E. 溃疡型 16. 食管癌病人有持续性胸背痛,多表示B 17.A. 癌肿部有炎症 18.B. 癌已侵犯食管外组织 19.C. 有远处转移 20.D. 癌肿较长 21.E. 食管气管瘘 22. 男性,52岁。6个月前发现进食哽噎感,其后症状逐渐加重,近3周只能进全流质,体重减轻,体力下降。查体:脉搏80次/分,血压17/12kPa,体温℃,消瘦,颈、锁骨上淋巴结未触及,化验正常,食管钡剂造影于食管中、下段见8cm狭窄,粘膜破坏,其诊断是E 23.A .贲门失弛缓症 24.B. 食管良性肿瘤 25.C .腐蚀性食管灼伤

胸苷激酶1(thymidine kinase 1,简称TK1)

细胞质胸苷激酶也称为胸苷激酶1(thymidine kinase 1,简称TK1),它和线粒体胸苷激酶(thymidine kinase2,简称TK2)为同工酶,是胸苷激酶在细胞内存在的两种形式。胸苷激酶1(TK1)与细胞增殖有密切关系。 胸苷激酶1(TK1)是DNA合成中的关键酶之一,它催化胸苷(Tdr)磷酸化为胸苷一磷酸(TMP),进而形成的胸苷三磷酸(TTP——DNA合成中的4中必须脱氧核苷酸之一),从而参与DNA合成(如图1)。 TK1在细胞增殖DNA合成中的作用 (图1:TK1在细胞增殖DNA合成中的作用机理图) TK1水平的升高和DNA的合成成正相关,在细胞周期中,TK1在G1期晚期开始升高,S期达到最高,至G2期开始下降,由于TK1与细胞周期S 期的特殊相关性,又被称为“S期关键酶”,与细胞增殖相关。 研究表明,对于异常增殖类病变(如:恶性组织病变,肿瘤等),由于病变细胞缺失了凋亡调控,DNA合成剧增会导致TK1水平的异常升高,即存在恶性增殖病变患者血清内TK1酶含量会比正常人有2-200倍的升高(图2)。目前,胸苷激酶1检测被广泛应用于体检及临床中的恶性增殖病变筛查和治疗后的跟踪监测。 TK1水平在正常与异常增殖中的变化 (图2:TK1在正常增殖与异常增殖患者血清中的差异) 编辑本段研究历史 1950s 胸苷激酶1被发现; 1980s 胸苷激酶1在世界范围内掀起研究热潮,美国、欧洲、日本均开始胸苷激酶1的相关研究;

1986 极富盛名的诺贝尔奖评审委员会所在的瑞典Karolinska医学院在Bernhard Tribukait教授(瑞典Karolinska大学终身教授,流式细胞技术发明者)的倡导下,成立了胸苷激酶1研究组,开始TK1的基础及应用研究; 1990s 胸苷激酶1活性检测方法及试剂盒问世,但是终由于操作方法的繁琐和对实体肿瘤灵敏度偏低等问题,在掀起一段热潮后终归沉寂; 1996 血清胸苷激酶1浓度免疫化学发光检测方法问世,解决了之前的实体瘤灵敏度偏低问题,同时免疫化学发光法更易操作,无放射污染; 2006- 血清胸苷激酶1检测再次掀起了医学临床研究热潮。 编辑本段应用价值 近年来,随着对肿瘤认识的加深,肿瘤是一种“慢性增殖类”病变的概念已为越来越多的人所接受。即,肿瘤的发生始于细胞癌变和组织的恶性增殖病变,但是从细胞开始发生癌变到原位癌的出现,是一个漫长的过程,往往需要8-15年,但原位癌一旦形成到由于肿瘤致死,只需要1-2年时间。所以,进入21世纪以来,WHO(世界卫生组织)就提出要将肿瘤的预防提前到原位癌尚未形成的“癌前病变”(已有一定程度的组织增生,但未成癌。WHO规定有20%几率进程为肿瘤的增殖类病变称为“癌前病变”)时期,以达到早发现、早诊断、早治愈的效果。 但是目前常用的肿瘤检测手段:肿瘤标志物、影像学对于早期肿瘤几乎无能为力,大部分肿瘤标志物对于早期肿瘤的灵敏度低于30%,影像学目前能够最早检测到癌巢直径为0.5cm,也以成癌。是否能有一种与恶性增殖密切相关的标志物能够及时提示体内出现增殖异常,及早提起关注已成为广大诉求。 胸苷激酶1(TK1)基于与细胞增殖的密切关系,能够及时提示体内癌前病变是否已出现恶性进展,再根据其他阳性体征,有针对性的进行干预,能够达到阻止肿瘤真正发生,预防肿瘤的效果。 编辑本段应用案例 体检应用 评估各类增殖类疾病恶变风险:处于过度增殖的增殖类疾病是肿瘤形成的第一步。基于TK1与细胞增殖的密切关系,能够灵敏地检查出TK1浓度的变化,从而发现恶性增殖风险,为肿瘤的预防提供增殖信息,适用于健康人群的肿瘤预防检测。 临床应用

2020全国规培 胸心外科学全真模拟试题13(题)

2020全国规培 胸心外科学全真模拟试题13 第 1题:单选题(本题1分) 男性,28岁。左胸外伤,胸痛,气促,痰中带血,呼吸36次/分,心律108次/分,血压14.6/10.7kPa (110/80mmHg),躁动,气管明显右移,左胸前壁有3cm×3cm反常呼吸区,可触及广泛皮下气肿,左胸叩诊过清音,听诊呼吸音弱,首要的处理应为( ) A.立即加压包扎 B.左胸放置闭式引流 C.立即气管插管辅助呼吸 D.给镇静、止痛药物,必要时心包穿刺 E.剖胸探查 第 2题:A1/A2型题(本题1分) 患者男,56岁,因不稳定心绞痛入院。冠状动脉造影提示3支病变,行3处冠脉内支架治疗,术后未坚持药物治疗,术后1个月突发胸部疼痛2小时入院。急诊冠状动脉造影检查提示2处支架完全闭塞。此时最恰当的治疗是 A.急诊PTCA B.急诊冠状动脉搭桥术 C.溶栓治疗 D.硝酸甘油静脉输入 E.主动脉内球囊反搏治疗 第 3题:单选题(本题1分) 淋巴瘤确诊最重要依据是 A.组织病理+免疫组化 B.细胞学检查结果 C.影像诊断 D.临床诊断 E.血生化+血常规检查 第 4题:B型题(本题0.5分) 肺动脉瓣狭窄,超声心动图显示( ) A.左心房增大 B.左心室增大 C.右心房增大 D.右心室增大 E.左心房、左心室增大 第 5题:A1/A2型题(本题1分) 食管癌的组织病理学分型中,不包括 A.鳞状细胞癌 B.单纯腺癌和腺鳞癌 C.黏液细胞癌 D.黏液表皮样癌和腺样囊性癌

D.黏液表皮样癌和腺样囊性癌 E.未分化癌 第 6题:单选题(本题1分) 诊断室性心动过速最有力的心电图证据是 A.心率140~200次/分 B.RR>PP(房室分离) C.QRS波群增宽>0.12秒 D.出现心室夺获或室性融合波 E.节律整齐或轻度不齐 第 7题:单选题(本题1分) 女,64岁,胸背疼痛一周,CT检查如图,最可能的诊断为( ) A.左上肺结核球 B.左上肺周围型肺癌 C.左上肺炎性假瘤 D.左上肺单发性转移癌 E.左上肺错构瘤 第 8题:A1/A2型题(本题1分) 对肺癌的基本论述中,下列不正确的是 A.起源于支气管黏膜上皮,亦称支气管肺癌,占肺实质恶性肿瘤的90%~95% B.多在40岁以上发病,发病年龄高峰60~79岁之间 C.生长速度和转移扩散与组织学类型、分化程度等生物学特性有关 D.右肺多于左肺,上叶多于下叶,从主支气管到细支气管均可发生 E.起源于肺段支气管以下,位置在肺周围者称为中央型肺癌 第 9题:单选题(本题1分) 下列心动过速哪项是绝对不规则的 A.心房扑动 B.室性心动过速 C.窦性心动过速 D.心房颤动

胸心外科学题库19-0-8

胸心外科学题库19-0- 8

问题: [单选,共用题干题]男性,48岁。吞咽困难1个月。30年前曾因"胃溃疡穿孔"行胃大部切除术。上消化道X线造影:食管中段长3cm充盈缺损伴管腔狭窄,黏膜破坏。目前,首先要做的检查是()。 A.A.血生化、肝肾功能、肺功能 B.食管镜或胃镜检查 C.食管细胞学检查 D.胸部X线摄片 E.胸部CT检查

问题: [单选,共用题干题]男性,48岁。吞咽困难1个月。30年前曾因"胃溃疡穿孔"行胃大部切除术。上消化道X线造影:食管中段长3cm充盈缺损伴管腔狭窄,黏膜破坏。诊断一经明确,治疗宜采取()。 A.A.放疗 B.化疗 C.食管内支架 D.食管癌根治手术 E.胃造瘘术

问题: [单选,共用题干题]女性,25岁。胸闷、咳嗽1个月。X线胸片检查:上纵隔内有一直径约5cm肿块影,随吞咽上、下运动。明确诊断后,宜采取的治疗是()。 A.A.口服碘剂 B.131Ⅰ治疗 C.化疗 D.外科手术 E.口服甲硫氧嘧啶 出处:古诗词 https://www.360docs.net/doc/7413552994.html,;

问题: [单选,共用题干题]女性,25岁。胸闷、咳嗽1个月。X线胸片检查:上纵隔内有一直径约5cm肿块影,随吞咽上、下运动。最可能的诊断是()。 A.A.胸骨后甲状腺肿 B.神经纤维瘤 C.淋巴瘤 D.畸胎类肿瘤 E.胸腺瘤

问题: [单选,共用题干题]男性,46岁。X线胸片检查发现左上肺外带有一直径约1cm结节。痰液检查未发现癌细胞和抗酸杆菌。纤维支气管镜检查为阴性。关于肺内小病灶的术前定位手段,不采用的是()。 A.A.胸部CT B.胸部CT或B超引导下用亚甲蓝注入病灶 C.胸部CT或B超引导下医用胶水注入病灶 D.胸部CT或B超引导下带钩钢丝固定病灶 E.胸部B超定位

规培考试题库-胸心外科练习 (4)

胸心外科练习 姓名:秦毅得分:0.00 总分:100 及格分:60 考试时间:2016- 一 . 单选题(共90题,每题1分) 1 .下列哪项检查常用于周围神经损伤的诊断与修复水平的判断 A . Tinel征 B . Thomas征 C . 指鼻试验 D . Hoffmann征 E . 腹壁反射 2 .早期滑膜结核与类风湿关节炎鉴别的可靠依据是 A . 累及关节的数目 B . 血沉是否正常 C . 滑膜组织病理学检查 D . 结核菌素试验 E . 关节间隙是否狭窄 3 .诊断门静脉高压症的依据不包括 A . 乙型肝炎病史 B . 脾肿大和脾功能亢进 C . 呕血和黑便 D . 腹水 E . 黄疸 4 .诊断腹腔内脏损伤最有价值的方法是 A . 超声波检查 B . 腹腔穿刺腹腔灌洗术 C . 腹部压痛 D . X线检查 E . 放射性核素扫描 5 .左右半肝划分的标志为 A . 镰状韧带 B . 门静脉 C . 胆总管 D . 下腔静脉右缘至胆总管中部 E . 下腔静脉左缘至胆囊中部 6 .全脓胸是指脓液积聚在下述哪个部位 A . 肺与纵隔之间 B . 肺与横膈之间

C . 肺与局部胸壁之间 D . 占据一侧胸膜腔 E . 肺叶之间 7 .早期胃癌的概念是 A . 局限于胃窦内 B . 局限于黏膜及黏膜下层 C . 直径在2cm以内 D . 无淋巴结转移 E . 尚未侵及浆膜层 8 .迄今尚无恶性变报道的骨肿瘤是 A . 腱鞘巨细胞瘤 B . 孤立性内生软骨瘤 C . 骨样骨瘤 D . 单发性骨软骨瘤 E . 骨囊肿 9 .肾损伤手术探查时,不宜 A . 经腹部切口手术 B . 先探查和处理腹腔器官损伤 C . 及早打开肾周筋膜 D . 应显露和阻断肾蒂,检查肾脏 E . 一侧肾损伤严重而对侧肾良好时才作肾切除 10 .主动脉缩窄的手术方式,哪一项是错误的 A . 狭窄段切除直接吻合 B . 狭窄切开补片扩大或左锁骨下动脉蒂垂片成形 C . 人造血管旁路或置换术 D . 球囊扩张术 E . 主动脉瓣膜置换术 11 .急性胆管炎典型的Charcot三联症是 A . 寒战高热,肝区持续胀痛 B . 突发右上腹束带状剧痛,轻度黄疸,低血压 C . 突发右上腹绞痛,畏寒发热,胆囊肿大 D . 突起剑突下偏右阵发绞痛,寒战高热,黄疸 E . 以上都不是 12 .男,20岁,近2日乏力、畏食、上腹痛,伴恶心呕吐,当腹痛尚未转移到右下腹前,在诊断急性阑尾炎上具有重要意义的是 A . 可以出现发热 B . 已有白细胞显著增高 C . 脐周压痛及反跳痛 D . 压痛固定在右下腹

细胞培养与病毒培养实验步骤

实验二传代细胞培养与病毒在传代细胞中的培养 一、实验目的 了解倒置显微镜的构造与使用,了解不同传代细胞的形态及接毒后的病变特征,掌握细胞的传代培养方法、病毒接种方法及收毒方法。 二、常用细胞的种类 BHK-21:仓鼠肾传代细胞 PK-15:猪肾传代细胞 IBRS-2:猪肾传代细胞 Hela:人的子宫瘤细胞 Vero:非洲绿猴肾细胞 Marc-145:来源于Vero细胞 TK-143:人的胸苷激酶阴性细胞 Sf9:昆虫细胞 三、材料 1、100ml细胞瓶、吸管、吸球、96孔细胞培养板、加样器、枪头 2、BHK-21(baby hamster kidney)细胞 3、0.25%胰酶 4、生长液:含10%犊牛血清、200U/ml青、链霉素的DMEM 维持液:含2-5%犊牛血清、200U/ml青、链霉素的DMEM

5、伪狂犬病病毒液(PRV) 四、传代细胞培养的条件要求 1)细胞密度:2-3×105个/ml 2)pH范围最适pH7.0-7.4,耐受pH6.6-7.8 3)培养温度 哺乳动物细胞一般为37℃ 昆虫细胞28-30℃ 五、常用细胞分散剂与作用原理 1、胰酶使精氨酸或赖氨酸的羧基和其他氨基酸的氨基之间的多肽链发生水解, 导致细胞间质水解而使细胞或组织块消化为分散的单个细胞。 2、乙二胺四乙酸二钠(EDTA):与二价钙、镁离子结合,从而使细胞分散。 3、灰色链丝菌酶:由灰色链丝菌提取的一种酶制剂,是蛋白酶、氨肽酶和羧肽 酶的混合物。 六、营养液 1、人工综合营养液 氨基酸、糖类、无机盐类、维生素、辅酶、嘌呤、嘧啶、辅助生长因子。 2、血清 1)血清的种类 胎牛血清、新生犊牛血清、成年牛血清、马血清、鸡血清、兔血清、羊血清、人血清,其中以新生犊牛血清使用最为广泛。 2)血清的处理

体检发现的218例肿瘤病人细胞质胸苷激酶1在临床应用中的分析与研究

云南医药2012年第33卷第6期 ·论著· 体检发现的218例肿瘤病人细胞质胸苷激酶1在临床应用中的分析与研究 王朝敏1,徐道亮2,李斌3 (江苏省苏北人民医院1.肿瘤科,2.内科,3.核医学科 江苏扬州225001) 摘要:目的探讨肿瘤患者血清细胞质胸苷激酶(TK1)在临床应用上的意义。方法利用免疫印迹增强化学发光法, 检测218例肿瘤患者血清和40例健康体检者血清的TK1水平。结果肿瘤病人TK1阳性率为45.29%,健康体检者血清 TK1阳性率为5%。鳞癌TK1阳性率为26.09%,腺癌TK1阳性率为54.29%。其中乳腺肿瘤、消化道肿瘤、其它肿瘤TK1阳性率较高,分别达55.57%、62.51%、53.86%。肺部肿瘤及宫颈肿瘤的TK1阳性率较低,分别为12.51%、14.3%。结论血 清TK1检测在腺癌的辅助诊断上是一个有价值的标志物。 关键词:细胞质胸苷激酶1;肿瘤标志物;免疫印迹增强化学发光法中图分类号:R730.45 文献标识码:A 文章编号:1006-4141(2012)06-0516-03 Clinicalapplicationofcytosolicthymidinekinase1in218caseswithtumor.WANGZhao-min,XUDao-liang,LIBin.(DepartmentofTumor,SubeiPeople'sHospital,Jiangsu225001,China) Abstract:ObjectiveToinvestigatetheclinicalsignificanceofcytosolicthymidinekinase(TK1)intumorpa-tients.MethodsUsingimmunoblottingenhancedchemiluminescencetodetectserumTK1levelsin218cancerpa-tientsand40healthycases.ResultsThepositiverateofTK1intumorpatientswas45.29%,andinhealthysubjectsthepositiveratewas5%.Insquamouscellcarcinoma,thepositiveratewas26.09%andthepositiveratewas54.29%inadenocarcinoma.Inbreastcancer,digestivetracttumorandothertumorsthepositiverateswerehigher,of55.57%,62.51%and53.86%respectively.Inlungcancerandcervicalcancer,TK1positiverateswerelow,respectivelyof12.51%and14.3%.ConclusionTheTK1inserumaidsdiagnosisforadenocarcinomaandisavaluablemarkerfortumor. Keywords:Cytoplasmicthymidinekinase1;Tumormarker;Immunoblottingenhancedchemiluminescencemethod 胸腺嘧啶核苷激酶(TK)是胸腺嘧啶核苷合成DNA的关键酶之一。TK以两种同工酶的形式出现:细胞质胸苷激酶(TK1)和线粒体胸苷激酶(TK2)。TK1是评估增殖细胞的增殖度的重要标志。TK1和DNA合成呈正相关。故TK1的升高与肿瘤细胞生长状态密切相关。本文对218例各类恶性肿瘤病人的TK1水平进行检测和分析,旨在研究TK1与恶性肿瘤的关系及其在临床应用上的意义。 材料与方法 一、研究对象:2010年6月~2011年12月期间,本院经病理学确诊的恶性肿瘤患者218例,男性120例,女性92例,年龄32~76岁(女性 45±11岁,男性52±9岁)。其中乳腺肿瘤36例,肺部肿瘤32例,消化道肿瘤64例,宫颈肿瘤28例,其它肿瘤52例。所有病例中腺癌70例,鳞癌46例,其它肿瘤96例。收集同期健康体检者40例作为对照组,男性22例,女性18例,年龄35~73岁(47.5±8.5岁)。 二、材料及仪器:硝酸纤维素薄膜,anti-TK1Ab,TK标准品(2.2、6.6、20pmol/L),ECL试剂,生物素化二抗,辣根过氧化物酶标记亲和素,封闭剂,抗体稀释液,抗体洗涤液(以上组成TK1诊断试剂盒)。CIS-Ⅰ型化学发光数字成像分析仪。试剂及仪器均由深圳华润同康生物技术有限公司提供。 三、方法和步骤:⑴所有研究对象均采集静 收稿日期:2012-08-12作者简介:王朝敏(1963~)女,副主任医师,从事肿瘤综合治疗20余年。通信作者:徐道亮。yzxdl@126.com 516··

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