导管相关血流感染标本的采集、运送及处理
血培养标本采集导管相关性血流感染
血培养标本采集导管相关性血流感染
血培养临床实践指南
CLSI Principles and Procedures for Blood Culture; Approved Guideline (M47-P,2006)
血培养标本采集导管相关性血流感染
CLSI 简介
CLSI是美国【临床实验室标准化协会】的英文缩写，英文名为Clinical and Laboratory Standards Institute。
CLSI前身是NCCLS【美国临床实验室标准化委员会】，英文名称为 National committee for clinical laboratory。
血培养是最好的工具帮助临床用药、减少患者死亡率
血培养标本采集导管相关性血流感染
血培养的指征是什么？
• 血流感染（Bbloodstream infection，BSI）是一种严重的全身感染性疾病，病原微生物在 循环血液中呈一过性、间歇性或持续性存在，对机体所有器官，如心脏瓣膜、关节等造成 损害、严重者可导致休克、多器官衰竭、弥散性血管内凝血（DIC），甚至死亡。
儿童血培养采集规范
8～
新生
13
儿
Kg
13～ 27
Kg
27～36
Kg
左侧
右侧
>36 Kg
单抽1儿童瓶： 单抽1儿童瓶：
0.5～1.5ml
3～5ml
单抽2儿童瓶:
5ml/瓶
单抽2成人瓶:
8ml/瓶
中心静脉导管培养标本采集流程
确定采集部位
通常在中心静脉导管插入口处进行采集，确保清洁和消毒
消毒
使用无菌消毒剂对采集部位进行充分消毒，一般按照规定的消毒时间和方法操作
取样
用无菌技术取下导管连接头，将连接头上的血液抽取到无菌采血管中，避免受到外界污染
封闭导管
在取样后，立即用无菌盖或其他方式封闭导管连接口，避免感染风险
标本处理
将采集的标本送至医院实验室，注意标记样本信息，确保准确性
记录
记录标本采集的时间、采集方法、采集者等信息，以备日后查询
处理废弃物
将用过的采血针、采血管等废弃物放入专门的医疗废弃物容器中，注意分类处理
血培养标本采集与运转标准操作规程
血培养标本采集与运转标准操作规程
导管血及导管尖端标本采集流程
怀疑导管相关血流感染，准备采集血培养标本
是否保
留导管
去除血培养的塑料瓶帽，使用75% 无菌操作拔出中央导管乙醇或70%异丙醇消毒或其他有效
消毒剂消毒血培养瓶口
手卫生，戴无菌手套
1.戴无菌手套
2.去掉导管前端无针接头，使用酒
精棉片消毒导管接头，待干无菌操作剪取导管尖端
3.连接注射器，回抽肝素丢弃 5cm，置于无菌容器中
4.重新连接注射器
从导管内抽取血液，分别注入需氧摘手套，手卫生
瓶和厌氧瓶，每瓶注入8-10mL，
颠倒混匀
注明采集时间
再次用酒精棉片擦拭消毒导管接头，
待干
同一时间采集1-2套外周摘手套，手卫生；血培养瓶上注明血培养标本，注明采集部采血部位和时间位和时间
导管端尽可能在15分钟内转运至实验室，其他血培养标本尽可能在
2小时内转运至实验室
怀疑导管相关血流感染且保留导管时，应尽快采集1-2套外周静脉血，并同时尽快采集1套等量的导管血。
准备1-2套血培养
瓶，无菌容器等
准备1-2套血培养
瓶，无菌容器等
是否。
血标本、导管相关感染
血培养标本的采集与运送（一）采集指征1．寒战、体温超过38℃或低体温，怀疑血流感染时。
2．以下情况时应抽血做细菌和真菌培养：医院内肺炎；留置中心静脉导管超过48h；感染性内膜炎；骨髓炎；有严重基础疾病、免疫缺陷伴全身感染症状；临床医生怀疑有血流感染可能的其他情况。
（二）采集方法1.皮肤消毒程序：用消毒液从穿刺点向外画圈消毒，至消毒区域直径达5cm 以上，待消毒液挥发干燥后（常需30s以上）穿刺采血。
2．采血部位：通常为肘静脉，疑为细菌心内膜炎时以肘动脉或股动脉采血为宜。
3．采血量：以培养基与血液之比为10:1为宜。
成人每次每培养瓶采血8～l0ml，婴幼儿每次每培养瓶采血2ml。
对于成人患者，应该同时分别在2个部位各采集1套(每套含1个需氧瓶和1个厌氧瓶）血标本，以帮助提高检出率和排出污染情况。
4．培养瓶接种：成人用注射器无菌穿刺取血后，排尽针头内空气，直接注入血培养瓶，勿换针头（如果行第二次穿刺或用头皮针取血时，应换针头），先注于厌氧培养瓶，然后注入需氧培养瓶，轻轻混匀以防血液凝固。
推荐采用负压血培养瓶，减少污染环节。
（三）标本运送所有标本采集后都应立即送往实验室，最好在2h内。
如果不能及时送检，宜置于室温环境。
血培养瓶送到检验科前，不应暂存于冰箱内。
（四）注意事项：1．采血时机：尽可能在抗菌药物使用前或在停用抗菌药物24小时后采集；最好在寒战和发热初期采血。
2．采血次数及间隔：对需马上做抗菌治疗的急性发热性疾病（如脑膜炎、细菌性肺炎）或需紧急手术的患者，应立即从两臂分别取2套标本。
对感染性心内膜炎患者，在24h内取血3次，每次间隔不少于30min；必要时次日再做血培养2次。
对发热原因不明者2次抽血间隔60min；必要时于24～48小时后再抽血2次。
3．不能在静滴抗菌药物的静脉处采血；不应从留置静脉或动脉导管取血。
血管导管相关感染标本采集二、血管导管相关性血流感染（CRBSI）定义带有血管内导管或拔除血管内导管48小时内的患者出现菌血症或真菌血症，并伴有发热（＞38℃）、寒颤或低血压等感染表现，除血管内导管外，无其它明确的感染源。
血培养标本的采集注意事项和运送
血培养标本的采集注意事项和运送第一篇：血培养标本的采集注意事项和运送血培养标本的采集注意事项和运送血流感染的发生发展可以严重威胁患者的生命，其正确诊断不仅可以减少抗菌药物的误用和滥用，同时可以大大地改善患者的预后，降低患者的病死率，减少医疗花费。
本文向读者详细介绍血培养标本采集时间、套数、血量要求、样本运输、皮肤消毒注意事项、导管相关性血流感染以及感染性心内膜炎诊断规范、快速鉴定血培养中的念珠菌、MRSA、葡萄球菌等新方法。
提醒广大医务工作者严格执行血流感染的诊断规范，快速报告实验结果，强调及时与临床，提高血流感染诊断水平的重要意义。
1、采血时间研究表明，大量入血的时间为患者寒颤发热前1小时，在此期间，应同时（或间隔30-60 min）采集2-3套血培养，只有在怀疑患者有感染性心内膜炎或其它血管内感染（如导管相关性感染）时，才有必要间隔较长时间多次采集血培养。
2、血培养数量在每次败血症期间，推荐采集2-3套血培养。
对于成人，不应仅做1套血培养，不仅因为采血量不足，而且1套血培养的结果较难解释。
由于在开始抗菌治疗后，患者中的致病菌不会立即清除，2-5天内无须重复进行血培养。
但对于感染性心内膜炎患者，应多次进行血培养以评估和指导治疗；由金葡球菌引起的败血症（非感染性心内膜炎），应在48-96 小时重复培养以判断其是否为复杂性金葡菌败血症。
3、血培养采血量采血量对于败血症的检测非常重要。
对于成人，采血量在2-30 ml 时致病菌的检测与血量成正比，虽然采血量增长至40 ml（甚至更高）时血培养阳性率仍在提高，但已经不再与采血量成正比。
对于婴幼儿，采血量不应超过患儿总血量的1%。
4、血标本在需氧瓶和厌氧瓶间的分配在常规血培养中，推荐成对使用需氧瓶和厌氧瓶。
如果采血量低于推荐血量，应将血标本先注入需氧瓶，再将剩余血液注入厌氧瓶，因为大部分败血症是由需氧或兼性细菌及酵母菌引起的。
如果仅做需氧培养，每套培养应使用2个需氧瓶并保证有足够的血量。
中心静脉导管相关血流感染监测流程图
中心静脉导管相关血流感染监测流程图
为了监测中心静脉导管相关血流感染，需要遵循以下流程：
1.患者带有血管内导管或者在48小时内拔除血管内导管。
2.如果患者出现发热、体温≥38℃、寒颤或低血压等感染
表现，或者静脉穿刺部位出现脓液/弥漫性红斑，或者沿导管
的皮下走行部位出现疼痛性红斑，就需要进行血常规和血培养检查。
3.临床医生需要填写检验申请单，并按照医院下发的血液
标本采集流程采集血标本。
如果判断为中心静脉导管相关血流感染，需要根据微生物结果选择抗菌药物，并在24小时内填
写《医院感染病例报告卡》上报感控科。
4.在治疗过程中，需要做好病程记录、导管相关血流感染
监测登记和医院感染病例登记。
医院感染监控专职人员每周收集登记数据，并观察与感染有关的因素。
血流感染相关标本的采集
第一节血流感染相关标本的采集血液作为无菌标本，血液培养对感染性疾病的诊断、治疗和预后有重要的临床意义。
血培养检测可以为临床进行血流感染和其它部位感染的诊断提供有力依据。
快速、准确的血培养检测结果，对临床的治疗和患者的预后有着至关重要的作用。
一、临床采样指征：1.菌血症：患者出现下列指征：①发热（≥38℃）或低温（≤36℃）；②寒战；③白细胞计数增多（计数>10.0×109/ L，特别是有“核左移”时）或减少（计数<4.0×109/L）；④呼吸频率大于20次/min或动脉血二氧化碳分压（PACO2）；⑤心率大于90次/分钟；⑥有皮肤黏膜出血；⑦昏迷；⑧多器官功能障碍；⑨血压降低；⑩炎症反应参数如C反应蛋白、降钙素原（PCT）1-3-β-D-葡聚糖升高。
只要具备其中之一，又不能排除细菌、真菌血流感染的，就应进行血培养。
尤其伴有以下情况之一时，应立刻进行血培养：（1）医院获得性肺炎。
（2）留置中心静脉导管、PICC等血管导管大于48小时。
（3）有免疫缺陷伴全身感染症状。
2.感染性心内膜炎：凡原因未明的发热，持续在1周以上，伴有心脏杂音或心脏超声发现赘生物，或原有心脏基础疾病、人工心脏瓣膜植入患者，均应多次进行血培养检测。
3.导管相关血流感染：患者带有血管内导管超过1天或者拔除导管未超过48小时，出现发热（>38℃）、寒颤或低血压等全身感染表现，不能除外由血管内导管引起感染可能的，应多次进行血培养检测。
二、标本采集：1.菌血症：1）采血时间：①尽可能在患者寒战开始时，发热高峰前30-60分钟内采血。
②尽可能在使用抗菌药物治疗前采集血培养标本；如患者已经使用抗菌药物治疗，应在下一次用药之前采血培养。
2）采血部位：通常为肘静脉，切忌在静滴抗菌药物的静脉处采血。
除非怀疑有导管相关的血流感染，否则不应从留置静脉或动脉导管取血，因为导管常伴有定植菌存在。
2）采血器具：采用商业化的真空血培养瓶，如果血培养瓶的储存温度为2-8℃，应先将血培养瓶在室温放置30分钟左右，平衡至室温再采血。
导管相关性血流感染(CRBSI)监测规范及操作手册
导管相关性血流感染(CRBSI）监测规范及操作手册筛选指征:在ICU 病房内携带中心静脉导管超过48小时，出现原因不明的发烧或低血压的患者,儿童患者出现低体温者。
处置方法：临床医护人员送检微生物学标本。
感控人员填写《ICU-CRBSI病人目标监测日常记录表》送检方法：临床医生首先判断导管是否仍有保留的必要性.按导管保留与否分别采用不同的送检方法。
1、保留情况：采取至少2套血培养，其中至少一套来自外周静脉，并做好标记,另外的一套则从导管中心或VAP隔膜无菌采获,两个来源的采血时间必须接近（不>5分钟）,各自做好标记。
2、不保留情况：从独立的外周静脉无菌采集2套血培养.无菌状态下取出导管并剪下5cm导管尖端或近心端交付实验室进行Maki 半定量平板滚动培养或者定量培养（following Vortex或超声降解)。
采血方法：1.消毒：①采血者用速干乙醇消毒液洗手②75％的乙醇消毒培养瓶的橡胶塞，待干60秒.③用安尔碘（络合碘）消毒皮肤待干60秒钟才能进行穿刺.2。
两个部位采血时间接近（不〉5分钟)。
3.每瓶采血10mL，尽量保证两套血培养采血达40mL，提高阳性检出率。
4.采血后，血培养瓶应尽快送至微生物实验室。
采血后的血培养瓶室温放置不能超过12小时.实验室工作流程：①血培养孵育时间5天。
②第4天早晨进行早期阴性报告③报告内容：血培养第四天，阴性.注:如无阳性，不再重复阴性报告④阳性标本进行早期涂片、镜检，早期阳性报告，转种,进一步鉴定、药敏试验,报告最终鉴定药敏结果。
诊断标准1.保留导管者结果解释：如果两套血培养阳性且为同种菌：（1）如缺乏其它感染证据，提示可能为CRBSI；（2）来自导管的血培养报阳时间比来自外周静脉的早120分钟：提示为CRBSI(报阳时间差异小于120分钟，但耐药谱一致，同时缺乏其它感染证据，也可能提示为CRBSI）；（3）来自导管血培养的细菌数量为至少5倍于外周静脉血培养，如果缺乏其它感染证据，提示可能为CRBSI（用于手工定量血培养系统）如果仅是来自导管的血培养为阳性:不能确定为CRBSI,可能为定植菌或采集血标本时污染如果仅是来自外周静脉的血培养为阳性：不能确定为CRBSI；但如为金黄色葡萄球菌，或念珠菌，在缺乏其它感染证据则提示可能为CRBSI如果一套或多套血培养阳性，且导管末梢培养阳性，根据鉴定和药敏谱提示两种培养为同种菌：提示可能为CRBSI如果一套或多套血培养阳性，而导管末梢培养阴性:如培养为金葡菌或念珠菌且缺乏其它感染的证据则提示可能为CRBSI，确认可能要求额外的血培养阳性结果且是同种菌如果血培养为阴性而导管末梢培养为阳性：提示为导管定植菌,不是CRBSI备注:1、对参与项目监测ICU科室的医护人员进行培训,掌握美国CDC 的CRBSI定义标准。
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导管相关血流感染标本的采集、运送及处理
一、标本采集与运送
（一）标本采集指征
导管相关血流感染（catheter related blood stream infection，CRBSI）是指带有血管内导管或者拔除血管内导管48小时内的患者出现菌血症或真菌血症，并伴有发热（≥38℃）、寒战或低血压等感染表现，除血管导管外没有其他明确的感染源。
1.发热，T≥38℃，寒战和（或）低血压，＜1岁的患者T ＜37℃。
2.静脉穿刺部位有脓液/渗出物/弥漫性红斑。
3.沿导管的皮下走行部位出现疼痛性红斑（排除理化因素）。
（二）采集方法
1.保留中心静脉导管
采取至少2套血培养，其中至少一套来自外周静脉，并做好标记，另外的一套则从导管中心或VAP隔膜无菌采获，两个来源的采血时间必须接近（不超过5分钟），各自做好标记。
2.不保留中心静脉导管
从独立的外周静脉无菌采集2套血培养。
无菌状态下取出导管并剪下5cm导管尖端或近心端交付实验室进行Maki半定量平板滚动培养或者定量培养（followingVortex）或超声降解导管。
（三）标本运送方法
剪下5cm导管尖端或近心端置无菌容器内，血培养瓶应尽快送至微生物实验室。
采血后的血培养瓶室温放置不能超过12小时。
二、标本处理
标本验收、培养瓶处理、培养基的选择、接种方法、培养方法同血培养标本；剪下5cm导管尖端或近心端在无菌状态下滚动接种血平板。
三、结果报告
1.阴性结果报告
两套血培养和导管末梢培养均为阴性，排除CRBSI。
2.阳性结果报告
（1）如果两套血培养阳性且为同种菌：①如缺乏其他感染证据，提示可能为CRBSI；②来自导管的血培养报阳时间比来自外周静脉的早120分钟提示为CRBSI；③报阳时间差异小于120分钟，但耐药谱一致，同时缺乏其他感染证据，也可能提示为CRBSI；④来自导管血培养的细菌数量为至少5倍于外周静脉血培养，如果缺乏其他感染证据，提示可能为CRBSI（用于手工定量血培养系统）。
（2）如果仅是来自导管的血培养为阳性，不能确定为CRBSI，可能为定植菌或采集血标本时污染。
（3）如果仅是来自外周静脉的血培养为阳性，不能确定为CRBSI，
但如为金黄色葡萄球菌或念珠菌，在缺乏其他感染证据则提示可能为CRBSI。
（4）如果一套或多套血培养阳性，且导管末梢培养阳性（导管尖端5cm节段半定量培养细菌计数≥15CFU/平皿或导管尖端肉汤定量培养细菌计数＞102 CFU/平皿），根据鉴定和药敏谱提示两种培养为同种菌，提示可能为CRBSI。
（5）如果一套或多套血培养阳性，而导管末梢培养阴性，如培养为金葡菌或念珠菌且缺乏其他感染的证据则提示可能为CRBSI，确认可能要求额外的血培养阳性结果且是同种菌。
（6）如果血培养为阴性而导管末梢培养为阳性（导管插入部位和导管中央培养出相同细菌的半定量细菌培养菌落计数＜15CFU/平皿），提示为导管定植菌，排除CRBSI。