公共场所微生物检验作业指导书
4.4.4.1涂抹法：用侵有无菌生理盐水的棉拭子在规格板（5cmx5cm） 内来回均匀涂满整个方格，并随之转动棉试子，剪去手接触部位后，将涂抹浴 盆的5个棉试子一并放入125mL生理盐水烧瓶中，涂抹脸（脚）盆的2个棉试 子一并放入50mL生理盐水三角烧瓶中，充分振摇或在旋涡振荡器上振荡1
4.3.2无菌生理盐水：分装125mL瓶供浴盆采样，50mL瓶供脸（脚）盆采 样。
米样
4.4.1采样必须在无菌操作下进行，采样用具应高压灭菌121C20分钟。
4.4.2采样部位，选择在盆内侧壁二分之一至三分之一高度采样。
4.4.3采样布点，浴盆可在四壁及盆底呈梅花布点，脸（脚）盆可在相对 两侧壁布点。
3、责任：
使操作者熟悉本规程，并在具体样品检验中严格遵照操作，确保检测结 果准确性。
4、内容
定义
细菌总数：指公用茶具经过采样处理，在一定条件下培养后（培养基成 分、培养温度、培养时间、ph值、需氧性质等），icm表面上含菌落的总数。 本方法规定的培养条件下所得结果，只包括一群在营养琼脂上生长发育的嗜 中温性需氧菌落总数。
分钟，每毫升的菌浓度相当于1平方厘米的菌量。
4.4.4.2斑贴法：将5cmx5cm无菌滤纸片放入灭菌平皿中，注入灭菌生理 盐水1mL片（吸满为止），以无菌操作将滤纸片贴到采样部位，1分钟后按序取 下，将贴浴盆的5片滤纸一并放入125,mL生理盐1分钟，每毫升的菌尝试相当 于1平方厘米的菌量。
检验方法
4.5.2检验方法
4.5.2.1发酵法
4.5.2.用测定细菌总数剩余的检样，倒入双料乳糖胆盐发酵培养液中。置36C±1C培养箱内培养24h。
4.5.2.观察是否产算、产气，若有变黄和气体产生，该管推测是检验阳性。 如不产酸、产气则为大肠菌群阴性。
4.5.2.自推测性检验阳性管中取一接种环培养液，转种伊红美蓝琼脂平板 上，置36C±1C培养箱培养18〜24h，然后取出，观察菌落形态，并做革兰氏 染色和证实性试验。
4.5.1用1mL灭菌吸管吸取样品1mL加到灭菌平皿内，同样再吸1mL加到Байду номын сангаас
作业指导书
编号：ZQCDC/ZY03
第2页共2页
公共场所浴盆、脸（脚）盆微生物 检验方法细菌总数测定操作规程
第1次修订
实施日期：2011年5月1日
一平皿内。
4.5.2如污染严重，可作10倍递增稀释，每递增稀释一次，换一支无菌吸 客，每个稀释度接种两个平皿。
4.5.2.在上述平板上，挑取可疑大肠菌群菌落1〜2个进行染色镜检；
同时接种乳糖发酵管，只36C±1C培养24h。
4.5.3纸片法
将已采样的纸片置36C±1C培养箱内培养16〜18h，观察结果。
结果报告
见GB/—2000中第7章。
作业指导书
编号：ZQCDC/ZY03
第1页共2页
公共场所浴盆、
脸（脚）盆微生物
细菌总数可作为判定公用茶具被污染程度的标志，也可以为公用茶具消 毒效果的判定和评价提供了依据。
仪器
高压蒸汽灭菌器。
干热灭菌箱。
培养箱：36C±1C。
冰箱。
电炉。
天平。
灭菌。
灭菌平皿：直径9cm.
灭菌刻度吸管：1mL,10mL
灭菌棉拭子。
灭菌剪刀。
放大镜。
PH计或精密PH式纸。
培养基和试剂
4.3.1生理盐水
4.5.3稀释液移入平皿后，应及时将冷却至46C的营养琼脂培养基（可放 置46C±1C水浴保温）注入平皿约15mL并转动平皿使混合均匀。待琼脂凝 固后，翻转平板，置36C±1C温箱内培养48h.
菌落计数方法
见GB/—2000中第8章。
浴盆、脸（脚）的细菌数按式（1）计算：
m=
式中：m—细菌总数，cfu/25 m2;
培养基和试剂：见GB/T—2000中第4章。
检验程序：见GB/T—2000中第5章。
操作步骤
4.5.1采样方法
4.5.1.1随机法：随机抽取清洗消毒后准备使用的毛巾、床上卧具。
4.5.1.2涂抹法：用测定细菌总数时采集的样品，无需重采。
4.5.1.3纸片法：用灭菌生理盐水湿润5cmx5cm大肠菌群快速测定纸片两 张，分别贴在毛巾、床上卧具规定部位和面积范围内，约30s后取下，置于无 菌塑料袋内。
k—稀释倍数；
n—平均菌落数；
9菌落计数的报告
见GB/—2000中的第9章。
作业指导书
编号：ZQCDC/ZY04
第1页共3页
公共场所茶具微生物检验万法细菌
第1次修订
总数测定操作规程
实施日期：2011年5月1日
1、目的：
公共场所茶具微生物检验方法细菌总数测定。
2、适用范围：
本标准适用于公共场所茶具细菌总数的测定。
3、责任
使操作者熟悉此规程，并在具体样品检验中严格遵照操作，确保检测结果准确性。
4、内容：
定义：大肠菌群
指一群在37C、24h能发酵乳糖、产酸、产气、需氧和兼性厌痒的革兰 氏阴性无芽胞杆菌。
该菌主要来源于人畜粪便，故以次作为粪便污染指标来评价公用毛巾、床 上卧具的卫生质量。
仪器：见GB/T—2000中第3章。
成分：氯化钠
蒸馏水1000mL
作业指导书
编号：ZQCDC/ZY02
第1页共1页
公共场所毛巾、床上卧具微生物 检验方法大肠菌群测定操作规程
第1次修订
实施日期：2011年5月1日
1、目的
依据GB/—2000公共场所茶具微生物检验方法大肠菌群测定，熟练掌握此 规程，保证检验结果的准确性。
2、适用范围
本标准规定了公共场所公用毛巾、床上卧具大肠菌群的测定方法。
第1次修订
检验方法细菌总数测定操作规程
实施日期：2011年5月1日
1、目的：
公共场所浴盆、脸（脚）盆微生物检验方法细菌总数测定。
2、适用范围：
本标准适用于公共场所浴盆、脸（脚）盆细菌总数的测定。
3、责任：
使操作者熟悉本规程，并在具体样品检验中严格遵照操作，确保检测结果 准确性。
4、内容
定义
细菌总数：指公共场所浴盆、脸（脚）盆经过采样处理，在一定条件下培 养后（培养基成分、培养温度、培养时间、PH值、需氧性质等），25cm1表面上
含菌落的总数。本方法规定的培养条件下所得结果，只包括一群在营养琼脂上 生长发育的嗜中温性需氧菌落总数。
细菌总数可作为判定公共场所浴盆、脸（脚）盆被污染程度的标志，也可 以为公共场所浴盆、脸（脚）盆消毒效果的判定和评价提供依据。
仪器
见GB/—2000中第四章
培养基和试剂
431营养琼脂培养基
见GB/—2000中
微生物限度检查作业指导书
目的：建立微生物限度检查的标准操作规程，为微生物检验人员提供正确的操作方法。
范围：合用于辅料、内包材料和所有产品的微生物限度检查。
职责：检验人员对本规程的实施负责。
参照标准：GB/T4789.3-2003,GB/T4789. 15-2003,GB/T4789.2-2003内容：1 概述微生物限度检查法系指非规定灭菌制剂及其原、辅料受到微生物污染程度的一种检查方法，包括染菌量及控制菌的检查。
供试品普通按批号随机抽样；抽样量应为检验用量(2 个以上最小包装单位) 的 3 倍量(以备复检)。
检验的全过程，均应严格遵守无菌操作，严防再污染。
2 仪器与用具恒温恒湿培养箱、生化培养箱、恒温水浴、高压蒸汽消毒锅、电热恒温干燥箱；试管、锥形瓶、量筒、培养皿(Φ90mm)、刻度吸管、研钵；托盘天平或者电子天平、镊子、剪刀、酒精灯、打火机、编号笔、75%酒精棉球；拖鞋、无菌衣、裤、帽、口罩。
以上玻璃器皿、镊子、剪刀等洗净、晾干，160~170℃干烤2h ，备用。
所有灭菌物品存放于第一缓冲间，不应超过2 周即用毕。
否则，应重新灭菌。
3 培养基、试液配制营养琼脂培养基 (细菌用)、孟加拉红培养基 (虎红琼脂培养基，霉菌用)，胆盐乳糖培养基 (即BL，用于大肠杆菌增菌培养) 、4—甲基伞形酮葡糖苷酸 (MUG)培养基 (用于大肠杆菌快速检查)、麦康凯琼脂培养基 (即MacC，用于肠道菌分离培养)、蛋白胨水培养基 (供靛基质试验用) 、磷酸盐葡萄糖胨水培养基 (供甲基红及VP 试验用)、枸橼酸盐培养基 (供枸橼酸盐利用试验用)；营养肉汤培养基、四硫磺酸钠亮绿培养基 (TTB ，沙门菌增菌用)、胆盐硫乳琼脂 (DHL) 或者沙门、志贺菌属琼脂 (SS)培养基 (用于沙门菌分离培养)、麦康凯琼脂或者曙红亚甲蓝琼脂培养基 (大肠杆菌及沙门菌分离培养用) 、三糖铁琼脂 (TSI) 斜面培养基 (肠道菌初步鉴别用)的配制及灭菌方法参见中国药典2000 年版一部附录ⅩⅢC。
微生物检验操作指导书
微生物实验室操作指导书目录（一）安全守则（二）检验总则（三）基本技术要求（四）食品平板菌落计数（五）食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法（六）沙门氏菌检验（七）金黄色葡萄球菌检验（八）霉菌计数（九）革兰氏染色（十）空气中微生物的检验（十一）水中微生物的检验（十二）食品接触面的微生物检验（十三）蔬菜农残的快速检测审核：编制：（一）安全守则1进入实验室工作衣、帽、鞋必须穿戴整齐。
2在进行高压、干燥、消毒等工作时，工作人员不得擅自离开现场，认真观察温度、时间，蒸馏易挥发、易燃液体时，不准直接加热，应置水浴锅上进行。
3严禁用口直接吸取药品和菌液，按无菌操作进行，如发生菌液、病原体溅出容器外时，应立即用有效消毒剂进行彻底消毒，安全处理后方能离开现场。
4工作完毕，两手用清水肥皂洗净，必要时可用（杀菌剂）新洁尔灭、过氧乙酸液浸泡手，然后用水冲洗，工作服应经常清洗，保持整洁，必要时高压消毒。
5实验完毕，及时清理现场和实验用具，对染菌带毒物品，进行消毒灭菌处理，并填写日常工作记录。
6每日下班，认真检查水、相关电源是否关闭和正在使用的设备运转是否正常，并认真记录。
下班前关好门窗，方可离去。
（二）检验总则1主题内容与适用范围本文规定了微生物检验一般规则。
本文适用于食品中微生物学检验的采样、检验及结果报告。
2样品的采集2.1采样目的确保采集的样品能代表全部被检验的物质，使检验分析更具代表性。
2.2采样原则2.2.1采集的样品要有代表性，采样时应首先对该批食品原料、加工、运输、贮藏方法条件、周围环境卫生状况等进行详细调查，检查是否有污染源存在，同时能反映全部被检食品的组成、质量和卫生状况。
2.2.2应设法保持样品原有微生物状况，在进行检验前不得污染，不发生变化。
2.2.3采样必须遵循无菌操作程，容器必须灭菌，避免环境中微生物污染，容器不得使用煤酚皂溶液，新洁尔灭、酒精等消毒物灭菌，更不能含有此类消毒药物，以避免杀掉样品中的微生物，所用剪、刀、匙用具也需灭菌方可使用。
微生物检验作业作业指导书.
微生物检验作业作业指导书.1000字微生物检验作业作业指导书一、作业目的通过学生的自主调研，了解微生物检验的基本概念、方法、流程及其应用领域，在此基础上，学习相关实验技能，并在实践中提高学生的实验操作能力。
二、作业要求1.选择一个与微生物检验相关的主题进行调研（如细菌检验、真菌检验、病毒检验等），深入了解其基本特征、检验方法、检验流程及其应用领域。
2.结合所学相关知识，了解微生物检验实验室的基本设备和实验条件，掌握相应的消毒、无菌操作和物品清洗等实验技能。
3.利用自己的调研和实验经验，撰写完成一份微生物检验实验报告。
三、作业步骤1.主题选择。
选择一个与微生物检验相关的主题或者问题，如“医院细菌检验方法研究”、“河水中大肠杆菌检测技术分析”等。
需要注重主题的实际可行性，避免选择过于宏大或难以完成的主题。
2.调研文献。
利用图书馆、网络等资源，收集与选定主题相关的文献资料，包括学术期刊论文、专业书籍、技术资料等。
建议访问一些专业网站，如中国微生物学会、中国食品科学技术学会等网站，获取最新的学术信息。
3.实验学习。
根据选定的主题和文献资料，了解相关的实验方法和流程，并在实验室中学习相关的实验技能。
了解实验室的基本设备和实验条件，掌握相应的消毒、无菌操作和物品清洗等实验技能。
需要注意实验过程中的安全问题，确保实验过程的有效性和安全性。
4.撰写实验报告。
根据实验结果，撰写一份完整的实验报告。
报告内容应包括所选主题的研究背景、研究目的、实验方法和流程、实验结果和分析、结论和建议等。
需要注意报告的逻辑性和系统性，确保表述准确、规范、清晰。
报告中需要注重科学方法和实验数据的稳定性和可重复性。
四、注意事项1.作业选题要求实际可行性和可完成性，避免选择过于宏大或难以完成的主题。
2.调研过程中要注意文献来源的可靠性和权威性，并及时更新最新的学术信息。
3.实验过程中要注意安全问题，严格遵守各项实验操作规程和安全操作程序。
微生物检验作业作业指导书.
1 目的通过对微生物检测流程的规范确保检验工作有序进行.2 范围适用于微生物检测的全过程。
3 职责3.1 检验人员严格按检测流程做好各项工作。
3.2 检测主管做好监督检查工作.4 内容4.1 准备工作4。
1.1 卫生清洁整理普通检验室内的各类检验物品，检查工作台面和地面卫生。
4.1.2样品收集登记4。
1.2。
1与收样员沟通，确定检样品种、数量（如仓库到货的茶原料、内包膜，车间生产的半成品、成品，研发样品,采购样品，稳定性试验的样品、定期跟踪检测的样品）。
4.1.2。
2与质保员沟通，确定检样品种、数量（如自来水、纯水、一楼生产过程跟踪的各阶段液体)。
4.1。
2。
3 按检测计划自行确定的检样品种、数量(如工作间空气、设备内表面、员工手部)。
4.1。
2.4各项确定后,收集并登记样品。
4。
1.3检测方法的确定4.1.3。
1样品收集后进行分类，确定样品的检测方法，若无方法的要尽快上报或查找相关方法。
4.1。
3.2微生物各项目所采用的检测方法（见附表1）4.2 试剂配制、物品包扎4。
2。
1玻璃容器的包扎：灭菌前器皿应包扎紧密完整后才进行灭菌,以防止灭菌后器皿受到污染。
4。
2。
2平皿、吸管按量分成若干单元用牛皮纸、报纸包扎；4.2.3试管及三角瓶应塞硅胶塞，在瓶口再用报纸包扎；4.2.4其它玻璃或金属取样工具也要用报纸包扎;4。
2。
5生理盐水按氯化钠加水比例0.84％配制；平板计数琼脂（PCA）、孟加拉红、月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤（LST）、煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）则以标签上规定的比例进行配制。
按需要量分装成于不同规格的容器中。
4。
3 高压灭菌4。
3。
1培养基及器皿的灭菌：4.3.1.1高压蒸汽灭菌：金属器具、玻璃器皿、基础培养基及其它耐热物品均放入锅内灭菌。
4。
3。
1.2灭菌参数：121℃（0。
1034MPa)，15～20min;4.3.2染菌培养物：121℃（0.1034MPa),30min；4.3.3含糖类不耐热培养基（按试剂要求)：115℃（0。
微生物检测作业指导书
• 8、培养基的监测 • 应对经湿热灭菌的培养基进行监测，尤其要对pH、色泽、灭菌效果和均匀度
等指标进行监测。
培养基的使用
• 1、琼脂培养基的融化 • 将培养基放到沸水浴中或采用相同效果的方法（如高压锅中的蒸汽）使之融
化。经过高压的培养基应尽量减少重加热时间，避免过度加热。培养基溶化 后放入47℃±2℃的恒温水浴锅中保温，直至使用。融化后的培养基应尽快使 用，放置时间一般不应超过4h。 • 2、培养基的脱气 • 必要时，将培养基在使用前放到沸水浴或蒸汽浴中加热15min，加热时松开 容器的盖子；加热后盖紧，并迅速冷却至使用温度。 • 3、平板的制备 • 倾注融化的培养基到平皿中，使之在平皿中形成一个至少2mm厚的琼脂层 （直径90mm的平皿通常要加入15 mL琼脂培养基）。将平皿盖好后放到水平 平面使琼脂冷却凝固。 • 注：在培养过程中，培养基会损失水分。当水分损失的量大于培养基总量的 15%时，就会影响微生物的生长。造成培养及水分损失的因素很多，如培养 基成分，平皿中培养基总量和培养箱的类型等（如使用带风扇的培养箱，培 养箱中的湿度偏低，平板在培养箱中放置的位置靠近加热管，培养温度过高 等），操作时应注意避免。
实验室废弃物处理
1对于培养物及其污染的物品（如斜面，用过的吸 量管、细菌培养皿等），应使用适当浓度的自配 或商业液体消毒剂（参见表D.1）对处理后一定时 间，或121℃高压灭菌至少30min，或者其他有效 处理措施。将处理物倒入特殊标识的垃圾袋内， 直接送到指定地点。
2对于实验动物尸体及相关废弃物，按照GB 14925 的规定进行处理。
微生物无菌室基本要求及管理
2 无菌室的管理 2.1无菌室在使用前和使用后应进行有效的消
环境微生物检测标准操作规程作业指导书
环境微生物检测标准操作规程作业指导书持有部门：院感办文件编号：
制定者：审核者：版次：1 制定日期：审核日期：执行日期：
一、监测目的
1.感染暴发或感染流行时，环境因素在感染传播中有流行病学意义。
2.监测潜在的危险环境状况，证明有危险的病原体存在或证明危险的病原体已被清除。
3.当某项感染控制措施改变时，评估其效果。
4.目标性监测的需要。
5.询证医学证据支持。
二、空气培养（沉降法）
1.采样时间：Ⅰ类环境在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ类环境在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样。
2.采样高度：距地面垂直高度
80-150cm。
3.采样点设定：
（1）Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ类环境：室内面
积≤30m2，在对角线上设里、中、外3点，里、外两点位置各距。
空间卫生微生物检验作业指导书
修改记录单空间卫生微生物检验作业指导书1 目的规范空间卫生检验规程和检验方法(微生物部份)，确保检验结果准确，及时了解车间空间卫生状况，发现问题及时解决，确保生产现场环境卫生符合公司质量标准要求。
2 适用范围适用于XXXXX公司生产车间配料房、灌注房。
3 职责3.1微检人员负责对灌注房、配料房空间卫生检测，并根据检验结果进行判定。
3.2部门主管负责对灌注房、配料房空间卫生整体质量判定。
3.3车间负责执行相关卫生消毒及预防纠正措施。
4 检测项目、检验频次、内控标准根据各工序控制点选用下列相应的标准。
注：a每周1次是指对某一车间当天生产线的空间进行检测。
b各生产线每月内至少1次检测。
5 工作流程图空间卫生检验作业流程6 工作流程描述（001）车间正常生产。
（002）检验员采用自然沉降法（检测时间：20分钟）对车间配料房、灌注房进行空间卫生检测，并对检测结果进行判定。
（003）检验员判定空间卫生为合格项时，检验员填写《半成品微生物检验报告单》。
（004）检验员判定空间卫生为不合格项时，检验员填写《半成品微生物检验报告单》、《质量信息反馈单》。
（005）品质经理对《半成品微生物检验报告单》进行审核。
（006）品质部将车间空间卫生质量信息反馈给车间。
（007）车间接收生产空间卫生质量信息。
（008）针对空间卫生出现不合格现象，车间实施相应的纠正措施。
（009）车间实施纠正措施后，微检人员检验、验证其整改效果。
7 相关文件7.1菌落总数测定----GB4789.2-947.2霉菌和酵母计数---- GB4789.15-948 表格8.1《半成品微生物检验报告单》JLB/YYN-QC-036A8.2《质量信息反馈单》JLB/YYN-QC-044A。
公共场所微物检验作业指导书5{作文类}
准确性。
、内容
定义
细菌总数：指公共场所浴盆、脸（脚）盆经过采样处理，在一定条件下培
养后（培养基成分、培养温度、培养时间、值、需氧性质等），表面上含菌落的
总数。本方法要求的培养条件下所得结果，只包括一群在营养琼脂上生长发育
的嗜中温性需氧菌落总数。
细菌总数可作为判定公共场所浴盆、脸（脚）盆被污染程度的标志，也可
布点。
采样方法
涂抹法：用侵有无菌生理盐水的棉拭子在规格板（ × ）内来回均匀涂满
整个方格，并随之转动棉试子，剪去手接触部位后，将涂抹浴盆的个棉试子一
并放入生理盐水烧瓶中，涂抹脸（脚）盆的个棉试子一并放入ｍＬ生理盐水三
角烧瓶中，十足振摇或在旋涡振荡器上振荡分钟，每毫升的菌浓度相当于平方
厘米的菌量。
斑贴法：将×无菌滤纸片放入灭菌平皿中，注入灭菌生理盐水片（吸满为
十倍递增稀释，即吸取加到灭菌生理盐水中，混匀，此液为：稀释液。每个稀
释度做两块平皿。
将已融化冷至℃左右的营养琼脂培养基倾入平皿，每皿约,并立即旋摇平皿。
冷凝后放入℃±℃培养箱培养.
作业指导书
公共场所毛巾、床上卧具微生物 检验方法细菌总数测定
编号： 第页 共 页 第次修订 实施日期：年月日
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细菌总数可作为判定公用茶具被污染程度的标志，也可以为公用茶具消
毒效果的判定和评价提供了依据。
仪器
高压蒸汽灭菌器。
干热灭菌箱。
培养箱：℃±℃。
冰箱。
电炉。
天平。
灭菌。
灭菌平皿：直径.
灭菌刻度吸管：
灭菌棉拭子。
灭菌剪刀。
放大镜。
计或精密试纸。
培养基和试剂
微生物检验实际操作作业指导书(定稿)
微生物检验作业指导书目录一、菌落总数测定作业指导书 (3)（一）菌落总数测定过程概述 (3)（二）菌落总数测定过程及注意事项 (3)1培养基的制备 (3)2样品的采集、处理和稀释 (4)3倾注平板 (5)4培养 (6)5菌落计数 (7)6菌落总数结果与报告 (7)7检验记录表格样本 (8)8其他注意事项 (9)二、大肠菌群测定作业指导书 (9)（一）大肠菌群测定过程概述 (9)（二）大肠菌群测定过程及注意事项 (9)1培养基的制备 (9)2样品的采集、处理和稀释 (10)3初发酵试验 (11)4复发酵试验 (11)5大肠菌群检验记录表格样本（表3或表4） (11)6大肠菌群最可能数（MPN）的报告 (11)7大肠菌群测定过程中注意事项 (11)三、微生物检验常见问题答疑 (13)四、食品微生物检验实验室要求 (15)（一）无菌操作要求 (15)（二）无菌室使用要求 (15)（三）消毒灭菌要求 (16)（四）培养基制备要求 (17)（五）样品采集及处理要求 (18)（六）样品检验、记录和报告的要求 (18)一、菌落总数测定作业指导书（一）菌落总数测定过程概述食品检样经过处理，在一定条件下（如培养基、培养温度和培养时间等）培养后，所得每g（mL）检样中形成的微生物菌落总数。
菌落总数的测定，一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液，然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合，在一定温度下，培养一定时间后（一般为48小时），记录每个平皿中形成的菌落数量，依据稀释倍数，计算出每g（mL）原始样品中所含微生物菌落总数。
菌落总数测定的基本操作包括：培养基的制备→灭菌→样品的稀释→倾注平皿→培养48小时→计数报告。
（二）菌落总数测定过程及注意事项1培养基的制备1.1.培养基的称量及溶解（1）培养基可以选择成品，也可自行制备。
（2）选择成品：称取平板计数琼脂培养基（杭州天和）23.5g放入1000mL 烧杯中，加1000mL蒸馏水，用玻璃棒搅拌，电炉上煮沸溶解，调节pH7.0±0.2，分装于锥形瓶中。
OG500 公共场所卫生检验方法 第3部分：空气微生物作业指导书
公共场所卫生检验方法第3部分：空气微生物作业指导书一、适用范围：GB/T18204的本部分规定了公共场所空气中细菌总数、真菌总数、β-溶血性链球菌和嗜肺军团菌的现场采样与实验室培养方法。
本部分适用于公共场所空气中细菌总数、真菌总数、β-溶血性链球菌和嗜肺军团菌的测定，其他场所可参照执行。
注：本部分中同一个指标如果有2个或者2个以上检验方法时，可根据技术条件选择使用。
二、参考文献GB/T18204.3—2013《公共场所卫生检验方法》第三部分：空气微生物三、细菌总数3.1 原理：采用撞击方法或者自然沉降法采样、营养琼脂培养基培养计数的方法测定公共场所空气中的细菌总数。
3.2 撞击法3.2.1 仪器和设备3.2.1.1六级筛孔撞击式微生物采样器。
3.2.1.2 高压蒸汽灭菌器。
3.2.1.3 恒温培养箱。
3.2.1.4 平皿：直径90mm3.2.2培养基3.2.2.1 营养琼脂培养基成分：蛋白胨 10g氯化钠 5g肉膏 3g琼脂 20g蒸馏水 1000mL2.2.2.2 制法：将蛋白胨、氯化钠、肉膏溶于蒸馏水中，校正PH为7.2～7.6,加入琼脂，121℃，20min灭菌备用。
3.2.3采样3.2.4 检验步骤将采集细菌后的营养琼脂平皿置35℃～37℃培养48h，菌落计数。
3.2.5 结果报告3.2.5.1采样点细菌总数结果计算：菌落计数，记录结果并按稀释比与采气体积换算成CFU/ m3 （每立方米空气中菌落形成单位）。
2.2.5.2一个区域细菌总数测定结果：一个区域空气中细菌总数的测定结果按该区域全部采样点中细菌总数测定值的最大值给出。
3.3 自然沉降法3.3.1 仪器和设备3.3.1.1 高压蒸汽灭菌器。
3.3.1.2 恒温培养箱。
3.3.1.3 平皿：直径90mm。
3.3.1.4 采样支架。
3.3.2 培养基见3.2.2。
3.3.3 采样3.3.4 检验步骤见3.2.4。
3.3.5 结果报告计数每块平板上生长的菌落数，求出全部采样点的平均菌落数，检验结果以每平皿菌落数（CFU/皿）给出。