注射用重组人白介素
重组人白介素-11针
重组人白介素-11针1mg*1 126.4适应症用于实体瘤、非髓系白血病化疗后Ⅲ、Ⅳ度血小板减少症的治疗；·实体瘤及非髓性白血病患者，前一疗程化疗后发生Ⅲ、Ⅳ度血小板减少症（即血小板数≤5×109/L）者，下一疗程化疗前使用本品，以减少病人因血小板减少引起的出血和对血小板输注的依赖性。
同时有白细胞减少症的病人必要时可合并使用粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）。
药理作用本品是应用基因重组技术生产的一种促血小板生长因子，可直接刺激造血干细胞和巨核祖细胞的增殖，诱导巨核细胞的成熟分化，增加体内血小板的生成，从而提高血液血小板计数，而血小板功能无明显改变。
临床前研究表明，体内应用本品后发育成熟的巨核细胞在超微结构上完全正常，生成的血小板的形态、功能和寿命也均正常。
用法用量根据本品临床研究结果，推荐本品应用剂量为50μg/kg，于化疗结束后24-48小时开始或发生血小板减少症后皮下注射（以1ml注射用水稀释），每天一次，疗程一般7-14天。
血小板计数恢复后应及时停药。
本品为无菌、白色、不含防腐剂的冻干粉末。
吉巨芬须配注射液，将3mg的白介素11冻干粉用1ml的注射用无菌水稀释,并须3小时内用完。
不良反应国外临床研究报道：除了化疗本身的不良反应外，重组人IL-11的大部分不良反应均为轻至中度，且停药后均能迅速消退。
约有10%的临床病人在观察期间有下列一些不良事件出现，包括乏力、疼痛、寒颤、腹痛、感染、恶心、便秘、消化不良、瘀斑、肌痛、骨痛、神经紧张及脱发等。
其中大部分事件的发生率与安慰剂对照组相似，发生率高于安慰剂对照组的临床不良反应包括。
全身性：水肿、头痛、发热及中性粒细胞减少性发热。
心血管系统：心动过速、血管扩张、心悸、晕厥、房颤及房扑。
消化系统：恶心、呕吐、粘膜炎、腹泻、口腔念珠菌感染。
神经系统：眩晕、失眠。
呼吸系统：呼吸困难、鼻炎、咳嗽次数增加、咽炎、胸膜渗出。
其他：皮疹、结膜充血、偶见用药后一过性视力模糊。
白介素的用法
白介素的用法白介素为抗肿瘤的生物治疗用药，适用于晚期肾癌、恶性黑色素瘤及癌性胸、腹腔积液的治疗，也可试用于其他恶性肿瘤综合治疗。
下面和店铺一起去了解白介素的用法。
白介素用量用法肿瘤治疗：1.静脉滴注：重组人白介素-2 每日一次，按体表面积每次10-20万国际单位(IU)/m ，加入到500ml无菌生理盐水，静脉滴注2-3小时，4-6周为一疗程。
医生可根据患者的具体情况而调整剂量。
2.皮下注射：重组人白介素-2皮下注射每周2-3次，按体表面积每次50-100万国际单位(IU)/m ，2ml灭菌生理盐水溶解，6周为一疗程。
医生可根据患者的具体情况而调整剂量。
3.胸腹腔注入：重组人白介素-2每周1-2次，每次20-50万国际单位(IU)，2-4周为一疗程。
或每日一次，每次20万国际单位(IU)，4-6周为一疗程(可与LAK或TIL联合使用)。
胸腔内给药尽量将胸水抽净(一次抽不净者，在第2天、第3天…继续抽，直至抽净或基本抽净为止)，并令患者变换体位，使药液与胸膜广泛接触。
医生可根据患者的具体情况而调整剂量。
4.动脉灌注：重组人白介素-2 两周一次，每次40-100万国际单位(IU)，6周为一疗程。
医生可根据患者的具体情况而调整剂量。
5.肿瘤病灶局部给药：据瘤体大小决定用药剂量。
一般剂量为每次按体表面积20万国际单位(IU)/m ，每周连用4次，2-4周为一疗程。
医生可根据患者的具体情况而调整剂量。
使用白介素的不良反应1.常见不良反应是发热、畏寒、疲乏，与用药剂量有关，一般是一过性的发热(38℃左右)，也可有寒战高热，停药后3￣4小时多可自行恢复到正常。
个别患者可出现恶心、呕吐、少数病人皮下注射后局部可出现轻度红肿、硬结、疼痛。
2.本品大剂量使用时，国外报导有可能引起行细血管渗漏综合症，表现为低血压、末梢水肿、暂时性肾功能不全等，应立即停用，积极对症处理。
禁忌症：1.严重低血压者; 2.严重心肾功能不全者; 3.高热者; 4.孕妇慎用。
注射用重组人白介素-11
注射用重组人白介素-11【药品名称】【通用名称】注射用重组人白介素-11【英文名】RecombinantHumanInterleukin-11forInjection【汉语拼音】ZhusheyongChongzuRenBaijiesu-11【成份】【化学名称】重组人白介素-11。
本品系将含人白介素-11（IL-11）融合蛋白基因的重组质粒转化大肠杆菌，使其高效表达融合蛋白，经融合蛋白纯化、羟胫切割、高度纯化后冻干制成。
【注射剂辅料】甘氨酸、PB缓冲液【性状】本品系无菌冻干制剂，白色疏松体，加入0.7ml[8.0x106AU/1.0mg/支]、1.0ml[1.2x107AU/1.5mg/支]或2.0ml[2.4x107AU/3.0mg/支]灭菌注射用水后能迅速溶解。
【适应症】用于实体瘤、非髓性白血病化疗后m、IV度血小板减少症的治疗。
【规格】1.2x107AU/1.5mg/支【用法用量】用法：取本品，加入0.7ml[8.0x106AU/1.0mg/支]、1.0ml[1.2x107AU/1.5mg/支]或2.0ml[2.4x107AU/3.0mg/支]灭菌注射用水溶解后，皮下注射。
用量：根据本品临床研究结果，推荐本品应用剂量为25-50pg/kg体重，于化疗结束后24-48小时开始或发生血小板减少症后皮下注射，每日一次，疗程一般7-14天。
血小板计数恢复后应及时停药。
【不良反应】国外临床研究报道：除了化疗本身的不良反应外，重组人IL-11的大部分不良反应均为轻至中度，且停药后均能迅速消退。
约有10%的临床病人在观察期间有下列一些不良事件出现，包括乏力、疼痛、寒颤、腹痛、感染、恶心、便秘、消化不良、淤斑、肌痛、骨痛、神经紧张及脱发等。
其中大部分事件的发生率与安慰剂对照组相似，发生率高于安慰剂对照组的临床不良反应包括：全身性：水肿，头痛，发热及中性粒细胞减少性发热。
心血管系统：心动过速，血管扩张，心悸，晕厥，房颤及房扑。
使用注射用重组人白介素：2出现呕吐是不良反应吗
使用注射用重组人白介素-2出现呕吐是不良反应吗重组人白介素-2（IL-2）是一种由人工合成的白介素，常用于治疗多种类型的癌症和自身免疫性疾病。
IL-2在调节免疫系统中扮演着重要的角色，通过增强免疫细胞的活性来对抗异常细胞，同时也可能引起一系列的不良反应，其中包括呕吐。
IL-2的作用机制IL-2是一种细胞因子，其主要作用是刺激和调节T细胞、B细胞和自然杀伤细胞（NK细胞）等免疫细胞的活性。
通过与IL-2受体的结合，IL-2可以激活这些免疫细胞，并促进它们分化、增殖和分泌其他细胞因子，从而增强免疫反应。
呕吐是IL-2的不良反应之一尽管IL-2在治疗肿瘤和自身免疫性疾病方面取得了一定的成功，但其使用也可能伴随一系列的不良反应。
呕吐是其中比较常见的一种表现，尤其在IL-2治疗早期可能更为明显。
呕吐可能是由于IL-2对中枢神经系统的刺激作用造成的，同时也可能与IL-2导致肠道运动异常有关。
除了呕吐外，IL-2的其他常见不良反应包括发热、头痛、乏力、腹泻、皮疹等。
严重的不良反应还包括血液系统、心血管系统和肝肾功能异常等，因此在使用IL-2时需要密切监测患者的生命体征和血液、尿液等指标。
管理IL-2导致的呕吐对于因IL-2治疗而出现呕吐的患者，医生需要评估呕吐的程度和频率，并根据患者的情况进行相应的处理。
一般来说，对于轻度呕吐，可以采取辅助措施如适当的休息、限制进食等来缓解症状。
对于持续、严重的呕吐，可能需要给予药物治疗如抗呕吐药物以减轻症状。
此外，饮食和饮水的管理也很重要，确保患者有足够的水分摄入以防脱水，并避免摄入过量的食物或刺激性食物，以减少呕吐的风险。
结论总的来说，IL-2是一种重要的免疫调节剂，尤其在治疗某些类型的癌症和自身免疫性疾病方面发挥着重要作用。
然而，使用IL-2也会引起一系列的不良反应，其中呕吐是比较常见的一种表现。
因此，在使用IL-2治疗时，医生需要密切关注患者的不良反应，并及时采取措施进行管理和处理，以确保治疗的安全性和有效性。
注射用重组人白介素要注意什么？
注射用重组人白介素要注意什么？关于《注射用重组人白介素要注意什么？》，是我们特意为大家整理的，希望对大家有所帮助。
近些年，全世界的癌症肿瘤病发的概率非常之大，呈几何情况增长，在其中肿瘤也是这种病中较为难医治的，也是更为普遍的一种病。
重组人白介素是乳白色或微淡黄色的松散状粉末状，非常容易在水中融解，融解后是全透明回应的液體。
它能够用以癌症胸腔的积血和肿瘤，肾癌及其恶变肿瘤的医治。
那麼，注射重组人白介素要留意什么问题？适用范围1.用以肾细胞癌、黑色素瘤、乳腺癌、膀胱癌、肝癌、直肠癌、淋巴癌、肺癌等恶变肿瘤的医治，用以癌性胸腹水的控制，还可以用以淋巴因子激话的破坏力体细胞的塑造。
2.用以手术治疗,放化疗及放疗后的肿瘤病人的医治,可提高机体免疫功能。
3.用以先天性或后天免疫缺点症的医治,提升患者免疫细胞作用和抗感染工作能力.4.各种各样免疫性疾病的医治,如类风湿性关节炎,针对性红班狼疮,干燥综合症等.5.对一些病毒性感染,链球菌病症,胞内寄生物感染病症,如乙型肝炎,麻风病,肺结核,白念珠菌感染等具备一定的医治功效。
使用方法使用量用杀菌注射水融解，实际使用方法、使用量和治疗过程患病而异，一般选用以下几类方式（或遵医嘱）。
1、全身给药：（1）皮下组织注射：重组人白介素-2（125Ala)60—150万IU/m2（1~2支）用2ml注射自来水融解，皮下组织注射3次/周，6周为一治疗过程。
（2）静脉注射：40—80万IU/m2（1~2支）,溶解500ml盐水,滴注時间不少于4钟头,每星期三次,6周为一治疗过程。
（3）干预主动脉注浆：50~100万IU/次（1~2支），2~4周一次，2~4次为一治疗过程。
2、地区与部分给药：（1）胸腔引入：用以癌性胸腔积液，重组人白介素-2（125Ala)100~200万IU/m2次（1~2支），尽可能抽去腔内积液后引入，1~2次/周，2~4周（或积血消退）为一治疗过程。
（2）肿瘤疾病部分给药：依据瘤灶尺寸决策使用量,每一次使用量不少于10万IU，隔天一次，4~6次为一治疗过程。
注射用重组人白介素-2
剂开始，逐渐增大剂量或遵从医嘱。使用本品低剂量、长疗程可降低毒性，并且可维持抗肿瘤活性。 【孕妇及哺乳期妇女用药】
孕妇慎用。 【儿童用药】
尚不明确。 【老年用药】
尚不明确。
【药物相互作用】 尚不明确。
（二）抗结核治疗： 辅助用于治疗由耐药结核菌株引起的难治性肺结核：在结核病治疗的强化期，与抗结核药联合使
用，其用法用量为：每次 20 万国际单位（IU），皮下注射，每日 1 次，第 1、3 月分别连续使用 30 日。 【不良反应】
各种不良反应中最常见的是发热、畏寒、疲劳，且与用药剂量有关。一般是一过性发热（38℃左 右），亦可有寒战高热，停药后 3~4 小时可自行恢复正常。个别患者可出现恶心、呕吐、类感冒症状。 皮下注射者局部可出现轻度红肿、硬结、疼痛，所有副反应停药后均可自行恢复。使用较大剂量时， 本品可能会引起毛细血管渗漏综合症，表现为低血压、末梢水肿、暂时性肾功能不全等。使用本品应 严格掌握安全剂量，出现上述反应可对症治疗。 【禁忌】
1. 对白介素-2 或本制剂其它成分有过敏史者。 2. 高热、严重心脏病、低血压者，严重心肾功能不全者，肺功能异常或进行过器官移植者。 3. 重组人白介素-2 既往用药史中出现过与之相关的毒性反应：
(1) 持续性室性心动过速； (2) 未控制的心率失常； (3) 胸痛并伴有心电图改变、心绞痛或心肌梗塞； (4) 心压塞； (5) 肾功能衰竭需透析＞72 小时； (6) 昏迷或中毒性精神病＞48 小时； (7) 顽固性或难治性癫痫； (8) 肠局部缺血或穿孔； (9) 消化道出血需外科手术。
核准日期：××××年××月××日 修改日期：××××年××月××日
欣吉尔 新形重组人白介素-2简介
2。 诱导细胞毒性T淋巴细胞产生和 增殖
IL-2是抗原激活的细胞毒性T细胞前提细 胞转化为细胞毒性T淋巴细胞的主要因子。 在IL-2存在条件下，细胞毒性T淋巴细胞 繁殖明显增强，特异性地识别肿瘤相应抗 原，特异性地杀伤肿瘤细胞，是肿瘤侵润 淋巴细胞的主要细胞群。
3 对自然杀伤细胞(NK)的作用
注意事项
对于孕妇、老年人及儿童，未进行相关临 床试验且无可靠参考文献建议慎用。
欣吉尔的优势
1.空间构象更稳定
原型IL2 125位的Cys存在易与58、105位的Cys形 成错配。欣吉尔将105位的Cys突变成Ala消除 二硫键错配可能不存在异构体，结构均一。
比活性提高一倍作用更强
半衰期更长，效应更久
随着国内外一些用基因重组方法获得的IL2被批准上市，应用欣吉尔与其他生物反 应调节剂或抗癌药物协同作用。已经是继 手术治疗、化疗、放疗之后又一更新且更 加有效的治疗途径。
作用机理
本品是一种淋巴因子，可使细胞毒性T细 胞（CTL)、自然杀伤细胞(NK)和淋巴因 子活化的杀伤细胞(LAK)增殖，并使其杀 伤活性增强，还可以促进淋巴细胞分泌抗 体和干扰素，具有抗病毒、抗肿瘤和增强 机体免疫功能等作用。
临床使用
1 IL-2与化疗联合应用 目前对恶性肿瘤的治疗提倡联合治疗，单 一的化疗或免疫治疗均未能取得满意的疗 效，因此常用IL-2与化疗药物联合应用。 化疗药物在直接杀伤肿瘤细胞的同时也抑 制了免疫系统，所以使用IL-2与化疗药物 联合应用可以起到协同作用。除全身用药 外，通过介入方式联合化疗药物治疗直肠 癌晚期肝转移已成为现今研究的热点
NK细胞是一种极为主要的杀伤细胞，具 有很强的清除肿瘤细胞和被感染细胞的功 能。NK细胞的活化、分化和增殖都离不 开IL-2。IL-2不仅能促进NK细胞的增殖， 还能促使NK细胞产生TNFα，IFNγ和GMCSF等多种细胞因子，IL-2与IL-12协同作 用增加NK细胞的杀伤能力。所以IL-2在 NK细胞发挥免疫调节、抗肿瘤等功能上 具有重要作用。
重组用人白介素
此外，由于使用本品而引起的肝、肾功能下降，会延缓并用药物清除，从而增加这些药物的不良反应的危险性。
注射用重组人白介素是一种药物，可用于癌性胸腹腔积液及黑色素瘤、肾癌等恶性肿瘤的治疗。
药品名称 注射用重组人白介素
外文名称 Recombinant Human Interleukin-2
是否处方药 处方药
用法用量 ：60～100万IU/m2/次
主要用药禁忌 对本品成分过敏者、严重心肾功能不全者等
当β-阻断剂及其它抗高血压药与本品一起使用时可能引起低血压。
药物过量编辑
使用本品后的不良反应是与剂量相关的。超过了建议的剂量，就会较快出现预期的毒性。对停止使用本品后仍持续的症状必须及时监控和治疗。若此毒性危及生命，则可以用地塞米松静脉输液使之改善，但是该药同时也会使本品降低治疗效果。
药理毒理编辑
已报道当本品连续的高剂量结合抗肿瘤剂对患者合并给药时，会引发过敏反应，尤其是甲氮咪胺，顺铂以及α-干扰素等抗肿瘤剂。这些反应包括红斑、瘙痒症以及低血压，而且这些反应发生在化学治疗的数小时之内,某些患者在遇到这些情况时，需要治疗解决。本品与α-干扰素给患者合并给药治疗后，会增加心肌受损，包括心肌梗塞、心肌炎、心室运动功能减退以及严重的横纹肌瘤的病症。
本品显示具有人天然白介素-2（IL-2）的生物学活性，包括增加淋巴细胞有丝分裂可使具有细胞毒性T细胞、自然杀伤性细胞和淋巴因子活化杀伤细胞（LAK）增殖，并使其杀伤活性增强。当本品在人体内给药量达到一定程度后会产生免疫效应，能诱导一些细胞因子如肿瘤坏死因子、IL-1及γ-干扰素的产生。本品具有抗病毒、抗肿瘤和增强机体免疫功能等作用。
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注射用重组人白介素—4外源DNA残留量的检测摘要目的检测本实验室生产制备的重组人白介素—4原液中外源DNA的残留量方法提取大肠杆菌基因组DNA，经过酶切变性处理后，加入地高辛标记探针，再用探针进行杂交实验。
结果包括DNA纯度及浓度检测、基因组DNA酶切效率的检测、探针标记效率的检测、杂交的免疫检测，显示五个结果均正常。
结论供试品（注射用人重组白介素—4原液）中外源DNA的含量小于0.1ng/μL，本批次产品合格。
关键词白细胞介素—4 外源DNA残留 DIG探针标记Detection of exogenous residues DNA from Injective RecombinantHuman IL-4Abstract Objective Detect the exogenous DNA in human recombinant interleukin - 4 concentrate residues which produced by our own lab. Method Extract E. coil’s genome DNA, deal with the enzyme denaturation, add tags digoxin probe, probe hybridization experiments. Test results including five: DNA purity and concentration, genomic DNA enzyme efficiency of detection, probe detection, the efficiency of hybridization of immune detection, experiment shows five results were normal. Conclusion The test shows that the samples (concentrate) employing recombinant interleukin - 4 injection of exogenous DNA content is less than 0.1 ng/mu L, so this batch product is qualified.Keyword Interleukin-4 the exogenous residues DNA DIG labeled probe前言基因工程药物中宿主细胞残余DNA对人体可能造成插入突变，导致抑癌基因失活，癌基因被激活等严重危害，外源大肠埃希氏菌DNA进入人体后, 可能导致肿瘤的发生[1]，因而对基因工程药物中外源DNA 的控制具有重要意义。
注射用重组人白介素—4中外源DNA经变性为单链后，吸附于固相尼龙膜上，在一定温度下可与相匹配的单链DNA复性而重新结合成双链DNA，称为杂交[2]，应用DNA杂交技术，将特异性单链DNA经地高辛（DIG）探针标记后，与吸附在尼龙膜上的注射用重组人白介素—4单链DNA杂交，加入碱性磷酸酶标记的抗地高辛抗体与地高辛标记的探针相结合，再加入碱性磷酸酶的作用底物CSPD，通过相应的显示系统显示杂交结果，与已知含量的阳性DNA对照比对后，可测注射用重组人白介素—4中外源DNA残留量[4]。
目前，基因工程药物在攻克肿瘤、心血管系统等一些疑难病症等领域，发挥着巨大的作用[8]。
本实验室生产的注射用重组人白介素—4，采用大肠杆菌作为工程菌，提取pET32a( + )载体与pUC18/ mIL24 质粒 ,用限制性内切酶NdeI 酶切得到带有互补粘性末端的载体和目的基因片段 ,用T4 DNA 连接酶连接后转入JM109中 ,涂布在加有氨卞青霉素的固体LB培养基上 ,培养过夜[11]。
挑取阳性菌落，经质粒酶切验证、DNA测序，确认质粒构建正确且无突变后 ,转入大肠杆菌BL21感受态细胞 ,从而获得pET32/ rmIL24 质粒的BL21(DE3)表达工程菌。
控制相关条件促使人的白介素-4基因（目的基因）表达，生产重组蛋白药物人白介素—4（约15KD）。
经目的基因工程菌的发酵，收集菌体沉淀，超声破菌后离心，3M盐酸胍洗涤，7M盐酸胍溶解，制得包涵体，逐步降低变性剂浓度复性后，再经脱盐、分子筛层析、离子交换层析等系列纯化后[3]，得到产品原液。
重组的蛋白产品功能一般与天然相似，但由于生产方法不同，其纯度要求、毒副作用和体内药物代谢动力学性质仍与天然的产品有很大区别[9]，所以对原液进行相关检测是必要的，外源DNA的含量超标，核酸残留量控制不好，可使药物产生毒副作用[7]，本实验借鉴southern blot的技术手段，应用DNA与DNA杂交的原理，检测产品原液中外源DNA的残留量，以达到质量监控的目的。
材料与方法1.实验材料1.1样品来源本实验室生产制备的重组人白介素-4原液。
1.2实验设备1.2.1实验器材名称厂家型号软片冲洗机虎丘影像科技（苏州）有限公司HQ—320XT 移液器1000μL eppendorf 100～1000μL 移液器100μL eppendorf 10～100μL 移液器10μL eppendorf 0～100μL 移液器2.5μL eppendorf 0～2.5μL 1.2.2实验材料名称厂家型号细菌基因组DNA提取试剂盒TIANGEN Biotech H7208 DNA酶切BsuRI(HaeⅢ) fermentas ER0151 杂交试剂盒（Detection Starter KitⅡ）Roche 11585614910 马来酸成都科龙试剂厂500g 氯化钠天津海龙药业有限公司1000g 氨基丁三醇重庆青阳药业有限公司500g 柠檬酸钠成都科龙试剂厂500g SDS(十二烷基硫酸钠) 湖南尔康制药有限公司500g 甲醇成都科龙试剂厂500mL 冰醋酸成都科龙试剂厂500mL1.3 溶液配制1×TAE：量取8mL 50×TAE（称取Tris 242g，Na2EDTA.2H2O 37.2g于1L烧杯中，加入800ml无菌水（电阻率＞18.2MΩ.cm），充分搅拌溶解。
加入57.1ml冰醋酸，充分混匀，继续加入无菌水定容至1L。
）加至382mL无菌水中，混匀，室温保存。
washing buffer（1L）：称取马来酸（顺丁烯二酸）11.6g，氯化钠8.775g, 适量无菌水（电阻率＞18.2MΩ.cm）溶解，调pH至7.5，定容至1L后，加入3ml 0.3%吐温20，充分混匀。
maleic acid buffer（1L）：称取马来酸（顺丁烯二酸）11.6g，氯化钠8.775g,加入适量无菌水（电阻率＞18.2MΩ.cm）溶解，调pH至7.5，定容至1L。
blocking buffer（1×）：用Maleic acid buffer稀释试剂盒中的blocking buffer 10×（瓶号⑥）至1×，即取2mL 10× blocking buffer加入18mL Maleic acidbuffer,现配现用。
抗体溶液：试剂盒中的抗体（瓶号④）溶液经10000r/min，5min离心，取上层液体用1×blocking buffer 1：10000稀释（1μL抗体溶液+ 10mL1×blocking buffer）。
detection buffer：称取Tris碱12.1g，NaCl 5.85g，适量无菌水（电阻率＞18.2MΩ.cm）溶解，调PH至9.5，定容至1L。
1%蛋白酶K溶液：称取蛋白酶K 0.1g,溶于10mL无菌水（电阻率＞18.2MΩ.cm）中,分装储存﹣20℃。
0.3%牛血清白蛋白溶液：称取BSA 0.3g,溶于1mL无菌水（电阻率＞18.2MΩ.cm）中,分装储存﹣20℃。
蛋白酶缓冲液（pH8.0）：量取1M Tris溶液（PH8.0）1mL、5M NaCl溶液2mL、0.5M乙二胺四乙酸二钠溶液（PH 8.0）2.0mL、20%SDS溶液（PH 8.0）2.5mL，加无菌水（电阻率＞18.2MΩ.cm）至10mL。
TE缓冲液（pH8.0）：量取1M Tris溶液（PH8.0）10mL、0.5M乙二胺四乙酸二钠溶液（PH8.0）2.0mL，加UP水（电阻率＞18.2MΩ.cm）至1000mL。
1%鱼精DNA溶液：精密称取鱼精DNA 0.1g 于10mL量瓶中，用TE缓冲液溶解并稀释至刻度，摇匀，用7号针头反复抽打以剪切DNA成为小分子，分装后贮藏于﹣20℃。
DNA稀释液：取1%鱼精DNA溶液50μL，加TE缓冲液至10mL。
20×SSC（1L）：称取氯化钠175.32g，柠檬酸钠88.23g，加无菌水（电阻率＞18.2MΩ.cm）1L溶解。
1%SDS（1L）：称取10g十二烷基硫酸钠溶于1L无菌水（电阻率＞18.2MΩ.cm）中。
2×SSC 0.1%SDS（1L）：取100mL1%SDS，100mL20×SSC，加无菌水（电阻率＞18.2MΩ.cm）800mL，混匀。
1×SSC 0.1%SDS（1L）：取100mL1%SDS，50mL20×SSC，加无菌水（电阻率＞18.2MΩ.cm）850mL，混匀。
2.实验方法2.1 培菌(PET32a-NdeI-hil4，于2007年5月保种)2.1.1 配制LB培养基：称取蛋白胨2g、酵母浸出物1g、氯化钠2g于200mL 蓝口玻璃瓶中，加入无菌水（电阻率＞18.2MΩ.cm）200mL。
2.1.2 121℃，20min高压蒸汽灭菌LB培养基。
2.1.3 待培养基冷却，超净工作台内加入氨苄西林钠100μL（浓度为0.2g/ml），接种PET32a-NdeI-hil4菌液20μL，37℃，220r/min摇床培养，过夜。
2.2 提取细菌基因组DNA(细菌基因组DNA提取试剂盒)2.2.1分别取细菌培养液1～5mL于标记A、B的离心管中（细菌提取量约为1.0×108个细胞），10000rpm,离心1分钟,尽量吸尽上清。
2.2.2 向菌体沉淀中加入200μL缓冲液GA，振荡至菌体彻底悬浮，加入4μLRNaseA(100mg/mL)溶液，目录号：RT405-11，振荡15s，室温放置5min.2.2.3 向管中加入20μL蛋白酶K溶液，混匀。
2.2.4 加入220μL缓冲液GB，振荡15s，70℃放置10min,简短离心去除管内壁水珠。
（注：加入缓冲液GB时可能产生白色沉淀，一般70℃放置10min会消失，不影响后续实验，如果溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可导致提取DNA量少和提取的DNA不纯。