常用细胞培养基配方及缓冲液
ms培养基配方表
ms培养基配方表ms培养基是一种常用的细胞培养基，用于无菌条件下培养哺乳动物细胞，特别是鼠胚胎成纤维细胞（Mouse Embryo Fibroblast,MEF）。
它是由多种有机和无机化合物组成的复杂混合物，可以提供细胞生长所需的必需氨基酸、糖类、维生素和微量元素等营养物质。
同时，它还包含有机缓冲剂和盐类，可以调节培养品的 pH 值和离子浓度，保持培养条件的稳定性。
下面介绍 ms培养基的配方表：MS培养基水相1. 将1L 去离子水（DI水）加入1mol/L NaCl 至5mL2. 加入HEPES缓冲液（1mol/L）27.7g，调节至pH7.2-7.43. 加入葡萄糖25.0g，混合直至葡萄糖完全溶解4. 加入 L-谷氨酸1.42g，细胞培养I 类和 II 类所需濃度5. 加入 L-苏氨酸0.07g，细胞培养所需濃度6. 加入 L-半胱氨酸0.16g7. 加入 L-赖氨酸0.07g8. 加入 L-缬氨酸0.07g9. 加入L-异亮氨酸0.07g10. 加入L-亮氨酸0.14g11. 加入L-丙氨酸0.14g12. 加入L-天冬氨酸0.15g13. 加入L-芸香氨基酸0.42g14. 加入 L-色氨酸0.03g15. 加入 L-酪氨酸0.03g16. 加入 L-精氨酸0.17g17. 加入 L-组氨酸0.03g18. 加入 L-甘氨酸0.10gMS培养基固相1. 加入 NaHCO3（7.5%）4mL，细胞培养所需濃度2. 加入 4-(2-羟乙基)吡啶盐酸盐（HEP）2g，细胞培养所需濃度；过度使用可导致凝块形成3. 加入 MgSO4（7H2O）0.94g，细胞培养所需濃度4. 加入 KH2PO4 0.17g，细胞培养所需濃度5. 加入 NaH2PO4（H2O，2. H2O）0.19g，细胞培养所需濃度6. 加入 Na2HPO4（7H2O）3.05g，细胞培养所需濃度7. 加入次黄嘌呤（NEAA）1mL，必需的非必需氨基酸，促进细胞生长8. 加入乳酸钠2.72g，利用减少氧淤积，促进细胞生长9.加入硫酸铜子（10-5M)）1mL，为MEF的细胞类型提供最佳的增生所需注：以上配方根据MS原始文献略作调整，如果在实验中出现差异，请根据实际情况微调。
常用缓冲液及培养基配方
常用缓冲液及培养基配方缓冲液和培养基是生物学实验中常用的重要试剂，它们的配方的选择对实验结果有着重要的影响。
下面将介绍几种常用的缓冲液和培养基的配方及其用途。
一、缓冲液配方1.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液常被用于细胞培养和生物化学实验中，它的使用范围很广。
常用的磷酸盐缓冲液有PBS（磷酸盐缓冲盐水），配方如下：-NaCl8g-KCl0.2g-Na2HPO41.42g-KH2PO40.24g将以上物质溶解在1L的去离子水中，pH值调到7.4，即可得到1×PBS缓冲液。
2. Tris缓冲液Tris缓冲液在分子生物学实验中常被用作DNA和RNA电泳的产物混合液。
常用的Tris缓冲液有Tris-HCl缓冲液和Tris-acetate缓冲液。
以下是Tris-HCl缓冲液的配方：- Tris 12.1 g-HCl(10M,pH7.6)10mL将Tris和HCl分别溶解在800 mL去离子水中，然后添加水调至1 L，pH值调节到目标值即可。
Tris-acetate缓冲液的配方与Tris-HCl相似，只是在Tris-HCl的基础上添加乙酸。
3. Glycine缓冲液Glycine缓冲液常被用于电泳实验中，用于电泳缓冲液和电泳媒介液的制备。
以下是Glycine缓冲液的配方：- Glycine 3 g- Tris 4.8 g-SDS0.207g-EDTA0.37g将以上物质溶解在1 L的去离子水中，pH值调至8.3，即可得到1×Glycine缓冲液。
1.LB培养基LB培养基是最常用的细菌培养基之一，用于培养大肠杆菌等革兰氏阴性菌。
以下是LB培养基的配方：- Tryptone 10 g- Yeast extract 5 g-NaCl10g将以上物质溶解在1L的去离子水中，加热至溶解，然后进行高压灭菌即可得到LB培养基。
2.M9培养基M9培养基是一种缺乏氮、氨基酸和碳的最小培养基，常被用于重组DNA的传输。
实验室常用试剂和缓冲液配方
实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液种类繁多，根据实验需求，可以根据不同的试剂和缓冲液配方来满足实验要求。
以下是一些常见的试剂和缓冲液配方，以及其用途和制备方法。
1. 磷酸缓冲液（Phosphate buffer）磷酸缓冲液常用于生化和分子生物学实验中，用于控制溶液的pH值，适用于酸性和碱性条件下。
常见的配方包括0.1M磷酸盐缓冲液（pH7.2-7.4），需要用磷酸盐和盐酸或氢氧化钠来制备。
2. 氯化钠溶液（Sodium chloride solution）氯化钠溶液是实验室中常见的缓冲液配方之一，通常用于调节生物样品的渗透压和离子浓度。
可以制备不同浓度的氯化钠溶液，常见的配方为0.9%氯化钠溶液（生理盐水）。
3. 碳酸氢盐缓冲液（Bicarbonate buffer）碳酸氢盐缓冲液常用于细胞培养和生理实验中，用于维持细胞培养基或实验液的pH稳定。
一种常见的配方为10mM碳酸氢盐缓冲液（pH7.2-7.4），需要用碳酸氢钠和盐酸来制备。
4. Tris缓冲液（Tris buffer）Tris缓冲液是一种常见的生化实验缓冲液，可以调节到不同的pH值。
常见的配方为50 mM Tris缓冲液（pH 7.4），需要用Tris（三氯甲烷磺酸，Tris-HCl）和盐酸来制备。
5. PBS缓冲液（Phosphate-buffered saline）PBS缓冲液是一种用于细胞和组织处理的常见缓冲液，具有稳定pH值和离子浓度的特点。
常见的配方为10mMPBS缓冲液（pH7.4），需要用磷酸盐和盐酸或氢氧化钠来制备。
6. 甘氨酸缓冲液（Glycine buffer）甘氨酸缓冲液常用于蛋白质电泳实验中，用作电泳缓冲液和传递缓冲液。
常见的配方为25mM甘氨酸缓冲液（pH8.3），需要用甘氨酸和盐酸来制备。
7. BSA溶液（Bovine serum albumin solution）BSA溶液是实验室中常见的蛋白质标准物质，用于测定蛋白质浓度和酶活性等实验。
各种培养液的配方
各种培养液的配方不同的细胞类型和培养目的需要使用不同的培养液。
下面列举一些常见的细胞培养液配方及其用途。
1.DMEM培养液：DMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）是一种最常用的细胞培养基，适用于多种哺乳动物细胞的培养。
以下是DMEM培养液的配方：-1×DMEM：将DMEM粉末加入去离子水中，调整pH至7.2-7.4，用0.22μm过滤器过滤灭菌。
-10%胎牛血清（FBS）：将FBS加入1×DMEM中，使最终浓度为10%。
-1%抗生素/抗菌素：将1%抗生素/抗菌素（如青霉素/链霉素）加入1×DMEM中，使最终浓度为1%。
2.RPMI1640培养液：RPMI1640是一种适用于淋巴细胞和白血病细胞的培养基。
以下是RPMI1640培养液的配方：-1×RPMI1640：将RPMI1640粉末加入去离子水中，调整pH至7.2-7.4，用0.22μm过滤器过滤灭菌。
-10%FBS：将FBS加入1×RPMI1640中，使最终浓度为10%。
-1%抗生素/抗菌素：将1%抗生素/抗菌素加入1×RPMI1640中，使最终浓度为1%。
- 2-mercaptoethanol：将2-mercaptoethanol加入1×RPMI 1640中，使最终浓度为0.05mM。
3.MEM培养液：MEM（Minimum Essential Medium）是一种用于哺乳动物细胞培养的基础培养液。
以下是MEM培养液的配方：-1×MEM：将MEM粉末加入去离子水中，调整pH至7.2-7.4，用0.22μm过滤器过滤灭菌。
-10%FBS：将FBS加入1×MEM中，使最终浓度为10%。
-1%抗生素/抗菌素：将1%抗生素/抗菌素加入1×MEM中，使最终浓度为1%。
-1×非必需氨基酸：将非必需氨基酸（如谷氨酰胺、苏氨酸等）加入1×MEM中。
细胞培养液配方
双抗(0.2ml)
RPMI-1640培养基 (180ml)
胎牛血清 (20ml)
双抗 （2ml）
溶液各组分终浓度为90%RPMI-1640培养基 +10%胎牛血清+1%双抗（200mM L-谷氨酰胺、10mg/ml链霉素和10000U青霉素）
三 细胞冻存液配方：(20ml)
RPMI-1640培养基 (14ml)
胎牛血清 (4ml)
细胞培养常用溶液配方
一PBS配方：
方法一 1×PBS(Phosphate-Buffered Sallines)
Na2HPO4、Na2HPO4•7H2O、Na2HPO4•12H2O中任选其一。
方法二 母液的配制：
0.2M Na2HPO4：称取71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于1000ml水
0.2M NaH2PO4：称取31.2g NaH2PO4-2H0.2M PB，加水稀释至1000ml即可。
0.02MPBS（PH=7.4）：取100ml 0.2 M PB，加水稀释至1000ml即可。
若需要NaCl的话，加入NaCl至0.9%（g/100ml）即可。
细胞培养常用溶液配方
二 细胞培养液配方：（200ml）
各种浓度PBS(pH=7.4)的配制：
先配0.2M PBS(pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4，81ml 0.2mol/L的Na2HPO4,即可。
然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可，如：
0.1MPBS（PH=7.4）：取500ml 0.2M PB，加水稀释至1000ml即可。
常用缓冲液及培养基配方
常用缓冲液及培养基配方常用缓冲液及培养基配方LB液体培养基：Bacto-蛋白胨10g酵母抽提物5g氯化钠10g加950ml蒸馏水溶解，用5N氢氧化钠调pH至7.0，定容至1000ml，高压灭菌后保存。
LB固体培养基：每升LB液体培养基中加入12g琼脂粉，高压灭菌后保存。
SOB液体培养基Bacto-蛋白胨20g酵母抽提物5gNaCl 0.5g加950 ml水溶解，加入250mmol/L KCl 溶液10ml，用5 N NaOH调pH至7.0，定容至1000 ml，高压灭菌后保存。
使用前加入5ml经灭菌的2mol/LMgCl2。
SOC液体培养基SOB中加入经灭菌的葡萄糖溶液至终浓度为20mmol/L。
麦康凯固体培养基每1000ml水中加52g培养基粉，煮沸溶解后分装，高压灭菌。
NA固体培养基牛肉浸膏3g酵母浸膏1g蛋白胨蔗糖琼脂粉5g 10g 15g加950ml蒸馏水溶解，调pH至7.0，定容至1000ml，高压灭菌后保存。
TB培养基：将下列组分溶解在0.9L水中：Bacto-蛋白胨12g酵母抽提物24g甘油4ml各组分溶解后高压灭菌。
冷却到60℃，再加100ml灭菌的170mmol/L KH2PO4/ 0.72 mol/L K2HPO4的溶液。
高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌。
溶液Ⅰ葡萄糖2.25 g 50mmol/L1mol/L Tris·Cl(pH8.0) 6.25ml 20mmol/L0.5mol/L EDTA(pH8.0) 5ml 10mmol/L调pH至8.0后，用水定容至250 ml，高压灭菌后保存。
溶液Ⅱ10 mol/L NaOH 2ml10% SDS 10ml用水定容至100 ml，现配现用。
溶液Ⅲ5 mol/L 醋酸钾60ml冰醋酸11.5ml水28.5ml高压灭菌后保存。
高盐TE缓冲液10mmol/L Tris.Cl, pH 8.0*0.1mmol/L EDTA, pH 8.0*1mol/L NaCl于室温保存（可在几年内保持稳定）CTAB抽提液2%（w/v）CTAB(古立烷基三乙基溴化铵)100mmol/L Tris.Cl,pH 8.0 *1.4mol/L NaCl于室温保存（可在几年内保持稳定）CTAB/NaCl 溶液（10% CTAB/0.7mol/L NaCl）在80ml H2O中溶解4.1g NaCl,缓慢加入10一CTAB（十六烷基三乙基溴化铵），同时加热并搅拌。
常用细胞培养基配方及缓冲液
常用细胞培养基配方及缓冲液细胞培养基是为了在体外维持细胞生长和增殖所设计的一种营养液。
细胞培养基的配方要求提供细胞所需的基本营养物质，如氨基酸、糖类、维生素和激素，并提供适当的pH和离子平衡。
同时，缓冲液也是细胞培养过程中不可或缺的一部分，用于稳定细胞培养基的pH，维持细胞正常的生长环境。
下面列举几种常用的细胞培养基配方及缓冲液：1. DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium)-细胞培养基配方：-DMEM培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)-缓冲液：无2. RPMI 1640 Medium (Roswell Park Memorial Institute Medium) -细胞培养基配方：-RPMI1640培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)-缓冲液：HEPES(4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙烷磺酸)溶液，浓度为25mM，用于稳定pH。
3. MEM (Minimum Essential Medium)-细胞培养基配方：-MEM培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)- 缓冲液：盐酸/NaOH缓冲体系，通常用NaHCO3/N-2-羟乙基piperazine-N'-2-乙磺酸(HEPES)缓冲。
4. Hank's Balanced Salt Solution (HBSS)-细胞培养基配方：-HBSS培养基粉末-对应体积的无菌水-缓冲液：无5. L-15 Medium (Leibovitz's L-15 Medium)-细胞培养基配方：-L-15培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-缓冲液：HEPES溶液，浓度为25mM。
6. DMEM/F12 Medium (Dulbecco's Modified Eagle Medium and Ham's F-12 Medium)-细胞培养基配方：-DMEM/F12培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)-缓冲液：HEPES溶液，浓度为25mM。
常用缓冲液及培养基配方
常用缓冲液及培养基配方LB液体培养基：Bacto-蛋白胨10g酵母抽提物5g氯化钠10g加950ml蒸馏水溶解，用5N氢氧化钠调pH至7.0，定容至1000ml，高压灭菌后保存。
LB固体培养基：每升LB液体培养基中加入12g琼脂粉，高压灭菌后保存。
SOB液体培养基Bacto-蛋白胨20g酵母抽提物5gNaCl 0.5g加950 ml水溶解，加入250mmol/L KCl 溶液10ml，用5 N NaOH调pH至7.0，定容至1000 ml，高压灭菌后保存。
使用前加入5ml经灭菌的2mol/LMgCl2。
SOC液体培养基SOB中加入经灭菌的葡萄糖溶液至终浓度为20mmol/L。
麦康凯固体培养基每1000ml水中加52g培养基粉，煮沸溶解后分装，高压灭菌。
NA固体培养基牛肉浸膏3g酵母浸膏1g蛋白胨蔗糖琼脂粉5g 10g 15g加950ml蒸馏水溶解，调pH至7.0，定容至1000ml，高压灭菌后保存。
TB培养基：将下列组分溶解在0.9L水中：Bacto-蛋白胨12g酵母抽提物24g甘油4ml各组分溶解后高压灭菌。
冷却到60℃，再加100ml灭菌的170mmol/L KH2PO4/ 0.72 mol/L K2HPO4的溶液。
高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌。
溶液Ⅰ葡萄糖2.25 g 50mmol/L1mol/L Tris·Cl(pH8.0) 6.25ml 20mmol/L0.5mol/L EDTA(pH8.0) 5ml 10mmol/L调pH至8.0后，用水定容至250 ml，高压灭菌后保存。
溶液Ⅱ10 mol/L NaOH 2ml10% SDS 10ml用水定容至100 ml，现配现用。
溶液Ⅲ5 mol/L 醋酸钾60ml冰醋酸11.5ml水28.5ml高压灭菌后保存。
高盐TE缓冲液10mmol/L Tris.Cl, pH 8.0*0.1mmol/L EDTA, pH 8.0*1mol/L NaCl于室温保存（可在几年内保持稳定）CTAB抽提液2%（w/v）CTAB(古立烷基三乙基溴化铵)100mmol/L Tris.Cl,pH 8.0 *1.4mol/L NaCl于室温保存（可在几年内保持稳定）CTAB/NaCl 溶液（10% CTAB/0.7mol/L NaCl）在80ml H2O中溶解4.1g NaCl,缓慢加入10一CTAB（十六烷基三乙基溴化铵），同时加热并搅拌。
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10
10
10
6
丁二酸钠
—
—
—
100
丁二酸
—
—
—
75
维生素H
1
1
1
1
D-泛酸钙
1
1
1
1
重酒石酸胆碱
—
—
—
1.8
氯化胆碱
1
1
1
—
叶酸
1
1
1
1
i-肌醇
2
2
2
2
烟酰胺
1
1
1பைடு நூலகம்
1
盐酸吡哆醛
1
1
1
1
核黄素
0.1
0.1
0.1
0.1
盐酸硫胺
1
1
1
1
pH（无碳酸氢钠）
5.9±0.3
6.8±0.3
5.9±0.3
4.2±0.3
97.67
97.67
97.67
磷酸二氢钾
—
60
—
—
60
—
—
—
—
氯化钠
6800
8000
6800
6800
8000
6800
6800
6800
6800
无水磷酸二氢钠
121.74
—
121.74
121.74
—
121.74
121.74
121.74
—
磷酸氢二钠
—
47.88
—
—
47.88
—
—
—
—
L-丙氨酸
—
—
—
8.9
8.9
1640细胞培养基
成分（mg/L）
MD800
MD801
MD802
MD803
四水硝酸钙
100
100
100
100
氯化钾
400
400
400
400
无水硫酸镁
48.84
48.84
48.84
48.84
氯化钠
6000
6000
6000
5850
磷酸氢二钠
800
800
—
800
L-精氨酸
200
200
200
200
L-天门冬酰胺
—
—
—
—
L-精氨酸盐酸盐
126
126
126
126
126
126
126
126
126
L-天门冬酰胺
—
—
—
13.2
13.2
—
—
—
—
L-天门冬氨酸
—
—
—
13.2
13.2
—
—
—
—
L-胱氨酸盐酸盐
31.29
31.29
31.29
31.29
31.29
31
31
31.29
31.29
L-谷氨酸
—
—
—
14.7
14.7
—
—
—
—
4.2±0.3
4.3±0.3
5.9±0.3
6.6±0.3
pH（加碳酸氢钠）
7.6±0.3
7.1±0.3
6.8±0.3
7.5±0.3
7.2±0.3
7.3±0.3
6.7±0.3
7.5±0.3
7.8±0.3
渗透压（无碳酸氢钠）
250±5％
282±5％
265±5％
250±5％
287±5％
251±5％
267±5％
50
50
50
50
L-天门冬氨酸
20
20
20
20
L-胱氨酸盐酸盐
65.15
65.15
65.15
65.15
L-谷氨酸
20
20
20
20
L-谷氨酰胺
300
300
300
300
甘氨酸
10
10
10
10
L-组氨酸
15
15
15
15
L-羟脯氨酸
20
20
20
20
L-异亮氨酸
50
50
50
50
L-亮氨酸
50
50
50
50
L-赖氨酸盐酸盐
—
72.5
L-蛋氨酸
15
15
15
15
15
15
15
—
15
L-苯丙氨酸
32
32
32
32
32
32
32
32
32
L-脯氨酸
—
—
—
11.5
11.5
—
—
—
—
L-丝氨酸
—
—
—
10.5
10.5
—
—
—
—
L-苏氨酸
48
48
48
48
48
48
48
48
48
L-色氨酸
10
10
10
10
10
10
10
10
10
L-酪氨酸
36
36
36
36
42
渗透压（加碳酸氢钠）
276±5％
以上数据仅为参考，以产品说明书为准。
BME细胞培养基
成分（mg/L）
MD100
MD101
MD102
MD103
无水氯化钙
200
140
200
200
氯化钾
400
400
400
400
无水硫酸镁
97.67
97.67
—
97.67
磷酸二氢钾
—
60
—
—
氯化钠
6800
8000
6800
0.01
L-组氨酸盐酸盐
21.88
21.88
氯化胆碱
0.50
0.50
L-羟脯氨酸
10.00
10.00
叶酸
0.01
0.01
L-异亮氨酸
40.00
40.00
i-肌醇
0.05
0.05
L-亮氨酸
60.00
60.00
维生素K3
0.01
0.01
L-赖氨酸盐酸盐
70.00
70.00
烟酸
0.025
0.025
L-蛋氨酸
维生素H
0.0035
0.0035
L-胱氨酸盐酸盐
31.29
31.29
D-泛酸钙
2.24
2.24
L-谷氨酰胺
365
365
氯化胆碱
8.98
8.98
甘氨酸
18.75
18.75
叶酸
2.65
2.65
L-组氨酸盐酸盐
31.48
31.48
i-肌醇
12.6
12.6
L-异亮氨酸
54.47
54.47
烟酰胺
2.02
2.02
48.84
48.84
亚油酸
0.042
0.042
氯化钠
6999.5
6999.5
硫辛酸
0.105
0.105
无水磷酸二氢钠
54.35
54.35
酚红
8.1
8.1
磷酸氢二钠
71.02
71.02
1,4-丁二胺二盐酸盐
0.081
0.081
七水硫酸锌
0.432
0.432
丙酮酸钠
55
55
L-精氨酸盐酸盐
147.5
147.5
6800
无水氯化镁
—
—
93.68
—
磷酸氢二钠
—
47.88
—
—
无水磷酸二氢钠
121.74
—
121.74
121.74
L-精氨酸盐酸盐
21
21
21
21
L-胱氨酸盐酸盐
15.65
15.65
15.65
15.65
L-谷氨酰胺
292
292
292
—
L-组氨酸盐酸盐
15
15
15
15
L-异亮氨酸
26
26
26
26
L-亮氨酸
MEM细胞培养基
成分（mg/L）
MD600
MD601
MD602
MD603
MD604
MD605
MD606
MD607
MD608
氯化钙
200
140
—
200
140
200
—
200
200
氯化钾
400
400
400
400
400
400
400
400
400
无水硫酸镁
97.67
97.67
97.67
97.67
97.67
97.67
1.8
—
—
氯化胆碱
1
1
1
1
1
—
—
1
1
叶酸
1
1
1
1
1
1
1
1
1
i-肌醇
2
2
2
2
2