薄层色谱的最新应用与进展
薄层色谱法在药物分析中的应用
1 薄层色谱法概述 (2)1.1 定义 (2)1.2 原理 (2)1.3 特点 (2)1.4 定量检测方法 (3)2 TLC在药物分析方面的应用 (3)2.1 中药材的鉴别 (3)2.2 植物药成分的鉴别 (4)2.3 化学药品及复方制剂 (5)2.4 药品杂质检验 (6)2.5 中药指纹图谱分析 (6)2.6 在定量分析中得应用[13] (7)2.6.1 薄层色谱定量方法 (7)2.6.2 薄层色谱在定量分析中得应用 (8)3 薄层色谱新技术及其应用 (8)3.1 高效薄层色谱（HPTLC） (8)3.2假相薄层色谱 (9)3.3 反相薄层色谱( RPTLC) (10)3.4 薄层扫描法[17] (11)4 总结 (12)薄层色谱在药物分析中的应用薄层色谱( Thin Layer Chromatography，TLC) 在药物，尤其在植物药成分的定性和定量分析方面早已有了非常广泛的应用。
随着科学技术的发展以及新材料的应用，使其得到了很大发展，出现了许多新技术，如高效薄层色谱、假相薄层色谱、反相薄层色谱、微乳薄层色谱在中药药物分析中已有一定的应用。
TLC 在规范化、仪器化方面均取得了长足的进步，在大批量样品及某些特殊样品的快速分析中，显示了分析容量大、可采用特征专属的显色剂以及极低的溶剂消耗等优势。
近年来TLC 广泛应用于有机化合物的分析鉴定、植物药有效部位的分离精制、有机合成、结构分析、生物测定等，尤其在研究开发植物药有效部位和中成药质量控制中，是用于定性、定量分析的最简便的科学方法。
但TLC亦有其缺陷，其色谱结果易受铺板质量、点样技术、展开剂配制、层析环境中展开剂的饱和度、环境温湿度等因素的影响，有时难于重复；显色又受均匀性、灵敏度、稳定性等影响，这均使测定结果偏差较大[1]。
最近几年围绕着测定过程的标准化和自动化，薄层色谱技术有了全新的发展，扩大了TLC技术在中药药物定性定量分析中的应用。
薄层色谱法的发展
薄层色谱分析法的应用和发展一、薄层色谱分析在层析分离过程中的应用生物技术、新型材料技术、信息技术是当今科技发展的前沿 ,在某种程度上甚至可以代表一个国家的科学技术发展水平。
层析分离过程是生化产物分离和纯化的重要手段之一 ,作为生物技术产业化进程中的“下游技术”往往成为技术和经济的关键 , 直接关系到产品的产量和质量 ,其成本经常占到总成本的60 %～90 %[2 ] 。
因此 ,层析分离过程的优化和控制就显得十分重要。
薄层色谱分析方法 , 因其具有分析迅速快、成本低廉、可现场操作等特点在层析分离过程中不可缺少。
1. 薄层色谱分析的优越性薄层色谱分析方法和高效液相色谱分析方法均遵循层析分离的基本原理 ,因此 ,层析分离过程的中间控制性分析和分离后的最终产物的检验 ,用上述两种分析方法是非常适合的。
高效液相色谱分析方法的精度高、分离效能高、选择性高、检测器灵敏度高 , 比较适合最终产物的检验。
虽然高效液相色谱也可用于中控分析 ,但是分析检验的成本非常高，需要设置专业人员进行分析操作。
由于样品在分析前需要预处理 ,得到分析结果的时间相对较长 ,对于层析过程的中间控制就显得不够及时 , 同时过高的分析精度也没有必要。
薄层色谱分析方法在对层析分离过程控制性分析中就显示出了很高的优越性。
2. 薄层色谱片的制作和分析操作用于层析分离过程的中间控制性分析的薄层色谱片可以在专业试剂商店买到 ,如果在实验室自己制备则可节约80 %的成本, 同时可以根据分析的实际需要灵活地调整固定相薄层的配方。
固定相通常用 GF254 硅胶和一定比例的纤维素配合而成。
将固定相的浆料均匀地涂布在毛玻璃片上，经烘干活化后即可使用。
每片薄层可以分析多个样品，重复使用几次。
经毛细管点样、在层析缸用展开剂展开后，在紫外分析仪上可观察到非常清晰的分析结果，一次分析过程基本可控制在 10min左右，现场操作人员经短时间的培训就可掌握。
3. 薄层色谱分析对层析分离过程的优化应用薄层色谱进行层析中间控制分析，选用展开剂和确定不同展开剂的比例是薄层分析的关键。
薄层色谱法在天然产物提取与分离中的应用
薄层色谱法在天然产物提取与分离中的应用1. 引言天然产物是指从植物、动物和微生物等自然来源中提取出的化合物，这些化合物具有丰富的生物活性，可以用于药物研发、食品添加剂等领域。
然而，天然产物的提取和分离是一项复杂而繁琐的过程，其中薄层色谱法作为一种常用的分析方法，在这个过程中发挥了重要作用。
2. 薄层色谱法的基本原理薄层色谱法是一种以固定相和流动相进行分离的分析方法。
在薄层色谱法中，固定相是一层涂在玻璃或铝板上的薄层吸附剂，流动相是由溶剂构成的液体体系。
样品溶液通过涂有固定相的薄层板时，不同组分会因为吸附作用在固定相上产生不同的迁移速度，从而实现分离和鉴定。
3. 薄层色谱法在天然产物提取中的应用薄层色谱法可以用于天然产物的初步组分分析和提取。
首先，将天然产物样品通过适当的溶剂提取，得到提取液。
接下来，将提取液倒入涂有固定相的薄层色谱板上，利用不同组分在固定相上的扩散速率差异，实现组分的分离。
然后，通过显色剂染色，可以直观地观察到样品中的化合物区带，并对化合物进行初步鉴定。
4. 薄层色谱法在天然产物分离中的应用除了提取，薄层色谱法还可以用于天然产物中特定化合物的分离。
在分离过程中，首先将样品通过适当的溶剂提取，得到混合物。
然后，将混合物倒入涂有固定相的薄层色谱板上，并通过不同流动相的选择，使得目标化合物以不同的速度迁移，实现目标化合物的分离。
最后，通过对分离得到的各组分进行鉴定和分析，可以得到纯度较高的目标化合物。
5. 薄层色谱法在天然产物鉴定中的应用天然产物中有许多化合物具有类似的结构或相似的化学性质，因此，在鉴定特定化合物时，往往需要借助薄层色谱法。
通过将待鉴定的天然产物样品与已知标准品一起在薄层色谱板上进行分析，可以通过比对化合物在色谱板上的迁移行为和显色效果，推断待鉴定化合物的结构或类型。
6. 薄层色谱法在天然产物提取与分离中的优势薄层色谱法具有操作简便、结果准确、成本低廉等优势，因此在天然产物提取和分离中广泛应用。
定量薄层色谱法的现状与展望
定量薄层色谱法的现状与展望定量薄层色谱法是一种用于化学分析的分离和定量方法。
它基于物质在固定相和流动相之间的分配行为，通过实验测定分离物质在色谱板上的迁移距离，进而定量分析样品中的组分含量。
薄层色谱法具有操作简便、分离效果好、分析速度快等优点，在化学、药学、环境科学等领域得到了广泛应用。
本文将对其现状与展望进行探讨。
目前，薄层色谱法的应用领域非常广泛。
在药学中，薄层色谱法可以用于药物纯度检验、药物成分分析和药物稳定性研究等。
在环境科学中，薄层色谱法可以用于监测水体、大气和土壤中的污染物。
在食品工业中，薄层色谱法可以用于食品添加剂的快速检测。
此外，薄层色谱法还被广泛应用于天然药物、天然产物和化妆品中药用植物及其制品的质量评价和有效成分的分析等。
薄层色谱法的发展还面临着一些挑战。
首先，色谱板的固定相和色谱条件的选择对分离效果和定量结果具有重要影响。
因此，需要进一步研究和开发新型的固定相和优化的色谱条件。
其次，薄层色谱法的灵敏度和选择性有待提高。
目前，一些新的技术如静电场增强薄层色谱法和质谱联用薄层色谱法已经被提出，可以提高分析灵敏度和选择性。
此外，还可以通过改进染料和显色剂的设计和合成来提高检测的灵敏度和选择性。
最后，薄层色谱法在分析速度和自动化方面仍有改进的空间。
可以利用微流控技术和自动进样等方法来提高分析速度和减少操作的复杂性。
展望未来，随着科学技术的发展，薄层色谱法有望在以下几个方面取得进展。
首先，新型固定相的研究将为分离和定量提供更好的选择。
例如，开发多功能固定相可以同时实现多种成分的分析和富集。
其次，薄层色谱法与质谱联用将在定性和定量分析中发挥更大的作用。
现代色谱技术和质谱技术的结合将为高灵敏度和高选择性的分析提供可能。
此外，结合纳米材料和微流体技术，可以进一步提高薄层色谱法的分析速度和自动化程度。
最后，基于互联网的薄层色谱数据库的建立将为数据共享和分析提供便利。
综上所述，薄层色谱法作为一种常用的定量分析方法，已在多个领域中发挥重要作用。
薄层色谱技术在中药检验中应用的研究进展
0引言薄层色谱法自《中华人民共和国药典》（简称《中国药典》）1985年版后的历版药典均有收载。
《中国药典》2020年版一部收载品种2711个，其中超过50%的品种应用了薄层色谱鉴别方法，薄层色谱分析是各级药品检验机构、药品生产经营部门质检人员检验中药的强制性检验项目［1］。
薄层色谱技术是一种经典的中药分析技术，其受测试样品种类限制很小，适用范围广［2-3］。
多年来，薄层色谱技术在中药上的应用开发研究趋于多元化，尤其在中药成分的鉴别和定量分析方面，涌现出许多高质量的学术研究成果［4-5］。
目前，对薄层色谱技术在中药检验应用方面的研究主要集中在以下3个方面：一是对现有的中药薄层色谱鉴别方法的优化，如改进样品制备方法、优化展开剂和显色剂等；二是建立新的中药成分薄层色谱鉴别方法，例如建立药典中未曾规定的中药薄层色谱系统；三是联合其他技术手段进行更全面的中药检验分析。
本文介绍、分析薄层色谱技术在中药检验方面的应用研究情况，尤其是中药定性鉴别和定量分析方面的研究进展，以期为相关学者提供研究方向和思路。
1薄层色谱在中药快速鉴别中的应用随着色谱技术的发展及检验质量的提高，目前《中国药典》中的绝大部分中药是利用薄层色谱法进行检验的，利用薄层色谱法可对一些强挥发性、无紫外线吸收的药物组分进行定性及定量检测，还可以对中药进行分离和分析鉴定。
薄层色谱技术可用于快速鉴别中药材的产地及真伪，以及鉴别药材中的非法添加。
不同产地的中药材所含的化学成分存在微小差别，可用薄层色谱技术方便地鉴别出不同产地的中药。
巢颖欣等［6］应用薄层色谱技术反映广陈皮药材的鉴别信息，通过分析广陈皮特有的2-甲氨基-苯甲酸甲酯斑点作为快速鉴别广陈皮与其他产地陈皮的有效手段。
薄层色谱除了用于不同产地中药的鉴别，也可用于伪中药的鉴别。
孔娟等［7］发现，在相同的色谱条件下，不同产地何首乌及其伪品的薄层色谱图均有明显差异，可凭此快速、高效地鉴别何首乌的真伪。
薄层色谱的用途
薄层色谱的用途
薄层色谱是一种分离和鉴定药物成分的分析技术，它属于细胞化学分析技术，可以用来分析和鉴定大量几乎所有不同来源的有机物质、无机物质及金属元素。
薄层色谱的原理主要是利用物质经过某物而在空间中分层的原理，以准确快速地分离出药物成分。
薄层色谱的用途十分广泛，可以用于研究新药、比较药物来源、检测药品质量等，还可以用于样品的鉴定和分离。
薄层色谱在药学研究中有重要意义，因为它可以提供准确、可靠、快速的结果，可以帮助研究人员更好地了解药物组成，从而更好地改善药物的质量。
此外，薄层色谱还可以用于鉴定细胞株的细胞类型。
通过分离细胞成份，可以检测细胞株中的蛋白质、核酸和其他有机物质，从而鉴定细胞类型。
薄层色谱还可以用于分离、鉴定和测定有机和无机物质，包括有机挥发性污染物、重金属、抗药性微生物等。
薄层色谱技术可以更细致地检测样品中被测参数，从而为改进环境质量和食品安全提供重要指导。
此外，薄层色谱在纯化和提取所需物质方面也有极大的用途，如从药物中提取药物成分、从植物中提取活性物质等。
总之，薄层色谱在以上各个领域具有重要意义，它可以提供准确、可靠、快速的结果，从而被广泛用于药物研究、细胞株鉴定、环境污染检测、物质纯化和提取等方面的研究。
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薄层色谱在药物成分分离中的应用的研究进展
薄层色谱在医药方面应用的研究进展摘要制备色谱技术在各个领域的迅速发展，使得研究和开发有中国特色的医药和攻克疑难杂症方面尤为重要，薄层色谱作为一种在物质分析和分离方面具有良好效果的制备方法，越来越受到人们的重视。
文章列举了一些国内外近些年有关薄层色谱用于医药成分研究的动态，综述了一些有关薄层色谱的优势和具体的制备方法，希望能对未来研究医药方面的科研工作者提供一些帮助。
关键词薄层色谱、医药1.1前言中国民族传统医药是在千年临床经验基础上总结而来的，有4O多个民族有自己的特色药物，有20多个民族有较完整的医药体系，可谓资源丰富，数量庞大，特色鲜明．从中研究和开发创新药物，是我国减少仿制、增加自主创新、攻克重大疾病的有效途径．目前中国少数民族传统医药开发主要靠提取、分离、纯化及活性追踪技术，虽然这类技术手段在民族药物资源的挖掘和开发中取得了关键性的进展，但是尚不能满足海量的民族医药资源的开发需要，大量宝贵的民族医药资源亟待开发和利用．极有必要采取新思路、新技术、新手段，加快开发速度，弥补常规手段的不足。
[1]现代制备色谱技术以快速、高效、高载样量和自动化为发展方向，融合了传统色谱的经典理论和现代科学技术中的众多创新之处，解决了许多传统色谱未能解决的问题与不足．可用于少数民族传统医药样品的快速制备和分离．1.2薄层色谱法的基本原理色谱法的基本原理是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能的不同，或和其它亲和作用性能的差异，使混合物的溶液流经该种物质，进行反复的吸附或分配等作用，从而将各组份分开。
薄层色谱是一种微量、快速和简便的色谱方法。
由于各种化合物的极性不同，吸附能力不相同，在展开剂上移动，进行不同程度的解析，根据原点至主斑点中心及展开剂前沿的距离，计算比移值（Rf）。
[2]化合物的吸附能力与它们的极性成正比，具有较大极性的化合物吸附较强，因此Rf 值较小。
在给定的条件下（吸附剂、展开剂、板层厚度等），化合物移动的距离和展开剂移动的距离之比是一定的，即Rf值是化合物的物理常数，其大小只与化合物本身的结构有关，因此可以根据Rf值鉴别化合物。
高效薄层色谱法及其应用简介
高效薄层色谱法及其应用简介1薄层色谱技术简介薄层色谱(thin layer chromatography,TLC)是一种快速、简便、高效、经济、应用广泛的色谱分析方法。
薄层色谱的特点是可以同时分离多个样品,分析成本低,对样品预处理要求低,对固定相、展开剂的选择自由度大,适用于含有不易从分离介质脱附或含有悬浮微粒或需要色谱后衍生化处理的样品分析。
TLC广泛地应用于药物、生化、食品和环境分析等方面,在定性鉴定、半定量以及定量分析中发挥着重要作用。
常规的TLC法存在展开时间长、展开剂体积需求大和分离结果差等缺点。
高效薄层色谱法是近年来迅速发展的一种高效、快速、操作简便、结果准确、灵敏度高和重现性好的薄层色谱新技术,已广泛用于各个领域。
1.1常规的薄层色谱方法TLC分离的选择性主要取决于固定相的化学组成及其表面的化学性质。
常规薄层色谱的固定相为未改性的硅胶、氧化铝、硅藻土、纤维素和聚酰胺等,平均颗粒度20μm,点样量1~5μL,展开时间30~200min,检测限1~5ng。
以正相色谱占主导地位,设备简单,所需资金投入少;不足之处是分离所需时间长,有明显的扩散效应。
1.2高效薄层色谱高效薄层色谱(HPTLC)采用更细、更均匀的改性硅胶和纤维素为固定相,对吸附剂进行疏水和亲水改性,可以实现正相和反相薄层色谱分离,提高了色谱的选择性。
C2、C8和C18化学键合硅胶板为常见反相薄层板。
高效板厚平均100~250μm、点样量0. 1~0. 2μL,展距3~6cm,展开时间3~20min,最小检测量0. 1~0. 5μg,较常规TLC可改善分离度,提高灵敏度和重现性,适用于定量测定。
2薄层色谱的在应用化学领域的应用应用化学学科领域非常宽广，涉及石油化工、精细化工、药物分析、环境监测等多方面。
色谱分析技术在这些领域都有着广泛的应用。
当然随着技术的发展，气象色谱和高效液相色谱的应用范围越来越广，已将成为现代化学化工领域一种必不可少的分析方法。
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2014-2015第一学期课程考查论文课程名称：现代分离方法与技术论文标题：薄层色谱的最新应用及进展摘要: 介绍常规薄层色谱和几种高效薄层色谱分析方法,薄层色谱与红外光谱、表面增强拉曼光谱、核磁共振、质谱、电化学等联用检测技术,以及薄层色谱与联用检测技术在医药、生物制品、毒物、环境有害物质、食品及其他领域定性定量分析中的应用,并对其前景进行了展望。
关键词:薄层色谱分析；质谱计；胶束薄层色谱；红外光谱；拉曼光谱；电化学检测；硅胶板；专业班级：学号：姓名：考查时间:2015年1月2日（以下论文正文：标题4号黑体，正文小4号宋体，英文和数字Times New Roman）薄层色谱的最新应用及进展薄层色谱(thin layer chrom atography, TLC)是一种快速、简便、高效、经济、应用广泛的色谱分析方法。
薄层色谱的特点是可以同时分离多个样品, 分析成本低, 对样品预处理要求低, 对固定相、展开剂的选择自由度大 ,适用于含有不易从分离介质脱附或含有悬浮微粒或需要色谱后衍生化处理的样品分析。
TLC广泛地应用于药物、生化、食品和环境分析等方面, 在定性鉴定、半定量以及定量分析中发挥着重要作用。
常规的 TLC法存在展开时间长、展开剂体积需求大和分离结果差等缺点。
高效薄层色谱法是近年来迅速发展的一种高效、快速、操作简便、结果准确、灵敏度高和重现性好的薄层色谱新技术已广泛用于各个领域，下面对薄层色谱方法、薄层色谱检测技术层色谱应用的新进展进行介绍。
1.常规的薄层色谱方法TLC分离的选择性主要取决于固定相的化学组成及其表面的化学性质。
常规薄层色谱的固定相为未改性的硅胶、氧化铝、硅藻土、纤维素和聚酰胺等 , 平均颗粒度 20μ m, 点样量 1 ～ 5μ L,展开时间 30～ 200m in, 检测限 1 ～5ng。
以正相色谱占主导地位,设备简单, 所需资金投入少 ;不足之处是分离所需时间长 ,有明显的扩散效应。
周漩等[ 1]在硅胶 G薄层板上用氯仿 - 乙酸乙酯 -甲醇- 水(体积比 15: 40:22: 10)作展开剂, 测定了人参皂甙的 R f值 ,并计算描述了在正相薄层色谱中人参皂甙结构与保留值之间的关系。
谢丽华等以乙酸乙酯 -无水乙醇- 水 (体积比 4: 1: 0. 6)为展开剂 ,玄参的特征性有效成分哈巴俄苷 (harpagoside)和哈巴苷 (harpagide)为对照品 ,对不同产地玄参药材以及数种易混淆药材进行检测,建立了中药玄参薄层色谱鉴别法 ,方法操作简便、准确、可靠。
1.1高效薄层色谱高效薄层色谱(HPTLC)采用更细、更均匀的改性硅胶和纤维素为固定相 , 对吸附剂进行疏水和亲水改性 ,可以实现正相和反相薄层色谱分离,提高了色谱的选择性。
C2 、C8和 C18化学键合硅胶板为常见反相薄层板。
高效板厚平均 100 ～ 250μ m、点样量 0. 1 ～ 0. 2μ L, 展距 3 ～ 6cm,展开时间 3 ～20m in,最小检测量 0. 1 ～ 0. 5μ g,较常规 TLC可改善分离度 ,提高灵敏度和 34重现性 ,适用于定量测定。
1.2棒状薄层色谱棒状薄层色谱(TLC- F ID)是用石英棒作支持物涂上硅胶, 点样、溶剂展开。
样品在色谱棒上分离后,将棒通过适当的机械传动装置穿过氢火焰离子化检测器火焰中心 ,使化合物燃烧裂解 ,形成离子碎片和自由电子, 再由电极收集并产生与化合物量成正比的电流信号, 从而测出各物质的含量(图 1)。
该方法优点是灵敏度高,操作简便, 薄层棒可反复使用, 通用性好 ,可用于非挥发性、没有可见及紫外吸收、没有荧光以及衍生化困难的有机化合物的定性定量分析, 被广泛地应用于工业、食品、药物及医学等领域。
利用 TLC-FID方法测定了不同来源、不同种类的催化裂化原料油的烃族组成。
将重油样品用甲苯溶解后点在 SIII 型色谱棒上,正庚烷和甲苯分次展开后, 转移到氢火焰上扫描,得到试样中饱和烃、芳烃、胶质以及沥青质的分离薄层色谱图。
1.3加压薄层色谱加压薄层色谱(OPLC)是指在水平的薄层色谱板上施加一弹性气垫。
展开剂不是靠毛细作用力 ,而是靠泵压被强制流动,因此可以采用更细颗粒的吸附剂和更长的色谱板,分离所需时间缩短,扩散效应减小, 分离效果更好。
1.4离心薄层色谱离心薄层色谱(CTLC)又叫旋转薄层色谱, 是一种离心型连续洗脱的环形薄层色谱分离技术 ,主要是在经典的薄层色谱基础上运用离心力促使流动相加速流动。
离心力用于分离, 可以减少破坏,对沸点高、分子量大的化合物有利 ,可用于分离 100mg左右的样品。
使用商品化生产的离心薄层色谱仪 ,仪器结构简单。
尽管其分辨率低于制备型 HPLC, 但操作简便 ,分离时间短, 并且无须将吸附剂刮下即可将产物洗脱下来 ,广泛应用于合成和天然产物的制备分离。
采用离心薄层色谱法提取大豆磷脂酰胆碱 (SPC), 速度快, 溶剂消耗量少, 制备样品量大,成本低。
用硅胶GF254、和CaSO4.H2O,加聚丙烯酸钠水溶液混合均匀,铺制薄层盘,烘干,薄层盘可重复使用5次以上,洗脱液:CHC l 3- CH3OH- H2O。
2.薄层色谱检测方法薄层色谱的定量检测有吸收测定法、荧光测定法和荧光猝灭法。
对在可见及紫外光区有吸收的化合物可用钨灯和氘灯在 200 ～ 800nm范围进行透射和反射吸收法测定。
化合物本身或者经过色谱前和色谱后衍生化生成对紫外有吸收并能放出更长波长的化合物适用荧光法测量,荧光法灵敏度高, 最低可测至 pg 级。
本身无颜色、又无特征紫外吸收或荧光, 并且不易衍生的化合物可采用荧光猝灭法测量, 使用含有荧光剂的薄层板。
薄层色谱扫描仪的常见扫描方式有直线扫描、锯齿扫描、飞点扫描、圆形扫描、倾斜扫描和多通道自动扫描等, 分别采用单波长或双波长的测光形式。
除此之外 ,薄层色谱还可与其他分离分析技术联用, 更有利于化合物的定性鉴别和定量检测。
2.1薄层色谱-傅立叶变换红外光谱联用检测化合物的红外光谱能提供丰富的结构信息 ,是定性的有力手段 ,也可以用于定量。
目前薄层色谱和红外技术联用主要采用原位法、光声光谱检测法(PAS)、自动洗脱物转移法和红外显微镜法[ 11 ] 。
原位法是采用改装DRIFTS附件, 由步进马达驱动TLC板, 对色谱斑点进行红外测量。
由于TLC固定相有强红外吸收 ,分析物吸收带容易发生畸变。
光声光谱法是将TLC板上附着有分析物的固定相依次转移到PAS附件中进行FT IR-PAS分析, 再用差谱方法扣除固定相的吸收,得到分析物光谱图。
同原位一样,固定相的强红外吸收会对分析物光谱产生干扰。
自动洗脱转移法使用TLC-FTIR自动接口。
样品在常规板上展开后,将板旋转90°,用螺丝固定在带有样品杯的金属部件上, 杯中充有KBr或KCl粉末,杯底部的金属丝芯和TLC板接触, 将板置于转移附件里 ,展开的各组分会被转移附件罐里的溶剂推向顶部 ,借助金属丝芯的毛细作用进入杯中。
转移完 ,用干燥空气流吹洗各样品杯表面,使杯中溶剂挥发, 组分沉积在杯顶部的KBr表面上,最后进行红外扫描。
红外显微镜法是用氧化钴作固定相涂在显微镜载片上,样品在氧化钴上展开后直接用红外显微镜测量, 用氧化钴代替硅胶和氧化铝 ,可消除固定相的干扰。
2.2薄层色谱-拉曼光谱联用检测拉曼光谱和红外光谱都属分子振动光谱,前者为散射光谱,后者为吸收光谱,分子偶极矩越大, 红外吸收强度越大;振动时分子极化率改变越大, 拉曼散射越强, 所以通过两种光谱的相互配合、补充,可以更好地解决化合物结构测定问题。
薄层色谱和表面增强拉曼光谱(SERS)联用较多。
表面增强拉曼要求检测的分子必须含有芳环、杂环、氮原子、硝基、氨基、羧酸基以及磷、硫原子, 因为这些基团可通过孤电子对或π电子与表面增强基底相互作用,从而产生拉曼散射增强效应 ,样品用量可低至数微克。
常用表面增强基底为银溶胶 ,通过硝酸银、柠檬酸三钠经氧化-还原反应制备 ,该银胶具有很强的表面增强活性,滴洒在薄层斑点原位 ,水分挥发干后测 FT-SERS谱。
应用 TLC- FT-SERS技术对天然药物钩藤生物碱中一对异构体 (钩藤碱与异钩藤碱 )进行高灵敏度的分离和斑点原位特征拉曼光谱检测 ;并应用 TLC- FT-SERS技术原位斑点获得中草药麻黄中麻黄生物碱衍生物中一对关于手性碳的光学异构体 (去甲基麻黄碱和去甲基伪麻黄碱 )的指纹光谱,原位样品仅需 16μg 。
便携式薄层色谱━拉曼光谱联用仪2.3薄层色谱-质谱联用相比其他联用技术,质谱是一种灵敏度高、选择性好、可提供丰富的组成和结构信息、能够进行有效定性的现代分析手段。
薄层色谱与质谱的联用,实现了优势互补, 更利于复杂样品的定性。
由于分离后的薄层色谱体系包括过量吸附剂、粘和剂、荧光指示剂,残余溶剂和盐等,每一个斑点都很难达到完全纯净 ,因而对质谱的接口提出了更高的要求。
目前常见的接口技术有以下几种 :①提纯直接引入法。
提纯直接引入法是实现 TLC- MS联用的最简单方法, 也是广泛采用的方法。
在这种方法中, TLC和MS的联用是离线的, 薄层色谱仅作为一种分离提纯方式。
样品经薄层色谱分离后 ,斑点从板上转移,用适当的溶剂洗脱,蒸去溶剂后精制得纯品, 再将纯品注入质谱计进行分析。
②热蒸发法。
该方法适用于易挥发、热稳定、分子量小的样品 ,样品分子受热蒸发,从而直接同吸附剂分离。
③特殊洗脱技术。
特殊洗脱技术包括许多设计巧妙的仪器装置和方法, 使溶剂能有效将样品洗脱并迅速转移至质谱计, 连续性好。
④毛细管技术。
毛细管可以广泛用于TLC- MS接口上。
利用高温高压迫使溶剂从薄层板转移至坯中渗滤,从而使样品快速流过毛细管,直接进入快原子轰击电离 (FAB)室或其他电离室, 这与加压薄层色谱原理相似 ,但不需要泵,设备小巧易制, 连续性好。
其次,实现 TLC与 MS联用, 还要考虑质谱中样品分子的电离方法。
传统的电子轰击源 (EI)和化学电离源 (CI)均可应用于 TLC- MS。
还有一些新的分子离子化方法 ,如快原子轰击 (FAB)、二次离子质谱 (SIMS)和基质辅助激光解吸 (MALD)等。
这些新的离子源的使用, 使 TLC- MS在化合物定性方面更加快速、准确、灵活 ,大大扩展了薄层色谱的应用。
除此之外,还发展有 TLC- MS- MS技术。
串联质谱可提供比单一质谱更详细的信息 ,且不受背景离子的干扰,不受共色谱体系污染。
将串联质谱同薄层色谱联用 ,同TLC- MS联用一样 ,可采用“手动方式或”“仪器方式”连接。
此技术广泛应用于合成化合物和天然产物。
采用dart质谱鉴定中草药薄层色谱中标记化合物2.4薄层色谱-电化学方法联用用薄层色谱分离出肉豆蔻科植物色素抗氧化剂 ,并用循环伏安法研究了它们的氧化还原性质。