溶出度的方法学验证
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桨法——片剂，以50转/分为主 转篮法——胶囊剂，以100转/分为主。 一般认为桨法50转/分相当于转篮法100转/分
5.溶出度测定方法的验证
例：ABC溶出度的方法学验证
溶出度测定 取本品6粒，采用2010版药典附录ⅩC第二法。以0.1M 盐酸溶液500ml
为溶出介质，转速为每分钟50转，依法操作，经30分钟时，取溶液 10ml，0.22μmPES滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。照紫外分光 光度法，必要时对溶液稀释，以溶出介质为参比，在286nm测定吸收 度。以0.002%w/v的ABC标准液的吸光度作对照，计算每粒的溶出量。
• 溶出介质第一次配制时，要测定pH值，与标准值的差值应 不超过0.1。溶出介质使用前要加热或超声脱气。
• 测定溶出曲线时取样点不宜过多，通常为5～6个点，例如： 5、10、15、30、45、60分钟；小规格的制剂因采用100～ 250 ml溶出介质，所以溶出曲线一般可选3～4个时间点。
4.溶出方法（转篮法与桨法）及其转速 的选择
0.1M HCl溶液
取处方量的空白辅料适量（29.59mg），置100ml量 瓶中，用0.1M HCl溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过， 取续滤液。
取6粒胶囊，尽可能除尽内容物，置同一溶出杯中， 按溶出度项下方法溶出，经30分钟时取样10ml，用 0.22μmPES滤膜过滤，取续滤液。
对照品溶液
称取ABC标准物质约10mg，精密称定，置10ml量瓶 中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，取1ml至50ml 量瓶中，用0.1M HCl溶解并稀释至刻度，摇匀
溶出度的方法学 验证
1.方法学验证
定义：方法验证就是根据检测项目的要求，预先设置一定的验证内容， 并通过设计合理的试验来验证所采用的分析方法能否符合检测项目的 要求。
• 方法验证的目的是判断采用的分析方法是否科学、 合理，是否能有效控制药品的内在质量。
• 方法验证在分析方法建立过程中具有重要的作用， 并成为质量研究和质量控制的组成部分
pH值
3.8
4.0
4.5
5.5
5.8
醋酸钠取样量 (g)
0.67
1.22
2.99
5.98
6.23
2mol/L醋酸溶 液取样量(ml)
22.6
20.5
14.0
3.0
2.1
3．磷酸盐缓冲液
0.2mol/L磷酸二氢钾溶液：取27.22g磷酸二氢钾，用水溶解并 稀释至1000ml。
0.2mol/L氢氧化钠溶液：取8.00g氢氧化钠，用水溶解并稀释至 1000ml。
6.0 28.0 7.4 195.5
6.2 40.5 7.6 212.0
6.4 58.0 7.8 222.5
6.6 82.0 8.0 230.5
• 3.4 注释
• 溶出曲线一般要考察至少3种介质，对于仿制药，在标准 介质中的溶出曲线必做，如果标准介质与上述常用介质不 一致，与标准介质最接近的介质不再做。
• 含量测定回收率一般选用测试浓度的80～120 ％，高、中、低浓度规定为80%、100%、120%； 对于溶出度范围则规定为限度的20%，高、中、 低三浓度设为：50%、限度规定、100%。
• 干扰试验：
测定干扰性试验在 2%以下可忽略不计，
高，
2-5%之间可适当将限度提
超过5%则测定方法不可取，
供试品溶液
取本品1粒，照溶出度测定法（中国药典2010年版二 部 附录Ⅹ C 第二法），以0.1M HCl 500ml为溶出介 质，转速为每分钟50转，依法操作，经30分钟时，取
• 分别取上述溶液适量，做紫外检测，记录紫外吸收值，结果如下：
专属性-阴性对照试验
浓度
吸光 平均标示吸 干扰量
（mg/ml) 度 光度
(%)
对照品溶 0.020 0.565 0.555
0.54
液-1
对照品溶 0.020 0.555
液-2
专属性-空胶囊壳干扰试验
辅料胶囊 胶囊 胶囊0.00胶3 囊 胶囊
壳-1 壳-2 壳-3 壳-4 壳-5
胶囊 壳-6
校正 值 (%)
A 0.010 0.009 0.008 0.008 0.008 0.010 1.5
• 只有经过验证的分析方法才能用于控制药品质量， 因此方法验证是制订质量标准的基础。方法验证 是药物研究过程中的重要内容。
为什么要进 行方法学验
证？
2.溶出度方法验证具体内容
溶出度方法验证与含量测定基本相同：
专属性
线性
回收率
溶液 稳定性
精密度 耐用性
值得注意：
• 在方法学验证中，试验所用的溶媒应为溶出介质，即应考查辅料、胶 囊壳在溶出介质中的干扰，药物在溶出介质中的线性、回收率及稳定 性等。
1 专属性
专属性试验的目的是考察辅料和胶囊壳对溶出度测定有 没有干扰。
空白 溶液
供试品 溶液
对照 品 溶液
HPLC法判断标准：空白溶液在主成分的位置不出峰； 供试品溶液色谱峰的理论板数、拖尾因子要符合要求；对 照品溶液和供试品溶液的峰面积相差不超过10% 。
UV法：
溶出度-待测溶液的制备
空白溶剂 阴性对照 空胶囊壳
取250ml 0.2mol/L磷酸二氢钾溶液与下表中规定量的0.2mol/L 氢氧化钠溶液混合后，再加水稀释至1000ml，摇匀，即得。
pH值
4.5
0.2mol/L氢 氧化钠溶液
（ml）
pH值
0.2mol/L氢 氧化钠溶液
（ml）
0 6.8 112.0
5.5
5.8
9.0 18.0
7.0
7ห้องสมุดไป่ตู้2
145.5 173.5
如果是空胶囊产生的应进行胶囊的消除试验 （不大于标示量2%可忽略不计，大于标示量
25%，试验无效）。
空胶囊测定：UV HPLC
3.溶出介质选择
pH值 1.02.2 3.8 、4.0 4.55.8 6.88.0
溶出介质 盐酸溶液 醋酸盐缓冲液 醋酸盐或磷酸盐缓冲液 磷酸盐缓冲液
1．盐酸溶液
取下表中规定量的盐酸，加水稀释至1000ml，摇匀， 即得。
pH值 1.0 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 1.7 1.8 1.9 2.0 2.1 2.2
盐酸 (ml)
9.00
7.65
6.05
4.79
3.73
2.92
2.34
1.84
1.46
1.17
0.92
0.70
2．醋酸盐缓冲液
2mol/L醋酸溶液：取120.0g（114ml）冰醋酸用水稀释至 取下表中规定物质的取样量，加水溶解并稀释至1000ml，
5.溶出度测定方法的验证
例：ABC溶出度的方法学验证
溶出度测定 取本品6粒，采用2010版药典附录ⅩC第二法。以0.1M 盐酸溶液500ml
为溶出介质，转速为每分钟50转，依法操作，经30分钟时，取溶液 10ml，0.22μmPES滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。照紫外分光 光度法，必要时对溶液稀释，以溶出介质为参比，在286nm测定吸收 度。以0.002%w/v的ABC标准液的吸光度作对照，计算每粒的溶出量。
• 溶出介质第一次配制时，要测定pH值，与标准值的差值应 不超过0.1。溶出介质使用前要加热或超声脱气。
• 测定溶出曲线时取样点不宜过多，通常为5～6个点，例如： 5、10、15、30、45、60分钟；小规格的制剂因采用100～ 250 ml溶出介质，所以溶出曲线一般可选3～4个时间点。
4.溶出方法（转篮法与桨法）及其转速 的选择
0.1M HCl溶液
取处方量的空白辅料适量（29.59mg），置100ml量 瓶中，用0.1M HCl溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过， 取续滤液。
取6粒胶囊，尽可能除尽内容物，置同一溶出杯中， 按溶出度项下方法溶出，经30分钟时取样10ml，用 0.22μmPES滤膜过滤，取续滤液。
对照品溶液
称取ABC标准物质约10mg，精密称定，置10ml量瓶 中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，取1ml至50ml 量瓶中，用0.1M HCl溶解并稀释至刻度，摇匀
溶出度的方法学 验证
1.方法学验证
定义：方法验证就是根据检测项目的要求，预先设置一定的验证内容， 并通过设计合理的试验来验证所采用的分析方法能否符合检测项目的 要求。
• 方法验证的目的是判断采用的分析方法是否科学、 合理，是否能有效控制药品的内在质量。
• 方法验证在分析方法建立过程中具有重要的作用， 并成为质量研究和质量控制的组成部分
pH值
3.8
4.0
4.5
5.5
5.8
醋酸钠取样量 (g)
0.67
1.22
2.99
5.98
6.23
2mol/L醋酸溶 液取样量(ml)
22.6
20.5
14.0
3.0
2.1
3．磷酸盐缓冲液
0.2mol/L磷酸二氢钾溶液：取27.22g磷酸二氢钾，用水溶解并 稀释至1000ml。
0.2mol/L氢氧化钠溶液：取8.00g氢氧化钠，用水溶解并稀释至 1000ml。
6.0 28.0 7.4 195.5
6.2 40.5 7.6 212.0
6.4 58.0 7.8 222.5
6.6 82.0 8.0 230.5
• 3.4 注释
• 溶出曲线一般要考察至少3种介质，对于仿制药，在标准 介质中的溶出曲线必做，如果标准介质与上述常用介质不 一致，与标准介质最接近的介质不再做。
• 含量测定回收率一般选用测试浓度的80～120 ％，高、中、低浓度规定为80%、100%、120%； 对于溶出度范围则规定为限度的20%，高、中、 低三浓度设为：50%、限度规定、100%。
• 干扰试验：
测定干扰性试验在 2%以下可忽略不计，
高，
2-5%之间可适当将限度提
超过5%则测定方法不可取，
供试品溶液
取本品1粒，照溶出度测定法（中国药典2010年版二 部 附录Ⅹ C 第二法），以0.1M HCl 500ml为溶出介 质，转速为每分钟50转，依法操作，经30分钟时，取
• 分别取上述溶液适量，做紫外检测，记录紫外吸收值，结果如下：
专属性-阴性对照试验
浓度
吸光 平均标示吸 干扰量
（mg/ml) 度 光度
(%)
对照品溶 0.020 0.565 0.555
0.54
液-1
对照品溶 0.020 0.555
液-2
专属性-空胶囊壳干扰试验
辅料胶囊 胶囊 胶囊0.00胶3 囊 胶囊
壳-1 壳-2 壳-3 壳-4 壳-5
胶囊 壳-6
校正 值 (%)
A 0.010 0.009 0.008 0.008 0.008 0.010 1.5
• 只有经过验证的分析方法才能用于控制药品质量， 因此方法验证是制订质量标准的基础。方法验证 是药物研究过程中的重要内容。
为什么要进 行方法学验
证？
2.溶出度方法验证具体内容
溶出度方法验证与含量测定基本相同：
专属性
线性
回收率
溶液 稳定性
精密度 耐用性
值得注意：
• 在方法学验证中，试验所用的溶媒应为溶出介质，即应考查辅料、胶 囊壳在溶出介质中的干扰，药物在溶出介质中的线性、回收率及稳定 性等。
1 专属性
专属性试验的目的是考察辅料和胶囊壳对溶出度测定有 没有干扰。
空白 溶液
供试品 溶液
对照 品 溶液
HPLC法判断标准：空白溶液在主成分的位置不出峰； 供试品溶液色谱峰的理论板数、拖尾因子要符合要求；对 照品溶液和供试品溶液的峰面积相差不超过10% 。
UV法：
溶出度-待测溶液的制备
空白溶剂 阴性对照 空胶囊壳
取250ml 0.2mol/L磷酸二氢钾溶液与下表中规定量的0.2mol/L 氢氧化钠溶液混合后，再加水稀释至1000ml，摇匀，即得。
pH值
4.5
0.2mol/L氢 氧化钠溶液
（ml）
pH值
0.2mol/L氢 氧化钠溶液
（ml）
0 6.8 112.0
5.5
5.8
9.0 18.0
7.0
7ห้องสมุดไป่ตู้2
145.5 173.5
如果是空胶囊产生的应进行胶囊的消除试验 （不大于标示量2%可忽略不计，大于标示量
25%，试验无效）。
空胶囊测定：UV HPLC
3.溶出介质选择
pH值 1.02.2 3.8 、4.0 4.55.8 6.88.0
溶出介质 盐酸溶液 醋酸盐缓冲液 醋酸盐或磷酸盐缓冲液 磷酸盐缓冲液
1．盐酸溶液
取下表中规定量的盐酸，加水稀释至1000ml，摇匀， 即得。
pH值 1.0 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 1.7 1.8 1.9 2.0 2.1 2.2
盐酸 (ml)
9.00
7.65
6.05
4.79
3.73
2.92
2.34
1.84
1.46
1.17
0.92
0.70
2．醋酸盐缓冲液
2mol/L醋酸溶液：取120.0g（114ml）冰醋酸用水稀释至 取下表中规定物质的取样量，加水溶解并稀释至1000ml，