植物生理学研究法
植物生理学实验测试

植物生理学实验测试植物生理学是研究植物生长和发育等生理过程的科学学科,通过实验测试可以揭示植物对外界环境因素的响应和适应机制。
本文将介绍几种常见的植物生理学实验测试方法,包括植物生长实验、叶绿素测定实验和逆境胁迫实验等。
一、植物生长实验植物生长实验是研究植物对不同环境条件下的生长反应的一种常见方法。
可以通过改变光照、温度、水分等环境因素来观察植物生长的变化。
在实验中,选取相同种子并进行处理,如将一组种子暴露在高温环境下,另一组放置在低温环境中,然后记录植物的生长情况,并进行数据统计和分析。
通过这种实验方法可以了解植物对温度的适应性以及不同温度对植物生长的影响。
二、叶绿素测定实验叶绿素是植物中起着关键作用的色素,其含量可以反映植物光合作用的强弱。
叶绿素测定实验可以通过测量植物叶片中叶绿素的含量来评估光合作用的效率。
实验中,首先需要采集新鲜叶片样品,并将其研磨得到绿色叶汁,然后通过光度计等仪器测定叶绿素的吸光度值,并根据标准曲线计算叶绿素的含量。
通过叶绿素测定实验可以评估植物对不同环境因素(如光照强度、养分浓度)的响应和适应能力。
三、逆境胁迫实验逆境胁迫实验是模拟植物在环境恶劣条件下的生理反应,如盐胁迫、干旱胁迫、冷热胁迫等。
通过逆境胁迫实验,可以研究植物在逆境条件下的生理适应和耐受机制。
实验中,可以使用不同浓度的盐水浇灌植物或让植物在干旱条件下生长,然后观察植物的生长情况、生理指标的变化,并与正常生长的植物进行比较分析。
逆境胁迫实验可以揭示植物对逆境的敏感性和胁迫响应机制,为育种和改良耐逆植物品种提供理论依据。
总结:植物生理学实验测试是研究植物生理过程的重要手段,通过不同的实验方法可以揭示植物对环境因素的响应和适应机制。
植物生长实验、叶绿素测定实验和逆境胁迫实验是常见的植物生理学实验方法,分别用于研究植物生长、光合作用和逆境胁迫的情况。
通过这些实验测试的结果,可以进一步了解植物的适应性和耐受能力,为培育适应不同环境的优良植物品种提供理论基础。
植物生理学与生物化学研究方法

植物生理学与生物化学研究方法植物生理学和生物化学是对植物生命过程进行深入研究的两个重要学科。
植物生理学研究植物在生长发育、代谢过程以及环境适应等方面的生理机制,而生物化学则着重于研究植物细胞和分子水平上的化学成分和反应。
本文将重点介绍植物生理学和生物化学研究中常用的方法和技术。
一、植物生理学研究方法1.生长分析法生长分析法是研究植物在时间和空间上的生长变化的一种重要方法。
它可通过测量植物的高度、叶面积、根系长度等参数,定量分析植物各组织器官的生长速率,并研究生长速率与外界环境因素的关系。
2.生理生化测定法生理生化测定法是研究植物代谢水平和功能活性的重要手段。
例如,酶活性测定可用于研究植物代谢过程中的关键酶活性变化;叶绿素含量测定可反映叶片光合能力水平;光谱测定可用于分析植物组织中的各种生物分子的含量和结构等。
3.生物学指标法生物学指标法是以某一生理生化指标作为植物对环境适应能力的评价指标。
例如,水分利用效率可通过测定植物封闭室内的水分蒸腾量和生物产量来评价植物对水分利用的效率;抗寒力可通过测定植物在低温下的生存能力和生长状态来评价植物的寒冷适应性等。
二、生物化学研究方法1.色谱分析法色谱分析法是生物化学领域中广泛应用的分离和定量分析方法。
其中,气相色谱法可用于分析植物挥发性成分和气体代谢产物;液相色谱法可用于分析植物中的有机酸、氨基酸、生物碱等物质。
2.质谱分析法质谱分析法是一种高灵敏度、高分辨率的分析技术,可用于鉴定植物中微量物质的种类和结构。
常用的质谱技术包括质谱-质谱联用技术(MS-MS)、电喷雾质谱技术(ESI-MS)、气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)等。
3.荧光显微镜技术荧光显微镜技术是一种通过利用植物中的特定荧光探针来标记和可视化特定分子或结构的技术。
例如,利用叶绿素的自然荧光和活性氧荧光染料,可以观察植物光合作用过程中的能量传递和损伤情况。
总结:综上所述,植物生理学与生物化学研究方法多种多样,每一种方法都有其适用范围和特点。
植物生理学研究及其在农业生产中的应用

植物生理学研究及其在农业生产中的应用植物生理学是植物科学中的分支之一,它主要研究植物的生理功能及其调控机制。
在农业生产中,植物生理学的研究对于提高农作物的产量和质量,缓解食品短缺问题,保障粮食安全具有重要意义。
本文将从植物生理学研究的对象、方法和应用三个方面进行探讨。
一、植物生理学研究的对象植物生理学的研究对象主要是植物的生长发育、代谢、营养吸收和转运、逆境响应等方面。
其中,植物生长发育是研究的重点之一,包括种子萌发、幼苗生长、植株形态发育等。
植物的营养吸收和转运也是研究的重要内容,它关系到植物体内营养的代谢和分配。
同时,在自然环境和人类活动的干扰下,植物往往面临不同的逆境和压力,例如盐碱、缺水、寒冷等,因此,逆境响应也成为了植物生理学研究的热点领域。
二、植物生理学研究的方法植物生理学的研究方法包括野外观察、实验研究、分子生物学等多种手段。
野外观察是植物生理学研究的最早手段之一,通过对植物生长发育及逆境响应的实际情况进行观察和比对,可以初步了解植物的形态和功能特征。
实验研究则更加深入和有针对性,可以采用不同的实验条件和处理方法对植物进行干扰、观察和分析,以此推断植物的生理机制。
近年来,分子生物学成为植物生理学研究的新兴手段。
通过基因、蛋白质等分子水平的分析,可以深入探讨植物的基因表达调控、代谢途径、信号传递等机制,进一步揭示植物生理学的本质。
三、植物生理学在农业生产中的应用植物生理学的研究结果可以为农业生产提供丰富的应用价值。
其中,对种子萌发和幼苗生长的研究可以为育种选择提供指导意义。
例如,在作物的自然屏障中存在一些突变基因,这些基因可能会耗费幼苗生长所需的能量和营养,限制植株生长和发育。
因此,通过选育不含这些突变基因的新品种,可以提高作物的生长速度和产量。
营养吸收和转运方面的研究则有利于制定适宜的肥料配方和施肥措施,使植株能够更好地吸收和利用养分。
例如,钾元素在农业生产中有重要的作用,但是直接施用钾肥存在高成本和土壤污染等问题。
现代植物生理学实验指南

现代植物生理学实验指南植物生理学是一门重要的生物学科,研究植物在生长、发育、代谢和适应环境等方面的生理过程。
为了深入理解植物生理学,我们需要进行各种实验研究,这里为大家提供一份现代植物生理学实验指南,帮助大家系统了解植物生理学实验的基本方法和技巧。
实验一:光合作用实验光合作用是植物体内最重要的生理过程之一,我们可以通过测量植物的氧气释放量和二氧化碳吸收量来评估光合作用效率。
实验步骤如下:1. 将一片绿叶片放入水中,并用环状金属片夹住叶片。
2. 将装有水的容器倒置在金属片上,并使叶片完全浸入水中。
3. 在光亮条件下放置数小时,测量水中溶氧量的变化,记录并计算光合速率。
4. 重复操作若干次,得出稳定的结果。
实验二:水分利用实验水是植物生命的重要组成部分,其缺乏或过多都会对植物生长产生影响。
我们可以通过测量植物根系吸水能力和细胞渗透压来评估植物对水分的利用效率。
实验步骤如下:1. 准备两盆一模一样的植物,其中一盆为对照组,另一盆加盐水。
2. 分别测量两盆植物的根系吸水量和细胞渗透压,记录数据。
3. 将两盆植物进行比较,得出对盐水处理的植物的适应能力。
实验三:激素生理实验植物激素在影响植物生长、发育和适应环境方面发挥了重要作用,我们可以通过测量植物生长的速率和荷尔蒙水平来评估激素的作用。
实验步骤如下:1. 选择一些与生长相关的植物,如小麦或豌豆等。
2. 分别在一组处理中加入不同浓度的激素,另一组作为对照组。
3. 坚持一段时间,测量植物的生长速率和荷尔蒙水平,比较两组的差异。
以上是三个常见的植物生理学实验,希望这份实验指南能对学习植物生理学的同学们有所帮助。
在实验过程中,需要注意实验条件的一致性和数据的准确性,以确保实验的正确性和可靠性。
植物生理学中的水分利用效率研究

植物生理学中的水分利用效率研究水分是植物生长发育必不可少的资源,但水分资源的稀缺性和不平均分布性导致水分是植物生产中的关键环节。
水分利用效率指的是植物通过光合作用形成单位干物质量的蒸腾水量,是反映植物水分利用效率水平的重要指标,对世界各地的农业生产和自然生态系统的正常运转均具有重要意义。
本文将从水分利用效率的定义、影响因素、研究方法和应用前景等方面展开讨论。
一、水分利用效率的定义水分利用效率(Water Use Efficiency,WUE)是指植物通过光合作用形成单位干物质量的蒸腾水量,即干物质与蒸腾量的比值,常用单位是μmol CO2 mmolH2O-1, WUE通常被认为是植物的水分利用效率。
从植株角度来看,WUE越高代表着单位蒸腾量产生更多的干物质,相应的生长速度也会增加。
在一定程度上,这也意味着植物需要摄取的水分量相对较少,能适应较干旱的环境。
二、影响因素植物的水分利用效率受到多种影响因素的调节,主要包括植物的内部水分调控机制和外界环境因素两方面。
对于内部因素,光合物质积累、小气孔密度、细胞膜透性和细胞渗透压调节等均可以影响WUE的水平。
部分植物会借助行星微生物来进行氮素固定,这也能在一定程度上影响植物的WUE表现。
植物内部调节机制和使用程度的种类也是对WUE影响比较大的内部因素。
环境因素对植物的WUE影响更加明显。
例如温度、光照、CO2浓度和土地类型等因素都是直接影响植物WUE的环境因素。
温度的上升会降低气孔开度,减少蒸腾量,从而提高WUE;而随着CO2浓度的升高,植物的WUE水平会有所下降。
三、研究方法WUE的研究方法多种多样,主要包括水分利用效率的测定与模型预测两种主要方法。
水分利用效率的测定主要通过实验室测量法、野外测量法和生态系统模拟等方法来进行。
其中,实验室测量法主要通过对植物的光合同步测量和根吸收量来确定WUE水平;野外测量法则通过在野外利用碳同位素标记技术和适用的计算模型来测定WUE。
植物生理学探索植物对环境和内部因素的响应和适应机制

植物生理学探索植物对环境和内部因素的响应和适应机制植物是地球上最重要的生物之一,它们不仅能够通过光合作用产生能量,还可以感知和适应外界环境的变化。
植物生理学旨在研究植物对环境和内部因素的响应和适应机制。
本文将探讨植物生理学的重要概念和研究方法。
一、植物对环境的响应植物生长在各种不同的环境条件下,包括光照、温度、水分和土壤等。
植物通过一系列的生理和形态变化来响应这些环境条件。
1. 光照响应光照是植物生长和发育的重要因素之一。
植物利用叶绿素和其他光合色素来吸收光能,并将其转化为化学能。
植物对光照的响应包括种子萌发、光合作用速率和植物形态结构的调整等。
2. 温度响应温度对植物的生理过程和生长发育具有重要影响。
植物对温度的响应主要表现在种子萌发和幼苗生长、酶活性及代谢速率等方面。
不同的植物对温度的适应能力也有所差异。
3. 水分响应水分是植物生长和发育的必需物质,植物通过吸收和运输水分来维持正常生理功能及组织的稳定。
植物对水分的响应包括开花、开放气孔、调节根系和叶片的水分吸收等。
4. 土壤响应土壤是植物根系的生存环境,土壤中的养分含量、pH值和微生物等对植物生长具有重要影响。
植物通过改变根系形态和分泌物质等途径来适应不同的土壤环境。
二、植物的内部因素调控除了外界环境的影响,植物的内部因素也对其响应和适应能力起到重要调控作用。
1. 激素调控植物激素是植物内部产生的一类化学物质,它们能够调控植物的各种生长和发育过程。
例如,植物的生长素能够促进植物的伸长和分化,而脱落酸则抑制植物的生长。
2. 基因调控植物基因组中的多个基因参与了植物对环境的响应和适应。
不同基因的表达调控使得植物能够在环境变化时产生不同的生理反应。
例如,一些基因的表达与植物的光照和温度适应能力相关。
3. 代谢调控植物代谢过程的调控也对植物的响应和适应具有重要作用。
代谢途径中的酶活性和底物浓度等会受到环境和内部因素的影响,从而调节植物的生理状态。
三、研究植物生理学的方法为了深入了解植物对环境和内部因素的响应和适应机制,植物生理学采用了一系列的研究方法。
现代植物生理学
现代植物生理学
现代植物生理学是研究植物生长、发育、代谢和适应环境的科学。
它涉及到植物的生理过程、分子机制和生态学特征。
现代植物生理学的研究方法包括生物化学、分子生物学、遗传学、生态学和生物物理学等多个学科的交叉应用。
植物生长和发育是植物生理学的重要研究方向。
植物生长和发育受到内部和外部环境的影响。
内部环境包括植物激素、基因表达和代谢等因素,外部环境包括光照、温度、水分和营养等因素。
现代植物生理学研究了植物生长和发育的分子机制和调控机制,为植物育种和生产提供了理论基础。
植物代谢是植物生理学的另一个重要研究方向。
植物代谢包括光合作用、呼吸作用、物质转运和信号传导等过程。
现代植物生理学研究了植物代谢的分子机制和调控机制,为植物生产和生态环境保护提供了理论基础。
植物适应环境是植物生理学的另一个重要研究方向。
植物适应环境包括植物对光照、温度、水分和营养等因素的适应。
现代植物生理学研究了植物适应环境的分子机制和调控机制,为植物育种和生产提供了理论基础。
现代植物生理学是一个综合性的学科,它研究了植物的生长、发育、代谢和适应环境等方面。
现代植物生理学的研究成果为植物育种和
生产提供了理论基础,也为生态环境保护提供了理论支持。
植物学实践课题研究报告(2篇)
第1篇一、课题背景植物学是研究植物形态、结构、生理、分类、遗传、进化以及与人类生活关系的一门科学。
随着生物科学技术的不断发展,植物学的研究领域也在不断扩大。
为了提高学生对植物学知识的理解和应用能力,我们选择了“植物组织培养技术”作为实践课题,旨在让学生通过实际操作,掌握植物组织培养的基本原理和操作技能。
二、研究目的1. 熟悉植物组织培养的基本原理和操作流程。
2. 掌握植物组织培养技术在不同植物中的应用。
3. 培养学生的实验操作技能和科学思维能力。
4. 提高学生对植物学知识的综合运用能力。
三、研究方法1. 文献查阅:通过查阅相关文献,了解植物组织培养技术的发展历程、原理和操作技术。
2. 实验操作:在实验室条件下,进行植物组织培养实验,包括外植体选择、消毒、接种、培养等环节。
3. 数据分析:对实验结果进行统计分析,探讨不同植物组织培养条件的最佳参数。
四、实验材料与设备1. 实验材料:水稻、小麦、番茄等植物的外植体。
2. 实验设备:超净工作台、高压蒸汽灭菌器、恒温培养箱、移液器、剪刀、镊子等。
五、实验步骤1. 外植体选择:选取生长健壮、无病虫害的植物叶片或茎段作为外植体。
2. 外植体消毒:将外植体用70%乙醇消毒30秒,然后用无菌水冲洗3次,再用无菌滤纸吸干水分。
3. 接种:将消毒后的外植体接种到含有不同植物生长调节剂的培养基上。
4. 培养:将接种后的培养基放入恒温培养箱中,保持适宜的温度和光照条件。
5. 观察与记录:定期观察外植体的生长情况,记录实验数据。
六、实验结果与分析1. 外植体生长情况:经过一段时间的培养,大部分外植体均能生长出愈伤组织或芽苗。
2. 不同植物生长调节剂的影响:实验结果表明,不同植物生长调节剂对植物组织培养的影响不同。
例如,NAA对水稻愈伤组织的诱导效果较好,而6-BA对番茄芽苗的诱导效果较好。
3. 最佳培养条件:通过实验数据分析,确定了不同植物的最佳培养条件。
例如,水稻愈伤组织的最佳培养基为MS+2mg/L NAA+0.5mg/L 6-BA,番茄芽苗的最佳培养基为MS+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA。
植物生理学的重要实验技术
植物生理学的重要实验技术植物生理学是研究植物内部各种生理过程的科学,通过实验技术的应用,可以深入研究植物的生理特性和调控机制。
本文将介绍几种重要的植物生理学实验技术,包括光合作用测定、光周期实验、蒸腾作用研究和植物生长素的测定。
一、光合作用测定光合作用是植物通过光能将二氧化碳和水转化为有机物质和氧气的过程。
光合作用的测定可以通过净光合速率的测定来进行。
测定方法可以使用荧光法或者气体交流法。
荧光法是通过测定叶片上的荧光信号的强度来计算净光合速率,而气体交流法是通过测定进出叶气体的浓度变化来计算净光合速率。
这些方法需要使用一些仪器设备,如荧光测定仪或气体交流测定系统。
二、光周期实验光周期是植物在一定时间内接受光照和黑暗的周期性变化。
光周期实验主要用于研究植物的花期控制、休眠期控制等生理过程。
常用的方法是通过控制植物所接受的光照时间和黑暗时间的比例来模拟不同的光周期条件。
可以使用光周期系列灯来实现对光周期的控制。
在实验过程中,可以观察植株的生长状况、花期的调控以及激素含量的变化等指标。
三、蒸腾作用研究蒸腾作用是植物体内水分的散失过程,是植物体内水分运输和植物生长发育的关键过程之一。
蒸腾作用研究常用的技术是测定植物叶片表面的水蒸气压,并结合气孔开闭情况来研究蒸腾作用的影响因素。
测定水蒸气压时通常使用水分压差传感器或者电子秤等设备,观察气孔开闭可以通过显微镜或者扫描电子显微镜等工具进行。
四、植物生长素的测定植物生长素是一类植物内源激素,调控着植物体内的生长和发育过程。
研究植物生长素的测定可以使用生物测定法、免疫测定法和色谱法等。
生物测定法使用生物体来测定生长素的活性,如使用阿片酸促进小麦胚芽的生长来测定生长素含量。
免疫测定法则是利用抗体和抗原之间的特异性结合来测定生长素含量。
色谱法是利用气相色谱或者液相色谱来分离和测定植物生长素的含量,通常需要先对样品进行提取和纯化。
结论植物生理学的实验技术是理解植物各种生理过程和调控机制的关键。
植物生理学与提高作物产量的研究
植物生理学与提高作物产量的研究植物生理学是研究植物生命活动的一门学科,它是植物学和生理学的交叉学科,涉及植物的生长、发育、代谢、适应及对环境因素的响应等方面。
通过对植物生理学的研究,可以开发出更有效的作物生产技术,提高作物产量。
一、植物生理学的研究对象生长调节物质是植物生理学研究的重要内容之一。
生长调节物质包括植物激素、植物生长素、赤霉素、细胞分裂素、脱落酸等。
生长调节物质的研究可以帮助我们更好地了解植物的生长发育规律,为应用提供依据。
植物对环境因素的响应也是植物生理学的研究对象。
植物有很强的适应能力,能够通过各种方式应对环境的变化。
例如,植物可以在干旱条件下通过减少蒸腾来调节水分,或者在低温条件下通过调节内部物质的含量来适应环境。
对植物对环境因素的响应进行研究,可以帮助我们更好地利用环境条件,提高作物产量。
二、植物生理学在作物生产中的应用1.植物生长调节物质的应用生长调节物质是控制植物生长发育的重要因素。
农业生产中,生长调节物质的应用可以促进根系、茎秆和叶片的生长发育,提高作物的产量和品质。
例如,利用生长素可以促进植物组织细胞的分裂和延伸,提高作物的产量。
另外,生长调节物质还可以控制植物的开花和结果,如利用脱落酸可以延迟植物的开花时间,促进花器官的生长,提高作物产量。
2.环境因素的调控在作物生产中,环境因素的调节对于作物生长发育至关重要。
例如,可以利用浇水、施肥、控制温度等方法来调节植物的生长环境,从而实现提高作物产量的目的。
另外,在环境因素不稳定的情况下,植物的适应性可以通过激素的调节来提高,例如利用赤霉素可以促进植物的生长,提高植物对环境的适应能力。
3.植物育种技术的改良植物育种技术的改良是通过选择和配合有利的生长特征,培育出更加优良的品种。
植物生理学的研究可以帮助人们更好地了解作物的生长发育规律和特征,从而优化培育方案,提高作物的产量和品质。
三、未来趋势植物生理学在未来将继续发挥着重要的作用。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
《植物生理学研究法》(课程实习)论文题目:秋海棠和一串红对水分胁迫下的生理响应目录一、实验设计方案 ---------------------------3二、实验预习报告----------------------------------4实验一植物组织中过氧化氢含量的测定实验二蒽酮法法测定可溶性糖实验三植物细胞膜透性的测定(电导仪法)实验四植物叶片水势测定实验五植物组织游离脯氨酸含量的测定实验六叶绿体色素的定量测定实验七植物组织含水量的测定三、测定数据记录及计算--------------------------12四、课程论文------------------------------------14一、《植物生理学研究法》实验设计方案(10分)3.预习报告实验1 植物组织中过氧化氢含量的测定(一)原理植物在逆境下或衰老时,由于体内活性氧代谢加强而使H2O2发生累积。
H2O2可以直接或间接地氧化细胞内核酸,蛋白质等生物大分子,并使细胞膜遭受损害,从而加速细胞的衰老和解体。
过氧化氢酶可以清除H2O2,是植物体内重要的酶促防御系统之一。
因此,植物组织中H2O2含量和过氧化氢酶活性与植物的抗逆性密切相关。
本实验用分光光度法测定过氧化氢含量。
H2O2与硫酸钛(或氯化钛)生成过氧化物—钛复合物黄色沉淀,可被H2SO4溶解后,在415nm 波长下比色测定。
在一定范围内,其颜色深浅与H2O2浓度呈线性关系。
(二)植物材料:一串红叶片和秋海棠叶片(三)仪器设备研钵;移液管0.2ml×2支,5ml×1支;10mL试管30只;离心机;分光光度计。
(四)试剂配制100μmol/L H2O2丙酮试剂:取30%分析纯H2O257μl,溶于100ml,再稀释100倍;2mol/L硫酸;5%(W/V)硫酸钛;丙酮;浓氨水。
(五)实验步骤及注意事项1.制作标准曲线:取10ml离心管7支,顺序编号,并按表40-1加入试剂。
待沉淀完全溶解后,将其小心转入10ml容量瓶中,并用丙酮少量多次冲洗离心管,将洗涤液合并后定容至10ml刻度,415nm波长下比色。
2.样品提取和测定:(1)秋海棠每个灌水梯度称取0.5g叶片,一串红每个梯度称取0.3g叶片。
按材料与提取剂1∶1的比例加入4℃下预冷的丙酮和少许石英砂研磨成匀浆后,置于冰箱冷藏室中浸提2h,上清液即为样品提取液。
(2)用移液管吸取样品提取液2ml,按表35-1加入0.2mL5%硫酸钛和0.4mL 浓氨水,待沉淀形成后3000rpm/min离心10min,弃去上清液。
沉淀用丙酮反复洗涤3~5次,直到去除植物色素。
(3)向洗涤后的沉淀中加入2mol/L硫酸5ml,待完全溶解后,与标准曲线同样的方法定容并比色。
(六)结果计算公式:植物组织中H2O2含量(μmol/g Fw)=C Vt FW V⨯⨯1式中C—标准曲线上查得样品中H2O2浓度(μmol);V t—样品提取液总体积(ml);V1—测定时用样品提取液体积(ml);FW—植物组织鲜重(g)。
(七)参考文献【1】邹琦.植物生理学实验指导.中国农业出版社,2010-1,(7),166-167实验2 蒽酮法法测定可溶性糖(一)原理糖在浓硫酸作用下,可经脱水反应生成糖醛,生成的糖醛或羟甲基糖醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糖醛衍生物,在一定范围内,颜色的深浅与糖的含量成正比。
糖类与蒽酮反应生成的有色物质,在可见光区的吸收峰为630nm,可在此波长下进行比色,故可用于糖的定量。
(二)植物材料一串红叶片和秋海棠叶片(三)仪器设备分光光度计、电炉、铝锅、20mL刻度试管、刻度吸管、记号笔、吸水纸适量。
(四)试剂配制1、硫酸-蒽酮溶液:24ml去离子水+76ml浓硫酸,冷却后,加入0.1g蒽酮2、浓硫酸(比重1.84)。
3、1%蔗糖标准液:将分析纯蔗糖在80℃下烘至恒重,精确称取1.000g。
加少量水溶解,移入100mL 容量瓶中,加入0.5mL浓硫酸,用蒸馏水定容至刻度。
4、100ug/L蔗糖标准液:精确吸取1%蔗糖标准液1mL加入100mL容量瓶中,加水定容。
(五)实验步骤及注意事项1.标准曲线的制作:取20mL刻度试管6支,从0-5分别编号,按下表加入溶液、水和硫酸-蒽酮,沸水浴10min,冷却后。
然后以空白为参比,在630nm波长下比色测定,以糖含量为横坐标,光密度为纵坐标,绘制标准曲线,求出标准直线方程。
各试管加溶液和水的量2.可溶性糖的提取:取新鲜植物叶片,擦净表面污物,剪碎混匀,称取0.30g秋海棠叶片、0.20g一串红叶片,各3份,分别放入6支刻度试管中,加入5-10mL 蒸馏水,塑料薄膜封口,于沸水中提取30min(提取2次),提取液过滤入20mL试管中,反复冲洗试管及残渣,定容至刻度。
3.直接吸取样液1ml到20ml具刻度试管,同制作标准曲线的步骤,按顺序分别加入4mL蒽酮硫酸溶液,沸水浴10min、显色并测定光密度(630nm)。
由标准线性方程求出糖的量。
(六)结果计算公式:按下面式子计算测试样品中糖含量可溶性糖含量(%)=(C×V/a×n)/(W×106)式中 C---------标准方程求得糖量(ug)a----------吸取样品液体积(ml)V---------提取液量(ml)n-----------稀释倍数W----------组织重量(g)(七)参考文献【1】邹琦.植物生理学实验指导.中国农业出版社,2010-1,(7),110-113.实验3 植物细胞膜透性的测定(电导仪法)(一)原理:植物组织受到逆境伤害时,由于膜的功能受损或结构破坏,而使其透性增大,细胞内各种水溶性物质包括电解质将有不同程度的外渗,将组织浸入无离子水中,水的电导仪将因电解质的外渗而加大,伤害愈重,外渗愈多,电导度的增加也愈大。
故可以用电导仪测定外液的电导度增加值而得知伤害程度。
(二)植物材料:一串红和海棠叶片(三)仪器设备:1. 电导仪1台;2.真空泵(附真空干燥器)1套;3.恒温水浴箱1个;4.30个三角瓶;5.30张封口膜;6.打孔器1把;7.10ml移液管(或定量加液器)2支; 8.镊子1把;以及记号笔、去离子水、滤纸、保鲜膜、玻璃棒、吸球、洗瓶等。
(四)试剂配制:无(五)实验步骤及注意事项1. 容器的洗涤:2. 叶片处理: 将一串红叶和海棠叶片分别用自来水冲洗干净并用去离子水润洗,再用洁净滤纸吸干表面水分。
用 6~8mm 的打孔器避开主脉打取叶圆片(或切割成大小一致的叶块),每个对照组5盆植物共取90个叶圆片,在每个三角瓶中放入30个。
3.测定:在装有叶片的各三角瓶中加入100ml的去离子水,用保鲜膜封口,并用解剖针将保鲜膜扎几孔(以防止叶圆片在抽气时翻出试管)以便抽气。
然后将试管放入真空干燥箱中用真空泵抽气15min,抽出细胞间隙的空气,当缓缓放入空气时,水即渗入细胞间隙,叶片变成半透明状,沉入水下。
将以上三角瓶在室温下保持 30min,其间要多次摇动三角瓶。
4) 30min 后将各试管充分摇匀,用电导仪测其初电导值(S1)。
5) 测毕,将各试管盖塞封口,置沸水浴中 10min,以杀死植物组织。
取出试管后用自来水冷却至室温,并在室温下平衡 10min,摇匀,测其终电导值(S2)。
注意事项:1、所用的叶片叶龄要一致。
2、整个过程中,叶片接触的用具必须绝对洁净,也不要用手接触叶片,以免污染。
3、抽气要使叶片下沉才能与水分充分进行交换。
4、CO2 在水中的溶解度较高,测定电导时要防止高 CO2气源和口中呼出 CO2进入试管,以免影响结果的准确性。
5、温度对溶液的电导影响很大,故 S1 和 S2 必须在相同温度下测定。
(六)结果计算:初电导值-空白电导率相对电导度(%)=——————————————× 100 终电导值-空白电导率伤害度(%)=(Lt-Lck)/(1-Lck)×100Lt:处理叶片的相对电导度Lck:对照叶片的相对电导度(七)参考文献【1】邹琦.植物生理学实验指导.中国农业出版社,2010-1,(7),159-160.实验四植物组织水势测定(一)原理:植物组织的水分状况可用水势(代表水的级量水平)来表示。
植物组织的水势愈低,则吸水能力愈强。
反之,水势愈高,则吸水能力愈弱。
不同植物,不同部位,不同年龄及不同时刻的组织,水势都有一定差异;土壤条件及大气条件等外界因毒对植物组织的水势也有很大影响。
测定植物组织的水势可以了解植物组织的水分状况,也可作制订作物灌溉的生理指标。
(二)植物材料:一串红和海棠叶片(三)仪器设备:1、水势仪;2、剪刀(四)实验步骤1. 叶片处理: 将一串红叶和海棠叶片分别用自来水冲洗干净并用去离子水润洗,再用洁净滤纸吸干表面水分。
用剪刀将各组叶片剪成小碎片。
2.测定:将各组剪碎的叶片放进仪器圆形的盒子里,进行测量。
实验5 植物组织游离脯氨酸含量的测定(一)原理植物在逆境条件下,游离脯氨酸便会大量积累,且积累指数与植物的抗逆性有关。
因此,脯氨酸可作为植物抗逆性的一项生化指标。
采用磺基水杨酸提取植物体内的游离脯氨酸,不仅大大减少了其他氨基酸的干扰,快速简便,而且不受样品状态(干或鲜样)限制。
在酸性条件下,脯氨酸与茚三酮反应生成稳定的红色缩合物,用甲苯萃取后,此缩合物在波长520nm处有一最大吸收峰。
脯氨酸浓度的高低在一定范围内与其消光度成正比。
(二)植物材料一串红叶片和秋海棠叶片(三)仪器设备分光光度计;水浴锅:漏斗:大试管(20m1);具塞刻度试管(20m1)注射器或滴管(5~l0ml)。
(四)试剂配制(1)3%磺基水杨酸溶液(2)甲苯;(3)2.5%酸性茚三酮显色液:冰乙酸和6mo1.L-l磷酸以3:2混合,作为溶剂进行配制,此液在4℃下2~3天有效;‘(4)脯氨酸标准溶液:准确称取25mg脯氨酸,用蒸馏水溶解后定容至250ml,其浓度为100ug.mL-l。
再取此液10ml,用蒸馏水稀释至lOOml,即成10μg.mL-1的脯氨酸标准液。
(五)实验步骤及注意事项1.标准曲线制作(1)取7支具塞刻度试管按表9.2-1加入各试剂。
混匀后加玻璃球塞,在沸水中加热40min。
(2)取出冷却后向各管加入5ml甲苯充分振荡,以萃取红色物质。
静置待分层后吸取甲苯层以0号管匀对照在波长520nm下比色。
(3)以消光值为纵坐标,脯氨酸含量为横坐标,绘制标准曲线,求线性回归方程表9.2.1各试管中试剂加入量试管编号0 1 2 3 4 5 6 脯氨酸标准溶液(m1) 0 0.2 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 水(m1) 2 1.8 1.6 1.2 0.8 0.4 0冰乙酸(m1) 2 2 2 2 2 2 2 茚三酮显色液(m1) 3 3 3 3 3 3 32.样品测定(1)脯氨酸提取:每个灌水梯度分别取0.3g叶片,加5mL磺基水杨酸于沸水中浸提。