HPLC—QAMS同时测定复方黄芩片中6种活性成分的含量

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高效液相色谱法同时测定枇芩口服液中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量

高效液相色谱法同时测定枇芩口服液中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量

高效液相色谱法同时测定枇芩口服液中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量王庆芬;倪晓霞;李杰;张荣【摘要】Objective To establisb a metbod for tbe simultaneous determination of baicalin, baicalein and bogonin in Piqin Oral Solution by HPLC. Methods Tbe Kromasil-C18 column ( 250 mm × 4. 6 mm, 5 μm ) witb a column temperature of 35 ℃ was used:tbe mobile pbase consisted of metbanol-0. 2% pbospbate, gradient elution, witb flow rate of 1. 0mL/min, and tbe detection wavelengtb was set at 280 nm. Results Tbe content of baicalin, baicalein and wogonin acbieved a complete separation, peak area of tbe 3 components bad a good linear relationsbip witb tbe amount of samples. Tbe linear ranges of baicalin, baicalein and wogonin were 34. 20-171. 00 μg/mL ( r=0. 999 8), 1. 44-7. 20 μg/mL( r=0. 999 6), 1. 36-6. 80 μg/mL( r=0. 997 7) respectively;tbe sample-adding recovery were 99. 09%, 99. 56%, 99. 61% for baicalin,98. 46%, 97. 95%, 98. 31% for baicalein,and 98. 44, 98. 51, 98. 10% for wogonin in bigb,middle, low concentrations( n=9). Conclusion Tbe metbod is simple, rapid, accurate and reproducible, and it is suitable for tbe content determination of baicalin, baicalein and wogonin in Piqin Oral Solution.%目的:建立同时测定枇芩口服液中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的高效液相色谱( HPLC )法。

HPLC法同时测定气管炎丸中6个活性成分的含量

HPLC法同时测定气管炎丸中6个活性成分的含量

3.875 0 3.905 3 3.912 4 3.932 2 3.868 0 3.922 8 3.902 6
1.932 7 1.924 8 1.913 7 1.905 8 1.914 2 1.883 7 1.912 5
4.192 6 4.215 7 4.223 9 4.190 2 4.253 7 4.201 1 4.212 9
Agilent ZORBAX SB-C18 Phenomenex Luna C18
平均值(mean)
Diamonsil C18(2) —
RSD/%

0.314 6 0.312 9 0.308 5 0.311 7 0.315 2 0.303 4 0.311 1 1.4
0.957 8 0.946 3 0.954 2 0.968 0 0.941 1 0.961 5 0.954 8 1.0
·2 1 6·
药 物 分 析 杂 志 Chin J Pharm Anal 2021,41(2)
2.6 样品含量测定 取 8 批 二 至 丸(批 号 190502、191101、191102、
190701、190301、190302、200401、200402),按“2.2.2”项
下方法制备供试品溶液,在“2.1”项色谱条件下进样测 定,分别采用 ESM 和 QAMS 法计算含量,结果见表 7,2 种方法无明显差异,相对平均偏差(RAD)均 <2.0%。
保 留 时 间(RT)的 比 值(即 RRT),tRi 为 待 测 物 i 的 RT,tRs 为内参物 s 的 RT。考察各待测成分 RRT 在 不 同 高 效 液 相 色 谱 仪 和 色 谱 柱 中 的 重 现 性,结 果 表明各待测成分 RRT 波动较小,无显著性差异,见 表 6。

复方黄芩片的质量标准研究

复方黄芩片的质量标准研究

复方黄芩片的质量标准研究摘要】目的探究复方黄芩片的质量标准。

方法 HPLC法测定复方黄芩片中黄芩苷的含量,选用AichromBond-AQ-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),流动相:甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2) 流速:1 mL/min 检测波长:280 nm。

采用薄层色谱法对复方黄芩片进行定性鉴别结果薄层色谱中斑点清晰;HPLC的方法灵敏、准确。

黄芩苷在1.51~18.12μg范围内有良好线性关系(r=0.9996),平均回收率为99.7%,RSD=1.25%(n=5)。

结论该方法可为复方黄芩片的质量评价提供科学依据。

【关键词】复方黄芩片黄芩苷薄层色谱法高效液相色谱法复方黄芩片由黄芩、穿心莲、等中药材组成,具有清热解毒,凉血消肿等功效。

用于咽喉肿痛,口舌生疮,感冒发热,大肠湿热泄泻、热淋涩痛,痈肿疮疡等。

按照中药新药研究规范,根据以上药材的理化性质,对黄芩、穿心莲进行了薄层鉴别,同时采用高效液相色谱法测定了黄芩苷的含量,建立了可靠,专属性强的质量标准研究方法。

实验方法1 仪器与试药日本岛津LC-10ADVP高效液相色谱仪,岛津SPD-10AVP紫外检测器, 复方黄芩片(肇庆星湖制药有限公司批号080110、080111、080112、080113、080114)甲醇(上海久亿化学试剂有限公司)试验中所用试剂均为分析纯或色谱纯。

2 定性鉴别2.1 黄芩薄层色谱鉴别:取本品10片,除去糖衣,研细,加甲醇20ml,加热回流30分钟,放冷,滤过,滤液作为供试品溶液。

另取黄芩苷对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。

照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各10μl,分别点于同一用4%醋酸钠溶液制备的以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上,以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5:3:1:1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以2%三氯化铁乙醇溶液。

供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。

HPLC法测定复方逍遥合剂中黄芩苷的含量

HPLC法测定复方逍遥合剂中黄芩苷的含量

HPLC法测定复方逍遥合剂中黄芩苷的含量张武标;沈阳;刘兆康;王申东【摘要】目的:建立复方逍遥合剂中黄芩苷的含量测定方法.方法:采用HPLC法,色谱柱Calesil-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:甲醇:0.1%磷酸(47:53),检测波长:280 nm.结果:黄芩苷进样量在0.08~0.80 μg范围内呈良好的线性关系(r=0.999 9),低、中、高三种浓度的平均回收率为99.59%、100.22%、100.40%,RSD分别为0.75%、2.58%、0.86%.结论:本法简便、准确,重复性好,可用于该产品的质量控制.f关键词]复方逍遥合荆;HPLC;黄芩苷【期刊名称】《中国医药导报》【年(卷),期】2011(000)008【总页数】3页(P58-59,61)【关键词】复方逍遥合剂;HPLC;黄苓苷【作者】张武标;沈阳;刘兆康;王申东【作者单位】上海市儿童医院(上海交通大学附属儿童医院),上海,200040;上海市儿童医院(上海交通大学附属儿童医院),上海,200040;上海市儿童医院(上海交通大学附属儿童医院),上海,200040;上海市儿童医院(上海交通大学附属儿童医院),上海,200040【正文语种】中文【中图分类】R927.72复方逍遥合剂为我院自制制剂(沪药制字Z04090765),由黄芩、当归、郁金、陈皮、香附、柴胡、白芍、柴胡、栀子、茯苓、生牡蛎、黄柏、白术等十几味中药组成。

具有舒肝理气、清热活血、软坚化痰等功能,用于调理肝郁痰阻型女童早期性早熟,运用临床多年来效果显著。

其中黄芩为处方主药,黄芩苷是黄芩主要有效成分。

为控制产品质量,确保临床疗效,参考文献[1-3],本文采用HPLC法对制剂中黄芩苷含量进行定量分析,方法简便、准确、重复性好,可用于该产品的质量控制。

Agilent 1100高效液相色谱仪,包括Agilent G1311A四元泵(Quatpump),AgilentG1322A 真空在线脱气机(Degrasser),Agilent G1313A 自动进样器(ALS),Agilent G1315B DAD二级管阵列检测器,Agilent chemstation system (安捷伦化学色谱工作站);电子天平(Sartorius,d=0.01 mg);超声提取器(SB1000,宁波新芝生物科技股份有限公司)。

HPLC 法快速检验几种黄芩;丹参中成药

HPLC 法快速检验几种黄芩;丹参中成药

HPLC 法快速检验几种黄芩;丹参中成药发表时间:2018-01-30T10:41:36.973Z 来源:《世界复合医学》2017年第9期作者:苏晓明[导读] 本文所采用的方式对于不同药物中的黄岑丹参成分都具有较好的检定效果。

哈药集团三精制药哈尔滨市 150000【摘要】目的:建立一套完善的HPLC鉴定黄岑和丹参等药物的方式;方法:针对各种药物中的药材进行分析,通过采用不同的方式来提取其中的有效物质,制备出试验用溶液,通过不同的分析方式的测试选出一种最为可行的HPLC检测方式;结果:针对相同药材中的不同药物成分进行鉴别之后,其具有相同特征的色谱,所以可以将色谱的峰数作为检定标准,通过对比色谱峰面积即可得到成分含量,并且测定效果比较准确;结论:本文所采用的方式对于不同药物中的黄岑丹参成分都具有较好的检定效果,所以在药物筛查工作中可以起到较好的效果。

【关键词】高效液相色谱法;黄芩;丹参;快速检验目前随着我国社会的发展,人们已经越来越重视自身的健康问题,所以用药的数量在不断提高。

在这种前提下,药物的质量也就成为一个越来越重要的问题。

目前我国最常用的药物质量及检测方式是HPLC方式,这种技术不仅仅用于药物的相关检验工作当中,其在物质分析工作上起到的作用是相当重要的,在很多化学工业和相关检测工作中都有能充分发挥其技术的优势。

这种检测方式本身具备很多优势,例如其速度和效率较高,并且具有足够的灵敏度。

在样品分析的过程中,载液具有较高的流动速度,所以大大提高了分析效率;并且这种检验方式分离效果好,所以大大提高了检验效率和准确性,同时其对于紫外检测器的灵敏度非常高,同时也可以回收色谱柱,基于其本身具备的诸多优势,其在药物鉴定工作中的应用范围已经越来越广泛,本次针对其在丹参和黄岑中的检定情况进行了探讨。

1 材料与方法1.1 实验材料采用美国 Agilent 公司生产的 Agilent 1260 Infinily 高效液相色谱以及超声波中药处理机和 Hypersil ODS2 色谱柱进行实验。

RP_HPLC法测定黄芩属四种药材中五个活性成分的含量

RP_HPLC法测定黄芩属四种药材中五个活性成分的含量

[δ:10512,7512,7719,6913,7813,6213]。

因此,文献〔1〕报道的升麻醇232O2β2D2葡萄糖苷的结构应为升麻醇232O2β2D2半乳糖苷。

另外,本研究同时也分得升麻醇232O2β2D2半乳糖苷,其13CNMR谱数据与文献〔1〕报道的升麻醇232 O2β2D葡萄糖苷的糖基部分和苷元部分均一致。

比较化合物1和升麻醇232O2β2D2半乳糖苷的薄层层析色谱,其Rf值不相同,说明二者为不同的化合物。

4 实验部分化合物1:白色无定形粉末,mp234~235℃, [α]20D+7016(c0119,CHCl3),L iber mann2Burchard 反应阳性,Molish反应阳性。

F AB2MS显示其准分子离子m/z651[M+H]+。

I R(K B r)c m21:3700~3040(br,OH),2965,2935,1460,1380,1260,1170, 1075,1045,980。

1HNMR(C5D5N,500Hz)δ:0123 (1H,d,J=410Hz,192H),0155(1H,d,J=515Hz, 192H),0185(3H,d,J=514Hz,212CH3),1109, 1114,1118,1132,1146,1148(各3H,s,6×CH3), 3153(1H,dd,J=1115,415Hz,32αH),3176(1H,s, 242H),4125(1H,s,152βH),4174(1H,d,J=815 Hz,232H),4176(1H,d,J=910Hz,葡萄糖端基氢1’2H),4105(1H,t,J=81Hz,2’2H),4124(1H,t,J= 710Hz,3’2H),4124(1H,dd,J=615,710Hz,4’2 H),3196(1H,d,J=715Hz,5’2H),4141(1H,dd,J =1116,510Hz,6’2H),4157(1H,dd,J=1115, 210Hz,6’2H)。

HPLC法测定黄芩片中黄芩苷的含量

HPLC法测定黄芩片中黄芩苷的含量作者:骆晓红梁超峰来源:《中国医药导报》2009年第21期[摘要] 目的:建立黄芩片中黄芩苷的含量测定方法。

方法:采用HPLC法,色谱柱为ODS C18柱(5 μm,4.6 mm×150 mm),流动相为甲醇-水-磷酸溶液(47∶53∶0.2),流速为1.0 ml/min,检测波长为280 nm。

结果:黄芩苷进样浓度在9.4~188.0 μg/ml(r=0.999 7)范围内线性良好,平均回收率为99.6%,RSD为1.32%(n=6)。

结论:本文建立的HPLC法可作为黄芩片的质量控制方法。

[关键词] HPLC;黄芩片;黄芩苷;含量测定[中图分类号]R927.2 [文献标识码]A [文章编号]1673-7210(2009)07(c)-040-02Content determination of baicalin in Huangqin Tablets by HPLCLUO Xiaohong1, LIANG Chaofeng2(1.Guangdong Hospitial of TCM, Guangzhou 510120, China; 2.Guangzhou Pharmaceutical Industrial Research Institute, Guangzhou 510240, China)[Abstract] Objective: To develope a method for determining baicalin in Huangqin Tablets. Methods: The ODS C18 column (5 μm, 4.6 mm×150 mm) was used, the mobile phase was methanol-water-phosphoric acid (47∶53∶0.2) at the flow rate of 1.0 ml/min, the detective wavelength was 280 nm. Results: The linear range of baicalin concentration was 9.4-188.0 μg/ml(r=0.999 7), the averag e recovery was 99.6% with a RSD of 1.32% (n=6). Conclusion: The method is simple, fast and accurate. It can be used for the quality control of Huangqin Tablets.[Key words] HPLC; Huangqin Tablets; Baicalin; Content determination黄芩片由黄芩单味中药材组成,具有抗菌、消炎的作用,临床常用于上呼吸道感染、痢疾等,效果良好。

HPLC同时测定复方芩兰口服液中黄芩苷、绿原酸、连翘苷的含量

HPLC同时测定复方芩兰口服液中黄芩苷、绿原酸、连翘苷的含量摘要:目的:建立HPLC法同时测定复方芩兰口服液口服液中黄芩苷、绿原酸、连翘苷的含量。

方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为AgilentC18分析色谱柱(4.6mm×250mmID,5μm),流动相A为5%甲醇(含0.5%磷酸),流动相B为甲醇,进行梯度洗脱。

结果:黄芩苷、绿原酸和连翘苷苷与各自相邻峰的分离度>1.5,黄芩苷、绿原酸、连翘线性范围分别为100.9~336.2μg·mL-1,14.5~48.4μg·mL-1,7.4~24.6μg·mL-1。

绿原酸、连翘苷和黄芩苷回收率分别为98.89%、99.27%和99.68%,RSD分别为1.5%、2.0%和2.0%。

结论:该方法简便、准确,可同时测定复方芩兰口服液中的黄芩苷、绿原酸、连翘苷的含量。

关键词:绿原酸;连翘苷;黄芩苷;HPLC;同时测定;复方芩兰口服液复方芩兰口服液具有辛凉解表、清热解毒之功效,用于外感风热引起的发热、咳嗽、咽痛[1]。

由金银花、连翘、黄芩、板蓝根4味中药组成,本品已收载于《中国药典》2015年版中[2],分别采用不同高效液相色谱条件测定绿原酸、连翘苷和黄芩苷的含量,其他相关文献[3-6]均采用HPLC 法同时测定其中1至2种主要成分的含量。

本试验通过优化色谱条件[7-9],采用高效液相色谱法梯度洗脱同时测定3组分的主要成分含量,具有简便可行、准确快速、全面整体的特点。

1仪器与试药赛默飞U3000型高效液相色谱仪、AgilentC18分析色谱柱(4.6mm×250mmID,5μm )。

黄芩苷、绿原酸、连翘苷对照品(中国食品药品检定研究院,批号:110715-201821、110753-201817、110821-201816);磷酸(国药集团);甲醇为色谱纯(欧姆尼);水为超纯水。

2方法与结果2.1系统适用性2.1.1 色谱条件AgilentC18分析色谱柱(4.6mm×250mmID, 5μm ),流动相B为甲醇,A相为5%甲醇的0.5%磷酸溶液;流速:1.0mL/min;洗脱程序:0~35min, A为95%~35% ,B为5%~65%;检测波长程序:0~16min为324nm;16~35min为278nm,柱温30℃;进样量10μl。

HPLC 法同时测定复方三黄酊中黄芩苷及盐酸小檗碱的含量

HPLC 法同时测定复方三黄酊中黄芩苷及盐酸小檗碱的含量丁长玲;崔俊凤;赵永德;高华;丁召兴;成文娜【摘要】目的:建立测定复方三黄酊中2组分含量的高效液相色谱法。

方法色谱柱:Thermo,ODS-2HYPERSIL,Dim( mm)250×4.6。

流动相:甲醇-乙腈-0.025 mol/L磷酸溶液(用三乙胺调节pH为3.0)(15:15:70);流速:1.0ml/min;检测器:DAD检测器;检测波长:280 nm和345 nm;柱温:25℃。

结果黄芩苷在0.06862 ug~0.6862 ug之间进样量与峰面积积分值呈良好的线性关系,平均加样回收率为99.42%, RSD=0.4%( n=6);盐酸小檗碱在0.0198~0.198 ug之间进样量与峰面积积分值呈良好的线性关系,平均加样回收率100.6%,RSD=1.9%( n=6)。

结论本法简单易行,可用于复方三黄酊的含量测定。

%Objective To establish the method for determination of the Baicalin and berberine Hydrochloride in Compound San -huang Tincture by HPLC.Methods HPLC chromat ographic condition:Thermo,ODS-2HYPERSIL,Dim( mm)250 ×4.6.The mobile phase consisted of methanol-acetonitrile -0.025 mol /L phosphoric acid solution ( adjusted with triethylamine to pH 3.0) (15:15:70) at a f low rate of 1.0 ml· min-1 .The DAD detection wavelength was 280nm and 235nm.The column temperature was 25℃.Re-sults The Baicalin was in good linearity over the range of0.06862~0.6862 ug.The average recovery was 99.42%, with RSD of0.4%(n=6).The berberine hydrochloride was in good linearity over the range of 0.0198 ~0.198 ug.The average recovery was 100.6%, with RSD of 1.9%(n=6).Conclusion This method is accurate,simple and can be used for the determination of Com-pound Sanhuang Chloramphenicol .【期刊名称】《滨州医学院学报》【年(卷),期】2014(000)001【总页数】4页(P12-14,18)【关键词】高效液相色谱法;复方三黄酊;黄芩苷;盐酸小檗碱【作者】丁长玲;崔俊凤;赵永德;高华;丁召兴;成文娜【作者单位】青岛大学青岛 266021; 滨州医学院附属医院药学部;滨州市药品检验所;滨州医学院附属医院药学部;青岛大学青岛 266021;滨州医学院附属医院药学部;滨州医学院附属医院药学部【正文语种】中文【中图分类】R286复方三黄酊是我院研制的一种治疗褥疮和外科创伤感染的特色药物,有清热、解毒、抗菌消炎,消肿、祛腐生肌、清凉止痛作用,对创面愈合具有很好的临床疗效。

采用HPLC法快速检验几种含黄芩、丹参中成药的研究

采用HPLC法快速检验几种含黄芩、丹参中成药的研究【摘要】目的:为保护人们健康,通过运用HPLC方法快速检验中成药中所含黄芩、丹参的的含量,进一步对其中的检验过程加以探究,从而确定其方法是否有效。

方法:本文主要应用了实验法、高效液相色谱法等对各类中成药进行检验,通过分离提取制成所需要的溶液来进行详细的检验,以测定中成药中黄芩、丹参的含量。

结果:通过利用HPLC方法进行检验,可以看出,黄芩、丹参各自种类药物的保留时间分别为7.860min;后者则为12.420min。

通过利用保留时间以及其他数据,可以对中药材进行定性分析,而中成药中的黄芩、丹参含量也能对照品色谱峰的面积得出结论,只是还需要进行一下计算。

结论:通过采用高效液相色谱法即HPLC这种方法能够对中成药中黄芩、丹参的含量进行快速的检验。

在一定程度上能够提升检验的效率,与此同时,也能测出黄芩、丹参的质量,在精确度上也能有所保证。

由此可见,HPLC法的应用还是具有很大价值的,能够准确的检测出中成药中黄芩、丹参的含量以及质量。

【关键词】HPLC法;快速检验;中成药随着时代的不断发展,我国的总体技术水平也在不断的上升,相应的设备仪器也在不断的进行更新换代,这是为了更好的满足人们工作的需要,同时,这也是社会发展的基本要求,只有保证设备、方法的先进性,才能推进工作的顺利进行,提高工作的效率,进而取得良好的工作效果。

因此,在日常的生活以及工作中,人们对于先进仪器设备、技术、方法等需求是极为迫切的,而在我国的中成药研究中,同样也需要先进设备以及技术方法的支持,而HPLC方法的应用就正好满足了这一需要,人们能够利用这种方法对其中药材中黄芩、丹参的含量进行深入的研究,而且还能保证检验的准确性。

所以,高效液相色谱法的应用具有重要的价值和意义,目前来看,这种方法已经被广泛的应用于医学、化工等领域,基本得到了广泛的应用与发展。

具体而言,这种方法具有高效率、高压等特点,能够更好的完成检验工作。

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HPLC—QAMS同时测定复方黄芩片中6种活性成分的含量作者:胡丹来源:《中国药房》2018年第11期中圖分类号 R284.1;R927 文献标志码 A 文章编号 1001-0408(2018)11-1510-05DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2018.11.17摘要目的:建立同时测定复方黄芩片中6种活性成分含量的高效液相色谱(HPLC)-一测多评法(QAMS)。

方法:采用HPLC法,以黄芩苷为内参物,分别计算其与虎杖苷、汉黄芩苷、黄芩素、穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯的相对校正因子(RCF),通过RCF计算复方黄芩片中上述5种成分的含量(计算值),同时采用外标法测定这6种成分的含量(实测值),比较计算值与实测值的差异。

色谱柱为ZORBAX Eclipse XDB C18,流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为306 nm(虎杖苷)、225 nm (穿心莲内酯)、275 nm(黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素)、254 nm(脱水穿心莲内酯),柱温为25 ℃,进样量为10 μL。

结果:虎杖苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯的检测质量浓度的线性范围分别为4.555~81.99、47.03~846.5、12.73~229.1、12.88~231.8、2.632~47.38、3.508~63.14 μg/mL(r为0.999 2~0.999 7);检测限分别为2.25、6.92、1.76、4.69、1.37、1.51 ng,定量限分别为6.89、19.98、5.28、13.81、4.15、4.71 ng;平均加样回收率分别为98.2%、98.8%、97.9%、98.9%、98.8%、98.7%(RSD为0.91%~1.32%,n=9);精密度、重复性、稳定性(48 h)试验的RSD0.05)。

结论:该方法简单、有效、结果准确、节约成本,可用于复方黄芩片中上述6种活性成分含量的同时测定。

关键词一测多评法;高效液相色谱法;复方黄芩片;相对校正因子;活性成分;含量测定Content Determination of 6 Active Constituents in Compound Huangqin Tablets by HPLC-QAMSHU Dan(Suzhou Food and Drug Inspection and Testing Center, Anhui Suzhou 234000,China)ABSTRACT OBJECTIVE: To establish quantitative analysis of HPLC-quantitative analysis of multi-components by single marker (QAMS) for simultaneous determination of 6 active constituents in Compound huangqin tablets. METHODS: Using baicalin as internal content, HPLC method was used to calculate relative correction factor (RCF) of baicalin to polydatin,wogonoside, baicalein, andrographolide and dehydroandrographolide. The contents of above-mentioned 5 components in Compound huangqin tablets were calculated by using RCF (calculation value). The external standard method (ESM) was used to determine the contents of 6 constituents (measured value). The differences between calculation value and measured value were compared. The determination was performed on ZORBAX Eclipse XDB C18 column with mobile phase consisted of acetonitrile-0.05% phosphoric acid (gradient elution) at the flow rate of 1.0 mL/min. The detection wavelength was set at 306 nm for polydatin, 225 nm for andrographolide, 275 nm for baicalin, wogonoside and baicalein, 254 nm for dehydroandrographolide. The column temperature was set at 25 ℃ and the injection volume was 10 μL. RESULTS: The linear range was 4.555-81.99 μg/mL for polydatin, 47.03-846.5 μg/mL for baicalin, 12.73-229.1 μg/mL for wogonoside, 12.88-231.8 μg/mL for baicalein, 2.632-47.38 μg/mL for andrographolide, 3.508-63.14 μg/mL for dehydroandrographolide (r=0.999 2-0.999 7), respectively. Limits of detection were 2.25, 6.92, 1.76, 4.69, 1.37, 1.51 ng; limits of quantitation were 6.89, 19.98,5.28, 13.81, 4.15, 4.71 ng. Average recoveries were 98.2%, 98.8%, 97.9%, 98.9%,98.8%, 98.7% (RSD=0.91%-1.32%, n=9). RSDs of precision, reproducibility and stability tests (48 h) were lower than 2.0% (n=6 or n=7). RCFs of baicalin to polydatin, wogonoside,baicalein, andrographolide and dehydroandrographolide were 0.529, 0.506, 1.004, 0.831 and 1.087, respectively. There was no statistical significance between calculated values and measured ones (P>0.05). CONCLUSIONS: The method is simple, effective, accurate and cost saving. It can be used for simultaneous determination of 6 active constituents in Compound huangqin tablets.KEYWORDS Quantitative analysis of multi-components by single marker; HPLC;Compound huangqin tablet; Relative correction factor; Active constituents; Content determination复方黄芩片由黄芩、虎杖、穿心莲和十大功劳4味中药材组成,具有清热解毒、凉血消肿之功效,用于咽喉肿痛、口舌生疮、感冒发热、痈肿疮疡[1]。

黄芩中含有黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素等黄酮类成分,有清热燥湿、泻火解毒的功效;虎杖中含有虎杖苷,有抗菌消炎、利湿退黄、清热解毒、止咳化痰的功效;穿心莲中含有穿心莲内酯及脱水穿心莲内酯,具有清热解毒、凉血消肿的功效[2]。

已有针对虎杖苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯含量测定的文献报道[2-8],但是涉及到多种成分同时测定时需要对照品数量多,但某些对照品提纯难度大,使用成本较高。

一测多评法(QAMS)的广泛应用,实现了以样品中某一廉价易得的对照品为内参对多种有效成分质量的同步控制的要求,该方法在中成药及中药饮片质量控制中得到了较广泛的应用[9-13],但采用QAMS法测定复方黄芩片的有效成分的含量尚未见报道。

本研究建立了高效液相色谱(HPLC)- QAMS法同时测定复方黄芩片中6种活性成分的含量,以黄芩苷为内标,计算虎杖苷、汉黄芩苷、黄芩素、穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯与其之间的相对校正因子(RCF),利用RCF测定各组分含量,并将结果与外标法(ESM)测得数据进行比较分析。

1 材料1.1 仪器e2695 Waters HPLC仪,包括2695 Alliance四元梯度泵、2695 Alliance自动进样器、Empower3色谱工作站、2998二极管阵列检测器(美国Waters公司);1260 Infinity HPLC仪,包括G1311C四元梯度泵、G1329B自动进样器、 Agilent EZchrom色谱工作站、G4212B 二极管阵列检测器(美国Agilent公司);3000 Ultimate HPLC仪,包括HPG-3x00A二元泵、Split-Loop自动进样器、Chromeleon 7色谱工作站、PDA-3000二极管阵列检测器(美国Thermo Fisher Scientific公司);Quintix 224万分之一电子天平(德国赛多利斯公司);D115烘箱(德国Binder公司); SP3-100AL超声波清洗机(上海泗裴电子科技有限公司)。

1.2 药品与试剂复方黄芩片(肇庆星湖制药有限公司,批号:1702062、1703078、1708045、1708067、1709023,规格:每片0.33 g);黄芩苷对照品(批号:110715-201619,纯度:93.5%)、虎杖苷对照品(批号:111575-201603,纯度:87.3%)、汉黄芩苷对照品(批号:112002-201501,纯度:98.8%)、黄芩素对照品(批号:111595-201306,纯度:97.8%)、穿心莲内酯对照品(批号:110797-201108,纯度:98.7%)、脱水穿心莲内酯对照品(批号:110854- 201508,纯度:99.4%)均购自中国食品药品检定研究院;甲醇、乙腈均为色谱纯,其他试剂均为分析纯,水为超纯水。

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