白芨组织培养实施方法
白及组织培养育苗技术规程
白及组织培养育苗技术规程
1.鲜茎段处理：从白及植株中取出茎段，用消毒剪刀切成长度为1-2cm的小段，去除叶片，用无菌水将茎段表面洗净消毒；
2.琼脂包埋：将洗净消毒的茎段置于琼脂中，深度约为1/2，待琼脂固化后，转移到无菌培养基上；
3.培养基处理：将培养基加热至液态状态，冷却至适宜的温度（通常为25℃左右），加入适当的植物生长调节剂（如NAA、BA等）；
4.移植：将琼脂包埋的茎段移植至培养基上，培养瓶密封，置于暗处；
5.培养：将培养瓶放入培养箱中，温度保持在20-25℃，光照强度为1000-2000lx左右，培养时间根据不同材料和培养条件而定。
三、注意事项
1.所有操作要在无菌条件下进行；
2.操作器材要进行高温高压灭菌处理；
3.琼脂及培养基要先进行质量检测，确保无菌、无毒性；
4.培养箱要定期进行消毒和清洁，保持良好的培养环境；
5.注意培养瓶密封，避免细菌和霉菌污染；
6.注意培养条件的控制，如温度、光照等，以促进白及组织的生长和分化。
- 1 -。
白芨栽培技术
白芨栽培技术白芨是收敛止血类常用药，别称连及草、甘根、白给等，为兰科白芨属多年生草本球根植物，我国广泛分布于长江流域各地，块茎入药有收敛止血、消肿生肌的功效，亦可盆栽或点缀花台、花境、庭院等作为观赏植物，下面我们就一起来看一看白芨的栽培技术吧!白芨的育苗方法1、分株：白芨常用分株繁殖，春季新叶萌发前或秋冬地上部枯萎后掘起老株，分割假鳞茎进行分植，每株可分3～5株，但繁殖周期长、效率低且耗种量大，很难满足大量栽培的需要。
2、播种：白芨可采用播种繁殖，但白芨的种子非常细小且只有几个细胞构成的发育不完全的胚，因此在自然状况下很难萌发和生长，实生苗的栽培较为困难。
3、组培：白芨组织培养技术可以快速繁殖大量种苗，通常是在培养基上进行无菌播种，待种子萌发后用组织培养方法进行无性系繁殖，从而实现白芨种苗的规模化生产。
白芨的种植条件1、土壤：白芨对土壤要求不严格，但宜选疏松肥厚的沙质壤土和腐殖质壤土。
2、温度：白芨喜温暖，稍耐寒，长江中下游地区能露地栽培。
3、光照：白芨耐阴性强，忌强光直射，夏季高温干旱时叶片容易枯黄。
4、水分：白芨喜阴湿的环境，怕涝，也不耐旱，需常浇水保湿。
白芨的种植方法1、土壤选择：白芨宜排水良好含腐殖质多的沙壤土和腐殖质壤土，喜温暖、稍阴湿环境，不耐寒，排水良好的山地栽种时宜选阴坡生荒地。
2、整地作畦：白芨种植地翻耕20厘米以上，亩施农家肥1000千克，再翻地使土和肥料混匀，栽植前整细、耙平，作宽130～150厘米的高畦。
3、中耕除草：白芨苗出齐后在5～6月份生长很旺盛，杂草也长的很快，因此要进行除草，除草结合搂松畦面，除草时要浅锄免得伤根。
4、适时追肥：白芨是喜肥的植物，通常每个月喷施一次磷酸二氢钾或稀薄的人畜粪尿，7～8月停止生长进入休眠，但是要防止杂草丛生。
5、灌溉排水：白芨喜阴湿环境，因此要经常保持湿润，干旱时要浇水，7～9月份早晚各浇一次水，但白芨又怕涝，大雨时及时排水避免伤根。
白芨组织培养实施方法
白芨组织培养实施方法白芨是一种珍贵的中草药材，具有很高的药用价值。
由于其生长条件苛刻，野生白芨数量逐渐减少，因此，进行白芨组织培养并实施人工繁殖是十分重要的。
下面将介绍一种白芨组织培养的实施方法。
1.材料准备-野生白芨组织：从自然界中采集健康的白芨植株。
-培养基：选择适宜的培养基来提供必需的养分和激素。
常用的培养基有MS培养基、WPM培养基等。
-植物生长调节剂：包括激素和生长素，如乙烯、激动素、生根粉等。
2.组织切割和处理-从野生白芨植株中取得幼嫩的茎尖或幼叶组织，这些组织相对较活跃。
-组织切割时，要确保使用消毒的工具，以避免任何细菌或病毒的传播。
切割后立即将组织放入含有抗生素的无菌培养基中。
3.培养基的制备和调整-根据需要，选择合适的培养基配方。
通常培养基中含有碳源、氮源、激素和其他必需的微量元素。
-调整培养基的pH值和浓度，以适应白芨的生长和发育。
4.培养条件的控制-培养环境的温度：温度是白芨生长的重要因素，一般适宜的培养温度为20-25摄氏度。
-光照条件：白芨是属于半阴性植物，适宜的光照条件是提供适量的光照，但避免过度照射。
-湿度控制：白芨对湿度要求较高，可以在培养箱中增加湿度或使用雾化器提供湿气。
5.组织培养的实施步骤-培养基预处理：将调整好pH值和浓度的培养基加热至约121摄氏度进行灭菌处理。
-组织接种：将切割好的组织块放置在培养基的表面上，避免埋入培养基中。
-培养基的代换：每隔一段时间，需要对培养基进行代换，以提供更多的营养物质和生长调节剂。
-培养条件的监测：每隔一段时间，观察并记录白芨组织的生长情况，包括根的生长率、茎的伸长情况等。
6.植物再生和繁殖-出瓶培养：当白芨组织生长良好时，可以将其移至含有适量生根粉的培养基中进行植株再生和繁殖。
-移栽和生长：当植株生长到一定高度时，可以将其移至含有适宜营养物和水分的基质中进行生长。
可以选择土壤、腐殖质和无菌培养基的混合物作为基质。
总结：白芨组织培养是一种重要的繁殖方法，能够用于保护和增加白芨资源。
白芨组培苗种植技术说明最终版
白芨组培苗种植技术说明最终版白芨（学名：Bletilla striata），又称石斛兰，是一种世界上广泛分布和栽培的兰科植物。
它是一种多年生草本植物，具有观赏和药用价值。
白芨的种植技术对于提高产量和质量非常重要。
接下来，将详细介绍一种白芨组培苗种植技术的最终版。
一、苗源选择：1.选择健康的母株作为组培材料，母株中心的健康、生长良好的叶片是首选。
2.母株需要充分生长，并且没有明显的病虫害。
二、材料准备：1.去壳，剪取健康的叶片，清洗干净。
2. 选取最上部的叶片，并切成5-8cm左右的片段。
3.用75%酒精或漂白粉进行消毒，再用净水漂洗3次，最后用无菌水冲洗3次。
三、培养基准备：1. 培养基主要由MS基础培养基和适量的糖、生长素构成。
一般可采用MS+30g/L蔗糖+0.05mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA。
2.所有材料需通过0.22μm的孔径过滤器过滤，以保持培养基的无菌性。
四、组培培养：1.将切好的叶片放入培养瓶中，每瓶放入3-5片，并添加适量的培养基。
2. 培养瓶使用250ml的容器，加盖并密封。
3. 培养瓶置于光照适宜、温度适中的培养室，一般光照强度为3000-5000lx，温度为25-28℃。
4.每隔一周，将培养瓶进行旋转，以促进组培苗的整形生长。
5.组培苗生长期为20-30天，根部长出后即可进行移栽。
五、移栽：1.准备好园地，园地土壤疏松、肥沃、排水良好。
以及做好苗圃的选址。
2. 直径6-8cm的塑料盆栽作为移栽容器。
3.移栽前用0.1%的稀泰勒霉素溶液浸泡10分钟，再用无菌水冲洗2次。
4.准备园地，并在盆栽中加入培养土，并将组培苗移栽到盆中。
5.移栽后浇透水，保持土壤湿润，但不要过于潮湿。
6.移栽完成后，放置在光照适宜、通风良好的大棚内，避免暴晒和寒冷天气。
六、管理和养护：1.每天早晚都要进行适量的浇水，保持土壤湿润。
2.定期施肥，可以每隔10天左右施一次基础肥（例如：全营养源肥），保证营养供给充足。
白芨组培技术实验设计方案
(mg/l)
KT
(mg/l)
IBA
(mg/l)
活性碳
(g/l)
土豆
（g/l）
蔗糖
（g/l）
1
MS
1.0
0.1
30
2
MS
1.00.5Βιβλιοθήκη 303MS
1.0
0.5
1.0
30
4
MS
1.0
0.5
0.5
30
5
1/2MS
1.0
0.1
30
6
1/2MS
0.5
1.0
30
7
1/2MS
1.0
0.5
1.0
30
8
1/2MS
9
1/2MS
0.5
0.3
40
10
1/2MS
0.1
1.0
0.5
2.0
30
11
1/2MS
1.0
1.0
1.0
30
12
1/2MS
1.0
0.5
0.5
0.5
2.0
30
13
1/2MS
0.1
1.0
0.5
0.5
2.0
30
14
1/2MS
0.1
1.0
1.0
0.5
0.5
30
15
1/2MS
0.1
1.0
0.5
75
30
16
1/2MS
30
7
1/2MS
0.5
0.1
30
8
1/2MS
0.5
0.5
30
白芨的组培育苗方法与设计方案
本技术介绍了一种白芨的组培育苗方法,①种子的采收；②种子的处理，先将白芨种子置于乙烯溶液中浸泡25～30h，接着将白芨种子转入消毒液中继续浸泡20～30min,最后将白芨种子用无菌水清洗后，置于0.1～0.2wt%的升汞中，振荡灭菌5～10min，再用无菌水清洗5遍以上；③增殖培养：将白芨种子接种到增殖培养基中培养得到一代白芨苗；④继代培养:将一代白芨苗分株后的单苗接种到继代培养基中得到二代白芨苗；⑤驯化培养：将二代白芨苗在自然光照下炼苗5～7天，接着将二代白芨苗从培养瓶中取出，用清水洗净根部后，置入培养室内的驯化基质中进行培养。
本技术容易操作、成本低,既能提高增殖系数及生根率，又能缩短培养周期、提高组培苗的质量。
技术要求1.一种白芨的组培育苗方法,其特征在于:包括以下步骤：①种子的采收:采收成熟的白芨种子,用手轻轻搓除果皮后,再采用重力法将干瘪的种子除去后得到合格的白芨种子；②种子的处理，先将步骤①得到的白芨种子置于乙烯溶液中浸泡25～30h，接着将白芨种子转入消毒液中继续浸泡20～30min,所述消毒液由以下重量份的原料组成:甘草酸1～2份、石榴皮提取物2～3份、鱼腥草提取物0.8～1.5份、乳化剂3～5份、酵母菌0.2～0.5份和无菌水150～200份，之后再将白芨种子从消毒液中滤出，并置于纱布中，在湿度为30～50%的条件下静置放置30～40h，最后将白芨种子用无菌水清洗后，置于0.1～0.2wt%的升汞中，振荡灭菌5～10min，再用无菌水清洗5遍以上；③增殖培养：向组培瓶中盛放5～6cm厚的增殖培养基，所述增殖培养基包括硝酸钙0.5～0.6g、18～25mg/L蔗糖、3～6g/L植物凝胶、2～3g/L WPM粉末、黄秋葵汁0.1～0.2g/L和1～1.2mg/L激素ZT，高温灭菌后将经步骤②处理的白芨种子接种到增殖培养基中，并密闭组培瓶，于温度为22～25℃、湿度为40～50%、光照为6000～7000LX的条件下培养至白芨种子长出芽孢，种苗长至2～3cm，培养得到一代白芨苗；④继代培养: 向另外一组组培瓶中盛放5～6cm厚的继代培养基，所述继代培养基包括硝酸钙0.5～0.6g、18～25mg/L蔗糖、3～6g/L植物凝胶、2～3g/L WPM粉末、黄秋葵汁0.1～0.2g/L和1～1.2mg/L激素ZT，高温灭菌后同时将经步骤③培养得到的一代白芨苗从增殖培养基中剥离后分隔成单苗，并将单苗的部分叶片或全部叶片切除，接着将单苗用无菌水冲洗后，再将单苗接种到另一组组培瓶中的继代培养基中，密闭组培瓶后于温度为24～28℃、湿度为45～55%、光照为6500～8000LX的条件下培养至单苗增长至原来的3～5倍，苗高至6～8cm后得到二代白芨苗；⑤驯化培养：将装有二代白芨苗的培养瓶转至自然光照下炼苗5～7天，接着将二代白芨苗从培养瓶中取出，用清水洗净根部后，将二代白芨苗分株后置入培养室内的驯化基质中进行培养，培养室内的温度控制在24～28℃、湿度控制在60～70%、遮光率控制在70%以上。
白芨组培技术实验设计方案
白芨组培技术实验设计方案白芨（Bletilla striata）是一种重要的中药材，具有抗菌、消炎、镇痛等药理作用。
然而，野生的白芨种群逐渐减少，且只在东亚特定地区分布，因此研究白芨的组培技术以进行大规模的人工繁殖具有重要意义。
为了建立高效的白芨组培技术，我们设计了以下实验方案。
实验一：不同白芨幼苗处理的影响1.实验目的：研究不同处理对白芨幼苗生长和增殖的影响。
2.实验材料和方法：-材料：白芨种子、MS培养基、激素溶液（IAA、BA）。
-方法：-步骤1：将白芨种子进行表面消毒，接种于含有IAA和BA的MS培养基上。
-步骤2：设置不同处理组：A组为不加激素，B组为加入适量IAA，C 组为加入适量BA，D组为既加入IAA又加入BA。
-步骤3：观察每组幼苗的生长状况、增殖情况和根系形态。
实验二：不同营养盐浓度对白芨幼苗生长的影响1.实验目的：研究不同营养盐浓度对白芨幼苗生长和发育的影响。
2.实验材料和方法：-材料：白芨幼苗、不同浓度的MS培养基。
-方法：-步骤1：将白芨幼苗移栽至含有不同浓度的MS培养基中，分别设置低浓度组、中等浓度组和高浓度组。
-步骤2：观察不同浓度组幼苗的生长状况、根系形态和叶片数目，测定幼苗的鲜重和干重。
实验三：不同光照条件对白芨幼苗生长的影响1.实验目的：研究不同光照条件对白芨幼苗生长和形态发育的影响。
2.实验材料和方法：-材料：白芨幼苗、灯光设备。
-方法：-步骤1：将白芨幼苗置于光照条件下，分别设置不同光照组：全光照、半阴影和全阴影。
-步骤2：观察幼苗的生长状况、根系形态和叶片数目，测定幼苗的鲜重和干重。
同时测定叶绿素含量和光合速率。
实验四：不同激素处理对白芨愈伤组织诱导的影响1.实验目的：研究不同激素处理对白芨愈伤组织诱导效果的影响。
2.实验材料和方法：-材料：白芨愈伤组织，不同激素溶液。
-方法：-步骤1：将白芨愈伤组织置于不同激素溶液中，分别设置IAA处理组、BA处理组和未处理对照组。
白芨组培苗种植技术
白芨组培苗种植技术白芨介绍白芨为兰科白芨属植物白芨的干燥根茎。
别名：连及草、甘根、白给、朱兰、紫兰。
具有补肺止血、消肿生肌等功能的常用中药。
主治肺结核咳血、支气管扩张咯血、胃溃疡吐血、尿血、便血等症；外用治外伤出血、烧烫伤、手足皲裂等症。
白芨止血效果特好，现在用白芨做的胶膜块，用于肝脾手术贴在刀口处，代替血钳子，效果特好。
具有快速凝血作用,可代血浆多用于外科手术。
主产于四川、云南、陕西、甘肃等省，全国各地有栽培。
形态特征多年生草本。
株高30～60厘米。
块茎肉质，白色，具2～3叉呈菱角状，有须根，常数个并生，总状花序顶生，常有花3～8朵；花淡紫红色，花瓣不整齐。
蒴果圆柱形，上有6条纵棱，两端稍尖。
种子细小，多数。
花期4-5月，果期7～8月。
白芨有两种，还有一种花黄白色，叶条状披针形，为狭叶白芨。
在紫红花中，又有大种、小种之分，其中以大种块茎产量较高。
生长特性喜温暖、阴凉和较阴湿的环境；不耐寒。
要求肥沃、疏松而排水良好的沙质壤上或腐殖质壤土。
要求栽培在阴坡或较阴湿的地块。
栽培技术1、选地整地选择疏松肥沃的沙质壤土和腐殖质壤土，温暖、稍阴湿环境，不耐寒。
排水良好的山地栽种时，宜选阴坡生荒地栽植。
把土翻耕20厘米以上，施厩肥和堆肥，每亩施农家肥1000千克，没有农家肥可撒施三元复合肥50公斤。
再翻地使土和肥料拌均匀。
栽植前浅耕一次，把土整细、耙平、作宽130--150厘米的高畦。
2、繁殖方法2.1 白芨用种子播种较难，分块茎繁殖较易。
9--11月初将白芨挖出，选大小中等，芽眼多，无病的块茎，每块带1--2个芽，沾草木灰后栽种。
开沟沟距20---25厘米，深5--6厘米，按株距10---12厘米放块茎一个，芽向上，填上，压实，浇水，覆草，经常保持潮湿，3--4月出苗。
亩用种苗100公斤。
2.2 白芨组培苗繁殖当白芨组培小苗在培养瓶中长到3-5cm高时,即可出瓶。
为使试管苗移栽后适应自然环境,移栽前要先揭开瓶盖，放在大棚室内自然光下炼苗7-10d,以提高小苗的抗性和适应性。
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①烧杯：用来盛放、溶解化学药剂等。常用的规格有50mL、100mL、250mL、500mL、1000mL。
②烘箱：用来烘干器械。
③恒温水浴：用来溶解琼脂等物质。
④玻璃搅拌棒：用来配制培养基。
⑤洗耳球：用来辅助吸取、转移少量液体。
⑥冰箱：用来贮存化学药剂、植物材料等。
⑦牛角勺：用来转移化学药剂。
环境：采用组培快繁技术进行白及的工厂化生产，包括外植体的筛选及获取、外植体灭菌诱导培养、无菌材料繁殖、继代扩繁、单株生根、出瓶炼苗、移栽等工艺程序。由于组培苗生产从进瓶到出瓶都是在无菌条件下完成，所以离不开一个无菌环境，但实验室的规模大小需依据生产规模来确定。组培实验室具体设计包括：
1、准备室：(1)进行药品、器具和实验材料的保存、消毒以及培养基的配制、灭菌、分装等。(2)器具的洗涤、干燥、消毒、储藏。(3)生理生化指标的测定等。
结合卢氏当地实际，探索采用白及无菌播种的技术路线，通过不同浓度和培方的培养基实现白及组织培养的最佳技术路线，建立白及快繁体系。白及组织培养完整的技术路线如下：
经过试验优化后的技术路线为：白及→种子（采集优质种源蒴果）→表面消毒→无菌播种（MS培养基等）→原球茎（分化诱导）→白及小苗（分株、扩繁）→壮苗生根（炼苗）→完整小植株→炼苗20-25天→移栽→白及
②酒精灯：用来进行接种器材的表面灭菌。
③细菌过滤器：用来过滤不能进行高温灭菌的试剂溶液。
④无菌滤纸：用来汲取器材、植物材料表面的水分。
⑤无菌脱脂棉：用来进行器械、植物材料表面的灭菌处理。
⑥高压灭菌锅：对培养基、接种器材进行灭菌处理。
⑦紫外线灭菌灯：用来对接种室、培养室、操作室等工作环境进行灭菌处理。
⑥各种规格的磨砂玻璃瓶：用来盛放培养母液，以及各种植物生长物质。
（3）计量器械
①量筒：用来量取一定体积的液体。常用的规格有25mL、50mL、100mL、500mL、1000mL。
②容量瓶：用来配制标准溶液。常用的规格有50mL、100mL、500mL、1000mL。
③大肚移液管：用来吸取定量溶液。常用的规格有1mL、5mL、10mL。
③将①中所取的各种物质(包括蔗糖)，加入煮好的琼脂中，再加水至L，搅拌均匀，配成培养基。
④用1mol/L的氢氧化钠或盐酸，滴入③中的培养基里，每次只滴几滴，滴后搅拌均匀，并用PH试纸（或酸度计）测其PH值，直到将培养基的PH值调到5.8-6.0。
⑤将配好的培养基，分装到组培瓶中，盖好瓶盖并做好标记，瓶中培养基的量约为20-25mL。
白及蒴果采回后，先用清水洗净，洗衣粉溶液浸泡10min再用清水冲刷洗净，在超净工作台上采用70%乙醇消毒30s，再用0.1%升汞消毒10-15min，用无菌水冲洗3-4次，在滤纸上吸干水分，从果实中部拨开，快速接种到培养基上。无菌播种培养基配方为：MS+6-BA0.05mg/L+NAA0.1-0.5mg/L，其中含蔗糖3%、琼脂粉0.7%、PH5.8。种子萌发条件为昼温20-25℃，夜温18-20℃，暗培养7d再转入光培养。观察种子萌发情况，以周围统计单位，统计萌发个数及生长情况，发现染菌需及时清理。
（1）制备母液
为了避免每次配制培养基都要对几十种化学药品进行称量，应该将培养基中的各种成分，按原量10倍、100倍或1000倍称量，配成母液。这样，每次配制培养基时，取其总量的1/10、1/100、1/1000，加以稀释，即成培养液。MS培养基主要包含5种主要成分：
大量元素：大量元素包括硝酸铵等用量较大的几种化合物。制备时，按表中排列的顺序，以其10倍的用量，分别称出并进行溶解，以后按顺序混在一起，最后加蒸馏水，使其总量达到1L，此即大量元素母液。
白及组织培养实施方案
一、白及简介
白及为兰科白及属多年生草本植物，又名甘根、连及草、地螺丝、羊角七、皲口药、利知子、刀口药、鱼眼兰等。分布在中国、日本以及缅甸北部，主产于贵州、四川、湖南、湖北、安徽、河南、浙江、陕西等地。其味苦、甘、涩,性凉,归肺、胃、肝经。以块茎供药用，能收敛止血，消肿生肌；治肺结核咳血，支气管扩张咯血、胃溃疡吐血、尿血、便血等症。外用治外伤出血、烧烫伤、手足皲裂等症。块茎含黏液质和淀粉等，可作糊料，在生物医药、保健食品、纺织印染、特种涂料和日用化工等方面有巨大的商业利用价值。又因白及为地生兰的一种，花开艳丽，被作为庭院、居室及园林景观绿化苗木大量应用。
④刻度移液管：用来吸取定量植物生长物质溶液。常用的规格有1mL、5mL、10mL(或可用移液器替换)。
⑤移液管架：用来放置、Байду номын сангаас定移液管。
⑥酸度计：用来检测培养基的pH。
⑦药物天平：用来称取配制培养基的药品。
⑧分析天平：用来称取少量有化学试剂，进行化学分析。
（4）灭菌器械
①磨砂口玻璃瓶：用来对植物材料进行表面灭菌。
培养基的成分比较复杂，为避免配制时忙乱而将一些成分漏掉，可以准备一份配制培养基的成分单，将培养基的全部成分和用量填写清楚。配制时，按表列内容顺序，按项按量称取，就不会出现差错。
（3）培养基的灭菌与保存
培养基配制完毕后，应立即灭菌。培养基通常应在高压蒸汽灭菌锅内，在压力0.1-0.15Mpa、温度122℃条件下，灭菌15—20min。期间需排出灭菌锅内的冷空气，具体操作方法为：通电后，待压力上升到0.05MPa时，打开放气阀，放出冷空气，待压力表指针归零后，再关闭放气阀。
以上各种混合液(母液)或单独配制药品，均应放入冰箱中保存，以免变质、长霉。至于蔗糖、琼脂等，可按配方中要求，随称随用。
（2）配制培养基的具体操作
①根据配方要求，用量筒或移液管从每种母液中分别取出所需的用量，放入同一烧杯中，并用粗天平称取蔗糖、琼脂放在一边备用。
②将①中称好的琼脂加蒸馏水300～400mL，加热并不断搅拌，直至煮沸溶解呈透明状，再停止加热。
（5）接种器械
①超净工作台：用来过滤通过接种工作台面的空气，以便进行无菌操作。
②小型喷雾器：装载灭菌药液，来给超净工作台等处喷雾灭菌。
③钝头镊子：在接种操作、继代培养时移取植物材料。
④尖头镊子：用来分离植物材料。
⑤解剖刀：用来切割植物材料。
⑥接种针：用来转移细胞团、愈伤组织。
（6）培养器械
①试管：用来作为外植体的培养容器。常用的规格有2cm×15cm、3cm×15cm。
器材：高压灭菌锅、超净工作台、电子分析天平（精度为千分之一）、电磁炉、接种消毒器、高效能培养架、医用小推车、日光灯、加湿器、紫外灯、晾瓶架、酸度计（或PH试纸）、试管、容量瓶、胶头滴管、试剂瓶、烧杯、试管架、量筒、玻璃漏斗、移液管、三角瓶、广口培养瓶、称量纸、毛刷、洗耳球、塑料筐、无菌脱脂棉、无菌滤纸、酒精灯、喷壶、橡胶手套、医用白大褂、紫外灯、镊子、接种针、剪刀、解剖刀、器械架、接种托盘等。
采用白及组织培养可在短时间内大量获取种苗，且成本相对较低，是提高白及产量的强有力措施。目前，国内研究资料报道的白及组织培养方法各异，所采用的外植体各不相同，且培养基及其中所加的植物生长调节剂种类和规格也千差万别。
二、白及组织培养技术路线
参照植物组织组织培养获得再生植株的方式，可通过4种途径获得白及再生植株：一是由愈伤组织形成不定芽再生植株；二是愈伤组织产生胚状体而再生植株；三是由侧芽或顶芽再生植株；四是由茎尖产生原球茎而再生植株。4种方式各有利弊，传统认为采用侧芽或顶芽发育途径获得的后代性状较稳定，但因为白及原球茎带有大量共生菌，组培过程中容易出现污染。
白及一般生于海拔110——3200m的山野、山谷较潮湿处或林下半遮阴地带，喜温暖、稍阴湿的环境，耐阴性强，忌强光直射，需排水良好、富含腐殖质的砂质土壤，稍耐寒，冬季可在地下越冬。白及能产生大量的种子(每个蒴果10～30万粒)，但这些种子没有胚乳，自然萌发率极低，繁殖困难，但白及胚的薄壁细胞贮存大量的蛋白质、油脂和碳水化合物，可作为种子萌发的营养成分，因此白及种子在保湿的情况下可以萌发，是兰科植物中种子易萌发的类型。传统的白及繁殖方法大多以分株为主，即将块茎分成小块种植，但繁殖系数低，大面积发展对种源消耗大，不宜推广且难以满足市场需求。
②培养皿：用来作为外植体的培养容器。常用的规格有直径9cm、12cm。
③锥形瓶：即三角烧瓶，主要作为培养器材，常用的规格有50mL、100mL。
④铝箔：用于培养容器封口。
⑤橡皮筋：用来束紧培养容器的封口材料。
⑥空调：用来调节操作间、培养室的温度。
药剂：硝酸铵（NH4NO3）、硝酸钾（KNO3）、氯化钙（CaCl2）、硫酸镁（MgSO4•7H2O）、磷酸二氢钾（KH2PO4）、碘化钾（KI）、硼酸（H3BO3）、硫酸锰（MnSO4•5H2O）、硫酸锌（ZnSO4•7H2O）、钼酸钠（Na2MoO4）、硫酸铜（CuSO4•5H2O）、氯化钴（CoCl2•6H2O）、乙二胺四乙酸二钠（Na2EDTA•2H2O）、硫酸亚铁（FeSO4•7H2O）、甘氨酸（C2H5NO2）、肌醇（C6H12O6）、烟酸（VB5）、盐酸吡哆醇（VB6）、盐酸硫胺素（VB1）、6-苄基腺嘌呤（6-BA）、萘乙酸（NAA）、腺嘌呤（AD）、赤霉酸（CA3）、蔗糖、琼脂
灭菌后的组培瓶取出后整齐摆放在室内，2h后即可冷却凝固成白色半透明状固体，经过灭菌的培养基要在配制后的一周内使用完，在多数情况下，应在灭菌后两周内用完。
2.外植体选择与消毒
选择合适的部位作为外植体，采回后经过适当的预处理，如清除残留的茎秆、剪去干枯的花序、分类筛选等，然后进行消毒处理。白及组织培养采用白及种子无菌播种的方法，因此要采集无杂菌感染、无病虫害、生长健壮的优良白及品种种子。实验选取白及种植基地的白及蒴果备用,蒴果采收时间为8月下旬至9月上旬。
三、实验准备：
种子：白及的蒴果中有大量的种子，并且蒴果的消毒较方便，污染率低。另一方面用种子作为外植体操作较容易，并且组培过程中萌发率高，培养的幼苗生长较为迅速，因此，种子作为外植体应用比较广泛，大部分的组培研究都选用种子。本实验选取卢氏本地优质白及（Bletillastriata(Thunb．)Reichb．f．）蒴果，采收时间为8月下旬至9月中旬，此时间段胚龄大约为第8周至第22周。