细胞培养基选择

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常见细胞系使用的培养基

常见细胞系使用的培养基

常见细胞系使用的培养基细胞系培养基是在细胞体外培养时提供营养、调节生理功能和维持细胞生长所必需的基础培养液。

常见的细胞系培养基包括以下几种:1.基本培养基:(a) Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM):DMEM是最常用的细胞培养基之一,可以满足大多数哺乳动物细胞的生长需求。

它包含丰富的氨基酸、维生素和硒等营养物质,pH 为7.4,细胞因子和血清可以根据需要添加。

(b)RPMI1640:RPMI1640是一种适用于淋巴细胞等肿瘤和免疫细胞的培养基。

它还包含可溶性蛋白、胎牛血清、植物血清和病毒适配因子等。

(c) Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM):EMEM是一种全面的培养基,适用于广泛的细胞系,并可添加血清、血清替代物或血清补充物来满足特定细胞系的需求。

(d) Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM):IMDM是用于骨髓细胞和其他白细胞的培养基,也适用于一些其他特定的细胞系。

2.补充因子:(a)L-谷氨酸:可以通过促进蛋白质合成以及为细胞提供能量,促进细胞生长。

(b)胱氨酸:可以作为抗氧化剂,保护细胞免受氧化损伤。

3.血清和血清替代品:(a)胎牛血清(FBS):FBS是最常用的培养基补充物之一,因为它含有多种生长因子、蛋白质和营养物质,可以促进细胞生长和增殖。

(b)马血清:适合一些特定的细胞系,可以替代FBS。

(c)血清替代品:血清替代品通常是人类血浆衍生物,不含动物血清,可以减少细胞系受到的外源性感染风险。

4.碳源和氮源:(a)葡萄糖:葡萄糖是最常用的碳源,可以提供细胞的能量需求。

(b)氨基酸:提供细胞各种生物合成的原料。

(c)谷氨酸/谷氨酰胺:作为氨基酸的前体,是合成蛋白质和核酸的重要物质。

5.生长因子和维生素:(a)血液集落刺激因子(CSFs):CSFs可以促进造血系统细胞系的增殖和分化。

细胞培养的最佳生长条件和培养基配方

细胞培养的最佳生长条件和培养基配方

细胞培养的最佳生长条件和培养基配方细胞培养是一种很重要的实验技术,它可以帮助我们了解和研究细胞的生命活动过程。

在进行细胞培养之前,我们需要明确和了解细胞培养的最佳生长条件和培养基配方。

这些因素直接影响着细胞的生长和繁殖,因此选择合适的生长条件和培养基配方对于获得高质量的细胞培养是至关重要的。

细胞培养的最佳生长条件受到多个因素的影响,其中最重要的是温度、湿度和二氧化碳浓度。

对于大多数哺乳动物细胞而言,理想的生长温度往往在37摄氏度左右。

较低的温度会减缓细胞代谢活动,而过高的温度则会导致细胞脱水、代谢异常甚至死亡。

此外,细胞培养的湿度也非常重要。

过低的湿度会导致细胞脱水,而过高的湿度则可能引发细菌或霉菌的生长,对细胞培养产生不利影响。

通常情况下,细胞培养时会在培养器内加入一定浓度的二氧化碳,以维持细胞培养的最佳PH值。

大多数情况下,使用5% CO2浓度可以满足细胞的生长需求。

除了生长条件外,培养基配方也是细胞培养中不可或缺的因素。

通常情况下,培养基可以分为基础培养基和补充物两部分。

基础培养基提供了细胞所需的基本营养物质,如氨基酸、糖类、无机盐和维生素等。

常用的培养基包括DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium)、RPMI-1640和MEM (Minimum Essential Medium)等。

这些培养基在组成和配方上略有区别,根据细胞的类型和需求,选择合适的基础培养基是十分重要的。

除了基础培养基外,补充物也是细胞培养中必不可少的。

补充物可以提供特定的生长因子、激素、细胞黏附因子和补充物等,以满足不同细胞的特殊需求。

常见的补充物有胎牛血清、人血清、胰岛素、转铁蛋白和脯氨酸等。

胎牛血清(Fetal Bovine Serum,FBS)是一种广泛使用的培养基补充物,它提供了丰富的生长因子、激素和营养物质,可以促进细胞的快速生长和繁殖。

然而,由于FBS来源和成分的不确定性,一些研究也开始使用人血清作为替代品,以减少动物血清对实验结果的可能影响。

动物细胞培养的注意事项

动物细胞培养的注意事项

动物细胞培养的注意事项动物细胞培养是生物学研究和医学实验中重要的工具之一。

在进行动物细胞培养时,需要注意以下几个方面的问题,以确保实验的顺利进行和结果的准确性。

1. 培养基的选择选择适当的培养基是动物细胞培养的基础。

不同种类的动物细胞对培养基的要求不同,因此在培养细胞前需要了解所使用细胞的特点,选择合适的培养基。

常用的培养基包括DMEM、RPMI-1640等,可以根据实验需求添加适当的补充物。

2. 细胞的来源细胞的来源对实验结果有重要影响。

通常,细胞可以从动物组织中分离得到,也可以通过购买商业化的细胞株获得。

在选择细胞来源时,需要考虑细胞的纯度、稳定性和应用范围等因素。

3. 细胞的处理和传代在进行细胞培养时,需要注意细胞的处理和传代方法。

细胞的处理包括细胞的分离、传代和冻存等步骤。

分离细胞时应注意使用适当的酶或缓冲液,避免对细胞造成损伤。

传代时要控制细胞的密度和培养时间,避免细胞过度增长或老化。

4. 培养环境的控制细胞的培养环境对细胞的生长和功能表达有重要影响。

在培养细胞时,需要控制培养箱的温度、湿度和二氧化碳浓度等因素。

通常细胞培养温度为37摄氏度,CO2浓度为5%。

同时,还需要注意培养器具和培养基的无菌操作,避免细胞受到外源性微生物的污染。

5. 细胞的检测和鉴定在进行动物细胞培养时,需要对细胞进行检测和鉴定,以确保细胞的纯度和功能。

常用的细胞检测方法包括形态学观察、细胞计数、细胞周期分析和免疫细胞化学等。

此外,还可以使用PCR和酶切等分子生物学方法对细胞进行鉴定。

6. 细胞的存储和传输细胞的存储和传输是细胞培养的常用操作。

存储细胞时,可以使用液氮冻存或干冰冻存等方法,注意选择适当的冻存液和冻存温度。

传输细胞时要注意包装和运输条件,避免细胞受到振动和温度变化等因素的影响。

7. 实验的伦理和安全在进行动物细胞培养实验时,需要遵守伦理规范和安全操作。

尊重动物权益,遵循实验动物使用的伦理原则。

同时,要注意实验室的安全措施,如佩戴实验手套、口罩和实验服,避免对自身和他人造成伤害。

衣原体的细胞培养方法

衣原体的细胞培养方法

衣原体的细胞培养方法引言:衣原体是一类常见的细菌性病原体,它可以感染人体的上皮细胞,引发多种疾病。

为了研究衣原体的生物学特性、发病机制以及寻找有效的治疗方法,科学家们进行了大量的细胞培养实验。

本文将介绍衣原体的细胞培养方法,包括培养基的选择、细胞的处理和培养条件的调控等方面。

一、培养基的选择衣原体的细胞培养需要特定的培养基,常用的培养基包括DMEM、RPMI-1640和MEM等。

这些培养基中含有丰富的营养物质,如氨基酸、葡萄糖、维生素等,可以提供衣原体生长所需的营养物质。

同时,培养基中还需要添加适当的抗生素,如青霉素、链霉素等,以防止细菌和真菌的污染。

二、细胞的处理在进行衣原体的细胞培养前,需要对细胞进行处理。

一般情况下,我们可以选择人类上皮细胞作为培养细胞。

首先,将细胞接种在含有培养基的培养皿中,并进行预培养,使细胞附着在培养皿上。

接着,使用抗生素处理细胞,以杀死潜在的细菌和真菌。

最后,用PBS缓冲液清洗细胞,以去除培养基中的抗生素和细胞碎片。

三、衣原体的感染在细胞处理完成后,可以将衣原体接种到培养皿中,使其感染细胞。

首先,将衣原体悬液加入培养基中,将其与细胞充分接触。

接着,将培养皿放入恒温培养箱中,保持适宜的温度和湿度,使衣原体能够在细胞内生长和复制。

通常情况下,衣原体的感染需要一定的时间,具体的感染时间可以根据实验的需要进行调整。

四、培养条件的调控为了使衣原体能够正常生长和复制,需要对培养条件进行调控。

首先,保持适宜的温度和湿度,一般情况下,37摄氏度和5%二氧化碳是较为常用的条件。

其次,定期更换培养基,以提供充足的营养物质。

此外,还可以添加一些辅助因子,如胎牛血清和胰蛋白酶等,促进衣原体的生长和复制。

五、细胞的观察和检测在进行衣原体的细胞培养过程中,我们可以通过显微镜观察细胞的形态和数量变化,以判断衣原体的感染情况。

此外,还可以使用PCR、免疫荧光染色等方法,检测衣原体的存在和复制程度。

如何选择合适的培养基和培养条件

如何选择合适的培养基和培养条件

如何选择合适的培养基和培养条件在生物科学研究中,细胞培养是非常重要的实验手段之一。

通过培养细胞,我们可以对其生长、分化和生物活性等进行深入的研究。

而要成功地培养细胞,选择合适的培养基和培养条件是至关重要的。

首先,我们需要了解细胞的类型和特性。

不同种类的细胞在生理和生化特性上存在差异,因此需要针对不同的细胞类型选择相应的培养基。

通常情况下,培养基可以分为无血清培养基和含血清培养基两类。

无血清培养基是指不含动物血清成分的培养基,主要适用于原代细胞的培养以及特殊要求的细胞系。

而含血清培养基则包含动物血清中的多种因子和营养物质,适用于细胞系的连续传代和大规模培养。

其次,在选择培养基时,需要考虑到细胞的营养需求和生长要求。

细胞需要获得充足的营养物质来维持其生长和增殖。

常见的培养基成分有运输生理盐水、糖类、氨基酸、维生素、抗生素等。

此外,还需要注意培养基的pH值和渗透压等因素,以保持培养环境的稳定性。

在细胞培养的过程中,我们还需要为细胞提供适当的温度、湿度和气体环境。

一般来说,细胞的适宜生长温度为37摄氏度,而湿度应保持在90%左右。

另外,细胞还需要充足的氧气和二氧化碳供应,以维持其正常代谢活动。

此外,细胞培养中还需要注意细胞的纯度和无菌性。

为了确保细胞的纯度,可以通过细胞的形态特征、生长速度和表面标记物等进行鉴定。

而为了保持培养环境的无菌性,我们需要严格遵守无菌操作的要求,并使用高质量的培养器具和培养基。

在选择培养基和培养条件时,还需要考虑到实验的目的和需求。

有些实验可能要求细胞的生长周期加快,可以选择富含生长因子和促进细胞增殖的培养基。

而有些实验则需要细胞的分化或特定功能的表达,需要通过添加不同的因子和调节培养条件来实现。

综上所述,选择合适的培养基和培养条件是成功进行细胞培养的关键。

针对不同的细胞类型和实验需求,我们需要根据细胞的特性和要求来选择合适的培养基,并提供适当的培养条件。

只有在确保细胞获得足够的营养和生长环境的情况下,我们才能获得可靠的实验结果,并推动细胞生物学研究的进一步发展。

细胞培养基简介

细胞培养基简介

依据实验目的选择培养基
增殖实验
选择能够支持细胞快速增殖的培养基,以便在短时间 内获得大量细胞。
诱导分化实验
选择能够诱导细胞分化的培养基,以便观察细胞分化 过程和分化后的表型特征。
基因转染实验
选择能够支持基因转染的培养基,以便将外源基因导 入细胞并观察其对细胞表型的影响。
优化培养基配方
调整营养成分
较高。
无血清培养基
总结词
无血清培养基是指在培养基中不添加任何动物来源的血清,完全由化学成分合成的培养基。
详细描述
无血清培养基不含动物来源的血清,而是通过添加多种化学成分来模拟血清的功能,如添加蛋白质、生长因子等 。无血清培养基适用于生产疫苗、单克隆抗体等生物制品,因为其成分明确、质量控制方便,且能够避免血清批 次差异对细胞培养的影响。
再生医学
细胞培养基在再生医学领域也有广泛应用,如组织工程、器官再生等 。
发展趋势
1 2 3
新型细胞培养基的开发
随着生物技术的不断发展,对新型细胞培养基的 需求越来越高,如无血清培养基、个性化培养基 等。
细胞培养基的个性化定制
根据不同细胞类型和实验需求,细胞培养基需要 进行个性化定制,以满足特定实验条件和生产需 求。
细胞培养基市场的主要参与者包括生 物技术公司、科研机构和制药企业等 。
细胞培养基市场主要集中在美国、欧 洲和亚太地区,其中亚太地区增长最 快。
应用领域
生物制药
细胞培养基是生物制药生产过程中必不可少的原料之一,用于大规 模培养细胞,生产重组蛋白、单克隆抗体等生物药物。
科学研究
细胞培养基广泛应用于生命科学、医学、药学和农业等领域的基础 研究和应用研究,如肿瘤研究、免疫学研究、干细胞研究等。

选择培养基

选择培养基引言:在生物科学研究和实验室工作中,选择正确的培养基是非常重要的。

培养基是供养细胞、微生物或其他生物体进行生长和繁殖的培养环境。

不同的生物体需要不同的培养基来提供所需的营养物质和环境条件。

本文将探讨选择培养基的重要性以及如何根据特定需求选择合适的培养基。

选择培养基的重要性:选择适当的培养基对于生物体的健康生长和研究结果的准确性至关重要。

不合适的培养基可能会导致细胞死亡、微生物感染、菌落不清晰等问题。

培养基的选择取决于多个因素,包括生物体的类型、目标实验的目的和特定的研究要求。

如何选择培养基:1.了解生物体类型:首先要了解要培养的生物体类型,例如细胞、微生物还是其他生物体,这将有助于确定选择培养基的范围。

不同类型的生物体具有不同的生长需求和生态环境。

2.了解生物体的特性:了解生物体的特性对于选择培养基至关重要。

例如,细胞培养通常需要富含营养物质的培养基,而微生物培养可能需要更适合其生理特性的培养基。

3.考虑营养物质和环境条件:根据所需的营养物质和环境条件来选择培养基。

一般来说,培养基中包含的主要成分包括碳源、氮源、维生素和矿物质等。

不同的生物体对这些成分的需求不同,因此需要根据特定需求来选择合适的培养基。

4.考虑生长因子和添加物:一些生物体在生长过程中需要特殊的生长因子或添加物来促进其生长和繁殖。

这些因子可以是激素、生长因子、抗生素等。

根据所研究的生物体类型和特性,选择含有适当生长因子和添加物的培养基。

5.考虑杂质和污染的风险:一些培养基可能带有杂质或受到污染,这可能会影响实验结果的准确性。

因此,选择质量良好、纯度高的培养基非常重要。

避免使用已过期的培养基,以及对培养基进行适当的质量控制和消毒处理,以减少污染的风险。

常用的培养基类型:根据生物体的类型和特性,人们开发了许多常用的培养基。

下面列举了几种常见的培养基类型:1.液体培养基:液体培养基是一种水溶性培养基,适用于细胞培养和微生物培养。

hmc3细胞培养技巧

hmc3细胞培养技巧
HMC3细胞是一种人类脑胶质瘤细胞系,广泛应用于神经科学研究。

在进行HMC3细胞的培养过程中,需要注意以下几个
技巧。

1. 培养基的选择:HMC3细胞适合在DMEM/F12培养基中进
行培养,其中含有10%的胎牛血清(FBS)和1%的青霉素/链霉素。

同时,可以添加一些生长因子,如EGF和FGF。

2. 细胞的传代:当HMC3细胞达到80%的密度时,可以进行
传代。

首先用PBS缓冲液洗涤细胞,然后加入0.25%的胰蛋
白酶进行消化。

消化时间一般为3-5分钟,视情况而定。

消化后加入培养基停止消化,离心收集细胞。

将细胞按照比例分配到新的培养皿中,加入新的培养基进行培养。

3. 细胞的冻存:在进行HMC3细胞的冻存前,需要保证细胞
处于最佳状态。

可以用PBS缓冲液洗涤细胞,然后加入0.25%的胰蛋白酶进行消化。

消化后加入培养基停止消化,离心收集细胞。

将细胞用冷冻液冷冻保存。

4. 细胞的恢复:在进行HMC3细胞的恢复前,需要将冷冻液
快速解冻至37℃。

然后将细胞转移到新的培养皿中,加入DMEM/F12培养基进行培养。

5. 细胞的检测:在进行HMC3细胞的检测时,可以采用荧光显微镜观察细胞的形态变化。

同时,也可以采用PCR或Western Blot等技术检测细胞中特定基因或蛋白的表达情况。

总之,在进行HMC3细胞的培养过程中,需要注意以上几个技巧。

只有保证每个步骤都正确无误,才能获得高质量的实验结果。

干细胞培养过程中的培养基选择与调整技巧

干细胞培养过程中的培养基选择与调整技巧干细胞是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的细胞,具有重要的研究和应用前景。

在干细胞培养过程中,培养基的选择和调整是非常关键的,可以直接影响到干细胞的生长、增殖和分化能力。

本文将介绍干细胞培养过程中培养基的选择和调整技巧。

一、培养基的选择干细胞的培养基通常包括基础培养基和补充物。

基础培养基提供了细胞生长所需的基本营养物质,而补充物可以调整培养基的成分,满足干细胞的特定需求。

常用的基础培养基主要包括无血清培养基和血清培养基。

无血清培养基通常采用动物血清替代物(如胎牛血清替代物,FBS),优点是能够降低培养基中的细菌和病毒污染风险,减少样品间的批次差异。

但无血清培养基的复杂配方和高成本是制约其广泛应用的主要因素。

相比之下,血清培养基更容易获取和使用,但存在许多负面因素,如潜在的污染风险和困扰实验结果的变异性。

当选择基础培养基时,需要考虑以下几个因素:1. 细胞类型:不同类型的干细胞对培养基成分的需求是不同的,如胚胎干细胞和间充质干细胞等对细胞因子和生长因子的需求有所差异。

2. 应用需求:如果是进行分化研究,需要选择适合特定分化类型的培养基;如果是进行维持和增殖,需要选择适合细胞增殖的培养基。

3. 实验目的:如果是进行基础研究,可以选择商业化的基础培养基;如果是进行应用研究或临床转化,可以选择自定义培养基。

在选择补充物时,需要根据细胞类型和实验需求来确定。

常用的补充物包括细胞因子、生长因子、维持因子和激素等。

补充物的种类和浓度应根据实验的需要进行调整。

二、培养基的调整技巧1. pH值的调整:维持适宜的pH值对于培养基的稳定性和细胞的生长非常重要。

在常温下,培养基的pH值通常保持在7.2-7.4之间。

可以通过添加缓冲液来调整培养基的pH值。

2. 渗透压的调整:细胞在维持稳态的过程中对渗透压非常敏感。

如果渗透压过高或过低,都会影响细胞的正常生理功能。

调整培养基的渗透压可以通过添加渗透剂(如蔗糖或甘露醇)来实现。

hacat细胞培养注意事项

hacat细胞培养注意事项
Hacat细胞是一种人类皮肤角质细胞系,广泛应用于皮肤生理和病理相关研究中。

下面是Hacat细胞培养注意事项:
1. 培养基的选择:选择适合Hacat细胞生长的培养基,常用的培养基包括DMEM/F12、DMEM等,其中添加10%的胎牛血清能够提高细胞生长速率和细胞存活率。

2. 培养条件的控制:Hacat细胞在37℃、5% CO2的环境下生长,要保证无菌操作,避免细胞污染。

3. 细胞的传代:Hacat细胞传代次数过多容易引起细胞凋亡和变异,建议在80%~90%的细胞密度下进行传代。

传代时需用胰酶等消化酶将细胞从培养瓶中剥离,建议每次传代不超过三次。

4. 细胞的冻存:Hacat细胞可在低温下冻存保存,但要注意细胞密度不宜过低,最好在80%~90%的密度下进行冻存,并使用10% DMSO等保护剂冻存,避免细胞死亡或变异。

5. 细胞的检测:为保证Hacat细胞的纯度和鉴定,建议进行细胞形态观察、细胞生长曲线分析、细胞标记物检测等方法进行检测。

同时,也要保存好细胞的相
关信息和记录,便于日后查阅和使用。

以上是Hacat细胞培养注意事项的一些基本要求,实验室研究人员需要严格按照操作规范进行操作,以保证实验结果的准确性和可重复性。

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细胞培养基的分类培养细胞的完全培养基由基础培养基(如MEM)和添加剂(如血清或无血清培养用的某些确定的激素及生长因子)组成,培养基的配方一直在改进,其中包括抗生素和抗有丝分裂剂等等。

一、基础培养基绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。

最广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。

而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和代谢添加剂(例如核苷酸)。

MEM/F12 这两种培养基各取1/2,形成神经生物学最通用的培养基。

Dulbecco`s改良培养基——DMEM,现应用于快速生长的细胞,同MEM含有相同的营养成分,但浓度高出2~4倍。

选择某种培养基,应仔细了解成分表,应知道大多数情形下培养基都有不足。

例如,有些培养基在氨基酸中包括有谷氨酸,而这种培养基虽广泛用于神经生物学领域,但它对某些对谷氨酸敏感的可能有细胞外毒性损伤的神经元而言,则并非最佳选择,特别是如果神经元生长在缺乏胶质的环境中时。

F12中含有硫酸亚铁,据报道也有神经毒效应。

在所有这些培养基中,谷氨酸比其他氨基酸有更高的浓度,这是因为它具有不稳定性以及在许多细胞培养中它常用作碳源。

对于神经元的培养常常在基础培养基中增加葡萄糖的含量到0.6%或者加入丙酮酸(若培养基中这两种物质缺乏时)。

MEM与F12均要用5%的CO2来平衡,DMEM含更高浓度的NaCO3,要用10%的CO2来平衡,当然也可以在较低CO2浓度下使用。

这些基础培养基的组成成分是建立在对不同细胞系生长的研究之上的,但通常在原代培养中使用也能有比较令人满意的结果。

原则上,HEPES作为缓冲剂可用来代替碳酸氢盐,以解除需要高浓度CO2培养环境的限制。

实际操作中并非如此简单。

显然,溶解的CO2与碳酸氢盐对良好的细胞生长是重要的。

Leiboviz`s L15培养基可用来在大气环境中令神经细胞生长,该培养基采用了与众不同的BSS作基础,它含有高浓度的氨基酸来提高缓冲能力,培养基中使用半乳糖作碳源,以阻止培养基中乳酸形成,少量溶解的CO2由丙酮酸代谢产生。

这一培养基的优点是明显的,特别是在保持较高CO2有困难时,例如在长时间的显微操作及生理学研究中。

L15培养基已用来成功的培养了外周神经元,但尚未在CNS神经元的发育研究中全面检测过。

(日水培养基NISSUI MEM 细胞培养原代传递用组织(细胞)培养产品α-MEM ①05921-102g (10.2g for 1L)Nissui 含核(糖核)苷、脱氧核(糖核)苷,不含碳酸氢钠。

该培养基比Eagle’s MEM多8种氨基酸、4种维生素、丙酮酸、4种核苷、4种脱氧核苷。

RTα-MEM ②05922-101g (10.1g for 1L)Nissui 不含核(糖核)苷、脱氧核(糖核)苷、碳酸氢钠。

RTDulbecco’s Modifie d Eagle Medium ①0688-100g ; 0316-500g (10.0g for 1L)Nissui 不含碳酸氢钠。

该培养基比Eagle’s MEM氨基酸浓度多2倍、维生素浓度多4倍,并含有甘氨酸、L-丝氨酸、丙酮酸盐和微量铁离子。

该培养基广泛用于病毒研究、原生细胞、单细胞培养。

RTDulbecco’s Modified Eagle Medium ②05919-100g (9.5g for 1L)Nissui 不含L-谷氨酸、碳酸氢钠。

能高压灭菌(121℃,15分钟)。

该培养基比Eagle’s MEM 氨基酸浓度多2倍、维生素浓度多4倍,并含有甘氨酸、L-丝氨酸、丙酮酸盐和微量铁离子。

该培养基广泛用于病毒研究、原生细胞、单细胞培养。

RTEagle’s MEM ① -622105900-100g ; 00680-500g (9.4g for 1L)Nissui 含有卡那霉素,不含L-谷氨酸、碳酸氢钠。

能高压灭菌(121℃,15分钟)。

特别有助于HeLa、L和其他细胞系的生长。

RTEag le’s MEM ②05901-100g (9.4g for 1L)Nissui 含有卡那霉素,不含酚红、L-谷氨酸、碳酸氢钠。

能高压灭菌(121℃,15分钟)。

RTEagle’s MEM ③05902-100g (9.4g for 1L)Nissui 不含卡那霉素、酚红、L-谷氨酸、碳酸氢钠。

能高压灭菌(121℃,15分钟)。

RTEagle’s MEM ④05903-100g (10.3g for 1L)Nissui 含有卡那霉素,不含L-谷氨酸、碳酸氢钠。

用于悬浮培养。

能高压灭菌(121℃,15分钟)。

RTEagle’s MEM Amino Acids and Vitamins Medium05904-20g (0.88g for 1L)Nissui 该培养基用作2-5倍浓缩液,加热至37℃并溶解,可用于少数细胞培养、悬浮培养、在半固态琼脂上形成细胞群落或斑块。

RTES Medium05971-100g (9.7g for 1L)Nissui 含有卡那霉素,不含L-谷氨酸、碳酸氢钠。

能高压灭菌(121℃,15分钟)。

该培养基比Eagl e’s MEM多添加了7种氨基酸、丙酮酸钠和维生素B12。

RTHam’s F12 Medium05910-100g (10.6g for 1L)Nissui 不含碳酸氢钠。

该培养基用于克隆哺乳动物细胞的增殖,特别用于中国田鼠细胞。

RTMedium 1990683-100g ; 0681-500g (9.8g for 1L)Nissui 不含碳酸氢钠。

该培养基不能增殖细胞,但能用于病毒学研究中的细胞培养,并且可用于生产脊髓灰质炎疫苗。

RTRPMI 1640 Medium ①0684-100g ; 0682-500g (10.4g for 1L)Nissui 不含碳酸氢钠。

用于悬浮细胞培养。

RTRPMI 1640 Medium ②0689-100g ; 0687-500g (10.2g for 1L)Nissui 不含L-谷氨酸、碳酸氢钠。

能高压灭菌(121℃,15分钟)。

该培养基能克服一般RPMI 1640 培养基只能膜过滤除菌而难以除去诸如支原体的缺点,用该培养基培养小鼠和人的白血病细胞、各种细胞系和KATO-III细胞株能显著增强它们的活性。

RTSFM-10105963-基础培养基1×12.5g / 补充物A 1×10ml(冻干) / 补充物B 1×5ml (12.5g for 1L) Nissui SFM-101是一种无血培养基,对细胞培养和帮助小鼠杂交瘤细胞生产抗体作用显著。

由于是无血清配方,减少了牛血清各批次间成分不同而对试验的干扰。

低蛋白含量,使得后期对细胞产物如单克隆抗体和生物活性物质的收集和纯化更加便利。

RTUC Medium 20205923-103g (10.3g for 1L)Nissui 不含碳酸氢钠。

UC Medium 202是培养CHO细胞的低浓度血清培养基,用于细胞增殖和生产细胞产物。

该培养基加入1%胎牛血清培养CHO细胞的效果等同于α-MEM加入5%胎牛血清。

RTEagle’s MEM Liquid06650-500mlNissui 含卡那霉素、L-谷氨酸、碳酸氢钠。

特别适用于HeLa、L或其他细胞系的培养。

RTRPMI 1640 Liquid06652-500mlNissui 含L-谷氨酸、碳酸氢钠。

用于悬浮培养。

RTSFM-101 Liquid06654-500mlNissui 即用型培养基,无须添加其他物质。

SFM-101是一种无血培养基,对细胞培养和帮助小鼠杂交瘤细胞生产抗体作用显著。

由于是无血清配方,减少了牛血清各批次间成分不同而对试验的干扰。

低蛋白含量,使得后期对细胞产物如单克隆抗体和生物活性物质的收集和纯化更加便利。

RTDulbecco’s PBS㈠05913-100g (9.6g for 1L)Nissui 能高压灭菌(121℃,15分钟)或膜过滤灭菌。

RTEarle’s Solution05907-100g (8.6g for 1L)Nissui 不含碳酸氢钠。

RTHanks’ Solution ①05905-100g (9.8g for 1L)Nissui 不含碳酸氢钠。

RTHanks’ Solution ②05906-100gNissui 不含酚红、碳酸氢钠。

用于免疫学实验、透析或其他。

RTDulbecco’s PBS Metal Salt Solution05914-10ml (1.0ml for 1L)NissuiRTGlutamine05908-0.3g (一个包装中含0.3g灭菌、冻干的谷氨酰胺)Nissui 溶液用于高压灭菌的无L-谷氨酸培养基的补充物,如Eagle’s MEM。

RT)二、血清细胞在单纯的基础培养基中不能存活,在特殊类型的细胞培养中必须提供某些痕量营养物质及生长因子才能使细胞得以生长并维持生长状态。

基础培养基常常要添加血清,血清终浓度多为5~20%。

特殊用途的血清来源须用经验确定,广泛应用的血清种类有马血清与胎牛血清。

胎牛血清中富含有丝分裂因子,常选其作增殖细胞用的血清,也用于细胞系和原代培养。

而马血清常常用来作有丝分裂后的神经元培养。

然而,很多人也将胎牛血清用于神经元培养,也有人用马血清来培养胶质细胞。

用大鼠进行神经元培养的某些研究者喜欢使用同型血清;人类的胎盘血清,亦曾用于神经组织的器官类型的培养,也用在一些特殊培养种类中。

血清的不同批号含有不同的成分,所以许多人发现,应该在使用前对血清进行测试。

大多数试剂商提供样品,所满意的批号即可选用,这样可以一次得到足够一年用量的血清,血清在使用前通常在56℃加热30分钟,这一过程称为灭活。

三、无血清培养基1979年神经细胞培养出现了一个重要进展,用化学添加剂即可维持神经细胞存活与生长而不需要在培养基中添加血清。

其工作基础是用合适的激素、营养物和促贴壁的物质的组合置换培养基中的成分,最后找到了适合大多数细胞培养的试剂配方,该配方称为N2,专门用于神经细胞培养,最早是用在B104大鼠神经母细胞瘤细胞系的培养。

它的基础培养基是1:1的DMEM与H12的混合液,添加了胰岛素、转铁蛋白、黄体酮、腐胺和硒。

胰岛素和胰岛素样生长因子对于大多数类型细胞的存活和生长有重要作用,硒是谷胱甘肽产生的合作因子,可能有助于过氧化物和超氧化物的水解,有报道说还能防止细胞的光照损伤。

随后的其他配方如N1N3则含有较低浓度的转铁蛋白。

未料到的是上述配方构成的培养基可以支持神经母细胞瘤细胞系快速增殖,随后又发展了能支持原代培养的各种神经元生长的培养基,这种培养基在许多实验室里已取代了有血清培养。

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