高效液相色谱_二极管阵列检测法检测蜂蜜中外源性_淀粉酶残留量
蜂蜜四环素判定依据
蜂蜜四环素判定依据
蜂蜜中是否含有四环素残留物的判定依据有以下几项：
1. 化学分析：使用高效液相色谱、气相色谱或质谱等分析方法，检测蜂蜜中是否含有四环素类药物残留。
2. 光谱分析：通过紫外-可见光谱或红外光谱分析，检测是否
存在特征性的四环素吸收峰。
3. 生物学试验：使用适当的生物学试验方法，如生物感应、细菌退色法等，来检验蜂蜜中是否含有四环素。
4. 磁性粒子分析：利用磁性粒子与四环素类药物结合的特性，通过磁性测定的方法，检测蜂蜜中是否含有四环素。
需要注意的是，以上方法仅为一些常用的判定依据，具体的判定依据可能会因不同国家、地区以及检测机构的要求而有所差异。
无论采用何种方法，检测蜂蜜中是否含有四环素都需要进行科学的实验和数据分析，以保证结果的准确性和可靠性。
固相萃取-高效液相色谱-二极管阵列检测法测定饮料中9种人工合成着色剂
固相萃取-高效液相色谱-二极管阵列检测法测定饮料中9种人工合成着色剂作者：汪强黄宇来源：《食品安全导刊》2021年第04期摘要：本文介绍了使用固相萃取-高效液相色谱-二极管阵列检测技术来简便快捷地检测饮料中柠檬黄、新红、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、诱惑红、亮蓝、赤藓红这9种人工合成着色剂含量的方法。
样品经PWAX固相萃取柱净化，采用串联两根Thermo BDS C18色谱柱（4.6×150mm，5μm），以甲醇和0.02mol/L乙酸铵溶液为流动相进行梯度洗脱，DAD检测波长为254nm，以保留时间和待测物的紫外吸收光谱进行定性分析、外标法进行定量分析。
结果显示，9种人工合成着色剂的线性范围为0.5～50mg/L（r2>0.999），检出限为0.11～0.39mg/kg，平均回收率为81.5%～102.2%，相对标准偏差为0.23%～2.24%。
结论为，该方法可实现对饮料中9种合成着色剂的同时检测，具有快捷、准确、灵敏的特点。
关键词：固相萃取高效液相人工合成着色剂饮料在现代食品工业中，各种食品添加剂被频繁使用。
其中，人工合成着色剂具有色泽鲜艳、着色能力强、性质稳定、价格低廉等特点，因而在各式饮料、糕点等的配料表中频频“曝光”。
殊不知，五彩斑斓的人工合成着色剂主要以苯、甲苯、萘等芳香族化工产品为主要原料，经过磺化、卤化、偶氮化等有机反应合成而来，过量摄入人工合成着色剂会对人体造成损害[1-3]。
因此，《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》（GB 2760-2014）[4]中对柠檬黄、新红、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、诱惑红、亮蓝、赤藓红这9种人工合成着色剂的使用范围及最大使用量作出了明确规定。
为了避免企业超量使用或超范围使用人工合成着色剂，故需要通过简单、快捷的检测手段对市场上流通的产品进行监管。
目前，人工合成着色剂的检测方法主要有高效液相色谱法、液相色谱-质谱联用法、薄层色谱法、毛细管电泳法等[5-9]。
高效液相色谱测定蜂蜜中的脱落酸、黄酮和酚酸
SUN Chong-zhen, WANG Chao, CAI Zi-zhe, CHEN Yan-ting, WU Xi-yang*
(Department of Food Science and Engineering, Jinan University, Guangzhou 510632, Guangdong, China) Abstract: Flavonoids( rutin, myricetin, quercetin, naringenin, luteolin, keampferol and apigenin), phenolic acids (gallic acid, catechin, caffeic acid, α-catechin, p-coumaric acid, ferulic acid and 3,4-dimethoxycinnamic acid ) and abscisic acid in eight different kinds of honeys (lichee honey, longan honey, loquat honey, linden honey, date honey, lenourus honey, osmanthus honey, and Chinese milk vetch honey) were analyzed by HPLC-PDA. There were significant differences in the contents of abscisic acid among different samples. The content of abscisic acid was ranged from 16.42 μg/100 g (osmanthus honey) to 1321.91 μg/100 g (lichee honey). Total phenolic contents of eight honey samples varied from 371.64 to 3449.14 μg/100 g honey . Among them, α-catechin was only be detected in longan honey, loquat honey, linden honey and date honey. Lichee honey contained the highest amount of ferulic acid and myricetin. But rutin and catechin were the main components in loquat honey. The longan honey contained a considerable amount of 3,4-dimethoxycinnamic acid, gallic acid and naringenin. These results showed that the profile of flavonoids, phenolic acids and abscisic acid could be used for authenticating honey floral origins. Keywords: honey; flavonoids; phenolic acids; abscisic acid; HPLC; monofloral honey detection 中图分类号：TS207.3 文献标识码：A
淀粉酶在食品中的应用
淀粉酶在食品中的应用刘宝琴摘要:酶,是一种蛋白质,它是由生物活性细胞所产生的,它具有高效率的催化的作用,并且其专一性很强,并且性质温和,没有毒害、无味吧,不会对食品产生幂良的影响,从而[1]大量的应用到食品的焙烤加工中。
淀粉酶在生活中的应用很广泛。
淀粉糖的生产,甜味剂的生产都离不开淀粉酶。
本文主要介绍各种淀粉酶在食品工业中的应用。
关键词: α-淀粉酶食品工业β-淀粉酶一.定义及分类淀粉酶是水解淀粉和糖原的酶类总称，通常通过淀粉酶催化水解织物上的淀粉浆料，由于淀粉酶的高效性及专一性，酶退浆的退浆率高，退浆快，污染少，产品比酸法、碱法更柔软，且不损伤纤维。
是目前发酵工业上应用最广泛的一类酶。
淀粉酶一般作用于可溶性淀粉、直链淀粉、糖原等α-1,4-葡聚糖，水解α-1,4-糖苷键的酶。
根据酶水解产物异构类型的不同可分为α-淀粉酶(EC3(2(1(1()与β-淀粉酶(EC3(2(1(2()。
α-淀粉酶广泛分布于动物(唾液、胰脏等)、植物(麦芽、山萮菜)及微生物。
微生物的酶几乎都是分泌性的。
此酶以Ca2+为必需因子并作为稳定因子和激活因子，也有部分淀粉酶为非Ca2+依赖型。
淀粉酶既作用于直链淀粉，亦作用于支链淀粉，无差别地随机切断糖链内部的α,1，4-链。
因此，其特征是引起底物溶液粘度的急剧下降和碘反应的消失，最终产物在分解直链淀粉时以葡萄糖为主，此外，还有少量麦芽三糖及麦芽糖，其中真菌a-淀粉酶水解淀粉的终产物主要以麦芽糖为主且不含大分子极限糊精，在烘焙业和麦芽糖制造业具有广泛的应用。
另一方面在分解支链淀粉时，除麦芽糖、葡萄糖、麦芽三糖外，还生成分支部分具有α-1，6-键的α-极限糊精(又称α-糊精)。
一般分解限度以葡萄糖为准是35-50%，但在细菌的淀粉酶中，亦有呈现高达70%分解限度的(最终游离出葡萄糖);β-淀粉酶广泛分布与α-淀粉酶的不同点在于从非还原性末端逐次以麦芽糖为单位切断α,1，4-葡聚糖链。
淀粉酶检测方法
淀粉酶检测方法淀粉酶是一种在生物体内分解淀粉的酶类，在工业生产中也有广泛的应用。
淀粉酶检测方法的研究和开发对于生物学和工业生产都具有重要的意义。
本文将介绍10种常用的淀粉酶检测方法，并展开详细描述。
1. 检测淀粉酶酶活力的方法淀粉酶酶活力的检测是在一定的条件下测定淀粉酶对淀粉分子链断裂的程度。
其方法多种多样，如I2-KI法、Nelson-Somogyi法、DNS法、酚硫酸法等。
其中DNS法的操作简单、精密度高、结果准确，被广泛运用于淀粉酶酶活力的测定中。
DNS法的具体流程：取淀粉酶反应液1ml，加入60μl 1% 普鲁士蓝，阴离子化的淀粉酶会将淀粉水解成低聚糖，反应后加入7.5ml DNS液，于100℃水浴烘箱加热10min，将反应液冷却至室温后用1mol/L NaOH调至中性，以1cm光程在720nm波长处测定吸光度。
2. 紫外线比色法紫外线比色法是一种测定淀粉酶酶活力的快速、准确、灵敏的方法。
该法利用酶水解淀粉时所产生的差异色团在化学性质和吸收光谱方面的变化来测定淀粉酶酶活力。
紫外线比色法的具体流程：取一定量的淀粉酶及淀粉，在相应的pH值下孵育一定的时间后，停止反应，加入氢氧化钠，合并各样品，稀释，分别于270nm、309nm处记录吸光值，然后计算各组淀粉酶的缩合作用所产生的光吸收值，即可求出淀粉酶的酶活力。
3. pH滴定法pH滴定法是以酶水解完淀粉后所生成的氢离子释放量作为反应结束的依据。
该方法的特点是操作简单，易于掌握，准确度高。
pH滴定法的具体流程：取一定量的淀粉酶及淀粉，设置相应的pH值，在一定的温度下孵育一定时间，取出样品，加入酚酞pH指示剂，并滴加NaOH溶液，直到溶液从淡红色转为深红色，记录NaOH滴加量，计算其中的氢离子产生量即可求出淀粉酶的酶活力。
4. 薄层酶法薄层酶法是将淀粉酶和淀粉均匀混合后涂在薄层板上，然后观察酶诱导的淀粉分解反应的变化，以判断淀粉酶的活力。
薄层酶法的具体流程：将淀粉酶和淀粉均匀混合后涂在薄层板上，然后孵育一段时间，用紫碱蓝溶液滴在板上，若淀粉分解为葡萄糖，其降解产物将与紫碱蓝成蓝绿色，而未被淀粉酶降解的淀粉则呈紫色。
液相色谱-串联质谱测定蜂蜜中的氯霉素残留
液相色谱-串联质谱测定蜂蜜中的氯霉素残留刘谦;颜红;王雪涛;淑英;王锋;刘丽丽【摘要】建立肠衣中氯霉素残留的高效液相色谱-串联质谱联用测定方法.该方法经乙酸乙酯和氨水提取样品,以XTerra MS C18柱(100 mm× 2.1mm,3μm)分离,流动相为乙腈-水(33∶67,V/V),电喷雾负离子模式,多反应监测采集模式(MRM)下检测.该法的检出限为0.1 μg/kg,添加水平为0.1～1.0μg/kg时,加标回收率在99.4～115％之间,相对标准偏差为3.34％.【期刊名称】《中国蜂业中旬刊（学术）》【年(卷),期】2012(063)002【总页数】3页(P73-75)【关键词】高效液相色谱—串联质谱法;氯霉素;残留;蜂蜜【作者】刘谦;颜红;王雪涛;淑英;王锋;刘丽丽【作者单位】保定出入境检验检疫局,保定071051;保定出入境检验检疫局,保定071051;保定出入境检验检疫局,保定071051;保定出入境检验检疫局,保定071051;保定出入境检验检疫局,保定071051;保定出入境检验检疫局,保定071051【正文语种】中文【中图分类】S896.8蜂蜜是由蜜蜂采集植物蜜腺分泌的汁液酿成。
中国大部分地区均有生产。
以稠如凝脂、味甜纯正、清洁无杂质、不发酵者为佳。
蜂蜜的主要成分为糖类，其中60～80%是人体容易吸收的葡萄糖和果糖，主要作为营养滋补品、药用和加工蜜饯食品及酿造蜜酒之用，也可以替食糖作调味品。
氯霉素(Chloramphenicol)作为一种广谱的抗生素药，对需氧菌、厌氧菌、衣原体、支原体、立克次氏体等有效，且价格较低，因此早期曾被广泛用于人、畜多种传染性疾病的治疗。
经临床研究发现，氯霉素对人体有严重的副作用，它能抑制人体骨髓造血功能而引起再生障碍性贫血、粒状白细胞缺乏症和血小板减少症等疾病，它在人体、动物肌体中蓄积的时间较长，若长期使用还会出现视神经炎或末梢神经炎等，因此对人类的健康构成了潜在的危害。
高效液相色谱法同时检测蜂蜜中的5类抗生素残留
高效液相色谱法同时检测蜂蜜中的5类抗生素残留卢坤;童群义【摘要】建立了蜂蜜中氯霉素类、硝基咪唑类、喹诺酮类、磺胺类、四环素类5类共15种抗生素残留同时检测的高效液相色谱分析方法.蜂蜜经pH 2.0的磷酸水溶液溶解后直接用PCX固相萃取小柱净化富集,以乙腈-磷酸溶液(pH 2.5)作流动相,梯度洗脱,紫外检测器在274、315 nm波长下进行检测.15种抗生素在0.2 ～20.0 mg/L范围内呈良好线性,平均加标回收率为60％～105％,相对标准偏差为1.3％～6.9％.方法的检出限为9.70～12.54μg/kg,定量下限为32.34～41.80μg/kg.该方法快速高效,样品前处理简单,选择性好,灵敏度高,适用于蜂蜜中抗生素多残留的检测.%A high performance liquid chromatographic method was established for the simultaneous determination of 5 classes of antibiotics such as chloramphenicols, nitromidazoles, quinolones, sul-fonamides and tetracyclines including 15 antibiotics residues in honey. The honey sample was dissolved in phosphoric acid solution at pH 2. 0 and then purified and enriched directly with PCX solid phase extraction small column. The target compounds were separated on HPLC using acetonitrile - phosphoric acid solution ( pH 2. 5 ) as mobile phase by gradient elution, and detected with ultraviolet detector at 274 tun and 315 run. The calibration curves of 15 antibiotics ( chloramphenicol, metronidazole, ornidazole, oxytetracycline, chlorotetracycline, doxycycline, sulfapyridine, ciprofloxacin, lomefloxa-cin, ofloxacin, gatifloxacin, sparfloxacin, sulfadiazine, sulfamerazine, sulfamethoxazole) were linear in the range of 0.2 -20.0 mg/L. The average spiked recoveries ranged from 60% to 105%with relative standard deviations of 1. 3% -6. 9% . The limits of detection of this method were in the range of 9. 70 -12. 54 μg/kg and the limits of quantitation were 32. 34 -41. 80 μg/kg. The method showed the advantages of simple sample preparation, good selectivity and high sensitivity, and was suitable for the simultaneous determination of antibiotics in honey.【期刊名称】《分析测试学报》【年(卷),期】2011(030)011【总页数】5页(P1320-1323,1328)【关键词】固相萃取;高效液相色谱;抗生素;蜂蜜;多残留【作者】卢坤;童群义【作者单位】江南大学食品科学与技术国家重点实验室,江苏无锡214122;江南大学食品学院,江苏无锡214122【正文语种】中文【中图分类】O657.72;S859.796抗生素残留的分析检测是动物源性食品中药物残留分析的重要研究课题。
高效液相色谱-二极管阵列检测器测定饮料中甜蜜素添加量
高效液相色谱-二极管阵列检测器测定饮料中甜蜜素添加量应洪波;杨晓燕;艾明
【期刊名称】《现代科学仪器》
【年(卷),期】2013(000)004
【摘要】目的:建立并验证了用高效液相色谱配二极管阵列检测器法测定饮料中甜蜜素添加量的方法.方法:样品在酸性条件下用次氯酸钠对甜蜜素进行衍生化处理,处理液经过正己烷萃取,过滤后,以高效液相色谱仪-二极管阵列检测器进行检测,以相对保留时间定性,峰面积定量.结果:该方法回收率为90.46％～100.20％,RSD％为3.48％～ 5.76％,最低检出限为0.5mg/kg.结论:实验表明该方法对饮料中甜蜜素添加量的测定操作简单,方便,结果准确.
【总页数】3页(P190-192)
【作者】应洪波;杨晓燕;艾明
【作者单位】江苏天瑞仪器股份有限公司江苏苏州215300;江苏天瑞仪器股份有限公司江苏苏州215300;江苏天瑞仪器股份有限公司江苏苏州215300
【正文语种】中文
【中图分类】TH833
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定香精香料中的甜蜜素 [J], 董风强;李祖光;周国俊;蒋健
2.柱前衍生-高效液相色谱法快速测定含乳饮料中的甜蜜素 [J], 何晓玲
3.高效液相色谱-质谱联用仪同时测定饮料中甜蜜素、阿斯巴甜、三氯蔗糖、纽甜
的r检测方法研究 [J], 袁月兰
4.柱前衍生-高效液相色谱法快速测定含乳饮料中的甜蜜素 [J], 何晓玲
5.超高效液相色谱串联质谱法测定饲料中纽甜、阿力甜、阿斯巴甜、环天冬氨酰苯丙氨酸、甜蜜素、安塞蜜、糖精钠 [J], 李延山
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
第5卷 第10期 食品安全质量检测学报 Vol. 5 No. 102014年10月Journal of Food Safety and Quality Oct. , 2014基金项目: 国家科技支撑计划项目(2012BAK17B10)、江苏省“333工程”科研项目(BRA2013276)、江苏出入境检验检疫局科研项目(2011KJ40)Fund : Supported by the National Key Technology Support Program (2012BAK17B10), the Research Program of 333 Engineering in Jiangsu Province (2010CBB02301) and the Technology Program of Jiangsu Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau (2011KJ40) *通讯作者: 费晓庆, 工程师, 主要研究方向为食品检测和食品掺假鉴定研究。
E-mail: dii01208@*Corresponding author: FEI Xiao-Qing, Engineer, Jiangsu Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, No. 99, Zhonghua Road, Nanjing 210001, China. E-mail: dii01208@高效液相色谱-二极管阵列检测法检测蜂蜜中外源性γ-淀粉酶残留量费晓庆1*, 谭梦茹2, 张 睿1, 沈崇钰1, 吴 斌1, 丁 涛1, 杨功俊2(1. 江苏出入境检验检疫局食品实验室, 南京 210001; 2. 中国药科大学药学院, 南京 211198)摘 要: 目的 利用高效液相色谱-二极管阵列检测法(HPLC-DAD)测定蜂蜜中外源性γ-淀粉酶残留量。
方法 选取对硝基苯-β-D -麦芽三糖作为γ-淀粉酶的酶解底物, 于55 ℃和pH 4.50的0.10 mol/L 乙酸钠缓冲液中反应90 min 。
采用C 18柱分离底物和酶解产物对硝基苯-β-D -葡萄糖, 流动相为乙腈/水(15:85, v :v )。
通过测定酶解产物的含量来确定γ-淀粉酶残留量。
结果 本方法的线性范围为1~50 U/kg, 定量限为1 U/kg, 回收率在94.0%~107.2%之间, 相对标准偏差在3.2%~5.1%之间。
采用本方法对市售蜂蜜和淀粉类糖浆共58个样本进行考察, γ-淀粉酶检出率为79.3%。
采用本方法测定一个掺入5%淀粉类糖浆的蜂蜜, 测得γ-淀粉酶残留量为3.6 U/kg 。
结论 本方法能够有效地从酶学的角度快速鉴定蜂蜜中淀粉类糖浆的掺假。
关键词: γ-淀粉酶残留量; 蜂蜜掺假鉴定; 高效液相色谱-二极管阵列检测法Determination of the exogenous γ-amylase residue in honey by high perfor-mance liquid chromatography-diode array detectorFEI Xiao-Qing 1*, TAN Meng-Ru 2, ZHANG Rui 1, SHEN Chong-Yu 1, WU Bin 1, DING Tao 1, GONG Jun-Yang 2(1. Laboratory of Food , Jiangsu Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau , Nanjing 210001, China ;2. College of Pharmacy , China Pharmaceutical University , Nanjing 211198, China )ABSTRACT: Objective To develop a new method for determination of exogenous γ-amylase activity inhoney using high performance liquid chromatography-diode array detector (HPLC-DAD). Methods 4-nitrophenyl beta-D -maltotriose was chosen as the substrate of γ-amylase. This enzymatic reaction was under the condition of 55 ℃ and 0.10 mol/L sodium acetate-acetic acid buffer solution (pH 4.50) for 90 min. Sub-strate and enzymatic hydrolysate 4-nitrophenyl beta-D -gulcose were separated by high performance liquid chromatography on a C 18 column. Isocratic elution was employed with a mobile phase consisting of acetoni-trile/water (15:85, v :v ). By identifying the content of enzymatic hydrolysate at 310 nm, the residue of γ-amylase in honey could be determined. Results The method showed a good linearity between the concentration and peak area with the correlation coefficient over than 0.999. The linear range of γ-amylase was 1~50 U/kg with2988 食品安全质量检测学报第5卷the quantification limit 1 U/kg. Recoveries were between 94.0% and 107.2%, with relative standard deviations from 3.2% to 5.1%. This method was used to analyze 58 honey and starch syrup samples, and the detection rate of γ-amylase was 79.3%. To further verify the detection capability of this method, an authentic honey was mixed with 5% rice syrup. γ-amylase content of this sample was 3.6 U/kg. Conclusion This method can ef-fectively identify honey adulteration by starch syrups from the perspective of enzymology.KEY WORDS: γ-amylase activity; honey adulteration detection; high performance liquid chromatography- diode array detector1引言天然纯正的蜂蜜具有较高的营养价值, 它富含氨基酸、维生素、多酚、多糖、类黄酮等多种活性物质, 因此也具有较高的经济价值。
少数蜂蜜生产商为了牟取非法利益, 在纯正蜂蜜中掺入便宜的糖浆, 其中淀粉类糖浆是蜂蜜掺假时常用掺假原料[1]。
蜂蜜掺假行为严重损害了广大消费者的经济利益, 同时影响了国内外蜂产品市场的正常秩序, 对我国的国际贸易产生了不良影响。
目前, 蜂蜜掺假鉴定方法主要有指纹图谱技术(如糖指纹图谱[2]、氨基酸指纹图谱[3])、红外光谱法[4,5]、拉曼光谱法[6]、薄层色谱法[7]、核磁共振法[8]和元素分析-同位素质谱联用法[9,10]等, 这些检测手段存在着干扰多、耗时长、灵敏度低、仪器昂贵、无法鉴定碳-3植物糖浆掺假等不足。
因此, 开发一种灵敏又快速的蜂蜜掺假检测方法变得极为迫切。
王艳等[11]采用液相色谱-示差折光检测法测定蜂蜜中外源性β-呋喃果糖苷酶的残留量, 能够有效地从酶学角度鉴定甜菜糖浆的掺假, 但无法鉴定淀粉类糖浆的掺假。
淀粉类糖浆(包括大米糖浆、木薯糖浆、小麦糖浆和玉米糖浆等)是蜂蜜掺假使用较多的原料。
在生产淀粉类糖浆的糖化工艺中, 需要使用γ-淀粉酶对液化后的淀粉进行进一步酶解[12,13]。
γ-淀粉酶(又称糖化酶, 葡萄糖淀粉酶, 淀粉葡萄糖苷酶)能水解淀粉中的α-1,4葡萄糖苷键, 它与α-淀粉酶联合作用能较快地将淀粉转化成淀粉类糖浆。
这些糖浆在糖的组成方面与蜂蜜相似, 通过常规检测手段已无法有效鉴别。
到目前为止, 尚未见纯正蜂蜜中含有γ-淀粉酶的文献报道[14,15], 因此通过测定蜂蜜中γ-淀粉酶残留量, 可以从酶学的角度来鉴定蜂蜜是否掺入淀粉类糖浆。
γ-淀粉酶的测定主要有分光光度法[16]、葡萄糖酶电极法[17]、滴定法[18]和液相色谱法[19,20]等。
这些方法主要用于研究淀粉生产糖浆工艺中的样本。
虽然费晓庆等[20]报道了一种测定蜂蜜中γ-淀粉酶残留量的方法, 但该法需要采用凝胶色谱进行样品预处理, 操作繁琐且耗时较长, 并且使用的同位素比质谱仪价格昂贵, 方法不易推广。
以对硝基苯-β-D-麦芽三糖作为酶解反应底物, 在pH 4.50的0.10 mol/L乙酸钠缓冲液体系中于55 ℃酶解反应90 min, 经HPLC分离底物和酶解产物对硝基苯-β-D-葡萄糖, 通过二极管阵列检测器在线测定酶解产物的响应, 利用酶解产物的响应与酶残留量之间的对应关系来确定γ-淀粉酶残留量。
相对于文献报道方法[20], 本法具有灵敏度高、操作便捷、检测迅速等优点, 通过对纯正蜂蜜、市售蜂蜜、淀粉类糖浆和掺入一定量淀粉类糖浆的蜂蜜样本的考察, 能够快速有效地鉴定蜂蜜是否掺入淀粉类糖浆。
2材料与方法2.1 仪器、试剂与材料1200高效液相色谱(德国Agilent公司); 二极管阵列检测器; SHZ-88恒温水浴振荡器(江苏太仓市实验设备厂); Sevenmulti精密pH计(梅特勒-托利多公司); 十万分之一电子天平(梅特勒-托利多公司); XW-80A涡旋混合器(上海医科大学仪器厂); 0.22 µm 水相滤膜(上海百赛生物科技有限公司); Milli-Q超纯水仪(美国Millipore公司)。