桑氏链霉菌突变株的抑菌活性及对杨树紫纹羽病的盆栽防效
桑氏链霉菌突变株的抑菌活性及对杨树紫纹羽病的盆栽防
效
摘要
本文在平板对峙法测定桑氏链霉菌突变株MV2和MV4拮抗活性的基础上，用不同有机溶剂对其发酵液和菌丝体进行萃取，采用孔洞法测定发酵液萃取物和菌丝体浸出物的抑菌活性，并分析活性物质的热、酸碱、光稳定性，耐储藏性和对福美双的耐受性；通过盆栽试验，探索突变株抑菌物质和福美双对杨树紫纹羽病的防治效果。
结果表明，两株突变株和原始菌株KJ40对除终极腐霉外的7种植物病原真菌均有拮抗作用，对紫纹羽丝核菌作用最强。
乙酸乙酯的发酵液萃取物和菌丝体浸出物的抑菌效果最明显；突变株MV2的抑菌效果略好于MV4和KJ40。
在稳定性检测中，突变株比原始菌株具有更好的热、酸碱、光、储藏稳定性，对福美双耐受性更强。
说明突变株更适宜于生产，具有较大的开发潜力。
在盆栽防效试验中，抑菌物质和福美双混合施用比单独施用效果更好，其中MV2和福美双混合施用预防杨树紫纹羽病的效果最好，防治效果超过80%；原始菌株的抑菌物质无论和福美双混合还是单独施用，效果都不如突变株。
关键词
桑氏链霉菌；突变菌株；抑真菌作用；防治效果
中图分类号：
S 763.15
文献标识码：A
DOI：10.3969/j.issn.05291542.2015.05.010
Abstract
On the basis of antagonistic activity of Streptomyces sampsonii mutant strains tested with dual culture method，the fermentation liquid was extracted by different organic solvents. The antifungal activities of fermentation liquid extract and mycelium extract were studied by hole method，and the thermal，pH，ultraviolet light，storage stability，and tolerance to thiram of the active antifungal substances were analyzed. The control effect of the active substances of mutant strain and thiram was explored in potted experiments. The results showed that two mutant strains （MV2 and MV4）and original strain KJ40 had antagonistic effects on seven species of pathogens except Pythium ultimum，and the effect was strongest on Rhizoctonia crocorum. The antifungal effects of liquid extract and mycelium extract were also most obvious by ethyl acetate extraction. The effect of mutant strain MV2 was slightly better than MV4 and the original strain. In the stability testing，the mutant strain had better thermal，pH，ultraviolet light and storage stability than the original strain，and the tolerance against thiram was stronger. In the potted experiment，the effect of mixed application of antifungal substances and thiram was better than separate application，of which the incidence was lowest and control effect was more than 80% in the mixed application of MV2 and thiram. The antifungal effect of original strain was not as good as that of the two mutant strains whether mixed with thiram or separate application.
Key words
Streptomyces sampsonii；mutant strain；antifungal effect；control effect
随着对环境健康、食品安全的重视，逐步降低化学农药用量是控制植物病害的趋势。
由此，开发高效低毒、环境兼容性好的替代化学杀菌剂的新型生物农药是目前国内外植物保护领域研究的热点之一[12]。
尽管如此，由于生防微生物种群的繁殖易受到环境温度、湿度、土壤pH等诸多因素的影响，药效反应慢，作用效果大多不明显甚至无效[34]。
有报道指出[5]，生防微生物和化学农药混合使用，不仅可以降低化学农药的使用量，减轻对环境的污染，还因为化学杀菌剂削弱了病原菌的生长，使其对生防菌更加敏感，从而提高了生防微生物的防治效果。
因此，生物农药的研究和开发要根据现有的基础和优势有针对性地发展。
紫纹羽病又称紫色根腐病，是由紫纹羽丝核菌（Rhizoctonia crocorum Fr.）引起的一种苗木病害。
该菌寄主范围广泛，达45科，76属，100多种，包括松、柏、杉、刺槐、杨、榆、桑、柳、苹果等，是一种重要的土传病原菌。
利用生防微生物防治紫纹羽丝核菌的研究，在国内外还未见报道。
感谢您的阅读！。
桑氏链霉菌产几丁质酶特性及对杨树紫纹病的生防作用
Ｋ Ｈ２ Ｐ Ｏ ０ ． ６ Ｌ ， 初始 ｐ Ｈ值 ７ ． ０， 培养温度 ２ ６℃ ， 培养时间 １ ４ ４ ｈ 。田间试验表 明 ： 优化培养的发酵滤液可降低杨树
紫 纹 羽病 发 生 率 ． 且 防 效 显 著
关键词 杨树 紫纹 羽病 菌： 链霉菌 ； 几 丁质酶 ： 生物防治 分类号 ￥ ７ ６ ３ ． １
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根际微生态调节对杨树根系活力及土壤有效P转化的效应
大相 关性 ； 毛 白杨 和 北 京 杨根 际 土壤 酸性 磷 酸酶 活性 增 强 ， 别 增 加 ２ ． １ ～ ３ ． ５ 和 １ ． ９ ～ 使 分 ０ ９ ６ ３ ３３ ％
５ ． ８ ， 根 际 区域 的 土壤 有 效 Ｐ具 有 明显 的 富集 效 应 ， 集 率 分 别 为 ７ ４ ～２ ． ７ 和 １ ． ５ ～ ４ ９ 对 富 ．９ ５ ６ ７８ ％
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具防病并提高植物耐旱功能的小链霉菌HS57的筛选
具防病并提高植物耐旱功能的小链霉菌HS57的筛选小链霉菌（Streptomyces）是一类常见的土壤细菌，被广泛应用于生物防治和增强植物耐旱能力的研究中。
本文将介绍一个针对具有防病并提高植物耐旱功能的小链霉菌HS57的筛选方法。
首先，为了筛选出具有防病功能的小链霉菌HS57，我们可以采用多种方法进行初步筛选，如抗菌活性筛选、溶胞酶活性筛选和生物膜形成筛选等。
抗菌活性筛选是最常用的筛选方法之一、可以使用琼脂平板法或井板法，将小链霉菌的培养液或提取物加入培养基中，培养细菌或真菌菌种后观察抑菌圈的形成情况。
抗菌活性强的菌株可能具有防病功能。
溶胞酶活性是一种常见的植物病原菌致病机制。
许多具有防病功能的菌株具有溶胞酶活性抑制作用。
可以将小链霉菌菌落刺激到发酵产生抑制溶胞酶作用的物质，再将产物与溶胞酶反应，观察其酶活的降低情况。
活性降低的小链霉菌可能具有防病功能。
生物膜形成是一种常见的细菌耐旱生存机制。
具有生物膜形成能力的菌株往往具有较强的逆境抗性和耐旱能力。
可以采用常规生物膜染色和显微镜观察的方法对小链霉菌HS57的生物膜形成能力进行筛选。
通过以上初步筛选，我们成功筛选出具有防病功能的小链霉菌HS57、接下来，我们进一步研究该菌株的防病机制和提高植物耐旱功能的机制。
为了研究小链霉菌HS57的防病机制，可以通过酶活测定、代谢产物分析和基因组比对等方法进行。
例如，可以测定小链霉菌HS57培养液中是否存在具有抑菌活性的酶，如蛋白酶、纤维素酶等。
此外，可以通过代谢产物分析，分析小链霉菌HS57培养基中的次生代谢产物，以寻找抑菌活性物质。
同时，还可以对小链霉菌HS57的基因组进行测序和比对，以寻找与防病功能相关的基因或途径。
为了研究小链霉菌HS57的提高植物耐旱功能的机制，可以通过测定其耐旱酶活性、抗氧化物质含量等方法进行。
例如，可以测定小链霉菌HS57培养液中的超氧化物歧化酶、过氧化氢酶等相关酶活性，以评估其抗氧化性能。
桑树紫纹羽病和细菌性黑枯病的发生与防治
缩 ，生长畸形 。枝条被害 ，常 出现粗细 不等稍 凹陷的棕 褐色 点线状病斑 ，在气候潮湿 时病斑 上产 生大量 蜜黄色 球状 细菌溢脓 ，溢脓干燥 后 ，成为有光泽 的小粒 。
２ 发 病 规 律
机质 肥 料 ，防止 桑 园过 湿 或 土壤 酸度 过 大 。夏 、 秋期 用 叶 ，应 摘 叶 留柄 ，防止 损伤 冬 芽 。③ 在 发病 初 期用 １ ０ ０单位 农 用链 霉素 或 ３ ０ ０～５ ０ ０单位 盐酸 土 霉素 药液 喷雾 杀 菌 ，１ ０ ｄ喷 １ 次 ，连 喷 ２～３次 ，为 节省 药 液 ， 也可 先 将病 部剪 去 ，后再 将 药液 喷于 顶 梢嫩 尖 部 及伤 口，防 治效果 良好 。
参 考文 献
２ ． １ 桑紫 纹羽 病 。病菌 以菌索 和菌 核在 病 根和 土 中越 冬 越夏 ，病 菌 可 生存 多 年 ， 当环境 适 宜 时 ，产 生营 养 菌 丝侵 入 桑根 。主 要通 过 病根 、流水 及 农具 等 接触 传 染 。桑 园地 势 低 、排 水 不 良以及酸 性 土壤 和 砂 砾土 质 发 病较 多 。苗 圃地连 作 或 桑地 间 作带 病 作物 常 为发 病
色 ，病 斑周 围 叶色 稍褪 绿变黄 ，气 候干燥 时 中部破裂 。 严重 时叶片大部分 发黄 ，很 易脱落 。病梢 的叶片 多变 黑
腐 死 ，形成 烂 头 现象 。叶脉 和 叶柄 被 害 ，常 使 叶片 皱
３ ． ２ 细 菌 性 黑 枯病 。① 注意 检 疫 ，病 条 不 可 作接 穗 ，
的绒状 菌膜 ，５～６月问膜 上生 出子 实层 。在 腐 朽 的根
部 除 菌 丝 索外 ，还 生 有 紫 红 色 的菌 核 。根 部 受 害 后 ，
2株木霉抑菌效果及其促植物生长机制
·2713·收稿日期：2020-01-14基金项目：中央引导地方科技专项（2181730）；甘肃省科技重大专项（18ZD2NA005）；甘肃省省级引导科技创新发展竞争性专项（2018ZX-11）作者简介：*为通讯作者，田永强（1972-），教授，主要从事微生物工程研究工作，E-mail ：****************。
张晓梦（1995-），研究方向为拮抗微生物学，E-mail ：*****************2株木霉抑菌效果及其促植物生长机制张晓梦，田永强*，潘晓梅，李佳佳，石晓玲，张建强，吴康莉（兰州交通大学化学与生物工程学院，兰州730070）摘要：【目的】探究绿色木霉（Trichoderma viride ）和棘孢木霉（T.asperellum ）对8种植物病原菌的抑制效果及其促植物生长机制，为木霉防治植物病害和促进植物生长等的田间应用提供理论参考。
【方法】采用平板对峙法和固体稀释法，检测2株木霉及其活性代谢产物对8种植物病原菌（棉花枯萎病菌、茄子菌核病菌、番茄链格孢病菌、茄腐镰刀病菌、尖孢镰刀病菌、枸杞炭疽病菌、番茄灰霉病菌和番茄匍柄霉病菌）的抑制率；采用平板透明圈法、Salkowski 比色法及钼锑抗比色法测定2株木霉的生防因子、生长素及溶磷效果；通过辣椒盆栽试验，测定2株木霉发酵液不同稀释倍数处理对辣椒叶片叶绿素含量及3种抗性酶［过氧化物酶（POD ）、多酚氧化酶（PPO ）和苯丙氨酸解氨酶（PAL ）］活性的影响。
【结果】平板对峙试验结果显示，2株木霉对8种植物病原菌的抑菌率均在60.00%以上；绿色木霉发酵11d 时其无菌滤液对茄子菌核病菌的抑制率达96.78%，但对其他病原菌的抑制率不高；棘孢木霉发酵11d 时无菌滤液对茄子菌核病菌、枸杞炭疽病菌和番茄链格孢病菌的抑制效果较好，抑菌率分别为99.08%、85.33%和68.65%，发酵9d 时无菌滤液对番茄灰霉病菌的抑制率为72.08%；2株木霉均可产生蛋白酶、几丁质酶、纤维素酶和铁载体4种生防因子；绿色木霉发酵9d 时分泌吲哚乙酸（IAA ）量为3.389mg/L ，在PKO 无机磷液体培养基培养7d 后溶磷量为67.236μg/mL ；棘孢木霉发酵11d 时分泌IAA 量达11.638mg/L ，在PKO 无机磷液体培养基培养7d 后溶磷量达151.905μg/mL ；盆栽试验结果表明，喷施不同稀释倍数的棘孢木霉发酵液较绿色木霉发酵液更能提高辣椒叶片叶绿素含量及3种抗性酶活性。
一种防治杨树溃疡病的生防菌菌株及其应用[发明专利]
![一种防治杨树溃疡病的生防菌菌株及其应用[发明专利]](https://360docs-1393072327.cos.ap-beijing.myqcloud.com/0dc8d4e5844769eae109ed00.webp)
专利名称：一种防治杨树溃疡病的生防菌菌株及其应用专利类型：发明专利
发明人：杨蕾,梁军,倪杨,张星耀
申请号：CN201410132397.X
申请日：20140402
公开号：CN104974940A
公开日：
20151014
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种防治杨树溃疡病的生防菌菌株及其应用方法。
所述的菌株为黄绿木霉(Trichoderma aureoviride)，菌株编号为CGMCC No.8891。
该菌株发酵液与麦麸和玉米粉混合，发酵7d后自然风干并碾碎制成原粉；添加38wt％原粉，38wt％高岭土，13wt％木质素磺酸
钠，8.5wt％SDS，2.5wt％腐植酸制成菌剂；将菌剂稀释后以喷洒和灌根的方式用于防治杨树溃疡病。
该菌株具有对病原菌的作用方式多种多样、繁殖速度快、作用效果稳定等优点，对杨树溃疡病病原菌葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidia)抑制作用强，对杨树溃疡病的防治具有重要意义，具有良好的开发应用前景。
申请人：中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所
地址：100091 北京市海淀区香山路颐和园后东小府2号
国籍：CN
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杨树紫纹羽病发生与防治
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飞龙斩血内一株链霉菌属的分离鉴定及抑菌活性检测
飞龙斩血内一株链霉菌属的分离鉴定及抑菌活性检测
杨本寿;杨小珍;杨德
【期刊名称】《曲靖师范学院学报》
【年(卷),期】2017(36)3
【摘要】采用严格的表面消毒程序以及在培养基中添加抑菌剂的方法从中药植物飞龙斩血中分离得到一株内生放线菌F-3-003,菌株的发酵产物通过纸片扩散法体外检测具有一定的抑菌活性.菌落形态特征和23S rDNA序列分析表明,菌株F-3-003属于链霉菌属,通过16S rDNA序列分析显示菌株F-3-003与多株淡紫灰链霉菌(Streptomyces lavendulae)的序列同源性均高于99％,因此,将菌株F-3-003命名为淡紫灰链霉菌F-3-003,基因登录号为KF751667,本研究为飞龙斩血内生菌资源的开发利用提供了基础.
【总页数】6页(P30-34,103)
【作者】杨本寿;杨小珍;杨德
【作者单位】曲靖医学高等专科学校微生物研究所,云南曲靖655000;曲靖师范学院,云南曲靖655000;曲靖医学高等专科学校微生物研究所,云南曲靖655000;云南农业大学园林园艺学院,云南昆明650091
【正文语种】中文
【中图分类】Q93-331;S567.3
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一株杨树烂皮病生防菌在抑制致病菌活性中的应用[发明专利]
专利名称：一株杨树烂皮病生防菌在抑制致病菌活性中的应用专利类型：发明专利
发明人：陈越渠,李立梅,毛赫,李鑫,左彤彤,孙伟,王聪慧,杨帆,张健,张晓军
申请号：CN201810736154.5
申请日：20151201
公开号：CN108795825A
公开日：
20181113
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及一株杨树烂皮病生防菌在抑制致病菌活性中的应用，杨树烂皮病生防菌为盐屋链霉菌(Streptomyces sioyaensis)F58，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.11469；所述致病菌为植物致病菌。
本发明具有抑菌效果好、抑菌谱广、对环境友好等优点。
申请人：吉林省林业科学研究院
地址：130033 吉林省长春市经开区临河街3528号
国籍：CN
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杨树紫纹羽病的防治方法
杨树紫纹羽病的防治方法杨树紫纹羽病的防治方法——紫纹羽病又称紫色根腐病，分布较广泛，主要寄主有杨、刺槐、柳、苹果、桑、甘薯等，该病常见于苗圃或积水林地果园。
是根部病害的一种。
苗木受害后很快会枯死，成年树受害树势减弱，严重时会导致死亡。
杨树紫纹羽病症状：病菌先侵入幼树根部，逐渐向侧根和主根蔓延。
受害根表皮形成黄色病斑，呈不规则形，内部皮层变为褐色。
后期根及根颈表面被有紫色绒毛毡状菌丝膜，紫色线状菌索和小突起状菌核。
严重时病根皮层腐烂，木质部腐朽，栓皮呈鞘状套于根外。
病组织有蘑菇味。
受害植株叶片发黄且小，枝条节间缩短，顶梢不抽芽，树势衰弱，树冠局部或全株枯死。
杨树紫纹羽病病原：病菌为紫卷担子菌Helicobasidiumpurpureum(Tul.)Pat.，属担子菌亚门真菌。
在菌丝膜外着生担子和担孢子。
担子弯曲圆筒状，无色，大小25-40μm×6-7μm，有3个隔膜，担子的每个细胞上可长1个小梗，小梗上着生担孢子。
担孢子单胞，卵圆形，无色，大小16-19μm×6.0-5.6μm，基部尖。
菌核大小1.1-1.4mm×0.7-1.0mm。
无性阶段学名为紫纹羽丝核菌Rhizoctonia crocorumFr.。
杨树紫纹羽病发病特点：该病菌以菌丝体、菌核及菌索在病根或土壤中越冬，菌核抵抗力强，能够长期长期存活在土壤中，萌发孢子后侵染寄主。
菌索在土内或土表延伸，从气孔或伤口侵入，为害健体根部。
病菌可通过病健体接触传染，经带菌苗木远距离传播。
担孢子在病害传播中不起作用。
低洼潮湿或排水不良的林地有利于病害发生。
老果园老苗圃发病较重。
品种间抗病性有差异。
杨树紫纹羽病防治方法1、因地制宜的选择抗病品种栽培。
2、严格检疫苗木，避免病菌随苗木传染，栽植前可用1:1:200-300的波尔多液浸根，或在1%硫酸铜液中浸根半小时。
3、加强栽培管理：合理施肥灌水，及时间苗，提高抵抗力。
作好排水措施，防止圃地或林地长期积水。