革兰氏染色——摘要翻译
革兰氏染色实验报告
革兰氏染色实验报告摘要：革兰氏染色是一种细菌分类和鉴定的基本方法。
本实验通过对不同菌株的革兰氏染色，观察细菌的形态、结构和染色反应，从而初步鉴定不同菌株的属性。
结果表明，革兰氏染色是一种简便、快捷、经济的细菌分类和鉴定方法，具有重要的应用价值。
引言：革兰氏染色是一种广泛应用于细菌分类和鉴定的基本方法。
它是由丹麦微生物学家革兰于1884年发明的。
革兰氏染色的原理是利用染色剂的作用，将细胞壁结构不同的细菌分成两类：革兰阳性菌和革兰阴性菌。
革兰氏染色方法简便、快捷、经济，是细菌分类和鉴定的重要手段之一。
本实验旨在通过对不同菌株的革兰氏染色，观察细菌的形态、结构和染色反应，从而初步鉴定不同菌株的属性。
材料与方法：材料：革兰氏染色试剂盒、细菌培养物、草酸、乙醇、碘酒、脱色剂。
方法：1.取细菌培养物，将其涂抹于玻片上。
2.将玻片放在温箱中，使其干燥。
3.用草酸涂抹干燥后的菌片，使其受到草酸的溶解作用。
4.用水洗去草酸，使其残留在菌片上的草酸被冲掉。
5.用乙醇涂抹草酸处，使其受到乙醇的脱水作用。
6.用水洗去乙醇，使其残留在菌片上的乙醇被冲掉。
7.用碘酒涂抹乙醇处，使其受到碘酒的着色作用。
8.用水洗去碘酒，使其残留在菌片上的碘酒被冲掉。
9.用脱色剂涂抹碘酒处，使其受到脱色剂的去色作用。
10.用水洗去脱色剂，使其残留在菌片上的脱色剂被冲掉。
11.将菌片放在显微镜下观察。
结果与分析：本实验选取了两个不同菌株进行革兰氏染色。
一个是革兰阳性菌——金黄色葡萄球菌，另一个是革兰阴性菌——大肠杆菌。
观察结果表明，金黄色葡萄球菌染色后呈紫色，细胞呈球形，直径约为1μm。
而大肠杆菌染色后呈红色，细胞呈梭形，长度约为2-3μm。
这说明革兰氏染色方法可以将细菌分成革兰阳性菌和革兰阴性菌两类，并且可以初步鉴定不同菌株的属性。
革兰阳性菌的细胞壁主要由厚壁的肽聚糖和少量的脂质组成，其细胞壁较厚，抗酸碱性能较强，所以在革兰氏染色中染色液不易穿透，呈紫色。
革兰氏染色的论文
胞壁比较厚，细胞壁上的间隙较小，媒染后形成的结，加上他基本不含脂类，经乙醇洗脱后，细胞壁非但没有缝隙，反而因肽聚糖的网孔脱水而变得通透性更小，于是蓝紫色的晶紫碘复合物留在细胞内而成蓝紫色。革兰阴性菌的肽聚糖的含量和交联程度较低，层次也少，所以细胞壁比较薄，细胞壁上的间隙较大，再加上细胞壁的脂质含量较高，经乙醇洗脱后，细胞壁缝隙变大，所以结晶紫碘极易洗脱出细胞壁，酒精脱色后成无色。经过沙黄复染，最终呈现红色，所以本实验的结论是正确的。
5复染
将玻片上残留水用吸水纸吸去，用番红复染液染色2分钟，水洗，吸去残水晾干
6镜检
油镜观察
色葡萄球菌混合涂片在载玻片同一区域用大肠杆菌和金黄色葡萄球菌混合涂片
结论与分析：
经过进一步观察，大肠杆菌在显微镜下呈现红色，金黄色葡萄球菌在显微镜下呈现蓝紫色。通过本实验由于革兰阳性菌细胞壁和革兰阴性菌的细胞壁结构和组成的差异所决定的。革兰性阳性菌肽聚糖的含量于交联程度均高，层次也多，所以细
一材料与方法
1菌种
大肠杆菌
大肠杆菌16小时牛肉膏蛋白胨琼脂斜面培养物和金黄色葡萄球菌16小时牛肉膏蛋白胨琼脂斜面培养物。
2溶液与试剂
革兰氏染液，草酸按结晶紫染液，卢戈氏碘液，95%乙醇，番红复染液。
3仪器和其他用品
酒精灯，载玻片，显微镜，双层瓶（内装二甲苯和香柏油），擦镜纸，接种环，试管架，镊子，载玻片夹子，载玻片支架，滤纸，滴管，无菌生理盐水等。
方法：
1制片
取活跃生长期菌种按常规方法涂片（不宜过厚），干燥和固定
2初染
滴加结晶紫染液覆盖图菌部位，染色1-2分钟后倾去染液，水洗至流出水无色
3媒染
先用卢戈氏碘液冲去残留水迹，再用碘液覆盖1分钟，倾去碘液，水洗至洗出水无色。
食品微生物学复习参考题及部分参考答案
食品微生物学复习参照题及部分参照答案一、名词解说：1．平和噬菌体 --------有的噬菌体侵入寄主细胞后，其核酸和寄主细胞同步复制，不惹起寄主细胞裂解，这种噬菌体称为平和噬菌体。
2.中间体------由细菌细胞膜内陷形成的层状、管状或囊状构造称为中间体。
3．高压蒸汽灭菌-----指利用高压蒸汽杀灭待灭菌物体内外的微生物的灭菌方法。
4.烈性噬菌体------进入细胞后，能改变宿主细胞的性质，大批形成新的噬菌体，最后导致菌体裂解死亡的噬菌体称为烈性噬菌体。
5．革兰氏染色 ------由丹麦科学家Gram 发明的一种经验染色法，经过革兰氏染色可将细菌鉴识为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
6.生长因子------有的微生物在基本培育基上生长极差或不可以生长，需要增补一些微量有机物才能正常生长，这些微生物生长不行缺乏的微量有机物称为生长因子。
7．培育基 -----是人工配制的合适微生物生长生殖或累积代谢产物的营养基质。
8.生长曲线-------在分批培育中，以培育时间为横坐标，以细菌数量的对数或生长速率为纵坐标绘制的曲线称为生长曲线。
9．接合孢子 -------是接合菌的有性孢子，由菌丝发育形成的配子囊联合形成。
10．病毒粒子 ------成熟的拥有侵袭力的病毒颗粒称为病毒粒子。
11.原核------仅由一条DNA分子构成，没有核仁、核膜，形态可变的细菌细胞核称为原核。
12.次生菌丝------指担子菌的两条初生菌丝联合形成的双核菌丝。
13.噬菌体------侵染细菌的病毒称为噬菌体。
14.担孢子------是担子菌的有性孢子，由双核菌丝顶端细胞经质配、核配和减数分裂而形成。
15.合成培育基------培育基中营养物质的浓度和化学成分完整清楚，构成成分精准的培养基称为合成培育基。
16.鞭毛-------由细菌细胞内伸出的修长、波曲、毛发状的丝状构造称为鞭毛。
17．菌落 ------微生物在培育基表面生长生殖时，常以母细胞为中心齐集在一同，形成一个肉眼可见的、拥有必定形态构造的微生物集体，称为菌落。
实验三细菌的革兰氏染色(Gram stain)
肽聚糖(peptidoglycan) 肽聚糖
革兰阳性菌肽聚糖—聚糖骨架、四肽侧链、 革兰阳性菌肽聚糖—聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥
N-乙酰葡糖胺 N-乙酰胞壁酸
溶菌酶作用点
青霉素作用点
肽聚糖(peptidoglycan) 肽聚糖
革兰阴性菌肽聚糖—聚糖骨架、 革兰阴性菌肽聚糖—聚糖骨架、四肽侧链
大肠杆菌革兰氏染色
炭疽芽胞杆菌
五、实验报告
1．结果 ． 列表比较大肠杆菌、 列表比较大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和未知菌 的染色反应，并判断它们分别是G 的染色反应，并判断它们分别是 -或G+. 2．思考题 ． （1）作革兰氏染色涂片为什么不能过于浓厚？ ）作革兰氏染色涂片为什么不能过于浓厚？ 其染色成败的关键一步是什么？ 其染色成败的关键一步是什么？ （2）当你对一株未知菌进行革兰氏染色时， ）当你对一株未知菌进行革兰氏染色时， 怎样能确证你的染色技术操作正确， 怎样能确证你的染色技术操作正确，结果 可靠？ 可靠？
2．染色
（1）初染：加草酸铵结晶紫一滴，约一分钟， ）初染：加草酸铵结晶紫一滴，约一分钟， 水洗。 水洗。 （2）媒染：滴加碘液冲去残水，并覆盖约一 ）媒染：滴加碘液冲去残水， 分钟，水洗。 分钟，水洗。 （3）脱色：将载玻片上面的水甩净，并衬以 ）脱色：将载玻片上面的水甩净， 白背景， 白背景，用95％酒精滴洗至流出酒精刚刚 ％ 不出现紫色时为止， 秒钟， 不出现紫色时为止，约20～30秒钟，立即 ～ 秒钟 用水冲净酒精。 用水冲净酒精。 分钟， （4）复染：用番红液染 ～2分钟，水洗。 ）复染：用番红液染1～ 分钟 水洗。
• 革兰氏染色需用四种不同的溶液：碱性染料 革兰氏染色需用四种不同的溶液： （basic dye）初染液；媒染剂 ）初染液； ）；脱色剂 （mordant）；脱色剂（decolorising ）；脱色剂（ agent）和复染液（counterstain）。 ）和复染液（ ）。 • 碱性染料初染液 碱性染料初染液——结晶紫（crystal 结晶紫（ 结晶紫 violet） ） • 媒染剂 媒染剂——碘（iodine） 碘 ） • 脱色剂——95％的酒精（ethanol） 脱色剂 ％的酒精（ ） • 复染液 复染液——番红 番红
革兰氏染色实验报告
革兰氏染色法的原理摘要：革兰氏染色反应是细菌重要的鉴别特征，所以学习微生物学，进行革兰氏染色实验是很重要的。
为保证染色结果的正确性，采用规范的的染色操作方法是十分必要。
本实验主要对大肠杆菌（Escherichia coli）、金黄色葡萄球菌（Staphyloccocus aureus Rosenbach）、枯草杆菌（Bacillus subtilis）进行革兰氏染色，观察它们的染色特征，辨别是革兰氏阴性还是阳性，从而掌握其染色方法。
染色方法与过程很清晰，但实验结果中金黄色葡萄球菌(S.aureus Rosenbach）多组呈现假阴性。
本实验的主要目的是熟悉并掌握革兰氏染色方法及原理，但要想做出很好的染色得多加练习。
本实验还可以锻炼显微镜操作技术和无菌操作技术。
关键词：革兰氏染色大肠杆菌(E.coli) 金黄色葡萄球菌(S.aureus Rosenbach) 枯草杆菌(B.subtilis)引言革兰氏染色是微生物学中最重要的鉴别染色方法，它可以直接将细菌分为革兰氏阴性和革兰氏阳性。
革兰氏染色法可将细菌分为革兰氏阳性（G+）和革兰氏阴性（G-）两种类型，这是由这两种细菌细胞壁结构组成与结构的差异所决定的。
经过一定的染色过程后，革兰氏阳性的细菌会因为细胞壁肽聚糖的含量高，脂质含量低而保持第一次染色的蓝紫色。
革兰氏阴性细菌细胞壁的脂质含量高，乙醇处理时脂质溶解，蓝色被洗脱，复染后变为红色。
革兰氏染色原理很简单，染色时需注意要注意使用处在活跃生长期的细菌，涂片不宜过厚，严格控制脱色时间。
大肠杆菌(E.coli)是革兰氏阴性细菌，金黄色葡萄球菌(S.aureus Rosenbach)与枯草杆菌 (B.subtilis)都是革兰氏阳性细菌，染色后在显微镜下容易区别。
同时它们的形态各异，可以根据具体颜色和形态差异来判断染色是否成功。
本实验还涉及到高倍油镜的使用。
使用油镜与用一般的镜头不同，具体使用在实验方法中描述。
革兰氏染色法
革兰氏染色法革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884年由丹麦医师Gram创立。
细菌先经碱性染料结晶染色，而经碘液媒染后，用酒精脱色，在肯定条件下有的细菌此色不被脱去，有的可被脱去，因此可把细菌分为两大类，前者叫做革兰氏阳性菌（G+），后者为革兰氏阴性菌（G—）。
为观看便利，脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红等进行复染。
阳性菌仍带紫色，阴性菌则被染上红色。
有芽胞的杆菌和绝大多数和球菌，以及全部的放线菌和真菌都呈革兰氏正反应；弧菌，螺旋体和大多数致病性的无芽胞杆菌都呈现负反应。
革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在化学组成和生理性质上有许多差别，染色反应不一样。
现在一般认为革兰氏阳性菌体内含有特别的核蛋白质镁盐与多糖的复合物，它与碘和结晶紫的复合物结合很牢，不易脱色，阴性菌复合物结合程度底，吸附染料差，易脱色，这是染色反应的主要依据。
另外，阳性菌菌体等电点较阴性菌为低，在相同PH条件下进行染色，阳性菌吸附碱性染料许多，因此不易脱去，阴性菌则相反。
所以染色时的条件要严格掌握。
例如，在强碱的条件下进行染色，两类菌吸附碱性染料都多，都可呈正反应；PH很低时，则可都呈负反应。
此外，两类菌的细胞壁等对结晶紫—碘复合物的通透性也不全都，阳性菌透性小，故不易被脱色，阴性菌透性大，易脱色。
所以脱色时间，脱色方法也应严格掌握。
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，详细操作方法是：１）涂片固定。
２）草酸铵结晶紫染1分钟。
３）自来水冲洗。
４）加碘液掩盖涂面染1分钟。
５）水洗，用吸水纸吸去水分。
６）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，30秒后水洗，吸去水分。
７）蕃红梁色液（稀）染10秒钟后，自来水冲洗。
干燥，镜检。
染色的结果，革兰氏正反应菌体都呈紫色，负反应菌体都呈红色。
下面是革兰氏阴性杆菌和革兰氏阳性杆菌。
革兰氏染色实验
革兰氏染色实验革兰氏染色（Gram Staining）是用来鉴别细菌的一种方法：这种染色法利用细菌细胞壁上的生物化学性质不同，可将细菌分成两类，即革兰氏阳性（Gram Positive）与革兰氏阴性（Gram Negative）。
(这种染色法是由一位丹麦医生汉斯·克里斯蒂安·革兰于1884年所发明)。
未经染色之细菌，由于其与周围环境折光率差别甚小，故在显微镜下极难观察。
染色后细菌与环境形成鲜明对比，可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，而用以分类鉴定。
阳性紫色，阴性红色革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌：革兰氏阳性菌：葡萄球菌属（主要是金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌等）、链球菌属（肺炎链球菌、草绿色链球菌、肠球菌等）、白喉杆菌、炭疽杆菌、破伤风杆菌、蜡样芽孢杆菌等，其中，金黄色葡萄球菌、肠球菌等为临床重要的病原菌。
革兰氏阴性菌：埃希氏菌属、枸橼酸菌属、假单胞菌属（绿脓杆菌等）、莫拉菌属（卡他莫拉菌等）、奈瑟菌属（淋球菌、脑膜炎双球菌等）、不动杆菌属（鲍曼不动杆菌、罗菲不动杆菌等）、克雷伯菌属（主要是肺炎克雷伯杆菌）、沙门氏菌属、志贺氏菌属（痢疾杆菌等）、黄杆菌属、变形杆菌属、军团菌属、耶尔森菌属、嗜血杆菌属（杜克雷嗜血杆菌、流感嗜血杆菌等）、产气杆菌属、霍乱弧菌、阴沟肠杆菌等。
革兰氏阴性菌在院内感染中的细菌感染中占了大约65%，且大多菌株容易对抗菌药物耐药，产生“新德里金属酶”（NDM-1）的绝大多数细菌都是革兰氏阴性菌（主要是大肠杆菌、鲍曼不动杆菌和肺炎克雷伯杆菌）。
革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌是利用革兰氏染色法来鉴别的两大类细菌。
大多数化脓性球菌都属于革兰氏阳性菌，它们能产生外毒素使人致病，而大多数肠道菌多属于革兰氏阴性菌，它们产生内毒素，靠内毒素使人致病。
细胞形态和结构细胞的基本结构包括细胞壁和原生质体两部分。
原生质体位于细胞壁内，包括细胞膜（细胞质膜）、细胞质、核质和内含物。
革兰氏染色实验报告
细菌革兰氏染色实验报告作者：刘冲地址：山东大学摘要：本次实验是通过一种特殊的染色方法-----革兰氏染色法进行细菌鉴定。
细菌一般可分为革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌，本实验将通过革兰氏染色使细菌呈现不同的颜色以达到鉴别菌种的目的。
革兰氏阴性菌将呈现红色，革兰氏阳性菌将呈现紫红色。
要想达到此目的，要求革兰氏染色必须成功。
因此，在实验中要特别注意革兰氏染色的注意事项和影响实验成功的关键因素。
除了掌握革兰氏染色法外，我还掌握了油镜的使用。
实验得到了应有的结果，通过其颜色不同鉴别了实验菌种的革兰氏阴阳性。
关键词：革兰氏染色细菌鉴定颜色油镜前言：本实验的目的主要是通过动手操作使我们学习并掌握革兰氏染色法，了解革兰氏染色的原理，巩固显微镜操作技术及无菌操作技术。
革兰氏染色法可把细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两种类型，这是由这两种细菌细胞壁结构和组成的差异所决定的。
（细胞壁的组成结构比较可看下图）革兰氏染色有很大的意义，主要如下鉴别细菌、选择药物、细菌致病性（革兰氏阳性菌能产生外毒素，革兰氏阴性菌能产生内毒素，两者的致病作用不同）。
因此，革兰氏染色法有着广阔的应用前景。
在若干疾病中中，有很多都是由细菌引起的。
在生活中，细菌无处不在，不会由单一的菌种存在（除了特殊培养以外）。
因此，在探明病人病因时了解致病菌种是非常重要的。
革兰氏染色可以将病菌分为G+ G- 两种类型，我们可以通过这种方法对菌种加以鉴别，在医学上加以应用。
利用革兰氏阴阳性可以了解细菌的致病性情况，应用于医学造福人类。
1 材料与方法1.1材料1.1.1菌种大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌1.1.2 试剂试剂：革兰氏染液、草酸铵结晶紫染液、碘液、95％乙醇、番红复染液、水仪器：酒精灯、载玻片、显微镜、双层瓶（内装香柏油和二甲苯）、擦镜纸、接种环、试管架、镊子、载玻片夹子、滤纸、滴管1.2方法操作步骤示意图：步骤（一）制片。
分别取大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌按常规方法依次进行涂片（不宜过厚）、干燥（可以用酒精灯烘干）和固定。
革兰氏染色实验教学探讨
革兰氏染色实验教学探讨
胡勇;侯建勇;唐文凤
【期刊名称】《实验室科学》
【年(卷),期】2014(017)006
【摘要】革兰氏染色的结果受许多因素的影响,初做该实验的学生不易掌握.为更好地指导学生得到正确的实验结果,分别对菌龄、涂菌量和乙醇脱色等关键影响因素进行了探索.结果显示大肠杆菌革兰氏染色的最佳菌龄是10～24h,金黄色葡萄球菌是10～14h;两种菌的涂片菌量(厚度)为在直径0.5～1.0cm内涂1～2μL的涂片菌液;脱色时间是浸入酒精溶液中脱色20～ 30s.
【总页数】3页(P120-122)
【作者】胡勇;侯建勇;唐文凤
【作者单位】重庆理工大学药学与生物工程学院,重庆400053;重庆理工大学药学与生物工程学院,重庆400053;重庆理工大学药学与生物工程学院,重庆400053【正文语种】中文
【中图分类】O6-33
【相关文献】
1.微生物教学实验中菌株革兰氏染色反应快速判定 [J], 刘春爽;赵朝成;顾莹莹;张云波;刘芳
2.微生物学实验教学——细菌的革兰氏染色经典法和三步法的比较与分析 [J], 吴红萍;王陈仪;宋晶霞;金映虹;
3.创新革兰氏染色实验教学方法,提高实验教学效果 [J], 祝传贵
4.新型漏斗型染色架——应用于革兰氏染色实验教学的探索 [J], 周敏瑜;谭琼;熊群英
5.革兰氏染色实验中容易影响实验结果的各种因素 [J], 杨善林
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革兰氏染色法
革兰氏染色法革兰氏染色法(Gram's stain)是最常用的细菌染色法，本实验要求同学能正确掌握此染色方法的操作技术，理解其在鉴别细菌上的重要意义。
【原理】细菌经结晶紫初染染成蓝色。
革兰氏染色阳性菌（G+）细胞壁肽聚糖层数多，且肽聚糖为空间网状结构，再经乙醇脱水，网状结构更为致密，染料复合物不易从细胞内漏出，仍为蓝色。
而革兰氏染色阴性菌（G-）细胞壁脂类含量多，肽聚糖层数少，且肽聚糖为平面片层结构，易被乙醇溶解，使细胞壁通透性增高，结合的染料复合物容易泄漏，细菌被脱色为无色，再经石炭酸复红稀释液复染成红色。
【材料】【方法】按涂片→干燥→固定→染色→镜检的顺序进行。
准备载物玻片：用镊子从载物片缸中取出经3％盐酸酒精脱脂的载物玻片，用擦片布擦净，然后用特种铅笔在玻片背面画一个直径为1.5~2.0cm的圆圈，做为涂膜的标记范围。
1．涂片：按无菌操作取材法进行，具体步骤如下：用肉汤培养物涂片：①右手拿接种环的黑色塑料柄部分，左手托持试管。
②将接种环按15°角放在煤气灯的外焰中烧灼灭菌，直到把金属丝烧红(图1-2)，然后将铝制的银色柄部也通过火焰略加烧灼。
③用右手小指和手掌的前内缘拔掉左手所持试管的棉塞，并立即将试管口用火焰烧灼灭菌。
④用灭菌后已冷却的接种环伸入试管中取出材料(图1-3)，此时注意勿使沾有材料的接种环触碰试管壁及试管口。
⑤将试管口再次灭菌，棉塞也要在火焰上略加烧灼（时间要短以免点燃棉塞），塞好棉塞，放回原处。
⑥将接种环上之材料涂于载物片上，随后立即将接种环用火焰烧灼灭菌。
为防止细菌溅散污染环境，接种环灭菌前，须先将接种环靠近火焰或放内焰中烤干，然后再在外焰中烧红灭菌，杀死残留的细菌。
用斜面培养物涂片：用细菌斜面培养物涂片，需预先取一接种环生理盐水放在载物片上，然后再按无菌操作取材法从斜面培养物上取少量菌苔，在水滴内轻轻研磨将细菌制成菌悬液，再涂成一薄膜。
无菌操作取材步骤同前。
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革兰氏染色
实验目的
1.学习并掌握革兰氏染色
2.理解革兰氏染色原理
3.巩固显微和无菌操作技术
实验步骤
1. 制片将生长旺盛时期的细胞用常规方法涂片（不应太厚），干燥、固定。
2. 初染滴加草酸铵结晶紫覆盖细菌的涂层，1-2分钟，倾斜玻片，用水冲
洗至无色
3. 媒染先用卢卡氏碘液冲掉残余水分，然后用碘覆盖1分钟，倾斜玻片，
用水冲洗至无色
4. 脱色用吸水纸吸去残余水分，在白色背景下使用95%乙醇脱色（通常20-30秒），当流出水无色时立刻用水冲洗乙醇。
5. 复染用吸水纸吸净水分，番红染液染色2min，用水冲洗至无色。
6. 镜检油镜观察
7. 混合涂片染色在同一区域内将大肠杆菌和金黄色葡萄球菌混合涂片，其
他步骤同上。
实验结果
大肠杆菌呈杆状，，说明大肠杆菌是革兰氏阴性（G-）细菌。
金黄色葡萄球菌呈球形，革兰氏染色后的颜色为蓝色，说明金黄色葡萄球菌是革兰氏阳性（G+）细菌。
Gram stain
Experimental purposes
1. Learn and master the Gram stain.
2. Understand the principles of Gram stain.
3. Consolidate microscopy operation techniques and aseptic technique.
Steps
1. producer
Take an active growth phase bacteria by conventional methods of smear( should not be too thick), dried and fixed.
2. primary stain
Plus ammonium oxalate crystal violet dye covering bacteria coated , dyeing 1-2min, tilting to the dye, washed out of the water to colorless.
3. mordanting
First used Lugol iodine washed out residual traces of water, then iodine covered 1min, tilting to the iodine, washed out of the water to colorless.
4. destaining
Residual water on the slide with absorbent paper absorbed, on a white background use dropper flow plus 95% ethanol bleaching(Usually 20 ~ 30s), when the outflow of water was colorless as soon as wash with water liquid ethanol.
5. counterstain
Residual water on the slide with absorbent paper absorbed, stained with safranin counterstain 2min, washed, absorb residual water to dry.
6. microscopic examination
Observe oil microscope.
7. mixed smear dyeing
In same area on slide Escherichia coli and Staphylococcus aureus are mixed smear, other steps like as above.
Experimental results
E. coli is rod-shaped, after the gram stain colour to red, description the E.coli is gram-negative (G-) bacteria. Staphylococcus aureus is a spherical shape,after the gram stain colour to Blue, description the Staphylococcus aureus is gram-positive (G +) bacteria.。