食品微生物检测期末论文
食品微生物检验论文

食品微生物检验论文摘要:食品微生物检测项目主要包括反映食品污染程度的指示菌和致病菌,分子生物学技术、免疫学方法和仪器分析法为主要检测技术。
要从不断提高检测人员素质、设施设备的配置和正确使用、采集有代表性的检测标本和运输保存过程中避免污染等方面,做好质量控制工作,保证检测结果的准确性和可靠性。
关键词:食品微生物检测项目检测技术质量控制随着经济社会的快速发展和人民生活水平的不断提高,出现了各种各样的食品安全问题,成为全世界关注的焦点问题[1]。
食品微生物检验是食品监测必不可少的构成部分,是判断被检食品是否可被食用、衡量食品卫生状况的重要指标和重要判定依据之一。
食品微生物检测结果反映出食品卫生环境和食品加工环境的具体现状,能评价食品为微生物污染的状况,为食品安全监督和管理工作提供重要的科学依据。
为了提高食品卫生质量,保障饮食安全,笔者对食品微生物检验的主要项目、检验技术和质量控制进行分析。
1 食品微生物检验项目1.1 食品污染程度指示菌在食品加工、运输、储存一直到食用前的任何环节,微生物均可以通过各种途径进入食品中造成污染。
检测食品中的大肠菌群和菌落总数,可以评定食品污染的程度。
大肠菌群是指载7 ℃的条件下,能分解乳糖、产气、产酸的需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。
大肠菌群与粪便污染有关,一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。
因此将其作为粪便污染指标菌提出,表明食品是否存在粪便污染。
食品中的大肠菌群数是指在100 g或100 mL样本中,大肠菌群数的最近似数(MNP)表示。
大肠菌群数的高低,直接表明了粪便污染的程度,也间接反映了对人体健康危害性的大小。
食品中有粪便污染,则可以推测该食品中存在着肠道致病菌污染的可能性,可能出现食物中毒和流行病,对人体健康具有潜在的危险性。
菌落总数是指载37 ℃的普通琼脂培养基上,1 g或1 mL样品在培养24 h后所生长的菌落总数,是评定生活饮用水和食品污染程度的一个指标。
我国食品微生物检验检测体系的完善范文_毕业论文(20200210123434)

我国食品微生物检验检测体系的完善范文随着人们生活水平的提高,食品安全逐渐为政府和民众所重视。
在食品安全中,微生物污染造成的食源性疾病仍是世界食品安全中最突出的问题。
以下就是我国食品微生物检验检测体系的完善。
加工食品过程中,病菌常常会随原料的生产、成品的加工、包装与制品贮运进入食品中,造成食品污染,影响消费者的饮食安全。
因此食品微生物检验工作对评价食品卫生质量,保证消费者饮食卫生有着极为重要的作用,并且研究灵敏度更高、特异性更强、简便快捷的食品安全检测技术和方法,建立和完善食品安全微生物检测技术和体系迫在眉睫。
食品微生物检验的特点对食品中微生物的检验需要专门的仪器和技术设施,并由受过专门训练的工作人员负责操作进行,正是特殊的工作环境,形成了食品微生物检验自身的特征。
(一)涉及微生物范围广、要求高食品微生物检验的范围相当广泛,一般包括:第一,引起人畜食物中毒的微生物及其毒素,如沙门氏菌、小肠结肠炎耶尔森菌、黄曲霉菌、副溶血性弧菌、等十几种之多的病菌;第二是经食物传播的病原微生物,是人类疾病病原微生物、畜禽疫病的病原微生物、人兽共患传染病病原微生物。
这几类微生物的种类更多,一般情况下就可达1 / 2数百种之多;第三是食品工业微生物,如酿造、发酵工业用霉菌酵母等曲种。
除了微生物检验的范围广泛,并且在食品微生物检验过程中,采集样品也极为重要。
在采样时应对食品的原料来源、加工方法、运输、保藏条件及销售中的各个环节等在调查的基础上采集具有代表性的样品,采样过程,需追求无菌操作,采样数量及方法与检验目的相适应,采样现场的温度、湿度及卫生状况同时监控。
(二)受检细菌数量少,干扰性大食品微生物检验过程中的受检菌株,主要是生产加工、贮存运输、销售等过程中因操作不规范而感染的,大量存在的是非致病性微生物,而致病性微生物数量却相对较少,两者之间比例悬殊。
此外有些致病菌在热加工、冷加工过程中受到损伤,也会使受检菌株不易检出,从而给检验工作带来许多麻烦,影响检验结果的正确得出。
浅谈食品微生物检测及质量控制措施

浅谈食品微生物检测及质量控制措施摘要:当今,我国经济发展十分迅速,随着我国经济实力的不断提高,食品安全已成为人们关注的重点问题。
食品微生物检测的质量控制对食品质量与安全来说十分重要。
因此,我国要做好食品微生物检测的质量控制工作,使食品微生物检测的质量与准确性得到有效保障,并使食品的微生物风险得到有效管理与把控,使食品微生物检测能更高效且准确地反映该食品的食用安全性,从而保障食品安全。
关键词:食品微生物检测;质量控制引言随着社会的不断发展和进步,人们对于食品安全的要求也越来越高。
由于食品微生物检测项目繁多,对检验工作造成了一定的难度,因而必须加强对食品微生物检测的质量管理。
人们对食物的需求由“吃饱”转向“吃好”。
食品安全问题是人们日益关注的一项重大民生问题。
目前,我国食品检验工作已形成了一套系统化的管理模式,但也存在一些不完善的地方,因此,必须进一步完善食品检验制度,强化食品微生物检测的质量控制,保障人民的健康。
1食品微生物检测的概念及重要性食品微生物检测是指按照特定检测方法和多方面的质量控制措施检测食品中微生物、毒素的种类和数量,通过定性和定量分析评价食品卫生质量。
食品微生物检测是食品质量管理的重要组成部分,以“预防为主”为基本方针,通过食品检测有效避免和减少由食物引起的人畜共患病的发生,为人们的身体健康提供保护屏障。
食品微生物检测也是衡量食品卫生质量的重要指标之一,通过检测能够判断食品生产、加工、运输和保藏等环节的卫生环境和质量,进而判断食品是否符合食用标准,为食品能否食用提供科学依据。
2我国食品安全的现状2.1食品原料缺乏安全性食品原料是引起食品安全问题的主要原因,主要表现在污染环境。
为了追求经济利益,很多地方对生态环境保护意识淡薄,使生产原料的环境污染严重。
水中、土壤中的重金属、有害物质等存在严重超标的现象,从而严重影响食品原材料的质量。
在种植、养殖食品原料过程中,使用大量化学性药品和生物制剂,影响食品安全,危害人们的身体健康。
应用微生物论文1200字_应用微生物毕业论文范文模板

应用微生物论文1200字_应用微生物毕业论文范文模板应用微生物论文1200字(一):应用快速检测方法准确测定食品中的微生物论文影响食品安全的因素有很多,病原微生物是其中一个比较大的安全隐患。
随着检测技术的进步,出现了很多应用广泛的微生物快速检测方法,并具有检测速度快、检测准确性高等优点。
一、分子生物学快速检测方法1.PCR快速检测方法。
PCR技术是一种能够检测已知核酸序列的微生物检测技术,其通过大量复制微生物菌种的部分特异性强的DNA,如果食品中存在微生物菌种,能够复制出相关的特异性DNA片段,通过聚合酶链反应检测出微生物菌种,从而快速地检测出病原微生物。
该方法能够实现对很多微生物菌种的精确检测,包括乳酸菌、双歧杆菌、定分酵母、啤酒酵母、大肠杆菌、沙门氏菌、肉毒梭菌等非常多种类的病原微生物。
2.核酸探针快速检测方法。
核酸探针快速检测方法具有快捷、直接、准确度高等特点,其核心原理是碱基配对,主要过程如下:首先,选择一段DNA片段,对其进行标记;其次,提供一个可以使目的菌种的DNA和所标记的DNA片段进行杂交的环境;最后,根据杂交的结果,检测出食品中是否含有目标微生物。
二、免疫学快速检测方法1.荧光抗体快速检测法。
荧光抗体快速检测法利用荧光物质来标注抗血清抗体,从而使之形成抗抗体,然后用荧光显微镜对样品进行观察,通过对比来确定食品中是否存在微生物菌种,并且确定微生物的类别。
2.免疫酶快速检测法。
免疫酶快速检测法的检测原理是利用酶对抗体进行标记,通过使酶标记的抗体与抗原、酶标记的抗抗体与抗原结合物发生反应,从而形成特殊的组,而酶反应能够显色,从而检测出抗原抗体的存在,并计算出具体的浓度。
3.免疫磁珠快速检测法。
免疫磁珠快速检测法的原理是通过连接抗体的磁珠对目标菌种进行跟踪和捕捉,从而发现目标菌种,然后将发现的目标菌种样品放置到选择性平板之上,通过这样的方式对微生物菌种的情况进行仔细观察。
除此之外,这种方法还能够利用荧光标记抗体或者是酶标记抗体来对微生物菌种进行检测,再利用聚合酶链式反应来确定菌种的浓度等详细信息,在大肠杆菌、沙门氏菌等细菌的检测中有很好的效果。
(整理)食品论文食品检测论文

食品论文食品检测论文浅谈食品微生物检测技术和方法摘要:食品安全是一个重大的世界性公共卫生问题,不仅影响到人类的健康,而且关系到国家的稳定。
近几年各国的许多机构和学者都很重视食品微生物检测技术和方法的研究,本文对此进行了详细的介绍。
Abstract: Food security is a major public health problem in worldwide. It not only affects human health, but also relates to the country's stability. In recent years, many institutions and scholars attach great importance to the research on testing techniques and methods of food microorganism. This article describes this in detail.关键词:检测技术;微生物;食品安全Key words: detection;microorganism;food safety中图分类号:TS2文献标识码:A文章编号:1006-4311(2010)35-0157-01 0引言多年以来,对食品微生物的检测,通常采用琼脂平板培养法,共需2-3d才能完成。
近几年各国的许多机构和学者都致力于快速检测技术和方法的研究,已改进和开发了一些快速的检测技术和方法,文章对近几年食品微生物检测技术和方法进行介绍。
1食品微生物的分类和命名食品微生物无特殊的分类系统。
按照微生物分类系统,可将与食品密切相关的微生物分为细菌、酵母菌、霉菌和病毒。
由于微生物种类繁多,很多微生物的亲缘关系(根据生物的外部性状、内部结构、生活特性等加以确定)尚未清楚,所以尚不能完全按照亲缘关系进行分类。
细菌有3种不同分类系统,即克拉西里尼科夫氏、伯杰氏和普雷沃氏分类系统。
食品微生物卫生与检验课程论文.doc

我国食品常见污染微生物及其监测分析摘要:食品安全直接关系到人民群众生命、健康、社会稳定的重大公共安全问题。
而微生物污染又是这其中最为重要的因素。
食品法典委员会将微生物健康危害列为食源性危害的三大原因之一。
我国对食物中毒案例的分析资料显示,微生物食物中度比例高达67%。
在国家质检总局每年的食品质量监督抽查中,微生物指标不合格的情况也相当严重。
近年来,我国食品安全问题尤其是奶制品安全事故时有发生,奶制品企业社会责任的缺失程度令人震惊, 2004年爆发的劣质奶粉事件促使全国的奶制品行业进行新的整顿;2008年的三鹿奶粉事件致使三鹿企业倒闭关门;然而蒙牛眉山黄曲霉素事件又一次挑战了消费者的底线。
关键词:奶制品微生物污染一、奶制品的供应链奶制品供应链是指以奶制品企业为核心,有关奶制品生产销售和流通的相关联的主体之间形成的一种网链结构我国奶业多采用公司+ 奶站+ 农户模式,即分散饲养集中挤奶模式,使得奶制品供应链涉及原奶环节奶站环节生产企业环节流通销售环节消费环节等奶农分散饲养奶牛,将原奶销售给奶站;奶站将统一收购的原奶再汇总卖给奶制品加工厂;加工厂将原奶制成各式奶制品,包括奶粉纯牛奶酸奶冰激凌等等;再流经销售环节(包括批发商各大超市便利店等),最后进入到消费领域二、奶制品的污染微生物奶与奶制品富含蛋白质、脂肪、糖、无机盐、维生素等多种营养物质,且易被人体消化吸收,适宜各个年龄段的人食用。
但奶与奶制品易受到微生物的污染,在适宜条件下,微生物在奶和奶制品中可迅速生长和繁殖,这不但降低了奶与奶制品的营养价值,影响其风味,而且会对消费者的健康造成损害。
奶制品的营养成分比较完全,都含有丰富的蛋白质,极易吸收的钙和完全维生素等。
所以奶与奶制品是微生物的良好培养基。
奶与奶制品被为污染后不及时处理,乳中的微生物机会大量繁殖,分解糖、蛋白质和脂肪等,产生酸性物、色素、气体及有碍产品风味及卫生的小分子产物及毒素,从而导致奶品出现酸凝固,色泽异常,风味异常等腐败变质现象。
探讨微生物检测技术在食品检验中的应用

探讨微生物检测技术在食品检验中的应用摘要随着食品安全问题日益受到重视,对食品中微生物检测的需求也不断增加。
目前,基于微生物的食品检验技术在确定食品安全性方面发挥着重要作用,通过它可以快速准确地检测出食品中的有害微生物,以保证食品质量和安全。
本文主要从微生物检测技术的研究背景、检测原理及其优势优劣势等方面详细介绍了微生物检测技术在食品检验中的应用。
关键词:微生物检测;食品检验;检测原理IntroductionWith the increasing attention paid to food safety, the demand for microbial detection in food is also increasing. Microbial detection technology based on microbes is playing an important role in determining food safety, which can quickly and accurately detect harmful microbes in food to ensure foodquality and safety. This paper mainly introduces the application of microbial detection technology in food inspection from the research background, detection principle and advantages and disadvantages of microbial detection technology.Research BackgroundMicrobes refer to the tiny living bodies that can't be seen by the naked eye, including bacteria, yeasts, molds, viruses and protozoa. Microbes are everywhere in nature. Food is the most direct contact between human and microbes, and many microbesexist in the food itself or occur during its storage and processing. When food is contaminated by pathogenic microorganisms, it will not only cause food spoilage and deterioration, but also directly endanger human health, so it is very important to ensure the safety of food. At present, the detection and quantitative determination of microbes in food not only needs to be done quickly and accurately, but also needs to be done in a relatively wide range, so it is urgent to research a method that meets the requirements.Detection PrincipleMicrobial detection technology mainly includes traditional cultural method and modern detection technology. The traditional cultural method is mainly to cultivate microorganisms to determine the number of pathogens, while modern detection technology is mainly to use the specific biological characteristics of microorganisms such as antigen-antibody reaction, enzyme-linked immunosorbent assay, polymerase chain reaction and flow cytometry.Advantages and DisadvantagesConclusionIn summary, the application of microbial detection technology in food inspection has the advantages of fast, accurate and wide range detection, which can improve the accuracy and efficiency of food safety determination. However,the high cost of modern detection technology is a major obstacle to its application. Therefore, further research is needed to reduce the cost of equipment and improve the accuracy and speed of detection.。
食品微生物检验3篇

食品微生物检验第一篇:食品微生物检验的概述食品微生物检验是针对食品中可能存在的病原微生物进行的检测,其中包括细菌、真菌、病毒等多种微生物。
这些微生物可能会造成食源性疾病,对人体健康造成威胁。
食品微生物检验涉及的范围很广泛,主要涉及到食品的原料、半成品和成品。
检测的项目包括总菌落数、致病菌、霉菌、酵母菌等。
其中,总菌落数是指在一定条件下培养基上生长的微生物菌落总数,该测试反映了食品中微生物污染的程度。
致病菌是指一些在食品中比较常见的病原菌,如沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等。
霉菌和酵母菌多见于芝士、酱油、醋等发酵类食品中,如果数量过多,将会对食品的质量造成影响。
这些检测都需要高度专业的实验室设备和技术知识来保证检测的准确性。
同时,需要检测的标准必须符合国家相关法规和标准,以确保食品质量和人民健康。
总之,食品微生物检验是保证食品品质和人民健康的重要手段。
通过对不同食品中微生物的检测,能够在很大程度上防范食品中存在的潜在风险,从而保障公众的健康安全。
第二篇:食品微生物检验的实验室设备和方法食品微生物检验需要进行大量的实验室操作,包括样品制备、培养基制备、微生物的生长和检测等。
这些检测需要用到一系列的实验室设备和方法,包括:1.显微镜:显微镜是用于观察微生物的一种重要设备。
通过显微镜,可以观察到微生物的形态、大小等特征,进行分类、鉴定。
2.平板计数器:平板计数器是一种比较常见的微生物计数设备。
它基于微生物在培养基上生长的原理,可以对微生物的数量进行可靠有效的统计和计算。
3.培养箱:培养箱是用于控制微生物生长环境的设备。
其中包含了温度控制装置、适当的通风装置等,以提供微生物生长所需的最佳环境。
4.生物安全柜:生物安全柜是用于防止微生物污染的设备。
在样品制备和分离过程中,生物安全柜能够保护实验人员和环境不受微生物的污染。
5.酶标仪:酶标仪是用于检测微生物生长过程中所产生的代谢产物的设备。
通过对代谢产物的浓度进行测量,可以了解微生物的生长情况。
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基因芯片技术在微生物检测中的应用摘要: 基因芯片技术作为一种前沿生物技术,具有高通量、快速、灵敏的优点,在生物学和医学各领域都有广泛的应用。
本文主要对其原理、应用领域和在微生物检测中的应用做了一些介绍,分析了基因芯片技术发展中存在的一些问题,并对前景做了展望。
关键词: 基因芯片;微生物;检测;应用;发展前景21世纪,随着人类基因组计划(Human Genomic Progect,HGP)的完成,后基因组时代揭开了序幕,人类正从结构基因组学(Structural genomics)进入功能基因组学(Functional genomies) 和功能蛋白组学(Functional proteomics)时代。
自从1992年Afymetfix公司首次合成第1块基因芯片以来,在之后的十几年里该技术以其具有高通量、平行性、微型化、自动化、快速灵敏、样品用量少等显著特点被广泛应用。
基因芯片技术(gene chip technology,GCT)作为21世纪生物技术的重要发展,在许多领域均显示出了巨大的利用价值[1]。
基因芯片概念和原理基因芯片也称DNA微阵列,是生物芯片的一种[2]。
基因芯片原理最初是由核酸的分子杂交衍生而来的,即应用已知序列的核酸探针对未知序列的核酸序列进行杂交检测。
基因芯片制备及检测流程是利用原位合成法或将已合成好的一系列寡核苷酸以预先设定的排列方式固定在固相支持介质表面,形成高密度的寡核苷酸的阵列,样品与探针杂交后,由特殊的装置检出信号,并由计算机进行分析得到结果[3]。
该技术可检测各种环境或媒介中的微生物,研究复杂微生物群体的基因表达。
与传统方法相比,GCT先进性主要体现在:(a) GCT可以(b)操作简便快速,对环境中的微生物实现高通量和并行检测,一次实验即可得出全部结果;整个检测4h 基本可以出结果,而传统方法一般需4~7 d时间;(c)特异性强,敏感性高[4]。
1. 基因芯片的制备:主要包括载片处理、基因片段点阵和固定化等步骤,其中点阵和固定化技术主要有原位合成和合成后交联2种。
2. 样品的制备: 样品经处理提取到纯度足够高的DNA后,进行PCR扩增以富集目标分子并对目的基因进行标记,或将目标基因转录后制备成基因文库。
3. 分子杂交: 标记后的样品双链DNA一般先要经过高温变性为单链DNA再与芯片上的单链寡核苷酸探针杂交。
4. 杂交信号的检测: 样品与探针杂交反应结束并经洗涤后,完全杂交发生强的荧光信号或特殊波长的信号,不完全杂交则信号较弱,若不能杂交仅能测到芯片原有的荧光信号或检测不到荧光信号。
通过计算机控制的高分辨荧光扫描仪可并行采集大量的杂交信号,利用软件数据处理后可进行靶基因的综合信息分析[5]。
基因芯片技术的应用领域基因芯片技术具有微型化、集约化和标准化的特点,在分子生物学研究、医学临床检验、生物制药和环境医学领域得到了广泛的应用。
2.1科研领域GCT能够快速、准确地分析数以千计基因组信息,在科研各个领域具有广泛的应用前景,主要表现在基因表达检测、突变检测、基因组多态性分析和基因文库作图以及杂交测序等方面。
传统的实验方法研究细胞中的上千个基因的改变必须首先提取细胞中足量的核酸,然后标记每一种探针,再分别进行分子杂交检测。
而采用GCT检测基因表达的改变能够节省大量的人力、物力和财力。
2.2生物制药领域各大药厂和生物技术公司已经开始使用GCT进行新药的研发和筛选。
应用GCT进行基因测序、基因表达检测和新的遗传标志如单核苷酸多态性定位等,对寻找新的功能基因、寻找新的药物作用靶点和开发新的基因药物具有重要意义。
采用GCT可以检测不同物种、不同组织、不同病种、不同处理条件下的基因表达改变,从而指导开发具有不同用途的诊断试剂盒。
2.3医学诊断2.3.1在优生方面目前知道有600多种遗传疾病与基因有关。
妇女在妊娠早期用DNA芯片做基因诊断,可以避免许多遗传疾病的发生。
2.3.2基因芯片在医学领域的应用基因表达及调控研究人类的某些疾病及其后遗症相关基因可因内外环境异常而出现异常表达,因此可利用GCT对这些异常表达基因进行检测,找到其与疾病的相互关系,研究疾病发生的基因调控机制,可从根本上预防和治疗疾病。
其次,人类成长的不同阶段,基因表达也有很大差异,利用GCT可找出这些差异表达基因,研究不同时段及情况下的基因调控机制。
最后,在一些多基因与环境因素共同作用的疾病筛查中,如糖尿病、冠心病、高血压等,GCT作为较理想的了解基因相互作用关系的技术之一,也将扮演重要角色。
2.3.3应用于器官移植、组织移植、细胞移植方面的基因配型:如HLA分型。
2.3.4基因芯片可应用于病原体诊断:如细菌和病毒鉴定、耐药基因的鉴定等。
2.3.5在环境对人体的影响方面已知花粉过敏等人体对环境的反应都与基因有关。
若对与环境污染相关的200多个基因进行全面监测,将对生态环境控制及人类健康有重要意义。
2.3.6法医学方面DNA芯片比早先的DNA指纹鉴定更进一步,它不仅可做基因鉴定,而且可以通过DNA中包含的生命信息描绘生命体的脸型长相外貌特征。
这种检验常用于灾难事故后鉴定尸体身份以及鉴定父母和子女之间的血缘关系[6]。
3基因芯片技术在微生物检测中的应用3.1 在食源性致病微生物检测中的应用细菌、病毒和真菌等微生物是引起食品安全问题的重要危害因素,严重威胁人类的健康。
目前传统食源性微生物的检测方法主要包括前增菌培养、分离、生化鉴定和血清型鉴定等程序,但过程繁琐,而且操作相对独立,很难及时、高通量的对食品进行检测。
GCT可以对食品中的致病菌实行高通量和并行检测,一次实验即可得出全部的检测结果,且操作简单快捷、特异性强并且敏感性高,整个检测在几个小时内即可得到检测结果。
预计基因芯片检测食源性致病微生物技术将广泛应用于出人境检验检疫、食品质量控制、突发食品安全事件检测,将为食品安全提供更有力的技术保障。
3.2 在传染性致病微生物检测中的应用SARS冠状病毒在2003年曾在世界范围内流行,当时由其引起的严重急性呼吸综合征病死率高,虽然现在具有多种血清学和分子生物学技术用于病原体检测,如:ELISA、IFA等,但是没有任何方法能够在感染早期确认好排除SARS—CoV的感染。
清华大学联合中国军事医学科学研究所研制的70—mer基因芯片对SARS—CoV进行早期检测,他们试验证实了基于基因芯片的分子生物学检测方法对于SARS—CoV的检测是具有高度特异性而且可用于早期的检测。
他们的结果证实基于基因芯片的分子检测技术对SARS—CoV的检测是具有特异性的,而且对SARS病人的血清的检测率比单独PCR检测高8%。
3.3 在环境微生物群落分析中的应用微生物的生态多样性在各种生态系统的功能和持续都起着综合的、独特的作用,因而关系到地球在物质平衡、大气构成、地质形成等方面的变化,如微生物所进行的反硝化作用使土壤、海洋的氮预算失去平衡,所形成的中间产物NO和N:O的积累则是全球气候变暖和臭氧层的破坏的主要原因之一。
另外,微生物在环境的生物治理中有着极为重要的作用。
所以弄清楚微生物群落的组成、结构和功能,它们对毒素污染、气候变化、农业和工业活动等环境变化的反应和适应,对于持续和恢复理想的尘态功能是非常必要的。
然而,仅有小于1%的微生物能人为培养,微生物群落的定性和对其在自然环境中的种群的检测是长期困扰着微生物学家和生态学家的一大难题。
现已表明GCT是研究环境微生物群落的一种强有力的研究工具,同时也是研究原核和真核生物基因多态性的极好方法。
与传统的以膜为基础的杂交方法比较,以载玻片为支撑物的GCT具有高密度、快速检测、基于多荧光素标记的平行检测等多种优势,并且还有相对成本低、自动化、低背景噪音等特点。
可以预计,GCT将是研究微生物群落的一种潜在有力的方法。
3.4 在微生物菌种鉴定中的应用利用基因芯片杂交图像进行细菌基因分型与菌种鉴定,筛选监测细菌抗药性基因。
应用分枝杆菌基因芯片进行基因分型与菌种鉴定,筛选监测结核分枝杆菌利福平抗药性基因突变。
Gingeras等利用rpob寡核苷酸芯片技术与常规双脱氧核苷酸测序方法分析了10种分枝杆菌种间与种内的序列多样性,并确证了几种特异性单碱基多态性。
利用基因芯片技术可以对细菌基因组多个基因表达同时进行定量分析,为了解细菌调节网络,研究细菌对环境信号或药物的反应,研究细菌侵,袭力的发生提供了一种直接、高效的检测方法[7]。
4问题与前景GCT是20世纪90年代早期发展起来的一项革命性的新技术,它具有并行性、微型化和自动化的特点。
但它还没有大量的转化为商品使用,因为仍存在一些技术问题,主要有:第一,由于样品的制备仍与传统的样品制备一样,依赖于各种生物、物理和化学手段实现,阻碍GCT向微型化、集成化、自动化发展的环节就是样品制备的滞后,样品制备是制约GCT 发展的“瓶颈”[8]。
第二,GCT所需的寡核苷酸合成仪、点样仪和扫描仪等仪器价格昂贵,导致成本过高。
目前芯片检测的重复性不是很稳定,有一定程度的假阳性,这与影响杂交的各种因素有关,必须充分研究了各种因素对杂交的动力学的影响,才能提高芯片的特异性。
第三,由于不同的实验室、不同的实验人员对芯片检测的结果判断没有统一的标准,造成了芯片检测在国际上没有标准化。
第四,还需丰富微生物的基因组库,进一步提高信号检测的灵敏度。
GCT是一项综合的技术,它可以融入各种新的技术。
不对称PCR制备样品的文章已有不少,但不对称PCR用于制备单链探针的报道还几乎没有。
近年来发展的液相芯片(liquid chip)又称悬浮芯片(suspension array),由于杂交反应在悬浮的液相中进行,因此需要反应时间很短,杂交后经常不需要清洗就能直接读数,所以检测效率比固相杂交更高。
GCT发展的最终目标是将各种生物化学分析操作的整个过程,从样品制备、生化反应到结果检测,都集成化并微缩到芯片上完成,即构建微缩芯片实验室(lab-on-chip)。
随着技术的不断发展和研究的更加深入,GCT必将对21世纪的社会经济和发展、人类的生活和健康产生更加深远的影响[9]。
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