肺积方抗小鼠肺癌转移
消积饮抑制小鼠Lewis肺癌细胞增殖及其分子机制
为 了 在 分 子 生 物 学 水 平 上 研 究 中药 的抗 癌 机 理 ， 研 究 采 用 小 本 鼠移植性肿瘤模 型 ， 察 中药复 方（ 积 饮） 肺癌 Ｐ Ｎ Ｒ 观 消 对 Ｃ Ａ、 Ｂ 蛋 白表 达 的影 响 ， 明 消 积 饮 抑 癌 的 分 子 机 制 ， 而 为 临 床 治 阐 从 疗肺癌提供实验依据 。
完 整 剥取 皮 下 肿 瘤 ， 除 血 污 、 肪 等 非 肿 瘤 组 织 ， 电 子 天 平 去 脂 用 称 量 瘤 重 ， 算 抑 瘤 率 。抑 瘤 率 一 （ Ｔ）ｃ× １０ （ 计 ｃ ／ ０ Ｃ为 对 照 组 平 均 瘤 重 ， 为 实 验组 平 均 瘤 重 ） Ｔ 。用 磷 酸 缓 冲液 （ Ｂ ） 肿 Ｐ Ｓ将
１ 材 料 与 方 法
１ １ 材 料 １ １ １动 物 及 瘤 株 ： 物 ： ５Ｂ ／ ． ．． 动 Ｃ ７ Ｌ ６小 鼠 ，
体 重 （ ０ ２ ｇ 由 中 山 医 科 大 学 实 验 动 物 中 心 提 供 ， 清 洁 级 ２ ± ）， 按
显 色 ， 木 素 衬 染 ， 片 。实 验 设 阴性 对 照 及 阳性 对 照 ； 微 镜 苏 封 显 下 观 察 ， 胞 核 呈 棕 黄 色 颗 粒 状 为 阳 性 。计 算 标 记 指 数 细 （ ａ ｅ ｎ ｄｘ， Ｉ ， 张切 片 在 高 倍 镜 下 观 察 ｌ Ｌ ｂ ｌ ｇｉ ｅ Ｌ ）每 ｉ ｎ Ｏ个 视 野 ， 记 录 １０ ００个 肿 瘤 细 胞 ， 算 阳 性 细 胞 指 数 （ Ｃ Ａ Ｌ ） （ Ｂ 计 Ｐ Ｎ Ｉ及 Ｒ
陕西 中 医 ２ ０ ０ ９年第 ３ Ｏ卷第 ４期
４７ ９
消积 饮抑 制小 鼠 Ｌ ｗｉ 癌 细 胞增 殖 及 其分 子 机 制 ｅ ｓ肺
中药复方治疗肺癌实验研究进展
０ ５ ；中药高剂量组大 鼠抑癌基 因 ｐ １ ．） ０ ２ 表达高于模型组
（ ＜００ ） Ｐ ． 。结果证 明，补 肾益 肺解毒方 能降低大 鼠癌 ５ 基 因 Ｋ． ａ 的表达、升高抑癌基因 ｐ １ ｒｓ ２ 的表达 ，说 明该 方可 以增强机体 的免疫功能 、有效地抑 制大 鼠肺癌的发
生 、发 展 ］ 。
均下 降 （ ＞００ ，Ｐ＜０ １ ，而 各组 Ｒ ｆ ＭＥ 表达 Ｐ ． ５ ． ） ０ ａ和 Ｋ
草 、法半夏 、瓜萎皮等药物组成 ） ，并通过实验观察其对 大 鼠肺癌 的干预 作用 。补 肾益肺解毒方对 大 鼠肺癌 的发 生有显著 的抑制作 用 ，改善大 鼠一般状态 ，保 持体质量 稳定 ，与模 型组 比较差 异有统计学 意义 （ Ｐ＜０ ５ ，同 ． ） ０ 时能够提高 大 鼠脾 指数 ，中药高剂量组 的作用 效果显著
３ 麦门冬汤合苇茎汤
虚 Ｌ ｗｓ ｅ ｉ肺癌 小 鼠肿瘤 生长 、 生存期及 Ｐ Ｄ １Ｐ ＤＸ ６ Ｒ Ｘ．、 Ｒ ．
表达 的影 响研究表 明， 益气 除痰方能抑制脾虚小 鼠 Ｌｗｉ ｅ ｓ
◎ 健 鲢
邹 勇 王 利
（ 山东省烟台市毓璜顶医院，烟台 ２４ ０ ） ６ ０ ０
晨
中药复 方治疗肺癌 实验研 究进展
关键词 ：中医药；复 方；肺癌 ；实验研 究 ｄ ｉ ０３ ６／．ｓ．６ ２２ ７ ． １ ． ．１ ｏ ：１ ．９ ９ ｉ ｎ１ ７ —７ ９ ０ ２０ １７ ｊｓ ２ ９ 文章编号 ：１７ ・７ ９（ ０ ２）一９０ ６ —４ ６ ２２ ７ ２ １ ０ —１ １０
形成 的。肺岩 宁冲剂 由生黄芪 、干 蟾皮、蜂房 、仙灵脾 、 黄精等十一 味药物 组成 ，该方 能够稳 定晚期肺 癌瘤体 ，
润肺消积胶囊对小鼠肺癌治疗作用的实验研究
பைடு நூலகம்
给药组、西药化疗组 ；另选未建模ｌ 只小鼠作为正常组。 Ｏ ⑤润肺消积胶囊治疗肺癌模 型小鼠 造模后第６ 天开始给药 ，模型对照组给予生理盐水 ，按 ｌｍ ／ ｇ Ｏ ｌ ｋ 灌胃；低 中高剂量组分别给予０ ５ ｌ ． ｍ 汤剂，早 晚给每 天二次 ；西药组按２ ｍ ／ ｇ ５ ｇｋ 用生理盐水配成 ，给予０ ２ ｌ ． ｍ ，每 天 一次给５ 。疗程均 为１ ｄ 天 ４ 。第 ｌ 天观察小 鼠体重变化 ， ５ 各组分别 处死 小 鼠５ ，取 出各组处死 的荷瘤小 鼠瘤 体的重 只 量 ，称重后再计算 出各组小 鼠的肿瘤生长抑 制率 。
中 国 民 族 民 间 医 药
・
论 著
Ｔｅｔｅ ｒ ａｉ ｓ
２０・
Ｃｈ ｎ ｓ ｏ ｒ ａ ｆＥｔ ｎ ｍｅ ｉｉ ｅ ａ ｄ Ｅｔ ｎ ｐ ａ ｍａ ｙ ｉ ｅ ｅ Ｊ ｕ ｎ ｌ ｏ ｈ ｏ ｄ ｃｎ ｎ ｈ ｏ ｈ ｒ ｃ
润肺 消 积胶 囊对 小 鼠肺 癌 治 疗 作 用 的 实验 研 究
比 较 ，Ｐ ． ５ ＜０ ０ ．
由表 １ 可见，中药低剂量给药组、中剂量给药组、高剂 量 给药组 的小 鼠体重均 大于模 型对照组 ，经 统计学检验 ， 低 、中 、高剂 量给药组 与模型对 照组的差别均有 统计学意 义 （ ＜０ ０ ）；西药化疗 组小 鼠体 重低 于模 型对 照组 ，且 Ｐ ．５ 两 者 差 别 具 有 统 计 学 意义 （ ＜０ ０ ） 。 Ｐ ．５ ２ ２ 润 肺消积 胶囊对 小 鼠肿瘤重 量及 生长抑 制率 的影响 ．
计 量资料Ｘ Ｄ ±Ｓ 表示 ，两样本 均数 的比较 用ｔ 检验 。用 Ｓ Ｓ １ ． 统计软件 ，对数据进行统计学 处理 。 ＰＳ３Ｏ ２ 结 果 ２ １ 润肺消积胶囊对肺癌小 鼠体重的影响 （ ． 见表 １ ）
中药复方肺积散对肺癌小鼠Fas／FasL蛋白表达影响的实验研究
作者简介 ： 静（ ９ ３一） 女 ， 郝 １８ ， 现为黑龙江省中医药大学 ２０ ０ ６级 中西医 结合肿瘤研 究方 向硕士研 究生 。 通讯作者 ： 姜家康（９４一）男 ， ， １６ ， 教授 主要从事中西医结合肿瘤学研究。
收 稿 日期 ：０ ８—１ ２０ ２—１ ６
修 回 日期 ：０ ９—０ —１ ２０ １ ２
本研 究采 用 小 鼠移 植性 Ｌ ｗ ｓ 癌模 型 ， ｅ ｉ肺 进行 中 药 复方 肺积 散免 疫抑 制 作 用 的实 验 研 究 ， 研 制 理想 为 的可供 临床 应用 的抑 制 剂提供 实 验依据 。
１ 材 料 与方 法
１１ 动物 近 交 系 Ｃ ７小 鼠 ４ ． ５ ０只 ， 性 ， 龄 ， 雄 ６周 体 重 １ ２ ｇ 由哈 尔 滨 医科 大 学 肿 瘤 医 院动 物 实 验 中 ９～ ２ ， 心提 供 。 １２ 瘤 株 Ｌ ｗ ｓ 癌 瘤株 ， ． ｅ ｉ肺 由长 春生 物 试 剂 动 物 实 验 中心提 供 。 １ ３ 药物 复方肺 积散 ： 子参 、 ． 太 黄芪 、 丹皮 、 术 、 牡 莪 白花 蛇舌 草 、 山慈菇 、 苓 、 门冬 、 茯 麦 天花 粉 、 骨皮 、 地 天 门冬 、 草等 十二 味 中药组 成 ， 甘 由天 江 医药公 司提 纯制 作 ， 沸水 冲 泡 ， ０ ２ ｌ 药量 相 当于 ６ ｇ・ ｇ 经 每 ．ｍ 含 ０ ｋ ～。 １４ 主要 试 剂 和 仪 器 设 备 医 用 超 净 工 作 台 Ｓ — ． Ｗ ＧＦ： 国苏 州净 化设 备 厂 ； 低温 冰箱 Ｍ Ｆ一３８ 日 Ｉ 中 超 Ｄ ２： 本三洋公司 ； 高速冷冻离心机 ：２ Ｒ １日本 Ｅ立制作所 ； ｔ 透射 电子 显微 镜 ： 一６ ０ 日本 １立 公 司 ； 子分 析 天 Ｈ ０ ３ 电 平 ： Ｂ一 ０ Ｎ梅 特勒 托利 多有 限公 司 。 Ａ ２ ４一 １ ５ Ｌ ｗｓ 癌 动 物模 型 的 建 立 液 氮 冻 存 的 小 鼠 ． ｅ ｉ 肺 Ｌ ｗｓ ｅ ｉ 肺癌 细 胞复苏 后 ， 先接 种 于 ３只小 鼠右腋 窝下 传 代 ； 死小 鼠 ， 处 按无 菌操 作程 序 ，０ １ｄ后 ， 脱颈 处 死 Ｌｗ ｅ—
中国中医秘方大全-肺癌18方之欧阳德创编
1．益肺消积汤中文名称: 益肺消积汤来源: 上海中医学院附属龙华医院刘嘉湘。
[功能主治] 功能益气养阴，清热解毒，软坚化痰。
主治原发性肺癌。
[处方组成] 生黄芪30克，生白术12克，北沙参30克、天冬12克、石上柏30克、石见穿30克、白花蛇舌草30克、银花15克、山豆根15克、夏枯草15克、海藻15克、昆布12克、生南星30克、瓜蒌皮15克、生牡蛎30克，水煎服，3个月为1疗程。
[辨证加减] 阴虚去黄芪、白术，加南沙参、麦冬、元参、百合、生地；气虚去北沙参、天冬，加党参、人参、茯苓；肾阳虚加补骨脂、仙灵脾、菟丝子、肉苁蓉、锁阳。
[临床疗效] 本方治疗经细胞学或组织学检查证实的不能手术的晚期(Ⅲ、Ⅵ期)原发性肺鳞癌60例和晚期原发性肺腺癌62例，均于住院时各随机分为中药组和化疗组对比观察。
中药组以本方辨证加减治疗，肺鳞癌治后1、2、3年生存率为66.7％、13.3％、3.3％；化疗组为33.3％、3.3％、0％；中位生存期中药组为465天，化疗组为204天，两组比较差异显著。
肺腺癌治后1、2，3年生存率，中药组为50％，13.3％、13％；化疗组为15％、6.25％、4.76％；中位生存期中药组为350天，化疗组为200天，两组比较差异显著。
治后病灶稳定率、生存质量，中药组均优于化疗组。
实验研究表明，中药组治后NK细胞活性、巨噬细胞吞噬率、E玫瑰花结形成率、CAMP等免疫功能均有显著提高，化疗组则无变化。
[处方来源] 上海中医学院附属龙华医院刘嘉湘。
[按语] 《医宗必读》谓“积之成也，正气不足，而后邪气踞之。
”说明正气虚损是肺癌发生的内在原因，肺癌到了晚期，患者正气虚损尤为显著，因此治疗应以扶正为主，祛邪为辅。
方中黄芪、白术益气，天冬、北沙参养阴；石见穿、白花蛇舌草、山豆根、生南星、夏枯草等清热解毒，化痰软坚，再结合辨证加减治疗晚期肺鳞癌、腺癌取得了良好的疗效。
2．破瘀散结汤中文名称: 破瘀散结汤来源: 上海市中医医院沈丕安。
调气消积汤对Lewis肺癌移植瘤MVD、MMP-9影响的实验研究
的调气消积汤 ０ ４ ｌＭＧ、 Ｇ组 分别予饮 用水 ０ ４ ｌ每 ．ｍ ； Ｄ ．ｍ ； 日 １次 ， 连续 １ ２天 。Ｄ 和 Ｚ 组 予顺 铂 注射 液 ０ １ｍ ； Ｇ Ｇ ．３ｌ ＭＧ、Ｇ组 分别予生理盐 水 ０ １ｍ 注射 ； 日１次 ， ３天。 Ｔ ．３ ｌ 隔 共
２ ３ 实验 观 察 指 标 及 检 测 方 法 ．
摘
要 目的 ： 讨 调 气 消积 汤 对 Ｌ ｗｓ 癌 移植 瘤 Ｍ Ｄ、 探 ｅ ｉ肺 Ｖ ＭＭＰ一９表 达 的影 响 。 方 法 ： ４ 将 ８只 Ｃ ７ Ｉ ５ ＢＭ
６ 鼠 常规 接 种 Ｌｗｓ 癌 ， 后 选取 荷 瘤 成 功 的 小 鼠 随 机 分 ４组 ： 瘤 对 照 组 （ Ｊ小 ｅ ｉ肺 ５天 荷 ＭＧ） 调 气 消 积 汤 组 、 （ Ｇ） 顺 铂 组 （ Ｇ） 综合 组 （ 气 消 积 汤 ＋顺 铂 组 ） Ｚ ， 组 ｌ 只 。 每 天 分 别 予饮 用水 、 气 消 积 汤 Ｔ 、 Ｄ 、 调 （ Ｇ） 每 ０ 调
（ ＭＧ） 调气 消积汤组 （ Ｇ） 顺铂组 （ Ｇ） 综合组 （ 、 Ｔ 、 Ｄ 、 调气消积
汤 ＋顺铂组 ） Ｚ ， （ Ｇ） 每组 １ ０只。各 组均在 接种 ５天 后晨 起
近 交系 Ｃ７ Ｌ６ ５ Ｂ ／Ｊ小 鼠 ５ Ｏ只 ， 为 均 空 腹 开 始 给 药 。Ｔ 组 和 Ｚ Ｇ Ｇ组 分 别 予 相 当 于 含 生 药 １ ． ｇ ６５／
结论 ： 气消积汤能 降低 Ｌ ｗｓ 调 ｅ ｉ 肺癌移植 瘤的微 血管密度 （ Ｄ） 并通过 下调基 质金属蛋 白酶 一 （ ＭＶ ； ９ ＭＭＰ
一
９ 的表达抑制肿瘤血 管形成 。 ）
肺 肿 瘤／ 医 药 疗 法 中 ＠ 调 气 消积 汤／ 疗应 用 小 鼠 治
玉屏风颗粒通过调节EMT对Lewis荷瘤小鼠肿瘤转移的影响
玉屏风颗粒通过调节EMT 对Lewis 荷瘤小鼠肿瘤转移的影响Δ林映雪 1＊，崔海鹏 2，王领弟 1，杨昌硕 3，庄朋伟 3 #（1.承德医学院附属医院药学部，河北 承德 067000；2.承德医学院病理生理学教研室，河北 承德 067000；3.天津中医药大学中药学院，天津 300193）中图分类号 R 965 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2023）17-2090-05DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2023.17.08摘要 目的 探讨玉屏风颗粒通过调节上皮-间充质转化（EMT ）改善上皮屏障功能并抑制肿瘤转移的作用。
方法 将30只C 57BL/6小鼠按随机数字表法分为正常组（蒸馏水）、模型组（蒸馏水）和玉屏风颗粒组（40 g/kg ），每组10只。
模型组与玉屏风颗粒组小鼠通过右腋皮下接种Lewis 肺癌细胞复制小鼠自发肺转移模型。
造模成功后，各组小鼠灌胃水/药物，每天1次，连续15 d 。
通过观察/测定小鼠肺组织病理形态、肺组织肿瘤转移灶计数、肿瘤转移灶、癌胚抗原表达来考察玉屏风颗粒对肿瘤转移的影响；通过qRT-PCR 法和Western blot 法检测小鼠肺组织中β-连环蛋白（β-catenin ）、E-钙黏蛋白（E-cadherin ）、波形蛋白（vimentin ）mRNA 及其蛋白表达来考察可能的作用机制。
结果 与模型组比较，玉屏风颗粒组小鼠肺表面转移结节总数显著减少（P ＜0.05），肺组织大体形态有所恢复，肺组织癌胚抗原表达显著减弱（P ＜0.05），且肺组织中E-cadherin mRNA 及其蛋白表达水平均显著升高（P ＜0.05），vimentin 、β-catenin mRNA 及其蛋白表达水平均显著降低（P ＜0.05）。
结论 玉屏风颗粒可能是通过调控β-catenin 表达来抑制EMT 的发生，进而改善小鼠的上皮屏障功能，发挥抑制肿瘤细胞侵袭、迁移的作用。
润肺消积胶囊对小鼠Lewis肺癌抑瘤作用的机理研究
盐水稀释成0 2m mL， . 3m og， . 创 每只0 UZ 腹腔注射， 每日1 次， 共 给药 lsd。
1. 5 实验指标及测定方法
1 材料与方法
1. 1 材料
动物及瘤株:选取近交系C5 尼L小鼠5 只， 7 0 雄性，周龄， 6
体重1 一 8 229， 黑龙江中 药大学实验动物 由 医 研究中 提供; 心
1 wis 肺癌瘤株， 无 由哈尔滨医科大学肿瘤医院提供。
1. 2 药物
肺癌组织: ( 1 肿瘤重量:完整剥离肿瘤， ) 天平称重;(2 体重 ) 变化: 去除肿瘤后的小鼠 体重;(3) 经 10%Bo i ’固 u n 5 定液固定， 常规石蜡包埋、 切片、 染色、 光镜下观察肺癌组织的形态。 1. 6 统计学处理 数据采用SP s 3. 统计软件进行处理， Sl 0 数据处理实验结果 以(又土 )表示， ， 样本均数的比 较用方、 黄蔑、 获荃、 三棱、 羲术、 鱼腥草、 桃 仁、 当归、 白花蛇舌草、 天花粉等 1 味中药组成( 天江医药公司 6
提纯制作) ， 经沸水冲 使0 2m 含药量相当 0 昨9。 泡， . L 于6 顺铂注 射剂(齐 鲁制药厂生产， 5 0 02 )。 批号:0 6 1
疫力等机制抑制肿瘤。
【 关键词〕肺癌; 中医; 中药; 润肺消积胶囊
[中图分类号] R 79.1 9 [文献标识码〕A [文章编号] 1673一 2 0 7刃 63一 9701( ( ) 7一 01
通过动物实验观察中药复方润肺消积胶囊对h 初 5肺癌荷 瘤小鼠 体重、 瘤重以及对肿瘤组织病理切片的观察， 探讨润肺消 积胶囊对肿瘤的作用机理。
l x lo， m L瘤细胞。 个l 选c57旧 L小鼠， 体重15 一 于 小 229， 每只
《2024年自拟健脾除积方联合免疫检查点抑制剂治疗晚期非小细胞肺癌的临床观察》范文
《自拟健脾除积方联合免疫检查点抑制剂治疗晚期非小细胞肺癌的临床观察》篇一一、引言非小细胞肺癌（NSCLC）是全球最常见的肺癌类型，其治疗一直是临床上的重要课题。
随着医学的进步，免疫治疗在肺癌治疗中显示出显著的效果。
然而，对于晚期非小细胞肺癌患者，单纯的免疫治疗或传统治疗方法往往难以达到理想的疗效。
近年来，中西医结合治疗在肺癌治疗中逐渐受到重视。
本文旨在探讨自拟健脾除积方联合免疫检查点抑制剂治疗晚期非小细胞肺癌的临床效果及安全性。
二、方法本研究采用自拟健脾除积方联合免疫检查点抑制剂对晚期非小细胞肺癌患者进行治疗。
自拟健脾除积方根据中医理论，针对患者体质及病情进行个性化配伍，旨在改善患者脾胃功能，消除痰湿积聚。
免疫检查点抑制剂则通过激活患者自身的免疫系统，增强对肿瘤的攻击力。
三、研究对象与分组本研究共纳入晚期非小细胞肺癌患者XX例，按照随机数表法分为两组。
对照组采用常规化疗及免疫检查点抑制剂治疗，实验组则在对照组基础上加用自拟健脾除积方。
两组患者在性别、年龄、病情等方面无显著差异，具有可比性。
四、治疗方法与观察指标1. 治疗方法：对照组患者接受常规化疗及免疫检查点抑制剂治疗。
实验组患者在对照组基础上，每日服用自拟健脾除积方，连续治疗XX周。
2. 观察指标：比较两组患者治疗前后的生活质量、肿瘤大小、免疫功能等指标。
记录治疗过程中出现的不良反应及并发症情况。
五、结果1. 生活质量：实验组患者在治疗后生活质量评分明显高于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）。
2. 肿瘤大小：实验组患者肿瘤缩小率及疾病控制率均高于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）。
3. 免疫功能：实验组患者治疗后免疫功能较对照组有明显改善，T淋巴细胞亚群及NK细胞活性均有所提高（P<0.05）。
4. 不良反应及并发症：两组患者在治疗过程中均出现了一定程度的不良反应及并发症，但实验组患者的不良反应及并发症发生率较低，且程度较轻。
小鼠皮下及肺转移肿瘤模型制备
小鼠皮下及肺转移肿瘤模型制备宋天姣;曹倩文;王娜;田雨;郑全辉【摘要】①目的经皮下和尾静脉注射，制备小鼠黑色素瘤细胞增殖、转移模型。
②方法体外培养黑色素瘤细胞，分别经腋部皮下和尾静脉注射接种C57BL／6小鼠，接种剂量分别为1×106／只和3×105／只，2周后观察黑色素瘤形成及肺部转移情况。
③结果黑色素瘤细胞注射2周后，经皮下接种的小鼠腋窝出现明显肿瘤，成瘤率达100％；经尾静脉注射的小鼠肺部出现大量黑色素瘤结节，肿瘤转移率达90％。
④结论经皮下和尾静脉注射方法能够成功制备小鼠的肿瘤细胞增殖和转移模型。
%Objective To prepare tumor proliferation and metastasis mouse models through sub‐cutaneous and tail vein injection of melanoma cells .Methods Melanoma cells (1 × 106/100uL )were subcutaneously injected into C57BL/6 mice from the axillary region to prepare the tumor proliferation mouse model;melanoma cells(3 × 105/100uL)were injected by tail vein to prepare the tumor metasta‐sis mouse model .Melanoma tumor formation and lung metastasis were detected 2 weeks after melano‐ma cell injection .Results The subcutaneously injected mice showed obvious melanoma formation in the axillary region and the tumor formation rate was 100% .The lung of tail vein injected mice showed apparent melanoma nodules and the tumor metastasis rate was 98% .Conclusion Tumor proliferation and metastasis mouse models can be successfully prepared by subcutaneous and tail vein injection of melanoma cells .【期刊名称】《河北联合大学学报（医学版）》【年(卷),期】2016(000)001【总页数】2页(P1-2)【关键词】肿瘤细胞;黑色素瘤;增殖;转移【作者】宋天姣;曹倩文;王娜;田雨;郑全辉【作者单位】华北理工大学河北唐山 063000;华北理工大学河北唐山 063000;华北理工大学河北唐山 063000;华北理工大学河北唐山 063000;河北省慢性疾病重点实验室【正文语种】中文【中图分类】Q784[ABSTRACT] Objective To prepare tumor proliferation and metastasis mouse models through subcutaneous and tail vein injection of melanoma cells.Methods Melanoma cells(1×106/100uL)were subcutaneously injected into C57BL/6 mice from the axillary region to prepare the tumor proliferation mouse model;melanoma cells(3×105/100uL)were injected by tail vein to prepare the tumor metastasis mouse model.Melanoma tumor formation and lung metastasis were detected 2 weeks after melanoma cell injection.Results The subcutaneously injected mice showed obvious melanoma formation in the axillary region and the tumor formation rate was 100%.The lung of tail vein injected mice showed apparent melanoma nodules and the tumor metastasis rate was 98%.Conclusion Tumor proliferation and metastasis mouse models can be successfully preparedby subcutaneous and tail vein injection of melanoma cells.[KEY WORDS] Tumor cell metastasis.Melanoma.Proliferation.Transfer目前恶性肿瘤已成为一类严重威胁人类健康的多发病和常见病，其发病机制仍未完全阐明，对肿瘤有效的治疗措施还处在不断探索之中。
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肺积方抗小鼠肺癌转移作者：田建辉, 施志明，周之毅, 黄云胜, 王琳【摘要】目的：观察肺积方对小鼠肺癌转移的疗效。
方法：采用小鼠转移瘤模型，24只C57BL/6小鼠分为模型组、顺铂组和肺积方组，每组8只。
模型组以生理盐水0.3 ml灌胃，肺积方组予肺积方煎剂（4 g/ml）0.3 ml灌胃，1次/d，顺铂组予顺铂（0.5 mg/ml）0.52 ml腹腔注射，1次/3 d。
干预20 d后，称取小鼠体质量、瘤质量和肺质量，玻片计数法计数肺部转移灶的数目。
结果：顺铂组小鼠的体质量低于模型组和肺积方组（P＜0.01），而肺积方组体质量最大；顺铂组和肺积方组的瘤质量低于模型组（P＜0.01）；顺铂组和肺积方组小鼠肺部转移灶数目比模型组少（P＜0.01）。
结论：肺积方可以抑制肿瘤生长，减少肺部转移瘤的个数，并具有保持小鼠体质量的作用。
【关键词】肺癌转移中医药肺积方小鼠Methods: The lung cancer metastasis model of mice was established in this experiment study. Twenty four mice were randomly divided into three groups: untreated group, cisplatin group and Feiji Formula group. Mice in the Feiji Formula group were treated with Feiji Formula decoction; in cisplatin group, with cisplatin by intraperitoneal injection; and in the untreated group, with normal saline (NS). After twenty day treatment, the body and tumor weights as well as the number of metastatic tumors in both lungs of each mouse were measured.Results: The body weight of mice in cisplatin group was significantly less than that of Feiji Formula group and untreated group (P＜0.01); the tumor weight of mice in cisplatin group and Feiji Formula group was markedly lower than that of untreated group (P＜0.01); and the number of metastatic tumors in cisplatin group and Feiji Formula group was markedly lower than that of the untreated group (P＜0.01), no significant difference between the Feiji Formula group and cisplatin group in terms of the weights and the numbers of metastatic tumors in bilateral lungs.Conclusion: Feiji Formula can suppress tumor growth and decrease the number of lung metastatic tnmors in the mice, and maintain the body weight of the mice.Keywords: lung cancer; metastasis; traditional Chinese medicine; Feiji Formula; mice肺积方是上海中医药大学龙华医院施志明教授的经验方，多年来在临床用于治疗肺癌，取得良好的效果。
临床研究证实，肺积方可稳定瘤体，改善中晚期非小细胞肺癌患者的临床症状，提高生存质量；机制研究表明肺积方可以通过多途径干预肺癌免疫逃逸,恢复机体的免疫监视作用，提高临床疗效［13］。
为进一步明确肺积方的作用，本研究采用小鼠转移瘤模型，观察肺积方的抑瘤作用和抗肺癌转移的作用。
1 材料和方法1.1 实验材料1.1.1 实验动物及瘤株 24只C57BL/6小鼠，雌雄各半，体质量（16±2）g，中国科学院实验动物中心提供，按清洁级标准饲养。
小鼠Lewis肺癌细胞株和瘤块种鼠1只，由上海市肿瘤研究所姚明研究员惠赠。
1.1.2 实验药物肺积方由生黄芪30 g、北沙参12 g、麦冬12 g、天门冬12 g、茯苓15 g、石上柏30 g、石见穿30 g、鱼腥草15 g、七叶一枝花24 g和山慈菇30 g组成。
浓煎成4 g/ml浓度，于4 ℃冰箱中贮存备用；顺铂由山东齐鲁制药厂生产，20 mg/支，批号为990711。
1.2 实验方法1.2.1 造模及分组在无菌台上剥离瘤种的瘤块，在含有抗生素的生理盐水中将瘤块剪成1 mm×1 mm×1 mm的瘤块。
取24只实验小鼠，将上述组织块采用20号套管针植入右侧腋后皮下。
将小鼠随机分为模型组、顺铂组和肺积方组，每组8只，各组间小鼠体质量差异无统计学意义。
接种后第2天开始灌胃干预治疗，共计20 d，治疗结束时处死取材。
模型成功率100%，所有小鼠存活并纳入统计分析。
1.2.2 给药方法肺积方组：肺积方汤0.3 ml灌胃，1次/d，连续20 d。
顺铂组：生理盐水配制成0.5 mg/L的顺铂溶液，根据人的常规用量换算［4］，每只0.52 ml/3 d，腹腔注射。
模型组：生理盐水0.3 ml灌胃，1次/d，连续20 d。
1.2.3 观察指标 20 d后，称取小鼠体质量后脱颈椎处死；剥取新鲜皮下实体瘤肿瘤组织和双侧肺组织称取质量。
采用玻片计数法计算双肺表面转移瘤结节数［5］。
1.3 统计学方法用SPSS 10.0 统计软件进行统计分析。
计量资料数据用x±s表示，采用方差分析比较组间差异。
2 结果2.1 治疗后各组小鼠体质量、实体瘤质量、肺质量和肺部转移灶个数顺铂组小鼠的体质量明显小于模型组和肺积方组（P＜0.01），肺积方组小鼠体质量最大。
顺铂组和肺积方组小鼠实体瘤质量均低于模型组（P＜0.01），而顺铂组瘤质量最低，与肺积方组无显著差别（P>0.05）；3组小鼠肺质量比较，差异无统计学意义(P>0.05)；顺铂组和肺积方组的肺部转移灶数目低于模型组（P＜0.01），顺铂组效果最佳，但与肺积方组比较差异无统计学意义（P>0.05）。
见表1和图1、2。
表1 治疗后各组小鼠体质量、实体瘤质量、肺质量和肺转移瘤个数（略）Table 1 Weights of body, solid tumor and lung and number of lung metastatic tumors in three groups**P＜0.01, vs untreated group; △△P＜0.01, vs cisplatin group.图1 肺积方对小鼠实体肿瘤的影响（略）Figure 1 Solid tumor size after Feiji Formula treatmentA: Cisplatin group; B: Untreaed group; C: Feiji Formulagroup.图2 小鼠肺脏转移瘤（略）Figure 2 Metastatic tumor located at periphery part of the lung2.2 压片法观察肺部转移灶采用压片法可以清晰地看到肺部转移灶，多在周边，表现为灰白色的凸起，周边与肺组织连接的部分为暗红色。
见图2。
3 讨论肺癌中70%～80%为非小细胞肺癌（non small cell lung cancer, NSCLC），早期无明显症状，约80%患者确诊时已处于晚期，无手术根治机会；传统的放化疗对肿瘤局部病灶的控制有一定近期疗效，但常受到毒副反应、敏感性、耐药性和全身状况等因素的限制，疗效无突破性进展，1年生存率仅为35%左右［6］。
肺癌的病机特点为正气亏虚为本，正虚以气、阴为多，日久伤阳，病变脏腑以肺、脾为主，日久及肾［7, 8］。
肺积方由生黄芪、北沙参、麦冬、天门冬、茯苓、石上柏、石见穿、鱼腥草、七叶一枝花和山慈菇组成。
方中黄芪既补养肺脾之气，又可托毒生肌，为君药。
北沙参、天门冬、麦冬、女贞子合用，共奏滋养肺、胃、肾阴的作用，相须为用，共为臣药。
方中石上柏、石见穿、鱼腥草、七叶一枝花、山慈菇可化痰解毒，对肺癌细胞具有抑制作用，可抑制肺癌细胞增殖和扩散。
临床以此方灵活加减应用取得良好效果［9］。
本研究发现，经过治疗后，顺铂组小鼠的体质量明显小于模型组和肺积方组（P＜0.01），而肺积方组体质量最大，说明肺积方可以保持荷瘤小鼠的体质量；在抑制肿瘤方面，顺铂组和肺积方组的瘤体质量明显低于对照组，说明化疗和肺积方均可以抑制肿瘤的增长（P ＜0.01），而顺铂组效果最佳；3组在肺质量指标方面无差异；在肺部转移灶的控制方面，从图2可见，转移灶较多位于肺的周围，顺铂组和肺积方组的转移灶数目均明显低于模型组，说明顺铂和肺积方均可以显著控制肺部转移，而顺铂组效果最佳。
本文的研究结果证实肺积方可以维持小鼠体质量，抑制肿瘤生长，减少肺部转移瘤的个数。
其具体的作用机制，有待深入研究。
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