GDNF基因修饰的骨髓基质干细胞移植治疗大鼠脑出血
ｇｏ ｔ ａｔ — ｅａ （ Ｇ — ）ｉ ｈ ｒｉ ｆｔｅｈ ｍ ｒ ａｉ ｆｃ ｓ ｅ ｕ ｓＢ ｔ Ｂ Ｎ —ｍ ｕ ｏｅｃｉ ｎ ｒｗ ｈｆｃｏ ｂｔ Ｎ Ｆ Ｂ ｎ ｔｅｍａ ｎ ｏ ｅ ｏｒ ｇｃ ｏ ｕ． ｓ ｌ ：ｏ Ｄ Ｆ ｉ ｍ ｎｒａｔ ｅ ａ ｄ ｒ ｇ ｈ ｈ Ｒ ｔ ｈ ｖ
Ｄｅ ｇ Ｌｉｅ ｌ ｎ ，ｔａ
Ｄ ｐ ｒ ｅ ｔｆＮｅｒｂｏ ｇ ，ｕｈ ｕＭｅ ｉ ｌＣ ｌ ｇ ｅ ａｔ ｎ ｕｏ ｉ ｏｙ Ｌ ｚｏ ｄｃ ｏｌ ｅ ｍ ｏ ｌ ａ ｅ
Ａ ｓｒｃ Ｏｂｅ ｔ ｅＴ ｘｌｒ ｈｔｅ ｒｎｐａｔｔｎ ｏ ＭＳ ｓ—ｏｉｅ ｙ Ｇ Ｎ ｅｅ ｈｓｂｔ ｒ ｂｔａｔ ｊｃｉ ：ｏｅｐｏｅｗ ｅ ｒｔ ｓｌ ａｉ ｆＢ Ｃ — ｄｆ ｄｂ Ｄ Ｆ ｇｎ ａ ｅｅ ｖ ｈ ａ ｎ ｏ ｍ ｉ ｔ
ｅｔ ｌ ｈ ｄ ｂ ｎｅｔ ｇ ｈｐ ｒ ｎ ｏｌ ｅ ａｅ ｉ ｃｕ ａ ｕａ ｅ ｔ ｅｔ ｉａ ｙ ｈ ｎ ｗ ｒ ｒｆ ｄ ｗ ｔ ｓ ｂｉ ｅ ｙ ｉ ｃｉ ｅ ａｉ ａ ｄ ｃｌ ｇ ｎ ｓ ｎ ａ ｄ ｔ ｐ ｔｍ ｎ ｓ ｒｏａ ｃｌ ，ｔｅ ｅｅ ｇａ ｅ ｉ ａ ｓ ｊ ｎ ｎ ａ ｅ ｅ ｘ ｌ ｔ ｈ
Ｎ －３ ｍｍ ｎ ｒａ ｔ ｅｐｏ ｕ ｔ ｎ Ｇ Ｎ ／ＭＳ ｓｇｏｐ ｓ ｎ ｃｎｌ ｉｃｅ ｓｄ ｃｍ ａｅ ｉ ｈｔｉ ＭＳ ｓ ＧＦ １ 一ｉ ｕ ｏｅｃ ｖ ｒｄ ｃ ｉ Ｄ ＦＢ Ｃ ｒｕ ｉ ｉ ａ ｔ ｎ ｒａｅ ，ｏ ｐ ｒｄ ｗｔ ｔａ ｎ Ｂ Ｃ ｉ ｇｆ ｉ ｙ ｈ
邓 莉 ， 江义 ， 涂 郭 侃 ， 小青 ， 高 杨朝 鲜
（ 州 医 学 院 ： 经 生 物 研 究室 ；解 剖 学 教研 室 ， 川 泸州 ６６ ０ ） 泸 神 四 ４ ００
摘
要 目的 ： 讨 移 植 胶 质 细 胞 源 性 神 经 营 养 因 子 （ＤＮＦ基 因修 饰 的 骨髓 基 质干 细 胞 （ ＭＳ ｓ是 否 比单 纯 Ｂ Ｃ 移 植 探 Ｇ ） Ｂ Ｃ） ＭＳ ｓ
ｒ ｕ ｎ ａｉｅ ｇｏ ｐＣｏ ｃｕ ｉｎＰ ｅｅ ｔｒ ｓｌ ｄ ｍｏ ｓ ａｅ ｔａ ｒｆ ｎ ｇｏ ｐ ａ ｄ ｓｌｎ ｒｕ ． ｎ ｌｓｏ ：ｒｓ ｎ ｅｕｔ ｅ ｎ ｔ ｔ ｈ ｔｇ ａｔ ｇ ＢＭＳ ｓ ｍｏ ｉ ｅ ｙ ＧＤＮＦ ｇ ｎ ｓ ｒ ｉ Ｃ ｄｆ ｄ ｂ ｉ ｅｅ
ＧＤＮＨＢＭＳ ｓ Ｃ 、Ｂ ＭＳ ｓ ａ ｄ ｓ ｌ ｅ ｒ ｓ ｅ ｔ ｅ ｙ ３ ｄ ｙ ｆ ｒ ｏ ｅ ａ ｉｎ Ｔ ｅ ｒ ｔ ｅ ｅ ｅ ｅ ｕ ｅ ｔｒ ｌ ａ ｄ ２ ． Ｃ ｎ ａｉ ｅ ｐ ｃ ｉ ｌ ａ ｓ ａ ｔ ｐ ｒ ｔ ． ｈ ａｓ ｗ ｒ ｘ ｃ ｔ ｄ ａ ｅ ｗ ｎ ｗ ｎ ｖ ｅ ｏ ｆ
中 图分 类号 Ｒ３ ８ ３ 文 献 标识 码 Ａ 文 章编 号 １ ０ — ６ ９ ２ ） — ３ ６ ０ ０ ０ ２ ６ （ ０１ ４ ０ ２ — ４ １
ＧＲＡＦＴＩ ＮＧ ｏＦ ＧＤＮＦ ＧＥＮＥ— ｏＤＩ Ｉ Ｍ Ｆ ＥＤ ＢｏＮＥ ＡＲＲｏＷ ＴＲｏＭ ＡＬ Ｍ Ｓ ＣＥＬＬＳ Ｔｏ ＴＲＥＡＴ ＮＴＲＡＣＥＲＥＢＲＡＬ Ｉ ＨＥＭ ｏＲＲＨＡＧＥ Ｉ ＲＡＴＳ Ｎ
Ｉ ｕｏｉｏｈｍｉｒ ａ ｓｄｔ ｏｓｒｅｔｅｅｐｅｓ ｎ ｆ ｒｉ—ｅｉｅ ｅｒｔ ｐ ｉ ｆｃ ｒＢ Ｎ ） ｎ ｅｙ ｍｍ ｎｈｓ ｃｅ ｓ ｙｗ ｓ ｅ ｂｅｖ ｘ ｒｓｉ ｓｏ ａ ｄｒ ｄｎｕｏ ｏｈｃ ａｔ （Ｄ Ｆ ａｄｒｒｅ ｔ ｔ ｕ ｏ ｈ ｏ ｂ ｎ ｖ ｒ ｏ ｌ
泸 州 医学 院学 报
３６ ２
２ １ 年 ０１
第３ ４卷
第 ４期
Ｊ ｕ ａ ｆＬ ｚ ｏ ｄｃ ｌＣ ｌ ｇ Ｖｏ．４ ｏ ｒ ｌｏ ｕ ｈ ｕ Ｍｅ ｉａ ｏｌ ｅ ｎ ｅ １ Ｎｏ４ ２ ３ ． ０１ １
ＧＤＮＦ基 因修 饰 的骨 髓基 质 干 细胞 移 植 治 疗 大 鼠脑 出血 木
边 区 的 表达 。 结 果 ：各 时 间点 ＧＤ ／ ＭＳ 组 的 Ｂ ＮＦＢ Ｃｓ ＤＮＦ和 ＮＧ — Ｆ Ｂ免疫 阳性 产 物 比 Ｂ Ｃ 与 生 理 盐 水 组 显 著 增加 。 结 论 ： ＭＳ ｓ Ｇ ＤＮＦ基 因修 饰 的 Ｂ Ｃ 比 Ｂ Ｓ ｓ 大 鼠脑 出 血 有 更好 的保 护 作 用 。 ＭＳ ｓ Ｍ Ｃ对 关键 词 骨 髓 基 质 干 细胞 ； 出血 ； 脑 移植 ； 因治 疗 ； 经 营 养 因子 基 神
对脑 出血 有 更 好 的保 护 作 用 。方 法 ： 用 脑 立体 定 位 方 法 注 射 肝 素和 胶原 酶 制 作 脑 出 血 模 型 ， ３ 别 移 植 Ｂ Ｃ 、 ＤＮＦ 采 第 ｄ分 ＭＳ ｓＧ ／
Ｂ Ｓ 以及 生 理 盐 水 ， 别 在 １ 和 ２ 处 死 大 鼠 ， Ｍ Ｃｓ 分 ｗ ｗ 免疫 组 织 化 学 染 色 观 察 脑 源 性 神 经 营 养 因 子 和 神 经 生 长 因 子 １在 脑 出血 周 ３
ｔ ｅ ａ ｅ ｔ ｅ ｅ ｔ ｈ ｎ ａ ｉｅ ｈ ｒ ｐ ｕ ｉ ｆ ｃ ｔ ａ ｎ ｔ ＢＭＳ ｓ ｏ ｓ ｏ ｅＭ ｅ ｈ ｄ Ｔ ｅ ａ ｍｏ ｅ ｓ ｆ ｉ ｔ ｃ ｒ ｂ ａ ｈ ｍｏ ｒ ａ ｅ ｅ ｅ ｃ ｖ Ｃ ｎ ｔ ｋ ． ｔ ｏ ｓ： ｈ ｒ ｔ ｒ ｄｌ ｏ ｎ ｒ ｅ ｅ ｒ ｌ ｅ ｒｈ ｇ ｗ ｒ ａ
蛛网膜下腔移植骨髓基质干细胞治疗大鼠脊髓损伤模型Fas、Fas—L表达变化
２０ ． ５ ０ ７ １ ７
引起 的损伤 ， 而且还 与血 肿 内释放 的血 液成 分 如凝 血
患者躁 动 ： 术 时 可 酌 情 给 予镇 静 药 如 地 西 泮 静 滴 ； 手
（） ４ 定位 ： 一般 先 根 据 头颅 Ｃ 片 初 步 定 位 ， 行 Ｃ Ｔ 再 Ｔ 检 查核 定 ， 这样 不仅 可较 正穿刺 点 ， 可 以观察 出血变 还 化； 如病 情很 重不 宜搬动 ， 则根据 头颅 Ｃ 片直 接定 位 Ｔ 穿 刺 ； 定位 时应 注意避 开表浅 动脉 ， 在 在钻 颅穿刺 时还 应 防止 头皮滑 动致穿 刺部 位及方 向变化 ；５ 抽吸血 肿 （） 液： 手法要 轻柔 ， 且不 可 一 次 抽 吸过 多 ， 以免压 力 骤 减 引起再 出血 ； 如血 肿 较 大较 长 ， 针 抽 吸效 果 不好 ， 单 则 可双针 穿刺 抽吸 冲洗 引流 ； ６ 基础 治 疗 不 放松 ： 期 （） 早 仍需脱 水 降颅压 ， 减轻脑 水肿 ， 根据血 肿抽 吸冲Βιβλιοθήκη 引流 维普资讯 ・
５ ・ ４
生垦塞 塑丝
盘查 ！ 生
箍 鲞箜 ９ 期 Ｃ ｉｅ ｕｎｌ ｆ ｒｃｃｌ ｅ ｏｓ ｉ ａｅ Ｄ ｃ２０ ， ｏ ０Ｎ ． ｈ ｓ Ｊ ｒａｏ ａｔａ Ｎ ｒ ｕ ｓ ｓ ｅ．０７Ｖ Ｌ ｏ９ ｎ ｅｏ Ｐ ｉ ｖ Ｄｅ ｓ ｔ
手术 治疗 临床 尚有不 同看法 ［ 。我 们 自 １ ９ —９月开 ３ ］ ９ ９０
始探 索应用 钻颅微 创血 肿 清 除术 治 疗 脑 出血 ， 累一 积 定 经验 后于 ２ ０ —３月开始 对 比观察 该 方法 对 中等 量 ０ ３０ 脑 出血 的疗效 。从本 研究结 果可 以看 出 ２组 治疗 前 的
在GDNF基因修饰的骨髓基质细胞与缺氧复氧神经细胞的共培养中神经细胞凋亡的变化
在GDNF基因修饰的骨髓基质细胞与缺氧复氧神经细胞的共培养中神经细胞凋亡的变化熊怀林;杨朝鲜;高小青;邓莉【期刊名称】《泸州医学院学报》【年(卷),期】2011(34)5【摘要】目的:探讨胶质源性神经营养因子(GDNF)基因修饰的骨髓基质细胞(BMSCs)对缺氧复氧神经细胞的保护作用.方法:GDNF基因修饰的BMSCs(BMSCs/GDNF)经诱导后与缺氧复氧神经细胞共培养,采用Hoechst33258检测神经细胞凋亡在共培养细胞中的表达.结果:BMSCs/GDNF组的神经细胞凋亡率显著低于BMSCs组和缺氧组(P＜0.05).结论:BMSCs/GDNF通过抑制缺氧复氧神经细胞凋亡发挥神经保护作用.【总页数】4页(P552-555)【作者】熊怀林;杨朝鲜;高小青;邓莉【作者单位】泸州医学院,人体解剖学教研室,四川泸州646000;泸州医学院,神经生物学研究室,四川泸州646000;泸州医学院,神经生物学研究室,四川泸州646000;泸州医学院,神经生物学研究室,四川泸州646000【正文语种】中文【中图分类】R741.05【相关文献】1.GDNF基因修饰的BMSCs对大鼠缺氧复氧神经细胞凋亡的实验研究 [J], 高小青;周玲;杜杰;杨朝鲜2.银杏叶提取物对缺氧复氧致神经细胞凋亡中Bax基因表达的影响 [J], 季凤清;孙海梅;郭燕茹;郭崇洁;赵天德3.一氧化氮在缺氧复氧所致神经细胞凋亡中的作用及银杏叶提取物的保护效应 [J], 季凤清;孙海梅;岳旭;郭艳茹;杜晓宇;郭崇洁;赵天德4.胶质源性神经营养因子基因修饰骨髓间充质干细胞与缺氧复氧神经细胞的共培养[J], 熊怀林;邓莉;高小青;王特为;郭侃;杨朝鲜5.银杏叶提取物对缺氧复氧致神经细胞凋亡中Bcl-2蛋白表达的影响 [J], 季凤清;孙海梅;郭燕茹;郭崇洁;赵天德因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
脑出血大鼠神经干细胞脑内移植和移植后VEGF,FN,LN表达的实验研究
原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。
尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南华大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。
与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。
作者签名：日期：年月日关于学位论文使用授权说明本人同意南华大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保留学位论文；学校可根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文。
作者签名：导师签名：日期：年月日脑出血大鼠神经干细胞脑内移植及移植后VEGF、FN、LN表达的实验研究研究生：胡苏华导师：武衡摘要目的了解体外培养的大鼠神经干细胞（neural stem cells, NSCs）生长、增殖及分化等生物学特性，体外培养的大鼠NSCs移植入脑出血大鼠脑内后，观察大鼠的神经功能缺损恢复情况，观察局部脑组织的病理学变化及移植细胞的存活、迁移、分化，了解血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）、纤维粘连蛋白（fibronection, FN）、层粘连蛋白（laminin, LN）的表达情况，探讨NSCs移植对脑出血后神经功能的修复作用，移植后VEGF、FN及LN的变化对神经回路重建的作用。
方法采用胶原酶注入大鼠苍白球方法复制脑出血大鼠模型；在特定条件下进行大鼠NSCs的体外分离培养、传代，并观察其生物学特性，采用免疫细胞化学染色方法鉴定培养的NSCs，利用BrdU整合入细胞DNA以标记NSCs；将实验大鼠随机分为脑出血模型组（A组）、移植组（B组）、假手术组（C组）及正常对照组（D组），移植组中，将标记后的NSCs移植于脑出血大鼠脑内；在脑出血（或假手术）后1天、7天、14天及30天，通过神经功能评分观察各组大鼠神经功能缺损情况及恢复情况；并于上述时间点提取各组大鼠脑组织标本，HE染色后观察各组脑组织病理变化，采用免疫组织化学染色方法鉴定各组脑组织的神经细胞，采用免疫组织化学方法检测各时间点各组血肿（损伤或移植）周围区及正常组织区VEGF、FN、LN的表达，采用免疫组织化学方法观察移植组BrdU的表达及分布。
GDNF诱导分化骨髓基质细胞对PD大鼠的治疗作用
Ｓ ｎｈｎ ＨＵ Ｈａ ｓ ｅ ｇ， Ｚ ｈ ｎ Ｗ ＮＧ Ｈｕ ｉ ＨＵ Ｃ ｅ ｇ， Ａ ａ ， ＷＡ ａ ＷＡ Ｇ Ｅ ｈ ａ ＮＧ Ｈ ｏ， Ｎ ｎ ｕ ｎ，
Ｚｈ ｎ ｙ ｎ ｏ ｇ ａ ｇ， Ｙ Ｎ ｕ ｉ Ａ Ｘｉｑｎ
Ｗ Ｎ ｅ ａ ｎ Ｅ Ｚｈ ｎ ｏ ｇ，
束 汉生 朱成 王淮 王昊 汪恩焕 温振 东 周钟 阳 闰秀琴 （ 东南大学附属蚌埠
市 第 三人 民医 院 神 经外 科 ， 徽 蚌 埠 ２ ３０ ） 安 ３ ００
摘 要 目的
探 讨 胶 质 细 胞 源性 神 经 营养 因子 （ Ｄ Ｆ 诱 导 分 化 骨 髓 基 质 细 胞 （ Ｍ Ｃ ） 内移 Ｇ Ｎ） Ｂ Ｓ ｓ脑
同时间点检测大鼠旋转行为变化 ， 运用免疫荧光组织化学方法分析 比较各组纹状体 内酪氨酸羟化酶
（ Ｈ） Ｔ 阳性 细 胞 数量 。结 果 ① 旋转 行 为 检 测 显示 ， 和 Ｄ组 在 所 有 时 间 点 未 见 明 显 变 化 ； 移 植 Ｃ组 在 后 ７～ ０ｄ Ａ组 和 Ｂ组 分 别 与 Ｃ组 和 Ｄ组 比较 ， 转 行 为 明显 减 少 （ ００ ）Ａ组 比 Ｂ组 旋 转 行 为 ３ ， 旋 Ｐ＜ ．５ ； 减 少更 为 显 著 （ ０ ０ ） ② 免 疫 荧 光 组 织 化 学 检 测 显 示 ， Ｐ＜ ． ５ 。 Ａ组 与 Ｂ组 比较 ， Ｆ Ｐ和 Ｔ 阳 性 细 胞 ＧＡ Ｈ
ｓａｎｎ ｒ ｒｏｍｅ Ｒｅ ｕ ｔ Ｆ ｅ ｕ ｎ ｙｏ ｏａｉｎ Ｗａ ｉｎｆｃ ｔｙｌ ｓ ｎ ｇ ｏ ｐ Ａ ｒｇ ｏ ｐ Ｂ ｔａ ｈ ｔｉ ｔｉｉｇ ｗｅｅ ｐ ｆｒ ｄ． ｓ ｌｓ ｅ ｒｑ ｅ ｃ ｆｒ ｔｔ ｓ ｓｇ ｉ ａ ｌ ｅ ｓｉ ｕ ｏ ｕ ｈ ｎ ｔａ ｎ ｏ ｉ ｎ ｒ ｒ
胶质细胞源性神经营养因子基因修饰的BMSCs移植对脑出血大鼠TrkA表达的影响
ＡｂｔａｔＯｂｅｔ ｅ Ｔ ｂｅｖ ｈ ｆ ｃ ｏ Ｇ Ｎ ｅｅ ｏｉｅ Ｍ Ｃ ａｓｌ ｔｉｎｏ ｘｒｓｉｎｏ ｓ ｃ ｊｃｉ ： ｏｏｓｒｅｔｅｅｅｔ ｆ Ｄ Ｆｇｎ — ｄｆｄＢ Ｓ ｓｔ ｎｐａ ａｏ ｎｅｐｅｓ ｆ ｒ ｖ ｆ ｍ ｉ ｒ ｎｔ ｏ
Ｔ ｋ ｉ ａ ｓｆ ｌ ｗｉ ｇ ｅ ｐ ｒｍｅ ｔ ｌ ｎ ｒ ｃ ｒ ｂ ａ ｅ ｒｈ ｇ ． ｅ ｈ ｄ ： ｈ ｎ ｍａ ｄ ｌ ｆｉｔａ ｅ ｅ ｒ ｌｈ ｍ— ｒ Ａ ｎ ｒ ｔ ｏ ｌ ｎ ｘ ｅ ｉ ｎ ａ ｔａ ｅ ｅ ｒ ｌｈ ｍｏ ｒ ａ ｅ Ｍ ｔ ｏ ｓ Ｔ ｅ ａ ｉ ｌ ｏ ｉ ｍｏ ｅ ｓｏ ｒ ｃ ｒ ｂ ａ ｅ ｎ
脑 尾 壳 核 注 射 胶 原 酶 和 肝 素 建 立 脑 出血 动 物 模 型 ， 随 机 将 大 鼠分 为 生 理 盐 水 组 、Ｍ Ｓ ｓ 和 Ｂ Ｓ ／ ＤＮＦ组 ， 组 又根 据 并 Ｂ Ｃ 组 Ｍ ＣｓＧ 各 细 胞 移 植 后 再 喂 养 时 间 的 不 同 （ｗ、ｗ） 为 ２个 亚 组 。在 脑 出血 第 ３ １ ２ 分 ｄ分别 注 射生 理 盐 水 和 移 植 Ｂ Ｓ 及 Ｂ ｃ ／ ＮＦ Ｍ Ｃｓ Ｍｓ ｓＧＤ 。采
泸 州 医学 院学 报
２ １ 年 ０１
第３ ４卷
第 ５期
５ ０１
Ｊ ｕｎ ｌｏ ｕ ｈ ｕ Ｍｅ ｉａ ｏｌｇ Ｖｏ．４ ｏ ｒ ａ ｆ ｚ ｏ ｄｃ ｌ ｌ ｅ Ｌ Ｃ ｅ １ Ｎｏ５ ２ １ ３ ． ０ １
胶质 细胞 源性神经 营养 因子基 因修饰 的 Ｂ Ｃ ＭＳ ｓ移植 对 脑 出血大 鼠 Ｔ ｋ ｒＡ表 达 的影 响 水
曾 昭明 ， 朝鲜 ， 江义 ， 杨 涂 高小 青
（ ｌ 医 学院 人 体 解 剖 学 教 研 室 与 神 经 生 物 学 研 究 室 ， 川 泸 州 ６６ ０ ） 泸Ｊ Ｊ 、 １ 四 ４ ００
GDNF基因修饰的BMSCs在脑出血大鼠脑内存活与分化的实验研究
GDNF基因修饰的BMSCs在脑出血大鼠脑内存活与分化的实验研究周玲;邓莉;涂江义;高小青;杨朝鲜【期刊名称】《实用医学杂志》【年(卷),期】2012(028)001【摘要】目的:探讨胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)在脑出血大鼠脑内的存活与分化.方法:分别将BMSCs/GDNF、BMSCs和生理盐水移植入脑出血大鼠脑内建立不同的实验组,采用Western blot 检测各组大鼠GDNF蛋白的表达,DAPI 和免疫荧光组织化学染色观察移植细胞在脑内的存活和分化情况.结果:与生理盐水组和BMSCs组相比,BMSCs/GDNF组的GDNF蛋白表达显著上调;与BMSCs组相比,BMSCs/GDNF组的BMSCs存活率增高,神经微丝阳性细胞率上升,但胶质纤维酸性蛋白阳性细胞率无明显变化.结论:GDNF基因修饰有助于BMSCs在脑出血大鼠脑内的存活和向神经元样细胞方向分化.%Objetive To explore the survival and differentiation of GDNF gene-modified BMSCs in a rat model of intracerebral hemorrhage (ICH). Methods Different groups were established by transplanting with BMSCs/GDNF, BMSCs and saline into the brains of ICH rats , respectively. The expression of GDNF protein was tested by western blot analysis. DAPI and immunohistochemistry staining were used to observe the survival and differentiation of transplanted cells in rat brains. Results The expression of GDNF protein was significantly increased in BMSCs/GDNF group when compared with saline group and BMSCs group. The survival rate of BMSCsincreased in BMSCs/GDNF group when compared with BMSCs group. The percentage of NF-200 positive cells in BMSCs/GDNF group was more than that in BMSCs group. Conclusion GDNF gene modification of BMSCs may contribute to the survival and neuron-like differentiation of the transplanted BMSCs in a rat model of intracerebral hemorrhage.【总页数】4页(P48-51)【作者】周玲;邓莉;涂江义;高小青;杨朝鲜【作者单位】646000,泸州医学院附属医院内分泌科;646000,泸州医学院神经生物学研究室;646000,泸州医学院神经生物学研究室;646000,泸州医学院神经生物学研究室;646000,泸州医学院神经生物学研究室【正文语种】中文【相关文献】1.GDNF基因修饰的BMSCs对大鼠缺氧复氧神经细胞凋亡的实验研究 [J], 高小青;周玲;杜杰;杨朝鲜2.hHCN4基因修饰的大鼠BMSCs与心肌细胞共培养分化为心肌样细胞的实验研究 [J], 范杰;王高频3.GDNF基因修饰的BMSCs向神经元样细胞的分化及神经营养因子的表达* [J], 杜杰;高小青;郭侃;邓莉;常能彬4.双重荧光标记验证静脉移植碱性成纤维细胞生长因子基因修饰骨髓间充质干细胞在脑缺血模型大鼠脑内的存活及分化 [J], 杨杰;张付峰;谷文萍;肖波;唐北沙;杨期东5.泻火补肾汤对移植入脑出血大鼠脑内的神经干细胞存活分化的影响 [J], 钟鹏程;黎杏群;梁清华;罗文芳;刘清娥;罗杰坤;唐涛;林源因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
骨髓间质干细胞移植治疗大鼠脑出血模型的实验
现代生物医学进展 Progress in Modern Biomedicine Vol.11NO.21NOV.2011骨髓间质干细胞移植治疗大鼠脑出血模型的实验研究戴杰陈蓝黄志东黄怀宇（南通大学第二附属医院，南通市第一人民医院神经内科江苏南通226001）摘要目的：研究大鼠骨髓间质干细胞(MSCs)移植治疗脑出血的可行性。
方法：分离MSCs 后，连续传代培养、扩增，Brdu 标记的MSCs 通过颈动脉、侧脑室2种途径移植入脑出血大鼠模型体内，采用爬行计分法评估神经功能的恢复程度，并观察脑部Brdu 阳性细胞的分布。
结果：通过侧脑室、颈动脉移植后大鼠神经功能改善，明显优于对照组(P<0.05)；经颈动脉注射组较经侧脑室注射组爬杆实验评分低(P<0.05)。
移植的MSCs 主要迁移到出血灶、大脑皮层、海马区等处。
结论：MSCs 移植对脑出血具有保护作用，而经颈动脉给药疗效优于经侧脑室给药。
关键词：脑出血；骨髓间充质干细胞；移植；中图分类号：Q95-3，R743.34文献标识码：A 文章编号：1673-6273（2011）21-4030-03Experimental Study of Bone Marrow Stem Cells Administration in Ratswith Intracerebral HemorrhageDAI Jie,CHEN Lan,HUANG Zhi-dong,HUANG Huai-Yu(Department of Neurology,Nantong First People's Hospital,the Second Affiliated Hospital of Nantong University,Nantong 226001)ABSTRACT Objective:To explore the feasibility of the rat bone marrow stromal cells (MSCs)transplantation to treat intracerebral hemorrhage.Method:MSCs were separated from rat bone marrow and cultured with culture medium.The MSCs were purified by culture expanded in vitro and then labeled with Brdu.MSCs were transferred into rat through carotid artery and lateral ventricle.The rat neuro-logic dysfunction ameliorating was observed by behavior scores,and distribution of Brdu labeled cells in cerebra was studied.Result:The test score of carotid artery group was lower than that of lateral ventricle group (P<0.05).In the carotid artery group,more Brdu labeled cells survived or migrated.The Transferred MSCs were mainly migrated to area of hippocampus and hemorrhage.They were also differ-entiated into nerve cells.Conclusion:MSCs transferring into rat brain following intracerebral hemorrhage is effective.Intra-arterial ad-ministration is more efficient.Key words:Intracerebral hemorrhage;Mensenchymal stem cells;Transplantation Chinese Library Classification(CLC):Q95-3,R743.34Document code:A Article ID:1673-6273(2011)21-4030-03作者简介：戴杰（1978-）男，本科，主治医师，研究方向：脑血管疾病方面。
针刺对急性脑出血大鼠脑组织GDNF表达影响的实验研究
针刺对急性脑出血大鼠脑组织GDNF表达影响的实验研究张国威;邹伟;刘芳;郭新年;赵佳辉;孙晓伟;李丹【摘要】目的:通过观察"百会"透"曲鬓"头针疗法对急性脑出血大鼠脑组织中GDNF表达的影响来揭示神经重塑的相关机理,为治疗急性脑出血的临床方法奠定实验基础.方法:选取健康雄性Wistar大鼠160只随机分为三组:模型组、针刺组、西药组,每组50只大鼠,每组再随机分为6h、1d、2d、3d、7d五个亚组,每个亚组10只大鼠;制备脑出血模型;另设10只正常大鼠作为空白组.针刺组针刺患侧"百会"透"曲鬓"穴.运用原位杂交方法检测各组大鼠脑组织中GDNF阳性细胞的表达.结果:各造模组大鼠术后均出现不同程度的GDNF mRNA阳性表达增多现象.模型组大鼠术后6h即出现较明显的GDNF mRNA阳性细胞表达增多现象;1d时达高峰;2d时呈现下降趋势;7d时接近正常.针刺组GDNF的表达明显高于模型组和西药组,在相同时间点差异有统计学意义(P＜0.01),7d时仍有很高表达.西药组与模型组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:"百会"透"曲鬓"头针疗法可能在脑出血急性期通过促进内源性GDNF mRNA表达的途径发挥神经重塑作用.【期刊名称】《内蒙古民族大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2010(025)002【总页数】3页(P191-193)【关键词】"百会"透"曲鬓"头针疗法;脑出血;胶质细胞源性神经营养因子【作者】张国威;邹伟;刘芳;郭新年;赵佳辉;孙晓伟;李丹【作者单位】内蒙古民族大学,医学院,内蒙古,通辽,028000;哈尔滨医科大学,第一临床医学院神经内科,黑龙江,哈尔滨,150001;黑龙江中医药大学,附属第一医院神经内科,黑龙江,哈尔滨,150040;黑龙江省哈尔滨市第一医院,干部病房,黑龙江,哈尔滨,150010;黑龙江省康复医院,黑龙江,哈尔滨,150018;黑龙江省中医研究院,黑龙江,哈尔滨,150036;黑龙江中医药大学,附属第一医院神经内科,黑龙江,哈尔滨,150040;黑龙江中医药大学,附属第一医院神经内科,黑龙江,哈尔滨,150040【正文语种】中文【中图分类】R743.34脑出血（Intracerebral hemorrhage,ICH）指原发性非外伤性脑实质内出血，约80%发生于大脑半球（基底节70%、脑叶10%），其余20%发生于脑干和小脑，约占全部脑卒中的20%~30%.急性期病死率约30%~40%，是脑血管病中发病急、病情重、死亡率高、致残率高的疾病〔1〕.本实验通过自体血注入法制备脑出血大鼠模型；针刺组大鼠针刺患侧百会透曲鬓穴；运用原位杂交检测方法，动态观察不同时间点针刺头部腧穴对脑组织中GDNF阳性细胞表达的影响，揭示头针疗法在脑出血后继发性损伤中的神经保护机制，为脑出血的治疗开辟新的领域.1.1.1 设计：随机对照动物实验.1.1.2 单位：内蒙古民族大学医学院，哈尔滨医科大学第一临床医学院神经内科，黑龙江中医药大学实验中心（备有相应仪器设备）.1.1.3 动物：实验于2007-09-25在黑龙江中医药大学实验中心（省级重点实验室）完成.健康雄性Wistar大鼠160只，体重350g±20g，由哈尔滨市兽医研究所提供（符合国家二级动物标准，动物质量合格证书号：SCXK（黑）20060021）.大鼠的饲养环境湿度45%～65%，温度22～25℃.1.1.4 设计、实施、评估者：设计为第一、第二作者；干预实施为全部作者；评估为第二作者和黑龙江中医药大学的程为平教授，均受过专业训练，未采用盲法评估.1.2.1 动物分组：健康雄性Wistar大鼠160只，体重350g±20g.实验前正常饲养1周.造模前禁食12h，禁水6h.随机分为三组：模型组、针刺组、西药组，每组50只大鼠；每组再随机分为6h、1d、2d、3d、7d五个亚组，每个亚组10只大鼠；制备脑出血模型；另设10只正常大鼠作为空白组.1.2.2 模型制备：根据大鼠脑立体定位图谱〔2〕确定右侧尾壳核（caudate-putamen nucleus,CPu）位置.参照Rosenberg等〔3〕报道的方法制作脑出血大鼠模型.1.2.3 筛选成功模型的方法：大鼠造模完成待大鼠清醒，采用Berderson〔4〕评分法筛选成功模型动物.1.2.4 实验动物的干预方法：针刺组针刺患侧“百会”透“曲鬓”穴，30min/1次，1次/d.针刺方法：大鼠捆绑固定，用28号1寸毫针针刺患侧百会穴透曲鬓穴，取穴方法参照华兴邦等制定的《实验动物穴位图谱》，进针0.8寸，留针30min，期间捻转3次，每次5min，以200转/分速度捻针.西药组给予忆立福稀释液1ml 灌胃（按人：大鼠体重为200：1配置）治疗，3次/d.模型组大鼠于脑出血造模及评分后，给予大鼠类针刺组相同捆绑30 min/d；类西药组生理盐水1ml灌胃，3次/d.空白组不做任何干预.1.2.5 统计学分析：采用SPSS 13.0软件进行统计.计量数据以表示.各实验组间以及时间点的比较采用均值比较，一维方差分析，因子和因变量列，进行方差齐性检验，以P<0.01或P<0.05为差异有统计学意义.2.1 实验动物数量分析为保证筛选成功模型及足量雄性Wistar大鼠能进入结果分析，本实验进行了双倍造模，剔除不成功模型及死亡的大鼠，保证了每个亚组随机足量大鼠进入了最终的结果分析，无脱失值.2.2 各组大鼠GDNFmRNA表达的原位杂交检测结果光学显微镜下，DAB显色阳性细胞的胞浆（有少量胞核）呈棕黄色或褐色，采用Motic Med6.0病理图像分析系统，每张片随机观察并计数脑出血区血肿周边5个不重复视野，在400倍视野下，摄入图像分析系统，选择原位杂交分析模块，通过灰度调节，区分视野内阳性信号面积并结合目测进行分析，计算阳性细胞总数.GDNFmRNA阳性细胞主要表达在神经元及神经胶质细胞.空白组大鼠见到主要在神经元细胞阳性反应的GDNFmRNA表达，有极微量的神经胶质细胞阳性反应.各造模组大鼠术后均出现不同程度的GDNFmRNA阳性表达增多现象，除7d模型组和7d西药组，其余造模组与空白组比较差异均有统计学意义（P<0.01）.模型组大鼠术后6h即出现较明显的GDNFmRNA阳性细胞表达增多现象，主要还是在神经元细胞，但神经胶质细胞阳性反应有增多趋势；1d时主要呈现神经胶质细胞阳性反应，虽反应弱可数目很多并达高峰；2d时呈现神经胶质细胞和神经元细胞阳性反应并存现象，反应增强，但阳性细胞数目出现下降趋势；7d时接近正常，但细胞形态不规整且反应较弱.针刺组GDNFmRNA阳性细胞表达较模型组和西药组增多且时间延长，7d时仍有很高表达.所有时间点总体比较，针刺组GDNFmRNA阳性表达均较模型组和西药组增多显著，差异均有统计学意义（P<0.01）；西药组与模型组比较，差异均无统计学意义（P>0.05）.见表1“百会”透“曲鬓”对脑出血大鼠脑组织GDNFmRNA表达影响的探讨，胶质源性神经营养因子（GDNF）是由Lin〔5〕于1993年从大鼠胶质细胞系B49分离纯化出的一种具有神经营养作用的糖基化二硫结合的同二聚体蛋白质，并首次对其基因进行克隆，命名为GDNF.GDNF是多效能的营养因子，对神经系统有营养、保护、支持和再生作用等，内源性GDNF可能是部分通过促进神经干细胞（NSC）的增殖分化阻抑神经元凋亡实现对脑组织的保护作用，已成为当今神经科学领域研究的热点〔6〕.脑出血后在血肿周围存在明显的神经胶质细胞GDNF阳性反应性增多，针刺能提高内源性GDNFmRNA表达水平，表明针刺可通过促进神经胶质细胞合成和分泌GDNF，调整脑出血后血肿周围神经元的局部营养环境，促进神经元存活、轴突再生而发挥其治疗脑出血的脑保护作用.我们推测其机制可能为：针刺通过提高内源性GDNFmRNA表达水平，GDNF与特异受体相结合，启动细胞内信号传导途径，产生相应的效应分子，调节神经元和周围结构、胶质细胞及其它细胞的交流，发挥脑保护作用；GDNF通过提高细胞内抗氧化酶如SOD、DSSG-R活性及刺激细胞的酶修复系统，通过抑制反应性氧和自由基作用以及减少细胞谷氨酸蓄积（谷氨酸引起钙离子升高和反应性氧离子增强），参与细胞内钙稳态调节，影响细胞膜钙通道蛋白质的表达以减少钙内流等缓解脑损伤；GDNF通过降低脑组织含水量，恢复细胞内外钠、钾浓度及降低BBB通透性，对减轻脑水肿有一定的帮助；CDNF通过部分阻抑神经元凋亡实现脑保护作用.得出结论：头针疗法在脑出血急性期可能通过促进内源性GDNFmRNA表达发挥脑保护作用；西药组无效.【相关文献】〔1〕吴江,贾建平,崔丽英，等.神经病学〔M〕.北京:人民卫生出版社，2006.170〔2〕包新民，舒斯云.大鼠脑立体定位图谱〔M〕.北京:人民卫生出版社，1991.35-40.〔3〕Rosenberg CA,Mun-bryce S,Wesley M,et al.Collagenase-induced intracerebral hemorrhage in rats〔J〕.Stroke，1990，21:801〔4〕Berderson JB,Pitts LH,Tsuji M,et al.Rat middle cerebral artery occlusion:evaluation of the model and development of neurologic examination〔J〕.Stroke，1986，17:472-476. 〔5〕Lin L-FH,Doherty D,Lile J,et a1.GDNF：a glial cell line-derived neurotrophic factor for midbrain dopaminergic neurons〔J〕.Sience，1993，260（5111）:1130.〔6〕Mallappa Anitha,Chetan Gondha,Roy Sutliff,et al.GDNF rescues hyperglycemia-induced diabetic enteric neuropathy through activation of the PI3K/Akt pathway〔J〕.The Journal of Clinical Investigation，2006，116（2）:344-356.。
骨髓基质细胞移植兼用脑源性神经营养因子促进大鼠脊髓损伤修复的实验探究
骨髓基质细胞移植兼用脑源性神经营养因子促进大鼠脊髓损伤修复的实验探究李小京;杨晓莉;郑金娥【摘要】目的：探讨骨髓基质细胞移植兼用脑源性神经营养因子促进大鼠脊髓损伤修复效果。
方法：选取30只Wistar大鼠，按照移植方法分为研究组与对照组，研究组移植采取骨髓基质细胞移植兼用脑源性神经营养因子（BDNF），对照组单纯移植的骨髓间充质肝细胞（BMSCs）悬液，分析比较两组效果。
结果：术后2～8周，两组神经功能评分有统计学差异（P＜0.05）。
结论：BMSCs移植能够提高大鼠半横断脊髓结构及功能水平恢复BMSCs与BDNF，联合应用对脊髓损伤修复具有明显协同效果。
【期刊名称】《北方药学》【年(卷),期】2014(000)010【总页数】1页(P72-72)【关键词】骨髓基质细胞移植;脑源性神经营养因子;大鼠脊髓损伤修复【作者】李小京;杨晓莉;郑金娥【作者单位】南昌大学抚州医学分院抚州 344000;南昌大学抚州医学分院抚州344000;南昌大学抚州医学分院抚州 344000【正文语种】中文【中图分类】R651.2脊髓损伤（SCI）在临床中属于较为常见的一种严重创伤症状，多发生在青壮年群体，往往引发严重残疾甚至死亡。
本文应用大鼠予以骨髓基质细胞移植兼用脑源性神经营养因子，分析其修复效果，现报道如下。
1.1 一般资料：选取30只健康Wistar大鼠，体重250～300g，雌雄均可，随机分为研究组（BMSCs联合BDNF移植）与对照组（BMSCs移植），每组15只。
1.2 方法：对照组采用BMSCs移植；研究组则予以BMSCs兼用BDNF移植。
手术完成后24h，3d、1周、2周、3周、4周、5周、6周、7周、8周均予以斜板试验并采取改良Tarlov评分观察动物后肢运动功能恢复程度。
手术后8周，取材，免疫组化染色，经电镜观察经移植治疗后大鼠脊髓形态结构改变情况。
采取SABC 免疫组化法染色，光镜下观察记录5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）阳性标记细胞，NF、GFAP免疫组化染色结果经彩色医学图像分析仪分析，对比免疫阳性反应的面积。
ApoJ基因修饰的BMSCs移植对脑出血大鼠C3表达的影响
•1364 +安徽医科大学学报"'012018 Sep;5&(9)网络出版时间：2018 - 8-2 09:39 网络出版地址：/kcms/detail/34. 1065. R.20180731. 1310. 009. html ApoJ基因修饰的BMSCs移植对脑出血大鼠C3表达的影响刘茂春\刘亮2，普娟3，陈慧3，徐斌2，刘学良2，郑晓梅3摘要目的探讨载脂蛋白J(Ap〇J)基因修饰的骨髓间充 质干细胞（BMSC/移植对脑出血大鼠补体3 (C3)表达的影响。
方法采用贴壁筛选法体外培养并纯化大鼠BMSC/利用脂质体介导重组质粒pEGFP-N1-A pP转染BMSC/建立 大鼠尾状核脑出血模型，随机分为ApoJ/BMSCs组、BMSC/组和NS组，每组24只，三组分别于建模后24 )在脑出血部位移植等体积转染A pP基因的BMSC/悬液、BMSC/悬液、生理盐水，各组再根据移植后喂养时间不同分为1、3、5、7 d4个亚组，每亚组6只。
采用RT-PCR法和免疫组织化学染色 技术分别检测血肿周围脑组织C3 mRNA和蛋白质的表达情 况。
结果应用全骨髓贴壁法成功分离、培养出活性及纯度 较高的BMSC/携带A pP基因的BMSCs能够表达外源性 ApP。
RT-PCR和免疫组化结果显示，与NS组和BMSC组比 较，ApoJ/BMSCs组各时间点C3的mRNA和蛋白表达均明显降低(！<0. 05)，且BMSCs组亦低于NS组（！<0. 05)。
结论 A pP基因修饰的BMSCs能明显下调C3的表达，证实ApP对脑出血的神经保护作用是通过抑制补体激活而实现的。
关键词载脂蛋白J;骨髓间充质干细胞;脑出血;补体3中图分类号 R743. 34文献标志码A文章编号1000 -1492(2018)09 -1364 -06 doi：10. 19405/ki.issn1000 - 1492. 2018. 09. 009脑出血（intracerebral hemorrhage，ICH)是指原 发性非外伤性脑实质出血，是急性脑血管病中的危 重类型，严重威胁着人类的健康，且至今缺乏决定性 的治疗策略，目前对脑出血治疗的探索仍是研究的 热点与难点[1]。