自体血注入大鼠脑出血模型的造模体会
自体血注入大鼠脑出血模型的造模体会
目的 应用立体定位仪通过抽取自体鼠尾血回注大鼠大脑的方法造大鼠脑卒中的模型，研究和掌握造出血性脑卒中动物模型的方式和方法。方法 SD雌性大鼠90只，在立体定位仪的辅助定位下，抽取鼠尾动脉血50 μL注入大鼠左侧尾状核，应用Longa 五级评分法对大鼠行为学观察评分，对大鼠脑出血模型进行评价。结果 对90只SD大鼠制作脑出血模型，86只存活大鼠均有神经功能缺损。结论 应用自体鼠尾血回注大脑的方法可构建稳定的出血性脑卒中动物模型。
标签：自体血注入法；脑出血；模型；大鼠
出血性脑卒中是原发于脑实质内的非外伤性出血，致残及致死率高较高，该病严重危害着人类的健康。对脑出血的实验研究一直受到广泛重视，脑出血造模的稳定性、同患者发病表现的接近性直接关系到实验研究的科学性和实用性。本实验研究通过鼠尾动脉血分次回注自体大鼠脑组织内，建立脑出血的大树模型。
1资料与方法
1.1实验仪器 脑立体定向仪 （日本）；100 μL微量注射器，涡轮牙钻机；手术相关器械
1.2一般资料 近交成年雌性SD大鼠90只，体重（300±20）g。由河北医科大学实验动物中心提供，标准普通饲料喂养和自由饮水，昼夜自然节律，饲养环境为河北大学医学部动物实验中心多层层流架。
1.3方法 大鼠脑出血模型的制备：应用10%水合氯醛对大鼠腹腔注射量为300 mg/Kg进行麻醉，头部备皮并应用碘伏常规消毒后，俯卧位固定于定向仪上，前囟抬高1 mm，取长度约为2 cm正中纵形切口，小型扩皮器牵开切口，取前囟点中线右侧旁开3.0 mm，沿矢状面向后1.5 mm，牙钻钻透颅骨，深及骨膜。在消毒后在鼠尾腹侧正中做一纵行切口，抽取尾动脉不加抗凝剂的动脉血液约60～70 μL。将针头垂直于颅骨骨孔的方向，进针约6 mm，缓慢注入50 μL自体动脉血液，注血时间以两分钟为宜，为防止鼠血反流，将针留置10 min。缓慢退针，骨蜡封闭颅骨骨孔，缝合手术创口。
1.4行为学的分级评估 参照Longa 五级评分法[1]，对大鼠进行神经功能缺损评分：0级：无体征，记0分；Ⅰ级：动物不能完全伸直其前肢，记1分；Ⅱ级：动物一侧肢体瘫痪，有追尾现象，记2分；Ⅲ级：动物不能站立/ 打滚，记3分；Ⅳ级：无自发性活动，有意识障碍，记4分。
2结果
大鼠实验脑出血造成后，进行行为学评分，每只大鼠均采用Longa方法，反应其行为学变化。根据对实验动物的观察，在大鼠大脑注射自体鼠尾动脉血液后，
动物迅速出现行为和神经功能异常，大鼠反应迟钝、皮毛无光泽、精神萎缩、进食下降，对侧肢体出现瘫痪，行走追尾，严重者动物不能站立/打滚，个别大鼠呈现意识障碍，昏迷等表现，其功能异常程度与出血的严重程度相关。脑组织标本可见明显的血肿占位，结合对大鼠造模3 d后进行行为学评分，评分2～3分得提示模型建立成功。评分1分的4只，2分的34只，3分46只，4分的6只。造模成功80只，成功率88.9%。
3讨论
脑出血动物模型的制备成为了研究脑血管病不可或缺的基础，而好动物脑出血模型是接近于人类脑出血的血肿、水肿、缺血缺氧等病生理變化，符合疾病的发展规律的，并且动物模型具有较好的稳定性、可重复性。
动物模型的应用，使脑出血过程的神经生物学基础研究得到较大进展。在过去几十年里有很多方法造脑出血的动物模型，用于模仿脑出血的发病机制，其原理各不相同，效果也不尽相同，模型的选择至关重要。常用的方法有以下几种：①胶原酶诱导脑出血模型，应用胶原酶向脑组织中注入，胶原酶刺激破坏脑内组织，破坏血管而渗血形成血肿[1]。②微球囊充胀脑出血模型，在大鼠大脑尾状核包埋微小气囊，充盈气囊造模，产生占位效应脑部伤害一致，可重复性好，但同颅内血肿产生的其他病生理改变不同。③自发性脑出血模型，用遗传方式筛选出自发性高血压大鼠，待出现高血压严重并发症脑出血后提示造模成功，本模型能够较准确的模拟高血压脑出血等病理生理变化，存在的问题是获得脑出血模型的时间不能把握，出血部位及大小各异，各模型间对比性差；④凝固自体动脉血注入脑出血模型，抽取大鼠股动脉血，静置5 min待动脉血凝固后后脑内注射。此方式可控制鲜血沿针道返流问题，但同时存在血液凝固后血肿在脑内塑形困难[2]。⑤应用立体定位技术取自体血注血脑出血模型，即本研究采用造模方法，新抽取鲜鼠尾动脉血，应用立体定位仪固定微量注射器，精确定位于尾状核，穿刺并脑内注血，注血量50 μL血相当与人35 mL的血肿，应用非肝素化自体动脉血，更接近接近人类自发性出血性卒中，适合研究脑出血病理生理特点，能够观察各种因子在血液凝固过程中对脑血流及脑组织细胞代谢的影响，本研究取SD大鼠脑内最大的核团--尾状核，是高血压脑出血最好发部位，对脑出血的研究提供可靠的依据[3]。
根据对实验动物的观察，其功能异常程度与病变严重程度一致。脑组织标本在尾状核部位可见明显的血肿形成，提示模型建立成功，本组大鼠造模成功率88.9%，本造模方式是能够较好的模拟脑出血的病理生理的改变，应用此方法保证了在对脑出血的研究过程中确保实验数据的真实性和可靠性。
参考文献：
[1]倪厚杰，刘娜，陈娟，等.神经损伤与功能重建[J].2012，7（06）：411-412.
[2]吕田明，陆兵勋.大鼠尾状核注射凝固自体动脉血脑出血模型[J].中风与神经疾病杂志，2006，23（1）：88-90.
[3]张祥建，刘春燕，祝春华，等.大鼠自体动脉血脑出血动物模型的建立[J].脑与神经疾病杂志，2003，11（06）：341-344.
脑卒中动物模型实验原理
脑卒中动物模型实验原理
1.1 缺血性脑卒中
2.1.2 线栓法
实验动物：MCAO大鼠、MCAO小鼠
模型特点：利用线栓闭塞大脑动脉血管，无需开颅，缺血时间和部位易控制，并发症少，是目前使用最广泛的脑卒中模型。
获取方法：可直接购买商品化模型
2.1.2 光化学法
实验动物：大鼠、小鼠
模型特点：无需开颅，重复性较高，病灶部位可控，但缺乏缺血半暗带，无法模拟部分病例的生理变化，适用于慢性脑缺血研究。
获取方法：系统给与光敏剂后，利用高强度光源照射，以激活脑区的光敏剂，产生脑水肿和血小板微血栓，造成局部梗死。
2.1.3 开颅电凝法
实验动物：大鼠、小鼠
模型特点：缺血效果稳定，出血量少，是目前公认的标准大脑中动脉闭塞模型，但开颅存在一定风险。
获取方法：右侧颞下入路进行开颅，采用双极电凝将大脑中动脉闭塞后切断。
1.2 出血性脑卒中
2.2.1 自体注入法
实验动物：ICH大鼠
模型特点：采集自体股动脉血注射至大鼠右侧基底节制作ICH模型，操作简便，出血部位稳定，与人类脑出血病理过程相似。
2.2.2 自发脑出血
实验动物：大鼠
模型特点：将高血压与出血性脑卒中有机结合，适用于高血压引起的脑出血病理生理机制研究。
获取方法：对SHR（自发性高血压）大鼠进行大脑中动脉结扎处理
2.2.3 胶原酶注入法
实验动物：大鼠、小鼠
模型特点：操作简便，重复性高，与临床脑出血病理生理相似性高，但实验影响因素较多，稳定性较差。
获取方法：将胶原酶通过微量注射器注射入动物尾壳核内。
大脑前动脉穿刺法制作蛛网膜下腔出血大鼠模型
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1页 大脑前动脉穿刺法制作蛛网膜下腔出血大鼠模型
【摘要】 目的 应用穿刺法制作蛛网膜下腔出血(SAH)动物模型,为SAH的实验研究提供简单、可靠的模型制作方法。方法 以SD大鼠为实验动物,将动物分为正常对照组、假手术组和模型组。显微手术分离大鼠左颈部动脉,使用锐化尼龙线经颈外动脉进入颈内动脉至颅内,穿刺大脑前动脉形成SAH。假手术组仅分离颈部动脉不实施穿刺。测定各组2 h内局部脑血流量(rCBF),3 d后用DAB染色法显示大鼠额区微血管,测定微血管直径、密度(MVD)、微血管面积比(MVA)。结果 模型组大鼠颅脑解剖发现蛛网膜下腔内大量的血液和血凝块,术后2 h内rCBF显著降低,3 d后模型组大鼠额区微血管直径、MVD、MVA明显下降。结论 应用大脑前动穿刺法成功建立了简单、可靠、接近于临床的大鼠SAH模型。
【关键词】 蛛网膜下腔出血 动物模型 穿刺
蛛网膜下腔出血(Subarachnoid hemorrhage,SAH)是一种常见的出血性脑血管疾病,常继发于动脉瘤破裂出血,居于脑血管意外的第三位,仅次于脑血栓形成及高血压脑出血,其死亡率及致残率较高[1,2]。建立一种简单、稳定、可靠的SAH动物模型来研究SAH后的病理生理变化,对于指导临床治疗具有重要的意义[3]。本研究采用大脑前动脉刺穿法建立大鼠SAH模型,通过测定局部脑血流量(rCBF),微血管直径、密度(MVD),微血管面积比(MVA)验证模型的可靠性,为进一步研究SAH发病与治疗提供简单、可靠的动物模型制作方法。 如有你有帮助，请购买下载，谢谢！
2页 1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 实验动物
SD大鼠雌雄各半,3～4月龄,体重300～350 g,由辽宁医学院实验动物中心提供。大鼠随机分为3 组:正常对照组10 只,不给予任何处理因素;假手术组10 只,仅显微手术分离颈部动脉;模型组10 只,
依达拉奉对脑出血大鼠SOD及MDA的影响
依达拉奉对脑出血大鼠SOD及MDA的影响
目的 探讨依达拉奉对脑出血大鼠血肿周围脑组织SOD及MDA的影响。方法 选SD大鼠90只，随机分成3组，每组30只，分别为假手术组、脑出血组及依达拉奉治疗组。将大鼠自体血注入尾状核制成脑出血模型；用黄嘌呤氧化法检测神经细胞SOD含量，改良的硫代巴比妥酸法测定MDA含量。结果 脑出血组与假手术组比较SOD活性显著降低，而MDA含量增加（P＜0.05），依达拉奉治疗组与脑出血组相比，神经细胞SOD含量明显增高（P＜0.05），而MDA含量减低，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 依达拉奉具有清除自由基作用，该作用与增加细胞SOD含量，抑制脂质过氧化过程有关。
[Abstract] Objective To investigate the effect of edaravone on SOD and MDA in
brain tissue around the hematoma of rats with cerebral hemorrhage. Methods 90 SD
rats were chosen and randomly divided into 3 groups， control group， the cerebral
hemorrhage group and edaravone treatment group， respectively， each group of 30
rats. Cerebral hemorrhage model was made by injecting the autologous blood of rats
into caudate nucleus. Xanthine oxidation method was used to detect the content of
SOD in nerve cells， and improved thiobarbituric acid method was adopted to detect
采用Ⅳ 型胶原酶构建大鼠脑出血模型
第２４卷第ｌ２期 ｌ３９４ ２００２年ｌ２月 第三军医大学学报 Ａ（ Ｉ’Ａ ＡＣＡＤＥＭＩＡＥ ＭＥＤＩＣｌＮＡＥ ＭⅡＪＴＡＲＩＳ ＴＥＲｒⅡＡＥ Ｖｏ１．２４．Ｎｏ．１２ Ｄｅｃ．２００２ －精 采用Ⅳ型胶原酶构建大鼠脑出血模型 文章编号：１０００—５４Ｏ４（２０Ｏ２）１２—１３９４－０２ 张艳玲 ，陈康宁 ，邵淑琴 ，王 英 （第三军医大学： 附属西南医院神经内科； 基础医学部病原生物学教研室，重庆４０００３８） 提要：目的利用Ⅳ型胶原酶构建大鼠脑出血模型，并研究血肿形成速度和血肿形成大小的影响因素。方法使用健康雄 性２００～２５０ ｇＷｉｓｔａｒ大鼠，随机分组，分别脑内尾状核注射不同容积Ⅳ型胶原酶，肝素生理盐水溶液、单纯Ⅳ型胶原酶生理盐水溶 液、单纯生理盐水，于术后６ ｈ、１２ ｈ、２４ ｈ、３ ｄ、７ ｄ分别观察冰冻切片连续切片血肿大小。结果单纯生理盐水注射仅引起１２ ｈ内的 针道渗血，单纯胶原酶生理盐水注射３ ｄ可以形成直径３ Ｆｉｌｍ左右的血肿，Ⅳ型胶原酶，肝素生理盐水注射２４ ｈ可形成直径３ Ｆｉｌｍ左 右的血肿。结论Ⅳ型胶原酶，肝素生理盐水注射可以建立理想稳定的脑出血动物模型，且血肿大小和注射溶液容积呈正相关。 关键词：胶原酶；脑出血；动物模型 中图法分类号：Ｒ一３３２；Ｒ３４５；Ｒ７４３．３４ 文献标识码：Ａ Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ ｏｆ ｒａｔ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ ｍｏｄｅｌ ｂｙ ｔｙｐｅⅣｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ＺＨＡＮＧ Ｙａｎ—ｌｉｎｇ，ＣＨＥＮ Ｉ６ｍｇ—ｎｉｎｇ，ＳＨＡＯ Ｓｈｕ—ｑｉｎ，ＷＡＮＧ Ｙｉｎｇ （Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｔｈｉｒｄ Ｍｉｌｉｔａｒｙ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ ４０００３８，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ａ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ ｍｏｄｅｌ ｉｎ ｒａｔｓ ｂｙ ｌｏｃａｌ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｙｐｅⅣｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅ，ａｎｄ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｆａｃｔｏｒｓ ａｆｆｅｃｔ— ｉｎｇ ｔｈｅ ｓｐｅｅｄ ａｎｄ ｖｏｌｕｍｅ ｏｆ ｈｅｍａｔｏｍａ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ．Ｍ酬１Ｏｄｓ Ａ ｔｏｔａｌ ｏｆ １５０ ｈｅａｌｔｈｙ ｍａｌｅ Ｗｉｓｔａｒ ｒａｔｓ ｗｅｉｇｈｉｎｇ ｆｒｏｍ ２００ ｔｏ ２５０ ｇ ｗｅｒｅ ｒａｎｄｏｍｌｙ ｄｉ— ｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ３ ｇｒｏｕｐｓ，ｃｏｎｔｒｏｌ，ｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅ，ａｎｄ ｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅ／ｈｅｐａｒｉｎ ｇｒｏｕｐｓ．Ａｎｉｍａｌｓ ｉｎ ｔｈｏｓｅ ｇｒｏｕｐｓ ｒｅｃｅｉｖｅｄ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｓａｌｉｎｅ，ｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅ（０．２ Ｕ／ ），ａｎｄ ｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅ（ＳａＢｌｅ ｄｏｓｅ）ａｎｄ ｈｅｐａｒｉｎ（２ ｕ／ｔａ）ｗｉｔｈ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｖｏｌｕｍｅ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ａｔ ｔｈｅ ｃａｕｄａｔｅ ｎｕｃｌｅｕｓ．Ｔｈｅ ｖｏｌｕｍｅ ｏｆ ｔｈｅ ｈｅｍａｔｏｍａ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｔｓ（ｎ＝６ ａｔ ｅａｃｈ ｔｉｍｅ ｐｏｉｎｔ）ｗａｓ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ６，１２，ａｎｄ ２４ ｈ，ａｎｄ ３，７ｄ ａｆｔｅｒ ｔｈｅ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｌｏｏｄ Ｗａｓ ｆｏｕｎｄ ｉｎ １２ ｈ ａｆｔｅｒ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｉｎ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ．Ｈｅｍａｔｏｍａ ａｂｏｕｔ ３ Ｆｉｌｍ ｉｎ ｄｉａｍｅｔｅｒ Ｗａｓ ｆｏｕｎｄ ｉｎ ３ ｄ ａｆｔｅｒ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｉｎ ｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅ ｇｒｏｕｐ，ｗｈｉｌｅ ｉｎ ｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅ／ｈｅｐａｒｉｎ ｇｒｏｕｐ，ｉｔ Ｗａｓ ｆｏｕｎｄ ｉｎ ２４ ｈ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｃｅｒｅｂｒａｌ ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ ｍｏｄｅｌ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｂｙ ｌｏｃａｌ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅ／ｈｅｐａｒｉｎ ｉｎ ｓａｌｉｎｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｉｓ ｉｄｅａｌ ａｎｄ ｒｅｌｉａｂｌｅ，ａｎｄ ｔｈｅ ｓｉｚｅ ｏｆ ｈｅｍａｔｏｍａ ｉｓ ｉｎ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｖｏｌｕｍｅ ｏｆ ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ ｉｎｊｅｃｔｅｄ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ｂｒａｉｎ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅ；ｃｅｒｅｂｒａｌ ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ；ａｎｉｍａｌ ｍｏｄｅｌ 脑出血是一种常见病、多发病，关于脑出血的实验 研究很多，动物模型有很多种。曾经使用水、气囊模仿 脑出血的占位效应，之后采用自体血脑内注射的自体 血肿模型…，以及目前使用较多的胶原酶脑出血模 型ｌ２ Ｊ。水、气囊可以模仿脑出血后的占位效应，但不能 反映出血后局部红细胞在病理生理中的作用；自体血 肿模型很好的解决了上述问题，但是自体血肿模型是 人为的血肿过程，血肿来势突然；胶原酶脑出血模型相 对更接近病理过程，体现了一个逐渐渗血的过程。目 前利用胶原酶构建脑出血动物模型主要有两种，分别 使用Ⅳ型胶原酶和Ⅶ型胶原酶。我们使用Ⅳ型胶原酶 配合肝素建立动物模型，实验证实Ⅳ型胶原酶可达到 稳定的脑出血效果，配合肝素局部注射可以加快脑出 血血肿形成的速度。 １材料和方法 １．１ 材料 实验动物选用健康雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠ｌ５Ｉ）只，体重２００～２５０ ｇ， 基金项目：第三军医大学基金资助项目（２ｏｏ２） 作者简介：张艳玲（１９７４一），女，河北省石家庄市人、硕士研究生，医师，主要 从事脑血管病方面的研究。电话：（ ３）６８７５２９０５ 收稿日期：２００２４）７，１９；修回日期：２ＯＯ２，１０－１５ 鼠龄４～７月，由第三军医大学附属大坪医院医用实验动物中 心提供；Ⅳ型胶原酶（美国Ｓｉｔ￣ｌａ公司）；肝素钠注射液（沪生物 １２ ５００ Ｕ／２ ｍ１）；江湾型动物头颅立体定位仪；微量注射器；微量 分析天平；恒冷冰冻切片机。 １．２方法 １．２．１动物分组 Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为生理盐水对照组、Ⅳ 型胶原酶组、Ⅳ型胶原酶，肝素钠组，其中Ⅳ型胶原酶，肝素钠组 按注射药物溶液容积不同又分为３个小组。每组分为术后６ ｈ、１２ ｈ、２４ ｈ、３ ｄ，７ ｄ共５个时相点，每时相点动物６只。各组间 动物体重无显著差异。 １．２．２动物模型的建立 使用Ⅳ型胶原酶建立脑出血模型 的方法参照文献Ｅ３～６］，大鼠术前１２ ｈ禁食，４ ｈ禁水，用０．４％ 戊巴比妥钠腹腔麻醉，保证手术操作期间大鼠有自主呼吸，俯 卧固定于江湾型动物头颅立体定位仪上，头皮丁字切开，取前 囟为原点，向右３ Ｆｉｌｍ，向后１ Ｆｉｌｍ，深度５ Ｆｉｌｍ为注射点（尾状 核），骨钻钻开颅骨，进针后缓慢注射药物溶液，留针２ ｍｉｎ，缓 慢退针，骨蜡封闭颅骨钻孔。缝合皮肤。术中大鼠肛温保持在 ３６．５～３７．５￣Ｃ，手术后动物被送至通风和有空调的动物房饲养。 Ⅳ型胶原酶，肝素钠组（Ｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅ／ｈｅｐａｒｉｎ）的３个小组分别注射 Ⅳ胶原酶，肝素，生理盐水溶液０．７ 、１．４ 和２．０ （每１ 含 Ⅳ型胶原酶０．２ Ｕ及肝素２ Ｕ）。对照组（Ｃｏｎｔｒｏ１）颅内注射生理 盐水２．０ ，Ⅳ型胶原酶组（Ｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅ）注射Ⅳ胶原酶，生理盐 水溶液２．０ （每１ 含Ⅳ型胶原酶０．２ Ｕ）。 １．２．３标本的取材和制备 术后在相应时相点过量乙醚麻 醉动物，迅速开胸暴露心脏，从左心室插管至主动脉根部，
持续灌洗治疗急性脑蛛网膜下腔出血大鼠模型的建立
第20卷第7期 2012年7月 Vol.20 No.7 Jul，2012中国医学工程China Medical Engineering
・ ・14持续灌洗治疗急性脑蛛网膜下腔出血大鼠模型的建立
杨 雷，赵建华，柏顺明，钱希颖，官从锦，黄胜全
（昆明医学院附属昆华医院 暨 云南省第一人民医院 神经外科，云南 昆明 650032）摘要：目的 建立一种制作简便、可重复性强的置管持续灌洗治疗脑蛛网膜下腔出血( SAH) 动物模型。方法 麻醉后将导管插入枕大池,分组一次、两次注入0.3mL 自体动脉血建立SAH 模型。监测动脉血压、血气分析、颅内压, 存活动物进行蛛网膜下腔灌洗治疗。结果 血液广泛分布于颅底动脉环周围脑池。SAH 组大鼠的血压、血pH、PaO2、PaCO2值改变无统计学意义( P>0.05) 。生理盐水、稀释尼莫地平生理盐水等蛛网膜下腔灌洗后大鼠心率、血压、等均无明显波动，颅内压略有上升，无明显神经行为改变和死亡。结论 该模型能很好地模拟临床SAH, 重复性好,适用于SAH 后灌洗治疗前后病理生理学机制的研究。 关键词：蛛网膜下腔出血；灌洗；动物模型 中图分类号：R 689 文献标识码：B
Animal model of subarachnoid irrigation treatment following
acute cerebral subarachnoid hemorrhage
YANG Lei,ZHAO Jian-hua,BAI Shun-ming,et al
(The Kunhua Affiliated Hospital of Kunming Medical College,Kuming,Yunnan 650032,P.R.China) Abstract:【Objective】To establish a simple and reproducible animal model of subarachnoid irrigation treatment following acute cerebral subarachnoid hemorrhage ( SAH) . 【Methods】The SAH model was induced by insertion of a
脑出血的研究进展
脑出血的研究进展
关键词 ] 脑出血
脑出血发病率、死亡率和致残率均较高，但 目前 为止尚无 肯定、有效的 治疗方法 ，同时对基础 研究 也远远地落后于脑 缺血。近年来脑出血的 研究 又有新进展，结合国内及我中心 近年来的工作对脑出血系列 研究 综述如下。
一、 脑出血的动物模型
自 20 世纪 60 年代开始， 就有脑出血动物模型， 种类较多， 运用的动物有狗、猫、猪、兔、猴、猿、狒狒及啮齿类等， 常用的主要有四大类型，不同的类型均有各自的特点和 应用 范围。
1. 注入胶原酶
该 方法 是在立体定位下用微量注射泵向脑组织中注入 VII
型胶原酶溶液，引导脑出血。胶原酶是一种金属蛋白酶，能 够分解细胞间基质和血管基底膜上的胶原蛋白，破坏血脑屏 障。血管壁受损后引起渗血，血液逐渐集聚，约 4h 出血区
融合成血肿。血肿的大小由胶原酶的量决定。 1990 年由
Rosenberg等首先报道，注入 0.5U凝血酶于200〜300克SD 大鼠的尾状核。1998年Clark等注入0.07U胶原酶于26〜36g
的雄性 Swiss albino 小鼠尾状核内制成脑出血模型。该模型 操作简单，所产生的出血大小、形态及部位基本一致，重复 性好。但需要一段时间才能产生出血，出血区为弥散性渗血 区，与临床自发性脑出血的血肿性状不同。 Chesney 认为该 模型适于脑出血后神经功能恢复的 研究 和治疗方法 的评价， 不宜用于血肿的演变、血肿及其分解产物的作用 研究 。我们
已进行了这种模型的基础 研究 。
2. 直接注血
有注入动脉血，亦有注入静脉血。 1994 年 Yang 等在立体 定位下将lOO^L新鲜的自体动脉血注入 250〜350g的SD大 鼠尾壳核内，制成自体血脑出血模型。该模型的关键是：应 以较低压力( <100mmHg )缓慢( 5min )注血以控制血肿大 小一致。 1996 年
Wagner 等采用 6〜 8Kg 的乳猪，在全麻、 气管插管、呼吸机通气、股动脉插管取血及监测血压、血气 等条件下，用三通开关分别连接立体定向插到尾状核，从股 动脉抽取 10mL 自体血注入肝素化的硅胶管后， 15min 左右 将 1.7mL 血液，制成脑叶出血模型。该模型对小动物难控制 血肿的大小，大动物相对好操作；比较接近人脑出血的病理
大鼠脑出血动物模型的制作技巧
大鼠脑出血动物模型的制作技巧
韩佳炜;王淑华;李桂平;郑健刚
【期刊名称】《中国实用神经疾病杂志》
【年(卷),期】2018(021)007
【摘 要】目的 将理论与实践相结合,为建立可信度高 、稳定性强 、重复性好 、更贴近人体生理病理的动物模型提供参考.方法 在对比四种不同造模方式利弊的基础上,选取较合适的方法制作200只脑出血大鼠模型.结果 通过对200只大鼠模型的实践操作,总结出造模过程中需要特殊注意的事项 、操作技巧以及常用的四种造模方法的优缺点,并分析四种不同造模方法分别适应的实验类型和测量指标.结论 每种造模方法各有其优缺点,我们开展动物实验时要根据观测的指标和预期结果的不同来选择合适的造模方法进行实验,以提高动物实验的可信度.
【总页数】5页(P707-711)
【作 者】韩佳炜;王淑华;李桂平;郑健刚
【作者单位】天津中医药大学 ,天津 300193;中国人民解放军第 254 医院 ,天津
300142;天津中医药大学第一附属医院 ,天津 300381;天津中医药大学第一附属医院 ,天津 300381
【正文语种】中 文
【中图分类】R-332
【相关文献】 1.大鼠异位心脏移植动物模型制作的外科技巧 [J], 高旭辉;王昊飞;王武军;邹小明
2.采用Ⅶ型胶原酶制作大鼠脑出血模型的技巧 [J], 李东方;赵海滨;姜天元;翟瑶瑶;杨丹丹;
3.采用Ⅶ型胶原酶制作大鼠脑出血模型的技巧 [J], 李东方;赵海滨;姜天元;翟瑶瑶;杨丹丹
4.自体血注入法大鼠脑出血模型建立的制作技巧 [J], 杨亚萍;刘晓鹏;台立稳
5.自体血注入法大鼠脑出血模型建立的制作技巧 [J], 杨亚萍;刘晓鹏;台立稳;
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针刺干预脑出血大鼠模型实验中的体会与思考
针刺干预脑出血大鼠模型实验中的体会与思考
褚鑫;蔡恩丽;唐柱生;方涛;武煜明
【摘 要】针刺防治脑出血(ICH)疗效肯定,具有广阔前景,但由于各种因素的制约,致使针刺干预ICH的实验研究中存在不少问题.笔者结合自身开展针刺对ICH大鼠实验研究的体会,对ICH的动物模型和针刺实验研究进行分析,并就灌注取脑的方法、制作脑组织石蜡切片各环节的时间进行总结,为针刺防治ICH实验研究方法的统一提供参考,从而促进ICH研究的发展.
【期刊名称】《云南中医中药杂志》
【年(卷),期】2013(034)009
【总页数】3页(P16-18)
【关键词】针刺;脑出血;大鼠模型
【作 者】褚鑫;蔡恩丽;唐柱生;方涛;武煜明
【作者单位】云南中医学院,云南昆明650500;云南中医学院,云南昆明650500;云南中医学院,云南昆明650500;云南中医学院,云南昆明650500;云南中医学院,云南昆明650500
【正文语种】中 文
【中图分类】R743.34
脑出血(Intracerebral hemorrhage，ICH)即原发性非外伤性脑实质内出血，是严重威胁人类生命的常见病、多发病，因其致死、致残率极高，一直是医学界研究的热点。ICH根据其症状和体征可归属于中医学“中风”范畴，针刺治疗ICH具有悠久的历史，已成为一种疗效肯定的治疗方法，在世界范围内得到广泛运用和推广。近年来，随着针刺干预ICH研究的深入，不仅有许多有效的治疗方法得以推广，而且在针刺干预ICH实验研究方面也有大量有益的探索。但就总体而言，实验研究依然存在局限性，不利于临床中针刺治疗ICH水平的提高。为此，笔者在目前针刺防治ICH研究现状的基础上，结合自身体会，对针刺干预ICH大鼠模型的实验研究做出如下思考：
1 对ICH大鼠模型的分析
ICH动物模型与人类ICH的近似程度直接关系到自发性ICH实验研究的价值。随着老龄化社会日益明显，临床ICH患者大多是在动脉硬化和高血压的基础上导致小动脉透明脂质化及纤维素样坏死，小动脉弹性下降，最终形成动脉瘤破裂出血。ICH患者有多种临床表现，病情严重程度、持续时间、早期血肿扩大与继发性的出血等与脑血管的基础病变有很大的相关性，并且ICH患者大多存在不同程度的残疾。
自体血三次注入法建立脑出血大鼠模型
中国康复理论与实践２ＯＯ６年８月第１２卷第８期Ｃｈｉｎ Ｊ Ｒｅｈａｂｉｌ Ｔｈｅｏｒｙ Ｐ ！ ，垒 曼： ！ 。Ｊ： ！ ：
自体血三次注入法建立脑出血大鼠模型
李红玲 ，刘瑞春 ，缑元冲“ ，李春岩 ・ ６５１ ・
・专题・
［摘要］ 目的建立稳定的脑出血大鼠模型．并观察动物的行为学改变、脑水肿及组织结构变化。方法取大鼠尾动脉血１００
ｌ，分３次注人大脑尾状核，观察动物的行为学改变．在不同时间点处死动物，观察脑组织水肿及组织学变化。结果模型成功率
７５ ．出血后６ ｈ出现行为学改变．持续４～５ ｄ，７ ｄ时基本恢复正常；脑组织含水量于出血后６ ｈ增加，４８～７２ ｈ达高峰，７ ｄ时基本 恢复正常。脑组织于出血早期表现为神经细胞水肿，后期表现为胶质细胞增生。结论此模型死亡率低，成功率高，血肿稳定，行为
学改变明显，病理学改变符合临床。
［关键词］脑出血；模型；行为改变；脑水肿；组织改变；大鼠
Ａｎ ｌｎｔｒａｃｅｒｅｂｒａｌ Ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ Ｍｏｄｅｌ Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｂｙ Ａｕｔｏｌｏｇｏｕｓ Ｂｌｏｏｄ ｌｎｊｅｃｔｉｏｎ Ｔｈｒｅｅ Ｔｉｍｅｓ ｉｎ Ｒａｔ ＬＩ Ｈｏｎｋ—ｌｉｎｇ．ＬＩＵ Ｒｕｉ—ｃｈｕｎ．
ＧＯＵＹ“ｎｔｌ—ｃｈｏｎｇ，ｅｔ ａ１．Ｔｈｅ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ０｝ Ｒｅｈａｂｉｌｉｔａｔｉｏｎ，ｔｈｅ Ｓｅｃｏｎｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｈｅｂｅｉ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｕｅｒｓｉｔｙ，ｓｈｉｊｉｎｚｈ“ａｎｇ
０５００００，Ｈｅｂ￣，ｉ，Ｃｈ ｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ａｎ ａｎｉｍａｌ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｉｎｔｒａｃｅｒｅｂｒａｌ ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ（ＩＣＨ）ｉｎ ｒａｔ ａｎｄ ｔｏ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｂｅｈａｖ—
ｉｏｒ．ｂｒａｉｎ ｅｄｅｍａ ａｎｄ ｔｉｓｓｕｅ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｄｕｒｉｎｇ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｈｅｍａｔｏｍａ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ａｎ ａｎｉｍａｌ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ＩＣＨ ｗａｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｂｙ ｓｔｅｒ—
胶原酶和自体血注入法建立脑出血动物模型的比较
ＣＨＩＮＥＳＥ ｊ０ＵＲＮＡＬ ＯＦ ＡＮＡＴＯＭＹ Ｖｏ１．３５ Ｎｏ．１ ２０１２ 解剖学杂志２０１２年第３５卷第１期
胶原酶和自体血注入法建立脑出血动物模型的比较
张波孙善全△ 邱国平甘胜伟 朱淑娟钟小燕伍修宇
（重庆医科大学神经科学研究中心，重庆４０００１６）
摘要目的：为脑出血发病机制和／或干预性治疗的模型选择提供参考。方法：采用胶原酶和自体血注入大鼠尾状核建立脑 出血（ＩＣＨ）模型，运用磁共振成像（ＭＲＩ）、干湿重法、伊文思蓝（ＥＢ）测定法、免疫荧光和免疫印迹分别比较两组脑出血模型的
血肿体积、脑含水量（ＢＷＣ）、血脑屏障（ＢＢＢ）通透性和水通道蛋白４（ＡＱＰ４）的表达变化。结果：两组脑出血模型在ＭＲＩ、
ＢＷＣ、ＥＢ含量和ＡＱＰ４的表达变化均存在差异。结论：自体血模型是较为接近临床的脑出血动物模型。
关键词脑出血；动物模型；胶原酶；自体血；水通道蛋白４；大鼠
Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｉｎｔｒａｃｅｒｅｂｒａｌ ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ ａｎｉｍａｌ ｍｏｄｅｌｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ
ｂｙ ｉｎｊｅｃｔｉｎｇ ｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅ ａｎｄ ａｕｔｏｌｏｇｏｕｓ ｂｌｏｏｄ
Ｚｈａｎｇ Ｂｏ，Ｓｕｎ ＳｈａｎｑｕａｎＡ，Ｑｉｕ Ｇｕｏｐｉｎｇ，Ｇａｎ Ｓｈｅｎｇｗｅｉ，Ｚｈｕ Ｓｈｕｊｕａｎ，Ｚｈｏｎｇ Ｘｉａｏｙａｎ，Ｗｕ Ｘｉｕｙｕ
（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ ４０００１ ６，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｐｒｏｖｉｄｅ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｆｏｒ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ａｎｄ／ｏｒ ｉｎｔｅｒｖｅｎｉｎｇ ｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ ｉｎｔｒａｃｅｒｅｂｒａｌ
ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ（ＩＣＨ）．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅ ａｎｄ ａｕｔｏｌｏｇｏｕｓ ｂｌｏｏｄ ｗｅｒｅ ｉｎｊｅｃｔｅｄ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ｃａｕｄａｔｅ ｎｕｃｌｅｕｓ ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ＩＣＨ ｍｏｄｅｌｓ ｉｎ ｒａｔｓ．Ｔｈｅ ｈｅｍａｔｏｍａ ｖｏｌｕｍｅ ｗａｓ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｂｙ ｍａｇｎｅｔｉｃ ｒｅｓｏｎａｎｃｅ ｉｍａｇｉｎｇ．Ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ｂｒａｉｎ ｗａｔｅｒ ｃｏｎｔｅｎｔ