2009年江南大学803微生物学综合科目考研真题
全国名校食品微生物学考研真题汇编(含部分答案)
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江南大学考研微生物真题与答案解析b卷
微生物学试卷（B）
使用专业、班级学号
题 数
一二Leabharlann 三四五六
七
总 分
得 分
本题得分
一、填空题 〖每空0.5分，共计20分〗
1.细菌的基本形态有、和。异常形态中的衰退形是引起。
2.放线菌的菌丝体一般有、和构成。
3.微生物生长所需的营养物质有、、、、
和能源。对于化能异养型微生物而言，能源是，碳源是。
江 南 大 学 考
8.青霉素的发明者是（ ）。
A列文虎克 B巴斯德 C柯赫 D弗莱明
9.诱导酶是指（ ）。
A引起底物结构诱导变化的酶 B由于酶催化反应底物的存在而合成量增加的酶 C由于调节部位被某物质结合诱导而使活性提高的酶
D由于调节部位被某物质结合诱导而使活性下降的酶
10.下列霉菌孢子中，属于无性孢子的有（ ）。
四、问答题：（如叙述的文字不同，但意思正确，酌情给分）
1、细菌生长曲线是如何得到（1分）；该曲线可以分为四个时期——延迟期、对数生长期、平衡期、衰亡期。叙述每一个时期的细胞生长的特点及规律（1.5×4=6分）；应用（3分），缩短延迟期方法，延长平衡期方法。
2、画出细菌细胞的结构图（2分），图中应画出主要结构：包括细胞壁、细胞膜、间体、拟核、细胞质、核糖体及颗粒状含物。比较真核、原核细胞结构，比较的不同的方面包括（6分）：细胞核不同，有无细胞器，细胞膜功能的不同，细胞壁组分和结构上的不同；两者都的细胞生物具有细胞结构（2分）——细胞壁、细胞膜、细胞质、含物等。
2、基菌丝、气生菌丝、孢子丝
3、水、碳源、氮源、无机盐、生长因子；有机物氧化产生ATP；有机碳源
4、比表面积大，吸收多、转化快，生长旺、繁殖快，适应强、变异快，分布广、种类多
江南大学研究生微生物(食品)历年真题史上最全97~2011最新版
史上最全江大微生物97-2011历届试题97年一．名词解释1.原生质体；2.芽孢；3.菌落；4.诱导酶；5.生长因素6.回复突变；7.诱导；8.拮抗； 9血清学反应； 10.巴斯德效应二．图解：1.曲酶的细胞形态；2.Z值；3.微生物营养物质的四种运输方式；4.微生物生长与T的关系三．填空1微生物生长的特点是：___ 、、、、、生长旺、繁殖快。
2微生物的学名是由_____和____所组成。
3细菌革兰氏染色的主要原理是__。
影响染色的主要因素是___和___，革兰氏染色后为红色的是__. 4酵母菌是__，其无性繁殖方式是____和____，有性繁殖是____和____。
5霉菌产生的无性孢子有_____、_____、 _____。
6噬菌体的特点是___、___、___，其生长繁殖过程包括____、____、_____、____、____五个步骤。
7培养基按用途可分为_____五种。
8根据生长和O2的关系，大多数酵母属于____，大多数霉菌属于____9影响微生物生长的延滞期长短的因素有______、_____、_____等10光复活作用是指____、___、___、___、四种情况11染色体畸变是指____、___、___、___、四种情况12大肠杆菌是指_食品中大肠菌群测定的食品卫生含义是_13影响微生物的抗热性的因素是_____、___、 ___、___、___、14 BOD是指_15在空气中能较长时间的微生物类群是____、_____、特点是____16培养时，培养皿倒置是为了_____和_____17平板菌落计数法结果表达中常用的“cfu”的意思是_____四．问答1.如何使微生物合成比自身需求量更多的产物？举例说明；2.如要长期保藏低酸性食品和酸性食品，通常分别采用什么温度杀菌？Why？3.设计一种从自然界中筛选高温淀粉酶产生菌的试验方案，并解释主要步骤的基本原理；4.下列食品如变质，主要是有什么类型的微生物所引起？说明其原因？1〉市售面包2〉充CO2的果汁；5.菌种保藏主要利用什么手段？原理？举例说明.98年一．名词解释1.芽孢；2.菌落；3.质粒；4.回复突变；5.生长因子；6.诱导酶；7.拮抗；8.巴斯德效应；9.光复活作用； 10.活性污泥二．图解:1.酿酒酵母的单、双倍体共存的生活史2.D值3.烈性噬菌体与温性噬菌体的生活史4.艾姆斯试验法（Ames test）三．填空1微生物的特点是_____2微生物的学名有____和____所组成3细菌革兰氏染色的主要原理是__影响染色的主要因素是___和___，革兰氏染色后为红色的是_菌。
2009年江南发酵考研微生物试题及答案
2009江南大学微生物(发酵)一判断题1、一般情况下，在土壤中细菌的总数和生物量往往都是高的。
×2、青霉素抑制肽聚糖分子中肽桥的形成，因此对于生长旺盛的细胞明显的抑制作用，而对于休止细胞无抑制作用。
√3、芽孢在适宜条件下可以萌发成为营养细胞，但芽孢不是细菌的繁殖方式。
√4、发酵是一种没有外源电子受体的生物氧化方式。
√5、有鞭毛细菌去除CW后鞭毛失去了着生位点，从而将失去运动能力。
×6、好氧处理能更快的分解废水中的有机物，因此废水中的有机物浓度越高，越适于采用好氧方式处理。
×7、啤酒酿造的发酵温度与酿酒酵母的最适生长温度基本上是一致的。
×8、通常在耐氧厌氧微生物与兼性厌氧微生物细胞中都有SOD酶和H2O2酶。
×9、已经发现的嗜高温微生物都是古生菌，他们的最适生长温度一般要高于80度。
√10、EMB培养基中，伊红美兰有促进E,coli生长的作用。
×11、两株具有不同营养缺陷型标记的霉菌进行准性生殖时，所形成的异核体和杂合二倍体的分生孢子在基本培养基上都能够形成。
×12、无义突变是指不造成任何遗传效应的无意义突变。
×13、SOS修复系统是诱导产生的一种修复体系，他是一种倾向差错的修复。
√14、Ames试验是利用细菌突变来检查环境中存在的致癌物质是一种简便、快捷、灵敏的方法。
可以通过某待测物质对微生物的诱变能力间接判断其致癌能力。
√15、亚硝酸、羟胺和5-溴尿嘧啶都能诱发碱基置换，因此在大多数情况下。
他们诱发的突变都可以被他们自己诱发而得以回复。
×二.名词解释(10个一个三分)1.转导噬菌体：指能够将供体基因组入受体细胞内的噬菌体，一般为溶源性噬菌体。
2.巴斯德效应：在有氧情况下，由于呼吸作用，酒精产量大大下降，糖的消耗速率大幅减慢，氧的吸收抑制发酵的想象。
对酵母菌而言，乙醇发酵属于厌氧发酵，如果将厌氧条件改为好氧条件，葡萄糖分解效率降低，发酵停止的现象。
江南大学803微生物学考研专业课真题及答案
是考研备考中至关重要的一环，真题是必不可少的备考资料。
为大家整理了2010年江南大学803微生物学考研专业课真题及答案，供大家下载使用，并且提供江南大学，更多真题敬请关注！江南大学803微生物学综合科目2010年硕士研究生入学考试试题及解析2010年江南大学微生物（发酵）805一、判断（30分）1、芽孢在适宜条件下可以萌发成为营养细胞，但芽孢不是细菌的繁殖方式。
T2、啤酒酵母双倍体细胞即可以通过出芽进行无性繁殖，又可以形成子囊孢子进行有性繁殖T3、好氧处理能更快的分解废水中的有机物，因此废水中的有机物浓度越高，越适于采用好氧方式处理F4、磺胺类药物可以阻止细胞内叶酸的合成，人体能从食物中获得叶酸，所以这类药物只杀菌而对人体无害F5、EMB培养基中，伊红美蓝有促进大肠杆菌生长的作用。
F6、芽孢萌发后可形成菌体，所以芽孢的生成是细菌的一种繁殖方式F7 已经发现的嗜高温微生物都是古生菌，它们的最适生长温度一般要高于80℃.T8、微生物六大营养要素对配制任何微生物培养基都是必不可少的.F9、Am青霉素只对生长的细菌起作用，对静息细菌无效es试验是利用细菌突变来检测环境中存在的致癌物质是一种简便、快速、灵敏的方法。
可以通过某待测物质对微生物的诱变能力间接判断其致癌能力T10、SOS修复系统是诱导产生的一种修复体系，它属于一种倾向差错的修复。
T二、名词解释（30分）1、 Plasmid细菌细胞内一种自我复制的环状双链DNA分子，能稳定地独立存在于染色体外，并传递到子代，一般不整合到宿主染色体上。
现在常用的质粒大多数是经过改造或人工构建的，常含抗生素抗性基因，是重组DNA技术中重要的工具。
2、 Batch culture分批发酵又称为分批培养，是指在一个密闭系统内投入有限数量的营养物质后，接入少量的微生物菌种进行培养，使微生物生长繁殖，在特定的条件下只完成一个生长周期的微生物培养方法。
3、巴斯德效应巴斯德发现的有氧氧化抑制糖的无氧酵解的作用。
江南大学研究生考试微生物学(食品科学跟食品工程专业)
江大食品微生物97-2011历届试题97年一．名词解释1.原生质体；2.芽孢；3.菌落；4.诱导酶；5.生长因素6.回复突变；7.诱导；8.拮抗； 9血清学反应； 10.巴斯德效应二．图解：1.曲酶的细胞形态；2.Z值；3.微生物营养物质的四种运输方式；4.微生物生长与T的关系三．填空1微生物生长的特点是：___ 、、、、、生长旺、繁殖快。
2微生物的学名是由_____和____所组成。
3细菌革兰氏染色的主要原理是__。
影响染色的主要因素是___和___，革兰氏染色后为红色的是__.4酵母菌是__，其无性繁殖方式是____和____，有性繁殖是____和____。
5霉菌产生的无性孢子有_____、_____、 _____。
6噬菌体的特点是___、___、___，其生长繁殖过程包括____、____、_____、____、____五个步骤。
7培养基按用途可分为_____五种。
8根据生长和O2的关系，大多数酵母属于____，大多数霉菌属于____ 9影响微生物生长的延滞期长短的因素有______、_____、_____等10光复活作用是指____、___、___、___、四种情况11染色体畸变是指____、___、___、___、四种情况12大肠杆菌是指_食品中大肠菌群测定的食品卫生含义是_13影响微生物的抗热性的因素是_____、___、 ___、___、___、14 BOD是指_15在空气中能较长时间的微生物类群是____、_____、特点是____16培养时，培养皿倒置是为了_____和_____17平板菌落计数法结果表达中常用的“cfu”的意思是_____四．问答1.如何使微生物合成比自身需求量更多的产物？举例说明；2.如要长期保藏低酸性食品和酸性食品，通常分别采用什么温度杀菌？Why？3.设计一种从自然界中筛选高温淀粉酶产生菌的试验方案，并解释主要步骤的基本原理；4.下列食品如变质，主要是有什么类型的微生物所引起？说明其原因？1〉市售面包2〉充CO2的果汁；5.菌种保藏主要利用什么手段？原理？举例说明.98年一．名词解释1.芽孢；2.菌落；3.质粒；4.回复突变；5.生长因子；6.诱导酶；7.拮抗；8.巴斯德效应；9.光复活作用；10.活性污泥二．图解:1.酿酒酵母的单、双倍体共存的生活史2.D值3.烈性噬菌体与温性噬菌体的生活史4.艾姆斯试验法（Ames test）三．填空1微生物的特点是_____2微生物的学名有____和____所组成3细菌革兰氏染色的主要原理是__影响染色的主要因素是___和___，革兰氏染色后为红色的是_菌。
江南大学微生物真题2005-2014
一、名词解释1 可赫原则2双命名法3细菌的异常形态4孢子丝5锁状联合6细菌的生长曲线7高压蒸汽灭菌法8准性生殖9转导噬菌体10活性污泥11 营养缺陷型12 组成型突变株13 MPN 14 CFU 15 BOD5二、问答题1试讨论细菌细胞壁的组成结构及与革兰式染色之间的关系2 试讨论微生物与氧之间的关系及厌氧菌的氧毒害机制3以大肠杆菌T4噬菌体为例叙述噬菌体的裂解性周期4培养大肠杆菌常用的培养基之一LB培养基，其组成为Tryptone 1% Yeast Extract 0.5% NaCl 1% 试从微生物对营养需求的角度分析为什么细菌能在培养基中生长5试讨论紫外线对DNA的损伤及修复6 资料显示某些芽孢杆菌具有分解和利用葡聚糖的能力，设计方案从自然界中筛选一产葡聚糖的菌株，并简要分析各主要步骤的依据7黄色短杆菌中有关苏氨酸生物合成的部分途径如图所示，请问应如何对野生型菌株进行遗传改造才能获得苏氨酸的高产突变株？原因如何？一、选择题1 Sacchromyces cerevisiae 的无性繁殖方式是:A.裂殖B芽殖C假菌丝繁殖D子囊包子繁殖2 菌种的分离，培养，接种和染色等研究微生物的技术的发明者是A巴斯德B科赫C列文虎克D别依林克3真核微生物中 A TCA环反应在细胞中进行，EMP途径在线粒体内进行 B TCA环反应在线粒体中进行，EMP途径在细胞内进行 C TCA环反应及EMP途径在细胞中进行 D TCA环反应及EMP途径在线粒体内进行4．下列霉菌中，哪一种属于多核单细胞结构A 红曲霉B米曲霉C产黄青霉D黑根霉5 下列微生物命名正确的是A Candida utilisB escherich coliC bacillusD Cerevisiae sacchromyces6.由菌株A＋B－和A－B＋形成的异核体菌落上所形成的分生孢子，一般情况下在（）培养基上不能萌A MMB MM+AC MM+BD MM+A+B7 组织分离法是纯种分离方法之一，适用于 A 细菌 B 放线菌C 高等真菌D酵母菌8菌苔是微生物在（）上的培养特征A 固体平板B固体斜面 C液体斜面D明胶穿刺9 下列孢子中属于真菌无性孢子的有（）二倍体有性孢子的有（）单倍体有性孢子的有（）属于真菌休眠体的有（）A节孢子B接合孢子C子囊孢子D厚垣孢子E卵孢子F担孢子G分生孢子H孢子囊孢子二、名词解释1芽孢2革兰式染色3生长因子4类囊体诱导抑制剂法6光复活作用7化能自养型8定位诱变9生物膜10移码突变11菌种退化12共生关系13 nucleiod 14 PCR 15 chemostat三、问答题1试述普遍性转导噬菌体及转导子的形成机制2 何谓微生物的营养物质？试比较微生物吸收营养物质的各种方式3试比较青霉素和溶菌霉在制备原生质体中的作用原理 4写出两种活菌体生长量的测定方法名称及基本操作过程5消毒和灭菌的概念有何不同？实验室常用的灭菌方法有那些？分别指出灭菌原理，优缺点，适用对象及注意事项一、名词解释（3*15）1.接合孢子2.局限性转导3.碳源物质4.芽孢5基团移位 6.移码突变7.生长因子 8.准性生殖 9.巴斯德灭菌 10.连续灭菌11.HFR菌株12.对数生长期13.prophage 14.prototroph 15.PCR二、问答题1.微生物菌名的命名法则是什么？并举例说明。
江南大学研究生考试微生物学(食品科学与食品工程专业)历年真题97~2013(最全版,带答案解析含食品工艺学)
江大食品微生物97-2011历届试题97年一．名词解释1.原生质体；2.芽孢；3.菌落；4.诱导酶；5.生长因素6.回复突变；7.诱导；8.拮抗； 9血清学反应； 10.巴斯德效应二．图解：1.曲酶的细胞形态；2.Z值；3.微生物营养物质的四种运输方式；4.微生物生长与T的关系三．填空1微生物生长的特点是：___ 、、、、、生长旺、繁殖快。
2微生物的学名是由_____和____所组成。
3细菌革兰氏染色的主要原理是__。
影响染色的主要因素是___和___，革兰氏染色后为红色的是__.____。
5霉菌产生的无性孢子有_____、_____、 _____。
6噬菌体的特点是___、___、___，其生长繁殖过程包括____、____、_____、____、____五个步骤。
7培养基按用途可分为_____五种。
8根据生长和O2的关系，大多数酵母属于____，大多数霉菌属于____ 9影响微生物生长的延滞期长短的因素有______、_____、_____等10光复活作用是指____、___、___、___、四种情况11染色体畸变是指____、___、___、___、四种情况12大肠杆菌是指_食品中大肠菌群测定的食品卫生含义是_13影响微生物的抗热性的因素是_____、___、 ___、___、___、14 BOD是指_15在空气中能较长时间的微生物类群是____、_____、特点是____ 16培养时，培养皿倒置是为了_____和_____17平板菌落计数法结果表达中常用的“cfu”的意思是_____四．问答1.如何使微生物合成比自身需求量更多的产物？举例说明；2.如要长期保藏低酸性食品和酸性食品，通常分别采用什么温度杀菌？Why？要步骤的基本原理；4.下列食品如变质，主要是有什么类型的微生物所引起？说明其原因？1〉市售面包2〉充CO2的果汁；5.菌种保藏主要利用什么手段？原理？举例说明.98年一．名词解释1.芽孢；2.菌落；3.质粒；4.回复突变；5.生长因子；6.诱导酶；7.拮抗；8.巴斯德效应；9.光复活作用；10.活性污泥二．图解:1.酿酒酵母的单、双倍体共存的生活史2.D值3.烈性噬菌体与温性噬菌体的生活史4.艾姆斯试验法（Ames test）1微生物的特点是_____2微生物的学名有____和____所组成3细菌革兰氏染色的主要原理是__影响染色的主要因素是___和___，革兰氏染色后为红色的是_菌。
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江南大学803微生物学综合科目2009年硕士研究生入学考试试题及解析
2009年硕士学位研究生入学考试题
考试科目：823微生物学（发酵）A
请将题号和答案写在答题纸上，直接写在试卷上无效！
一、判断题：正确的回答T，不正确的回答F（2分*15）
1. 一般情况下，在土壤中细菌的总数和生物量往往都是高的。
F
2. 青霉素抑制肽聚糖分子中肽桥的生物合成，因此对于生长旺盛的细胞明显的抑制作用，而对于休止细胞无抑制作用。
T
3. 芽孢在适宜条件下可以萌发成为营养细胞，但芽孢不是细菌的繁殖方式。
T
4. 发酵是一种没有外源电子受体的生物氧化方式。
T
5. 有鞭毛细菌去除细胞壁后鞭毛失去了着生位点，从而将失去运动能力。
F
6. 好氧处理能更快的分解废水中的有机物，因此废水中的有机物浓度越高，越适于采用好氧方式处理。
F
7. 啤酒酿造的发酵温度与酿酒酵母的最适生长温度基本上是一致的。
T
8. 通常在耐氧厌氧微生物与兼性厌氧微生物细胞中都含有SOD酶和过氧化氢酶。
T
9. 已经发现的嗜高温微生物都是古生菌，它们的最适生长温度一般要高于80℃.T
10. EMB培养基中，伊红美蓝有促进大肠杆菌生长的作用。
F
11. 两株具有不同营养缺陷型标记的霉菌进行准性生殖时，所形成的异核体和杂合二倍体的分生孢子在基本培养基上都能够生长。
T
12. 无义突变是指不造成任何遗传效应的无意义突变。
F
13. SOS修复系统是诱导产生的一种修复体系，它属于一种倾向差错的修复。
T
14. Ames试验是利用细菌突变来检测环境中存在的致癌物质是一种简便、快速、灵敏的方法。
可以通过某待测物质对微生物的诱变能力间接判断其致癌能力。
T
15. 亚硝酸、羟胺和5-溴尿嘧啶都能诱发碱基置换，因此在大多数情况下，它们诱发的突变都可以被它们自己诱发而得以回复。
F
二、名称解释：（3分*10）
1. 生长因子
微生物生长所必需且需要量很小，而微生物自身不能合成或合成量不足以满足机体生长需要的有机化合物。
2. 拮抗作用
两种微生物生活在一起，其中一种能够产生某种特殊的代谢产物或者改变环境条件，从而抑制或杀死另一种微生物的现象
3. 局限性转导
局限性转导的噬菌体是温和噬菌体，转导噬菌体内的遗传物质是部分噬菌体基因组和细菌染色体DNA的个别基因
4 移码突变
在DNA序列中由于一对或少数几对核苷酸的插入或缺失而使其后全部遗传物质密码的阅读框架发生移动，进而引起转录和翻译错误的突变
5. 增值培养
是增殖培养，又称富集培养
指从微生物混合群开始对特定种的数量比例不断增高而引向纯培养的一种培养方法。
在适于目标微生物而不适于其他微生物生长的条件下继续培养，则目标微生物将成为优势种而得到纯培养。
6. 高压蒸汽灭菌法
可杀灭包括芽胞在内的所有微生物，是灭菌效果最好、应用最广的灭菌方法。
方法是将需灭菌的物品放在高压锅内，加热时蒸汽不外溢，高压锅内温度随着蒸汽压的增加而升高。
在蒸汽压下，温度达到121℃，维持15～30分钟。
适用于普通培养基、生理盐水、手术器械、玻璃容器及注射器、敷料等物品的灭菌。
7.巴斯德效应
酵母菌酒精发酵时通入氧气，发酵减慢，停止产生乙醇，葡萄糖消耗速率下降，氧对发酵的这种抑制现象称为巴斯德效应。
8. biofilm
围绕细胞或细胞器的脂双层膜。
由磷脂双层结合有蛋白质和胆固醇、糖脂构成，起渗透屏障、物质转运和信号转导的作用。
细胞内的膜系统与质膜的统称。
9．Peptideglycan
存在于革兰氏阳性和阴性细菌细胞壁中的一种复合糖类。
主链是β-1,4-糖苷键连接的N-乙酰氨基葡糖和N-乙酰胞壁酸交替的杂多糖。
在N-乙酰胞壁酸上接有肽链，不同糖链上
的肽链交联后形成稳定的水不溶产物。
10.Escherichia coli（Migula）Cvastellani et Chalmers 1919
大肠埃希氏菌，首次定名人为Migula，现名定名人为Cvastellani et Chalmers，定名年份为1919年。
三、问答题（共90分）
1. 试述大肠杆菌、酿酒酵母、红曲霉和T4噬菌体这四种微生物的主要繁殖过程，并从微生物繁殖方式的角度谈谈你对微生物多样性的认识。
（20）
大肠杆菌一般进行无性生殖，成为裂殖，首先是细胞核区伸长并分裂，同时在细胞赤道附件的细胞质膜由外向中心做环状推进，然后闭合形成一个垂直于细胞长轴的细胞质隔膜，并使细胞分开，第二步是形成横膈膜，最后是将细胞等分为两个子细胞。
酵母繁殖方式主要分无性繁殖和有性繁殖，无性繁殖包括芽殖、裂殖和裂芽繁殖。
有性繁殖是形成子囊孢子进行繁殖。
红曲霉的有性繁殖是形成卵孢子和接合孢子，无性繁殖有游动孢子，孢囊孢子和厚膜孢子
噬菌体的繁殖主要分为吸附、侵入、增殖、成熟和释放五步，温和性噬菌体可以整合到宿主基因组上繁殖。
微生物繁殖方式多种多样，每类微生物的繁殖方式各不相同，及时同类微生物，不同的种属之间的主要繁殖方式也各有千秋，可见大自然中微生物的多样性。
各个种群由于突变、自然选择或其他原因，往往在遗传上不同。
因此，某些种群具有在另一些种群中没有的基因突变，或者在一个种群中很稀少的等位基因可能在另一个种群中出现很多。
这些遗传差别使得有机体能在局部环境中的特定条件下更加成功地繁殖和适应。
不仅同一个种的不同种群遗传特征有所不同，即存在种群之间的基因多样性；在同一个种群之内也有基因多样性。
在一个种群中某些个体常常具有基因突变。
这种种群之内的基因多样性就是进化材料。
具有较高基因多样性的种群，可能有某些个体能忍受环境的不利改变，并把它们的基因传递给后代。
环境的加速改变，使得基因多样性的保护在生物多样性保护中占据着十分重要的地位
2. 微生物营养物质的跨膜运输有哪几种方式？试从输送动力、输送方向、是否需要载体和代谢能量、输送物质种类（举例）及输送前后存在状态等方面对各自的特点进行比较。
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3. 何谓基因工程？为什么说基因工程的操作离不开微生物？（15）
是指对遗传信息的分子操作和施工，即把分离到的或合成的基因经过改造，插入载体中，导人宿主细胞内，使其扩增和表达，从而获得大量基因产物，或者令生物表现出新的性状。
基因工程的基本过程：目的基因的获得+重组载体的构建斗重组载体导人宿主细胞+阳性重组子的筛选+基因的测序和鉴定斗基因的控制表达。
每一个环节都离不开微生物的参与。
微生物世界的多样性为人类的活动提供了取之不尽、用之不竭的基因来源；基因工程的克隆载体通常由病毒、噬菌体和细菌质粒DNA改建而成；基因工程所用到的绝大多数工具酶都是从不同微生物中分离和纯化而获得的；基因工程中最重要、最广泛应用的克隆载体宿主是原核生物的大肠杆菌及真核生物的酿酒酵母。
植物基因工程和动物基因工程也要先构建穿梭载体，在大肠杆菌中完成外源基因或重组体DNA的拼接和改造，才能再转移到植物和动物细胞中。
大肠杆菌表达系统、酵母菌表达系统和哺乳动物细胞表达系统都是采用重组细胞通过微生物发酵罐的方式大量生产目的蛋白。
基因工程的应用表现在基因工程药物、基因治疗、改造传统工业发酵菌种、动植物特性的基因工程改良及环境保护中各个方面，并已经取得了丰硕的成果。
同时基因工程也推动了微生物学的发展，特别是对于新的微生物资源的开发，认识和了解微生物世界中更多的微生物种类、微生物代谢、微生物遗传等将产生积极的影响。
4. 适述配制斜面培养基的程序和注意事项。
（培养基配方：牛肉膏0.5%、蛋白胨1%、NaCl0.5%、琼脂2%，Ph7.2,灭菌121℃ 20min）（15）
1玻璃器皿的洗涤，清洗干净，用自来水及蒸馏水冲洗，烘干备用
2 按配方准确称量药品，溶于水中，定容后用酸碱调节pH至7.2
3加热煮沸，将称好的琼脂加入，用玻璃棒不断搅拌，继续加热至溶解，加水至所需体积。
4将配好的培养基分装入试管，分装是注意不要使培养基沾污管口，分装至试管高度的四分之一左右
5包装好后放入灭菌锅，在121℃下灭菌20min
6灭好后，趁热将试管摆成适当斜度，斜面长度不超过试管长度的二分之一为宜，凝固
后即成。
5. 以谷氨酸棒杆菌为出发菌株，通过诱变育种，为什么筛选Hser-AECr株，可以获得赖氨酸（Lys）高产菌株？并进一步叙述通过紫外诱变，筛选Hser-突变株的主要步骤及理由。
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Hser-AECr株由于使合成高丝氨酸途径无法进行，是代谢流向赖氨酸途径转移，增大了赖氨酸的产量，同时由于苏氨酸无法合成，解除了其对天冬氨酸激酶的反馈抑制，所以可以获得赖氨酸高产菌株。
出发菌株的选择：选择野生型菌株或者生产中经历生产条件考验的菌株或者诱变过的菌株，以上菌株都有可能获得更高产的突变株
诱变菌株的培养：用LB培养基培养细菌至对数生长期，以使细胞处于同步生长状态的旺盛时期，而且细胞内含有丰富的内源性碱基。
诱变菌悬液的制备：选择缓冲液悬浮细胞，以稳定pH，同时是细胞处于良好的分散状态，利于均匀的诱变剂量下，同时调节适当的细胞密度。
诱变处理：选择紫外诱变处理。
后培养：立即将处理过的细胞转移到丰富的培养基中进行培养，是突变基因稳定、纯合并表达
高产突变株的分离与筛选：可通过复印平板法进行初筛，已筛选到合格的突变株，之后进行鉴定。