传染性肌肉坏死病毒快速检测方法的建立

杨苗;林华;董新燕;陈世界;方智;张婧;安微;薛昌华;张妙

【期刊名称】《畜牧兽医科学（电子版）》

【年(卷),期】2019(000)004

【摘要】为建立一种检测传染性肌肉坏死病毒的荧光定量RT-PCR方法,利用GenBank中收录的该病毒的全基因序列,设计特异性的引物与TaqMan探针,并构建包含目的序列的质粒作为标准品,经过优化反应参数建立检测传染性肌肉坏死病毒的荧光定量RT-PCR方法.结果显示,建立的方法特异性良好,对其他8种病毒核酸无扩增,扩增总时长90 min.该方法的灵敏度达到220 copies/μL.重复性好,批内变异系数为0.3％～0.7％.外标法定量所需的标准曲线方程为y=﹣3.404x+37.21,相关系数R2=0.997,扩增效率为96.7％.应用建立的方法对15批南美白对虾样品进行检测,未检出阳性.试验结果表明,所建立的实时荧光定量RT-PCR方法特异、灵敏、可定量,适用于对虾样品中传染性肌肉坏死病毒的检测.

【总页数】5页(8-12)

【关键词】传染性肌肉坏死病毒;检测方法;荧光定量RT-PCR

【作者】杨苗;林华;董新燕;陈世界;方智;张婧;安微;薛昌华;张妙

【作者单位】成都海关技术中心,成都 610041;成都海关技术中心,成都 610041;四川大学华西医学院,成都 610013;成都海关技术中心,成都 610041;成都海关技术中心,成都610041;成都海关技术中心,成都610041;成都海关技术中心,成都610041;成都海关技术中心,成都 610041;成都海关技术中心,成都 610041【正文语种】中文